НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ МИКОЛОГИИ ОБЩЕРОССИЙСКАЯ ОБЩЕСТВЕННАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ СОВРЕМЕННАЯ МИКОЛОГИЯ В РОССИИ ТОМ 2 ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ ВТОРОГО СЪЕЗДА МИКОЛОГОВ… [629429]
НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ МИКОЛОГИИ
ОБЩЕРОССИЙСКАЯ ОБЩЕСТВЕННАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ
СОВРЕМЕННАЯ МИКОЛОГИЯ
В РОССИИ
ТОМ 2
ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ ВТОРОГО СЪЕЗДА
МИКОЛОГОВ РОССИИ
Москва
2008
ББК 28.591
УДК 58-616.5C56
Главный редакторДьяков Ю. Т.
Заместитель главного редактора
Сергеев Ю. В.
Редакционная коллегия
Белозерская Т.А.
Биланенко Е.Н.Бондарцева М.А.Бубнова Е.Н.Воронина Е.Ю.Гарибова Л.В.Дьяков М.Ю.Еланский С.Н.Камзолкина О.В.Коваленко А.Е.Кураков А.В.Левитин М.М.Лекомцева С.Н.Лихачев А.Н.Маноян М.Г.Марфенина О.Е.Мельник В.А.Мокеева В.Л.Озерская С.М.Прохоров В.П.Сергеев А.Ю.Сидорова И.И.Толпышева Т.Ю.Феофилова Е.П.Чекунова Л.Н.Чернов И.Ю.
Современная микология в России. Том 2. Материалы 2-го Съезда микологов России. М.: Национальная академия микологии, 2008. – 548 c.
УДК 58-616.5
ББК 28.591
ISBN 978-5-93649-024-8 © Национальная академия микологии, 2008Издано в Российской Федерации в рамках программы
Национальной академии микологии
Предисловие 3
Между первым, учредительным, и вторым Съезда-
ми Микологов России прошло белее 5 лет. Публикуе-
мый ниже сборник тезисов докладов, присланных на второй Съезд, свидетельствует о большом пути, проде-ланном российскими микологами за это время.
Во-первых, увеличилось число городов, научных,
научно-производственных и учебных заведений, со-трудники которых или занимаются непосредственно изучением грибов, или использую грибы для решения различных научных и практических задач.
Во-вторых, расширилась сфера исследований
грибов. Наряду с традиционными для России иссле-дованиями в области биоразнообразия грибов и гри-бов-агентов заболеваний растений, животных и чело-век
а – фитопатологии, медицинской и ветеринарной
микологии – все большее число учреждений включи-лось в изучение самых разных аспектов современной микологии и смежных с ней дисциплин.
В-третьих, значительно расширились практичес-
кие, инновационные аспекты в исследованиях грибов. Огромный пласт тезисов занимают работы в области биохимии, физиологии и биотехнологии.
В-четвертых, все большее число исследователей
начинают использовать молекулярные методы, кото-рые, не являясь панацеей, дают возможность:
• решать проблемы, ранее не поддававшиеся реше-нию (анализ генетической регуляции синтеза био-логически активных веществ, перенос генов из так-сономически далеких организмов и др.);
• установить таксономический статус видов, слож-ных для определения традиционными методами;
• проводить быструю и точную диагностику отде-льных видов в различных субстратах (возбудите-лей болезней в организме хозяина, редких видов в природной обстановке и т.п.);
• строить молекулярные филогении и проводить мо-лекулярную паспортизацию коммерческих штам-мов и др.В-пятых, за прошедшие годы произошла смена ак-
центов в изучении разных групп грибов. Значительно выросло число исследований в области биохимии и биотехнологии высших базидиальных грибов при сни-жении количества тезисов, посвященных аналогичным исследованиям микромицетов.
Расширению микологических исследований и улуч-
шению их качества способствовали ряд обстоятельств, одно из которых – деятельность оформленной на первом Съезде Академии микологии. За период между Съезда-ми Академия провела 5 конгрессов по медицинской ми-кологии, которые сыграли огромную роль в координа-ции и расширении работы медицинских микологов.
Академия помогала в финансовом и организаци-
онном отношениях проведению ряда совещаний и конференций, посвященных разным направлениям теоретической и прикладной микологии, и обеспечи-ла публикацию многих монографий и сборников, спо-собствовавших повышению микологического образо-вания в стране.
Важным событием последних лет стало проведе-
ние в Санкт-Петербурге конгресса Европейских Ми-кологов, организованного микологическим отделом Ботанического института Р АН. В отличие от боль-шинства предыдущих конгрессов, на Петербургском был значительно расширен круг вопросов, связанных с изучением грибов и их практическим использовани-ем. Участие в работе съезда многих выдающихся ев-ропейских (и не только) микологов дало возможность нашим коллегам, работающим в различных городах России, установить контакты с рядом европейских на-учных учреждений.
Будем надеяться, что и 2 Съезд Микологов России,
организованный Национальной академией Миколо-гии пройдет не менее успешно и станет стимулом для увеличения количества и повышения качества исследований во всех областях общей и прикладной микологии.
Ю.Т. Дьяков,
Академик Р АЕН, профессор,
заведующий кафедрой микологии
и альгологии МГУ
Председатель Оргкомитета 2-го Съезда
микологов РоссииОТЕЧЕСТВЕННАЯ МИКОЛОГИЯ НА ПОДЪЕМЕ
СОДЕРЖАНИЕ
Раздел 1
ПЛЕНАРН
ыЕ зАСЕДАНИЯ. МЕМОРИАЛьНыЕ СИМПОзИуМы
БИОТЕХНОЛОГИЯ МИКРОМИЦЕТОВ – РЕАЛЬНОСТЬ И ПЕРСПЕКТИВЫ
Бибикова М.В., Катлинский А.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………….33
ВЕГЕТАТИВНАЯ НЕСОВМЕСТИМОСТЬ ГРИБОВ – ПРОСТЕЙШАЯ ФОРМА ИММУННОГО ОТВЕТА
Дьяков Ю.Т. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………34
РОЛЬ ГРИБОВ В ГЛОБАЛЬНОМ КРУГОВОРОТЕ АЗОТА
Кураков А.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..34
ВОСПОМИНАНИЯ О АРУТЮНЕ ХРИСТОФОРОВИЧЕ САРКИСОВЕ
Левитин М.М. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………35
ОППОРТУНИСТИЧЕСКИЕ МИЦЕЛИАЛЬНЫЕ ГРИБЫ:
ОСНОВНЫЕ
НАПР АВЛЕНИЯ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИССЛЕДОВАНИ Й
Марфенина О.Е. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..36
МИЦЕЛИАЛЬНЫЕ ГРИБЫ С ПОЗИЦИЙ эВОЛЮЦИИ И СОЦИУМ А
Феофилова Е.П. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………37
Раздел 2
КуЛь
ТИВИРуЕМыЕ СЪЕДОбНыЕ ГРИбы
РЕЙСИ (GANODERMA LUCIDUM) – ПЕРСПЕКТИВЫ ПРОИЗВОДСТВА В УКР АИНЕ
Бабаянц О.В., Маслий Е.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………………..39
КУЛЬТИВИРУЕМЫЕ ГРИБЫ – РЕСУРСЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ В УКР АИНЕ
Бабаянц О. В., Залогина-Кыркелан М.А., Никифорова Е.А. ………………………………………………………………………………………..39
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МАКРОМИЦЕТОВ НА АГАРИЗОВАННЫХ СРЕДАХ
Дьяков М.Ю., Штаер О.В., Гарибова Л.В. ………………………………………………………………………………………………………………….40
СР АВНИТЕЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ МЕХАНИЗИРОВАННОГО И РУЧНОГО
ПРИГОТОВЛЕНИЯ СУБСТР АТОВ ДЛЯ ВЫР АЩИВАНИЯ ШИИТАКЕ
Лавлинский А.В., Богдаев А.Г., Богдаев А.А. ……………………………………………………………………………………………………………..41
МАКРО- И МИКРОМОРФОЛОГИЯ ШТАММОВ Ganoderma lucidum
Р АЗЛИЧНОГО ГЕОГР АФИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
Постнова Е. Л. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..42
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ СЪЕДОБНОГО КСИЛОТРОФНОГО БАЗИДИОМИЦЕТА PleuroTuS erYnGii (DC.) GILLET И эПИФИТНЫХ ДРОЖЖЕЙ В КУЛЬТУРЕ
Савельева Д.Н., Камзолкина О.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………42
ПР АКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ МИЦЕЛИЯ ВЫСШИХ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ (len
TinuS edodeS И Ganoderma lucidum) В ПТИЦЕВОДСТВ Е
Трояновская Л.П., Белогуров А.Н., Польских С.В. ……………………………………………………………………………………………………..43
эФФЕКТИВНОСТЬ ВНЕСЕНИЯ ОРГАНИЧЕСКИХ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ ДОБАВОК В
СУБСТР АТЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ШАМПИНЬОНА ДВУХСПОРОВОГО
Цизь А.М. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………44
МОЛЕКУЛЯРНОЕ ГЕНОТИПИРОВАНИЕ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ ШТАММОВ И ВИДОВ ВЕШЕНКИ PleuroTuS SPP.
Шнырева А.В., Сиволапова А.Б. ………………………………………………………………………………………………………………………………..45
ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ ТВЕРДОФАЗНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ lenTinuS (P anuS)
Ti
GrinuS ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПЛАСТИКОВ ИЗ ОТХОДОВ ХЛОПЧАТНИКА
Шутова В.В., Ревин В.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………45
Содержание 5
Раздел 3
ФЛОР
А И ОхРАНА ГРИбОВ
CRITICAL REvISION Of DATA ABOUT daldinia SpECIES IN UkRAIN E
Акулов О.Ю., Stadler M. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………47
fIRST RECORDS Of HYPoxYlon SubmonTiculoSum fROM RUSSIA
Акулов О.Ю., fournier J., Ju Y .-M. ………………………………………………………………………………………………………………………………48
fIRST RECORDS Of FraccHiaea broomeana fROM EAST EUROpE
Bianchinotti M.v ., Akulov O.Yu. ………………………………………………………………………………………………………………………………….48
МАКРОМИЦЕТЫ УРБАНИЗИРОВАННЫХ БИОТОПОВ ВОРОНЕЖСКОЙ ОБЛАСТИ
Афанасьев А.А., Мелькумов Г.М., Кубанкина С.С. ……………………………………………………………………………………………………..49
ТАКСОНОМИЧЕСКИЙ СОСТАВ МИКРОМИЦЕТОВ, Р АЗВИВАЮЩИХСЯ НА ХВОЙНЫХ ПОРОДАХ В УСЛОВИЯХ БЕЛАРУСИ
Беломесяцева Д.Б. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..50
ТАКСОНОМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ БИОТЫ ДИСКОМИЦЕТОВ ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА
Богачева А.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….51
ДИСКОМИЦЕТЫ БОЛЬШЕХЕХЦИРСКОГО ЗАПОВЕДНИКА
Богачева А.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….51
НОВЫЕ И РЕДКИЕ ДЛЯ РОССИИ ВИДЫ ВОДНЫХ И ВОДНО-ВОЗДУШНЫХ ГИФОМИЦЕТОВ
Бодягин В.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 52
ИССЛЕДОВАНИЯ ГРИБОВ В БЕЛОМ МОРЕ
Бубнова Е.Н., Киреев Я.В., Коновалова О.П., Порхунова Н.Н. ……………………………………………………………………………………53
ГРИБЫ ДОННЫХ ГРУНТОВ КАНДАЛАКШСКОГО ЗАЛИВА БЕЛОГО МОРЯ
Бубнова Е.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..54
ФИЛЛОТРОФНЫЕ ПРЕДСТАВИТЕЛИ АНАМОРФНОГО РОДА pHOMA fR.
НА ДРЕВЕСНЫХ Р АСТЕНИЯХ В РОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ
Булгаков Т.С. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….54
ПЕРВЫЕ СВЕДЕНИЯ О МИКОБИОТЕ ДЕРЕВОР АЗРУШАЮЩИХ ГРИБОВ ТИГИРЕКСКОГО ЗАПОВЕДНИК А
Власенко В.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………55
ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ МИКСОМИЦЕТОВ НА ТЕРРИТОРИИ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ
Власенко А.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………56
ТРУТОВЫЕ ГРИБЫ ЛЕСНОГО МАССИВА В ОКРЕСТНОСТЯХ ПОСЕЛКА ДОБРЫЙ (ОРЛОВСКАЯ ОБЛАСТЬ)
Волобуев С.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………57
АГАРИКОИДНЫЕ И ГАСТЕРОИДНЫЕ ГРИБЫ Б ОТАНИЧЕСКОГО САДА РГУ ИМ. ИМ. КАНТ А
Володина А.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..58
ГРИБЫ ПОРЯДКА ERYSIpHALES НА ТЕРРИТОРИИ МИНСКОЙ ВОЗВЫШЕННОСТИ
Гирилович И.С., Лемеза Н.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………….58
ФИТОТРОФНЫЕ МИКРОМИЦЕТЫ ОСНОВНЫХ ЛЕСООБР АЗУЮЩИХ ПОРОД НОВГОРОД-СЕВЕРСКОГО ПОЛЕСЬ Я
Голубцова Ю.И. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………59
НОВЫЕ СВЕДЕНИЯ О МИКОБИОТЕ АЛТАЯ
Горбунова И. А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………60
БАЗИДИАЛЬНЫЕ ГРИБЫ ВЫСОКОГОРНОГО ПОЯСА АЛТАЯ
Горбунова И.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….60
ОСОБЕННОСТИ Р АСПРЕДЕЛЕНИЯ МИКОПЛАНКТОНА В БАССЕЙНЕ НИЖНЕГО ДОНА
Горлачева Г.Ю. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….61
НЕМАТОФАГОВЫЕ ГИФОМИЦЕТЫ, ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С ПОЧВЕННОЙ МИКРОФЛОРОЙ
Дарханова Т.А., Александрова А.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………62
ИЗУЧЕНИЕ АГАРИКОИДНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ В ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТ И
Десятова О.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………63
РОД P araPeronoSPora CONSTANT . В СОСТАВЕ МИКОБИОТЫ УКР АИН Ы
Дудка И.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..63
ГАСТЕРОИДНЫЕ БАЗИДИОМИЦЕТЫ С ЛЕКАРСТВЕННЫМИ И ПИЩЕВЫМИ
СВОЙСТВАМИ И ИХ Р АСПРОСТР АНЕНИЕ НА ЛЕВОБЕРЕЖНОЙ УКР АИН Е
Дудка И.А., Сивоконь Е.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………65
ВИДОВОЙ СОСТАВ ГРИБОВ ОСИНОВЫХ ЛЕСОВ ЮГА КР АСНОЯРСКОГО КР АЯ
Заузолкова Н.А., Максимова Т.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………….66
Содержание 6
ГРИБЫ ПОРЯДКА HYMENOCHAETALES В ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ
Зернаева А.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 67
ЦВЕТОХОСТНИК АРЧЕР А ( claTHruS arcHeri (BERk.) DRING, CLATHRACEAE,
pHALLALES, BASIDIOMYCOTA) В УКР АИНЕ
Зыкова М.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………68
ИССЛЕДОВАНИЯ АГАРИКОИДНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ В ВОЛОГОДСКОЙ ОБЛАСТИ
Кириллова О.С. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………69
РОД inocYbe (fR.) fR. В БЕЛОРУССКО-ВАЛДАЙСКОМ ПООЗЕРЬЕ
Колмаков П.Ю. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….70
СТРУКТУР А БИОТЫ АФИЛЛОФОРОИДНЫХ ГРИБОВ ПЕЧОРО-ИЛЫЧСКОГО
ГОСУДАРСТВЕННОГО ПРИРОДНОГО ЗАПОВЕДНИКА (РЕСПУБЛИКА КОМИ)
Косолапов Д.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….70
МИКОБИОТА КАБАРДИНО-БАЛКАРСКОЙ РЕСПУБЛИКИ (ЗАПАДНАЯ ЧАСТЬ ЦЕНТР АЛЬНОГО КАВКАЗА)
Крапивина Е.А., Шхагапсоев С.Х., Булгаков Т.С. ……………………………………………………………………………………………………….71
НОВЫЕ ДЛЯ УКР АИНЫ ВИДЫ РОДА Pezicula TUL. ET C. TUL., СОБР АННЫЕ
НА ТЕРРИТОРИИ ХАРЬКОВСКОЙ ЛЕСОСТЕП И
Красникова О.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..72
ХАР АКТЕРИСТИКА БИОТЫ АФИЛЛОФОРОИДНЫХ ГРИБОВ ФЛОРИСТИЧЕСКИХ Р АЙОНОВ И БИОГЕОГР АФИЧЕСКИХ ПРОВИНЦИЙ РЕСПУБЛИКИ КАРЕЛИЯ
Крутов В.И., Коткова В. М., Бондарцева М.А., Руоколайнен А.В. ………………………………………………………………………………. 73
МАТЕРИАЛЫ К ИЗУЧЕНИЮ БАЗИДИОМИЦЕТОВ ТЕМНОХВОЙНЫХ ЛЕСОВ ЗАПАДНОГО САЯНА (СЕМ. CORTINARIACEAE )
Крючкова О.Е. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..73
НОВЫЕ ВИДЫ РЖАВЧИННЫХ ГРИБОВ ЗАПАДНО-АЛТАЙСКОГО ЗАПОВЕДНИКА
Кызметова Л.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………74
АГАРИКОИДНЫЕ ГРИБЫ ОКСКОЙ ПОЙМ Ы
Левицкая Г.Е. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….75
ВИДЫ РОДА cHaeT omium ПОДМОСКОВЬЯ И ИХ ХАР АКТЕРИСТИКА
Линник М.А., Прохоров В.П. …………………………………………………………………………………………………………………………………….76
ПОЧВЕННЫЕ МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ БИОСФЕРНОГО ЗАПОВЕДНИКА АСКАНИЯ – НОВА
Лиховидов В.Е., Александрова А.В. …………………………………………………………………………………………………………………………..76
ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ МАКРОМИЦЕТОВ НА ЮГЕ СРЕДНЕЙ СИБИРИ
Майнагашева Н.В., Горбунова И.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………77
ПРОСТР АНСТВЕННАЯ СТРУКТУР А эПИФИТНЫХ ДРОЖЖЕВЫХ СООБЩЕСТВ НА ПЛОДАХ SorbuS aucuP aria L.
Максимова И.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..78
ДИСКОМИЦЕТЫ МОСКВЫ И МОСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ
Милехин Д.И. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………79
ВИДОВОЙ СОСТАВ МИКСОМИЦЕТОВ ПРИРОДНОГО ЗАПОВЕДНИКА МЕДОБОРЫ (УКР АИНА)
Морозова И.И., Леонтьев Д. В. …………………………………………………………………………………………………………………………………..80
БИОТА АГАРИКОИДНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ ЦЕНТР АЛЬНО-ЛЕСНОГО ЗАПОВЕДНИКА (ТВЕРСКАЯ ОБЛ.) И УСТЬЯНСКОЙ НАУЧНОЙ СТАНЦИИ (АРХАНГЕЛЬСКАЯ ОБЛ.)
Мухина Ю.Г. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 80
НАХОДКА РЕДКОГО ГРИБА muTinuS ra Venelii (BERk. ЕT CURT.) E.fISCHER В КАЗАХСТАНСКОМ АЛТАЕ
Нам Г.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………81
НОВЫЕ ДЛЯ УКР АИНЫ ВИДЫ КОРТИЦИОИДНЫХ ГРИБОВ ИЗ НАЦИОНАЛЬНОГО ПРИРОДНОГО ПАРКА «СВЯТЫЕ Г ОРЫ»
Ордынец А.В., Акулов А.Ю. ………………………………………………………………………………………………………………………………………82
ДОПОЛНЕНИЯ К ПОЗНАНИЮ СУМЧАТЫХ ГРИБОВ ТВЕРСКОЙ ОБЛАСТ И
Попов Е.С., Курочкин С.А …………………………………………………………………………………………………………………………………………82
АГАРИКОВЫЕ ГРИБЫ БИОГЕОГР АФИЧЕСКИХ ПРОВИНЦИЙ КАРЕЛИИ
Предтеченская О.О. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………..83
ОЦЕНКА ВИДОВОГО Р АЗНООБР АЗИЯ ГАСТЕРОМИЦЕТОВ РОССИИ
Ребриев Ю.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………84
К ИЗУЧЕНИЮ БИОТЫ АФИЛЛОФОРОИДНЫХ ГРИБОВ К ОЖ ОЗЕРСКОГО
ПРИРОДНОГО ПАРКА (АРХАНГЕЛЬСКАЯ ОБЛАСТЬ )
Руоколайнен А. В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..85
ИНВЕНТАРИЗАЦИЯ МИКОБИОТЫ НИЖНЕГО ДОНА: ИТОГИ И ПЕРСПЕКТИВЫ
Русанов В.А., Ребриев Ю.А., Булгаков Т.С. ……………………………………………………………………………………………………………….. 86
Содержание 7
ВИДЫ СЕМЕЙСТВА HYGROpHORACEAE ГОРНЫХ ЛЕСОВ КРЫМА
Саркина И.С. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….86
БАЗИДИАЛЬНЫЕ МАКРОМИЦЕТЫ ЛИПЕЦКОЙ ОБЛАСТИ: СТЕПЕНЬ ИЗУЧЕННОСТИ И ПРОБЛЕМЫ ИХ ОХР АНЫ
Сарычева Л.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..87
ДЕРЕВОР АЗРУШАЮЩИЕ ГРИБЫ БЕРЕЗНЯКОВ Ю ЖНОГО ПРИУР АЛЬ Я
Сафонова Т.И…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….88
cliT ocYbe (fR.) STAUDE В ТУЛЬСКОЙ ОБЛАСТИ
Светашева Т.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………89
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ВИДЫ РОДА armillaria В РОССИИ
Селочник Н.Н. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..90
ЩЕЛЕЛИСТНИК ОБЫКНОВЕННЫЙ (Sc HizoPHYllum commune fR.) В ЛИТВЕ
Снешкене Вилия, Юронис Видмантас ……………………………………………………………………………………………………………………….90
КОПРОТРОФНЫЕ ПЕРИТЕЦИОИДНЫЕ АСКОМИЦЕТЫ ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ
Сорокина Н.Л., Прохоров В.П. …………………………………………………………………………………………………………………………………..91
НОВЫЕ ДАННЫЕ О Р АСПРОСТР АНЕНИИ РЕДКИХ И ИСЧЕЗАЮЩИХ ВИДОВ ГРИБОВ В УКР АИНЕ
Сухомлин М.Н., Бисько Н.А., Кутковая О.В., Трискиба С.Д. ……………………………………………………………………………………….92
МИКРОМИЦЕТЫ ХВОИ МОЖЖЕВЕЛЬНИКА НЕКОТОРЫХ ОСТРОВОВ КЕРЕТСКОГО АРХИПЕЛПГА
Тобиас А.В., Федосова А.Г. ………………………………………………………………………………………………………………………………………..93
К ИЗУЧЕНИЮ МАКРОМИЦЕТОВ БОЛОТ ЛЕСНОЙ ЗОНЫ ЗАПАДНОЙ СИБИР И
Филиппова Н. В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….93
АГАРИКОИДНЫЕ ГРИБЫ В МИКОБИОТЕ ЗЕЛЕНЫХ НАСАЖДЕНИЙ ГОРОДА МИНСКА
Шапорова Я.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….94
БИОГЕОГР АФИЧЕСКИЕ СВЯЗИ БИОТЫ КЛАВАРИОИДНЫХ ГРИБОВ РОССИИ
Ширяев А.Г. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………95
О ВСТРЕЧАЕМОСТИ РЕДКИХ ВИДОВ МАКРОМИЦЕТОВ СЕМЕЙСТВА PHallaceae НА СЕВЕРО-ЗАПАДНОМ КАВКАЗЕ
Шумкова О.А., Криворотов С.Б., Касаннелли Д.П. ……………………………………………………………………………………………………..96
Раздел 4
ГРИ
бы И эКОЛОГИЯ ЧЕЛОВЕКА
ИССЛЕДОВАНИЕ ЗАГРЯЗНЕНИЯ АТМОСФЕРНОГО ВОЗДУХА ЛЕНИНГР АДСКОЙ ОБЛАСТИ
Дмитриченко О.П., Зачиняев Я.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………97
УСЛОВНО ПАТОГЕННЫЕ МИКРОМИЦЕТЫ В ЗАГРЯЗНЕННЫХ ФТОРСОДЕРЖАЩИМИ СОЕДИНЕНИЯМИ
ПОЧВАХ И ИХ СПОСОБНОСТЬ Р АЗВИВАТЬСЯ ПРИ НИЗКИХ ТЕМПЕР АТУР АХ
Евдокимова Г.А., Корнейкова М.В., Лебедева Е.В. ……………………………………………………………………………………………………..98
МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ В ПОЧВАХ, ПРИЗЕМНЫХ СЛОЯХ ВОЗДУХА И СНЕГОВОМ ПОКРОВЕ ГОРОДА МОСКВЫ
Иванова А.Е., Марфенина О.Е., Суханова И.С., Макарова Н.В. ………………………………………………………………………………….. 98
ВОПРОСЫ БЕЗОПАСНОСТИ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ ЛЮДЕЙ В ПОМЕЩЕНИЯХ, ПОР АЖЕННЫХ МИКРОСКОПИЧЕСКИМИ ГРИБАМИ
Кондратюк Т.А., Наконечная Л.Т., Артышкова Л.В., Харкевич Е.С., Жданова Н.Н. ………………………………………………………99
БИОИНДИКАЦИОННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ МИКОБИОТЫ ПОМЕЩЕНИЙ
Лихачев А.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….100
ВОЗМОЖНОСТЬ ВЫЖИВАНИЯ И СПОРООБР АЗОВАНИЯ КУЛЬТУР КЛИНИЧЕСКИХ ИЗОЛЯТОВ aSPerGilluS SYdowii (BAINIER & SARTORY) THOM & CHURCH В Р АЗЛИЧНЫХ ПОЧВАХ
Наумова Е.М., Марфенина О.Е. ……………………………………………………………………………………………………………………………….102
ГРИБЫ РОДА alTernaria В ПРИЗЕМНЫХ СЛОЯХ ВОЗДУХА Г . САМАР А
Овчинникова Т.А., Панкратов Т.А., Петухова Е.А. …………………………………………………………………………………………………….102
Р АСПРОСТР АНЕНИЕ ОППОРТУНИСТИЧЕСКИХ ГРИБОВ В ПАРКОВОЙ ЗОНЕ Г. КИРОВА
Огородников А.Н., Широких А.А. …………………………………………………………………………………………………………………………..103
НАКОПЛЕНИЕ НЕКОТОРЫХ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА ПЛОДОВЫМИ ТЕЛАМИ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
Скобанев А.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….105
МИКОБИОТА ПИЩЕВЫХ И ЛЕКАРСТВЕННЫХ СУБСТР АТОВ ИЗ Р АСТЕНИЙ
Скоробогатова Р .А., Шинкель Т. В, Малащицкая Н.В., Жебрак И.С. ………………………………………………………………………….105
МИКОТЕСТИРОВАНИЕ ХИМИЧЕСКИХ ВОЗДЕЙСТВИ Й
Терехова В.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….106
Содержание 8
Раздел 5
КОЛЛЕК
цИИ ГРИбОВ РОССИИ
CОВРЕМЕННЫЕ НАПР АВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ И МЕТОДЫ АНАЛИЗА МАКРОМИЦЕТОВ
Белова Н.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….107
ИЗУЧЕНИЕ К ОЛЛЕКЦИИ ГРИБОВ РОДА FuSarium СЕКЦИИ SPoroTricHiella
Гаврилова О.П. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..108
КОЛЛЕКЦИЯ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР МАКРО- И МИКРОМИЦЕТОВ СРЕДНЕЙ СИБИРИ – БАЗА
ДЛЯ СОЗДАНИЯ НОВЫХ БИОТЕХНОЛОГИЙ И ОБР АЗОВАТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА
Громовых Т.И., Садыкова В.С., Ковалева Г.К., Кутафьева Н.П., Гайдашева И.И., Миронов А.Г., Пашенова Н.В. ………..109
СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ДЛИТЕЛЬНОГО ХР АНЕНИЯ ГРИБОВ
Иванушкина Н.Е., Кочкина Г.А., Еремина С.С., Афанасьева Т.И., Озерская С.М. ………………………………………………………110
БИОЛОГИЧЕСКИЕ РЕСУРСНЫЕ ЦЕНТРЫ – НОВЫЙ эТАП Р АЗВИТИЯ КОЛЛЕКЦИЙ КУЛЬТУ Р
Озерская С.М., Кочкина Г.А., Иванушкина Н.Е. ……………………………………………………………………………………………………….111
КОЛЛЕКЦИЯ КУЛЬТУР ЛЕ (БИН) КАК ОСНОВА ДЛЯ СОХР АНЕНИЯ ex SiTu
Р АЗНООБР АЗИЯ БАЗИДИАЛЬНЫХ МАКРОМИЦЕТОВ РОССИИ
Псурцева Н.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………111
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА КРИОКОНСЕРВАЦИИ ДЛЯ ХР АНЕНИЯ КУЛЬТУР ГРИБОВ
Сафронова В.И., Оследкин Ю.С., Свиридова О.В., Воробьев Н.И. …………………………………………………………………………… 112
ВЫДЕЛЕНИЕ В КУЛЬТУРУ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ ИЗ ПРИРОДНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ ЮГА ЗАПАДНОЙ СИБИРИ И АЛТАЯ
Теплякова Т.В., Михайловская И.Н., Горбунова И.А. ……………………………………………………………………………………………….. 113
О РЕДКИХ ВИДАХ PenioPHora РОССИИ В КОЛЛЕКЦИИ MSk- f
Юрченко Е.О. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….114
Раздел 6
ФИ
зИОЛОГИЯ И бИОхИМИЯ ГРИбОВ
ФИТОПАТОГЕННЫЙ ГРИБ maGnaPorTHe GriSea ВЫДЕЛЯЕТ АНТИОКСИДАНТЫ,
ЗАЩИЩАЮЩИЕ ЕГО ОТ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ
Абрамова О.С., Пасечник Т.Д., Аверьянов А.А., Лапикова В.П., Гайворонская Л.М., Кузнецов Вл.В., Baker С.J. ………..115
ДИНАМИКА НАКОПЛЕНИЯ ОСНОВНЫХ ГРУПП ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ В ПРОЦЕССЕ Р АЗВИТИЯ ПЛОДОВОГО ТЕЛА ТРУТОВИКА СЕРНО-ЖЕЛТОГО – laeTiPoruS SulPHureuS (BULL.: fR.) MURR .
Агафонова С.В., Боровский Г.Б., Пензина Т.А., Оленников Д.Н. ………………………………………………………………………………. 116
НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ИССЛЕДОВАНИЮ СОСТАВА КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ ГРИБО В
Андриянова Д.А., Мейчик Н.Р ., Николаева Ю.И., Галанина Л.А., Феофилова Е.П. …………………………………………………….117
ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТР АЦИИ ФЕНОЛА НА РОСТ И СИНТЕЗ ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ ГРИБОМ lenTinuS TiGrinuS
И БАКТЕРИЕЙ rHodococcuS erYTHro PoliS ПРИ Р АЗДЕЛЬНОМ И СОВМЕСТНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ
Атыкян Н.А., Костина Е.Г., Ревин В.В………………………………………………………………………………………………………………………117
ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ПЛОДОВЫХ ТЕЛ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
Бабицкая В.Г., Трухоновец В.В., Смирнов Д.А., Щерба В.В., Осадчая О.В., Филимонова Т.В. , Черноок Т.В. ……………..118
ЛИПОФИЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ armillaria cePiSTiPeS Velen .
Баяндина И.И., Горбунова И.А., Деревянко А.Г., kукина Т .П. ……………………………………………………………………………………. 119
САХАРОЗАМЕНИТЕЛЬ эРИТРИТОЛ ИЗ ПЛОДОВЫХ ТЕЛ armillaria cePiSTiPeS Velen.
Баяндина И.И., Горбунова И.А., Деревянко А.Г., Kукина Т.П. …………………………………………………………………………………….120
МЕХАНИЗМЫ АДАПТАЦИИ PaecilomYceS lilacinuS (THOM) SAMSON
К э
КСТРЕМАЛЬНЫМ УСЛОВИЯМ СУЩЕСТВОВАНИЯ
Белозерская Т.А., Иванова А.Е., Гесслер Н.Н., Асланиди К.Б., Егорова А.С. ……………………………………………………………..121
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНЫХ ЗНА ЧЕНИЙ РН И ТЕМПЕР АТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ IRpEX LACTEUS fR А-ДОН-02-ПРОДУЦЕНТА ПРОТЕИНАЗ МОЛОКОСВЕРТЫВАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ
Бойко М.И., Кузнецова И.А., Белун А.В. ………………………………………………………………………………………………………………….121
БИОСИНТЕЗ α-Ν-АЦЕТИЛГАЛАКТОЗАМИНИДАЗЫ И α-ГАЛАКТОЗИДАЗЫ ASpERGILLUS NIGER И ВОЗМОЖНОСТИ ЕГО РЕГУЛЯЦИИ
Борзова Н.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………122
ИССЛЕДОВАНИЕ ОСЦИЛЛЯЦИЙ СКОРОСТИ АПИКАЛЬНОГО РОСТА МИЦЕЛИЯ У ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА ulocladiu M
Быстрова Е.Ю., Панина Л.К., Богомолова Е.В. …………………………………………………………………………………………………………123
Содержание 9
ОСОБЕННОСТИ ФЕНОЛОКСИДАЗНОГО КОМПЛЕКСА В ПРОЦЕССЕ МОРФОГЕНЕЗА
КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ Р АЗНЫХ эКОЛОГИЧЕСКИХ ГРУПП
Ветчинкина Е.П., Степанова Л.В., Никитина В.Е. …………………………………………………………………………………………………….124
СБР АЖИВАНИЕ КР АХМАЛА АМИЛОЛИТИЧЕСКИМИ ДРОЖЖАМИ
Голубев В.И. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………124
СКРИНИНГ МИКРОМИЦЕТОВ, СПОСОБНЫХ Р АЗРУШАТЬ ЦЕЛЛЮЛОЗОСОДЕРЖАЩИЙ СУБСТР А Т
Жданова Н.Н., Василевская А.И., Олишевская С.В., Айзенберг В.Л., Курченко И.Н., Артышкова Л.В., Наконечная Л.Т., Капичон А.П. ……………………………………………………………………………………………………..125
эКСПРЕССИЯ ГЕНА ГЛЮКОЗООКСИДАЗЫ В КЛЕТКАХ МИЦЕЛИАЛЬНОГО ГРИБА P . adameTzii ЛФ f-2044.1
Жуковская Л.А., Михайлова Р .В., Семашко Т.В., Хомич М.Б., Ярмолинский Д.Г. ………………………………………………………126
АПОПТОЗ ДРОЖЖЕВЫХ КЛЕТОК
Звягильская Р .А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………126
ИНДУКЦИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОНИЦАЕМОСТИ ДРОЖЖЕВЫХ МИТОХОНДРИЙ
Зылькова М.В., Ковалева М.В., Суханова Е.И., Тренделева Т.А., Лейн С.А., Звягильская Р .А. ……………………………………127
ДЕЙСТВИЕ ИНГИБИТОРОВ НА МЕЛАНИНОГЕНЕЗ ГРИБОВ PHellinuS robuSTuS М-10 И inono T uS obliQuuS В-26
Иконникова Н.В., Щерба В.В, Бабицкая В.Г. …………………………………………………………………………………………………………….128
ИЗУЧЕНИЕ АДАПТАЦИОННОГО СТАТУСА НЕКОТОРЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
Ильин Д.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 129
АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ШТАММОВ ОПЕНКА ЗИМНЕГО Flammulina VeluTiPeS (CURT.: fR.) p . kARST
Кваско Е.Ю., Бисько Н.А., Паршикова Т.В. ………………………………………………………………………………………………………………129
ПОЛУЧЕНИЕ МУТАНТОВ cur Vularia luna Ta ВКМ f-644 С ПОВЫШЕННОЙ 11β-ГИДРОКСИЛАЗНОЙ
АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ КОРТЕКСОЛОНА И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ
Коллеров В.В., Шутов А.А., Гулевская С.А., Донова М.В. ………………………………………………………………………………………..130
ПРОТЕИНАЗА МИКРОМИЦЕТА aSPerGilluS ocHraceuS 513 СО СВОЙСТВАМИ
АКТИВАТОР А ПРОТЕИНА С ПЛАЗМЫ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
Крейер В.Г., Баранова Н.А., Егоров Н.С. …………………………………………………………………………………………………………………..131
МИКРОМИЦЕТЫ – ПРОДУЦЕНТЫ ВИТАМИНОВ И КОФЕРМЕНТОВ
Кучмеровская Т.М., Супрун С.М., Пархоменко Ю.М., Черныш И.Ю., Харкевич Е.С. …………………………………………………132
ВЛИЯНИЕ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ ГЛИКОПРОТЕИНОВ НА Р АЗМЕР И ФОРМУ КЛЕТОК ДРОЖЖЕЙ SaccHaromYceS cereViSia e
Лейбо А.И., Егоров С.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………………….132
ВЛИЯНИЕ э ФФЕКТОРОВ НА БИОСИНТЕЗ ВНЕКЛЕТОЧНОЙ ПЕРОКСИДАЗЫ PHellinuS robuSTuS k
Макович О.М, Михайлова Р .В., Лобанок А.Г., Чихаева О.В. ……………………………………………………………………………………..133
МОРФОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАР АКТЕРИСТИКА Penicillium Piceum f-648 – ПРОДУЦЕНТА КАТАЛАЗЫ
Мороз И.В., Михайлова Р .В. …………………………………………………………………………………………………………………………………….134
ЛИПИДЫ СПОР АНГИОСПОР ГРИБОВ mucor ramannianuS И mucor HiemaliS
В СВЯЗИ СО СПОСОБНОСТЬЮ К ДИМОРФНОМУ РОСТУ
Мысякина И.С., Фунтикова Н.С. ………………………………………………………………………………………………………………………………134
ВОЗР АСТАНИЕ ПЕРОКСИДАЗНОЙ АКТИВНОСТИ КУЛЬТУРЫ Pl.oSTrea TuS
(JacQ.:Fr.) Kumm. В ОТВЕТ НА СТРЕССОВОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ
Нанагулян С.Г, Авагян И.А., Неркарарян А.В., Минасбекян Л.А……………………………………………………………………………….135
СКРИНИНГ ГРИБОВ НА СПОСОБНОСТЬ УТИЛИЗИРОВАТЬ АЦК
Никонов И.Н., Ячиновский И.С., Сафронова В.И., Белимов А.А……………………………………………………………………………….136
ГЛИКОПРОТЕИНЫ В СОСТАВЕ ЛОНГОЛИТИНА
Оккельман И.А., Шаркова Т.С., Серебрякова Т.Н., Подорольская Л.В. ……………………………………………………………………… 137
ЛОКАЛИЗАЦИЯ В ПЛАЗМАТИЧЕСКИХ МЕМБР АНАХ ДРОЖЖЕЙ НОВОГО ТИПА
ФОТ
ОСЕНСИБИЛИЗАТОР А ПОРФИРИНОВОЙ ПРИРОД Ы
Пиняскина Е.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….138
БИОПОЛИМЕРЫ УГЛЕВОДНОЙ ПРИРОДЫ Р АЗЛИЧНЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ГРИБОВ РОДА LENTINU S
Пучкова Т.А., Смирнов Д.А., Щерба В.В. …………………………………………………………………………………………………………………138
ИССЛЕДОВАНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ГРУПП В АКТИВНОМ ЦЕНТРЕ Б-L-Р АМНОЗИДАЗ pENICILLIUM COMMUNE 266
Рзаева О.Н., Варбанец Л.Д ……………………………………………………………………………………………………………………………………….139
ШТАММЫ Penicillium lilacinum, ПРОДУЦИРУЮЩИЕ В -ГАЛАКТОЗИДАЗЫ
С ОПТИМУМОМ ДЕЙСТВИЯ В НЕЙТР АЛЬНОЙ СРЕДЕ
Сапунова Л.И., Лобанок А.Г., Тамкович И.О., Костеневич А.А. ………………………………………………………………………………..140
СЕКРЕТИРУЕМЫЕ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИЕ ФЕРМЕНТЫ И ИНГИБИТОРЫ ПРОТЕИНАЗ эНТОМОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
Семенова Т.А., Дунаевский Я.Е., Белозерский М.А., Белякова Г.А., Борисов Б.А., Семенова С.А. ……………………………………………………………………………………………………………..141
Содержание 10
ЛИПИДЫ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ КАК АЛЬТЕРНАТИВНЫЙ ВИД ТОПЛИВА ДЛЯ ДИЗЕЛЬНОГО ДВИГАТЕЛ Я
Сергеева Я.э., Галанина Л.А., Феофилова Е.П. ………………………………………………………………………………………………………..141
МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ФЕРМЕНТА ЛАНОСТЕРОЛ –
14 – АЛЬФА-ДЕМЕТИЛАЗЫ CANDIDA ALBICANS С ИМИДАЗОЛОМ.
Смолина Н.А., Маркозашвили Д.Т., Батагов А.О., Игнатьева С.М. …………………………………………………………………………….142
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ЛЕКТИНА ТРУТОВИКА GriFola FrondoSa 0917 СО СПЕЦИФИЧЕСКИМИ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКИМИ АНТИТЕЛАМИ
Степанова Л.В., Бурыгин Г.Л., Никитина В.Е. …………………………………………………………………………………………………………..142
ПОИСК ПРОДУЦЕНТА ВНЕКЛЕТОЧНОЙ ИНУЛИНАЗЫ ГРИБНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
Стойко В.И., Айзенберг В.Л., Захарченко В.А., Капичон А.П., Калашник С.Н., Бурбан А.Ф., Коновалова В.В. …………..143
ИЗУЧЕНИЕ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ГРИБОВ РОДА TRICHODERMA ИЗ АНТРОПОГЕННО НАРУШЕННЫХ ПОЧВ РТ
Тазетдинова Д.И., Тухбатова Р .И., Шишкин А.В., Рафаилова э.А., Морозова Ю.А., Михайлова И.М., Скворцов Е.В. …………………………………………………………………………………………………….144
ФЕРМЕНТНЫЕ ПРЕПАР АТЫ МИКОЛОГИЧЕСКОЙ ПРИРОДЫ
Телишевская Л.Я., Овчинников Р .С. …………………………………………………………………………………………………………………………145
СОСТАВ МЕМБР АННЫХ ЛИПИДОВ И ПРОТЕКТОРНЫХ УГЛЕВОДОВ МИЦЕЛИАЛЬНОГО ГРИБА aSP
erGilluS niGer ПРИ Р АЗЛИЧНЫХ ТЕПЛОВЫХ ВОЗДЕЙСТВИЯХ
Терёшина В.М., Меморская А.С., Котлова Е.Р ., Феофилова Е.П. ……………………………………………………………………………….146
ИЗУЧЕНИЕ ЛИПОКСИГЕНАЗНОЙ АКТИВНОСТИ У ПРЕДСТАВИТЕЛЯ НИЗШИХ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ СЕМЕЙСТВА Pillobolaceae
– Pilaira anomalA
Ткачевская Е.П., Сергеева Я.э., Ларкина Е.А. …………………………………………………………………………………………………………..147
ОСОБЕННОСТИ РОСТА И ПОТРЕБЛЕНИЯ ГЛЮКОЗЫ НЕКОТОРЫМИ ШТАММАМИ aSPerGilluS VerSicolor (vUILL.) TIRABOSCHi
Тугай Т.И., Василевская А.И., Артышкова Л.В., Тарасова М.В., Наконечная Л.Т. ………………………………………………………149
СТРОЕНИЕ И ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ Р АСТВОРИМЫХ В ЩЕЛОЧИ ПОЛИСАХАРИДОВ ИЗ МИЦЕЛИЯ Ganoderma lucidum
Усов А.И., Евсенко М.С., Шашков А.С., Автономова А.В., Краснопольская Л.М., Исакова Е.Б., Бухман В.М. …………………………………………………………………………………………………….15
0
ОСОБЕННОСТИ ПРОТЕКАНИЯ ФОТОЗАВИСИМЫХ ПРОЦЕССОВ У МУТАНТОВ NEUROSpORA CRASSA С ПОВРЕЖДЕНИЯМИ АЗОТНОГО МЕТАБОЛИЗМА
Филиппович С.Ю., Бачурина Г.П. …………………………………………………………………………………………………………………………….150
СВОЙСТВА ГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩЕГО ПРОТЕОГЛИКАНА, ВЫДЕЛЕННОГО ИЗ КУЛЬТУР АЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ БАЗИДИОМИЦЕТА LENTUNUS EDODE S
Цивилева О.М., Никитина В.Е., Лощинина Е.А., Макаров О.Е. ………………………………………………………………………………… 151
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ОБР АЗОВАНИЯ ЛИПИДОВ ВЫСШИМИ МИЦЕЛИАЛЬНЫМИ ГРИБАМИ
Черноок Т.В., Гвоздкова Т.С., Щерба В.В., Филимонова Т.В., Осадчая О.В. ………………………………………………………………152
К ВОПРОСУ О ДЕЙСТВИИ ИНГИБИТОРОВ СИНТЕЗА ГЛИКОЦЕР АМИДОВ НА РОСТ ,
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ХАР АКТЕРИСТИКИ И ЛИПИДНЫЙ СОСТАВ ГРИБО В
Котлова Е. Р ., Сеник С. В., Кияшко А. А., Шаварда А.Л. …………………………………………………………………………………………..153
Раздел 7
ФИТОПА
ТОГЕННыЕ ГРИбы
INTRODUCTION THE NEW HOSTS Of armillaria Spp . fROM IRAN
Dalili S. A. R., Nanagulyan S.G., Alavi S. v. ………………………………………………………………………………………………………………..155
fIRST REpORT Of CHARCOAL ROT DISEASE OCCURRENCE ON SESAME p LANTS CAUSED BY
macroPH
omina PHaSeolina, AND DETERMINATION Of THE fUNGUS ISOLATES
REACTION IN THE pOTASSIUM CHLORATE MEDIUM IN NORTH IRA N
Rayatpanah S., Nanagulyan S.G., Alavi S.v . ………………………………………………………………………………………………………………..155
pATHOGENIC fUNGI IN THE RHIzOSpHERE Of HEALTHY LOOkING pOT -pLANTS
Stankeviciene A., Lugauskas A. ………………………………………………………………………………………………………………………………….156
ВЛИЯНИЕ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА И 3-АМИНО-1, 2, 4-ТРИАЗОЛА НА Р АЗВИТИЕ МУЧНИСТОЙ РОСЫ ПШЕНИЦ Ы
Аветисян Г.А., Бабоша А.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………..157
ПУТИ И СПОСОБЫ ПРЕДОТВР АЩЕНИЯ ИНВАЗИЙ ЧУЖЕРОДНЫХ ФИТОПАТОГЕНО В
Александров И.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………157
СЕПТОРИЕВЫЕ ГРИБЫ – ПАТОГЕНЫ РОЗОЦВЕТНЫХ
Андрианова Т.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………159
Содержание 11
ПОЛИМОРФИЗМ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛОЖНОЙ МУЧНИСТОЙ РОСЫ ПОДСОЛНЕЧНИКА PlaSmoP ara
HalSTedii (f ARL.) BERL.& DE TONY В РЕГИОНАХ СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
Антонова Т.С., Ивебор М.В., Гучетль С.З., Арасланова Н.М., Челюстникова Т.А., Рамазанова С.З. ……………………………160
МЕЖДУНАРОДНЫЙ НАБОР СОРТОВ-ДИФФЕРЕНЦИАТОРОВ ДЛЯ АНАЛИЗА ПОПУЛЯЦИЙ PYrenoPHora TereS f . TereS
Афанасенко О. С., Ялли М., Пиншмидт Х., Филатова О.А., Платс Г. …………………………………………………………………………161
ВИДОВОЙ СОСТАВ И ПАТОГЕННОСТЬ ГРИБОВ РОДА FuSarium lK:Fr. – КОНТАМИНАНТОВ
КОЛОСЬЕВ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ В ЮЖНОЙ СТЕПИ УКР АИНЫ
Бабаянц О.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………162
НЕМОНОТОННОСТЬ ЗАВИСИМОСТИ ДОЗА-э ФФЕКТ КАК ПРИЧИНА НЕОДНОЗНА ЧНОСТИ
ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ЦИТОКИНИНОВ
Бабоша А.В., Рябченко А.С., Аветисян Т.В. ……………………………………………………………………………………………………………..163
ПОИСК И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГРИБОВ АНТАГОНИСТОВ ДЛЯ БОРЬБЫ С ФАКУЛЬТАТИВНЫМИ ПАР АЗИТАМИ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ
Башта Е.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………164
ОБР АЗОВАНИЕ ЦИННИОЛА ГРИБОМ al Ternaria cirSinoxiae И ЕГО
ФИТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ДЛЯ БОДЯКА ПОЛЕВОГО
Берестецкий А.О., Юзихин О.С., Каткова А.С., Добродумов А.А. ……………………………………………………………………………. 164
ФИТОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ГРИБА SePT oria cirSii –ПОТЕНЦИАЛЬНОГО
МИКОГЕРБИЦИДА ПРОТИВ БОДЯКА ПОЛЕВОГО
Берестецкий А.О., Кашина С.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………….165
ФИТОТОКСИЧНОСТЬ эМУЛЬСИОННЫХ ПРЕПАР АТОВ ПОТЕНЦИАЛЬНОГО МИКОГЕРБИЦИДА НА ОСНОВЕ МИЦЕЛИЯ ГРИБА STaG
onoSPora cirSii
Берестецкий А.О., Сокорнова С.В., Кунгурцева О.В., Юзихин О.С., Каткова А.С., Авилкин А., Добродумов А.А. ………………………………………………………………………………………166
ВИДОВОЙ СОСТАВ МИКРОМИЦЕТОВ НА БОДЯКЕ ПОЛЕВОМ И ОЦЕНКА ПАТОГЕННЫХ СВОЙСТВ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ
Берестецкий А.О., Бильдер И.В., Гагкаева Т.Ю., Ганнибал Ф.Б., Гасич Е.Л., Левитин М.М., Хлопунова Л.Б. …………….166
ГРИБЫ РОДА monilinia HONEY НА ПЛОДОВЫХ КУЛЬТУР АХ В РОССИИ
Бильдер И.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………167
ВИДОВОЙ СОСТАВ ГРИБОВ ПОР АЖАЮЩИХ ОЗИМОЕ ТРИТИКАЛЕ В УСЛОВИЯХ БЕЛАРУС И
Буга С.Ф., Жуковский А.Г. ……………………………………………………………………………………………………………………………………….16 8
ПАТОГЕННЫЕ ГРИБЫ ОТДЕЛА deuTeromYcoT a
НА
ИНТРОДУЦИРОВАННЫХ Р АСТЕНИЯХ КАЗАХСТАН А
Валиева Б.Г. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….168
ФИТОФТОРОЗ ДРЕВЕСНЫХ ПОРОД
Веденяпина Е.Г. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….169
НЕКОТОРЫЕ ХАР АКТЕРИСТИКИ АССОЦИАЦИИ ФИТОПАТОГЕННОГО ГРИБА VerTicillium
daHliae И mY cobacTerium Sp . В СВЯЗИ С ПАТОГЕННОСТЬЮ ГРИБА
Власова Т.А., Агеева И.В., Колесникова В.Ф., Кузнецов Л.В. ……………………………………………………………………………………171
ВСТРЕЧАЕМОСТЬ ГРИБОВ РОДА FuSarium НА БОДЯКЕ (CIRSIUM Spp.)
Гагкаева Т.Ю., Бильдер И.В., Берестецкий А.О. ……………………………………………………………………………………………………….172
К ВОПРОСУ О СПЕЦИАЛИЗАЦИИ ASCOCHYTA SONCHI (SACC.) GROv E
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
эКОЛОГИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ АСКОМИЦЕТА PleoSPora PaPaVeracea (DE NOT.) SACC.
МЕТОДОМ ЦЕНТРИФУЖНОГО ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКОГО СКРИНИНГА К ШИРОКОМУ КРУГУ Р АСТЕНИЙ
Глухова Л.А., Адукаримов А.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………….174
ВНУТРИВИДОВОЙ ПОЛИМОРФИЗМ ВОЗБУДИТЕЛЯ Р АКА КОРЫ КАШТАНА (crYPHonec
Tria ParaSiTica (MURR.) BARR.) НА СЕВЕРНОМ КАВКАЗЕ
Гринько Н.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………174
ФИТОПАТОГЕННЫЕ ГРИБЫ И БОЛЕЗНИ ЧЕЛОВЕКА
Данилова Т.А., Левитин М.М., Мироненко Н.В. ……………………………………………………………………………………………………….176
ГНИЛИ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ В ЗАПАДНОМ ПРЕДКАВКАЗЬЕ
Жалиева Л.Д. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..177
СР АВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ Р АЗНЫХ ВИДОВ ГРИБОВ ИЗ РОДА Fu Sarium ПО ПАТОГЕННЫМ СВОЙСТВАМ
Жемчужина Н.С., Киселева M.И., Коваленко E.Д. …………………………………………………………………………………………………….177
ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ ГРИБА uSTilaGo zeae (BESkM.) UNGER В МЕЖ ВЕГЕТАЦИОННЫЙ
ПЕРИОД КАК ИСТОЧНИК ИНФЕКЦИИ ПУЗЫРЧАТОЙ ГОЛОВНИ КУКУРУЗ Ы
Жердецкая Т.Н., Жуковская А.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………178
НОВЫЕ ГР АНИЦЫ АРЕАЛОВ МАЛОИЗВЕСТНЫХ ГРИБОВ, ВЫЗЫВАЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЯ ХВОЙНЫХ ПОРОД
Жуков Е.А., Жуков А.М. ………………………………………………………………………………………………………………………………………….178
Содержание 12
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ PYTHium oliGandrum ДЛЯ ЗАЩИТЫ Р АСТЕНИЙ ОТ ФИТОПАТОГЕНО В
Ибрагимова С.А., Сивова Н.Н. …………………………………………………………………………………………………………………………………179
РЖАВЧИННЫЕ ГРИБЫ – ПАР АЗИТЫ ЦВЕТОЧНО-ДЕКОР АТИВНЫХ Р АСТЕНИЙ НИЖНЕГО ДОНА
Карпенко Т.В., Русанов В.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………….180
НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ БИОэКОЛОГИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ АЛЬТЕРНАРИОЗА
КАРТОФЕЛЯ В ЛЕСОСТЕПИ СРЕДНЕГО ПОВОЛЖЬ Я
Кинчарова М.Н., Соколова А.И. ……………………………………………………………………………………………………………………………….180
ОСОБЕННОСТИ Р АЗВИТИЯ НЕКРОТРОФНЫХ ГРИБОВ boTr YTiS cinerea pERS.
И ScleroT inia ScleroTiorum (LIB.) DE BARY НА ФАСОЛИ
Кирик Н.Н., Пиковский М.И. …………………………………………………………………………………………………………………………………..181
ОЦЕНКА УСТОЙЧИВОСТИ К БУРОЙ РЖАВЧИНЕ СОРТОВ ПШЕНИЦЫ ИЗ КОЛЛЕКЦИИ USDA-AR S
Киселева M.И., Куркова Н.Н., Жемчужина Н.С., Щербик А.А., Коваленко E.Д. ………………………………………………………… 182
КОРНЕВЫЕ И СТВОЛОВЫЕ ГНИЛИ СОСНЫ (pINUS SYL vESTRIS) В ГОРОДСКИХ
ЛЕСОПАРКАХ В УСЛОВИЯХ АНТРОПОГЕННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ
Колтунов Е.В., Залесов С.В., Лаишевцев Р.Н…………………………………………………………………………………………………………….183
ВЛИЯНИЕ РИЗОТОРФИНА НА ПОР АЖЕННОСТЬ Р АЗЛИЧНЫХ СОРТОВ ГОРОХА АЛЬТЕРНАРИОЗОМ В СРЕДНЕМ ПОВОЛЖЬЕ
Космынина О.Н., Кошелева А.Б., Кинчарова М.Н. …………………………………………………………………………………………………… 184
ГРИБ GaeumannomYceS GraminiS v AR. TriTici –ВОЗБУДИТЕЛЬ ОФИОБОЛЕЗА
ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ: МЕТОДЫ ИЗОЛЯЦИИ И ИДЕНТИФИКАЦИИ
Крючкова Л.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………185
МИГР АЦИИ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ И АРЕАЛЫ ПОПУЛЯЦИЙ
Левитин М.М., Новожилов К.В., Афанасенко О.С., Михайлов
а Л.А., Мироненко Н.В., Гагкаева Т.Ю., Ганнибал Ф.Б. ……………………………………………………………………………..186
ВИРУЛЕНТНОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ СТЕБЛЕВОЙ РЖАВЧИНЫ ПШЕНИЦЫ Puccinia
Gramini
S f.Sp. TriTici В НЕКОТОРЫХ РЕГИОНАХ Р ОССИИ В 2006 ГОД У
Лекомцева С.Н., Волкова В.Т., Зайцева Л.Г., Чайка М.Н. ………………………………………………………………………………………….. 186
ГОРЛЕНКО МИХАИЛ В ЛАДИМИРОВИЧ
Лекомцева С.Н…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………187
SCLEROpHOMA Spp. НА СОСНЕ В НОВГОРОДСКОЙ ОБЛАСТ И
Лесовская С. Г., Константинов А.В. ………………………………………………………………………………………………………………………….188
ВИДОВОЙ СОСТАВ ГРИБОВ РОДА FuSarium В ЛЕСНЫХ ПИТОМНИКАХ СРЕДНЕЙ И ЮЖНОЙ СИБИРИ
Литовка Ю.А., Шалаева Т.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………189
ИЗУЧЕНИЕ МИКОПАР АЗИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МИКРООРГАНИЗМОВ – АНТОГ
ОНИСТОВ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБО В
Лукаткин А.А., Ибрагимова С.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………..189
МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ПОДХОДЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ РЖАНОЙ ФОРМЫ ВОЗБУДИТЕЛЯ СТЕБЛЕВОЙ РЖАВЧИНЫ ЗЛАКОВ Puccinia G
raminiS f .Sp. SecaliS
Малеева Ю.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….190
УСТОЙЧИВОСТЬ СОРТОВ ХЛОПЧАТНИКА ВИДА G.HirSuTum L. И G.barbaden
Se L. К ВИЛТУ НА ИСКУССТВЕННО-ИНФЕКЦИОННОМ ФОНЕ
Мамедова Н.Х. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..191
ГРИБЫ ОБИТАЮЩИЕ В ПОР АЖЕННЫХ КОРНЯХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ И ПРЯННЫХ Р АСТЕНИЙ СЕМЕЙСТВА lamiaceae LINDL.
Мачкинайте Р . ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….192
МИКОБИОТА ЛЮПИНА БОТАНИЧЕСКИХ САДОВ ГОРОДА ВОРОНЕЖА
Мелькумова Е.А., Мануковская Т.В. …………………………………………………………………………………………………………………………192
ПОПУЛЯЦИИ PHYT oPHTHora inFeST anS В РЕСПУБЛИКЕ МАРИЙ э Л
Милютина Д.И., Шеин С.А., Апрышко В.П., Еланский С.Н………………………………………………………………………………………193
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ СТРУКТУР А ПОПУЛЯЦИЙ COCHLIOBOLUS SATIvUS, ПАР АЗИТИРУЮЩИХ НА ПШЕНИЦЕ
Мироненко Н.В., Смурова С.Г., Михайлова Л.А. ………………………………………………………………………………………………………194
НАСЛЕДОВАНИЕ ВИРУЛЕНТНОСТИ К УСТОЙЧИВОЙ ЛИНИИ ПШЕНИЦЫ 181–5 У ИЗОЛЯТОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТЕМНО-БУРОЙ ПЯТНИСТОСТИ COCHLIOBOLUS SATIvU S
Мироненко Н.В., Михайлова Л.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………195
СТРУКТУР А ПОПУЛЯЦИЙ ВОЗБУДИТЕЛЯ Р АКА КАРТОФЕЛЯ ПО ДНК МАРКЕР АМ И ВИРУЛЕНТНОСТИ
Мироненко Н.В., Хютти А.В., Афанасенко О.С. ……………………………………………………………………………………………………….195
СР АВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПОПУЛЯЦИЙ PYrenoPHora TriTici-rePenTiS
ПО ПРИЗНАК У ВИРУЛЕНТНОСТИ И RApD-МАРКЕР А М
Михайлова Л.А., Тернюк И.Г., Мироненко Н.В…………………………………………………………………………………………………………196
Содержание 13
ПАТОГЕННАЯ МИКОБИОТА ЛЮЦЕРНЫ В УСЛОВИЯХ АРМЕНИИ
Нанагюлян С.Г., Согоян Е.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………………………..197
АНАМОРФА эРИЗИФАЛЬНЫХ ГРИБОВ – ВСЕГДА ОБЛИГАТНЫЙ ПАР АЗИТ?
Осипян Л.Л. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….197
ИНТЕГРИРОВАННАЯ ИНФОРМАЦИОННО-АНАЛИТИЧЕСКАЯ БАЗА
«МИК
ОМИЦЕТЫ ЗЛАКОВЫХ КУЛЬТУР В Р АЗЛИЧНЫХ ПОЧВЕННО-КЛИМАТИЧЕСКИХ
ЗОНАХ К
Р АСНОЯРСКОГО КР АЯ »
Платонова Ю.В., Сорокатая Е.И. ……………………………………………………………………………………………………………………………..198
АГРЕССИВНОСТЬ ШТАММОВ PHYT oPHTHora inFeST anS ИЗ БЕЛАРУСИ
Пляхневич М.П. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………199
ДИНАМИКА ПОПУЛЯЦИОННОЙ СТРУКТУРЫ CLADOSpORIUM fUL vUM COOkE (fUL vIA
fULvA (COOkE) CIfERRI) В БЕЛАРУСИ ПО ПРИЗНАКУ ВИРУЛЕНТНОСТИ
Поликсенова В.Д. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………199
Р АННИЕ эТАПЫ ВЗАИМООТНОШЕНИЙ ПАТОГЕНА И ХОЗЯИНА ПРИ ПОР АЖЕНИИ ЯБЛОНИ ПАРШОЙ
Рахимова Е.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 200
МИКОБИОТА ЗЕРНА ЯЧМЕНЯ УКР АИНЫ И ЕЕ ТОКСИГЕННОСТЬ
Рухляда В.В., Андрийчук А.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………201
ВЛИЯНИЕ эКЗОГЕННОГО ЗЕАТИНА НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ
Р АЗВИТИЯ КОЛОНИЙ ВОЗБУДИТЕЛЯ МУЧНИСТОЙ РОСЫ ПШЕНИЦ Ы
Рябченко А.С., Аветисян Т.В., Аветисян Г.А., Бабоша А.В. ……………………………………………………………………………………….202
РОЛЬ ГРИБОВ РОДА fUSARIUM В ПАТОГЕНЕЗЕ КОРНЕВОЙ СИСТЕМЫ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ
Селиванова Г.А………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..203
ДЕЙСТВИЕ ТОКСИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ FuSarium oxYSPorum f . lYcoPerSici (SACC.) SNYDER
AND HANSEN НА э ЛЕКТРИЧЕСКИЕ ПАР
АМЕТРЫ ПЛАЗМАЛЛЕМЫ Р АСТИТЕЛЬНОЙ КЛЕТКИ
Сидорова С.Г., Кудряшова В.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………….. 204
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БЕЛКОВЫХ И МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАРКЕРОВ ПРИ ОЦЕНКЕ ВНУТРИВИДОВОЙ ИЗМЕНЧИВОСТИ Puccinia GraminiS pERS.
Сколотнева Е.С., Инсарова И.Д., Малеева Ю.В., Лекомцева С.Н. ………………………………………………………………………………205
СОПРЯЖЕННОСТЬ КУЛЬТУР АЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ
С ПАТОГЕННОСТЬЮ ИЗОЛЯТОВ ГРИБА boTr YTiS cinerea
pERS:
fR., ВЫДЕЛЕННЫХ С ПАСЛЕНОВЫХ КУЛЬТУР
Стадниченко М.А., Поликсенова В.Д. ………………………………………………………………………………………………………………………205
МИКОБИОТА РИЗОСФЕРЫ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ
Стогниенко О.И. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………206
КУЛЬТУР АЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ И ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЙ СТАТУС cercoSP
ora be Ticola SACC.
Стогниенко О.И., Мелькумова Е.А. …………………………………………………………………………………………………………………………. 207
НИЗКОТЕМПЕР АТУРНЫЕ СКЛЕРОЦИАЛЬНЫЕ ГРИБНЫЕ ПАР АЗИТЫ РОДОВ TYPHula И Sclero Tinia В РОССИИ
Ткаченко О.Б., Хошино Т., Сайто И. ………………………………………………………………………………………………………………………… 208
ЛИСТОВЫЕ ИНФЕКЦИИ ДРЕВЕСНЫХ Р АСТЕНИЙ В УРБАНИЗИРОВАННОЙ СРЕДЕ
Томошевич М.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..208
РОЛЬ ВНЕКЛЕТОЧНОЙ КАТАЛАЗЫ В ВИРУЛЕНТНОСТИ ШТАММОВ SePT oria nodorum
Трошина Н.Б., Сурина О.Б., Яруллина Л.Г., Максимов И.В. ……………………………………………………………………………………… 209
ВЛИЯНИЕ САЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ НА РОСТ И Р АЗВИТИЕ ВОЗБУДИТЕЛЯ ПЫЛЬНОЙ
ГОЛОВНИ u. TriTici В СОВМЕСТНЫХ КУЛЬТУР АХ С КАЛЛУСАМИ ПШЕНИЦ Ы
Трошина Н.Б., Сурина О.Б., Максимов И.В. ……………………………………………………………………………………………………………..210
РЕЗУЛЬТАТЫ ПОЛЕВЫХ ИСПЫТАНИЙ НЕКОТОРЫХ ГРИБОВ-АНТАГОНИСТОВ КОРНЕВЫХ ГНИЛЕЙ ДРЕВЕСНЫХ ПОРОД
Федоров Н.И., Звягинцев В.Б. ………………………………………………………………………………………………………………………………….211
ПОЧВЕННЫЕ ГРИБЫ РОДА TRICHODERMA –
АНТАГОНИСТЫ ВРЕДОНОСНЫХ ФИТОПАТОГЕНОВ
Храмцов А.К., Шевчук Е.С., Юркевич А.Ю. …………………………………………………………………………………………………………….212
ПАТОГЕННАЯ МИКРОФЛОР А ДРЕВЕСНЫХ КУЛЬТУР В ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ
Шероколава Н.А., Скрипка О.В., Александров И.Н., Дудченко И.П., Сурина Т.А, Никифоров С.В. ……………………………213
ФИТОПАТОГЕННЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ – ВОЗБУДИТЕЛИ ГНИЕНИЯ КОРНЕЙ ВИНОГР АДА, ПОВРЕЖДЕННЫХ ФИЛЛОКСЕРОЙ В УСЛОВИЯХ АЗЕРБАЙДЖАНА
Шихлинский Г.М., Хияви К.Г. ………………………………………………………………………………………………………………………………….214
Содержание 14
Раздел 8
эКОЛОГИЯ
ГРИбОВ
ОСОБЕННОСТИ ВИДОВОГО СОСТАВА МИКРОМИЦЕТОВ, Р АСПРОСТР АНЯЕМЫХ
НА ШЕРСТИ МЕЛКИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ
Александрова А.В., Александров Д.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………….215
МИКРОМИЦЕТЫ, АССОЦИИРОВАННЫЕ С ПЫЛЬЦОЙ БЕРЕЗЫ ПОВИСЛОЙ (beTula Pendula ROTH)
Антропова А.Б., Биланенко Е.Н., Мокеева В.Л., Чекунова Л.Н., Желтикова Т.М. ……………………………………………………….216
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ШИРОТНО-ЗОНАЛЬНЫХ СПЕКТРОВ ВИДОВОГО СОСТАВА КСИЛОМИКОКОМПЛЕКСА ПРИ ИНДИКАЦИИ СОСТОЯНИЯ ЛЕС А
Арефьев С. П. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………216
АНТАГОНИСТИЧЕСКИЕ ВЗАИМООТНОШЕНИЯ АГАРИКОИДНЫХ МАКРОМИЦЕТОВ И МИКРОМИЦЕТОВ-БИОДЕСТРУКТОРОВ В эКСПЕРИМЕНТЕ
Баринова К.В., Власов Д.Ю., Псурцева Н.В. …………………………………………………………………………………………………………….217
ОСОБЕННОСТИ эКОЛОГИИ ГИФОМИЦЕТОВ В ХВОЙНЫХ ЛЕСАХ БЕЛАРУСИ
Беломесяцева Д.Б., Шабашова Т.Г. …………………………………………………………………………………………………………………………..218
РОЛЬ ДИСКОМИЦЕТОВ В Р АСТИТЕЛЬНЫХ ЦЕНОЗАХ
Богачева А. В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………219
эКОМОРФОЛОГИЯ ГРИБОВ
Бондарцева М.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..220
К ХАР АКТЕРИСТИКЕ МЕЖПОПУЛЯЦИОННЫХ ОТНОШЕНИЙ ГРИБОВ И АКТИНОМИЦЕТОВ В ЧЕРНОЗЕМЕ И ПОДЗОЛИСТОЙ ПОЧВЕ
Виноградова К.А., Александрова А.В., Лихачева А.А., Кожевин П.А. ………………………………………………………………………. 221
ДИНАМИКА ЗАСЕЛЕНИЯ ИЗМЕЛЬЧЕННОЙ ДРЕВЕСИНЫ ВЕТОК МИКРОМИЦЕТАМИ В ДЕРНОВО-СЛАБОПОДЗОЛИСТОЙ ПОЧВЕ
Волощук Н.М. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………222
ВЛИЯНИЕ РИЗОСФЕРЫ, МИКОРИЗОСФЕРЫ И ГИФОСФЕРЫ СИМБИОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ НА ВИДОВОЕ Р АЗНООБР АЗИЕ ПОЧВООБИТАЮЩИХ МИКРОМИЦЕТОВ
Воронина Е.Ю. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….223
МАКРОМИЦЕТЫ – БИОИНДИКАТОРЫ Р АДИАЦИОННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ УКР АИНЫ
Гродзинская А.А., Сырчин С.А., Кучма Н.Д. ……………………………………………………………………………………………………………. 22 4
МИКРОМИЦЕТЫ ПЕЩЕР ИСКУССТВЕННОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
Демидова Л. А., Александрова А.В. …………………………………………………………………………………………………………………………225
МИКРОМИЦЕТЫ (HYpHOMYCETES, COELOMYCETES) ХВОЙНЫХ ЛЕСОВ ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА
Егорова Л.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………225
ВЛИЯНИЕ ИНТРОДУКЦИИ cor YnebacTerium GluT amicum В ПОЧВУ НА ИЗМЕНЕНИЕ
СТРУКТУРЫ КОМПЛЕКСА МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ГРИБОВ
Жебрак И.С., Скоробогатова Р .А., Кожевин П.А. ………………………………………………………………………………………………………227
КОНСОРТИВНЫЕ СВЯЗИ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА Picea A.DIETR., И ГРИБОВ-
МАКРОМИЦЕТОВ В ЛЕСНЫХ эКОСИСТЕМАХ ТВЕРСКОЙ ОБЛАСТИ
Медведев А.Г., Курочкин С.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………….228
ВЛИЯНИЕ СПЛОШНОЙ САНИТАРНОЙ РУБКИ ХВОЙНОГО ЛЕСА НА КОМПЛЕКС ПОЧВЕННЫХ МИКРОМИЦЕТОВ
Мовчан Д.Д., Александрова А.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………..228
РАСПРЕДЕЛЕНИЕ АГАРИКОИДНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ ВИШЕРСКОГО ЗАПОВЕДНИКА ПО АБСОЛЮТНЫМ ВЫСОТА М
Мухутдинов О.И. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 229
ЦЕНОТИЧЕСКАЯ РОЛЬ И АКТИВИЗАЦИЯ ПАТОГЕННЫХ СВОЙСТВ ARMILLARIA MELLEA SENSU LATO В ХВОЙНЫХ ЛЕСАХ ЮГА ВОСТОЧНОЙ СИБИРИ
Павлов И.Н., Губарев П.В., Миронов А.Г., Барабанова О.А., Агеев А.А. …………………………………………………………………… 230
ПЕРВАЯ НАХОДКА РЕДКОГО ВИДА SYzYGoSPora TumeF acienS (GINNS ET SUNHEDE) GINNS НА УКР АИН Е
Прилуцкий О.В., Акулов А.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………………………231
СМЕНА КОМПЛЕКСОВ ПОЧВЕННЫХ ГРИБОВ ПРИ ЗАР АСТАНИИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ТЕРРИТОРИЙ И ВОЗМОЖНОЕ УЧАСТИЕ В эТОМ ПРОЦЕССЕ МЕЛКИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ
Романова С.С., Александрова А.В., Александров Д.Ю. …………………………………………………………………………………………….232
МИКОИНДИКАЦИЯ УСТОЙЧИВОСТИ ЛЕСОВ В ЮЖНОМ ПРИУР АЛЬЕ
Сафонов М.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………232
ИНФОРМАЦИОННОЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ МИКРОМИЦЕТОВ И БАКТЕРИЙ В эКОЛОГИЧЕСКИХ НИШАХ С ЛИГНОЦЕЛЛЮЛОЗНЫМИ ОРГАНИЧЕСКИМИ СУБСТР АТАМИ
Свиридова О.В., Воробьев Н.И., Петров В.Б., Ковалева Н.М., Никонов И.Н., Русакова И.В. ………………………………………233
Содержание 15
АКТИНОМИЦЕТЫ В ГИФОСФЕРЕ АГАРИКОИДНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ В ЛЕСНЫХ эКОСИСТЕМАХ
Сидорова И.И., Александрова А.В., Виноградова К.А., Воронина Е.Ю., …………………………………………………………………..234
ОСНОВНЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ПРЕОБР АЗОВАНИЯ СООБЩЕСТВ КСИЛОТРОФНЫХ ГРИБОВ
ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ПРИРОДНО-КЛИМАТИЧЕСКИХ И АНТРОПОГЕННЫХ ФАКТОРОВ
Ставишенко И.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..235
СТРУКТУР А И ФУНКЦИИ ГРИБНОГО КОМПЛЕКСА ЛЕСНОГО БИОГЕОЦЕНОЗА
Стороженко В.Г. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………236
БАЛАНС ПРОЦЕССА Р АЗЛОЖЕНИЯ ДРЕВЕСИНЫ ГРИБАМИ В эКОСИСТЕМЕ СОСНОВОГО БОР А
Темнухин В.Б. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………237
ПОЧВЕННАЯ МИКРОБИОТА ВТОРИЧНОГО БЕРЕЗНЯКА СРЕДНЕЙ ТАЙГИ
Хабибуллина Ф.М., Лиханова И.А. ………………………………………………………………………………………………………………………….237
ПОЧВЕННЫЕ МИКРОМИЦЕТЫ В КОРЕННЫХ СТАРОВОЗР АСТНЫХ СРЕДНЕТАЕЖНЫХ ЕЛОВЫХ ЛЕСАХ
Хабибуллина Ф.М …………………………………………………………………………………………………………………………………………………..238
МИКРОМИЦЕТЫ РИЗОСФЕРЫ И МЕЖДУРЯДИЙ ЛАВАНДЫ УЗКОЛИСТОЙ В УСЛОВИЯХ ИНТРОДУКЦИИ
элланская Н.э., Юношева Е.П. ………………………………………………………………………………………………………………………………..239
Раздел 9
МИКОТОКСИКОЛОГИЯ
ГИГИЕНИЧЕСКОЕ НОРМИРОВАНИЕ ОХР АТОКСИНА А И ФУМОНИЗИНОВ В1 И В2
С
ПОЗИЦИЙ ГАРМОНИЗАЦИИ ОТЕЧЕСТВЕННОГО И МЕЖДУНАРОДНОГО
САНИТ
АРНОГО ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВ А
Аксёнов И.В., Седова И.Б., Захарова Л.П. ………………………………………………………………………………………………………………..241
БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИНДИКАЦИИ СТАХИБОТРИОТОКСИНО В
Андриенко Е.В., Зайченко А.М., Лысенко Т.Г. ………………………………………………………………………………………………………….241
ФУМОНИЗИН В1 ВЛИЯЕТ НА КЛЕТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ex ViV o
Аристархова Т.В., Пичугина Л.В., Мастернак Т.Б., Мартынова Е.А. ………………………………………………………………………….242
ПРОБОПОДГОТОВКА КР АСНЫХ ВИН МЕТОДОМ ТВЕРДОФАЗНОЙ эКСТР АКЦИИ
ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОХР АТОКСИНА А МЕТОДОМ ПОЛЯРИЗАЦИОННОГОФЛУОРЕСЦЕНТНОГО ИММУНОАНАЛИЗА
Белоглазова Н.В., Еремин С.А., Сахаров И.Ю. ………………………………………………………………………………………………………….243
МИКОТОКСИНЫ В НАПИТКАХ БРОЖЕНИЯ
Буркин А.А., Кононенко Г.П. ……………………………………………………………………………………………………………………………………244
эРГОАЛКАЛОИДЫ: ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ
Буркин А.А., Кононенко Г.П. ……………………………………………………………………………………………………………………………………245
ОЦЕНКА АДСОРБЦИОННЫХ СВОЙСТВ эНТЕРОСОРБЕНТОВ IN vITRO В ОТНОШЕНИИ
МИКОТОКСИНА ЗЕАР АЛЕНОН
Валиуллин Л.Р., Семёнов э.И. ………………………………………………………………………………………………………………………………….245
ПРОДУЦЕНТЫ ЦИТРИНИНА: ОПЫТ ИЗУЧЕНИЯ МОНОКОНИДИАЛЬНЫХ КУЛЬТУР
Васильев Д.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….246
ГРИБНАЯ МИКРОБИОТА ЗЕРНА ПИВОВАРЕННОГО ЯЧМЕНЯ И СОЛОДА
Волкова Т.Н. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 247
ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА ПРОДУКТОВ ЖИВОТНОВОДСТВА ПРИ СОЧЕТАННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ПИРЕТРОИДА И МИКОТОКСИНА
Галяутдинова Г.Г., Егоров В.И., Папуниди э.К., Иванов А.В. …………………………………………………………………………………… 248
ИССЛЕДОВАНИЕ ПСИЛОЦИБИНСОДЕРЖАЩИХ ГРИБОВ ПРИ
ПРОИЗВОДСТВЕ СУДЕБНЫХ эКСПЕРТИ З
Градусова О.Б. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..249
ШТАММЫ Penicillium roQueForTi THom , ВЫДЕЛЕННЫЕ ИЗ СЫРОВ РОКФОР
Григорян К.М, Саргсян М.П., Акопян Л.Л., . Маргарян Н.Р. ……………………………………………………………………………………..249
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ А эРОТЕХНОГЕННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ МЕГАПОЛИСА НА
НАКОПЛЕНИЕ В ВОЗДУХЕ ПОТЕНЦИАЛЬНО-ПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
Дмитриченко О.П., Зачиняев Я.В., Зачиняева А.В. …………………………………………………………………………………………………… 250
ОДНОВРЕМЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКОТОКСИНОВ ЗЕАР АЛЕНОНА И ОХР АТОКСИНА А МЕТОДОМ ПОЛЯРИЗАЦИОННОГО ФЛЮОРЕСЦЕНТНОГО ИММУНОАНАЛИЗА
Еремин С.А., Бондаренко А.П., Белоглазова Н.В., Колосова А.Ю., Marieke Lobeau, Sarah De Saeger ……………………………………………………………………………………………………..251
Содержание 16
ИННОВАЦИОННАЯ ДИАГНОСТИКА АФЛАТОКСИНА B1 ГРИБОВ
РО
ДА aSPerGilluS В ПРОДУКТАХ ПИТАНИ Я
Жернов Ю.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..252
СР АВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА СИНТЕЗА ВЕРРУКАРИНОВ И РОРИДИНОВ
ШТАММАМИ dendrodocH ium , mY roTHecium И ST acHY boTr YS
Зайченко А.М. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………252
ИЗУЧЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ МИКОТОКСИНОВ (ДЕЗОКСИНИВАЛЕНОЛА, ЗЕАР АЛЕНОНА
, ФУМОНИЗИНОВ В1 И В2, ОХР АТОКСИНА А)
В ПРО
ДОВОЛЬСТВЕННОМ ЗЕРНЕ УРОЖАЕВ 2006–2007 Г ОДОВ
Захарова Л.П., Седова И.Б., Аксёнов И.В. ………………………………………………………………………………………………………………..253
К ВОПРОСУ О НАКОПЛЕНИИ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ, Р АДИОНУКЛИДОВ И МЫШЬЯКА ПЛОДОВЫМИ ТЕЛАМИ БАЗИДИАЛЬНЫХ МАКРОМИЦЕТОВ
Иванов А.И., Костычев А.А., Скобанев А.В., Плотников М.А. …………………………………………………………………………………. 254
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ ДЛЯ ДЕТОКСИКАЦИИ АФЛАТОКСИНА В1
Иванов Е.Н., Матросова Л.Е., Иванов А.В. ……………………………………………………………………………………………………………….255
ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКОТОКСИНОВ В ЗЕРНЕ МЕТОДОМ Вэ ЖХ-МС/МС
Комаров А.А., Крапивкин Б.А., Вылегжанина А.В., Панин А.Н. ……………………………………………………………………………….255
эРГОАЛКАЛОИДЫ: ПРОБЛЕМА КОНТРОЛЯ ЗЕРНОПРОДУКЦИИ
Кононенко Г.П., Буркин А.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………256
ФАКТОРЫ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЕ СТЕПЕНЬ НАКОПЛЕНИЯ НЕКОТОРЫХ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА ПЛОДОВЫМИ ТЕЛАМИ БАЗИДИАЛЬНЫХ МАКРОМИЦЕТОВ
Костычев А.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………257
НОВЫЕ ДОСТИЖЕНИЯ В ИЗУЧЕНИИ МЕХАНИЗМОВ ДЕЙСТВИЯ ФУМОНИЗИНА В1
Мартынова Е.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..257
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МЕТАБОЛИТОВ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ С ПОМОЩЬЮ ПРОСТЕЙШИХ
Митина Г.В., Виноходов Д.О. …………………………………………………………………………………………………………………………………..258
К ПРОБЛЕМЕ ПРОФИЛАКТИКИ СМЕШАННОГО Т-2 И АФЛАТОКСИКОЗА
Мишина Н.Н., Семенов э.И., Тремасов М.Я. ……………………………………………………………………………………………………………259
ОТР АВЛЕНИЯ ГРИБАМИ
Мусселиус С.Г. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..260
aSPerGіlluS nіGer – ПРОДУЦЕНТ ОХР АТОКСИНА А НА КОРМАХ УР АИНЫ
Рухляда В.В., Андрийчук А.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………261
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ФУМОНИЗИНА В1 НА ЦЫПЛЯТ
И ПРОТЕКТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ МИКОСОРБА
Рухляда В.В., Билан А.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………262
МОНИТРОИНГ АФЛАТОКСИНОВ В КОРМАХ РЕСПУБЛИКИ ТАТАРСТАН
Садыкова В.Н., Танасева С.А., Шангараев Н.Г. …………………………………………………………………………………………………………263
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ И НЕКОТОРЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ НОРОК ПРИ Т-2 ТОКСИКОЗЕ И ПРИМЕНЕНИЕ СОРБЕНТОВ И ПРОБИОТИКОВ
Самсонов А.И., Тремасов М.Я., Нуртдинов М.Г., Папуниди К.Х……………………………………………………………………………….264
САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА УРОВНЯ КОНТАМИНАЦИИ ПРОДУКТОВ ДЕТСКОГО ПИТАНИЯ АФЛАТОКСИНАМИ
Сеидова Г.М. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………265
Penicillium ciTrinum THOM КАК МОДЕЛЬНЫЙ ОБЪЕКТ ДЛЯ ЛАБОР АТОРНО-ПР АКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЙ В КУРСАХ МИКОЛОГИИ И МИКОТОКСИКОЛОГИ И
Скоробогатова Р .А., Жебрак И.С. ……………………………………………………………………………………………………………………………..265
О НАРУШЕНИИ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ ЖИВОТНЫХ ПРИ МИКОТОКСИКОЗАХ
Тремасов Ю.М., Ахметов Ф.Г., Сергейчев А.И., Иванов А.В. ……………………………………………………………………………………266
АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ МОНИТОРИНГА ЗАГРЯЗНЕНИЯ КОРМОВ МИКОТОКСИНАМИ
Фетисов Л.Н., Солдатенко Н.А., Русанов В.А. ………………………………………………………………………………………………………….267
ИЗМЕНЕНИЯ В СТРУКТУРНОМ КОМПЛЕКСЕ МИКОБИОТЫ КОРМОВ ПОД ВЛИЯНИЕМ
СИНТЕТИЧЕСКИХ
МОЮЩИХ СРЕДСТВ И ИХ КОМПОНЕНТО В
Харченко С.Н., Башта Е.В., Волощук Н.М………………………………………………………………………………………………………………..268
ОДНОВРЕМЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФУМОНИЗИНА, ОХР АТОКСИНА И ЗЕАР АЛЕНОНА В ПШЕНИЦЕ МЕТОДОМ МЕМБР АННОГО ПРОТОЧНОГО ИММУНОАНАЛИЗА
Яковлева М.Е., Колосова А.Ю., Сара де Саегер, Еремин С.А. …………………………………………………………………………………..268
Содержание 17
Раздел 10
бИОЛОГИЯ
ДРОЖЖЕй
ИЗУЧЕНИЕ ШТАММОВ candida albicanS ДЛЯ СОЗДАНИЯ АНТИКАНДИДОЗНОЙ ВАКЦИНЫ
Блинкова Л.П., Горбатко Е.С…………………………………………………………………………………………………………………………………….271
ВЛИЯНИЕ ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЯ НА ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ КЛЕТОК ДРОЖЖЕЙ
Войчук С.И., Громозова Е.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………272
эПИФИТНЫЕ ДРОЖЖИ СПОРОВЫХ Р АСТЕНИЙ
Голубев В.И. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………272
ИЗУЧЕНИЕ ПУТЕЙ ПЕРЕДА ЧИ КЛЕТОЧНЫХ СИГНАЛОВ НА МОДЕЛИ КАНДИДОЗА
Гроза Н.В., Иванов И.В., Мягкова Г.И. ……………………………………………………………………………………………………………………..273
ВЛИЯНИЕ эКЗОМЕТАБОЛИТОВ ДРОЖЖЕВЫХ ГРИБОВ НА РОСТОВЫЕ СВОЙСТВА БИФИДОБАКТЕРИЙ.
Иванова Е.В., Перунова Н.Б. ……………………………………………………………………………………………………………………………………274
ОСОБЕННОСТИ ДРОЖЖЕВЫХ ГРУППИРОВОК В ФИЛЛОСФЕРЕ СФАГНОВЫХ МХОВ
Качалкин А.В., Глушакова А.М., Юрков А.М., Чернов И.Ю. …………………………………………………………………………………….275
ВИДОВОЙ СОСТАВ РОДА zYGOWILLIOpSIS СОГЛАСНО ГЕНЕТИЧЕСКОМУ АНАЛИЗУ
Кондратьева В.И., Наумов Г.И. …………………………………………………………………………………………………………………………………275
АДГЕЗИЯ И РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ШТАММОВ candida albicanS КАК ХАР АКТЕРИСТИКИ ПАТОГЕННОСТИ
Лисовская С.А., Глушко Н.И. …………………………………………………………………………………………………………………………………..276
ДЕЙСТВИЕ Б-ИНТЕРФЕРОНА ЧЕЛОВЕКА НА АДГЕЗИЮ В СИСТЕМЕ
«CANDIDA ALBICANS – БУККАЛЬНЫЕ эПИТЕЛИОЦИТЫ»
Лукова О.А., Заславская М.И., Махрова Т.В. ……………………………………………………………………………………………………………277
БИОХИМИЧЕСКИЕ МОДИФИКАЦИИ В ДРОЖЖЕВЫХ КЛЕТКАХ, ИНДУЦИРОВАННЫЕ ВИДИМЫМ И НИЗКОИНТЕНСИВНЫМ КР АСНЫМ СВЕТОМ
Пиняскина Е.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….278
ОСОБЕННОСТИ БИОЛОГИИ ГРИБОВ РОДА CANDIDA
Тимохина Т.Х., Николенко М.В., Перунова Н.Б. , Варницына В.В. ……………………………………………………………………………279
ХАР АКТЕРИСТИКА ВРЕМЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ГРИБОВ РОДА CANDIDA В АССОЦИАЦИИ С ЗОЛОТИСТЫМ СТАФИЛОКОККОМ
Тимохина Т.Х., Николенко М.В., Паромова Я.И., Перунова Н.Б. ……………………………………………………………………………….280
ДРОЖЖИ В ПИВОВАРЕНИ И
Филимонова Т.И., Борисенко О.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………281
ВЛИЯНИЕ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ АУТОРЕГУЛЯТОРОВ МИКРОБНОГО МЕТАБОЛИЗМА НА РОСТОВЫЕ СВОЙСТВА CANDIDA ALBICANS
Явнова С.В., Перунова Н.Б. …………………………………………………………………………………………………………………………………….282
Раздел 11
Фу
НГИцИДы И АНТИМИКОТИКИ
NEW pOSSIBILITY fOR pRODUCTION AND UTILIzATION Of fUNGI USEfUL fOR pEST CONTROL
Gouli v.v., Gouli S.Y . ………………………………………………………………………………………………………………………………………………..285
УЛЬТР АСТРУКТУР А ДЕРМАТОФИТОВ И ЕЕ ИЗМЕНЕНИЕ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ТЕРБИНАФИНА (ЛАМИЗИЛА)
Акышбаева К.С. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………285
ОТР АБОТАННЫЕ ПИВНЫЕ ДРОЖЖИ – КОМПОНЕНТ СРЕД ДЛЯ ПРОМЫШЛЕННОГО
ПРОИЗВОДСТВА БИОПРЕПАР АТОВ – ФУНГИЦИДОВ
Асабина Е. А., Четвериков С.П., Логинов О.Н. ………………………………………………………………………………………………………..286
АНТИМИКОТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НОВОГО БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАР АТА «ФАРГАЛС »
Баженов Л.Г., Артемова Е.В., Шаниева З.А. …………………………………………………………………………………………………………….. 287
ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИБИОТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ АНТИГИСТАМИННЫХ, ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРЕПАР АТОВ И ПРИМЕНЕНИЕ ИХ В ПЕДИАТРИИ ПРИ АТОПИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
Горюнов А.В., Лихачев А.Н. …………………………………………………………………………………………………………………………………….287
АНТАГОНИСТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СПОРОВЫХ ПРОБИОТИКОВ
В
ОТНОШЕНИИ КЛИНИЧЕСКИХ ШТАММОВ ГРИБОВ РОДА candida,
ВЫДЕЛЕННЫХ
ОТ ПАЦИЕНТОВ КАРДИОХИРУРГИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ .
Давыдов Д.С., Мефёд К.М., Габриэлян Н. И., Горская Е. М., Осипова И.Г. ………………………………………………………………..288
Содержание 18
ПРИМЕНЕНИЕ эКСПРЕСС-МЕТОДА ПРИ ОЦЕНКЕ ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ
ПРЕПАР АТОВ, СОДЕРЖАЩИХ НАНОЧАСТИЦЫ МЕТАЛЛОВ
Дмитриева М. Б., Ребрикова Н. Л. ……………………………………………………………………………………………………………………………. 289
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ MG2+ НА АНТИФУНГАЛЬНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПРОИЗВОДНОГО АДАМАНТАН А
Дудикова Д.М., Романова Е.А., Врынчану Н.А. ………………………………………………………………………………………………………..290
УСТОЙЧИВОСТЬ К МАНКОЦЕБУ ШТАММОВ PHYT oPHTHora inFeST anS И al Ternaria SP . ИЗ РОССИИ И БЕЛАРУСИ
Еланский С.Н., Пляхневич М.П., Романова С.С., Шеин С.А., Александрова А.В., Милютина Д.И. …………………………….290
ВЛИЯНИЕ ГУМУСОВЫХ ВЕЩЕСТВ ПЕЛОИДОВ И ИХ ХЕЛАТНЫХ КОМПЛЕКСОВ
НА РОСТ И Р АЗВИТИЕ ГРИБОВ candida albicanS
Жернов Ю.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..291
ФУНГИЦИДНЫЙ э ФФЕКТ ПРЕПАР АТА «КСИДИФОН» В СИСТЕМАХ С candida albicanS IN vITRO
Заславская М.И., Лукоянова Т.В. , Булгаков В.С., Шакеров И.И. ………………………………………………………………………………..292
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ИЗОЛЯТОВ FuSarium Spp . К НЕКОТОРЫМ ФУНГИЦИДАМ
Ильюк А.Г. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 293
СЪЕДОБНЫЕ УПАКОВОЧНЫЕ ПЛЕНКИ И ПОКРЫТИЯ, ОБЛАДАЮЩИЕ ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Кузнецова Л.С., Нагула М.Н., Казакова Е.В., Кудрякова Г.Х. …………………………………………………………………………………….. 293
НОВЫЕ ПИЩЕВЫЕ ДОБАВКИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ПОВЕРХНОСТИ МЯСНЫХ ПРОДУКТОВ ОТ ПОР АЖЕНИЯ МИЦЕЛИАЛЬНЫМИ ГРИБАМИ
Кузнецова Л.С., Михеева Н.В., Писменская В.Н. ……………………………………………………………………………………………………..294
ПОТЕНЦИАЛ эНТОМОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ КАК ПРОДУЦЕНТОВ МОСКИТОЦИДНЫХ ПРЕПАР АТОВ
Лиховидов В.Е., Исангалин Ф.Ш., Наумов А.Н., Асланян Е.М., Быстрова Е.В. ………………………………………………………….296
ИЗУЧЕНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ АНТИМИКОТИЧЕСКОГО ШТАММА bacilluS SubTili S
Лукманова К.А., Гиззатуллина С.В., Галимзянова Н.Ф., Актуганов Г.э., Мелентьев А.И., Трофимов В.А. …………………296
ВЛИЯНИЕ э ФИРНЫХ МАСЕЛ НА РОСТ МИЦЕЛИЯ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
Поликсенова В.Д., Ахрамович Т. ……………………………………………………………………………………………………………………………..297
МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МОЛЕКУЛ-МИШЕНЕЙ В КЛЕТКАХ ПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ ДЛЯ ПРЕОДОЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ К э ХИНОКАНДИНАМ
Прокопов И.А., Корчененкова Е.А., Дигтярь А.В. …………………………………………………………………………………………………….298
ФУНГИЦИДНОЕ ДЕЙСТВИЕ ВОДНЫХ ВЫТЯЖЕК ВЫСШИХ Р АСТЕНИЙ НА МОРФОЛОГИЮ ГРИБОВ РОДА FuSariuM
Рукавицина И.В., Нечай Н.Л., Карамшук З.П. …………………………………………………………………………………………………………..299
ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СИБИРСКИХ ШТАММОВ TRICHODERMA
ДЛЯ СОЗДАНИЯ БИОПРЕПАР АТОВ ЗАЩИТЫ Р АСТЕНИЙ
Садыкова В.С., Бондарь П.Н., Савицкая А………………………………………………………………………………………………………………..300
ПРОДУКТЫ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ PSeudomonaS PuTida КМБУ 4308 ПРОТИВ
НЕСОВЕРШЕННОГО ГРИБА boTr YTiS cinerea pERS:fR.
Стадниченко М. А., Кулешова Ю.М. ………………………………………………………………………………………………………………………..301
ВЛИЯНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ МЕТАБОЛИТОВ НА ГРИБНЫЕ ФИТОПАТОГЕНЫ Р АСТЕНИЙ
Сулейманова Л.Р ., Четвериков С.П., Логинов О.Н. ……………………………………………………………………………………………………301
БИОПРЕПАР АТ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БЕЗВИРУСНОГО КАРТОФЕЛЯ
Тазетдинова Д.И., Тухбатова Р .И., Рафаилова э.А., Алимова Ф.К. ……………………………………………………………………………. 302
ИЗУЧЕНИЕ ИЗМЕНЕНИЙ ТОНКИХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ СТРУКТУР ВОЗБУДИТЕЛЯ КОКЦИДИОИДОМИКОЗА ПОД ВЛИЯНИЕМ ДЕЗИНФЕКТАНТОВ
Тарасова Т.Д., Курилов В.Я., Андрус В.Н, Лесовой В.С., Липницкий А.В. ………………………………………………………………..303
СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕРМАТОМИКОЗОВ
Титова В.Ю., Матросова Л.Е., Крючкова М.А., Степанов В.И. ………………………………………………………………………………….304
БОРЬБА С ФИТОФТОРОЗОМ С ПОМОЩЬЮ АНТАГОНИСТИЧЕСКИХ НЕМАТОД
Тихонова Л.В., Зейрук В.Н., Абашкин О. В., Кукушкина Л.Н., Масюк Ю.А., Марьяновская М.В., Черников В.И. ………305
ДЕЙСТВИЕ ФУНГИЦИДОВ И ИНДУКТОРОВ БОЛЕЗНЕУСТОЙЧИВОСТИ НА ФИТОПАТОГЕНЫ
Тютерев С.Л. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..305
ВЛИЯНИЕ КУЛЬТУР АЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ БАКТЕРИЙ PSeudomonaS auranTiaca B-
162 НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ СПОР ВИДОВ РОДА alTernari A
Федорович М.Н., Веремеенко Е.Г. ……………………………………………………………………………………………………………………………306
АНТИМИКОТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ ПРОБИОТИКОВ В ОТНОШЕНИИ ДЕРМАТОФИТОВ IN vITRO
Харченко С. Н., Волков А.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………307
ДЕЙСТВИЕ НАТУР АЛЬНЫХ ФУНГИЦИДНЫХ СРЕДСТВ НА РОСТ ВИДОВ ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ candidA
Шакалите Ю., Пашкявичюс А., Ложене К. ……………………………………………………………………………………………………………….307
МИКОЗИДИН – НОВЫЙ ОРИГИНАЛЬНЫЙ АНТИФУНГАЛЬНЫЙ ПРЕПАР АТ ДЛЯ СИСТЕМНОГО ЛЕЧЕНИЯ МИКРОСПОРИИ
Шилова И.Б., Пушкина Т.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………..308
Содержание 19
ВЛИЯНИЕ БИОПРЕПАР АТОВ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ НА МИКРОМИЦЕТЫ В АГРОЦЕНОЗАХ ПРОПАШНЫХ КУЛЬТУР
Штырлина О.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….309
МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МОЛЕКУЛ-МИШЕНЕЙ В КЛЕТКАХ ПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
ДЛЯ ПРЕОДОЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ К э ХИНОКАНДИНАМ
Прокопов И.А, Корчененкова Е.А., Дигтярь А.В. ……………………………………………………………………………………………………..310
Раздел 12
СИСТЕМА
ТИКА И эВОЛюцИЯ ГРИбОВ
ARMILLARIA MELLEA IS THE pREv ALENT SpECIES Of THE GENUS ARMILLARIA IN IRA N
Dalili S.A.R. №, Nanagulyan S.G. І, Alavi S.v . № ………………………………………………………………………………………………………..313
РЕВИЗИЯ РЖАВЧИННЫХ ГРИБОВ (UREDINALES) РОССИИ
Азбукина З.М., Каратыгин И.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………….313
О ПРОБЛЕМАХ ТАКСОНОМИЧЕСКОГО СТАТУСА эНТОМОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
МАЛОИЗВЕСТНОГО АНАМОРФНОГО РОДА eV lacHoV aea (DEUTEROMYCOTA)
Борисов Б.А., Тарасов К.Л., Александрова А.В. ……………………………………………………………………………………………………….. 314
ТАКСОНОМИЯ И ФИЛОГЕНИЯ ГРИБОВ РОДА FuSarium
Гагкаева Т.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………315
ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА РОДА alTernari A
Ганнибал Ф.Б…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..316
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ПЦР ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ГРИБОВ РОДА fUSARIUM
Гришина М.А., Антонов В.А., Ткаченко Г.А., Липницкий А.В. …………………………………………………………………………………. 317
ОСОБЕННОСТИ ОБЛАСТИ ВНУТРЕННИХ ТР АНСКРИБИРУЕМЫХ СПЕЙСЕРОВ ITS1–5,8S-ITS2 И МЕЖГЕННОГО ИНТЕРВАЛА IGS1 ЯДРЕНОЙ РИБОСОМАЛЬНОЙ ДНК leccinum PS
eudoScabruM
Иванов Д.М. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 318
КОМПЛЕКСНАЯ ТЕР АПИЯ ОНИХОМИКОЗОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АППАР АТНОГО МЕТОДА
Коваленко А.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..318
Раздел 13
ГРИ
бНыЕ бИОТЕхНОЛОГИИ
ОТБОР ЛИПОЛИТИЧЕСКИ АКТИВНЫХ КУЛЬТУР МИКРОМИЦЕТОВ С НОВЫМИ СВОЙСТВАМ И
Айзенберг В.Л., Борисенко А.В., Захарченко В.Л.,
Курченко И.Н., Капичон А.П., Бурбан А.Ф., Коновалова В.В. …………………………………………………………………………………… 321
ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАР АТА ПРОТИВ ПАР АЗИТИЧЕСКИХ НЕМАТОД Р АСТЕНИЙ И ЖИВОТНЫ Х
Ананько Г.Г., Теплякова Т.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………….321
ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТР АЦИИ ФЕНОЛА НА РОСТ И СИНТЕЗ ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ ГРИБОМ len TinuS
TiGrinuS И БАКТЕРИЕЙ rHodococcu S erYTHro PoliS ПРИ Р АЗДЕЛЬНОМ И СОВМЕСТНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ
Атыкян Н.А., Костина Е.Г., Ревин В.В………………………………………………………………………………………………………………………322
ГЛИКОПОЛИМЕРЫ И УГЛЕВОДСВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ LENTINUS EDODES
Бабицкая В.Г., Никитина В.Е., Смирнов Д.А., Щерба В.В., Цивилева О.М., Филимонова Т.В., Осадчая О.В. ……………..323
ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ГРИБОВ РОДА CORDYCEp S
Бабицкая В.Г., Бисько Н.А., Смирнов Д.А., Щерба В.В., Пучкова Т.А., Осадчая О.В., Поединок Н.Л. ………………………..324
УТИЛИЗАЦИЯ ЛИГНОСУЛЬФОНАТА ДЕРЕВОР АЗРУШАЮЩИМИ ГРИБАМИ
Бойко М.И., Просянок М.В., Терещенко Г.С., Али М. Ибрагим …………………………………………………………………………………324
ВОЗМОЖНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ ДЛЯ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАР АТОВ МАЦЕРИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ
Бойко С.М., Филиппова Ю.О., Древаль К.Г. ……………………………………………………………………………………………………………..325
ПОЛУЧЕНИЕ ЧИСТОЙ СУСПЕНЗИИ БАЗИДИОСПОР
Владимирова С.Ф., Нефелова М.В., Жарикова Г.Г. ……………………………………………………………………………………………………326
ПОВЫШЕНИЕ АКТИВНОСТИ БИОПРЕПАР АТОВ НА ОСНОВЕ ГРИБОВ-АНТАГОНИСТОВ TricH oderma SPP .
Войтка Д.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..327
РАЗР АБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ
ВЕЩЕСТВ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ПТИЦЕВОДСТВ Е
Гвоздкова Т.С., Черноок Т.В., Валюженич Т.Е., Щерба В.В., Бирман Б.Я., Гирис Д.А., Буйко Н.В., Зинина Н.В. ……………………………………………………………………………………………………327
Содержание 20
ГРИБЫ РОДА TRAMETES fR. КАК ОБЪЕКТЫ БИОТЕХНОЛОГИИ
Горшина Е.С. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..328
ПАР АЗИТАРНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ В НОВОСИБИРСКОЙ ОБЛАСТИ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
ХИЩНЫХ ГРИБОВ В БОРЬБЕ С ГЕЛЬМИНТОЗАМИ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕК А
Ефремова Е.А., Бонина О.М., Коптенкова Н.Б., Теплякова Т.В., Урютова Л.А. …………………………………………………………..329
ГЛУБИННОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ НЕКОТОРЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
Кожемякина Н.В., Гурина С.В., Ананьева Е.П. …………………………………………………………………………………………………………330
ГРИБЫ РОДА Penicillium КАК ПРОДУЦЕНТЫ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ
АЗОТСОДЕРЖАЩИХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ.
Козловский А.Г., Желифонова В.П., Антипова Т.В. ………………………………………………………………………………………………….. 330
БИОДЕГР АДАЦИЯ НЕФТЯНЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ ПРИ СОВМЕСТНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ lenT
inuS TiGrinuS И rH odococcuS er YTHroPoliS
Костина Е.Г., Надежина О.С., Атыкян Н.А., Ревин В.В. …………………………………………………………………………………………….331
ПОГРУЖЕННАЯ БИОМАССА БАЗИДИАЛЬНЫХ КСИЛОТРОФНЫХ ГРИБОВ: ПОЛУЧЕНИЕ В УСЛОВИЯХ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КР АТКИХ ПРОЦЕССОВ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ И СР АВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ СВОЙСТВ
Краснопольская Л.М., Автономова А.В., Белицкий И.В., Леонтьева М.И., Соболева Н.Ю., Баканов А.В., Евсенко М.С., Усов А.И., Трещалина Е.М., Седакова Л.А., Исакова Е.Б., Бухман В.М. ………………………..332
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ МИКРОМИЦЕТОВ С ТЯЖЕЛЫМИ МЕТАЛЛАМИ: АККУМУЛЯЦИЯ И ТОКСИЧНОСТЬ
Куимова Н.Г., Жилин О.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………….333
ПОИСК МИКРООРГАНИЗМОВ – АКТИВНЫХ ПРОДУЦЕНТОВ ЛАКТАТОКСИДАЗЫ
Куплетская М.Б., Кураков А.В., Нетрусов А.И. …………………………………………………………………………………………………………334
ВЛИЯНИЕ Р АЗЛИЧНЫХ ИСТОЧНИКОВ АЗОТА И УГЛЕРОДА НА Р ОСТ ВЫСШИХ
ДЕРЕВОР АЗРУШАЮЩИХ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБО В
Линовицкая В.М., Дзыгун Л.П., Клечак И.Р ., Бухало А.С. …………………………………………………………………………………………335
эНТОМОПАТОГЕННЫЕ ГРИБЫ КАК ИСТОЧНИК НОВЫХ РЕСУРСОВ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТ В
Лиховидов В.Е., Исангалин Ф.Ш., Наумов А.Н., Артюхин В.И., Асланян Е.М., Быстрова Е.В., Коробова Н.А., Уткина Н.Н. ……………………………………………………………………………………… 335
ПОЛУЧЕНИЕ ПОСЕВНОГО МАТЕРИАЛА ПРОДУЦЕНТА ГЛЮКОЗООКСИДАЗЫ pENICILLIUM fUNICULOSUM 46.1 НА Р АЗЛИЧНЫХ СУБСТР АТАХ
Павловская Ж.И., Семашко Т.В., Михайлова Р .В., Виноградова Н.В., Лобанок А.Г. …………………………………………………..336
ДЕСТРУКЦИЯ ФЕНОЛА ГРИБОМ «БЕЛОЙ ГНИЛИ» LENTINUS TIGRINU S
Паршин А.А., Надежина О.С., Кадималиев Д.А., Атыкян Н.А. …………………………………………………………………………………337
ВЛИЯНИЕ МИНЕР АЛЬНЫХ И ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ
НА
СОРБЦИОННУЮ АКТИВНОСТЬ ГРИБНЫХ СОРБЕНТОВ
Ровбель Н.М. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..338
ВЛИЯНИЕ ИОНОВ МЕДИ НА СИНТЕЗ ЛАККАЗЫ ПРИРОДНЫМ ШТАММОМ БАЗИДИАЛЬНОГО КСИЛОТРОФА TrameTeS
HirSuT a 56 (WULfEN) pILБT В УСЛОВИЯХ ГЛУБИННОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ
Сальцова И.Ю., Горшина Е.С. ………………………………………………………………………………………………………………………………….338
ФЕРМЕНТНЫЙ ПРЕПАР АТ ЛАККАЗЫ БАЗИДИОМИЦЕТА TrameTeS HirSuT a
(WUL
fEN) pILAT И ОСОБЕННОСТИ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ
Самохвалова Н. С., Горшина Е.С., Бирюков В.В. ………………………………………………………………………………………………………339
ЗАЩИТА ГЕНОМА И ВОЗМОЖНОСТИ ГРИБНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ
Сенюк О.Ф., Горовой Л.Ф., Курченко В.П. ……………………………………………………………………………………………………………….34 0
ГУМИНОВЫЕ КИСЛОТЫ КАК СТИМУЛЯТОРЫ РОСТА ГРИБОВ
Сидоренко М.Л., Ефремова Н.Ю………………………………………………………………………………………………………………………………341
БЕЛКОВО-ВИТАМИННЫЙ ПРЕПАР АТ НА ОСНОВЕ МИКРОМИЦЕТОВ: ПОЛУЧЕНИЕ, ХАР АКТЕРИСТИКА И АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ
Супрун С.М., Харкевич Е.С., Донченко Г.В., Пархоменко Ю.М., Кучмеровская Т.М. …………………………………………………341
ФЕРМЕНТНЫЕ ПРЕПАР АТЫ ИЗ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ГРИБО В
Телишевская Л.Я., Овчинников Р .С. ………………………………………………………………………………………………………………………… 342
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ TRICHODERMA В ПРОЦЕССЕ ПЕРЕР АБОТКИ ОТХОДОВ СПИРТОВОГО ПРОИЗВОДСТВ А
Тухбатова Р .И., Рафаилова э.А., Тазетдинова Д.И., Алимова Ф.К., Скворцов Е.В., Мельникова Т.А. ………………………….343
ИЗУЧЕНИЕ НЕНАСЛЕДСТВЕННОЙ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ МИТОСПОРОВОГО ГРИБА ARTHROBOTRYS LONGA – ПРОДУЦЕНТА ЛОНГОЛИТИНА, ТРОМБОЛИТИКА С АКТИВАТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Шаркова Т.С., Подорольская Л.В., Серебрякова Т.Н., Неумывакин Л.В. …………………………………………………………………….344
БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ МИКОСИМБИОНТНЫХ БАКТЕРИЙ
Широких А.А., Широких И.Г. ………………………………………………………………………………………………………………………………….345
Содержание 21
Раздел 14
ВЕТЕРИНАРНАЯ
МИКОЛОГИЯ
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФАРМАЙОДА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ ТРИХОФИТИЕЙ ЖИВОТНЫХ
Алешкевич В.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………347
СОВРЕМЕННЫЕ ДЕЗИНФЕКТАНТЫ ПРИ ТРИХОФИТИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Алешкевич В.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………349
ВЛИЯНИЕ МОНАКОЛИНА К (ЛОВАСТАТИНА) НА СОБСТВЕННЫЙ ПРОДУЦЕНТ –
МИКРОМИЦЕТ aSP erGilluS TerreuS
Баранова Н.А., Крейер В.Г., Егоров Н.С. …………………………………………………………………………………………………………………..351
ГРИБЫ С (ИЗ) ОПУХОЛЕЙ У ГОЛЬЯНА pHOXINUS pHOXINUS (L.)
Доровских Г.Н., Шергина Н.Н., Поминова А.В. ………………………………………………………………………………………………………..351
ПРОБЛЕМЫ ИЗУЧЕНИЯ СИСТЕМНЫХ МИКОЗОВ У РЫБ
Карасева Т.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..352
ПРОБЛЕМА БЕССИМПТОМНОГО МИКОНОСИТЕЛЬСТВА У ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ, Её СОЦИАЛЬНАЯ ЗНА ЧИМОСТЬ И ПУТИ РЕШЕНИЯ
Маноян М.Г., Овчинников Р .С., Панин А.Н. ……………………………………………………………………………………………………………..353
СОВРЕМЕННЫЕ СРЕДСТВА СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ТЕР АПИИ ДЕРМАТОФИТОЗОВ ЖИВОТНЫ Х
Маноян М.Г., Панин А.Н., Овчинников Р .С. ……………………………………………………………………………………………………………..354
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАР АТА НУКЛЕВИТ НА ОРГАНИЗМ РЫ Б
Мясоедов А.В., Ханис А.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………………………….355
ВОЗР АСТАЮЩАЯ ЗНА ЧИМОСТЬ ГРИБОВ-ОППОРТУНИСТОВ В эТИОЛОГИИ МИКОЗОВ ЖИВОТНЫ Х
Овчинников Р .С.2, Маноян М.Г.2, Ершов П.П.1, Гайнуллина А.Г.2 ………………………………………………………………………………356
МИКОТИЧЕСКИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ эКЗОТИЧЕСКИХ ПРЕСМЫКАЮЩИХСЯ, СОДЕР
ЖАЩИХСЯ В ДОМАШНИХ УСЛОВИЯ Х
Овчинников Р .С., Маноян М.Г., Гайнуллина А.Г. ………………………………………………………………………………………………………357
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ эКСТР АКТА БИОМАССЫ ГРИБА fUSARIUM SAMBUCINUM В КОРМЛЕНИИ СОБОЛЕЙ
Пучков А.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….359
К ВОПРОСУ Р АЗР АБОТКИ СРЕДСТВ И МЕТОДОВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ДЕРМАТОМИКОЗОВ ЖИВОТНЫХ
Саркисов К.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..360
эКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ НТ-2 ТОКСИКОЗ ЦЫПЛЯТ
Труфанов О. В. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..361
Раздел 15
ГРИ
бы – АГЕНТы бИОПОВРЕЖДЕНИй
fUNGI AS BIODETERIORATION AGENTS IN MUSEUMS Of RUSSIA AND GREECE
Bogomolova E.v ., k apsanaki-Gotsi E., Saketopoulou D., kobyakovav .I., panina L.k. …………………………………………………….363
ПОДХОДЫ К ОЦЕНКЕ МИКОЛОГИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ ПОМЕЩЕНИЙ МУЗЕЕВ, АРХИВОВ,
БИБЛИОТЕК НА ОСНОВЕ МЕТОДОВ АНАЛИЗА МНОГОМЕРНЫХ ДАННЫ Х
Абрамов Е.Г., Богомолова Е.В., Панина Л.К. …………………………………………………………………………………………………………….364
ГРИБЫ ПОВЕРХНОСТНОЙ ПЛЕСЕНИ ДРЕВЕСИНЫ ДУБА
Абрамян Дж.Г., Нанагюлян С.Г., э лоян И.М. ……………………………………………………………………………………………………………364
ГРИБОСТОЙКОСТЬ НЕКОТОРЫХ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ПОЛИВИНИЛОВЫХ СПИРТОВ (ПВС) И ПОЛИВИНИЛАЦЕТАТОВ (ПВА)
Абрамян Дж.Г., Нанагюлян С.Г., Фармазян З.М., Шахазизян И.В. ……………………………………………………………………………..365
Р АЗНООБР АЗИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ, ВЫЯВЛЯЕМОЕ В ПЫЛИ ГЕРМОЗАМКНУТОГО ОБЪЕМА НА БОРТУ СЛУЖЕБНОГО МОДУЛЯ РС МКС.
Алехова Т.А., Александрова А.В., Лысак Л.В., Загустина Н.А., Новожилова Т.Ю., Романов С.Ю. ……………………………..366
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРЕПАР АТА ПОЛИДЕЗ ДЛЯ ЗАЩИТЫ МУЗЕЙНЫХ ОБЪЕКТОВ ОТ БИОПОВРЕЖДЕНИЙ
Бидзиля В.А, Митковская Т.И, Коваль э.З. ……………………………………………………………………………………………………………….367
РОСТ МИКРОМИЦЕТОВ НА АВИАЦИОННОМ ТОПЛИВЕ И Р АЗЛИЧНЫХ УГЛЕВОДОРОДАХ
Васильева А. А., Чекунова Л. Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………367
ПОВРЕЖДЕНИЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПОЛИэ ФИРНЫХ МАТЕРИАЛОВ ГРИБАМИ
Виноградова А.В., Ермилова И.А., Лебедева Е.В………………………………………………………………………………………………………368
Содержание 22
МИКОБИОТА ВОЗДУХА СЕКТОР А РЕДКОЙ КНИГИ ЧЕЛЯБИНСКОЙ
ОБЛАСТНОЙ УНИВЕРСАЛЬНОЙ НАУЧНОЙ БИБЛИОТЕКИ
Головина Т.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….369
ПЛЕСНЕВОЕ ПОР АЖЕНИЕ МАТЕРИАЛОВ ПЛЕСНЕВЫМИ ГРИБАМИ РОДА ASpERGILLU S
Гончарова И.А., Ровбель Н.М., Грек Д.С. ………………………………………………………………………………………………………………….370
ЗАЩИТА ВОЛОКНИСТЫХ МАТЕРИАЛОВ КОСМИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ ОТ БИОПОВРЕЖДЕНИЙ
Дешевая Е.А., Новикова Н.Д., Поликарпов Н.А., Дьякова М.Г., Шевлякова Н.В., Тверской В.А. ………………………………..371
МИКРОМИЦЕТЫ – ДЕСТРУКТОРЫ КОТОНИЗИРОВАННОГО КОНОПЛЯНОГО ВОЛОКНА
Ермилова И.А., Лебедева Е.В., Бойченко А.М. ………………………………………………………………………………………………………….371
ЛАБОР АТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОДЕГР АДАЦИИ ПОЛИУРЕТАНА В ПОЧВАХ ЛЕНИНГР АДСКОЙ ОБЛАСТИ
Зачиняев Я.В., Мирошниченко И.И., Зачиняева А.В. ………………………………………………………………………………………………..372
ПОЧВЕННЫЕ МИКРООРГАНТЗМЫ КАК БИОДЕСТРУКТОРЫ ПОЛИМЕРНЫХ КОМПОЗИЦИОННЫХ МАТЕРИАЛОВ
Легонькова О.А., Селицкая О.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………373
МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ ДЛЯ ПЕРЕР АБОТКИ ОРГАНИЧЕСКОГО СЫРЬ Я
Матросова Л.Е., Сергейчев А.И., Иванов А.А., Иванов А.В. ……………………………………………………………………………………..373
ОЦЕНКА РОЛИ МИКРОМИЦЕТОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ С ПРОИЗВЕДЕНИЙ ИСКУССТВА
Митковская Т.И., Коваль э.З. …………………………………………………………………………………………………………………………………..374
ИСПЫТАНИЯ ПРОМЫШЛЕННЫХ МАТЕРИАЛОВ И ИЗДЕЛИЙ НА ГРИБОСТОЙКОСТЬ В МОСКОВСКОМ УНИВЕРСИТЕТЕ
Мокеева В.Л., Чекунова Л.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………375
РОЛЬ САПРОТРОФНЫХ ГИФОМИЦЕТОВ В ИНТЕГР АЦИИ Р АЗДЕЛОВ МИКОЛОГИИ
Осипян Л.Л. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….376
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЛАЗЕРНОЙ ТЕХНОЛОГИИ УДАЛЕНИЯ МИКОГЕННЫХ
ЗАГРЯЗНЕНИЙ С ПОВЕРХНОСТИ ПАМЯТНИКОВ
Парфенов В.А., Кирцидели И.Ю. ……………………………………………………………………………………………………………………………..376
МИКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В ОБЛАСТИ КОНСЕРВАЦИИ КУЛЬТУРНОГО НАСЛЕДИЯ
Ребрикова Н.Л. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..377
ОСОБЕННОСТИ ДИНАМИКИ ИЗМЕНЕНИЯ ЧИСЛЕННОСТИ МИКРОМИЦЕТОВ В КНИГОХР АНИЛИЩАХ
Сергеева Л.Е. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..378
МИКРОМИЦЕТЫ В ВОЗДУХЕ эКСПОЗИЦИОННЫХ ЗАЛОВ ГОСУДАРСТВЕННОГО эРМИТАЖА
Смоляницкая О.Л. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………378
ИЗУЧЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАР АТА СЕПТОДОР НА МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ – ДЕСТРУКТОРЫ ИЗДЕЛИЙ И МАТЕРИАЛОВ
Суббота А.Г. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………379
МИКРОМИЦЕТЫ, ПОВРЕЖДАЮЩИЕ КОЖУ ПЕРЕПЛЕТОВ
Хазова С.С., Великова Т.Д., Лебедева Е.В. ………………………………………………………………………………………………………………..380
МИКРОМИЦЕТЫ ВОЗДУХА МУЗЕЙНЫХ ПОМЕЩЕНИЙ И ВЫЗВАННЫЕ ИМИ НЕГАТИВНЫЕ ПОСЛЕДСТВИЯ
элоян И.М., Оганесян Е.Х., Акопян Л.А., Мнацаканян э.А. ……………………………………………………………………………………..381
Раздел 16
ГРИ
бы эКСТРЕМАЛьНых МЕСТООбИТАНИй
МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ Р ОСТ А КОЛОНИЙ МИКРОМИЦЕТОВ В УСЛОВИЯХ СТРЕССА
Водопьянов В.В., Киреева Н.А., Идиятуллина А.Р . ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 383
СПЕКТР АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ У МИКРОМИЦЕТОВ ЩЕЛОЧНЫХ ЗАСОЛЕННЫХ ПОЧВ
Георгиева М.Л., Толстых И.В., Биланенко Е.Н., Катруха Г.С. …………………………………………………………………………………….384
МИКРОМИЦЕТЫ ТОРФЯНИКОВ ВЕРХОВЫХ БОЛОТ НА ПОБЕРЕЖЬЕ КАНДАЛАКШСКОГО ЗАЛИВА БЕЛОГО МОРЯ
Грум-Гржимайло О.А., Биланенко Е.Н. …………………………………………………………………………………………………………………….384
ГИДРОЛИТИЧЕСКИЕ ФЕРМЕНТЫ ГАЛОАЛКАЛОФИЛЬНОГО АСКОМИЦЕТА Heleococcum alKalinu M
Грум-Гржимайло А.А., Биланенко Е.Н. …………………………………………………………………………………………………………………….385
ОЛИГОКАРБОТОЛЕР АНТНЫЕ ГРИБЫ В УСЛОВИЯХ 10-КМ ЗОНЫ ОЧУЖДЕНИЯ .
Жданова Н.Н., Павличенко А.К. ………………………………………………………………………………………………………………………………385
ВЫСШИЕ ГРИБЫ ИЗ ДОННЫХ ОТЛОЖЕНИЙ СЕРОВОДОРОДНОЙ БАТИАЛИ ЧЕРНОГО МОРЯ
Зайцев Ю.П., Копытина Н.И. ……………………………………………………………………………………………………………………………………386
Содержание 23
СТРУКТУР А КОМЛЕКСОВ МИКРОМИЦЕТОВ В НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ ПОЧВАХ
И ПРИ РЕКУЛЬТИВАЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОПРЕПАР АТА
Киреева Н.А., Рафикова Г.Ф. ……………………………………………………………………………………………………………………………………387
МИКРОМИЦЕТЫ В ПОЧВАХ ПОЛЯРНЫХ ПУСТЫНЬ СЕВЕРО-ВОСТОЧНОЙ ЗЕМЛИ
Кирцидели И.Ю. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..388
МИКОБИОТА МНОГОЛЕТНЕЙ МЕРЗЛОТЫ
Кочкина Г.А., Озерская С.М., Иванушкина Н.Е., Гиличинский Д.А. ………………………………………………………………………….389
ВНЕКЛЕТОЧНЫЕ ПРОТЕАЗЫ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ ГИДРОТЕРМ ЗАБАЙКАЛЬЯ
Лаврентьева Е.В., Биланенко Е.Н., Дунаевский Я.Е. ………………………………………………………………………………………………… 390
ОЛИГОКАРБОТОЛЕР АНТНЫЕ ГРИБЫ В УСЛОВИЯХ 10-КМ ЗОНЫ ОЧУЖДЕНИ Я
Павличенко А.К., Жданова Н.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………390
МОНИТОРИНГ МИКРОМИЦЕТНЫХ СООБЩЕСТВ В ПИРОГЕННЫХ ПОЧВАХ
Семенова Т.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….391
ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ И ПРОЯВЛЕНИЯ Р АДИОАДАПТАЦИОННЫХ СВОЙСТВ У ГРИБОВ, ДЛИТЕЛЬНОЕ ВРЕМЯ НАХОДЯЩИХСЯ В УСЛОВИЯХ ПОВЫШЕННОГО Р АДИАЦИОННОГО ФОНА
Тугай Т.И., Жданова Н.Н. …………………………………………………………………………………………………………………………………………392
ИССЛЕДОВАНИЕ РОСТА ГРИБОВ GeomYceS P annorum В Р АЗЛИЧНЫХ
ОКИСЛИТЕЛЬНО-ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫХ УСЛОВИЯХ
Щербакова В.А., Кочкина Г.А, Иванушкина Н.Е, Озерская С.М, Лауринавичюс К.С. ………………………………………………..392
Раздел 17
СИМ
бИОз ГРИбОВ И РАСТЕНИй
СОЗДАНИЕ э ФФЕКТИВНОГО СИМБИОЗА БОБОВЫХ КУЛЬТУР
С ГРИБАМИ АРБУСКУЛЯРНОЙ МИКОРИЗЫ
Алещенкова З.М., Картыжова Л.Е., Ланцевич А.А., Короленок Н.В. …………………………………………………………………………395
эНДОФИТ-Р АСТЕНИЕ КАК СЛОЖНАЯ ДИНАМИЧЕСКАЯ СИСТЕМА
Благовещенcкая Е.Ю. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………396
КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА СИМБИОТИЧЕСКОЙ
СОСТ
АВЛЯЮЩЕЙ ПРОДУКТИВНОСТИ эКТОМИКОРИЗНОГО ВИДА Р АСТЕНИЙ
(PinuS SYlVeSTriS L.) В ЕСТЕСТВЕННЫХ МЕСТООБИТАНИЯХ
Веселкин Д.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………396
ГРИБЫ НА КОРНЯХ Р АСТЕНИЙ ПАМЯТНИКА ПРИРОДЫ «Д УБР АВА »
Карпук В.В., Кулаковская Н.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………397
ИЗУЧЕНИЕ ГРИБА mYcoPHYciaS aScoPHYlli (COTTON) kOHLMEYER&vOLkMAN-
kOHLMEYER, АССОЦИАЦИИРОВАННОГО С ВОДОРОСЛЬЮ aScoPHYllum
nodoSum (L.) LEJOLIS В КАНДАЛАКШСКОМ ЗАЛИВЕ БЕЛОГО МОР Я
Коновалова О.П., Бубнова Е.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………..398
ЦЕЛЛЮЛАЗНАЯ И КСИЛАНАЗНАЯ АКТИВНОСТИ У эНДОФИТНЫХ
ГРИБОВ СФАГНОВЫХ БОЛОТ УКР АИНСКОГО ПОЛЕСЬЯ
Курченко И.Н., Соколова Е.В., Жданова Н.Н., Юрьева Е.М., Ярынчин А.Н. ………………………………………………………………399
ФИТОГОРМОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ КУЛЬТУР АЛЬНОЙ СРЕДЫ ГРИБА-
эНДОФИТА РОДА acremoniu M
Нагорный С.Н., Драговоз И.В., Яворская В.К. ………………………………………………………………………………………………………….399
МИКОРИЗНЫЕ АГАРИКОИДНЫЕ БАЗИДИОМИЦЕТЫ ЛЕСОПАРКА «Б АЛАТОВСКИЙ» Г . ПЕРМИ
Переведенцева Л.Г. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….400
АССОЦИИРОВАННОСТЬ МИКРОМИЦЕТОВ С Р АСТЕНИЯМИ ПРИМОРСКИХ ЛУГОВ КАНДАЛАКШСКОГО ЗАЛИВА (БЕЛОЕ МОРЕ)
Порхунова Н.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….401
эКОТОПИЧЕСКАЯ ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ПРИЗНАКОВ
МИКОРИЗЫ Picea oboV aTa LEDEB.
Творожникова Т.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….402
О ЗНА ЧЕНИИ ПОДВИЖНОГО АЗОТА ДЛЯ ПЛОДОНОШЕНИЯ эКТОМИКОРИЗНЫХ ГРИБОВ
Шубин В.И. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….402
ВЛИЯНИЕ АБОРИГЕННЫХ эНДОМИКОРИЗНЫХ ГРИБОВ НА ПРИРОСТ БИОМАССЫ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ Р АСТЕНИЙ
Юрина Т.П. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..404
Содержание 24
Раздел 18
ДЕРМА
ТОМИКОзы. КАНДИДОз СЛИзИСТых ОбОЛОЧЕК
malaSSezia – ФОЛЛИКУЛИТ: КЛИНИКА, ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ
Адаскевич В.П., Козловская В.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………..405
КАНДИДОЗНАЯ ИНФЕКЦИЯ У ЖЕНЩИН, ОБР АТИВШИХСЯ В ЖЕНСКИЕ КОНСУЛЬТАЦИИ
Акышбаева К.С., Джусупгалиева М.Х., Калоиди И.А. ………………………………………………………………………………………………406
ИЗБЫТОЧНАЯ ПОТЛИВОСТЬ: ПРОБЛЕМЫ И РЕШЕНИЯ.
Альбанова В.И. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….406
НАРИНэ В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕР АПИИ КАНДИДОЗНОГО ВАГИНИТА
Альменова Л.Т. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..407
НОВОЕ В ДИАГНОСТИКЕ, ОЦЕНКЕ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА И
ПРОГНОЗИРОВАНИИ ВУЛЬВОВАГИНАЛЬНОГО КАНДИДОЗА
Арзуманян В.Г., Мальбахова Е.Т., Комиссарова Л.М., Сердюк О.А., Карапетян Т.э. ………………………………………………….408
ЗООАНТР АПОНОЗНАЯ ТРИХОФИТИЯ ЛОБКОВОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ И ЕЕ ЛЕЧЕНИЕ
Арифов С.С., Иноятов А.Ш., Арифова М.Х ……………………………………………………………………………………………………………..410
ОПЫТ СИСТЕМНОГО ЛЕЧЕНИЯ ОНИХОМИКОЗОВ У ЛИЦ ПОЖИЛОГО ВОЗР АСТА
Асташина С.М. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..410
МИКОЗЫ СТОП В ПР АКТИКЕ ВР А ЧА-ТЕР АПЕВТА
Барабанов Л.Г., Калинина Т.В., Барабанов А.Л. ………………………………………………………………………………………………………..411
НАШ ОПЫТ ЛЕЧЕНИЯ ИНФИЛЬТР АТИВНО-НАГНОИТЕЛЬНОЙ ТРИХОФИТИИ АТИПИЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ
Баратова В.А., Саркисова э.э. …………………………………………………………………………………………………………………………………412
КОМПЛЕКСНОЕ ЛЕЧЕНИЕ ТРОФИЧЕСКИХ ЯЗВ ГОЛЕНИ И ВАРИКОЗНОЙ (ГИПОСТАТИЧЕСКОЙ)
эКЗЕМЫ АССОЦИИРОВАННОЙ С МИКОТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИЕ Й
Баткаев э.А., Махулаева А.М., Аскеров Н.Г., Малина В.Н., Светухин А.М………………………………………………………………..413
СИТУ АЦИЯ ПО ДЕРМАТОМИЦЕТАМ И КА ЧЕСТВО ЖИЗНИ БОЛЬНЫХ
Бендриковская И.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………413
эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ СИТУ АЦИЯ ПО МИКРОСПОРИИ В РЕСПУБЛИКЕ КОМИ В 2003 – 2006 ГГ.
Бендриковская И.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………414
АНАЛИЗ ПЕРСПЕКТИВНЫХ ИСТОЧНИКОВ СЫРЬЯ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД
Блинкова Л.П., Горобец О.Б., Калягина С.Ю. ……………………………………………………………………………………………………………415
ОЦЕНКА СПЕКТР А ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ДЕРМАТОМИКОЗОВ В МОСКВЕ В 2007 ГОДУ
Богуш П.Г., Лещенко В.М., Дворников А.С., Полякова А.А., Кириллова Н.Н., Курбатова И.В., Бондарев И.М., Лещенко Г.М., Павлова Г.В., Стерлигова Н.Д., Белкина К.Б., Миринова Л.Г., Туманян А.А., Галькевич Т.М. …………………………………………………………………………………….416
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ РУМИКОЗА В ЛЕЧЕНИИ ГРИБКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ.
Ваисов А.Ш., Мусаева Н.Ш., Аллаева М.Д. ……………………………………………………………………………………………………………..416
МИКОЗ СТОП У ЛИЦ ПОЖИЛОГО И СТАРЧЕСКОГО ВОЗР АСТА ПО ДАННЫМ Т АШКЕНТСКОГО ОБЛАСТНОГО КВД
Ваисов А.Ш., Имамов О.С. ………………………………………………………………………………………………………………………………………417
К ПРОБЛЕМЕ ТРИХОФИТИИ В ЦЕНТР АЛЬНОАЗИАТСКОМ РЕГИОНЕ
Ваисов А.Ш., Мусаева Н.Ш., Аллаева М.Д. ……………………………………………………………………………………………………………..418
ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС У БОЛЬНЫХ ОНИХОМИКОЗОМ
Васенова В.Ю., Бутов Ю.С. ……………………………………………………………………………………………………………………………………..419
ТАКТИКА КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕР АПИИ ОНИХОМИКОЗОВ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЛАКА «БАТР АФЕН »
Васенова В.Ю., Бутов Ю.С., Аллахвердов А.И. ………………………………………………………………………………………………………..420
ПРИНЦИПЫ ТЕР АПИИ ОНИХОМИКОЗОВ
Васенова В.Ю., Бутов Ю.С., Школьников М.М…………………………………………………………………………………………………………420
ИССЛЕДОВАНИЕ э ФФЕКТИВНОСТИ КОМПЛЕКСА «ФОЛТЕНЕ ФАРМА ПРОТИВ ПЕРХОТИ »
Верхогляд И.В., Пинсон И.Я. …………………………………………………………………………………………………………………………………..421
ПЕРСПЕКТИВЫ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ПРОТИВОГРИБКОВОЙ ТЕР АПИИ
Гарасько Е. В., Ефимова Е.Г., Пругер И.В. ………………………………………………………………………………………………………………..421
ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ КАНДИДО-ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ МИКСТ-ИНФЕКЦИЕЙ
Гарбузов Д.А., Федотов В.П. ……………………………………………………………………………………………………………………………………422
ЛЕЧЕНИЕ БОЛЬНЫХ МИКОЗАМИ СТОП НОВЫМ АНТИМИКОТИКОМ ЛАМИКАН
Гафаров М.М., Блинова Е.С., Петрасюк О.А. ……………………………………………………………………………………………………………423
Содержание 25
НОВЫЙ МЕНЕДЖМЕНТ ЛЕЧЕНИЯ ДЕРМАТОФИТИЙ
Герасимчук Е.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..423
ИММУНОМОДУЛИРУЮЩАЯ ТЕР АПИЯ МАЛАССЕЗИОЗА КОЖИ
Горбунцов В. В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….424
Р АСПРЕДЕЛЕНИЕ БОЛЬНЫХ С ОНИХОМИКОЗАМИ ПО ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ В СИСТЕМЕ АВО
Дукович Е.В., Хабирова Р .Х., Титугина А.Ю., Балтер И.А., Табашникова А.И. …………………………………………………………. 425
эФФЕКТИВНОСТЬ ТЕРБИЗИЛА В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ОНИХОМИКОЗОВ
Ерашова Т.Ю., Разумная Г.Н., Суслов В.С. ……………………………………………………………………………………………………………….426
РЕДКИЕ ЛОКАЛИЗАЦИИ ЗООАНТРОПОНОЗНОЙ МИКРОСПОРИИ У ВЗРОСЛЫХ
Жукова И.Ю., Терегулова Г.А., Магазова Р .А., Левченко Т.С., Хамматова А.А., Гареева Р .Р ., Корытова Е.Н. ……………….427
ПСЕВДОМИКОЗЫ В ПР АКТИКЕ ДЕРМАТОЛОГА-МИКОЛОГА
Завадский В.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..428
АДГЕЗИВНЫЕ РЕАКЦИИ БУККАЛЬНЫХ эПИТЕЛИОЦИТОВ У ПАЦИЕНТОВ
ДЕТСКОГО ВОЗР АСТА С ОНИХОПАТИЯМИ
Заславская М.И., Мишина Ю.В., Лукова О.А. …………………………………………………………………………………………………………..429
эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ СИТУ АЦИЯ ПО ТРИХОФИТИИ В РОССИИ В 2003 – 2006 ГГ.
Иванова М.А., Бендриковская И.А., Мельниченко Н.Е., Николаев А.И. …………………………………………………………………….430
РОЛЬ МИКОФЛОРЫ В Р АЗВИТИИ НАРУЖНОГО ОТИТА
Ивченко О.В., Литвинов А.М. ………………………………………………………………………………………………………………………………….431
ЛЕЧЕНИЕ ОТРУБЕВИДНОГО ЛИШАЯ КРЕМОМ «эКЗОДЕРИЛ» (НАФТИФИНА ГИДРОХЛОРИД )
Исламов В.Г., Киянская Е.С. …………………………………………………………………………………………………………………………………….431
К ВОПРОСУ ОБ АТИПИЧНЫХ ФОРМАХ МИКРОСПОРИИ
Касымов О.И., Максудова М.Н., Нуралиев М.Д., Бобиев А.З. ……………………………………………………………………………………432
ОРУНГАЛ В ТЕР АПИИ ОНИХОМИКОЗОВ
Касымов О. И., Хайдаралиева Ш. З., Кулмадов А. Ш. ……………………………………………………………………………………………….432
эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ТРИХОМИКОЗОВ В ГРУЗИИ
Китуашвили Т.А., Твалиашвили Г.М., Бучукури И.В., Иноземцева М.Н., Гурчумалидзе Х.Т., Галдава Г.Г. ………………………………………………………………………………………………….. 433
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАР АТА «эКЗИФИН» В ЛЕЧЕНИИ ОНИХОМИКОЗА СТОП
Киянская Е.С. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….433
КЛИНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ЗАБОЛЕВАНИЙ НОГТЕЙ У ПАЦИЕНТОВ ДЕТСКОГО ВОЗР АСТА
Клеменова И.А., Мишина Ю.В., Шебашова Н.В. ……………………………………………………………………………………………………..434
ВОПРОСЫ ЛЕЧЕНИЯ Р АСПРОСТР АНЕННЫХ ФОРМ ОТРУБЕВИДНОГО ЛИШАЯ
Коган А.И., Носоченко Г.Ф., Сазонова Н.И. ………………………………………………………………………………………………………………435
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИНДУКТОРОВ ИНТЕРФЕРОНА В ТЕР АПИИ РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО УРОГЕНИТАЛЬНОГО КАНДИДОЗА
Корепанов А.Р ., Якубович А.И., Чуприн А.Е. ……………………………………………………………………………………………………………435
ГРИБЫ РОДА CANDIDA – МАРКЕРЫ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ ПСОРИАЗА
Корнишева В.Г., Чилина Г.А., Свиридова К.В. ………………………………………………………………………………………………………….436
МИКОЗЫ КОЖИ НА ПРОМЫШЛЕННЫХ ПРЕДПРИЯТИЯХ СЕВЕРНОГО РЕГИОНА КАЗАХСТАНА
Котлярова Т.В., Батпенова Г.Р ., Малгаздарова К.С. …………………………………………………………………………………………………… 436
КЛИНИЧЕСКИЕ Р АЗНОВИДНОСТИ МИКРОСПОРИИ, ВЫЗВАННОЙ microSPorum caniS
Кравец Е.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..437
РУБРОМИКОЗ ГЛАДКОЙ КОЖИ И ВОЛОСИСТОЙ ЧАСТИ ГОЛОВЫ
Кравец Е.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..438
СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИРОВАНИЯ И ПОДСЧЕТА ЖИВЫХ И НЕЖИЗНЕСПОСОБНЫХ КЛЕТОК ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ
Лесовой В.С. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………438
СОСТОЯНИЕ эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЙ СИТУ АЦИИ Р АЗНОЦВЕТНОГО ЛИШАЯ В РЕСПУБЛИКЕ УЗБЕКИСТАН
Махсудов М.Р ., эшбаев э.Х., Маматкулов У .А. …………………………………………………………………………………………………………439
РУБРОФИТИЯ, МАСКИРУЮЩАЯ ОГР АНИЧЕННУЮ ПРЕТИБИАЛЬНУЮ МИКСЕДЕМУ У БОЛЬНЫХ С ГИПЕРТИРЕОЗОМ
Мельник А.П., Яковлев И.М. ……………………………………………………………………………………………………………………………………439
ЛЕЧЕНИЕ МИКОЗОВ КОЖИ МЕТОДОМ АППЛИКАЦИОННОЙ ФОТОХИМИОТЕР АПИИ
Мошнин М.В., Яковлев А.Б. …………………………………………………………………………………………………………………………………….440
СИСТЕМНАЯ ТЕР АПИЯ БИНАФИНОМ В ЛЕЧЕНИИ МИКОЗОВ СТО П
Новикова Л.А., Бахметьева Т.М. ………………………………………………………………………………………………………………………………441
Содержание 26
ВАГИНАЛЬНЫЙ ГЕЛЬ «КАНДИД» И ВАГИНАЛЬНЫЕ ТАБЛЕТКИ «КАНДИД»
В ЛЕЧЕНИИ ВУЛЬВОВАГИНАЛЬНОГО КАНДИДОЗ А
Новикова Л.А., Бахметьева Т.М. ………………………………………………………………………………………………………………………………441
СЕБОРЕЙНЫЙ ДЕРМАТИТ – КАК МАЛАССЕЗИОЗ
Новоселов А.В., Богадельникова А.Е., Новоселов В.С. …………………………………………………………………………………………….442
ВЛИЯНИЕ МИКОТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ НА ПСОРИАТИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС
Павлова О.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………442
КЛИНИКО-эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ МИКРОСПОРИИ В Г.МИНСКЕ В 2003–2007 ГОДАХ
Панкратов В.Г., Панкратов О.В., Рабчинская О.М., Новиченко Д.Д. ………………………………………………………………………….443
ОПЫТ ЛЕЧЕНИЯ МИКРОСПОРИИ ПРЕПАР АТАМИ ТЕРБИНАФИНА
Панкратов В.Г., Панкратов О.В., Рабчинская О.М., Римко Е.Г., Страпко Е.В., Олецкая Н.э. ………………………………………444
МИКОНОРМ В ТЕР АПИИ МИКОЗОВ
Рукавишникова В.М. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………….445
СТРУКТУР А ОНИХОДИСТРОФИЙ, ОШИБОЧНО Р АССМАТРИВАЕМЫХ КАК ОНИХОМИКОЗ
Рукавишникова В.М. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………….446
К ВОПРОСУ О ВУЛЬВОВАГИНАЛЬНОМ КАНДИДОЗЕ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ
Саркисян э.Ю. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..447
РАЗР АБОТКА МЕТОДИКИ ВЫЯВЛЕНИЯ ДНК ASpERGILLUS Spp . НА ОСНОВЕ ПЦР С ГИБРИДИЗАЦИОННО-
ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ ПРОДУКТОВ АМПЛИФИКАЦИИ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕН И
Сафонова А.П., Шипулина О.Ю., Куевда Д.А., Шипулин Г.А. ………………………………………………………………………………….448
АКТИВАЦИЯ Т-ХЕЛПЕРОВ 2 И ПОВЫШЕНИЕ IGE У БОЛЬНЫХ ОНИХОМИКОЗОМ,
ВЫЗВАННОГО ГРИБОМ TRYCHOpHYTON RUBRUM
Свирщевская Е.В., Айрапетян Н.Р ., Матушевская Е.В., Карпенкова С.В., Лещенко В.М. …………………………………………..449
ДИСТАНЦИОННЫЕ МЕТОДЫ ПРЕПОДАВАНИЯ В МЕДИЦИНСКОЙ МИКОЛОГИИ: ОПЫТ РОССИИ
Сергеев Ю.В., Сергеев А.Ю. ……………………………………………………………………………………………………………………………………449
СООТВЕТСТВИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ПЦР-ТЕСТА И РЕГЛАМЕНТИРОВАННЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ПРИ ОНИХОМИКОЗЕ
Сергеев В.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..450
НОВЫЙ МЕТОД ПЦР В ОЦЕНКЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ЛЕЧЕНИЯ ОНИХОМИКОЗА
Сергеев В.Ю. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..451
ЗАВИСИМОСТЬ э ФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ МИКРОСПОРИЕЙ ОТ
СОПУТСТВУЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И СУТОЧНОЙ ДОЗЫ ПРЕПАР АТА
Степанова Ж.В., Оленич И.В., Климова И.Я. ……………………………………………………………………………………………………………452
К ВОПРОСУ О НАРУЖНОЙ ТЕР АПИИ И ПРОФИЛАКТИКИ МИКОЗОВ
Тарасенко Г.Н., Патронов И.В., Кузьмина Ю.В., Тарасенко Ю.Г. ………………………………………………………………………………. 452
РЕДКАЯ ЛОКАЛИЗАЦИЯ ОТРУБЕВИДНОГО ЛИШАЯ НА ВОЛОСИСТОЙ ЧАСТИ ГОЛОВЫ У БОЛЬНОГО МИКРОСПОРИЕЙ
Терегулова Г.А., Жукова И.Ю., Магазова Р .А., Левченко Т.С., Копусова С.И., Гумерова И.Р ……………………………………….453
СЛУЧАЙ СЕМЕЙНОЙ МИКРОСПОРИИ
Терегулова Г.А., Жукова И.Ю., Гафаров М.М., Левченко Т.С., Магазова Р .А., Корытова Е.Н. ……………………………………..454
ИСКУССТВЕННЫЕ НОГТИ КАК ПРИЧИНА ПАТОЛОГИИ НОГТЕЙ
Титугина А.Ю., Хабирова Р .Х., Дукович Е.В., Табашникова А.И. …………………………………………………………………………….. 454
МОРФОЛОГИЯ МИКОТИЧЕСКИХ ПОР АЖЕНИЙ КОЖИ НА ФОНЕ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА
Тухватуллина З.Г, Рахимов С.В., Сиротина Н.В., Тухватуллина э.Ф. …………………………………………………………………………455
МИКОТИЧЕСКАЯ КОЛОНИЗАЦИЯ ПРИ ОСЛОЖНЕННЫХ ФОРМАХ ПСОРИАЗА: ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ
Файзуллина Е.В., Файзуллин В.А., Бригаднова А.Ю., Глушко Н.И. …………………………………………………………………………..456
КОМПЛЕКСНОЕ ЛЕЧЕНИЕ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ, ОСЛОЖНЕННОЙ КАНДИДОЗНЫМ ВУЛЬВОВАГИНИТОМ. ПРОФИЛАКТИКА ЦЕРВИКАЛЬНЫХ НЕОПЛАЗИЙ
Файзуллина Е.В., Файзуллин В.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………457
МЕДИЦИНСКИЕ ПЕРИОДИЧЕСКИЕ ОСМОТРЫ, КАК ОДНО ИЗ ВАЖНЕЙШИХ ЗВЕНЬЕВ ПРОФИЛАКТИКИ ОНИХОМИКОЗОВ
Фандий В. А., Мамон А. А., Привалов В.С. ………………………………………………………………………………………………………………457
К ВОПРОСУ эПИДЕМИОЛОГИИ МИКРОСПОРИИ ВОЛОСИСТОЙ ЧАСТИ ГОЛОВЫ
Фахретдинова Х.С., Абсалямова Н.Н., Левченко Т.С., Бурханова Н.Р . ……………………………………………………………………….458
АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ МИКРОСПОРИЕЙ Р АЗЛИЧНЫМИ АНТИФУНГАЛЬНЫМИ ПРЕПАР АТАМ И
Фахретдинова Х.С., Абсалямова Н.Н., Левченко Т.С., Бурханова Н.Р . ……………………………………………………………………….458
Содержание 27
АППАР АТ «АЛОМ» В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ МИКОЗОВ И ОНИХОДИСТРОФИЙ СТОП И КИСТЕЙ
Федосеев А. С. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..459
АНАЛИЗ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ И ОПЫТ ЛЕЧЕНИЯ МИКОЗОВ СТОП И КИСТЕЙ В КЛИНИЧЕСКОМ САНАТОРИИ «БАРВИХА »
Федосеев А.С. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………460
СИФИЛИС, КАНДИДОЗ ВУЛЬВЫ И ВАГИНЫ У СОЦИАЛЬНО-ДЕЗАДАПТИРОВАННЫХ ЖЕНЩИН
Хейдар С.А., Кулешов А.Н. ……………………………………………………………………………………………………………………………………..461
ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА Р АСПОРСТР АНЕНИЕ МИКОТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ У СОЦИАЛЬНО-
ДЕЗАДАПТИРОВАННЫХ ЛИЦ, БОЛЬНЫХ СИФИЛИСОМ И ИНФЕКЦИЯМИ, ПЕРЕДАВАЕМЫЕ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ
Хейдар С.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….462
эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ МИКОЗОВ В РЕСПУБЛИКЕ ТАТАРСТАН И НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ИХ ЛЕЧЕНИЮ
Хисматуллина И.М., Лисовская С.А., Никитина Л.Е., Абдрахманов Р .М. ………………………………………………………………….. 463
КЛИНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ НАГНОИТЕЛЬНЫХ ФОРМ ЗООАНТРОПОНОЗНОЙ ТРИХОФИТИИ
Хисматуллина З.Р ., Алиева Г.А., Гафаров М.М., Мухамадеева О.Р . …………………………………………………………………………… 464
ДИАГНОСТИКА ОНИХОМИКОЗОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПЦР
Цыкин А.А., Иванов О.Л., Ломоносов К.М. …………………………………………………………………………………………………………….464
КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕР АПИЯ ОНИХОМИКОЗОВ С ПРИМЕНЕНИЕМ АППАР АТНОЙ ОБР АБОТКИ НОГТЕВЫХ ПЛАСТИН.
Цыкин А.А., Иванов О.Л., Ломоносов К.М. …………………………………………………………………………………………………………….465
ЛЕЧЕНИЕ ОСТРОГО И РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО КАНДИДОЗНОГО ВУЛЬВОВАГИНИТА ПРЕПАР АТОМ «МИКОФЛЮКАН»
Шамина Г.Е., Родионов В.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………….466
«ИТР АЗОЛ» В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕР АПИИ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ХЛАМИДИОЗА И МИКОПЛАЗМОЗА
Шамина Г.Е., Родионов В.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………….466
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К ПРОТИВОГРИБКОВЫМ ПРЕПАР АТАМ ГРИБОВ РОДА КАНДИДА, ВЫЗЫВАЮЩИХ КАНДИДОЗ КОЖИ И НОГТЕЙ
Шебашова Н.В., Клеменова И.А., Мишина Ю.В. ……………………………………………………………………………………………………..468
ПРИМЕНЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ В ПАРОДОНТОЛОГИИ
Щербо С.Н., Садовский В.В., Сергеев А.Ю., Чониашвили Д.З., Дё Д.А., Щербо Д.С., Сергеев Ю.В. …………………………469
ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ КУЛЬТУР ГРИБОВ ВИДОВ TRICHOpHYTON vERRUCOSUM И TRICHOpHYTON MENTAGROpHYTES
МЕТОДОМ ИХ ВЫСЕВА НА ВАРИАНТЫ СУСЛОАГАР А С ДОБАВКАМИ Р АСТВОРОВ УГЛЕВОДОВ
эмнис-Хома О.О. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………469
РЕЗУЛЬТАТЫ ВИДОВОГО МОНИТОРИНГА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ МИКОЗОВ В МОНГОЛИИ С 1964 ПО 2006 ГО Д
энхтур Я., Уранчимэг Ц., Намжилмаа Ш., Лыкова С.Г. …………………………………………………………………………………………… 470
СПЕКТР ВОЗБУДИТЕЛЕЙ И ВИДОВАЯ ХАР АКТЕРИСТИКА ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА КАНДИДА ПРИ ОНИХОМИКОЗАХ В ПРИМОРСКОМ КР АЕ
Юцковский А.Д. , Кулагина Л.М., Паулов О.И. ………………………………………………………………………………………………………..471
ГРИБЫ РОДА malaSSezia В эТИОЛОГИИ УГРЕВОЙ БОЛЕЗНИ
Юцковский А.Д., Рахманова С.Н., Петрова Л.И………………………………………………………………………………………………………..472
ПРИМЕНЕНИЕ КРЕМА ТЕРБИНАФИНА В ЛЕЧЕНИИ КЕР АТОМИКОЗОВ
Якубович А.И., Корепанов А.Р ., Чуприн А.Е. ……………………………………………………………………………………………………………473
Раздел 19
ОППОРТ
уНИСТИЧЕСКИЕ И ИНВАзИВНыЕ МИКОзы.
МИКО
зы В ОНКОЛОГИИ, ПЕДИАТРИИ И СПЕцИАЛИзИРОВАННОй КЛИНИКЕ
КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ И МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАР АКТЕРИСТИКА
ДЕРМАТОРЕСПИР АТОРНОГО СИНДРОМА ПРИ ПЕЦИЛОМИКОЗЕ
Ахунов В.М., Ахунова А.М ……………………………………………………………………………………………………………………………………..475
ПЕЦИЛОМИКОЗ. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ
Ахунова А.М. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………475
АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ У ДЕТЕЙ, АССОЦИИРОВАННЫЕ С ГРИБКОВОЙ СЕНСИБИЛИЗАЦИЕЙ
Балаболкин И.И., Ибоян А.С., Рылеева И.В., Тюменцева Е.С., Горюнов А.В. …………………………………………………………….476
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ АКТИНОЛИЗАТА ПРИ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ АКТИНОМИКОЗОМ СЛЕЗООТВОДЯЩИХ ПУТЕЙ
Белоглазов В.Г., Атькова Е.Л., Сидорова М.В……………………………………………………………………………………………………………477
ОТОМИКОЗЫ У ПАЦИЕНТОВ: СИСТЕМА ОРГАНИЗАЦИИ ДИАГНОСТИКИ, ЛЕЧЕНИЯ И РЕАБИЛИТАЦИИ
Бунакова Л.К., Егорова В.В., Файзуллина Е.В. ………………………………………………………………………………………………………….478
Содержание 28
ДИАГНОСТИКА МУКОРМИКОЗА В ПР АКТИКЕ ВР А ЧА ОТОРИНОЛАРИНГОЛОГ А
Буркутбаева Т.Н., Нурмагамбетова А.С., Григоренко В.И., Плотникова А.В. ……………………………………………………………..479
ВНУТРИБОЛЬНИЧНЫЕ МИКОЗЫ – АКТУ АЛЬНАЯ ПРОБЛЕМА
С.А.Бурова ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………480
ОСОБЕННОСТИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ ГЛУБОКИМИ МИКОЗАМИ НА ФОНЕ ТЯЖЕЛОЙ
СОПУТСТВУЮЩЕЙ ПАТОЛОГИИ АКТИНОМИКОЗ ПОЛОВОЙ СИСТЕМЫ ЖЕНЩИН
Бурова С.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..481
ОСНОВНЫЕ НАПР АВЛЕНИЯ В БОРЬБЕ С ВНУТРИБОЛЬНИЧНОЙ ГРИБКОВОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Бурова С.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..482
ЛЕЧЕНИЕ ДИССЕМИНИРОВАННОГО КАНДИДОЗА С ПОР АЖЕНИЕМ СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК
Бурова С.А ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………483
ОТО-РИНО-КОНЬЮНКТИВАЛЬНЫЙ СИМПТОМОКОМПЛЕКС ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ РИНОСИНУСИТАХ АССОЦИИРОВАННЫХ ПЕЦИЛО МИКОЗНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Бустонов М.О., Умаров У .У ., Кодири Д.А., Тагаймуродов Ф.Т., Лолаев Н.Г. ………………………………………………………………. 484
МАКРОФАГ И ИМУННЫЕ МЕХАНИЗМЫ ПРИ ГРИБКОВЫХ РИНОСИНУСИТАХ
Бустонов М.О., Умаров У .У ., Кодири Д.А., Тагаймуродов Ф.Т., Лолаев Н.Г. ………………………………………………………………. 485
ИЗУЧЕНИЕ IN vITRO РОЛИ ФАКТОРОВ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА В
ЗАЩИТЕ ОТ ИНФЕКЦИИ, ВЫЗВАННОЙ candida albicanS
Ганковская О.А., Блинкова Л.П., Лавров В.Ф. …………………………………………………………………………………………………………..485
ОППОРТУНИСТИЧЕСКИЕ МИКОЗЫ ПРИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ МОЧЕВЫВОДЯЩИХ ПУТЕЙ
Гасанова Т.А., Липский В.С., Хачатуров К.А.2 …………………………………………………………………………………………………………486
ОСОБЕННОСТИ ГРИБКОВОЙ ФЛОРЫ ПРИ ОТОМИКОЗАХ
Глушко Н.И., Лисовская С.А., Халдеева Е.В, Сайфиева О.В. …………………………………………………………………………………….487
ОСОБЕНОСТИ КАНДИДОЗА ПИЩЕВОДА У БОЛЬНЫХ, ПОЛУЧАЮЩИХ СИСТЕМНЫЕ ГЛЮКОКОРТИКОСТЕРОИДЫ
Гудкова Ю.И., Шевяков М.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………..488
эКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ КАНДИДОЗНОГО МЕНИНГОэНЦЕФАЛИТА
Гусева Е.В., Надеев А.П., Шкурупий В.А. ………………………………………………………………………………………………………………..488
СТРУКТУР А ГРИБКОВЫХ ПОР АЖЕНИЙ ЦНС У ПАЦИЕНТОВ С ВИЧ-
ИНФЕКЦИЕЙ ПО МАТЕРИАЛАМ ГОСПИТАЛЯ Р ОССИЙСКОГО КР АСНОГО
КРЕСТА ИМ. ДЕДЖ. Б АЛЧИ В Г . АДДИС-АБЕБА, эФИОПИЯ
Дегтярь Л.Д. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………489
СР АВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНОЙ И ГРИБКОВОЙ МИКРОФЛОРЫ ОКОЛОНОСОВЫХ ПАЗУХ И КИШЕЧНИКА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ СИНУСИТОМ
Заболотный Д.И., Волосевич Л.И., Зарицкая И.С. …………………………………………………………………………………………………….490
ЧАСТОТА ВЫСЕВАЕМОСТИ ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ РОДА CANDIDA ОТ ЧАСТО БОЛЕЮЩИХ ДЕТЕЙ ГОРОДА КАР АГАНДЫ
Захарова Е.А., Азизов И.С. ………………………………………………………………………………………………………………………………………490
РОЛЬ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ ПИЕЛОНЕФРИТОМ, АССОЦИИРОВАННЫМ ГРИБАМИ РОДА CANDIDA
Зиатдинова Н.В., Агафонова Е.В., Дзамукова Н.Н. ……………………………………………………………………………………………………491
РОЛЬ МИКОФЛОРЫ В Р АЗВИТИИ НАРУЖНОГО ОТИТА
Ивченко О.В. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..492
КЛИНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ МИКОТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ У ПАЦИЕНТОВ С НАРУШЕНИЯМИ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА
Кондратьева Ю.С. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………492
ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ КАНДИДОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ У БОЛЬНЫХ СО СМЕШАННЫМИ УРОГЕНИТАЛЬНЫМИ ИНФЕКЦИЯМИ
Крывовязый И.В., Якубович А.И., Корепанов А.Р ., Чуприн А.Е. ……………………………………………………………………………….493
ЛАБОР АТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГРИБКОВЫХ ИНФЕКЦИЙ ЛЕГКИХ ВО ФТИЗИАТРИЧЕСКОЙ КЛИНИКЕ
Кулько А.Б., Исаева Е.Л. …………………………………………………………………………………………………………………………………………494
ПОЛИКОМПОНЕНТНАЯ ВАКЦИНА ДЛЯ ПРОФИЛАТИКИ И ИММУНОТЕР АПИИ ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ОППОРТУНИСТИЧЕСКИМИ БАКТЕРИЯМИ И ГРИБАМИ
ОСОБЕННОСТИ МИКРОФЛОРЫ ГОЛОСОВЫХ ПРОТЕЗОВ
Новожилова Е.Н., Ольшанский В.О. ………………………………………………………………………………………………………………………..495
ПРОБЛЕМА ГРИБКОВОЙ ИНФЕКЦИИ У БОЛЬНЫХ,
ПОДВЕРГШИХ
СЯ ПР АВОСТОРОННЕЙ ГЕМИКОЛэКТОМИИ
Палий И.Г., Заика С.В., Дроненко В.Г. ……………………………………………………………………………………………………………………..496
Содержание 29
ВЛИЯНИЕ Р АСПРОСТР АНЕННОСТИ ГРИБКОВОГО ПОР АЖЕНИЯ НА ОСНОВНЫЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ
И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ У ПАЦИЕНТОВ С ТЕРМИНАЛЬНОЙ СТАДИЕЙ ХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ, ПОЛУЧАЮЩИХ ГЕМОДИАЛИЗ
Пушкин А.В., Полякова И.Я., Мордик А.И. ……………………………………………………………………………………………………………… 496
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДИАГНОСТИКА ПНЕВМОЦИСТНОЙ ПНЕВМОНИИ У ВИЧ–ИНФИЦИРОВАННЫХ БОЛЬНЫХ С ЛЕГОЧНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ
Сафонова А.П., Шипулина О.Ю., Шахгильдян В.И., Пиксасова О.В., Куевда Д.А. …………………………………………………….497
СР АВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МИКРОБИОТИЧЕСКОГО ПЕЙЗАЖА ЗЕВА И НОСА У БОЛЬНЫХ АТОПИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ И МИКРОБНОЙ эКЗЕМОЙ
Соколова Т.В., Кливитская Н.А., Дьячек И.А., Айзикович Л.А. …………………………………………………………………………………498
МИКРОБИОТИЧЕСКИЙ ПЕЙЗАЖ ЗЕВА И НОСА У БОЛЬНЫХ АТОПИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ
Соколова Т.В., Кливитская Н.А., Дьячек И.А., Айзикович Л.А. …………………………………………………………………………………499
НОРМАТИВЫ МЕНЕДЖМЕНТА КА ЧЕСТВА МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ ПРИ ХИМИОТЕР АПИИ ГРИБКОВОЙ ИНФЕКЦИ И
Старченко А.А., Третьякова Е.Н., Комарец С.А., Кочергина Г.А., Курило И.Н., Алешин П.И. …………………………………….500
СР АВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ Р АЗЛИЧНЫХ СХЕМ ЛЕЧЕНИЯ АКТИНОМИКОЗА
Федюкина М.Ю. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..501
МАТЬ КАК ПЕРВИЧНЫЙ ИСТОЧНИК КОЛОНИЗАЦИИ НОВОРОЖДЕННОГО РЕБЕНКА ГРИБАМИ РОДА CANDIDA
Фролова Н.А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..502
РОЛЬ Р АЗЛИЧНЫХ ТРИГГЕРНЫХ ФАКТОРОВ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ С ГРИБКОВОЙ СЕНСИБИЛИЗАЦИЕЙ.
Царев С.В. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….503
ДОЛЯ И СПЕКТР ГРИБОВ В ВЕДУЩЕЙ МИКРОБИОТЕ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ ПАЦИЕНТОВ ПОЛИКЛИНИЧЕСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РЦПБ СПИД ГОРОДА КАЗАНИ
Шахбазова Е.Н., Котляр Е.Ю., Жадько Е.Н., Захарова О.С., Романенко О.М., Килина Л.Н. ………………………………………..504
ХРОНИЧЕСКИЙ ТЕРМИЧЕСКИЙ ОЖОГ ПИЩЕВОДА КАК ФАКТОР РИСКА КАНДИДОЗНОГО э ЗОФАГИТА
Шевяков М.А., Митрофанов В.С. …………………………………………………………………………………………………………………………….505
ОБЪЕМ ОБСЛЕДОВАНИЯ И ВЫБОР АНТИФУНГАЛЬНОГО ПРЕПАР АТА ПРИ КАНДИДОЗЕ ПИЩЕВОДА
Шевяков М.А., Авалуева Е.Б. …………………………………………………………………………………………………………………………………..505
Раздел 20
МОРФОЛОГИЯ
, МОРФОГЕНЕз, ОНТОГЕНЕз И у ЛьТРАСТРуКТуРА ГРИбОВ
ФЕРМЕНТЫ В ПРОЦЕССЕ ПЛОДООБР АЗОВАНИЯ ВЫСШИХ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ
Гарибова Л.В., Завьялова Л.А., Инсарова И.Д. ………………………………………………………………………………………………………….507
КОНВЕРГЕНЦИЯ ПРИЗНАКОВ ГИМЕНОФОРОВ В МОРФОГЕНЕЗЕ ПЛОДОВЫХ ТЕЛ ШЛЯПОЧНЫХ ГРИБОВ
Горовой Л.Ф. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..508
ПОЛИВАРИАНТНОСТЬ ОНТОГЕНЕЗА МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ
Громозова Е.Н. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..508
ОСОБЕННОСТИ РОСТА ШТАММОВ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ НА
ПЛОТНЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ Р АЗЛИЧНОГО СОСТАВА
Ильина Г.В., Лыков Ю.С. ………………………………………………………………………………………………………………………………………..509
РОСТ ШТАММОВ Ganoderma aPP lana Tum (pERS.) pAT . И G.lucidum (CUR T .) p. kARST В КУЛЬТУР Е
Круподерова т.А., Бисько н.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………….510
МИКРОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ КУЛЬТУР cordYcePS miliT ariS (I.:fR.) LINk
И cordYcePS SinenSiS (BERk.) SACC. LINk. (aScomYcoT a) В ЧИСТОЙ КУЛЬТУР Е
Михайлова О.Б., Поединок Н.Л., Бухало А.С., Бисько Н.А., Бабицкая В.Г., Щерба В.В., Пучкова Т.А. ……………………….511
ВЛИЯНИЕ ИОНОВ МЕДИ НА МОРФО ЛОГИЮ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ
ОСОБЕННО
СТИ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ГРИБО В
Олишевская С.В., Чепчак Т.П., Жук Е.А. ………………………………………………………………………………………………………………….512
ЦИТОЛОГИЯ Р АЗНОВОЗР АСТНОГО ПОВЕРХНОСТНО Р АСТУЩЕГО И ГЛУБИННОГО МИЦЕЛИЯ Podo
SPora PauciSeT a (СES.) TRA vERSO
Смолянюк Е.В., Камзолкина О.В. …………………………………………………………………………………………………………………………….513
ОСОБЕННОСТИ МЕЙОЗА У ШАМПИНЬОНА ДВУСПОРОВОГО
Спангенберг В.Е., Мажейка И.С., Коломиец О.Л. ……………………………………………………………………………………………………..514
УЛЬТР АСТРУКТУР А КОНИДИОГЕННОГО АППАР АТА aSPerGilluS TerreuS THOM
Степанова А. А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….514
МОРФОГЕНЕЗ ВИДОВ РОДА aSPerGilluS ПО ДАННЫМ э ЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ
Степанова А.А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..515
Содержание 30
Раздел 21
ЛЕКАРСТВА
Из ГРИбОВ
ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ СВОЙСТВА МАКРО- И МИКРОМИЦЕТОВ СРЕДНЕЙ СИБИР И
Громовых Т.И., Ковалева Г.К., Садыкова В.С., Гаврилова А.Г. …………………………………………………………………………………..517
ВЫСШИЕ БАЗИДИАЛЬНЫЕ ГРИБЫ – ПРОДУЦЕНТЫ АНТИВИРУСНЫХ СОЕДИНЕНИЙ
Разумов И.А., Казачинская Е.И., Пучкова Л.И., Козлова Н.С., Винокурова А.В.,
Горбунова И.А., Михайловская И.Н., Локтев В.Б., Теплякова Т.В. …………………………………………………………………………….518
ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ МЕЛАНИН-ГЛЮКАНОВОГО КОМПЛЕКСА ИЗ ТРУТОВЫХ ГРИБОВ
Сенюк О.Ф., Горовой Л.Ф., Паламар Л.А., Ковалев В.А., Круль Н.И., Рытик П.Г., Кучеров И.И. ………………………………..518
АНТИКОАГУЛЯНТНЫЕ СВОЙСТВА ГРИБНЫХ ПРОТЕИНАЗ
Серебрякова Т.Н., Шаркова Т.С., Максимова Р .А., Цыманович С.Т., Подорольская Л.В. …………………………………………….519
ОЦЕНКА БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ В КА ЧЕСТВЕ ПРОДУЦЕНТОВ АНТИБИОТИКОВ
Тихонова О.В., Ефременкова О.В., Катруха Г.С. ……………………………………………………………………………………………………….520
ОЦЕНКА БИОСИНТЕТИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА aSPerGilluS P arVuluS SMITH
Цыганенко Е.С. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….520
Раздел 22
ЛИ
хЕНИзИРОВАННыЕ И ЛИхЕНОФИЛьНыЕ ГРИбы
СОВРЕМЕННАЯ ДИНАМИКА ВИДОВОГО СОСТАВА эПИФИТНОЙ ЛИХЕНОБИОТЫ Г. МОСКВЫ
Бязров Л.Г. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………523
СОДЕРЖАНИЕ ФОТОСИНТЕТИЧЕСКИХ ПИГМЕНТОВ В ТАЛЛОМАХ ЛИШАЙНИКА HYPoGYmnia
PHYSodeS (L.) NYL. В ЕСТЕСТВЕННЫХ И АНТРОПОГЕННО-НАРУШЕННЫХ МЕСТООБИТАНИЯ Х
Вержбицкая Е.В., Андросова В.И. …………………………………………………………………………………………………………………………..524
ВЛИЯНИЕ ФОРТИФИКАЦИИ НА БИОР АЗНООБР АЗИЕ ЛИХЕНОБИОТЫ В ОКРЕСТНОСТЯХ Г. ГРОДНО.
Голубков В.В., Касперец А. А., Островская О. В., Свирид ов Д. А. …………………………………………………………………………… 525
ВОПРОСЫ ФИЛОГЕНИИ И СИСТЕМАТИКИ ЛИШАЙНИКОВ СЕМЕЙСТВА umbilicariaceae РОССИ И
Давыдов Е. А. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….525
К ФЛОРЕ ЛИШАЙНИКОВ РЯЗАНСКОЙ ОБЛАСТИ
Жданов И.С., Волоснова Л.Ф. ………………………………………………………………………………………………………………………………….526
ЛИХЕНОФИЛЬНЫЕ ГРИБЫ АРКТИКИ: СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ИССЛЕДОВАНИ Й
Журбенко М. П. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….527
МЕСТОНАХОЖДЕНИЯ LOBARIA Pulmonaria (L.) HOffM НА ТЕРРИТОРИИ ПСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ
Истомина Н.Б. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………528
ЛИХЕНОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ УЧАСТКОВ ТИПА «СНИЖЕННЫЕ АЛЬПЫ»
НА ТЕРРИТОРИИ БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ
Конорева Л. А. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………528
К ИЗУЧЕНИЮ ЗАВИСИМОСТИ ЛИХЕНОФЛОРИСТИЧЕСКОГО СОСТАВА ОТ УСЛОВИЙ БИОТОПА В ЛЕСНЫХ СООБЩЕСТВАХ СТЕПНОЙ ЗОНЫ (НА ПРИМЕРЕ КР АСНОСАМАРСКОГО ЛЕСНОГО МАССИВА)
Корчиков Е.С. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….529
ЛИХЕНОБИОТА УСАДЕБНЫХ ПАРКОВ ПСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ
Лихачева О.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….530
МОНТАННЫЙ ГЕОэ ЛЕМЕНТ В ЛИХЕНОФЛОРЕ СТЕПНОЙ ЗОНЫ
ЮЖНОГО
УР АЛА И ПРИЛЕГАЮЩИХ ТЕРРИТОРИ Й
Меркулова О.С. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….531
НОВЫЕ СВЕДЕНИЯ О ЛИХЕНОБИОТЕ Р ЯЗАНСКОЙ ОБЛАСТ И
Мучник Е.э., Лосева Е.И. ………………………………………………………………………………………………………………………………………..531
МОНИТОРИНГ СОСТОЯНИЯ РЕДКИХ ВИДОВ ЛИШАЙНИКОВ ЮЖНОЙ СИБИРИ (ЗАПАДНЫЙ САЯН)
Отнюкова Т.Н., Степанов Н.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………….532
НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ СТЕПНОЙ ЛИХНЕОБИОТЫ РЕСПУБЛИКИ КАЛМЫКИЯ
Очирова Н.Н. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..533
ПЕРВЫЕ ДАННЫЕ О КОНЦЕНТР АЦИИ э ЛЕМЕНТОВ В СЛОЕВИЩАХ
эПИФИТНОГО ЛИШАЙНИКА НА ДЕРЕВЬЯХ ЦЕНТР А МОСКВЫ
Пельгунова Л.А., Бязров Л.Г. ……………………………………………………………………………………………………………………………………534
Содержание 31
эПИФИТНЫЕ ЛИШАЙНИКИ НОРСКОГО ЗАПОВЕДНИКА
Пчелкин А.В. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….534
эКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ЛИХЕНОБИОТЫ МАЛЫХ ОСТРОВОВ
ЗАЛИВА ПЕТР А ВЕЛИКОГО В ЯПОНСКОМ МОРЕ
Родникова И.М. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….536
ИЗУЧЕНИЕ ВИДОВОГО СОСТАВА эПИФИТНЫХ ЛИШАЙНИКОВ И КИСЛОТНО-ЩЕЛОЧНЫХ СВОЙСТВ КОРЫ ИВЫ ШВЕРИНА (НА ПРИМЕРЕ ПРИМОРСКГОГО КР АЯ)
Скирина И.Ф., Скирин Ф.В………………………………………………………………………………………………………………………………………536
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ СВЕДЕНИЯ О ЛИШАЙНИКАХ СИХОТэ-АЛИНСКОГО ЗАПОВЕДНИКА, ПРИМОРСКОГО КР АЯ И ЮГА ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА РОССИИ
Скирина И.Ф. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………537
РОЛЬ БИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ СРЕДЫ В ФОРМИРОВАНИИ ПРИБРЕЖНЫХ ЛИШАЙНИКОВЫХ ГРУППИРОВОК
Сонина А.В., Фадеева М.А. ……………………………………………………………………………………………………………………………………..53 8
ПРИМЕНЕНИЕ КОНЦЕПЦИИ ДИСКРЕТНОГО ОПИСАНИЯ ОНТОГЕНЕЗА Р АСТЕНИЙ К ЛИШАЙНИКАМ
Суетина Ю.Г. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..539
ВЛИЯНИЕ ЛИШАЙНИКА cladonia STellariS НА МИКРОМИЦЕТЫ
ОЛИГОТРОФНЫХ БОЛОТ САЛЫМО-ЮГАНСКОГО МЕЖДУРЕЧЬЯ
Толпышева Т.Ю. ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………540
ЛИХЕНИЗИРОВАННЫЕ ПРЕДСТАВИТЕЛИ СЕМЕЙСТВ cla Variaceae
И
TricHoloma Taceae (AGARICALES) В Р ОССИ И
Урбанавичене И. Н…………………………………………………………………………………………………………………………………………………..540
ТАКСОНОМИЧЕСКОЕ Р АЗНООБР АЗИЕ ЛИХЕНОБИОТЫ Р ОССИИ В СВЕТЕ
СОВРЕМЕННЫХ ДОСТИЖЕНИЙ МОЛЕКУЛЯРНОЙ СИСТЕМАТИКИ
Урбанавичюс Г. П. …………………………………………………………………………………………………………………………………………………..541
ЛИШАЙНИКИ СРЕДНЕТАЕЖНЫХ ЛЕСОВ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО ПРЕДУР АЛЬЯ
Шаяхметова З.М., Атеева Ю.А., Шкараба Е.М………………………………………………………………………………………………………….542
Именной указатель ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….543
Во второй половине прошлого столетия Россия
являлась крупнейшим производителем антибиотиков
в мире, не только обеспечивая собственные потреб-ности в лекарствах, но и помогая организовать био-те
хнологические производства других странах. эти
успехи определялись существованием серьезной на-учной школы, которая в настоящее время находится в стадии восстановления. Следует признать, что ана-лиз современного состояния дел выявляет серьезные трудности в организации биотехнологической науки и производства, связанных, прежде всего с недостатком опытных кадров для целей эффективной конкуренции с множеством иностранных фирм. Производство ле-карств в настоящее время ведется либо там, где име-ется давняя непрерывная производственная традиция, либо в тех государствах, где наличествует дешевая рабочая сила. Иногда осуществляется симбиоз этих требований, осуществляемый путем организации филиалов и дополнительных производств. В России наиболее рациональным выходом из создавшегося положения представляется поиск и разработка ориги-нальных лекарственных препаратов с использовани-ем оставшегося в стране научного потенциала. При этом следует исходить из того, что нахождение пре-паратов с принципиально новым спектром действия в процессе скрининга требует комплексной работы высококвалифицированных специалистов в разных областях биологии, медицины и химии. В настоящее время уже появляются отдельные предприниматели или государственные структуры, заинтересованные в производстве оригинальных отечественных лекарств. Поэтому особенно важен анализ основных мировых тенденций в производстве новых биологически ак-тивных веществ.
Исторически основой для создания глобального
направления в антимикробной химиотерапии явились грибные культуры. Краеугольным камнем явилось, несо
мненно, открытие пенициллина и затем – цефа-лоспорина. И в настоящее время грибные культуры ос-таются важнейшим источником антибиотиков. Распро-странение новых и рецессия существовавших ранее опасных инфекционных заболеваний, а также угроза биотерроризма настоятельно диктуют необходимость скрининга новых антибактериальных лекарств. Есть все основания полагать, что именно исследование при-родных и, в частности, грибных метаболитов должно способствовать получению лекарств, эффективных в отношении возбудителей с множественной резистен-тностью.
Значительная и вновь пионерская роль грибов от-
мечается и в получении биологически активных при-родных соединений (БАПС). Фактически внедрение в практику БАПС осуществилось после открытия им-муносупрессора циклоспорина и гиполипидемическо-го препарата ловастатина, продуцируемых грибными культурами. Следует ожидать, что именно в произ-водстве БАПС грибные культуры особенно перспек-тивны, поскольку, являясь эукариотами, они обладают системами регуляции, более близкими к системам ре-гуляции человека, чем, например, бактерии. Именно у них можно ожидать синтеза веществ, существенных для модификации функционирования важнейших систем организма человека. Отметим, что в течение последних лет число открываемых БАПС превыша-ет число новых антибиотиков. По данным Берди к 2005 г. общее число БАПС из грибов составило около 8600
– около 40 % БАПС из микроорганизмов. В пос-
ледующие годы тенденция только усиливалась, так что именно мет
аболиты грибов составляют более 50 % от
всех вновь открываемых БАПС. Перспективность это-го направления подчеркивается и тем, что исходя из геномных исследований почвенных образцов, следует, что многие микроорганизмы, включая грибные, пока просто не удается выделять и культивировать. В буду-щем такие культуры могут стать важным источником новых БАПС.Раздел 1
ПЛЕНАРНыЕ зАСЕДАНИЯ.
МЕМОРИАЛ
ьНыЕ СИМПОзИуМы
БИОТЕХНОЛОГИЯ МИКРОМИЦЕТОВ – РЕАЛЬНОСТЬ И ПЕРСПЕКТИВЫ
Бибикова М.В., Катлинский А.В.
ФГУП Государственный научный центр по антибиотикам,
Московская Медицинская Академия им И.М.Сеченова,
Москва
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 1 34
Вегетативная несовместимость (ВН) – широко рас-
пространенное среди грибов, оомицетов и миксомице-
тов явление, при котором анастомозы между гифами штаммов, гетероаллельных по определенным локусам (het-локусам), сопровождаются гибелью слившихся и прилегающих к ним клеток, что препятствует взаим-ному обмену ядрами и элементами цитоплазмы. ВН грибов имеет все признаки, позволяющие рассматри-вать ее как иммунную реакцию.
1. ВН есть форма узнавания и отторжения «чу-
жого», ибо чем больше у контактирующих штаммов гетероаллельных het-локусов, и, следовательно, чем
больше различия их геномов, тем сильнее реакция от-торж
ения. Отторжение чужого – одна из важнейших
иммунных функций организмов (например, реакции гистонесовместимости).
2. ВН сопровождается программированной гибе-
лью клеток апоптозом автолитического типа), которая является наиболее распространенной формой иммун-ного ответа у растений и животных.
3. Внутрипопуляционная вариабельность частот
аллелей het-генов подвержена позитивному дарвинов-
скому отбору, причем число несинонимических замен оснований ДНК в вариабельных участках генов пре-вышает число синонимических замен, что характерно для большинства генов иммунного ответа у растений, комплекса генов гистосовместимости млекопитаю-щих, поверхностных антигенов паразитов и вирусов.
Позитивный отбор, способствующий полиморфиз-
му генов несовместимости в природных популяциях, свидетельствуют о первичной функциональной роли ВН, по поводу которой высказано ряд гипотез. Каж-дая из них может выступать на первый план в той или иной экологической ситуации.
Ограничение гетерокариоза. Генеральная линия
эволюции грибов направлена в сторону специализа-ции, поэтому высокая приспособленность к опреде-ленным условиям жизни оказывается полезнее, чем адаптабельность, т.е. вариации, обусловленные гете-рокариозом и парасексуальным процессом.
Ограничение гетероплазмона (защита от вирус-
ной инфекции). В цитоплазме грибов обнаружено большое число автономно реплицирующихся эле-ментов: плазмид, вирусоподобных частиц и др. Их распространение в грибных популяциях возможно дв
умя путями: вертикальным – через споры от роди-
те
лей потомкам, и горизонтальным – через гифаль-
ные анастомозы. Защитой от вертикальной передачи служит половой процесс, ибо ВНК и РНК-содержа-щие плазмиды не попадают в мейоспоры, а защитой от
горизонтальной передачи – вегетативная несов-
местимость, так как через зону барража инфекция не передается или эффективность передачи сильно сн
ижается. Т. о. у мицелиальных грибов pCD при ВН
имеет такой же характер защиты от инфекции, как у растений и животных.
Защита занятой территории, обозначение границ
индивидуума. Благодаря ВН грибы активно расширя-ют
свою территорию, убивая соседей – конкурентов,
что очень напоминает территориальное поведение позвоночных животных.
Роль ВН в эволюции популяций
и видообразовании
Гены ВН играют в разделении популяций грибов
(особенно агамных дейтеромицетов) такую же роль, как гены ассортивного скрещивания у животных: они обеспечивают премейотическую изоляцию дивергиру-ющих субпопуляций. Поскольку ВН по своим функци-ям сходна с иммунной системой (узнавание «чужого» штамма и гибель слившихся клеток), можно считать, что у грибов впервые возникли механизмы симпатри-ческого видообразования, основанные на эксплуата-ции простейшей иммунной системы.ВЕГЕТАТИВНАЯ НЕСОВМЕСТИМОСТЬ ГРИБОВ –
ПРОСТЕЙШАЯ ФОРМА ИММУННОГО ОТВЕТА
Дьяков Ю.Т.
Московский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
РОЛЬ ГРИБОВ В Г ЛОБАЛЬНОМ КРУГОВОРОТЕ АЗОТА
Кураков А.В.
Московский Государственный Университет имени М.в. ломоносова,
Москва
Даются современные представления о возмож-
ности грибов осуществлять ключевые процессы круговорота азота (N) в биосфере (иммобилизации и формирование пула стабильных N-содержащих ор-ганических соединений в почвах, деполимеризации, аммонификации, нитрификации, восстановление окисленных форм азота в условиях гипоксии и анок-сии до закиси азота, молекулярного азота и аммония) и стимуляции азотфиксации. Рассматривается значе-ние взаимодействий грибов с другими организмами (бактериями, водорослями, растениями, животны-ми) в регулирование интенсивности этих процессов в конкретных экосистемах. Обобщены данные об особенностях трансформации азотных соединений
Пленарные заседания. Мемориальные симпозиумы 35
грибами разных систематических и эколого-трофи-
ческих групп.
Рассмотрена новая концепция, в которой акцент с
минерализации органических N-содержащих веществ до аммонийного азота как центрального звена цикла азота перенесен на деполимеризацию органических N-содержащих веществ до мономеров, катализируемой внеклеточными ферментами, как главную стадию, ли-митирующую образование биологически доступного азота. Приводятся последние достижения в изучение роли микоризы в азотном питании растений и цикле азота в экосистемах различных природных зон. Пока-зано, что возможность азотного питания растений за счет органического азота с помощью микоризы пред-ставляет принципиально важный механизм их адапта-ции к почвам бореальных и альпийских зон с высоким содержанием органического вещества и низкой актив-ностью минерализации. Такой способ получения азота устраняет их полную зависимость от минерализации и, соответственно, снижает довольно напряженную конкуренцию с микроорганизмами за аммоний и нит-раты.
Дается сопоставительная оценка участия грибов и
бактерий в процессах цикла азота в почвах. Делается вывод, что принципиальная роль бактерий не только в фиксации молекулярного азота, но и ускорение про-цессов трансформации азота, а функциональные воз-можности грибов позволяют им успешно удерживать и сохранять азот в почвах и экосистемах в целом. Об этом свидетельствуют наблюдения, что уменьшение соотношения грибной и бактериальной биомассы в почвах, при практически неизменной общей микро-бной биомассе, ведет к росту активности аммонифи-кации, нитрификации и газообразных потерь азота. Рассматривается важная роль грибов в транслокации азотных соединений в наземных экосистемах, что спо-собствует повышению эффективности их использова-ния и предотвращению потерь из системы.
В целом, участие грибов в цикле азота (иммобили-
зации, аммонификации и, в ряде ситуаций, нитрифи-кации) значимей в почвах природных экосистем, что обусловливает его более высокий уровень запасания и удержания в системе. Роль бактерий возрастает в поч-вах агроэкосистем, что интенсифицирует круговорот азота, и растения получают возможность ассимили-ровать минеральный форм азота в короткий период. Одновременно, более высокая удельная метаболичес-кая активность бактерий, особенно в окислении и вос-становлении азотных соединений, обусловливает уве-личение потерь азота из этих почв в форме нитратов, закиси азота и молекулярного азота. Анализ данных о распространение и физиолого-биохимических особен-ностях бактерий и грибов, позволяет констатировать, что антропогенные нарушения природных экосистем и интенсификация сельскохозяйственного производства (уничтожение естественного растительного покрова, обработка почв, применение пестицидов, удобрений) ведет к снижению роли грибов в круговороте основ-ных биофильных элементов в глобальном масштабе. эт
о, несомненно, является одной из причин возрас-
тания потока лабильных соединений азота из почв в сопряженные среды (атмосферу, водоемы, подпочвен-ные грунты) и их загрязнения, а также изменению кли-мата.
ВОСПОМИНАНИЯ О АРУТЮНЕ ХРИСТОФОРОВИЧЕ САРКИСОВЕ
Левитин М.М.
всероссийский институт защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
Мне посчастливилось познакомиться с Арутюном
Христофоровичем в 1989 г. В те годы на юге России происходили сильнейшие эпифитотии фузариоза ко-лоса зерновых культур. В связи с этим в лаборатории микологии и фитопатологии ВИЗР начали проводиться исследов
ания по токсигенным грибам – возбудителям
фузариоза. Мне были известны микологические и ми-котоксикологические работы А.Х.Саркисова по грибам рода f
usarium, и хотелось обсудить с ним ситуацию,
сложившуюся на зерновых культурах. Первое впечат-ление о
т встречи с ним – это исключительное обаяние
человека, интеллигентность, и, конечно, огромная эру-диция. Он с упоением рассказывал о своей первой эк-спедиции на Алтай, где была расшифрована причина смертельно опасного заболевания людей и животных, об обнаружении токсинообразующих видов грибов рода Fusarium, вызывающих алиментарно-токсичес-
кую алейкию, о работах, которые проводились под его руководством по токсигенным грибам. В них действи-тельно было много ценных сведений по фитопатоген-ным грибам, продуцирующих микотоксины. Под руко-водством А.Х.Саркисова была выполнена докторская диссертация Е.С.Квашиной по токсико-биологическим свойствам грибов рода Fusarium. Накопленный много-
летний опыт в изучении токсигенных грибов и мико-токсикозов позволил разработать ряд практических ре-комендаций не только для санитарно-гигиенических и ветеринарных лабораторий, но и для фитопатологов и службы защиты растений. Арутюн Христофорович вы-соко ценил специалистов в области защиты растений, считая, что они первыми должны ограничить распро-странение и развитие опасных для животных и челове-ка заболеваний. Он всегда отдавал должное микологам ВИЗР
– проф. Н.А.Наумову, у которого стажировался
в молодые годы, и проф. М.К.Хохрякову, с которым в экспедиции на Украине расшифровывал этиологию стахиботриотоксикоза. Встреча с А.Х.Саркисовым сыграла огромную роль в становлении исследований
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 1 36
по токсигенным грибам в стенах ВИЗР . Мы разверну-
ли работы по идентификации видового состава грибов рода Fusarium на зерновых культурах, стали изучать
биоэкологические особенности наиболее вредоносных и токсигенных видов, разрабатывать системы защиты зерновых культур от фузариозов. В дальнейшем сов-местно
сотрудниками ВНИИВСГэ начали проводить
микотоксикологические, а с иностранными коллега-ми
– молекулярные исследования отдельных видов.
Уже, будучи на пенсии, Арутюн Христофорович не пе-реставал интересоваться нашими работами. И когда бы я не приезжал в Москву, считал своим долгом посетить Арутюна Христофоровича и рассказать ему о наших делах. Он обладал обширными знаниями в различных областях сельскохозяйственной науки. Арутюн Хрис-тофорович болезненно переживал трудные для науки 90-е годы и очень надеялся на поддержку государства в развитии микотоксикологических исследований. С неиссякаемой активностью и настойчивостью он на всех уровнях доказывал необходимость расширения микотоксикологических работ, создания новых лабо-раторий, подготовки кадров микотоксикологов.
Незабываемая встреча была у нас в Санкт-Петер-
бурге в 1995 г. Арутюн Христофорович уже терял зре-ние, но приехал с сыном в Санкт-Петербург, чтобы еще раз соприкоснуться с достопримечательностями горо-да. Мы посетили Екатерининский дворец в Пушкине, а затем совершили прогулку по парку. И во время этой прогулки он читал нам стихи. И как читал! Читал с ар-тистизмом, с необычным вкусом и эмоциональностью. эт
о запомнилось мне на всю жизнь.
В общении с Арутюном Христофоровичем я понял
правоту его принципа: «учитель не тот, кто учит, а у кого учатся». Поэтому я в полной мере могу отнести Арутюна Христофоровича Саркисова к своим учите-лям.
ОППОРТУНИСТИЧЕСКИЕ МИЦЕЛИАЛЬНЫЕ ГРИБЫ:
ОСНОВНЫЕ
НАПР АВЛЕНИЯ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Марфенина О.Е.
Московский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
Изучение группы оппортунистических (потенци-
ально
патогенных) грибов – активно развиваемое на-
правление микологических исследований в последние десятилетия. К оппортунистическим относят грибы, которые преимущественно развиваются в природных условиях как сапротрофы, но одновременно способны в определенных ситуациях вызывать заболевания че-ловека и животных. Основные направления исследо-ваний
этих грибов в микологии настоящее время – их
инвентаризация, изучение молекулярно-генетических, физиолого-биохимических свойств, экологии, устой-чивости к антимикотикам и т.д. До сих пор законо-мерности, условия заражения оппортунистическими грибами человека окончательно не выяснены. По сов-ременным представлениям во взаимоотношениях че-ловек:гриб возможность заражения, в первую очередь, определяется состоянием человека, его иммунным статусом. Однако пока окончательно не ясны и многие вопросы относительно свойств грибов: а именно, об-ладают ли оппортунистические грибы, способные вы-звать заболевания, какими-либо особыми свойствами? каковы отличия сапротрофных и клинических штам-мов? в каких условиях может происходить наиболее активное развитие оппортунистических грибов? каков опасный для человека уровень их присутствия во вне-шней среде? могут ли штаммы, вызвавшие заболева-ния, сохраняться и развиваться в природе? и т.д.
Сейчас известно несколько сотен видов мицели-
альных оппортунистических грибов и их списки с каждым годом расширяются. Показано, что важней-шим фактором вирулентности оппортунистических грибов может быть наличие у них диморфизма, т.е. способности развиваться как в мицелиальной, так и в дрожжевой форме.
У становлено, что способность оппортунистических
грибов развиваться как патогены человека может быть многофакторна, так как обусловлена наличием опре-деленного набора свойств, включая системы адгезии, образование токсинов, внеклеточных ферментов и т.п. Наиболее четко показаны отличия клинических и сап-ротрофных штаммов по активности ряда ферментов, на-пример, фосфолипазы, эластазы. Относительно различий молекулярно-генетических свойств, которые могут быть связаны с вирулентностью оппортунистов, имеются про-тиворечивые сведения. Есть данные о подобных отличи-ях у сапротрофных и клинических штаммов, например, у a. fumigatus
и также об их отсутствии как у этого вида,
так и других грибов. У становлен ряд особенностей эко-лого-физиологических свойств для оппортунистических грибов в целом и, в частности, для их клинических штам-мов. Основным из таких свойств является лучший рост при повышенной температуре (28–30
°С).
Возможность сохраняться в окружающей среде и
высокий уровень концентрации спор оппортунисти-ческих грибов могут являться критическими фактора-ми для заболеваний вторичными микозами. Условно безопасной концентрацией считают несколько сотен КОЕ/м
3 воздуха. В помещениях – наибольшее коли-
чество диаспор отмечается в воздухе предприятий, где складируется и перерабатывается сельскохозяйствен-ная про
дукция. Во внешней среде – существенно бо-
лее высокая численность и разнообразие видов, извес-тных как оппортунистические, отмечается в южных, чем в умеренных широтах, а в последних возрастает
Пленарные заседания. Мемориальные симпозиумы 37
в антропогенных экосистемах. На примере вида a. sy-
dowii нами показана способность клинических штам-
мов, выделенных от человека, выживать и активно спороносить в почвах, особенно при повышенной тем-пературе. Учитывая тенденции потепления климата на Земле, необходим прогноз изменения распространения оппортунистических грибов в северных и умеренных регионах, в том числе и на территории России.
МИЦЕЛИАЛЬНЫЕ ГРИБЫ С ПОЗИЦИЙ эВОЛЮЦИИ И СОЦИУМА
Феофилова Е.П.
Институт микробиологии им. С.Н. виноградского РАН,
Москва
В начале 21 века наблюдаются изменения в тра-
диционных представлениях о значении грибов в че-ловеческом социуме. Наряду с большими успехами, связанными с использованием грибов в пищевой ин-дустрии и в медицине, как лекарственных препаратов, все большее беспокойство вызывают данные об отри-цательных последствиях деятельности этих организ-мов. Отрицательная роль грибов наглядно проявляется в их разрушительном действии (в порче бумажных из-делий, в том числе бумажных обоев, гранитных и мра-морных памятников, бетона, канализационных труб, проводов, приборов, тканей, кожи, оптического стек-ла, кинофотодокументов, кинофильмов), высокой ин-фицированности грибами жилых помещений, в резком увеличении числа продуцентов микозов, и особенно в активной порче поверхности пищевых продуктов, ко-торая часто сопровождается образованием токсических соединений, например, микотоксинов, обладающих сильным гепатотоксическим и гепатоканцерогенным действием. Повреждающему действию мицелиальных грибов по
двержено около 25 % производимого в мире
продовольствия, что было бы достаточно для питания более 7 млн. человек в течение года.
Полагают, что грибы по количеству видов являются
второй группой, уступая только насекомым и, возмож-но, число видов грибов может выражаться цифрой 1.5 миллиона. Во всяком случае, число известных видов увеличивается с каждым годом, причем обнаружива-ется новая закономерность, свидетельствующая о том, что грибы могут жить в условиях, например, сильного защелачивания, повышенных температур, радиации, что значительно расширяет наши представления об их распространении в климатических и неблагоприятных для жизни зонах.
Понять, почему именно грибы оказались в настоя-
щее время одними из основных организмов, мешающих деятельности человечества, вероятно, можно, обсудив наличие у этих низших эукариотов определенных спе-циализированных биохимических механизмов, позволя-ющих им выживать при неблагоприятных воздействиях. это
му посвящено основное содержание доклада.
Рассматриваются следующие отличительные осо-
бенно
сти представителей царства fungi: наличие апи-
кального роста и специальных везикул (ЦУДВ), кле-точной стенки, осмотрофии, протекторных полиолов, специализированной липидной мембраны и, главное, наличие специализированных механизмов, способных остановить жизненную активность при действии так называемых «факторов гибели». В связи с этим особое внимание уделяется особому состоянию, свойственно-му т
олько грибам – состоянию покоя, особым формам
этого состояния, образованию «переживающих» кле-ток, в том числе спор, их разнообразию и особеннос-тям химического состава, в частности состава липи-дов, и содержанию и формам воды. В заключительной части доклада подчеркивается большая гетероген-ность представителей царства грибов, проявляющаяся в искусственности их систематик, и обсуждается роль адаптивной эволюции, и значение этого процесса для аскомицетных грибов.
Работа выполнена при поддержке РФФИ. Грант №
07–04–12005-офи а
Раздел 2
КуЛьТИВИРуЕМыЕ СЪЕДОбНыЕ ГРИбы
В Селекционно-генетическом институте в лабора-
тории прикладной микологии отдела фитопатологии
и энтомологии в течение ряда лет разрабатываются научно-обоснованные методики выращивания лечеб-ных и съедобных грибов. Проводятся генетические исследования природных и коллекционных изолятов макромицетов, ведется создание исходного материала, который обладает высокой устойчивостью к возбудите-лям заболеваний. На основе отборов лучших изолятов проводятся скрещивания и создаются высокопродук-тивные сорта грибов. Наиболее пристальное внимание в последние годы уделяем макромицетам с уникальны-ми лечебными свойствами, и в этом ряду Рейси, или трутовик лакированный занимает ведущее место. Рейси (Ganoderma lucidum (fr
.) karst) – дереворазрушающий
гриб, в Японии и Китае его гордо называют грибом дол-го
летия. Известны и другие названия этого гриба – гриб
бессмертия, гриб десяти тысяч лет и трава духовной силы. История его применения насчитывает более 2000 лет. Сейчас его выращивают в промышленных масшта-бах во многих странах мира. Приспособления традици-онных культивационных приемов к региональным ус-ловиям и субстратам Украины, а также создание новых технологий ограничивается рядом факторов, которые уменьшают эффективность производства этого ценного лекарственного гриба. В Украине промышленное вы-ращивание Рейси не налажено, оно только начинается и имеет большие перспективы. В коллекции нашей ла-боратории имеется ряд природных изолятов трутовика лакированного ( Ganoderma lucidum ), которые собраны
на территории Украины, есть также набор штаммов, по-лученных по обмену с научными учреждениями разных стран мира. В результате селекционной работы нами уже создано 2 сорта Рейси, которые, помимо отменного качества плодовых тел, имеют высокую устойчивость к основным болезням, ведь известно, что патогены яв-ляются одним из дестабилизирующих факторов произ-водства грибной продукции. Сорта Рейси, созданные в СГИ, имеют достаточно короткий цикл выращивания и вы
сокий потенциал урожайности – до 1,2 кг плодовых
тел с 1 кг сухого вещества субстрата. В результате ис-следований нами также специально для промышленно-го выращивания Рейси отработана энергосберегающая и экономически выгодная технология приготовления субстрата. В основу технологии положено использова-ние энергии микроволнового поля для обеззараживания целлюлозо-лигнин-содержащих отходов сельскохозяйс-твенного производства. Технология уже испытана, име-ет охранную документацию и используется в ряде хо-зяйств Одесской области. Нами инициируется массовое производство таких микроволновых установок, так как это дает возможность выращивать экологически безо-пасную продукцию плодовых тел Рейси самого высоко-го
качества и в достаточно больших количествах – как
для фармацевтики, так и для получения биологически активных добавок к питанию.
*Исследования выполнялись согласно гранта 3141 УНТЦ
(2005 – 2008 гг).РЕЙСИ (GANODERMA LUCIDUM) – ПЕРСПЕКТИВЫ ПРОИЗВОДСТВА В УКР АИНЕ
Бабаянц О.В., Маслий Е.В.
Се
лекционно-генетический институт –
Национальный центр семеноведения и сортоизучения,
одесса
КУ ЛЬТИВИРУЕМЫЕ ГРИБЫ – РЕСУРСЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ В УКР АИНЕ
Бабаянц О. В., Залогина-Кыркелан М.А., Никифорова Е.А.
Се
лекционно-генетический институт – Национальный центр семеноведения и сортоизучения,
одесса
Перед человечеством в последнее время достаточ-
но остро стоит вопрос недостатка продуктов питання, особенно белковой его составляющей, проблема за-грязнения окружающей среды и ухудшение здоровья людей. В решении этих проблем грибоводство как отрасль селькохозяйственного производства может
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 2 40
внести значительный вклад. Интенсивное развитие
промышленого культивирования съедобных грибов обусловлено рядом факторов, а именно их высокой продуктивностью, так как они есть наиболее высоко-урожайная культура, грибы являються бесценным ис-точником белка, витаминов, микроэлементов, других полезных веществ. Для культивирования съедобных грибов используются отходы сельскохозяйственного производства, лесного хозяйства и перерабатывающей промышленности. В процессе выращивания грибы, являясь ценным источником для получения пищи и лекарственных веществ, преобразуют отходы в удобо-варимую добавку в корм животным и подкормку для растений. Таким образом, одновременно решается вопрос производства продуктов питания и лекарствен-ных в
еществ – и экологическая проблема утилизации
отходов. Научно обоснованная, логически правильно выстроенная технология выращивания грибов являет-ся экологически безопасной, ее возможно максималь-но механизировать. Мы считаем, что грибоводство является одной из перспективных отраслей сельского хозяйства, поэтому участие ученых в развитии этого направления обязано привнести в него новую, эврис-тичную компоненту. Более 10 лет отделом фитопа-тологии и энтомологии Селекционно-генетического институт
а – Национального центра семеноведения и
сортоизучения осуществляется поиск и выделение в чистые культуры макромицетов степной зоны Украи-ны, создание и поддержание коллекции чистых куль-тур, изучение их морфологических, физиолого-биохи-мических свойств для получения исходного материала для селекции. Осуществляется селекция грибов пи-щевого и лечебного предназначения по устойчивости к возбудителям наиболее вредоносных заболеваний и вредителям, разрабатываются и усовершенствуются технологии получения высококачественного мицелия. Коллекция макромицетов лаборатории микологии СГИ-НЦСС имеет в своем составе: 195 штаммов Pleurotus
ostreatus, 69 штаммов Flammulina velutipes , 35 штамов
len
tinula edodes , по15 штаммов Herycium erynaceum .
и Phallus impudicus , по 7 штамов Ganoderma lucidum
и Grifola frondosa, по 6 штаммов lae tiporus sulphureus,
Polyporus squamosus, Pleurotus eryngii и coprinus coma-
t
us, по 4 штамма Pleurotus cytrinopileatus, P .pulmonarius
u P .djamor , Hyphsyzigus tessulatus, Hyphsyzigus ulmarius,
mac
rolepiota procera, langermania gigantea, lycoper-
do
n perlatum, Phellinus igniarius – по нескольку штам-
мов. Ежегодно коллекция природных макромицетов пополняется. В результате отборов на провокационных инфекционных фонах и ступенчатых скрещиваний коллекционных с дикими штаммами впервые в Укра-ине нами было создано 10 сортов Pleurotus ostreatus и
4 сорта lentinula edodes ,
которые с 2004 года и по сей
день находятся в Государственном Реестре сортов рас-те
ний, рекомендованных для выращивания. эти сорта
успешно выращиваются крупними грибоводческим хозяйствами по разработанным нами технологиям. Го-товы для передачи в Госреестр 2 сорта Ganoderma lu-
cidum и 4 сорта Flammulina velutipes . Сорта, помимо
высокой устойчивости к патогенам и вредителям имеют отличное качество плодових тел, высокоурожайны и высокотехнологичны. Нами разработана, запатентована и используется не имеющая аналогов универсальная технология производства субстрата для выращивания дереворазрушающих грибов. Таким образом, в Украине есть все предпосылки для интенсификации грибного производства, причем для получения наиболее ценных и необходимых видов грибов.
КУ ЛЬТИВИРОВАНИЕ МАКРОМИЦЕТОВ НА АГАРИЗОВАННЫХ СРЕДАХ
Дьяков М.Ю., Штаер О.В., Гарибова Л.В.
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
Бурное развитие различных направлений биотех-
нологии за последние десятилетия привело к повыше-нию интереса к многим группам грибов, в том числе и к макромицетам. Обусловлено это относительной простотой работы с культурами грибов, сложностью метаболизма (большое количество ферментов, соеди-нений, представляющих интерес для фармакологии и т. п.) и огромным числом практически не исследован-ных видов.
Целью нашей работы является изучение большого
количества видов макромицетов с точки зрения оценки их перспективности в различных сферах прикладного использования. Для осуществления этой цели в пер-вую очередь были поставлены следующие задачи:
– сбор коллекции культур грибов, относящихся к
различным таксономическим и эколого-трофическим группам;- отработка методов длительного хранения этих
культур;
– подбор более менее унифицированной среды для
культивирования;
– изучение морфолого-культуральных признаков,
микроморфологии, пищевых потребностей.
Сбор коллекции культур проводили в 2006 и 2007
годах главным в Москве и Московской областях, а так-же в Ростовской области и в Краснодарском крае. В работе были использованы культуры (22 штамма, 19 видов) различных таксономических групп. Основную часть культур составляли агарикоидные базидиоми-цеты различных семейств (Agaricaceae, Marasmiaceae, My
cenaceae, paxillaceae, polyporaceae, Strophariaceae,
Tricholomataceae). Также в исследования включены куль-туры афиллофороидных ( Ganoderma lucidum (
Curtis) p.
karst. и Sparassis crispa (W ulfen) fr.) и гастероидных ба-
культивируемые съедобные грибы 41
зидиомицетов ( lycoperdon perlatum pers. и l. pyriforme
Schaeff.). Основное внимание было уделено ксилотроф-
ным грибам, поскольку у представителей этой эколого-трофической группы близкие трофические требования. Довольно широко представлены подстилочные сапро-трофы. Кроме того, в работу были включены гумусовые сапротрофы (промышленно культивируемый cop
rinus
comatus (O.f. Mьll.) pers.). Для охвата максимального
разнообразия макромицетов в группу ксилотрофных грибов были включены паразитические виды ( arm
illaria
sp.) и виды, развивающиеся на погребённой древесине (Sparassis crispa ),
а также добавлен – микоризообразо-
ватель Paxillus involutus ( Basch) fr.
Хранение культур осуществлялось на двух типах
сред: на агаризованных средах и на кусочках древесины, увлажнённых пшеничным отваром. Хорошие результа-ты получены на модифицированной среде Чапека.Из четырёх испытанных питательных сред (пше-
ничный агар, картофельно-декстрозный агар, мальт-агар, сусло-агар) наиболее удачным оказался сусло-агар, т. е. большинство культур исследуемых видов показали на нём хороший рост и стабильные морфоло-го-культуральные характеристики. Показательно, что представители узкоспециализированных эколого-тро-фических групп (погребённая древесина и микоризо-образователи) отличались низкой скоростью роста на всех испытанных средах.
При изучении микроморфологии колоний, обра-
щает на себя внимание факт гаплоидности культуры Ganoderma lucidum, изолированной из плодовых тел тканевым методом. Данный феномен нуждается в до-полнительной проверке (необходимо подтверждение стерильности или фертильности штамма и получение спороносящих плодовых тел).
СР АВНИТЕЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ МЕХАНИЗИРОВАННОГО И РУЧНОГО
ПРИГОТОВЛЕНИЯ СУБСТР АТОВ ДЛЯ ВЫР АЩИВАНИЯ ШИИТАКЕ
Лавлинский А.В., Богдаев А.Г., Богдаев А.А.
вороне
жский государственный университет,
воронеж
В настоящее время стратегическое преимущество
при промышленном культивировании шиитаке ( lenti-
nus
edodes (Berk.) Sing.) заключается в механизации и
автоматизации процессов производства их субстратов, что должно обеспечить одновременно мобильность и строгую воспроизводимость качества субстратных блоков. В ходе предварительной технической прора-ботки
(совместно с конструктором Старцевым Г.А.,
г. Воронеж) и анализа результатов механизированно-го производства (в условиях Подмосковья на основе субстратной машины третьего поколения, изготови-тель
– ООО «Техник», г. Саратов) стерильных блоков
шиитаке (штамм 4080, «Sylvan») было выявлено сле-дующее. Обработку субстратной композиции пред-почтительно проводить перегретым (сухим) паром. Наиболее удобен шнековый вариант перемешивания и выгрузки стерильного субстрата. При использовании зернового мицелия ряд преимуществ имеют дозаторы в виде сменных кассет, дающие возможность вносить мицелий относительно небольшими порциями. В этом случае несколько раз меняется посадочный материал в ходе производства одной партии блоков, что дает дополнительную страховку качеству производства. Необходимо обеспечивать возможность регулировки объёма субстратных блоков с точностью до 50 грамм. Несомненное повышение качества стерильности про-изводимого субстрата дает установка дополнитель-ной системы тонкой фильтрации подаваемого внутрь машины воздуха или параллельное использование в помещении фильтров НЕР А. Посевной мицелий дол-жен обладать достаточной сыпучестью (зерновой но-ситель), либо представлять собой жидкую суспензию, что обеспечивает эффективное перемешивание компо-нентов субстрата с мицелием при меньших трудозат-ратах.
Также нами было установлено, что на результатив-
ность производства влияет и консистенция (твердость) частиц зернового носителей. Выявлено, что, благодаря наличию жестких покровных чешуй, зерновки овса, ис-пользованные нами для изготовления мицелия, значи-тельно лучше сохраняют жизнеспособность грибных клеток, чем просяные зёрна мицелия фирмы «Sylvan». В зависимости от режима выгрузки субстрата в про-изводстве грибных блоков шиитаке жизнеспособность мицелия на овсе превосходит таковую у просяного ми-целия в 1,1–17,5 раз. Сравнение результатов ручного и механизированного производств субстратных бло-ков шиитаке показало, что при машинном производс-тве жизнеспособность вносимого зернового мицелия может существенно меняться в ходе выполнения ра-бот. Её следует контролировать как перед внесением, так
и в ходе изготовления блоков (взятие 3 – 5 проб
в зависимости от объема партии), т. к. часть мицелия механически повреждается внутри емкости при пере-мешивании.
Известно, что при ручном выполнении работ мо-
жет происходить нарастающее загрязнение и сниже-ние стерильности рабочей зоны. При механизирован-ном производстве блоков шиитаке наблюдались два противоположно направленных процесса: со време-нем часть поверхностей в емкости загрязняется, в то время как ряд рабочих узлов постоянно очищается за счёт
перемещения субстрата. это приводило к ситу-
ации, когда инфицировались контаминатами только первые блоки в одной партии, а следующие уже были полностью чистыми. Сравнительный анализ качества
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 2 42
ряда партий блоков шиитаке, произведенных ручным
и механизированным способами, показал, что при руч-ном производстве степень их инфицированности варь-иру
ет в каждой партии от 5 % до 17 %. При машинном
производстве все факторы, влияющие на качество и стерильность субстратной продукции, легче подверга-ются контролю, колебания по этому показателю ниже, и они составляют, как между партиями, так и внутри партий о
т 0 % до 3 %.
МАКРО- И МИКРОМОРФОЛОГИЯ ШТАММОВ Ganoderma lucidum
Р АЗЛИЧНОГО ГЕОГР АФИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
Постнова Е.Л.
Биологический факультет МГУ имени М.в. ломоносова,
Москва
Трутовик лакированный – Ganoderma lucidum (M.A
Curtis: fr
.) p. karst – является одним из представителей
ксилотрофных базидиомицетов, вызывающих белую гниль листв
енных пород деревьев. экстракты плодо-
вых тел, мицелия, культуральная жидкость, а также споры G.lucidum обладают широким спектром фар-
макологических свойств и используются в качестве продуцента биологически активных веществ (Wasser & veis, 1999).
Нами были исследованы морфолого-культуральные
и микроскопические особенности девяти штаммов G.
lucidum различного географического происхождения (Ро
ссия – Московская область и окрестности г. Сочи,
Корея, Франция, США). У большинства штаммов кол-лекции были обнаружены споры бесполого размноже-ния
– хламидоспоры. Хламидоспоры представляют
собой толстостенные лимоновидные структуры, часто встречающиеся у ксилотрофных базидиомицетов (Ре-шетников, 1999).
По линейной скорости роста, морфологии колоний,
по присутствию и количеству хламидоспор штаммы G.lucidum заметно различаются. Так, например, штам-мы Московского региона характеризуются медленным ростом, сильной пигментацией колоний, единичными хламидоспорами, слабым плодоношением.
С помощью микроманипулятора были выделены
отдельные хламидоспоры, и в дальнейшем получе-ны моноспоровые изоляты; исследована способность этих структур к прорастанию. Установлено, что полу-ченные моноспоровые культуры оказались способны к плодообразованию.Выявлена способность некоторых штаммов образовы-
вать на мицелии резупинантные плодовые тела, форми-рующие жизнеспособные базидиоспоры. Из литературы известно, что атипичные плодовые тела (АТП) корал-ловидной формы являются характерной особенностью некоторых штаммов G.lucidum (Seo, 1995). Исследована
микроморфология этих структур и влияние освещеннос-ти, вентиляции и источников С:N на онтогенез АТП и рост мицелия. У становлено, что рост мицелия ингибиру-ется светом. У некоторых штаммов при кислородном го-лодании наблюдается потеря пигментации и увеличение скорости роста колоний. Формирование АТП происходит только на свету и не зависит от вентиляции. Источники С:N питания влияют и на скорость роста мицелия, и на формирование АТП. Базидиоспоры АТП формируются на базидии, имеют яйцевидную форму, усеченные вер-шины с бородавчатым буроватым эндоспорием.
Описана реакция взаимодействия дикариотических
штаммов при совместном сращивании на твердой сре-де. Штаммы из Московской области показали схожие реакции вегетативной несовместимости с остальными штаммами и между собой.
Метод вертикального электрофореза в полиакрила-
мидном геле с окрашиванием на 5 ферментативных ак-тивностей подтвердил выявленные ранее различия штам-мов и обособленность штаммов из Московской области.
Получены плодовые тела, которые так же различа-
ются по морфологии.
Для штамма из Кореи характерны ветвящиеся ба-
зидиомы, формирующие базидиоспоры по всей повер-хности плодового тела.
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ СЪЕДОБНОГО КСИЛОТРОФНОГО БАЗИДИОМИЦЕТА
PleuroTuS er YnGii (DC.) GILLET И эПИФИТНЫХ ДРОЖЖЕЙ В КУ ЛЬТУРЕ
Савельева Д.Н., Камзолкина О.В.
Московский Государственный Университет имени М.в. ломоносова,
биологический факультет,
Москва
Королевская вешенка, или степной белый гриб –
Pleurotus eryngii (DC.) Gillet – растет на погребенных
корнях и в основании отмерших стеблей зонтичных растений. Гриб широко распространен в степной зоне России, а также на юге Европы, в Северной Африке и в Центральной Азии. Королевская вешенка съедобна и
культивируемые съедобные грибы 43
широко культивируется в искусственных условиях, а
также является продуцентом биологически активных веществ (например, ловастатина). В природных усло-виях грибы рода Pleurotus, как и многие ксилотрофные
грибы, могут вступать в ассоциации с микроорганиз-мами, встречающимися на древесине, с целью вос-полнения недостатка питательных веществ (в первую очередь, азота). Данное свойство вешенки и других видов съедобных грибов открывает перспективу ис-пользования совместных культур грибов и микроор-ганизмов (дрожжей, бактерий) в промышленном куль-тивировании съедобных грибов, а также в процессе получения биологически активных веществ. В литера-туре описаны механизмы взаимодействия мицелия и клеток дрожжей для видов P . ostreatus и P . pulmonarius .
Целью настоящей работы было исследование совмес-тных культур P . eryngii и некоторых видов эпифитных
дрожжей в культуре на твердых средах.
Материалы и методы. Объекты исследования: коро-
ле
вская вешенка pleurotus eryngii (DC.) Gillet и 5 видов
дрожжей – Cryptococcus albidus (Saito) C.E. Skinner,
Hanseniaspora uvarum (Niehaus) Shehata, Metschnikowia pu
lcherrima pitt. & M.W. Will., Rhodotorula minuta (Saito)
f.C. Harrison, Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C.
Hansen. Микроорганизмы культивировали в чашках Пе
три раздельно и совместно на 1,5 %-ном голодном
агаре. Чашки Петри инкубировали в термостате при +2
5° ±1 °С. Совместные культуры были созданы путем
подсева водной суспензии дрожжей (концентрация кле-ток 2,5 Ч 106 в 1 мл), выращенных на скошенном сус-ло-агаре (2,4°Б), в виде капель (50 мкл) на расстоянии 1,5–2 см от края колонии гриба на 7 сутки роста мице-лия. Совместные культуры вешенки и дрожжей микро-скопировали на 3 сутки совместного роста. Результаты. Было отмечено, что мицелий гри-
ба полностью зарастал микроколонии дрожжей на поверхности среды. Присутствие дрожжей не ин-гибировало роста мицелия P. eryngii . В совместных
культурах гриба и всех видов дрожжей были обнару-жены специализированные сосочковидные выросты для контакта мицелия и дрожжевых клеток размером 2–40 Ч 8–15 мкм. Реакцию мицелия вешенки на при-сутствие клеток дрожжей m.
pulcherrima, r. minuta
и S. cerevisiae можно определить как нейтральную:
морфология гиф практически не изменялась, сосоч-ковидные выросты были немногочисленными, кон-тактов гиф и дрожжевых клеток не было обнаружено. Реакция гриба на присутствие клеток c.
albidus – сла-
бо положительная: сосочковидные выросты были немногочисленные, единично были обнаружены контакты дрожжевых клеток и мицелия. Наиболее выраженной была положительная реакция гриба на присутствие клеток H. uvarum : клетки дрожжей были
сосредоточены преимущественно вдоль гиф вешен-ки; на мицелии были обнаружены коралловидные структуры, представляющие собой разветвленную систему коротких выростов на гифах, пронизыва-ющих клетки дрожжей и служащих для всасывания их содержимого. В совместных культурах вешенки с дрожжами c.
albidus и H. uvarum были обнаружены
головчатые выросты, которые практически не наблю-дали в монокультуре гриба на данной среде роста, что может свидетельствовать о специфическом влиянии дрожжевых метаболитов на морфологию вешенки. Полученные результаты демонстрируют способность мицелия королевской вешенки использовать дрожже-вые клетки в качестве источника питания в условиях дефицита азота и углерода.
ПР АКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ МИЦЕЛИЯ ВЫСШИХ БАЗИДИАЛЬНЫХ
ГРИБОВ (len TinuS edodeS И Ganoderma lucidum) В ПТИЦЕВОДСТВЕ
Трояновская Л.П., Белогуров А.Н., Польских С.В.
ФГоУ в
По воронежский государственный аграрный университет им к.Д. Глинки,
лаб
оратория биотехнологии вГАУ,
воронеж
В условиях промышленного птицеводства, в связи
с его интенсификацией для получения максимальной продуктивности от птицы, нередко отмечается про-цесс снижения общей неспецифической резистентнос-ти организма, а также новые технологические циклы в производстве птицеводства все это, укорачивается срок ее эффективного использования. Резко возраста-ют стрессовые явления, за счет многочисленных от-рицательных воздействий факторов внешней среды, что приводит организм птиц к ослаблению, развитие различных заболеваний и преждевременной гибели птицы.
Одним из возможных путей предупреждения этого,
является применение лекарственных средств, облада-ющих комплексным действием направленным на вос-становление организма птицы.
эк
сперименты проводились на Курской, Липецкой,
Рамонской и Белгородской, Московской птицефабри-ках совместно с ветеринарными факультетами Воро-нежского государственного аграрного университета имени К.Д. Глинки, Курской государственной сель-скохозяйственной академии им. И.И. Иванова, ФГОУ ВПО «Московской государственной академии ветери-нарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скря-бина».
В ходе экспериментов было получено:Мицелий высших базидиальных грибов (Lentinus
edodes и
Ganoderma lucidum) в дозе 5 % от суточной
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 2 44
массы корма, приводит к нормализации показателей
белкового, липидного, углеводного и минерального обменов.
Обеспечивается восстановление функционального
состояния печени. Гепатотропное действие мицелия грибов (lentinus
edodes и Ganoderma lucidum ) сопро-
вождается нормализацией макроскопических показа-телей печени уже к 235 суточному возрасту. Отмечено восстановление размера органа, цвета, других струк-турных особенностей.
Использование мицелия высших грибов ( len
–
tinus edodes и Ganoderma lucidum ) обуславливают нормализацию толщины скорлупы, с последующим уменьшением «боя» и насечки яиц, способствует уве-личению яйценоскости кур-несушек. Нормализует химический состав белка и желтка яиц на протяже-нии 140 дней.
Мицелий грибов оказывает выраженное антибио-
тическое действие на культуры Staphylocccus aureus и
esherichia coli .
У
величивает сохранность поголовья птицы.
Применение мицелия высших базидиальных гри-
бов экономически оправданы. На 1 рубль ветеринар-ных зат
рат хозяйство сохраняет 25,4 – 28,7 рублей.
эФФЕКТИВНОСТЬ ВНЕСЕНИЯ ОРГАНИЧЕСКИХ
АЗОТСОДЕРЖАЩИХ ДОБАВОК В СУБСТР АТЫ ДЛЯ
КУ ЛЬТИВИРОВАНИЯ ШАМПИНЬОНА ДВУХСПОРОВОГО
Цизь А.М.
Национальный аграрный университет,
киев
В решении проблем, которые стоят перед челове-
чеством: недостаток продуктов питания, загрязнение окружающей среды, ухудшение здоровья людей, зна-чительный вклад может внести культивирование съе-добных грибов. Один из известных специалистов в от-расли грибоводства С. Чанг считает, что XXI век будет ознаменован «незелёной революцией» в результате развития производства съедобных грибов и продуктов из них. э
то объясняется тем, что свыше 70 % расти-
тельных остатков, которые в мире не используются, могут быть трансформированы грибами в продукты питания и лекарственные вещества.
Целью наших исследований было изучение эф-
фективности внесения в субстраты, на которых куль-тивируется шампиньон двухспоровый, различных азо
тсодержащих органических добавок – отходов пе-
рерабатывающей промышленности. В качестве конт-роля (I вариант) использовали синтетический субстрат следующег
о состава: пшеничная солома – 1000 кг, ку-
риный по
мет – 800 кг, карбамид – 10 кг, мел – 15 кг,
гипс – 60 кг. К нему добавляли вещества, которые со-держат
значительное количество азота: II вариант – 50
кг пивной дробины, III вариант – 50 кг солодовых рос-тков, I
v вариант – 50 кг соевого шрота.
В результате исследований установлено, что внесе-
ние азотсодержащих добавок в субстраты, на которых культивируется шампиньон двухспоровый, положи-тельно отражается на их физико-химических и микро-биологических свойствах. Внесение пивной дробины, солодовых ростков, соевого шрота предопределяет рост содержания в субстратах питательных веществ. Коли-честв
о общего азота увеличивается на 0,05 – 0,44 %,
белкового азота – на 0,07 – 0,37 %, фосфора – на 0,02 – 0,05 %, калия – на 0,07 – 0,13 %. Наибольшее количест-во белкового азота, который является основным источ-ником питания шампиньона, содержится в субстрате с добавлением
солодовых ростков – 1,92 %. Добавление органических азотсодержащих веществ способству-ет также улучшению микробиологических свойств синтетических субстратов, что положительно отра-жается на качестве ферментации. Наиболее активно развитие полезной микрофлоры проходит в субстрате с добавлением солодовых ростков. Количество термо-фильних бак
терий (pseudomonas putida, pseudomonas
fluorescens) в нем возрастает на 50,4 %, термофильних микромицетив (Scytalidium thermophilum, Humicola insolens)
– на 28,8 %. В результате этого улучшаются и
органолептические свойства субстрата.
При культивировании шампиньона на субстратах
различного состава наивысшие показатели скорости роста мицелия и товарного качества имеют грибы, выращенные на субстрате с добавлением солодовых ростков. На нем наблюдалась скорость роста мице-ли
я – 10,4 мм/сутки, кратчайший период до вступле-
ни
я в плодоношение – 31 сутки, образовывались кар-
по
форы наибольшей массы – 29,9 г. Состав субстратов
влияет на биохимические параметры плодных тел шампиньона двухспорового. Наивысшее содержание сухого вещества, белка и сахаров зарегистрировано в плодных телах, культивируемых на субстрате с до-бавлением солодовых ростков. Внесение азотсодер-жащих органических добавок в синтетические суб-страты способствует росту урожайности шампиньона на
1,1 – 2,25 кг/100 кг субстрата. Наивысшая урожай-
ность получена на субстрате с добавлением солодо-вы
х ростков – 26,1 кг/100 кг субстрата, что на 9,4 %
превышает контроль. На субстрате с добавлением со
евого шрота получена урожайность 25,35 кг/100
кг субстрата, пивной дробины – 24,95 кг/100 кг суб-
ст
рата, а без внесения азотсодержащих веществ –
23,85 кг/100 кг субстрата.
Таким образом, сделан вывод о перспективности
использования органических азотсодержащих добавок к шампиньонным субстратам.
культивируемые съедобные грибы 45
Виды рода Pleurotus широко культивируются в Рос-
сии и за рубежом благодаря их пищевой ценности. В
последние годы заметно вырос интерес и к экзотичес-ким видам
– P .djamor и P .sajоr-caju. Ранее нами было
показано c помощью анализа полиморфных аллозим-ных лок
усов, RApD-полиморфизма и традиционных
скрещиваний с тестерными штаммами, что группа культивируемых вешенок весьма неоднородна по сво-им характеристикам. Были продемонстрированы ос-новные источники происхождения культивируемых сортов и штаммов. Причем, как было показано, штам-мы, выделенные из природы и внедренные в культиви-рование производителями грибов, характеризовались наибольшим полиморфизмом и значительно отлича-лись от культивируемых европейских сортов. Целью данного исследования было продолжить генотипиро-вание культивируемых штаммов и видов вешенки и оценить полиморфизм на основе вариабельных локу-сов кластера генов рибосомальной ДНК. Были сконс-труированы геноспецифические праймеры на участки ITS- (internal transcribed spacer, внутренний транскри-бируемый спейсер) и IGS-областей (internal gene spac-er, внутренний генный спейсер). Полиморфизм локу-сов оценивали с помощью полного секвенирования ITS об
ласти и RfLp-анализа (restriction fragment length
polymorphism, полиморфизм длин фрагментов рест-рикции) IGS последовательности и более протяжен-ной последовательности, включающей участок гена малой субъединицы 18S рДНК, ITS область и ген 5.8S рДНК.
Были проанализированы коммерческие сорта Ми-
чиган, florida,
Sommer, штаммы 27 и БП-8 (прина-
длежащие виду P.ostreatus); три штамма розовой ве-
шенки, P .djamor и штамм P .sajor-caju. Полученные в реакции амплификации с геноспецифическими ITS- и IGS-праймерами ПЦР-продукты варьировали по дли-не среди исследуемых видов, в то время как длина амплифицированной последовательности среди штам-мов в пределах одного вида была одинаковой. Длина IGS-последовательности составила около 1.2 тнп для P .djamor и 1.1 тнп для P.ostreatus; различия в длине
ITS-участка между видами колебались в пределах 100 нп и составили около 770 нп для P .djamor и 760 нп
для вида P.ostreatus. RfLp
анализ показал четкие раз-
личия как между видами рода Pleurotus, так и между
штаммами в пределах вида. Получаемые паттерны с рестриктазой Haeiii
были видо- сортоспецифичны и
характеризовались хорошим разрешением в агарозном геле (четким разделением фрагментов рестрикции), что демонстрирует возможность их использования как тест-систем для видовой диагностики культивируе-мых коммерческих сортов и штаммов вешенки. Была построена дендрограмма сходства между культивиру-емыми штаммами вешенки на основе вариабельных Rf
Lp-паттернов.
При секвенировании ITS участка (ITS1–5.8S-ITS2)
не было обнаружено значительной вариабельности нуклеотидных последовательностей между культиви-руемыми сортами P.ostreatus за исключением редких
замен нуклеотидов по некоторым позициям.
Данное исследование важно не только для харак-
теристики культивируемых сортов съедобных грибов, но также демонстрирует необходимость внедрения в культивирование дикорастущих штаммов с целью рас-ширения генетической базы и повышения общего ге-нотипического разнообразия культивируемых видов.
Исследование было поддержано грантом РФФИ-
офи.МОЛЕКУ ЛЯРНОЕ ГЕНОТИПИРОВАНИЕ КУ ЛЬТИВИРУЕМЫХ
ШТАММОВ И ВИДОВ ВЕШЕНКИ PleuroTuS SPP.
Шнырева А.В., Сиволапова А.Б.
кафе
дра микологии и альгологии, биологический факультет,
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ ТВЕРДОФАЗНОГО КУ ЛЬТИВИРОВАНИЯ
lenTinuS (PanuS) Ti GrinuS ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ
БИОПЛАСТИКОВ ИЗ ОТХОДОВ ХЛОПЧАТНИКА
Шутова В.В., Ревин В.В.
ГоУв
По «Мордовский государственный университет им. Н.П. огарева»,
Саранск
Производство древесно-полимерных композицион-
ных материалов базируется на использовании древеси-ны. Во многих странах она была и остается традицион-ным сырьем. Однако, для изготовления композиционных материалов может служить и другое растительное сы-рье, например, стебли хлопчатника. Создание новых материалов на основе растительного возобновляемого сырья позволит значительно расширить ассортимент недефицитных композитов. После предварительной обработки гузапаи, а именно, биомодификации с помо-щью лигнолитических грибов (к которым относится и гриб l. tigrinus )
, из нее можно получать биопластики.
Для получения биопластиков с высокими физико-ме-
ханическими показателями, необходимо оптимизировать
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 2 46
условия культивирования гриба и процесс потребления
им компонентов субстрата. Одним из важнейших физи-ческих факторов среды, определяющих жизнедеятель-ность микроорганизмов, является температура. Темпе-ратура влияет на скорость клеточных реакций, природу метаболизма, пищевые потребности. Большинство де-реворазрушающих грибов относится к мезофилам. Оп-ти
мум их развития лежит между 24 и 28 °С. Культиви-
ро
вание при 37 °С ослабляет рост дереворазрушающих
грибов. При оптимальной температуре и прочих благо-приятных условиях развитие гриба и биодеградация им субстрата происходит без осложнений.
В связи с этим было исследовано влияние темпера-
туры культивирования гриба l.
tigrinus на изменение
химического состава биообработанной гузапаи и на физико-механические показатели биопластиков, полу-ченных из нее.
При культивировании гриба L. tigrinus на стеблях
хлопчатник
а – гузапае при различных температурах
обнаружено, что наилучший рост наблюдался при 25 и 30
°С. При 40 °С гриб рос плохо, полного обрастания
субстрата мицелием к 9 суткам роста не было.
Исследование изменения химического состава гу-
запаи показало, что наиболее интенсивное потребле-ние к
омпонентов субстрата происходило при 30 °С к
9 суткам роста. При этом убыль целлюлозы состави-ла 18,8
%, а лигнина 20,5 %. Таким образом, гриб L.
tigrinus активен как по отношению к лигнину, так и по отношению к целлюлозе гузапаи.
Содержание легкогидролизуемых полисахаридов
гузапаи снижалось при культивировании гриба при всех исследованных температурах. Содержание реду-цирующих веществ было подвержено колебаниям.
Наилучшими физико-механическими показателями
обладали биопластики, полученные из гузапаи, обра-бо
танной грибом при 30 °С в течение 6 суток: предел
прочности при изгибе 17,8 МПа, плотность 896 кг/м3. Возможно, это связано с тем, что на шестые сутки роста при этой температуре происходило максималь-ное высвобождение функциональных групп лигнина, которые образуются в результате действия лигнолити-ческих ферментных комплексов, в частности, фенолок-си
дазных, продуцируемых грибом. эти перестройки в
молекуле лигнина и образование новых продуктов при образовании лигнина увеличивали связующие свойс-тва сырья. Обнаружена корреляция между пределом прочности при изгибе прессованных материалов и их плотностью.
The genus daldinia Ces. et de Not. (Xylariaceae) cur-
rently comprises ca. 30 species of angiosperm-associated
pyrenomycetes that are characterized by well developed stromata with internal alternating dark and bright zones. In the past decade, the genus was critically revised, resulting in cardinal changes of its taxonomy and new fundamental in-sights into its biology and ecology. In particular, it has been shown that d.
concentrica (Bolt. ex fr.) Ces. et De Not. is not
the most trivial and common representative of dal dinia in
Eu
rope. H pLC profiling and extensive culturing were carried
out in addition to morphological studies of the teleomorphs. A
revision of specimens in the herbaria kW (M.G. kholodny
Institute of Botany, kyiv) and CWU ( v.N. karasin National
University, kharkiv) was carried out, resulting in five new
records of dal dinia spp. for Ukraine. Brief information about
collection data, numbers of herbarium specimens (in paren-theses) and substrata are compiled below.
daldinia
childiae J.D. Rogers et Y .M. Ju, in Rogers,
Ju, Watling et Whalley, Mycotaxon 72: 512. 1999. Local-ity: kharkiv f
orest-Steppe (22), Left Bank forest-Steppe
(2), Left Bank polissya (2), Right Bank forest-Steppe (1),
Left Bank Gramineous-Meadow Steppe (1). This species, still regarded as d.
concentrica by Ju et al. (1997), may
occur on various angiosperm plants. In Ukraine, the ma-jority of specimens were collected on Quercus robur (7),
acer
platanoides (6), corylus avellana (3), Fraxinus ex-
celsior (2), and Populus tremula (2). Individual finds of d.
childiae
were registered on other acer spp. (a . campestre,
a.
negundo, a. tataricum), as well as on alnus glutinosa,
carpinus betulus
and Tilia cordata.
daldinia
fissa Lloyd, Mycol. Writ. 7: 1313. 1922.
Locality: kharkiv f
orest-Steppe (8), Right Bank forest-
Steppe (4), Left Bank Gramineous-Meadow Steppe (1), Transcarpathians
(1), precarpathian forest (1). This spe-
cies, previously known under the illegitimate name, d.
vernicosa
, also does not show any apparent host specific-ity. In Ukraine it was collected on betula pendula (4) and
Quercus robur (3). Individual specimens from acer camp-
estre, a. platanoides, carpinus betulus, Fagus sylvatica,
robinia
pseudoacacia and ulmus laevis. respectively,
were also found.
daldinia
lloydii Y .M. Ju, J.D. Rogers et f. San Martнn,
Mycotaxon 61: 273. 1997.
Lo
cality: Crimean forest-Steppe (1), Right Bank for-
est-Steppe (1). d. lloydii samples were collected on aln us
glutinosa and betula pendula wood. The specimen from al-
der is the first record of this species from that host genus.
daldinia
loculata (Lйv.) Sacc., Syll. fung. (Abellini)
1: 394. 1882.
Locality: Right
Bank forest-Steppe (2), kharkiv for-
est-Steppe (1), Left Bank Gramineous Steppe (1), Left Bank polissya
(1), Left Bank forest-Steppe (1), Western
forest-Steppe (1). In Ukraine the majority of its specimens were collected on betula
pendula (3) and alnus glutinosa
(2). Singular specimens were found from Fraxinus excel-
sior and Prunus cerasus.
daldinia
pyrenaica M. Stadler et Wollw., Mycotaxon
80: 179–196. 2001.
Locality: kharkiv f
orest-Steppe (17), Mountain
Crimea (2), Right Bank forest-Steppe (1), Western for-
est-Steppe (1), Left Bank Gramineous-Meadow Steppe (1). In Ukraine the majority of d.
pyrenaica samples were
collected from Quercus robur (13). Singular finds of this
species were registered on aesculus hippocastanum, car –
pinus betulus, Fagus sylvatica , Pyrus communis and Tilia
cordata. So far, this fungus was only recorded from the pyreneйs, Spain and
france and only on Quercus spp.
Interestingly, among the investigated samples from
Ukraine, there was no specimen of d. concentrica sensu
stricto, a fungus that is apparently confined to the mild Atlantic climates of Western Europe, where it preferably colonizes Fraxinus.Раздел 3
ФЛОРА И ОхРАНА ГРИбОВ
CRITICAL REvIsION Of DATA AbOUT daldinia spECIE s IN UkRAINE
Акулов О.Ю.1, Stadler m.2
1 Национальный универитет Харькова им. в.Н. карасина,
Украина
2 intermed discovery GmbH,
Germany
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 48
Hypoxylon submonticulosum Y .-M. Ju et J.D. Rogers
(X
ylariaceae, Xylariales, pezizomycetes, Ascomycota) is
a representative of xylariaceous fungi, which develops on
dead decorticated trunks of some deciduous trees. It was de
scribed in 1996 basing on the sample WS p 69640, collected
by J.D. Rogers in 1986 in Wakonda park, Missouri, USA.
Meanwhile, some specimens of this species were found by
these authors in B pI Herbarium (Beltsville, Maryland,
USA) where they were filed under Hypoxylon investiens .
H. submonticulosum is distributed in different states of the
USA and is likely a common species in North America.
In 1999 H. submonticulosum sample was found by
f. Candoussau
from rotten deciduous wood in Atlantic
pyrenees, france. This sample was further confirmed by
J.D. Rogers (fC 667, duplicate BpI 746443) and stands as the first record of H. submonticulosum found outside North
America. In 2002 at the same location two additional H.
submonticulosum samples
were collected by J. fournier
(Jf-02219 and Jf-02220).
Also there is available unverified information about
finding of H. submonticulosum on the territory of National
Nature Reserve Ranљpurk in the South Moravia in Czech Republic. In this country H. submonticulosum is considered
as extra rare and is included at the Red list as critically endangered species (CR category).
Thereby, according to available data, H. submonticulosum
till now was known in Europe by singular finds and it is possible to consider it as enough rare species.
In October 2006 during «IX Working Meeting of the
Macromycetes Investigation Comission of Russian Botanic So
ciety», which was held in the veshenskaya stanitsa (Rostov
district, Russia), three samples of H. submonticulosum
were collected . Samples CWU (myc) AS 2036 and 2037
were collected on fallen trunks of ace r campestre L. in
an oak forest, Semenovskaya beam, 5 km to the south of ves
henskaya stanitsa (N 49°31’36, 1’’; E 041°50’28, 0’’).
Sample CWU (myc) AS 2031 was collected from a fallen trunk, which possibly belongs to a ulm us species, in flood
plain of an alder-willow forest, Don river bottomland, 1.5 km
to the southwest of veshenskaya stanitsa (N 49°37’29,
1’’; E 041°42’27, 0’’). H. submonticulosum is reported for
the first time from Russia.
A description of H. submonticulosum based on the
samples from Russia is given below.
Stromata irregularly effused to elongated, with incon-
spicuous perithecial mounds, 0.3–6 cm long Ч 0.3–2 cm broad Ч 0.5–0.7 mm thick; surface rust when young, dark brown to black when mature, shiny; carbonaceous tis-sue immediately beneath surface and between perithecia, without apparent k
OH-extractable pigments, but with pale
livid violet pigments from immature stromata; the tissue below the perithecial layer inconspicuous or brownish-black, up to 250 µm thick.
perithecia
subglobose to obovoid, 200–400 µm mm
diam. Ч 380–450 µm high. Ostioles higher than the stro-matal surface, black, shiny, minutely conical-papillate, at the centre of a faint disc 100–130 µm diam.
Asci 115–136(–153) µm total length Ч (6.5-)7.5–8.5(–
9.5) µm broad, the spore-bearing parts (65-)70–80(–100) µm long, the stipes 42–60(–72) µm long, with eight ob-liquely uniseriate ascospores, with apical ring discoid, weakly amyloid (bluing in Melzer’s iodine reagent), 1.5–2.5 µm high Ч2.5–3 (–3.4) µm broad.
Ascospores light brown to brown, unicellular, ellipsoid,
slightly inequilateral, with broadly to less frequently narrowly rounded ends, 9–12(–13.5) Ч 4–5.5(–6) µm; with a short, straight to slightly oblique germ slit less than spore-length on the more convex side; perispore indehiscent in 10
% kOH in most specimens but dehiscent from one end
occasionally; epispore smooth.
Anamorph in nature was not observed. Anamorph ob-
tained in culture is Virgariella -like.
Habitat: on rotten decorticated wood of acer spp., ul-
mus
spp., Populus spp.fIRsT RECORDs Of HYPoxYlon SubmonTiculoSum fROM RUssIA
Акулов О.Ю.1, Fournier J.2, Ju Y.-m.3
1 Национальный универитет Харькова им. в.Н. карасина,
Украина
2 las muros,
rimont, France
3 institute of Plant and microbial biology, academia Sinica,
nankang, Taiwan
fIRsT RECORDs Of FraccHiaea broomeana fROM EAsT EUROpE
bianchinotti m.V . 1, Акулов О.Ю.2
1 cerzoS-coniceT, universidad nacional del Sur,
bahнa blanca, argentina
1 Национальный универитет Харькова им. в.Н. карасина,
Украина
Fracchiaea broomeana (Berk.) petch a.k.a. nitschkia
broomeana (Berk.) Nannf. is one characteristic representa-tive of Nitschkiaceae (Ascomycota). The family Nitschki-aceae (syn. Coronophoraceae) has been placed in differ-
Флора и охрана грибов 49
ent orders over the years. Most recently it was accepted in
the Coronophorales and placed in the Hypocreomycetidae based on sequence data from large subunit nrDNA.
The type sample of this species [as Sphaeria broomei-
ana] was found out by M.J. Berkeley in 1854 on rotten wood
in Ceylon. from that time Fracchiaea broomeana
has been collected in many countries of Africa, Asia, Aus-tralasia, North and South America, and Europe. This spe-cies is widespread in most warmer countries, but at the same time it is enough rare from more northern areas. In Europe Fracchiaea broomeana is known on individual
finds and
was registered in Czech Republic, france, Great
Britain, Italy, Serbia and Montenegro.
In the spring of 2002 in the forest shelter belt in vicini-
ties of
Svetlichnyj village (zolochev area, kharkiv district,
Ukraine) two samples of F . broomeana (CWU (myc) AS
63 and 2405) were collected. The perithecia develops on fallen decorticated branches of Fraxinus excelsior L. and
ulmus
laevis pall. This is the first record of F . broomeana
from East Europe.
A modified description of F . broomeana based on the
samples from Ukraine is given below.
F . broomeana is characterized by single ascomata or
clusters of 2–30 ascomata emerging from cracks in bark or other woody material. The bark then frequently becoming detached so that the ascomata appear to be superficial.
perithecia
are globose, only rarely collapsing into cup-
shape, (350) 400–500 (650) µm in diameter, often orna-mented with pointed spines up to 25 µm (the spines them-selves being sometimes forked and often with secondary barb-like ornamentation), without an ostiole, but with a short dome-like special opening apparatus (sometimes called a ‘Quellkцrper’); outer wall composed of dark- and thick-walled cells forming a well-defined textura angula-
ris, individual cells often with small but conspicuous pores which look like minute bullet holes (sometimes called ‘Munk pores’); inner wall composed of paler, thinner-walled, flatter cells also forming a textura angularis .
Asci are polysporous, they arise from the base of the
ascoma, oblong to obovate, thin-walled, with a short stalk, 100–110 Ч 15–20 µm. According to «IMI Descriptions of fungi
and Bacteria» No. 1739 asci size can reach up to
125 Ч 25 µm.
Ascospores are characteristically arranged in a ‘herring-
bone’ pattern, they are hyaline to yellowish, subcylindrical, slightly curved, smooth, very variable in size, with one drop-let in each end, eventually with a faint septum. In the material described from Ukraine they are 10–12 Ч 1, 8–2, 2 (2, 9) µm. They are slightly wider than ascospores from other collec-ti
ons, accordingly to «IMI Descriptions of fungi and Bacte-
ria» No. 1739 they are 8–11 Ч 1, 5–2 µm. In the material col-le
cted by Dr. L. vasilyeva from far East of Russia ascospores
are one celled, 6–7 Ч 1 µm (it is possible immature).
Ascomata of this species open by irregular apical
cracks, but the mode of ascospore release and transmission is not known. Anamorph was not observed.
We
are very grateful to prof. David Minter (CAB Inter-
national Mycological
Institute, United kingdom) for kind-
ly sending us the decriptions of Fracchiaea broomeana
samples which are kept in the IMI herbarium.
МАКРОМИЦЕТЫ УРБАНИЗИРОВАННЫХ БИОТОПОВ
ВОРОНЕЖСКОЙ ОБЛАСТИ
Афанасьев А.А., Мелькумов Г.М., Кубанкина С.С.
вороне
жский госуниверситет,
воронеж
Биологическое разнообразие грибов различных
промышленных городов Центрального Черноземья стало изучаться сравнительно недавно (Ртищева, 1995; Ртищева, Афанасьев, 1999; Хмелев, Афанасьев, 2000, 2001). В ходе многолетних микологических исследо-ваний выявлен систематический состав макромицетов городских биотопов г. Воронежа и районных центров области (г. Россошь, г. Лиски, г. Борисоглебск, г. Пово-рино, г. Бобров и др.), представленный 187 видами из 82 родов, 36 семейств, 10 порядков.
Рассмотрение системы грибов в ранге порядков по-
казывает преобладание видов порядка Agaricales (97 ви-до
в; 51,9 % от общего числа). Меньшим числом видов
представлены порядки Russulales (32 и 17,1 % соответс-
тв
енно), poriales (28; 15 %), Boletales (17; 9,1 %). Ведущи-
ми
семействами являются Tricholomataceae (42; 22,5 %),
Russulaceae (32; 17,1 %), poriaceae (14; 7,5 %), Boletaceae
(11; 5,9 %), Cortinariaceae (10; 5,3 %), Amanitaceae (8;
4,3 %), Strophariaceae (8; 4,3 %), Coprinaceae (7; 3,7 %),
pleurotaceae (6; 3,2 %), Hymenochaetaceae (5; 2,7 %). На-ибольшее количество видов содержат роды Russula (20; 10
,7 %), Lactarius (12; 6,4 %), Clitocybe (7; 3,7 %).
По своей трофической приуроченности выявленные
виды грибов относятся к сапротрофам (SA), симбиотро-фа
м (SY) и паразитам ( pA). В пределах сапротрофного
типа питания (107; 57,2 %) выделяются группы моно-
сапротрофов, деструктирующих один вид субстрата (81; 43
,3 %): Hymenochaete rubiginosa (Schr.) Lйv., pholiota
destruens (Brond.: fr.) Gill. (ксилосапротрофы), Agaricus
arvensis Schaeff.ex Secr., Lycoperdon perlatum pers.: pers
(гумусовые сапротрофы), Ramaria formosa ( pers.: fr.)
Quйl., Clitocybe clavipes ( pers.: fr.) kumm. (подстилоч-
ны
е сапротрофы), Myxomphalia maura ( fr.: fr.) Hora
(карботрофы) и др., и полисапротрофов (26;13,9 %),
способных утилизировать два и более видов субстрата в пр
еделах сапротрофии: Coprinus atramentarius (Bull.: fr.)
fr., Lyophyllum decastes ( fr.: fr.) Sing., Mycena cinerella
karst., M. acicula (Schaeff.: fr.) kumm. и др.
В симботические с автотрофными организмами спо-
собны в
ступать 73 (39 %) вида: Leccinum aurantiacum
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 50
(Bull. ex St. Am.) S. f. Gray, Xerocomus badius (fr.)
kuehn. et Gilb., Chroogomphus rutilus (Schaeff.: fr.) O. k.
Miller, Amanita phalloides (v aill.: fr.) Secr., Tricholoma
populinum Lange, Scleroderma citrinum pers. и др.
Паразитическим типом питания в условиях урбани-
зированных биотопов Воронежской области обладают
7 (3,7
%) видов: Laetiporus sulphureus (Bull.: fr.) Bond.
et Sing., phellinus igniarius (L. : fr.) Quйl., phellinus
robustus (karst.) Bourd. et Galz и др.
Следует отметить, что многие макромицеты способ-
ны в определённых условиях менять тип питания, либо использовать разные типы питания одновременно (по-литрофные грибы): Paxillus involutus (
Batsch.: fr.) fr.,
Tylopillus felleus ( Bull.: fr.) karst. (образуют микоризу с
хвойными и лиственными деревьями, но могут также питаться за счёт остатков древесины); ino
cybe geoph-
ylla (Sow.: fr .) Quйl., Phallus impudicus per s. (гумусовые сапротрофы, способные образовывать микоризу с хвой-ными и лиственными деревьями); mac
rolepiota procera
(S
cop.: fr.) Sing. (развивается как гумусовый сапротроф,
симбиотроф, реже деструктирует лесную подстилку).
Данные географического анализа позволили отнес-
ти выявленные виды базидиальных макромицетов к 4 географическим элементам и 13 типам ареалов. В био-те урбанизированных биотопов Воронежской области преобладаю
т виды мультирегионального (89; 47,6 %)
и голарктического (71; 38 %) географических элемен-тов, относящиеся к евразиатско-североамериканскому (42; 22,5
%), космополитному (37; 19,8 %) и мультизо-
нально
му (13; 16 %) типам ареалов.
Таким образом, в ценозах, подверженных антропо-
генному влиянию, преобладают виды, имеющие ши-рокую экологическую валентность и широко распро-странённые по Земному шару.
ТАКСОНОМИЧЕСКИЙ СОСТАВ МИКРОМИЦЕТОВ, Р АЗВИВАЮЩИХСЯ
НА ХВОЙНЫХ ПОРОДАХ В УСЛОВИЯХ БЕЛАРУСИ
Беломесяцева Д.Б.
Институт экспериментальной ботаники им. в.Ф. к упревича,
Минск
В 1998–2007 гг. ходе научно-исследовательских ра-
бот по установлению видового состава микромицетов, развивающихся на хвойных культурах были проведены микофлористические исследования в различных бота-нико-географических подзонах республики Беларусь. В ходе маршрутных обследований проводился отбор проб корневой системы и надземных частей растений сосны, ели, можжевельника и пихты. При документи-ровании и обработке гербарных образцов использова-лись общепринятые методы. Выделение микромицетов в культуру проводилось методом мацерации корней.
Согласно полученным данным, с сосной обыкно-
венной связан 331 вид микромицетов. Большая часть из них относится к гифомицетам, как правило, типич-ным с
апротрофам – 47.5 %. Далее следуют аскоми-
цеты
– 31.5 %, и целомицеты – 14.8 %. Значительно
меньше зигомицетов – 4.7 % и последнее место по ко-личеств
у видов занимают ржавчинные грибы – всего
1.5 % от общего числа видов в консорции сосны обык-новенной. В целом достаточно выражена специали-зированность, и около половины всех выявленных на сосне
видов приурочены к хвойным, примерно треть –
непосредственно к сосне обыкновенной.
В консорцию ели европейской входит 209 видов мик-
ромицетов. Распределяются они следующим образом. Еще большая доля, чем в консорции сосны приходится на гифомицеты. Их доля в общем видовом составе со-ст
авляет более 60 %. Значительно меньше аскомицетов,
17.1 %. Количество видов целомицетов относительно
схоже с таковым у сосны – 12.3 %. Зигомицеты занимают
7.4 % и ржавчинные грибы – менее 2 % от всех видов.
На можжевельнике было идентифицировано 173
вида микро
мицетов. Среди них 27,5 % относится к ас-ко
мицетам, 1,7 % составляют возбудители ржавчины,
гифомицеты занимают 54,5 %, целомицеты – 13,5, и зигомицеты 2,8 %.
Значительно меньше видов выявлено на пихте бе-
лой
– всего 56. Однако и в этом случае их процентное
распределение оказалось весьма схожим с сосной (в первую очередь) и с елью. Так, гифомицеты занимают 41,2
% всех видов, аскомицеты – около 25, и целомице-
ты
– 23,5 %. Остальные виды относятся к зигомицетам
(3,2 %) и ржавчинным грибам – примерно 7 %. Фак-тически единственным существенным отличием для пихты оказывается высокая доля целомицетов, во всех ост
альных случаях она не поднимается выше 15 % и
относительно более разнообразный состав возбудите-лей ржавчины.
Возможно, это связано с тем, что среди гербарных
образцов пихты достаточно много собранных в куль-турценозах,
в то время как остальные породы – пре-
имущественно в лесных фитоценозах.
Как видно из вышеизложенного, имеется совершен-
но явная закономерность в таксономическом распреде-лении выявленных видов. Причем, что интересно, она практически не меняется, независимо от того, какое об-ще
е количество образцов было изучено. это означает,
что в том случае, если методика исследований предпо-лагает выявление всех вышеперечисленных групп мик-ромицетов (сплошной скриннинг), то, и при наличии такой большой выборки, как образцы микобиоты сосны об
ыкновенной, и при меньших – как пробы, взятые с
ели и можжевельника, и даже при совсем небольшом количестве изученного материала, как это происходит с пихтой, все равно распределение происходит по одной схеме. Больше всего гифомицетов, затем идут аскоми-
Флора и охрана грибов 51
цеты и целомицеты, в то же время все остальные груп-
пы, включая такую важную в хозяйственном отноше-нии, как ржавчинные, представлены всего несколькими процентами.
ТАКСОНОМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ БИОТЫ ДИСКОМИЦЕТОВ
ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА
Богачева А.В.
Биолого-почвенный институт Дво РАН,
владивосток
Дальний Восток (ДВР) является одним из немно-
гочисленных регионов России, где в последнее время ведутся целенаправленные исследования дискомице-тов. Результаты показали высокий уровень их видового разнообразия. На основании имеющегося гербарного материала и литературных данных нами на территории юга ДВР зарегистрировано 640 видов и 8 внутривидо-вых таксонов дискомицетов, которые относятся к 187 родам, 26 семействам, 4 порядкам, 4 подклассам и 4 кл
ассам. Из них впервые для региона приведено – 372, в
том числе 261 новых для России. На основании собран-ного нами материала было описано 3 новых для науки вида: Scutellinia aurantiaca Bogachеva (Богачева, 2001), Lachnum pseudonudipes Raitv. et Bogacheva, Neobulgaria orientalis Raitv. et Bogacheva (Райтвийр, Богачева, 2007). Богатство дальневосточной биоты наглядно можно про-демонстрировать следующими данными. Из 14 семейств порядка Helotiales, биота юга ДВР включает представи-телей 11 из них. Характерной чертой является большое количество гиалосцифовых грибов (Hyaloscyphaceae, 151 вид). Также доминирующее положение занимают дерматеевые виды (Dermateaceae, 107) и гелоциевые (Helotiaceae, 83). На долю этих крупных семейств при-хо
дится 62 % всего объема этой группы. Средние по объ-
ем
у семейства – Sclerotiniaceae, Geoglossaceae, представ-
лены полутора десятками видов каждое, за исключением представителей семейства Rutstroemiaceae (из 100 видов, объединенных в нем, в биоте ДВР отмечено 7); показа-те
ли для более мелких семейств – Bulgariaceae (моно-
ти
пное), Cudoniaceae (из 10 – 4), Leotiaceae (из 13 – 2),
phacidiaceae (из 3 – 2), vibrisseaceae (из 14 – 2). Ядро био-
ты иноперкулятных дискомицетов составляют 3 семейс-тв
а – Hyaloscyphaceae, Dermateaceae и Helotiaceae. Ана-
лиз репрезентативности иноперкулятных дискомицетов в биоте юга ДВР показал доминирование следующих родов: Lachnum (44 видов), Mollisia (28), Hymenoscyphus (25), Lachnellula (16), Dermea (12), Dasyscyphus (9), Tapesia (9). Остальные 112 родов представлены 1–8 ви
дами. Ведущие роды – традиционные деструкторы
растительного опада, указывают на сбалансированный процесс его утилизации в дальневосточных лесах. Пред-ст
авители порядка Thelebolales – типичные копротроф-
ные широко распространенные грибы. Из включенных в семейство Thelebolaceae 15 видов из 5 родов, в биоте региона отмечено 6: Ascozonus (1), Thelebolus (5). Опер-кулятные дискомицеты в своем подавляющем большинс-тв
е – пионерные виды, заселяющие оголенную почву.
Дальневосточная биота содержит 231 вид из 63 родов, включая 13 видов с неясным местоположением в объеме по
рядка pezizales. Из 15 семейств порядка в дальневос-
точных лесах встречаются представители 12. Традицион-но превалируют представители двух обширных семейств pyr
onemataceae (87 видов) и pezizaceae (58). Отмечено
11 видов рода Ascobolus, 10 – из Saccobolus семейства
Ascobolaceae и Ascodesmis sphaerospora из небольшого семейства Ascodesmidaceae. Анализ репрезентативности оперкулятных дискомицетов в биоте ДВР показал доми-ни
рование следующих родов: peziza (49), Scutellinia (21),
Helvella (19), Ascobolus (11), Coprotus (10), Saccobolus (10). Остальные 57 родов представлены 1–7 видами. Ве-ду
щие роды – активные участники почвообразования,
деструкторы древесины и копрофилы. это указывает
на жизнеспособность дальневосточных лесов, на их вы-сокую заселенность, в первую очередь, копытными, а также хищными животными. Ядро биоты оперкулятных ди
скомицетов составляют 2 семейства – pyronemataceae
и pezizaceae. На территории юга ДВР зарегистрировано 2
вида специфических безпарафизных грибов рода Neolecta из недавно обособленного семейства Neolectaceae поряд-ка Neolectales самостоятельного класса Neolectomycetes. Виды чрезвычайно редкие, сохранившиеся в регионе с доледникового периода.
ДИСКОМИЦЕТЫ БОЛЬШЕХЕХЦИРСКОГО ЗАПОВЕДНИКА
Богачева А.В.
Биолого-почвенный институт Дво РАН,
владивосток
Большехехцирский государственный заповедник
расположен на западном останцовом отроге горной системы Сихотэ-Алинь. В прошлом горно-лесные мас-сивы подверглись сильному хозяйственному воздейс-твию. После организации здесь охранной зоны нача-лись процессы лесовосстановления. Практически не
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 52
нарушенные природные комплексы занимают не более
1/3 территории заповедника. это в основном пихтово-
еловые, кедрово-еловые леса и небольшие участки ка-менноберезников. Особенно сильные изменения пре-терпели лесные экосистемы равнин. Лиственничники сменились белоберезниками и осоково-вейниковыми лугами; кедрово-широколиственные леса предгорий и нижней части горных склонов тоже испытали много-кратное воздействие рубок и пожаров.
Нами были обследованы основные растительные со-
общества заповедника. Наблюдения за ходом процесса лесовосстановления и участием в них грибов дали бо-гатый материал, позволяющий судить о роли грибов, в частности дискомицетов, в биогеоценозах. В результате проведенных работ выявлена систематическая структура микобиоты Большехехцирского заповедника. На сегод-няшний день она включает 277 видов дискомицетов из 105 родов 19 семейств 3 порядков 2 подклассов. Анали-тическая обработка полученных результатов для Больше-хехцирского заповедника показала полный спектр видо-вого разнообразия грибов, развивающихся на древесных породах, что позволило получить достоверную инфор-мацию по экологическому состоянию территорий. Опре-делены группы грибов, ассоциированных с отдельными древесными породами. Несомненным лидером в данном отношении является береза из твердолиственных деревь-ев. Более 60 видов дискомицетов напрямую или опосре-дованно связано с этой породой.
Спектр видов грибов, ассоциированных с хвойны-
ми породами в Большехехцирском заповеднике весь-ма широк. Отмечен целый ряд видов дискомицетов с высокой экологической валентностью. Освоение ими разнообразных субстратов, широкое распространение, высокий уровень численности, что дает основание ут-верждать, что это эволюционно прогрессивные, био-логически процветающие виды.
Наряду с этим на территории Большехехцирского
заповедника определен ряд редких видов с ограничен-ным распространением. Полученные данные вносят существенный вклад в проблему изучения и сохране-ния биоразнообразия региона. Также дополнена ин-формация о биологическом разнообразии грибов на Дальнем Востоке. Определены группы гемерофиль-ных и
гемерофобных организмов. Виды рода peziza
fr.: Р . arvernensis Boud., p. badiofusca (Boud.) Dennis, p.
domiciliana Cooke, p. verrucosa (v elen.) Smitska и неко-
торые другие виды грибов, развивающиеся на костри-щах, почве в местах скопления мочевины, на различ-ных техногенных остатках, по-видимому, расширяют область своего обитания благодаря воздействию че-ловека на природу. Относительно видов грибов, ис-чезающих или исчезнувших в результате воздействия человека на естественную растительность, можно вы-сказать предположение, что узкоспециализированные сапротрофные виды или ярко выраженные монофаги наиболее уязвимы. Среди дискомицетов таких грибов мало. В пример можно привести найденные на терри-тории заповедника Sarcosoma amurense, развивающу-юся только на елях, и Bulgaria inquinans, приурочен-ную к дубам.
НОВЫЕ И РЕДКИЕ ДЛЯ РОССИИ ВИДЫ ВОДНЫХ И
ВОДНО-ВОЗДУШНЫХ ГИФОМИЦЕТОВ
Бодягин В.В.
кафедра микологии и альгологии
Моск
овского государственного университета им. М.в. ломоносова,
Москва
Водные или амфибийные гифомицеты встречаются
практически во всех пресноводных местообитаниях. Они обеспечивают разложение растительного опада в водоемах, выполняя, таким образом, важную функцию в круговороте биогенных элементов в водных экосис-темах.
Фрагментарные сведения о видовом составе водных
и водно-воздушных гифомицетов известны лишь для от
дельных регионов в европейской части России – на
Кольском полуострове, в Ленинградской, Воронежской, Вологодской областях, в Поволжье, в окрестностях г. Воркуты, в Московской области на территории Звениго-ро
дской биостанции (ЗБС) МГУ им. C.Н. Скадовского.
Исследование биоразнообразия водных гифоми-
цетов было проведено в 2004–2007г.г. в лесопарках г. Москвы и на территории ЗБС. Для выявления видо-вого состава использовали листовой опад, собранный в водоемах, который инкубировали в чашках Петри и пену, фик
сированную 4 % формалином.В результате проведённых исследований впер-
вые на территории России были найдены следующие ви
ды водных гифомицетов – camposporium pellucidum
(Grove) Hughes , en antioptera tetra-alata Descals , Flabel-
lospora verticillata Alasoadura , is thmotricladia britannica
Descals , ma gdalaenaea monogramma Arnaud, Tetracla-
dium apiense Sinclair et Eicker и Varicosporium delicatum
Iqbal . На территории России до наших исследований
Jaculispora submersa Hudson et Ingold была отмечена
только в Хабаровском крае. Следует отметить, что e.
te
tra-alata, F . verticillata, i. britannica, m. monogramma ,
T. apiense были встречены однократно, в то время как
c.
pellucidum и V .delicatum были часто встречающимися
видами. c. pellucidum, F . verticillata, T. apiense б ыли най-
дены при инкубации опавшей листвы, а c. pellucidum
также и в виде отделившихся конидий в пене, осталь-ные виды были обнаружены только в пене.
Группа водно-воздушных гифомицетов практичес-
ки не изучена на территории России, имеются только
Флора и охрана грибов 53
отдельные сообщения об обнаружении представите-
лей этой группы. Из группы водно-воздушных гифо-мицетов на территории России в 2006 г. был впервые обнаружен Helicodendron giganteum Glen Bott. Пред-
ставители этого вида массово встречались на листовом опаде, собранном в водах медленно текущего ручья в парке Лосиный остров (г. Москва) в сентябре 2006 г., а в остальные сезоны этот вид в этом водоеме не был обнаружен. В других водоемах H. giganteum не был
выявлен.
В связи со слабой степенью изученности водных и
водно-воздушных гифомицетов на территории России вероятны дальнейшие находки видов новых как для России, так и для науки.
ИССЛЕДОВАНИЯ ГРИБОВ В БЕЛОМ МОРЕ
Бубнова Е.Н., Киреев Я.В.,
Коновалова О.П., Порхунова Н.Н.
Биол
огический факультет МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
Белое море – внутренний водоём, относящийся к
бассейну Северного Ледовитого океана; частично он расположен за северным полярным кругом. В целом оно отличается суровыми условиями (низкая темпе-ратура и прозрачность воды, долгий ледовый период). Другой его особенностью является большое количес-тво пресных стоков и связанная, в том числе, с этим пониженная солёность воды (18–28‰). Кроме подпре-снения, стоки ответственны за вынос в море огромно-го количества терригенного материала. Исследования грибов в Белом море начались с работы М.В. Согонова и О.Е. Марфениной (1999). В этой работе было пред-ставлено исследование микобиоты почв приморских лугов в Кандалакшском заливе Белого моря. Иссле-дование проводили с использование культуральных методов, и как одну из основных особенностей полу-ченного видового комплекса авторы указали высокую встречаемость грибов из рода acr
emonium Link. Даль-
нейшие исследования проводятся также в основном с использованием культуральных методов. Кроме того, используются прямые наблюдения для обнаружения облигатно-морских грибов и методы световой и элек-тронной микроскопии и молекулярно-генетического анализа. Все работы проводятся в Кандалакшском заливе, на базе Беломорской биостанции МГУ . К на-стоящему времени довольно полно охарактеризована микобиота литорали: исследованы грибы в грунтах, в маршевых почвах, на талломах водорослей-мак-рофтитов, на корнях и надземных частях некоторых высших литоральных растений. Из особенностей грибного населения исследованных местообитаний отметим следующие: при прямых наблюдениях очень редко удаётся наблюдать облигатно-морские грибы в традиционном понимании. Учитывая объём наблюде-ний, можно предположить, что в данном бассейне они могут не играть такой заметной роли, как, например, в тропических и субтропических морях. Абсолютное большинство выделенных в культуру видов относится к группе несовершенных гифомицетов; представители других групп, как правило, относительно малочис-ленны. Во всех исследованных местообитаниях пре-обладают грибы терригенного происхождения; за всё время исследований выделялись представители толь-ко четырёх видов облигатно-морских грибов: acr
emo-
nium fuci Summerb., z uccaro et W. Gams, dendryphiella
arenaria Nicot, d. salina (G.k. Sutherland) pugh et Nicot
и Stagonosporopsis salicorniae (Magnus) Died. Показа-
но, что ручьи выносят в литоральные местообитания большое количество пропагул грибов, характерных для почв наземных ценозов; в бесстоковых участках их численность и разнообразие значительно ниже. По-казано, что в почвах литорали и на макрофитах пре-обладают cephalosporium
-подобные несовершенные
грибы, а также виды рода dendryphiella , некоторые
другие темноокрашенные гифомицеты и стерильные мицелии. Кроме того, мы отмечали, что в некоторых литора
льных местообитаниях (в первую очередь – в
слизистых чехлах водорослей-макрофитов) высока численность дрожжевых грибов. Всестороннее изу-чение этой группы грибов, так же как и обитающих в море cephalosporium
-подобных анаморф представ-
ляется нам весьма перспективным направлением. Ис-следования последнего времени посвящены с одной стороны уточнению таксономического положения не-ко
торых выделяемых грибов, а с другой – изучению
ассоциаций литоральных макрофитов с эндофитными грибами. В ходе этих работ была показана необосно-ванность перенесения морских видов рода dendryphi-
ella
в род Scolecobasidium E. v. Abbott. Кроме того, в
ходе этих работ были обнаружены псевдотеции эндо-фитного гриба mycophycias
ascophylli (Cotton) kohl. et
volkm.-kohl. на рецептакулах скальной формы asco-
phyllum nodosum; уточнены особенности его жизнен-ного цикла и впервые обнаружен мицелий эндофит-ного гриба в талломах бенто-плейстонной и маршевой форм этой водоросли. Кроме того, впервые в таком хо-лодном районе показано наличие структур везикуляр-но-арбускулярной микоризы в корнях некоторых рас-тений, доминирующих на приморских лугах; в корнях ещё о
дного доминанта этих местообитаний – Triglochin
maritimum обнаружены гифы темноокрашенного эндо-фита. В целом отметим, что в ходе этих исследований открываются новые перспективы и появляются новые задачи, решение многих из которых будет способство-вать понимаю функционирования многих биосистем, и не только собственно Белого моря.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 54
В сообщении представлены результаты первого ис-
следования микобиоты донных грунтов Белого моря;
данная работа является частью комплексных исследо-ваний беломорского бентоса. Образцы грунтов для оп-ределения численности и выявления видового состава грибов о
тбирали во время рейса эС «Беломор» 18–20
июля 2006 на десяти станциях в Кандалакшском зали-ве (пролив Великая Салма) с глубин 54–108 м. Матери-ал на каждой станции отбирали из грунта, поднятого в 1–3-кратной повторности дночерпателем Ван-Вина; общий объём образца составлял 2–6 см
3. Образцы вы-
севали на агаризованные питательные среды на при-родной морской воде солёностью 24‰. Численность грибных пропагул составляет от десятков (nЧ10) до сотен (nЧ102) на 1 см3 исходного грунта. Не показа-но какой-либо связи полученных значений числен-ности с известными характеристиками точек отбора: глубиной, положением на рельефе и типом грунта. Из всех исследованных образцов выделено 599 изолятов мицелиальных грибов. Все выделенные культуры мы отнесли к 73 морфотипам, 65 из которых идентифи-цирова
ли до уровня вида, а 8 – только до уровня рода
(всего 24 рода). Кроме того, было выделено 8 различ-ных изолятов стерильных мицелиев. Подавляющее большинство выделенных грибов относится к несо-вершенным
гифомицетам – 551 изолят, 61 вид из 15
родов. Другие группы – это аскомицеты (22 изолята из 3 родов), несовершенные пикнидиальные грибы (12 из
олятов из 1 рода phoma Sacc.) и мукоровые зи-
гомицеты (6 изолятов из 3 родов). Из родов наиболее разнообразен penicillium
Link – 25 видов, менее богат
Acremonim Link – 12 морфотипов (7 видов и 5 иденти-фицировано
до уровня рода), а также Trichoderma pers.
(5 видов) и Cladosporium Link (5 морфотипов, 2 вида). Остальные роды представлены 3 и менее морфотипа-ми. Видовой состав грибов в отдельных точках значи-тельно различается: ни один вид не был обнаружен во всех исследованных образцах, большая часть видов обнаруживалась только в одном из образцов. Вместе с тем, какой-либо связи структуры видовых комплексов с известными характеристиками точек отбора не пока-зано. В группу видов, доминирующих (встречаемость не
менее 60 %) в исследованных грунтах в целом вхо-
дят: Geomyces pannorum (Link) Sigler & J.W. Carmich. var. pannorum (вместе с изолятами, давшими в культу-ре
половое спороношение – pseudogymnoascus roseus
Raillo), penicillium chrysogenum Thom, p. expansum
Link, p. nalgiovense Laxa, Tolypocladium inflatum W.
Gams и Trichoderma viride pers. Из перечисленных ви-
до
в наибольшее обилие показано для p. chrysogenum
(15 %); для p. expansum – 9,8 %, T. inflatum – 6,8 %,
Geomyces pannorum + pseudogymnoascus roseus – 6,3 %,
p. nalgiovense – 3,8 %; для T. viride – 2,3 %. Таким об-
разом, здесь доминируют или виды, обычные в почвах наземных ценозов в данном районе (G. pannorum, T. inflatum, T. viride), или обильно спороносящие космопо-ли
тные виды-убиквисты ( penicillium spp.). Для видового
состава в целом, так же как и для комплекса доминантов характерно преобладание грибов терригенного про-исхождения, обычных в окрестных почвах или обиль-носпороносящих космополитов. Вместе с тем, есть ряд собственных особенностей видового состава грибов в исследованных грунтах. Во-первых, было выделено три облигатно-морских вида грибов: Acremonium fuci Su
mmerb., zuccaro et W. Gams, Dendryphiella arenaria
Nicot и D. salina (G. k. Sutherland) pugh et Nicot. Кроме
собственно морских видов, другой группой характер-ных видов являются Cephalosporium-подобные ана-морфы, в основном, типа Acremonium, а также виды из ро
дов Emericellopsis и pseudeurotium, имеющие такие
анаморфы. Для исследованных грунтов показано высо-кое разнообразие грибов этой группы, хотя большинс-тво выделенных морфотипов встречалось единично; кроме того, значительная часть изолятов не была иден-тифицирована до вида, т.к. не может быть достоверно отнесена к какому-либо из известных видов.ГРИБЫ ДОННЫХ ГРУНТОВ КАНДАЛАКШСКОГО ЗАЛИВА
БЕЛОГО МОРЯ
Бубнова Е.Н.
Биологический факультет МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
ФИЛЛОТРОФНЫЕ ПРЕДСТАВИТЕЛИ АНАМОРФНОГО РОДА pHOMA fR.
НА ДРЕВЕСНЫХ Р АСТЕНИЯХ В РОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ
Булгаков Т.С.
Южный федеральный университет,
Ростов-на-Дону
В рамках изучениях микобиоты древесных расте-
ний Ростовской области нами было выявлено 7 фил-лотрофных представителей крупного анаморфного рода Phoma fr
., вызывающих пятнистости листьев и
отмирание молодых побегов. Два филлотрофных вида Phoma являются специализированными паразитами, развивающимися лишь на определённом виде расте-ний: Phoma sambuci-nigrae (Sacc.) E. Monte, Bridge et
B. Sutton [= Phyllosticta sambucina Allesch.] на Sambu-
cus nigra и Phoma viburnicola Oudem. на Viburnum opu-
Флора и охрана грибов 55
lus. Более специализированный гриб Phoma asiatica
(Cooke) Aa [= Phyllosticta cotoneastri Allesch.] поража-
ет только представителей рода cotoneaster (отмечен на
14 видах кизильников), а Phoma glomerata (Corda) Wol-
lenw. et Hochapfel [= Phyllosticta westendorpii Thьm.] –
зафиксирован лишь на четырёх представителях рода
berberis
.
Наибольшее значение имеют три широко распро-
странённых плюриворных вида, которые на протя-жении XIX-XX вв. были многократно описаны под разными названиями на многих видах растений, чаще всего как различные виды Phyllosticta sensu lato (Aa,
vanev, 2002; Boerema et al., 2003).
Пов
семестно распространённый плюриворный
гриб Phoma pomorum Thьm. [= Phyllosticta pruni-avi-
um Allesch., = Ph. prunicola Sacc., = Ph. circumscissa
Cooke, = Ph. pruni-spinosae Allesch., = Ph. pyrina Sacc.]
отмечен на 15 видах растений сем. rosaceae , однако
в условиях Ростовской области существенной ущерба не причиняет.
Второй
плюриворный филлотроф – Phoma macros-
toma Mont. [= Phyllosticta berberidis Rabenh., = Ph. mali
prill.
et Delacr., = Ph. spireae-salicifoliae kabбt et Bubбk]
сравнительно редко развивается на листьях, хотя он за-фиксирован на 27 видах древесных растений из родов berberis
, malus , Spiraea.
Наиболее значимый и повсеместно встречающийся
филлотрофный гриб Phoma exigua Desm. в Ростовской
области обнаружен на 18 видах древесных растений (в скобках указаны синонимы этого вида гриба по Aa, vanev,
2002): actinidia arguta [= Phyllosticta actinidiae
Ablak. et k
oval], видах deutia и Philadelphus [= Phyl-losticta coronaria pass.], видах Sambucus [= Phyllosticta
sambuci Desm.], Paeonia suffruticosa [= Phyllosticta ar-
borea Cejp.], а также практически на многих культиви-руемых в области видах Forsythia [= Phyllosticta for-
sythiae Sacc.], lonicera
[= Phyllosticta caprifolii (Opiz)
Sacc.], Syringa [= Phyllosticta syringicola fautrey], V i-
burnum [= Phyllosticta viburni Roum., = Ph. lantanoides
peck].
По нашим наблюдениям, Phoma exigua часто
развивается совместно с другими грибными патогена-ми перечисленных растений, а в дискомфортных для растений-хозяев условиях городских посадок законо-мерно замещает специализированные виды филлот-рофных грибов: ascochyta
syringae Bres. на Syringa
vulgaris, Phoma sambuci-nigrae (Sacc.) E. Monte, Bridge et B. Sutton [= Phyllosticta sambucina Allesch.] на Sam-
bucus nigra, Phoma viburnicola Oudem. [= Phyllosticta
opuli Sacc.] на Viburnum opulus.
Согласно современным данным и нашим исследо-
ваниям, к числу филлотрофных Phoma с относительно
узкой специализацией, по-видимому, должны быть от-несены также следующие виды Phyllosticta sensu lato,
выявленные на древесных растениях в Ростовской об-ласти (всего 20 видов): Ph. argyrea Speg., Ph. aucupar-
iae Thьm. [= Ph. sorbi Westend.], Ph. cinerea pass., Ph.
caprifolii
(Opiz) Sacc., Ph. corylaria Sacc., Ph. juglandis
(DC.) Sacc., Ph. lacerans pass., Ph. mahaleb Thьm., Ph.
menispermicola Tehon et E.Y . Daniels, Ph. negundinis
Sacc. et Speg., Ph. padi Brunaud, Ph. paupercula peck,
Ph.
pruni-domesticae voglino, Ph. pseudoplatani Sacc.,
Ph. quercus Sacc. et Speg., Ph. quinquefoliae Allesch., Ph.
rosae Desm., Ph. schizandrae Mitrosch., Ph. ulmi West-
end., Ph. salicicola Thьm.
ПЕРВЫЕ СВЕДЕНИЯ О МИКОБИОТЕ ДЕРЕВОР АЗРУШАЮЩИХ
ГРИБОВ ТИГИРЕКСКОГО ЗАПОВЕДНИКА
Власенко В.А.
Центральный сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
Нами были начаты исследования афиллофоро-
идных дереворазрушающих грибов Тигирекского заповедника в связи с их слабой изученностью. До начала наших исследований имелись сведения о нахождении двух видов трутовых грибов, поэтому мы считаем интересным опубликовать полученные нами данные. Данная работа является началом пол-ной инвентаризации микобиоты столь интересной и важной группы грибов, как в плане их хозяйствен-ной, так и экологической роли, на исследуемой тер-ритории. Решение данной задачи очень актуально, так как дереворазрушающие грибы являются обяза-тельным компонентом сообществ древесных и кус-тарниковых растений. В связи с переосмыслением проблемы биоразнообразия, особенно его экологи-ческой роли, информация о структуре микобиоты является прямым свидетельством стабильности эко-систем. Тигирекский заповедник находится на землях Тре-
тьяковского, Змеиногорского и Краснощековского районов Алтайского края. Его территория лежит на периферии западной части Алтайской горной страны в левобережье бассейна Верхнего Чарыша. Основ-ной массив территории заповедника занимает запад-ную часть Тигирецкого хребта. Заповедник состоит из трех обособленных участков, из которых нами был осмотрен Тигирекский. Данная территория относится к Западно-Алтайской провинции, Тигирецко-Бащелак-скому таежно-лесостепному округу, Тигирецкому та-ежному черневому району.
В растительном покрове преобладают смешанные
осиново-пихтовые, березово-пихтовые леса, в составе древостоев довольно часто встречается лиственница сибирская. В охранной зоне, примыкающей к Тигирек-скому участку заповедника в окрестности п. Тигирек встречаются березовые и пойменные ивово-березовые
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 56
леса, обильны заросли кустарников, образованные ка-
раганой, черемухой, боярышником, сибиркой алтайс-кой. Данные ассоциации и были нами исследованы в июле 2007 года, несколько видов указаны по сборам 2005 года.
В ниже приведенном списке виды расположены в
алфавитном порядке, согласно их распределению по характеру поражаемой породы. На лиственных поро-дах мы встретили: art
omyces pyxidatus (pers.) Julich,
bjerkandera adusta (Willd.) p. karst., cerrena unicolor
(Bull.) Murrill, cyt idia salicina (fr.) Burt, climacocystis
borealis (fr .) kotl. et pouzar, climacodon septentriona-
lis (fr .) p. karst., coriolopsis trogii (Berk.) Domaсski,
dae
dalea quercina (L.) pers., daedaleopsis confragosa
(Bolton) J. Schrцt., dae daleopsis tricolor (Bull.) Bond-
artsev et Singer, dat ronia stereoides (fr.) Ryvarden,
Fomes fomentarius ( L.) J.J. kickx, Fomitopsis pinico-
la (Sw.) p. karst., Ganoderma applanatum (pe rs.) pat.,
Gloeoporus dichrous (fr .) Bres., Hericium coralloides
(S
cop.) pers., Hymenochaete tabacina (Sowerby) Lйv.,
ino
notus obliquus (Ach. : pers.) pilбt, inonotus rheades
(per
s.) Bondartsev et Singer, irpex lacteus (fr.) fr., ir-
pex sinuosus fr., la etiporus sulphureus (Bull.) Murrill,
len
zites betulina (L.) fr., lopharia spadicea (pers.) Boi-din, Piptoporus betulinus ( Bull.) p. karst., Plicaturopsis
crispa (pe rs.) D. A. Reid, Polyporus alveolarius (Bosc)
fr.
, Polyporus arcularius (B atsch) fr., Polyporus badius
(per
s.) Schw., Polyporus melanopus (pe rs.) fr., Polypo-
rus pseudobetulinus ( Murashk. ex pilбt) Thorn, kotir. et
Niemelд, Polyporus umbellatus (per s.) fr., Polyporus
varius (pe rs.) fr., Pycnoporellus fulgens (fr .) Donk, Pyc-
noporus cinnabarinus ( Jacq.) fr., Phellinus igniarius (L.)
Quйl., Phellinus lonicerinus (Bondartsev) Bondartsev
et Singer, Phellinus nigricans (fr .) p. karst., Phellinus
punctatus (fr .) pilбt, Phellinus tremulae (Bondartsev)
Bo
ndartsev et p.N. Borisov, Stereum hirsutum (Willd.)
per
s., Stereum subtomentosum pou zar, Trametes gibbosa
(per
s.) fr., Trametes hirsuta ( Wulfen) pilбt, Trametes
ochracea (pe rs.) Gilb. et Ryvarden, Trametes pubescens
(S
chumach.) pilбt, Trametes suaveolens ( L.) fr., Trame-
tes versicolor (L.) Lloyd. На хвойных породах встреча-
ются: Fomitopsis officinalis (vil l.) Bondartsev et Singer,
irpicodon pendulus (Alb. et Schwein.) pouzar, Phellinus
hartigii (Allesch. et Schnabl) pa t., Phellinus viticola
(Schwein.) Donk, Trichaptum abietinum (Dicks.) Ryvar-
den. Как на лиственных, так и на хвойных породах:
Gloeophyllum sepiarium ( Wulfen) p. karst., Schizophyl-
lum commune fr.
ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ МИКСОМИЦЕТОВ
НА ТЕРРИТОРИИ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ
Власенко А.В.
Центральный сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
Историю изучения миксомицетов на территории За-
падной Сибири условно можно разделить на два пери-ода. Первый период характеризуется активным накоп-лением материала по слизевикам в Томской области и на террит
ории Алтая. этот период связан с приходом в
Томский университет Н. Н. Лаврова и созданием в нем кафе
дры фитопатологии и микробиологии (1928 г.).
Более поздние исследования возобновились в конце 80-х (второй период), изучение миксомицетов прово-дилось в Алтайском заповеднике (Новожилов, 1987; Барсукова, 1995, 2000) и на севере Западной Сибири (Новожилов, 1998, 1999).
Первые планомерные исследования миксомицетов
на территории Западной Сибири были проведены Н. Н. Лавровым в окрестностях города Томска. В результате исследований опубликована статья «Материалы для флоры слизевиков Сибири, 1. Слизевики окрестностей города Томска». В данной работе приводится список 55 видов миксомицетов. В тоже время проводилось изучение миксомицетов Алтая. Полученные сведения опубликованы в статье «Материалы для Флоры слизе-виков Сибири, 2. Слизевики Северного и Центрально-го Алтая». В работе приводится список 58 видов. По результатам многолетних сборов Н. Н Лавровым был составлен библиографический систематический суб-стратный карточный каталог миксомицетов Западной Сибири и опубликована статья «Новые формы сли-зевиков Сибири» (Лавров, 1938). Каталог гербария в настоящее время хранится в лаборатории низших рас-тений Центрального Сибирского Ботанического сада СО Р АН.
В результате изучения миксомицетов во время ра-
боты микологического отряда экспедиции БИНа им В. Л. Комарова АН СССР на территории Алтайского за
поведника в июле – августе 1985 г. Ю.К. Новожи-
ловым было выявлено 36 видов, из них 3 новых вида для России: cri
braria elegans Berk. et M.A. Curtis,
c. minutissima Schw., Physarum psitacinum Ditmar in
Sturm (Новожилов, 1987). Там же в 1995–1997 гг. Т. Н. Барсуковой собраны 67 видов миксомицетов, не-которые из которых оказалась редкими для террито-рии России. Кроме уже известных видов для Сибири ранее выявленных Ю. К. Новожиловым (1987, 1993), были отмечены новые находки, как lic
ea variabilis
Schr., Tubifera microsperma (Berk. et Curt.) Martin, Re-
ticularia lycoperdon Bull., lycogala flavofuscum (Ehr.)
Rost., lamproderma atrosporum Meylan, cra terium
minutum (Leers) fr ., Fuligo cinera (Schw.) Morgan,
muc
ilago crustacea Wigg., а также ряд видов из родов
Trichia , Stemonitis , Physarum и др. (Барсукова, 2000).
Данные о видовом разнообразии и распространении
миксомицетов на севере Западной Сибири представле-
Флора и охрана грибов 57
ны в книге «Грибы Российской Арктики» (1999), где
приводится аннотированный список 44 видов миксо-мицетов для Тюменской области и Полярного Урала.
Таким образом, анализ литературы показал, что
биота миксомицетов на территории Западной Сиби-ри изучена фрагментарно и крайне недостаточно. На юге Западной Сибири коллекционные сборы проводи-лись главным образом в Томской области и на севере Горного Алтая, территория же Алтайского края прак-тически не охвачена подобными исследованиями. В связи с этим изучение таксономического разнообразия и экологии миксомицетов на юге Западной Сибири ос-тается актуальной задачей. Особый интерес представ-ляют заповедные территории, где наиболее сохранены естественные биоценозы. Одним из таких заповедни-ков является государственный природный заповедник «Тигирекский», который расположен в юго-западной части Алтайского края.
В растительном покрове на территории заповедни-
ка широко представлена черневая тайга. Таежные ус-ловия являются наиболее оптимальными для развития миксомицетов.
Данные о миксомицетах Тигирекского заповедника
отсутствуют. Поэтому в 2007 году нами начато изуче-ние миксомицетов на территории Тигирекского запо-ведника.
ТРУТОВЫЕ ГРИБЫ ЛЕСНОГО МАССИВА В ОКРЕСТНОСТЯХ
ПОСЕЛКА ДОБРЫЙ (ОР ЛОВСКАЯ ОБЛАСТЬ)
Волобуев С.В.
орловский государственный университет,
орёл
Трутовые грибы, будучи важными гетеротрофными
компонентами лесных экосистем, достаточно широко распространены. Вместе с тем, территория Орловской области в микологическом отношении остается слабо-изученной. Целью данной работы является установле-ние видового состава и выявление экологических осо-бенностей трутовых грибов конкретного биотопа.
Исследованная территория включает лесной мас-
сив, расположенный в 24 км к югу от города Орел, в окрестностях поселка Добрый. Изучаемый биоценоз представлен дубравой с примесью березы и осины, сменяющейся сосновым бором в восточной своей час-ти и бере
зняком – в северной.
Сбор грибов осуществлялся маршрутным методом
в марте-апреле 2007 года. Идентификация собранных образцов проводилась по определителям М. А. Бон-дарцевой, э
. Х. Пармасто (1986), М. А. Бондарцевой
(1998), Т. Ниемеля (2001). На исследованной террито-рии выявлено 18 видов трутовых грибов, относящихся к 15 родам, 8 семействам и 3 порядкам. Систематичес-кое положение и названия видов приведены в соот-ветствии с данными электронного ресурса http://www.indexfungorum.org.
Ведущими по численности видов семействами
на из
ученной территории являются polyporaceae (6
видов)
– coriolopsis trogii (Berk.) Domaсski, daedale-
opsis
confragosa (Bolton) J. Schrцt., Fomes fomentarius
(L.) J.J. k
ickx, Polyporus brumalis ( pers.) fr., Trametes
ochracea (pers.) Gilb. et Ryvarden, T richaptum biforme
(f
r.) Ryvarden – и Hymenochaetaceae (5 видов) – Hy-
menochaete
rubiginosa (Dicks.) Lйv., Phellinus concha-
tus (pers.) Quйl., P . ferruginosus (Schrad.) p at., P . ignia-
rius (L.) Quйl., P . tremulae (Bondartsev) Bondartsev et
p.N. Borisov
. 6 семейств трутовых грибов, отмеченных
на исследованной территории, представлены 1–2 ви-дами: Gloeoporus dichrous (
fr.) Bres. (Meruliaceae), bjerkandera adusta (Willd.) p. karst. (Hapalopilaceae),
antrodiella semisupina (Berk. et M.A. Curtis) Ryvarden
(Steccherinaceae), Schizopora paradoxa (Schrad.) Donk
(Schizoporaceae), Fomitopsis pinicola (Sw .) p. karst.,
Piptoporus betulinus (Bull.) p. k arst. (fomitopsidaceae),
Stereum hirsutum (Willd.) pers. (Stereaceae).
Среди выявленных грибов преобладают сапрофит-
ные к
силотрофы (14 видов, 78 %) на пнях, валеже и
сухостое различных деревьев и кустарников: на Betula pendula Roth
отмечено 6 видов, populus tremula L. – 3,
Quercus robur L. – 1, Salix caprea L. – 1, Corylus avellana L. – 4. Паразитами живых деревьев (Salix caprea, Quercus robur, populus tremula) являются phellinus
conchatus, p. igniarius, p. tremulae, Bjerkandera adusta (4
вида, 22 %).
Трутовые грибы играют важную роль в процессе
разложения древесины. В исследованном ценозе 15 видов (83
%) дереворазрушающих грибов, расщепляя
лигнин, вызывают белую коррозионную гниль, и лишь такие
виды, как fomitopsis pinicola, Hymenochaete
rubiginosa, piptoporus betulinus осуществляют деструк-
цию целлюлозы и относятся к грибам бурой гнили (17
%).
Различная потребность трутовых грибов во влаж-
ности субстрата и окружающего воздуха позволяет выделять экологические группы гигрофилов, мезо-филов и ксерофилов. Ведущее место в исследованной биоте
занимают мезофилы – 9 видов (50 %). К группе
ксерофилов относятся 5 видов (28 %), а гигрофилы представлены 4 видами (22 %).
Таким образом, на исследованной территории
выявлено и изучено 18 видов трутовых грибов, оп-ределена экологическая структура выявленной био-ты по отношению к субстрату и влаге, проанали-зирована частота встречаемости грибов с разными типами гнили.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 58
В дендрариях и ботанических садах обычно высо-
ка доля интродуцированных видов древесных расте-
ний. Процесс их развития в культуре может зависеть не только от климата, соблюдения условий места по-садки и определенного ухода, но и от наличия трофи-чески связанных с деревьями видов грибов, особенно симбиотрофов и паразитов. С этой точки зрения изу-чение биоты грибов в дендрариях и выявление видов микоризообразователей представляет интерес. С 2004 по 2006 года в ботаническом саду РГУ им. Им. Канта, площадью 16 га, проводилось исследование видового состава агарикоидных и гастероидных базидиомице-тов, в ходе которого обнаружили 159 видов грибов. В таксономической структуре микобиоты лидируют семейства Tricholomataceae (64 вида) и Russulaceae (29 видов). В трофической структуре преобладают ми
коризообразователи (37 %), подстилочные (22 %)
и гумусовые сапротрофы (20 %). Доля гумусовых
сапротрофов достаточно велика и согласуется с пло-дородием почв сада. Значительная часть парка заня-та куртинами с разными видами лиственных пород, под которыми почва более плодородна: грабы, буки, лещины, дубы, липы. Под этими растениями обнару-жено также наибольшее количество симбитрофов из порядков Russulales и Boletales, особенно под мест-ны
ми видами: Carpinus betulus L. (10 видов), fagus
sylvatica L. (9), Corylus avellana L. (2), Quercus robur L.
(7). С березой повислой (Betula pendula L.) связаны микоризообразователи (17 видов) из различных се-мейств (Tricholomataceae, Amanitaceae, Russulaceae и др.). Немало видов растет на куртине лип (21 вид грибов и 7 видов симбиотрофов) и хвойных. Среди интродуцентов микоризных сожителей имеют сосна ру
мелийская – pinus peuce Griseb., лиственница ев-
ро
пейская – Larix decidua Mill., различные виды рода
пихта Abies Miller.
Ксило
трофы (16 %) также в основном поселяются
на лиственных деревьях. Более всего они связаны с ветковым опадом старых лип. Обращает на себя вни-мание наличие грибов, поселившихся в ранах стволов живых деревьев
– pholiota aurivella (Batsch. : fr.) p.
kumm., kuehneromyces mutabilis (Schaeff. : fr.) Singer
et A. H. Sm., pholiota squarrosa (Weigg. : fr.) p. kumm.,
pleurotus ostreatus (Jacq. : fr.) p . kumm.АГАРИКОИДНЫЕ И ГАСТЕРОИДНЫЕ ГРИБЫ
БОТАНИЧЕСКОГО САДА РГУ ИМ. ИМ. КАНТА
Володина А.А.
Российский государственный университет имени Иммануила канта,
калининград
ГРИБЫ ПОРЯДКА ERYsIpHALEs НА ТЕРРИТОРИИ
МИНСКОЙ ВОЗВЫШЕННОСТИ
Гирилович И.С., Лемеза Н.А.
Белорусский государственный университет,
Минск
Исследования видового состава мучнисторосяных
грибов, их распространения, вредоносности и эколо-гических особенностей проводились нами в различ-ных естественных экосистемах (лесных, луговых, болотных) и агроценозах на территории Минской воз-вышенности. э
то наиболее высокая часть Белорусской
гряды, которая расположена в зоне двух сопряженных геобо
танических областей – Евроазиатской хвойно-
лесной и Европейской широколиственной.
В исследуемом регионе нами выявлено 70 видов гри-
бов пор. Erysiphales , принадлежащих к 8 родам. Домини-
рующим по числу видов, распространенности и вредо-носности является род ery
siphe DC. еmend. U. Braun et S.
Takamatsu, который представлен 42 видами, зарегистри-рованными на 158 видах растений-хозяев 26 семейств.
Второе место по числу видов занимает род Podos-
phaera kunze
emend. U. Braun et S. Takamatsu (20 ви-
дов). эти
грибы отмечены на 54 видах питающих рас-
тений 12 семейств.
Род Golovinomyces (U. Braun) v. Heluta включает
12 видов, которые паразитируют на 56 видах питаю-щих растений 11 семейств. Другие роды ( neoerysiphe
U.
Braun, Phyllactinia Lйv., Sawadaea Miyabe, blumeria
Golovin
ex Speer) представлены сравнительно неболь-
шим числом видов (3–1).
На территории Минской возвышенности нами выяв-
лены новые для республики виды мучнисторосяных гри-бов, получившие в последние годы достаточно широкое распространение. Таковым является ery
siphe (uncinula )
fl
exuosa (pe ck) U. Braun et S. Takam. развивающаяся на Aesculus hippocastanum L. этот возбудитель болезни от-
мечается ежегодно во многих городах республики, где вызывает высокую степень поражения полновозрастных деревьев, используемых в озеленении. Довольно часто встречается и ery
siphe (uncinula ) arcuata U. Braun, v.
H
eluta et S. Takam. развивающийся на Carpinus betulus L.
Отмечено также развитие ery siphe (microsphaera ) azaleae
(U. Braun) U. Braun & S. Takam. на Rhododendron luteum (L.) Sweet.; ery
siphe (uncinula ) prunastri DC. на pr unus
cerasiphera Ehrh.; ery siphe (microsphaera ) syringae-japoni-
cae (U. Braun) U. Braun et S. Takam. на Syringa josikae J.
Jacq. ex Rchb. с высокой степенью поражения.
Флора и охрана грибов 59
Мучнисторосяные грибы отмечены на 266 видах
растений-хозяев из 186 родов 52 семейств. Как и в
других регионах нашей республики наибольшее число видов пораженных растений отмечено в таких семейс-твах,
как Asteraceae, fabaceae, Rosaceae, poaceae, La-
miaceae. Среди них поражаются кормовые, овощные, технические, лекарственные, декоративные и другие хозяйственно-полезные группы растений. Впервые в республике нами отмечено поражение таких видов растений, как Armeniaca vulgaris L., Bidens frondosa L., Cerasus avium (L.) Moench, Cyclachaena xanthiifo-lia (Nutt.) f
resen, Dasiphora fruticosa (L.) Rydb., Geum macrophyllum Willd., Lappula squarrosa (Retz.) Dumort., Malus niedzwetzkyana Dieck., Nemesia strumosa Benth., Quercus rubra L., Scabiosa columbaria L., Thlaspi arvense L, viburnum lantana L. и ряд других.
Прив
еденные данные не являются исчерпывающи-
ми, так как в последующие годы при проведении даль-нейших исследований возможно нахождение новых видов питающих растений и появления новых видов мучнисторосяных грибов.
Авторы выражают искреннюю благодарность до-
ктору биологических наук В. П. Гелюте за помощь в идентификации некоторых видов грибов.
ФИТОТРОФНЫЕ МИКРОМИЦЕТЫ ОСНОВНЫХ ЛЕСООБР АЗУЮЩИХ
ПОРОД НОВГОРОД-СЕВЕРСКОГО ПОЛЕСЬЯ
Голубцова Ю.И.
Сумской государственный педагогический
университет им. А.С. Макаренка,
Сумы, Украина
Разнообразие фитотрофных микромицетов преиму-
щественно определяется наличием пригодного пита-тельного субстрата. В Новгород-Северском Полесье (Украина) основным источником растительных субстра-тов для грибов выступают древесные и кустарниковые породы, изучение видового состава микромицетов кото-рых проводилось нами на протяжении 2003–2007 гг.
В результате исследований в Новгород-Северском
Полесье на 48 видах деревьев и кустарников выявлено 189 видов фитотрофных микромицетов. Наивысшей на-сыщенностью микоконсортами характеризуются доми-нанты и субдоминанты лесных ярусов: Alnus glutinosa (L
.) p. Gaertn., Betula pendula Roth, Corylus avellana L.,
pin
us sylvestris L., po pulus tremula L. и Quercus robur
L. Количественное распределение выявленных видов микромицетов по этим породам является неравномер-ным. Наиболее разнообразно представлены микро-ми
цеты на Q. robur (34) и p. sylvestris (22). Среди ми-
коконсортов дуба чаще всего встречаются bis porella
citrina (Batsch) ko rf et S.E.Carp., colpoma quercinum
(fr.) Wallr., mollisia melaleuca (fr.) Sacc., diatrypella
quercina (pe rs.) Nitschke и d. pulvinata Nitschke – на
древесине, coc comyces coronatus (I.H. Schum.) Rehm,
myc
osphaerella punctiformis (pers.) Starbдck – на опалых
листьях и mic rosphaera alphitoides Griff. et Maubl. – на
живых. Из микоконсортов сосны массовое распростра-нение в районе исследований приобретают Sphaeropsis
sapinea (fr.) Dyko et B. Sutton, T
herrya pini (Alb. et Schw.)
Hцhn. и lophodermium pinastri ( Schrad.) Chevall. Alnus
glutinosa, bet ula pendula , Corylus avellana и po pulus
tremula на територии Новгород-Северского Полесья
практически не образуют самостоятельных массивов, встречаясь главным образом в виде примеси в древос-то
е основных лесообразователей. этим, вероятно, и
объясняется меньшее количество консортивно связан-ных с ними микромицетов. Так, на b.
pendula зарегист-
рировано 17 видов, среди которых чаще всего встреча-ются chlorociboria aeruginascens ( Nyl.) kanouse ex C.S.
Ramamurti, korf et L.R. Batra, Hypoxylon multiforme fr.
(fr
.), nectria cinnabarina (Tode) Fr. и Phyllactinia guttata
(W
allr. : fr.) Lйv. Несколько беднее представлены гри-
бы на C. avellana (14 видов), на котором, в частности, выявлены исключительно ксилотрофные виды. На A. gl
utinosa и p. tremula отмечено по 12 видов.
Сравнение видового состава микромицетов основ-
ных лесообразующих пород показало, что микромице-ты выявляют достаточно четкое распределение на две гр
уппы – существующие на хвойных и лиственных
породах. Для лиственных пород характерным является большее видовое разнообразие и одновременное при-сутствие сразу нескольких видов грибов на одном и том же субстрате. Видовой состав последних нередко пе-рекрывается, много общих видов. Кластерный анализ, проведенный с использованием коэффициента Жаккара, показал, что наибольшее сходство выявляют микоком-плексы березы и осины, дуба и орешника. Достаточно своеобразным является видовой состав сосны и оль-хи. Необходимо отметить объединение в один кластер ми
кокомплексов березы, осины и ольхи. эти растения
принадлежат к одному семейству – Betulaceae. Следова-
тельно, можно предположить, что для большинства из выявленных на них видов грибов характерна приуро-ченность к растениям-хозяевам на уровне семейства. Достаточно высокая схожесть микокомплексов ореш-ника и дуба, очевидно, связана с тем, что эти растения в Новгород-Северском Полесье встречаются, как прави-ло, в одних и тех же ценозах, в которых дуб выступает до
минантом, а орешник – субдоминантом. Следователь-
но, это создает условия для развития одних и тех же ви-дов грибов на каждой из двух названных пород. К сосне приурочено значительное количество узкоспециализи-рованных видов фитотрофных микромицетов, в связи с чем ее видовой состав практически не перекрывается с таким лиственных пород.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 60
Несмотря на длительную историю изучения макро-
мицетов на юге Западной Сибири, ежегодные иссле-
дования микобиоты данной территории обогащают сведения о видовом разнообразии грибов Сибири и России, позволяющие дополнить и расширить мико-флористические и микогеографические знания.
За последние четыре года выявлено более 200 но-
вых видов для Алтая. Наибольший интерес вызвали виды, которые ранее не были обнаружены в Сибири, а некоторые являются новыми для России. Одним из таких видов является lactarius
olivinus kytцv., обна-
руженный в лесном поясе Алтая в заболоченном при-русловом ельнике. В монографии «Грибы Северной Европы» (Heilmann-Clausen et al., 1998) данный вид описывается как редкий, встречающийся в основном на севере Европы, ассоциирующийся с прирусловыми березово-ивово-еловыми лесами, образующий симби-отиче
скую связь с picea abies. Подобная экологичес-
кая приуроченность сохраняется и на Алтае. Однако, в качестве симбионта lactarius
olivinus использует Picia
obovata, которая играет доминирующую роль в соста-ве древесного яруса прирусловых лесов Алтая. Таким образом, ареал данного вида не ограничивается Евро-пой. Единственная находка lactarius
olivinus в Южной
Сибири указывает на его редкость и узкую экологичес-кую амплитуду.
Новыми для Сибири являются еще два представи-
теля данног
о рода – lactarius badiosanguineus kьhner et
Romagn. и l. semisanguifluus R. Heim et Leclair. Млеч-
ник каштаново-красный ранее обнаружен на Среднем Урале в темнохвойной тайге и охарактеризован как очень редкий вид (Марина, 2006). На Алтае распро-странение lactarius
badiosanguineus связано также
с темнохвойной тайгой, он предпочитает достаточно влажные местообитания, вступает в симбиоз с елью picea
obovata и с пихтой Abies sibirica. Данный вид
нельзя назвать редким в Горном Алтае, он достаточ-но обычен в характерных местообитаниях. До насто-ящего времени на Алтайской территории отмечались только два вида рыжиков lactarius
deliciosus (L.) Gray
и l. deterrimus Grцger. Однако новые коллекционные сборы и ревизия ранее собранных на Алтае образцов млечников с оранжевым млечным соком на основании современной литературы показали, что в кедровых и смешанных темнохвойных лесах Алтая растет неизвес-тный ранее для Сибири вид lactarius
semisanguifluus,
образующий
микоризу с pinus sibirica. В районе Се-
минского перевала во влажной темнохвойной тайге и в прирусловом зеленомошном еловом лесу впервые для Западной Сибири отмечен микоризообразователь ели Hygrophorus olivaceoalbus (
fr.) fr. И хотя в известных
местонахождениях вид не отличался высокой числен-ностью, в благоприятных условиях он является скорее обычным, чем редким на Алтае.
Новой находкой в Сибири является термофиль-
ный степной вид Floccularia luteovirens f. luteovirens
(Alb. et
Schw.) pouzar, обнаруженный в степных кус-
тарниковых сообществах Алтая. Ареал данного вида, по-видимому, своим северным краем захватывает юг России, так как в России этот вид известен в Ростовс-кой области (Красная книга, 2005), в Ставропольском крае и в Приморском крае. Во всех известных местона-хождениях в России вид редок, в связи с этим, занесен в региональные Красные книги и рекомендован для включения в Красную книгу РФ.
Еще одной новой и интересной находкой в та-
ежном поясе на севере Алтае является leu
copaxillus
rhodoleucus ( Ro mell) kьhner – новый для Сибири вид,
известный ранее только на Западе. В настоящее время появились сведения о единичных находках Лейкопак-сила розово-белого на Среднем Урале (Марина, 2006) и на юге Западной Сибири (Жуков, 2008; опр. И. А. Гор-бунова). В черневой тайге Алтая впервые обнаружен Polyozellus multiplex (Underw.) Murrill, характерный для
Се
верной Америки. экология вида на Алтае и в Канаде
общая – встречается в горных лесах с участием пихты.НОВЫЕ СВЕДЕНИЯ О МИКОБИОТЕ АЛТАЯ
Горбунова И. А.
Центральный сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
БАЗИДИАЛЬНЫЕ ГРИБЫ ВЫСОКОГОРНОГО ПОЯСА АЛТАЯ
Горбунова И.А.
Центральный сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
Изучение арктической и альпийской микобиоты
началось в начале 19 века, но данных о таксономии, экологии и распределении арктических и альпийс-ких макромицетов все еще недостаточно. Практи-чески белым пятном остается микобиота альпий-ской зоны южных гор Азии, к которым относится Горный Алтай. В этой связи микологические ис-следования данной области представляют большой интерес.
Альпийская область Алтая отличается большим
разнообразием растительности. Высокогорную рас-тительность составляют субальпийские и альпийские луга, высокогорные болота, разнообразные формации тундр, а также тундрово-степные комплексы. Нижняя
Флора и охрана грибов 61
граница высокогорного пояса определяется на боль-
шей части Алтая пределами распространения леса. В альпийскую область вклиниваются островки редколе-сий из
лиственницы (Larix sibirica) и кедра (pinus si-
birica), которые комплексируются с обширными про-странствами субальпийских лугов либо контактируют непосредственно с тундровыми формациями. На Се-веро-Западном Алтае граница леса располагается на-иболее низко (1700–1800 м), на юго-восточном Алтае лес доходит до 2465 м. Иногда тундровые формации спускаются ниже лесных лент и тянутся по широким долинам рек по причине стекания холодных масс воз-духа в котловины и более длительного промерзания почв (Куминова, 1960).
Изучение высокогорной микобиоты на Алтае нача-
лось с 2000 г., и первыми самыми многочисленными были сборы макромицетов в тундрово-степных сооб-ществах на плато Укок (Горбунова, 2003). Позже ис-следования проводились в кедровых и лиственничных редколесьях, в долинных тундровых формациях, эпизо-дически были обследованы субальпийские и альпийс-кие луга, заболоченные участки и нивальная зона. Всего для высокогорного пояса Алтая выявлено более 160 ви-дов базидиальных макромицетов. Самое большое видо-вое разнообразие грибов отмечено в тундростепях (105 видов), что объясняется сочетанием разнообразных растительных сообществ на высокогорном плато. Боль-шинство видов в тундростепях встречаются по берегам рек и в понижениях рельефа. Здесь отмечено наиболь-шее количество альпийских видов.
Микобиота ерниковых тундр и высокогорных редко-
лесий насчитывает около 80 видов макромицетов. На-ибольшая видовая насыщенность характерна для ерни-ков, контактирующих с лесной растительностью либо расположенных достаточно близко к границе леса (60 видов). Известно, что в горах альпийские грибы могут встречаться на небольших высотах и наоборот грибы лесного пояса заходят в горно-тундровые сообщества, занимая особо защищенные среды обитания. Данное явление ярко выражено на Алтае. Именно поэтому ми-кобиоту долинных и комплексирующих ерников состав-ляют, в основном, бореальные виды из семейств Corti-nariaceae (19 видов), Russulaceae (11), Tricholomataceae (11) и др. с незначительным участием аркто-монтанных видов. Ерниковые тундры, простирающиеся значитель-но выше границы леса, бедны грибами. Здесь отмече-ны amanita vaginata
var. vaginata (Bull.) Lam., lec cinum
rotundifoliae (Singer) A.H. Sm., Thiers et Watling , виды
рода Galerina . В лиственничных и кедровых высоко-
горных редколесьях встречаются маслята, вступающие в
симбиоз с лиственницей и кедром – Suillus grevillei
(klo
tzsch) Singer, S. sibiricus (Singer) Singer, S. placidus
(Bonord.) Singer, некоторые полипоровые, в том числе Polyporus umbellatus (pe
rs.) fr., mycena и др.
В субальпийских и мелкотравных альпийских лу-
гах с
участитем карликовых ив отмечено 8 видов –
melanoleuca strictipes (p. karst.) Jul. Schдff ., Geastrum
floriforme vittad., bovista nigrescens pers. и др. На за-
болоченных участках выявлено 10 видов макромице-тов,
в лишайниковых и дриадовых тундрах – 17 видов
грибов из родов inocybe, r ussula, lactarius, agaricus,
Psilocybe и др. На курумах и осыпях обнаружены
battarr
ea phalloides (Dicks.) pers., Psilocybe montana
(p
ers.) p . kumm., mycenastrum corium (Guers.) Desv.
ОСОБЕННОСТИ Р АСПРЕДЕЛЕНИЯ МИКОПЛАНКТОНА
В БАССЕЙНЕ НИЖНЕГО ДОНА
Горлачева Г.Ю.
Южный научный центр РАН,
Ростов-на-Дону
Одним из постоянных компонентов планктона яв-
ляются водные грибы. К таким относится большинство представителей отделов Oomycota, Hyphochytridiomy-co
ta, Labyrinthulomycota, plasmodiophoromycota, Chy-
tridiomycota, имеющие в цикле развития зооспоры или гаметы (Кузнецов, 2003; Гарибова, Лекомцева, 2005). Высшие грибы также представлены микромицетами кл
асса Hyphomycetes ( fungi imperfecti) – водные ги-
фомицеты, весь жизненный цикл которых полностью проходит в водной среде. Они входят, как составная часть, в большую экологическую группу гидромицет, вк
лючающую также ряд видов из классов zygomycetes,
Ascomycetes и Basidiomycetes, характерных для почвен-ных биоценозов (Batko, 1975; Дудка, 1985; Семенова, 1994; Пивкин, 2006). Достаточно часто исследователи отмечают в водоемах в активном состоянии почвенные (амфибийные) грибы, но вопрос об их роли в функцио-нировании водных экосистем открыт до сих пор.Материал исследования был отобран во время ком-
плексной гидробиологической экспедиции ЮНЦ Р АН в июле 2006 г. по Нижнему Дону. Температура воды на станциях колебалась от 22,8
°С до 24,2 °С. Прозрач-
ность воды росла по мере продвижения вверх по те-чению
– от 0,78 до 1,2 м (особенно выше ст. Манычс-
кая). Учет грибов производился в пробах, отобранных с водной поверхности.
В наибольшем количестве встречались грибы рода
Indriella (37
%), aff. Monascus (27 %) и темноокрашен-
ный мицелий
(23 %). В меньшей степени развивались
микромицеты рода penicillium (8 %), малочисленными
были представители родов Trichoderma (3 %), Alternaria и aff. Dendriopsis (1 %). Данные микромицеты отно-сятся к почвенным грибам, но микологи неоднократно отмечают присутствие некоторых из них и активное развитие в водоемах (Артемчук, 1981; Семенова, 1994; Пивкин, 2006 и др.).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 62
По результатам исследования выявлены следу-
ющие зависимости распределения микопланктона:
1) максимумы развития микромицетов приходились на устья
рек Северский Донец и Маныч – притоков
р. Дон; 2) приуроченность развития грибов в р. Дон к левому берегу; 3) постепенное снижение количест-венных показателей и разнообразия микопланктона от Цимлянского водохранилища до дельты Дона.
Объяснить такое распределение микромицетов
можно постоянным сносом органических веществ из притоков; большее развитие грибов на низком левом бе-регу связано с его застойностью (заросли макрофитов, низкая гидродинамика и мелководность обеспечивают лучшую прогреваемость воды, наличие большего ко-личества питательных веществ и т.д.). Смена родового состава и количественных показателей микопланктона объясняется увеличением техногенного загрязнения во
д ближе к дельте – наблюдается вытеснение менее
устойчивых к загрязнениям микромицетов более устой-чивыми и быстрорастущими ( Tr
ichoderma, alternaria,
темноокрашенный мицелий) (Семенова, 1994).Литература:Артемчук Н.Я. Микофлора морей СССР . М.: Наука,
1981.–192 с.
Гариб
ова л.в., лекомцева С.Н. Основы микологии:
Морфология и систематика грибов и грибоподобных организмов. Учебное пособие. М.: КМК, 2005.–220 с.
Дудка И.А. Водные несовершенные грибы СССР .
Киев: Наукова думка, 1985.–188 с.
кузнец
ов е.А. Грибные и грибоподобные организ-
мы морских, солоноватоводных и пресноводных водо-емов (учебное пособие). М.: Академия цветоводства, 2003.–120 с.
Пивкин М.
в., кузнецова Т.А., Сова в.в. Морские
грибы и их метаболиты. Владивосток: Дальнаука, 2006.–248 с.
Семенова Т.А. Антропогенная изменчивость мик-
роскопических грибов в водных экосистемах (на при-мере в
одоемов Среднего Поволжья). Тольятти: ИэВ
Р АН, 1994.–36с.
batko a
. zarys hydromikologii. Warszawa: pWN,
1975 – 478 s.
НЕМАТОФАГОВЫЕ ГИФОМИЦЕТЫ, ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ
С ПОЧВЕННОЙ МИКРОФЛОРОЙ
Дарханова Т.А., Александрова А.В.
кафе
дра микологии и альгологии, МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
Нематофаговые гифомицеты являются уникальной
группой грибов, способной к хищничеству, эта осо-бенность всегда привлекала и привлекает интерес ис-следователей к их изучению. Однако многие вопросы экологии этой группы до сих пор остаются мало изучен-ными, так, например, очень мало данных, касающихся взаимоотношений хищных грибов с почвенной биотой. Присутствие представителей этой группы грибов отме-чено на самых разнообразных субстратах и по всему земному шару. В связи с этим было интересно выяснить их представленность в малоизученном регионе, а также получить некую картину взаимоотношения нематофа-говых гифомицетов с почвенной микрофлорой.
Были исследованы образцы почвы, мха, древесины,
растительных остатков, помета животных, собранные на территории Заиграевского и Прибайкальского районов республики Бурятия. Выделение нематофаговых гифоми-цетов, проводили на среду голодный агар в присутствии нематод caenorabditis elegans и
ли Panagrellus redivivus .
В результате работы показано, что нематофаговые
гифомицеты являются обычными обитателями лесных биогеоценозов. Они были отмечены во всех исследо-ванных местах и на всех выбранных типах субстратов.
Всего было выявлено 13 видов нематофаговых ги-
фомицетов принадлежащих к 5-ти родам: arthr
obotrys,
dactylella, dactylaria, Gamsylella, monacrosporium.
Из них наиболее представлен был род arthr obotrys
(7 видов). Чаще всего встречались виды arthrоbotrys
oligospora, А. cladodes. По
лученные данные указывают на то, что немато-
фаговые гифомицеты не являются редкими грибами. Для выбора субстрата как постоянного местообитания, нематофаговым грибам важна влажность, обилие ли-чинок нематод, доступность для гриба органических соединений. Очевидно, почва не является единствен-ным местообитанием хищных грибов.
Рассматривая взаимоотношения между хищными и
сапротрофными грибами, мы заметили, что при усло-виях, культивирования близких к таковым в их естест-венных средах обитания, конкуренции не наблюдается. Нематофаговые гифомицеты успешно развивались и спороносили, несмотря на развитие в тех же чашках та-ких сильных антогонистов как Trichoderma . Даже мед-
ленно растущие виды, формирующие липкие головки и более зависимые от нематод ( dac
tylella sp.1, dactylella
s
p.2, monacrosporium ellipsosporum, Gamsylella gephy-
r
opaga ), встречаются практически во всех образцах, не-
смотря на присутствие тех грибов, которые в культуре на богатой питательной среде подавляют их.
Интересно отметить тесные контакты, в которые
вступают хищные грибы с бактериями. Они были от-мечены на гифах многих изолятов как эпифиты, где развивались, не причиняя вред грибам, и часто совер-шенно не изменяя морфологию колонии. Однако, при определенных условиях, бактерии обильно развивались и могли лизировать гифы гриба. С другой стороны, изо-ляты медленно растущих грибов, таких как dac
tylella ,
mon
acrosporium, Gamsylella переставали расти совсем
Флора и охрана грибов 63
после очистки их от бактерий. При выяснении видового
состава бактерий не было отмечено какой либо приуро-ченности их видов к видам нематофагов, все бактерии относились к самым распространенным родам почвен-ных бактерий: rho
dococcus, Flavobacteria, cellulomonas,
bacillus ( b. subtilis, b. megaterium).
ИЗУЧЕНИЕ АГАРИКОИДНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ В ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ
Десятова О.А.
оренбургский государственный университет,
оренбург
Изучение агарикоидных базидиомицетов на терри-
тории Оренбургской области было начато с целью выяс-нения их видового состава, определения особенностей таксономической и эколого-трофической структуры ми-кобиоты, а также выявления представленности редких видов для внедрения в дальнейшем мер по их охране.
Оренбургская область занимает обширную террито-
рию площадью 124 тыс. км
2. Расположение области в
трех природных странах (Русская равнина, Уральская горная страна, Тургайская столовая страна), двух бо-танико-географических зонах (лесостепная и степная), особенности климата, рельефа, почв и влагонакопления, определяют значительное разнообразие её территории, в том числе разнообразие растительных сообществ и своеобразие микобиоты агарикоидных макромицетов.
Планомерное изучение агариковых грибов на тер-
ритории Оренбуржья начато в 2003 году. Исследования проводились в различных типах местообитаний: лес-ные сообщества (широколиственные, мелколиственные, пойменные, сосновые и смешанные леса), открытые (луговые и степные сообщества) и рудеральные местоо-битания. При проведении полевых работ предпочтение было отдано маршрутным методам ввиду разнообразия местообитаний и удаленности ряда участков.
В настоящее время на исследуемой территории
зарегистрировано 312 видов агарикоидных базидио-мицетов, относящихся к 64 родам, 17 семействам и 5 порядкам (agaricales, b
oletales, cortinariales, Poriales
и russulales ). Из них 214 видов впервые отмечены на
территории Оренбургской области, 4 вида ( coprinus
idae
Uljй, coprinus pallidissimus Romagn., coprinus
subimpatiens
M. Lange et A.H. Sm., cortinarius suillus
fr
.) являются новыми для России.
Ведущими по числу видов являются семейства:
Tricholomataceae
(64 вида, 20,5 %), Cortinariaceae (43
вида, 13,8 %) и Russulaceae (40 вида, 12,8 %). Лидиру-ющее положение этих семейств характерно для всех биот умеренной зоны Голарктики. За тремя ведущими семейств
ами следуют: Coprinaceae (30 видов, 9,6 %)
и Agaricaceae (29 видов, 9,3 %), что свидетельствует о явном ксероморфном (степном) характере иссле-дуемой микобиоты, а сравнительно высокая видо-вая
насыщенность семейства pluteaceae (19 видов,
6 %) – о её неморальных чертах. В спектре ведущих родов первое место занимает род Russula (26 видов), который широко распространен в широколиственных лесах. Неморальные черты вносят и такие роды как pluteus
(17 видов) и psathyrella (11). Близость изучае-
мой микобиоты к неморальным биотам подтверждает и тот факт, что вклад бореальных родов сравнительно невысок
– Lactarius (14), Tricholoma (5), Cortinarius и
Hebeloma (по 9). Высокая видовая насыщенность «теп-лолюбивых» родов Coprinus (19) и Agaricus (14) так же подчеркивает степной характер микобиоты.
Трофическая структура микобиоты агарикоидных
базидиомицетов Оренбургской области представлена 11 трофическими группами. Ведущее положение за-нимаю
т микоризообразователи (35,9 %). Их процент
заметно ниже, чем в биотах более северных областей. Кроме того, наблюдается увеличение доли гумусовых са
протрофов (23 %), что характерно для степных тер-
риторий. Анализ распределения агариковых грибов по основным типам местообитаниям показал, что на-ибольшим видовым разнообразием характеризуются мелколиственные леса (74 вида), в том числе березово-осиновые, ивовые колки и черноольшаники. Макси-мально специфичным видовым составом отличаются березово-осиновые колки, сосновые и широколиствен-ные леса. Наибольшее количество редких видов, и ви-дов, подчеркивающих своеобразие микобиоты Орен-буржья, отмечено в черноольшаниках и на открытых степных и луговых местообитаниях.
РОД ParaPeronoSPora CONsTANT . В СОСТАВЕ МИКОБИОТЫ УКР АИНЫ
Дудка И.А.
Институт ботаники им. Н.Г. Холодного НАН Украины,
киев
К концу XIX ст. в составе семейства peronosporaceae
было известно 5 родов: Peronospora Corda, описанный
в 1837 г., br emia Regel – в 1843 г., basidiophora Roze et Cornu
– в 1869 г., Sclerospora J. Schrцt. – в 1879 г.,
Plasmopara J. Schrцt. – в 1886 г. В 1903 г был опи-
сан еще один род этого семейства Pseudoperonospora
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 64
Rostovzev, в 1914 г. – род bremiella G.W. Wilson, в 1927
г.
– род Peronosclerospora (S. Ito) Hara. Такой объем се-
мейства
сохранялся до конца XX ст. – начала XXI ст.,
когда в результате исследований О. Константинеску
было описано несколько новых для науки родов пе-роноспоровых грибов, преимущественно в результате критического пересмотра объема ранее описанных ви-дов родов Peronospora,
basidiophora и Plasmopara.
Род Paraperonospora Constant. создан в 1989 г. (Con-
stantinescu, 1989). Основанием для его создания послу-жила Peronospora leptosperma de Bary, которая была
описана А. де Бари на растениях семейства Asteraceae (в то время Compositae) еще в 1863 г. О. Константи-неску, детально проанализировав 355 гербарных об-разцов пероноспоровых грибов, паразитирующих на питающих растениях из семейства астровых, пришел к заключению о том, что, кроме Peronospora radii de
Bary, приуроченной к развитию на цветках астровых, все остальные виды рода Peronospora, описанные на
хозяевах из семейства Asteraceae, имеют очень боль-шое морфологическое сходство. В качестве общих для них морфологических признаков приведены следую-щие: постепенное расширение ответвлений, а часто и ствола конидиеносцев по направлению к верхней части; при доминировании дихотомического типа вет-вления конидиеносцев у многих из них практически в каждом из исследованных образцов встречается три-хотомия; каждое предпоследнее ответвление заканчи-вается (1-)2–3(–4) удлиненно-коническими короткими конечными ответвлениями, имеющими затупленные, закругленные или вздутые верхушки, на которых обра-зуются крупные одиночные эллипсовидные конидии, без выводковой поры. Подавляющее большинство ис-следованных образцов видов рода Peronospora на аст-
ровых, которые О. Константинеску назвал Peronospora
leptosperma-подобными грибами, характеризуется де-терминированным ростом конечных ответвлений и син-хронным образованием одиночных конидий, что соот-вет
ствует признакам родов семейства peronosporaceae.
В то же время, как указывает О. Константинеску, уни-кальные признаки строения и ветвления конидиенос-цев у Peronospora leptosperma-подобных грибов четко
отличают их от видов рода Peronospora, у которых вет-
вление конидиеносцев всегда дихотомическое, ответв-ления имеют одинаковую ширину на всем протяжении и каждое предпоследнее ответвление заканчивеется двумя конечными короткими ответвлениями с усе-ченными верхушками. От видов родов Plasmopara и
br
emiella, которые осуществляют бесполое размноже-
ние с помощью зооспорангиев с порой прорастания, Peronospora leptosperma- подобные грибы отличаются
размножением конидиями. Исходя из этого детального анализа морфологических и онтогенетических при-знаков О. Константинеску пришел к выводу о том, что Peronospora leptosperma- подобные грибы достаточно
четко
отличаются от остальных родов peronosporaceae,
чтобы учредить для них самостоятельный род. При-нимая во внимание, что по типу ветвления конидие-носцев они, с одной стороны, сходны с Plasmopara,
а с другой стороны, с Peronospora, О. Константинес-ку назвал новый род Paraperonospora Constant. c ти-
повым видом Paraperonospora leptosperma (de Bary)
Constant., базионимом для которого была использована Peronospora leptosperma de Bary (Constantinescu, 1989).
Кроме типового вида, в состав нового рода вошло еще несколько видов пероноспоровых грибов, паразитиру-ющих в основном на астровых из трибы Anthemidae. Основываясь на изложенных выше морфологических признаках, О. Константинеску предложил 7 новых но-менклатурных комбинаций. Из рода Peronospora в со-
став Paraperonospora перешли Peronospora artemisiae-
annua Ling et M.C. Tai, P . artemisiae-biennis Gдum., P .
sulphurea Gдum., P . sulphurea Gдum. f. minor Sгvul. et
Rayss, P . tanaceti Gдum.; из рода Plasmopara – P
. chry-
santhemi-coronarii Sawada; из рода br emiella – b. multi-
formis Tao et Qin.
В Украине известно 3 вида рода Paraperonospora: Pp.
leptosperma (de Bary) Constant., Pp. sulphurea (Gдum.)
Constant. и Pp. tanaceti (Gдum.) Constant. Наиболее
распространенным в Украине видом является Pp. lep-
tosperma. Выделяя род Paraperonospora, О. Константи-
неску заявил, что в пределах этого рода им принимает-ся морфологическая концепция вида, предполагающая, что идентичные по морфологии образцы, независимо от растения-хозяина, рассматриваются как принадлежа-щие к одному виду (Constantinescu, 1989). В результате часть видов рода, в том числе и Pp. leptosperma, ока-
зались приуроченными к разным видам и даже родам питающих растений из семейства астровых. В Украине Pp. leptosperma обнаружена на видах растений из родов
An
themis, Cichorium, Lepidotheca, pyrethrum и Tripleuro-
spermum. Чаще всего в Украине как питающее растение гриба регистрировался Tripleurospermum inodorum, на котором Pp. leptosperma была собрана в Правобереж-
ном Полесье, Западноукраинских лесах и Харьковской Лесостепи. На Lepidotheca suaveolens гриб был выявлен в Правобережной Лесостепи и Западноукраинских ле-са
х, а на Cichorium intybus и p yrethrum cinerariefolium –
только в Левобережной Лесостепи. Еще одна находка Pp. leptosperma сделана на Anthemis ruthenica в Крымс-
кой Степи. На листьях и стеблях пораженных растений наблюдали невыразительные, желтеющие, позже буре-ющие пятна, на нижней стороне которых формировапся рыхлый серый или слегка фиолетово-серый налет, при более высокой влажности переходивший и на верхнюю сторону листовой пластинки.
К числу видов рода Paraperonospora, консортивно
связанных с питающими растениями из разных родов семейства астровых, принадлежит и Pp. sulphurea. По
О. Константинеску, растениями-хозяевами Pp. sul-
phurea являются виды родов Artemisia и Helichrysum,
а также один из видов рода Tanacetum, а именно T. corymbosum. В Украине Pp. sulphurea была выявлена
только на двух видах рода Artemisia: на A. absinthium в Прав
обережной, а на A. vulgaris – в Левобережной
Лесостепи. Внешне поражение растений полыни Pp.
sulphurea проявляется как бледные желтоватые, часто
ограниченные жилками листа пятна, с нижней сторо-ны которых образуется плотный войлочный, желтова-тый до золотисто-желтого налет из конидиеносцев и
Флора и охрана грибов 65
конидий, часто занимающий значительную часть ниж-
ней поверхности листовой пластинки.
В отличие от двух рассмотренных выше видов рода
Paraperonospora Pp. tanaceti паразитирует только на
одном виде питающего растения Tanacetum vulgare. В Украине она была собрана на этом растении-хозяине в Левобережной Лесостепи. У пораженных растений на листьях образуются слабозаметные бледные желтова-тые пятна, а нижняя сторона листовой пластинки часто полностью покрыта плотным войлочным желтоватым, реже беловатым налетом из конидиеносцев и конидий.
Морфологические отличия видов рода Parap-
eronospora, обнаруженных в Украине, проявляются в различных размерах конидий и строении и размерах конечных ответвлений конидиеносцев. У Pp. leptosper-
ma ширина большинства конидий в средней части не
превышает 16–20 мкм, тогда как у Pp. sulphurea и Pp.
tanaceti большинство конидий значительно шире – от
20
до 26(28) мкм. Что касается конечных ответвлений
конидиеносцев, то только для Pp. tanaceti характерно
наличие неравновеликих терминальных и латераль-ных конечных ответвлений с усеченными верхушками. У Pp. leptosperma и Pp. sulphurea конечные ответвле-
ния равновеликие, с закруглеными или слегка вздуты-ми верхушками, хотя у Pp. leptosperma встречаются и
усеченные верхушки.
ГАСТЕРОИДНЫЕ БАЗИДИОМИЦЕТЫ С ЛЕКАРСТВЕННЫМИ И ПИЩЕВЫМИ
СВОЙСТВАМИ И ИХ Р АСПРОСТР АНЕНИЕ НА ЛЕВОБЕРЕЖНОЙ УКР АИНЕ
Дудка И.А.1, Сивоконь Е.В.2
1 Институт ботаники им. Н.Г. Холодного НАН Украины,
киев
2 Харьковский национальный университет им. в.Н. каразина,
Харьков
В XXI ст. в качестве БАД, нутрицевтиков, пара-
фармацевтиков широко используются съедобные и ле-карственные грибы. Среди них особое место занимают высшие базидиомицеты, обладающие противоопухо-левым, иммуномодулирующим, гепатопротекторным, кардиососудистым, антивирусным, антибактериаль-ным и некоторыми другими видами воздействия. Од-нако не все группы базидиальных грибов исследованы в этом аспекте в достаточной мере. Определенное вни-мание уделялось лечебным свойствам ксилотрофных базидиомицетов, шляпочных напочвенных грибов. Значительно меньше изучены в этом отношении гас-тероидные базидиомицеты, хотя имеются сведения об их использовании в нетрадиционной медицине разных народов мира. Первое указание о применениии лечеб-ных свойств гастеромицетов восточными славянами приве
дено в «Новгородских Вертоградах» XIv ст. Пло-
довые тела видов родов bovista, c alvatia, lycoperdon
употреблялись ими как перевязочный материал, а споровая
масса – как кровеостанавливающее, дезин-
фицирующее и противовоспалительное средство при внешних кровотечениях. Аналогичное применение гастеромицеты указанных родов издавна находили и в странах
Западной Европы (Semerdћieva, veselskэ, 1986;
Lelley, 2007). В народной медицине стран Европы про-тив ревматизма и подагры традиционно использовали Phallus impudicus (Lelley, 2007), который считался так-
же одним из эффективных натуральных афродизиаков. Восточные славяне применяли P . impudicus не только
против ревматизма и подагры, но также при болях в желудке, для лечения мочекаменной болезни и некото-рых кожных заболеваний (Бухало и др., 1996). Особо ценилась для приготовления лекарств стадия яица P . impudicus, называвшаяся «земляным маслом». Тради-ция использования этого гастероидного базидиоми-цета в качественародного лекарственного средства в Украине сохранилась до сих пор.
С середины ХХ ст. интенсифицировались иссле-
дования, направленные на выявление среди базидио-мицетов видов-продуцентов лекарственных веществ различного спектра действия. Из гастероидных ба-зидиомицетов рода cyathus
(c. earliei, c. helenae, c.
striatus и др.) были выделены вещества антибиоти-ческ
ой природы широкого спектра действия – циати-
ны и стриатины A, B и C. У видов рода calvatia (c.
craniiformis, c
. cyathiformis, c. gigantea, c. lilacina ),
а также у lycoperdon pyriforme обнаружены вещест-
ва, обладающие цитостатическим эффектом, который обусловлен кальвациновой кислотой ( p-карбоксифе-
нилазоксицианид), выделяемой грибами в культураль-ную жидк
ость (Semerdћieva, veselskэ, 1986). В свежем
соке из плодовых тел P . impudicus выявлен полисахарид
pL-2,
оказывающий онкостатическое воздействие на
клетки саркомы 180 (kuznecovs et al, 2007). У некото-рых видов гастероидных базидиомицетов обнаружены новые, ранее неизвестные для них типы активности: у видов рода Hyphostroma –
бактериостатическая (Yang
Lin et al, 2007), у cyathus striatus – антиоксидантная
(Asatiani et al, 2007) активности. Заслуживает внима-ния тот факт, что ряд лекарственных гастероидных базидиомицетов одновременно являются и ценными съедобными грибами. В Китае широко используются как съедобные calvatia
gigantea, lycoperdon perlatum,
l. pyriforme (Yu-Cheng Dai, Bau Tolgor, 2007), в Мек-
сике
– c. gigantea, l. perlatum (Guzmбn, 2007), в Ин-
дии
– c. gigantea и Geaster sp. (Rai, k arwa, 2007).
Исследование лекарственных свойств гастероид-
ных базидиомицетов и разработка технологий про-мышленного выращивания некоторых съедобных видов из этой группы осуществляется двумя путями.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 66
Один из них – выделение изучаемых видов грибов в
чистую культуру. К сожалению, количество видов и штаммов гастероидных базидиомицетов в коллекции культур шляпочных грибов Института ботаники им. Н.Г.
Холодного НАН Украины (IBk) невелико. Всего
в IBk поддерживается 836 штаммов макромицетов, принадлежащих к 211 видам 96 родов (Бухало и др., 2006). Из них только 30 штаммов, относящихся к 7 видам 4 родов ( calvatia, c
yathus, lycoperdon, Phallus),
являются представителями гастероидных базидиоми-цетов.
Второй путь – сбор плодовых тел грибов этой
группы в природе, с одной стороны, для последующе-го выделения чистых культур, с другой стороны, для использования в качестве сырья, необходимого для проведения химических анализов и биологических испытаний воздействия на соответствующие тест-объ-екты. Для выявления локалитетов и ареалов гастеро-идных базидиомицетов нами проведено изучение рас-пространения видов с лекарственными и пищевыми свойствами на территории Левобережной Украины. К часто встречающимся в этой части Украины относит-ся calvatia utriformis
(Syn. calvatia caelata ) , плодовые
тела которой многократно отмечались в степных цено-зах Старобельской и Левобережной злаково-луговых степей. Однако в этих регионах местонахождения вида приурочены в основном к целинным степям природ-ны
х заповедников – Луганского (Стрельцовская степь),
Украинского степного (Хомутовская степь, Каменные Могилы), Днепровско-Орельского. Перспективными как ресурсные являются выявленные в последние годы местонахождения c.
utriformis за пределами заповед-
ных территорий. К ним относятся локалитеты этого вида в лесополосах Полтавской обл., Присамарском лесу Днепропетровской обл., сосновых и сосново-бере-зовых лесах Черниговской обл. и Харьковской обл. Рас-пространенным является также lyc
operdon pyriforme,
локалитеты которого выявлены преимущественно в
полесских и лесостепных регионах Левобережья, что связано с его приуроченностю к древесным субстратам. Гриб неоднократно обнаруживался нами на валежных стволах и пнях в осинниках, дубравах, сосновых бо-рах Сумской, Черниговской и Харьковской областей. Довольно часто встречается на Левобережье и Phallus
impudicus . Его одиночные местонахождения отмечены
во всех природных зонах региона. Многочисленные ло-калитеты этого вида зарегистрированы на Левобережье в дубравах Присамарского леса (Днепропетровская обл.). calvatia cyathiformis (
Syn. c. lilacina ) известна на
Левобережье из многих местонахождений. Часть из них выявлена в степных заповедниках Аскания–Нова (Хер-сонская обл.), Луганский (Стрельцовская степь), Ук-раинский степной (Каменные Могилы), где ресурсное использование гриба исключено. Более ограниченное число местонахождений известно для cal
vatia gigantea ,
причем часть из них также приурочена к Украинско-му степному и Днепровско-Орельскому заповедникам. bov
ista nigrescens известна на Левобережье в Сумской,
Черниговской, Харьковской, Днепропетровской, Донец-кой и Луганской областях (гербарные данные). Однако, в последние годы нам не удалось выявить ни одного нового локалитета этого вида на Левобережье. Анало-гичная ситуация сложилась со Scleroderma citrinum . На
Левобережье известно более 10 местонахождений этого вида в Черниговской, Полтавской, Днепропетровской, Донецкой и Херсонской областях. Нами во время экспе-диций и экскурсий по Левобережью новые местонахож-дения этого вида не установлены. В то же время в 2006 г. нам удалось обнаружить первое и пока единственное местонахождение cya
thus striatus на Левобережье, где
он был собран на почве в зарослях орешника в смешан-ном лесу Ичнянского национального природного парка (Черниговская обл.). Часть видов гастероидных бази-диомицетов, приведенных различными авторами как лекарственные ( cal
vatia craniiformis, cyathus bulleri, c.
helenae и некоторых др.), в Украине или отсутствуют,
или указания об их нахождении некорректны.
Дальнейшей задачей изучения распространения
лекарственных гастероидных базидиомицетов явля-ется создание базы данных местонахождений часто встречающихся на Левобережной Украине видов с характеристикой состояния популяций и данными о сроках и регулярности появления плодовых тел. Для редко встречающихся видов более перспективным яв-ляется выделение их в чистую культуру.
ВИДОВОЙ СОСТАВ ГРИБОВ ОСИНОВЫХ ЛЕСОВ ЮГА КР АСНОЯРСКОГО КР АЯ
Заузолкова Н.А., Максимова Т.А.
Хакасский Г
осударственный Университет им. Н.Ф. катанова,
Абакан
На юге Красноярского края осиновые леса занима-
ют
не более 10 %, но являются производными образо-
ваниями, возникающими на месте хвойных лесов.
Грибы имеют большое значение в жизни различных
фитоценозов, в том числе и в осиновых лесах. Монито-ринг грибов в Сибири необходимо проводить в связи с недостаточной изученностью данной проблемы. Если в северной и центральной части Красноярского края, грибы частично изучались (Перова Н.В., 1968, 1970; Беглянова М.И., 1963, 1970, 1972 и др.), то южная часть Красноярского края (Минусинский район) анализиро-валась частично только Н.М. Мартьяновым в 1882 году. Поэтому южная часть Красноярского края остается ре-гионом, не изученным в микологическом отношении.
Осиновые леса на юге Красноярского края встре-
чаются в сухом и теплом климате лесостепи (Мину-синский р-н), небольшими участками в Саяно-Шу-шенском заповеднике, в предгорной зоне на границе с
Флора и охрана грибов 67
Тувой. Осина требовательна к плодородию почвы, но
зато малотребовательна к климатическим условиям и устойчив
а к заморозкам. это быстрорастущая порода,
особенно до 50 лет, но недолговечная, со средним воз-растом до 80–100лет, светолюбивая.
Для проведения мониторинга грибов осиновых
лесов нами заложено 5 стационарных участков (два в лесостепной зоне (Минусинский р-н), 1 в лесной, 1
– в предгорной зоне Саяно-Шушенского заповедника
(Шушенский р-н), и 1 на границе с Тувой (Ермаков-ский р-н). Сбор грибов осуществляли в течение двух лет начиная с конца мая и до 10 октября 2006–2007 года. Площадь участков по 500 мІ.
В течение двух лет в осиновых лесах Минусинс-
кого, Шушенского и Ермаковского районов собрано 127 видов грибов, относящихся к 37 семействам и 3 классам. Доминируют грибы класса базидиомице-ты (Basidiomycota). э
тот класс представлен 32 се-
мействами и 116 видами. Аскомицеты (Ascomycota) представлены 4 сем. и 11 видами, а дейтеромицеты (Deuteromycota)
– 1сем. и 1 видом.
В осиновых лесах доминирующими семействами
являю
тся Tricholomataceae – 26 видов (16,7 %), Corti-
ciaceae
– 15 в (12,3 %) и poriaceae – 10 видов(10,5 %).
Многие представители сем-ва Tricholomataceae
космополиты. Такие виды грибов как: Tricholoma
columbetta , T. sulphureum, mycena polygramma и др.
Большинство видов семейства Corticiaceae (Corticium
by
ssinum, peniophora argillacea, Hyphodontia paradoxa и
др.) – сапротрофы, встречаются на ослабленной и мер-
твой древесине осин. В осиновых лесах Минусинского р-
на доминируют сапрофитные виды –82,5 % (phellinus
igniarius, Bjerkandera adusta, Daedaleopsis confragosa). Па
разитических видов 17,5 % (fomitopsis officinalis). И
сапрофитные и паразитные виды грибов вызывают раз-личные типы гнилей. Паразитические грибы поселяют-ся на осинах, которым не меньше 20 лет.
Согласно классификации Горленко М.В. все най-
денные нами виды грибов разделены на 4 экологичес-кие группы:
1. К
силофилы. эту группу можно разделить на 2
подгруппы: грибы – паразиты и грибы – сапрофиты.
Грибы – паразиты, поселяющиеся на живой коре
деревьев или на других живых растениях (Taphrina sp., Trametes gibbosa, Fomes fomentarius, Trametes versico-
lor и др.).
Грибы
– сапрофиты, обычно поселяются на мёрт-
вой, уже частично разложившейся древесине (daldinia concentrica , Ganoderma
applanatum, Fomes fomentarius,
Hymenochaete tabacina и др.). Грибы, входящие в эти первую и вторую подгруппы, последовательно сменя-ют друг друга на одном и том же дереве
2. Подстилочные сапрофиты. Среди них можно вы-
делить лесные виды затененных мест и открытых про-странств, живущих на подстилке, на опаде. Мицелий данных грибов развивается в гумусном слое почвы. Сюда входят: marasmius
alliaceus, m. androsaceus, m.
epyphyllus , m. ramealis, m. rotula , mycena galericulata ,
m.
inclinata , m. filopes , m. leptocephala , m. polygramma
и др.
3. Микоризные грибы. Типичными микоризо-
образующими родами грибами являются Geastrum,
lycoperdon
, Paxillus , Ramaria, russula .
4. Особую экологическую группу составляют гри-
бы-копрофилы, живущие на помёте травоядных жи-вотных. И это в основном представители одного рода coprinus atramentarius
, c. plicatilis ).
Очень
часто в осиновых лесах обследованных
районов выявлены такие грибы как: bjerkandera
adusta
, Fomitopsis pinicola , Trametes versicolor ,
Trametes hirsute, lycoperdon perforatum , daedaleopsis
confragosa
var tricolor, Phellinus igniarius f. tremulae,
Stereum hirsutum и др. виды.
Среди очень редких видов следует отметить
ascocorine
sarcoides , cyathus stercoreus, daldinia
concentrica , Geastrum
fimbriatum, macr otyphula fistulosa,
mycena
leptocephala , ramaria apiculata , Scutellinia
scutellata .
Анализируя грибы изучаемой территории по пи-
щевой ценности можно увидеть, что в осиновых лесах доминир
уют несъедобные грибы 118 вида (92,02 %).
Процент ядовитых грибов трудно определить, не рис-ку
я отравиться. Только 9 видов или 7,08 % считаются
съедобными.
Самые богатые в видовом отношении осиновые
леса Минусинского р-на, относящиеся к лесостепной зоне (127 видов), Шушенского р-на 26 видов ( пред-горная зона) и в предгорной зоне на границе с Тувой Ерм
аковского р– на – 45 видов.
Грибы разновозрастных осиновых лесов отлича-
лась между собой не только в количественном, но и в качественном отношении. Наибольшее видовое раз-нообразие грибов представлено в пятидесятилетних осиновых ле
сах – 65 видов.
В осинниках до 10 лет, выявлено наименьшее кол-
во грибов (16 видов).
ГРИБЫ ПОРЯДКА HYMENOCHAETALEs В ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ
Зернаева А.В.
оренбургский государственный педагогический университет,
оренбург
Одним из наиболее типичных порядков деревораз-
рущающих грибов -базидиомицетов является порядок Hymenochaetales. В настоящее время на территории Оренбургской области обнаружено 22 вида трутовых грибов этого порядка, относящихся к семействам: phellinaceae,
Hymenochaetaceae, Inonotaceae. Ведущим
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 68
семейством является phellinaceae, число найденных
видов которого составляет 12. Наиболее крупными и
распространенными родами рассматриваемого поряд-ка яв
ляются phellinus, Inocutis, Hymenochaete.
Большое влияние на состояние дубрав Оренбург-
ской области оказывают трутовик древолюбивый (Inocutis dryophila),
дубовый трутовик (fomitoporia
robusta). Обычно I. dryophila обитает на вегетирую-щих деревьях дуба (Бондарцева, Пармасто, 1986). Ис-следования в разных районах области показали, что в среднем уровень зараженности древостоев этим видом сост
авляет 10–15 %. Активным патогеном дуба также
является f. robusta – вид–космополит, широко распро-
страненный
на вегетирующих деревьях дуба, реже –
на каштане, лещине, клене и других родах листвен-ных деревьев.
В Оренбургской области f. robusta чаще
встречается в низкогорных дубравах южных отрогов Уральских гор, где зараженность древостоев грибом мест
ами достигает 7–10 %.
Для прочих лиственных древесных растений наибо-
лее активными патогенами являются ложный трутовик (phe
llinus igniarius) и ложный осиновый трутовик ph.
tremulae. Ложный трутовик является космополитом и характеризуется значительной пластичностью по отно-шению к субстрату. В Оренбургской области чаще всего вс
тречается на осине, несколько реже – на ивах, тополях,
кленах. В целом распространение ph. igniarius в области
по большей части приурочено к пойменным биотопам. ph.
tremulae является постоянным участником микоце-нозов осинников, однако численность его невысока (10–15 %
). В Оренбургской области вид отмечен на вегетиру-
ющ
их и сухостойных populus tremula (Сафонов, 2000).
Также к ксилотрофным грибам порядка
Hymenochaetales, способным поселяться на вегетиру-ющих растениях в Оренбургской области, относятся: inocutis
rheades, i. radiatus, Phellinus alni, P . linteus ;
некоторые виды, в частности, Fomitoporia punctata ,
являются некротрофными паразитами, поражающими ткани дерева, ставшие мертвыми по иным причинам (бактериальное поражение, инфекция другого гриба, механическое повреждение). Виды, относящиеся к се-мейству
Hymenochaetaceae – Hymenochaete tabacina ,
H. rubiginosa, H. fuliginosa и др., как правило, обитают
на старых пнях и валежных стволах дуба и других лис-твенных пород; реже встречаются на хвойных (Бон-дарцева, Пармасто, 1986).
К числу редко встречающихся в Оренбургской об-
ласти представителей порядка Hymenochaetales отно-сятся: Hymenochaete corrugata, Phellinus tuberculosus ,
Ph. rimosus, Ph. pseudopunctatus.
Высокая дереворазрушающая активность и тен-
денция к быстрому расселению в лесах Оренбургской области грибов порядка Hymenochaetales, подвержен-ных рекреационному воздействию, требуют создания постоянно действующей системы мониторинга за со-стоянием популяций этих видов, контроля за древос-тоями, в которых эти патогены могут дать вспышку численности.
ЦВЕТОХОСТНИК АРЧЕР А (cla THruS arcHeri (bERk.) DRING,
CLATHRACEAE, pHALLALEs, bAsIDIOMYCOTA) В УКР АИНЕ
Зыкова М.А.
киевский национальный университет имени Тараса Шевченко,
киев
Межконтинентальные инвазии, пути и темпы рас-
селения грибов удовлетворительно изучены лишь для немногих видов. К их числу относится цветохвостник Арчера ( clathrus archeri (
Berk.) Dring) (= ant hurus archeri
(B
erk.) E. fisch.). Описанный из Тасмании, он впоследс-
твии был обнаружен в Австралии, Новой Зеландии, Цен-тральной и Юго-Восточной Азии, Африке, Южной Аме-рике, на островах Маврикий и Св. Елены (Dring, 1980 и др). c. archeri
считается инвазийным для территории
СШ
А (Arora, Burk, 1982) и Европы ( parent et al., 2000).
Точное время занесения c. archeri в Европу неиз-
вестно. Предположительно, он был случайно завезен во Францию накануне 1914–20 гг. из Австралии или Новой Зеландии с шерстью для текстильной промышленности или с австралийскими военнослужащими, которые вое-вали на территории Франции во время Первой мировой во
йны (Breitenbach, krдnzlin, 1986; Engel, 1970; parent,
Thoen, 1986; parent et al., 2000 и др.). До середины 30-
х гг. все европейские находки c. archeri были сосредо-
то
чены в горном массиве Вогезы ( vosges) на востоке
Франции вблизи границ с Германией и Швейцарией. В последующие годы c. archeri быстро распространяется
по территории Европы и в настоящее время регистри-руется от Испании на западе до Польши и Украины на востоке, от Великобритании и стран Скандинавии на се
вере до балканских стран на юге ( krieglsteiner, 1992;
Stengl-Rejthar, Wojewoda, 1985; Сосин, 1973 и др.).
В Украине цветохвостник Арчера впервые был обна-
ру
жен в 1977 г . в окрестностях г . Ужгород (Закарпатская
обл.), где отмечался и в 1978–79 гг . (Комендар, Куртин, 1980). Краткие сведения по биологии этого вида, осно-ванные на материалах из Закарпатья, были опубликованы С.П. Вассером и И.А. Дудкой (Вассер, 1990; Дудка, Вас-сер, 1987). Украинская находка c.
archeri стала второй
для территории СССР; первая была зарегистрирована в Казахстане в 1953 г . (Шварцман, Филимонова, 1970).
В июле 2007 г. c.
archeri был найден нами в окрес-
тностях г. Свалява (Закарпатская обл.) в двух локалите-тах в 60–70 км к юго-востоку от места первой находки. Впоследствии были выявлены и другие местонахожде-ния этого вида в Закарпатской и Ивано-Франковской областях (Зыкова, в печати) . Все находки c.
archeri в
Флора и охрана грибов 69
Украине приурочены к разновозрастным лиственным
(буковые, грабовые, березовые) и смешанным лесам по склонам гор на высотах 350–900 м н.у.м. Плодовые тела развиваются одиночно или группами в местах с различ-ной освещенностью на участках с большим количест-вом опада, а также гниющей древесины. Они форми-руются в период с последней декады июня по вторую декаду октября с максимумом обилия в июле-августе.
По морфологии c.
archeri из Украины соответству-
ет форме «brevipes» (sensu Maire, 1930), характерной для Западной и Центральной Европы. У зрелых бази-диом карпатских образцов «нога» рецептакула корот-кая (2–3 см.), обычно скрыта перидием, тогда как у c.
ar
cheri из Казахстана она значительно длиннее (8–10
см) (Сосин, 1973). Считается, что неприятный запах глебы c. archeri
привлекает мух и других насекомых, которые разно-сят споры гриба на большие расстояния (Breitenbach, krдnzlin,
1986 и др.). Из насекомых на цветохвостнике
Арчера мы наблюдали лишь красногрудых мертвоедов
(oiceoptoma thoracica L.) – жуков семейства Silphidae,
которые питались глебой и лопастями рецептакула. На возможное участие жесткокрылых в распростра-нении спор c.
archeri указывал Г. Кригльштейнер
(k
rieglsteiner, 1992).
Полученные данные свидетельствуют о том, что за
последние 30 лет c. archeri широко распространился
по Украинским Карпатам. Мы не исключаем возмож-ность его обнаружения в сопредельных регионах Ук-раины и в Республике Молдова.
ИССЛЕДОВАНИЯ АГАРИКОИДНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
В В
ОЛОГОДСКОЙ ОБЛАСТИ
Кириллова О.С.
вологодский государственный педагогический университет,
вологда
Вологодская область расположена на севере евро-
пейской части России, в пределах средней и южной тайги, занимает площадь 145,7 тыс. кв. км. В расти-тельном покрове представлены зональные типы хвой-ных лесов, во многих районах велико участие мелко-лиственных лесов, интразональная растительность представлена различными типами лугов, болот.
Сведения об агарикоидных базидиомицетах Воло-
годской области являются неполными, несмотря на то, что первые исследования были проведены ещё в XIX веке. Из публикаций, вышедших во второй половине XX века, следует отметить работу Т.Н. Кутовой (1957), выполненную в Дарвинском государственном заповед-нике (Череповецкий район). Результаты данных иссле-дований включены в вышедшие позднее российские определители
(э.Л. Нездойминого, 1983, 1996; А.Е.
Коваленко, 1989; «Низшие растения, грибы …», 1990, 1995). Данные по заготовкам и урожайности некоторых съедобных
грибов приводятся в работах Е.Г. Тюрина с
соавторами (1984) и Л.Н. Беляева (1999). В 2002 году на территории национального парка «Русский Север» (Кирилловский
район) проводил сборы Е.С. Попов
(Попов, 2004). С 2003 года исследования в националь-ном парке продолжаются нами (Кириллова, 2007).
Изучение разнообразия и структуры биоты агари-
коидных базидиомицетов осуществляется с использо-ванием стационарных и маршрутных методов на ох-раняемых территориях (национальный парк «Русский Север»), а также на участках с антропогенной нагруз-кой различной интенсивности (г. Вологда и окрестнос-ти, Сокольский, Грязовецкий, Сямженский, Нюксенс-кий и др. административные районы).
В настоящее время в Вологодской области выявле-
но 457 видов и внутривидовых таксонов агарикоидных базидиомицетов, которые относятся к 86 родам, 20 се-мействам и 5 порядкам. Список составлен на основе собственных исследований и литературных данных. Спектр ведущих семейств возглавляют Tricholomataceae, Cortinariaceae, Russulaceae, что характерно для всей лес-ной зоны Голарктики. В Красную книгу Вологодской области включено 7 видов агариковых грибов (Попов, 2004): entoloma incanum ,
Pluteus romellii , P . umbrosus ,
P . podospileus , russula aurea , r. azurea , Cortinarius
violaceus. Исследования последних лет позволили рас-ширить список редких видов, в Красную книгу облас-ти предложено внести 14: ama
nita nivalis , cortinarius
r
ubellus , cystoderma lilacipes , Gyrodon lividus , inocybe
c
ervicolor , i. mixtilis , lactarius semisanguifluus , l.
queticolor , leccinum percandidum , Pluteus boudieri ,
P . pellitus , P . punctipes , russula postiana , Tricholoma
aurantium . Данные виды встречаются редко в преде-
лах таёжной зоны европейской части России, многие охраняются в сопредельных с Вологодской областью регионах: Ленинградской, Архангельской, Ярославской областях, республике Карелия.
Литература:Беляев Л.Н. Побочные и иные пользования лесом
// Леса земли Вологодской. Вологда: Легия, 1999. С. 119
– 136.
Кириллова О.С. Агарикоидные базидиомицеты на-
ционального парка «Русский Север» (Вологодская об-ласть). Дисс. …канд. био
л. наук. – М., 2007. 179 с.
Коваленко А.Е. Определитель грибов СССР . Поря-
док Hygrophorales.
– Л.: Наука, 1989. 165с.
Кутова Т.Н. Шляпочные грибы Дарвинского запо-
ведника. // Труды Дарвинского государственного запо-ве
дника, 1957, Вып. Iv , С. 467 – 480.
Нездойминого э.Л. Определитель грибов России:
порядок Агариковые. Вып. 1. Семейство Паутиннико-вые.
– СПб.: Наука, 1996. 408 с.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 70
Нездойминого э.Л. Шляпочные грибы СССР . Род
Cortinarius fr. – Л.: Наука, 1983. 240с.
Низшие растения, грибы и мохоообразные Дальнего
Во
стока России. Грибы. Т.3. – СПб.: Наука, 1995. 382 с.
Низшие растения, грибы и мохоообразные советского
Да
льнего Востока. Грибы. Т.1. – Л.: Наука, 1990. 407 с.Попов Е.С. Грибы / Красная книга Вологодской
об
ласти Т.2. Растения и грибы. Вологда, 2004. С. 325 –
348.
Тюрин Е.Г., Нефедов Н.М., Серый А.А. Вологод-
ские леса. Архангельск; Вологда: Сев-зап. кн. изд-во,
1984. 128 с.
РОД inocYbe (fR.) fR. В БЕЛОРУССКО-ВАЛДАЙСКОМ ПООЗЕРЬЕ
Колмаков П.Ю.
витебский государственный университет им. П.М. Машерова,
витебск
Район исследования, в Белорусско-Валдайском По-
озерье, лежит между 57˚00’ и 54˚20’ с. ш. и 31˚20’ и 26˚ 00’ в. д. и занимает площадь в 49,3 тыс. кв. км. Он рас-положен в пределах Валдайского ландшафтного окру-га Северо-Западной ландшафтной области Русской равнины (Исаченко, Дашкевич, Карнаухова, 1965) и Поозерской ландшафтной провинции в северной части Беларуси (Природа Белоруссии, 1986).
Основные полевые исследования проводились с
2002 по 2005 год. Для сбора образцов применялся маршрутный метод исследования. Материал герба-ризирован по стандартным методикам (Бондарцев, Зингер, 1950; Гербарное дело, 1995) с изменениями и дополнениями, учитывающими современные подходы и требования различных определителей. В результате полевых работ собрано более 90 образцов 31 вида ага-рикоидных базидиомицетов из рода inocybe
(fr.) fr.,
которые пополнили коллекцию микологического гер-бария БИН Р АН (LE) и Витебского государственного университета им. П.М. Машерова (ВГУ). Сбор мате-риала проводился в различных лесных формациях.
Список видов:i.
abjecta p. karst., i. appendiculata kьhner, i. brun-
neotomentosa Huijsman, i. calamistrata (fr.) Gillet, i.
calospora Quйl., i. cookei Bres., i. curvipes p. karst., i. dulcamara (Alb. et Schw.) p. k umm., i. flocculosa (Berk.)
Sacc., i. fuscidula velen., i. fuscomarginata kьhn., i. geo-
phylla (pers.) p. k umm. i. grammata Quйl. et Le Bret., i.
hirtella
Bres., i. jacobi kьhn., i. lacera (fr.) p. kumm., i.
lanuginosa (Bull. : f r.) p. kumm., i. leptocystis G.f. Atk.,
i. mixtilis (Britzelm.) Sacc., i. napipes J.E. Lange, i. nitidi-
uscula (Britzelm.) Lapl., i. obscurobadia (J. favre) Grund
et D.E. Stuntz, i. paludinella (peck) Sacc., i. pelargonium
kьhn., i
. praetervisa Quйl., i. pusio p. karst., i. quietiodor
Bon, i. rimosa (Bull.) p. kumm., i. salicis kьhn., i. sam-
bucina (f r.) Quйl., i. striata Bres.
ЛитератураБондарцев А.С.,
Зингер p. Руководство по сбору
высших базидиальных грибов для научного их изуче-ния // Труды Бот. ин-та им. В.Л. Комарова, сер. 2, вып. 6. 1950. С. 500–546.
Гербарное дело. Справочное руководство // Под
ред. Бридсон Д., Форман Л. Королевский Бот. Сад, Кью, 1995. 341 с.
Исаченко А.Г., Дашкевич З.В, Карнаухова Е.В. Фи-
зико-географическое районирование Северо-Запада СССР . Л.: ЛГУ , 1965. 248 с.
Природа Белоруссии // Популярная энциклопедия.
Мн.: Белорусская советская энциклопедия им. Петру-ся Бровки, 1986. 598 с.
СТРУКТУР А БИОТЫ АФИЛЛОФОРОИДНЫХ ГРИБОВ
ПЕЧОРО-ИЛЫЧСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО ПРИРОДНОГО
ЗАПОВЕДНИКА (РЕСПУБЛИКА КОМИ)
Косолапов Д.А.
Институт биологии к оми НЦ Уро РАН,
Сыктывкар
Одним из важнейших компонентов лесных биоце-
нозов являются грибы, роль которых в природе вели-ка и многообразна. Грибы играют главенствующую роль в обеспечении растений почвенными элемен-тами минерального питания и водой (микоризооб-разователи). Дереворазрушающие грибы, благодаря мощному ферментативному комплексу, способному разлагать лигнин и целлюлозу играют ведущую роль в процессе деструкции древесины, который является одним из ключевых этапов в процессе круговорота веществ и энергии в лесных экосистемах.
Работы по изучению разнообразия афиллофоро-
идных грибов в Печоро-Илычском заповеднике были проведены в разные годы различными учеными (Хер-манссон, 1997; Косолапов 2000, 2003, 2004, 2005; Ушакова, 2000; Ширяев, 2000, 2004). В пределах Пе-чоро-Илычского выявлены местообитания 295 видов афиллофороидных грибов, относящихся к 128 родам,
Флора и охрана грибов 71
47 семействам и 21 порядку. Исследованиями были
охвачены все растительные сообщества равнинного и предгорного ландшафтных районов.
Таксономический анализ биоты афиллофороидных
макромицетов выявил, что наиболее крупными порядка-ми на территории заповедника являются Hyphodermatales (5
6 видов), fomitopsidales (42) и Hymenochaetales (25).
Ведущими семействами являются Chaetoporellaceae (2
7 видов), phaeolaceae (22), fomitopsidaceae , (20),
Schizophyllaceae (17), Coriolaceae и ph ellinaceae (по 15
видов). В целом спектр семейств характерен для таежной зоны северо-западной части России, где высокий уро-вень биоразнообразия наблюдается прежде всего в се-ме
йствах Chaetoporellaceae, fomitopsidaceae, phaeolaceae
и Schizophyllaceae. Средняя видовая насыщенность се-ме
йств видами составляет 6.3, родовая – 2.3. Наиболь-
шее число видов насчитывают такие роды как Phellinus
(15 видов), Postia (14), Hyphodontia и Skeletocutis (по 10) ,
Antrodia и Phlebia (9 и 8 видов соответственно). Высокая
видовая насыщенность таких родов как ant rodia, Phlebia,
Postia и Skeletocutis также свидетельствует о бореальных
чертах изученной биоты.
Выявление особенностей географического рас-
пространения видов, которые составляют биоту, ее позиции в ряду зональных и региональных биот яв-ляется одной из важнейших задач микогеографии. На территории заповедника среди афиллофороидных макромицетов наиболее полно представлены виды муль
тизонального географического элемента – 155
(53 %), который включает в себя такие грибы как Amphinema byssoides, Gloeoporus dichrous, fomitopsis pinicola, Hyphodontia sambuci, porotheleum fimbriatum
и др. Представителей бореального элемента, к кото-рым относятся Antrodia serialis, Cystostereum murrayi, Chaetoderma luna, f
omitopsis rosea, Skeletocutis
papyracea и др., – 128 видов (43 %). Вместе они состав-ляют основное ядро биоты афиллофороидных макро-мицетов
– 283 вид (96 % всего видового состава). Доля
неморальных видов невелика – всего 4 % (Ganoderma lucidum, Ischnoderma resinosum, Oxyporus populinus, Sistotremastrum niveocremeum и др.). Распределение по долготно-региональному признаку показало, что большинство видов имеют обширные типы ареалов. Так, мультирегиональных видов, распространенных как в Северном, так и в Южном полушариях, насчиты-вает
ся 114 видов (39 % общего видового состава) – это
Bjerkandera adusta, Hymenochaete tabacina, Mycoacia fuscoatra, phellinus
nigrolimitatus и др. В пределах Го-
ларктического флористического царства встречается 143 вида
(48 %): Antrodia heteromorpha, Diplomitoporus
lindbladii, Hapalopilus rutilans, phellinus chrysoloma,
Steccherinum fimbriatum, veluticeps abietina и др. Виды
с евроазиатским, европейским и амфиатлантическим распространением представлены незначительным числом
и в суммесоставляют 13 %. В целом, в биоте
афиллофороидных макромицетов заповедника пре-обладают виды, области распространения которых в мире дов
ольно обширны, – виды мультизонального
географического элемента с мультирегиональным ти-пом ареала (космополиты) и бореальные виды с голар-ктическим типом ареала. Таким образом, специфика изученной микобиоты не высока.
МИКОБИОТА КАБАРДИНО-БАЛКАРСКОЙ РЕСПУБЛИКИ
(ЗАПАДНАЯ ЧАСТЬ ЦЕНТР АЛЬНОГО КАВКАЗА)
Крапивина Е.А.1, Шхагапсоев С.Х.1, Булгаков Т.С.2
1 кабардино-Балкарский государственный университет им. Х.М. Бербекова,
Нальчик
2 Южный Федеральный университет,
Ростов-на-Дону
Кабардино-Балкарская Республика расположена в
центральной, наиболее высокогорной части (от 300 до 5000 м и выше) Большого Кавказа, на его северных скло-нах, в бассейне левых притоков Терека. Республика зани-мает часть Предкавказской равнины. Крайняя северная точка республики находится на 44˚01’ с.ш. и 44˚25’, край-ня
я южная – 42˚53’ с.ш. и 43˚22’ в.д., крайняя западная –
43˚17’ с.ш. и 42˚24’ в.д., крайняя восточная – 43˚35’ с.ш. и
44˚28’ в.д. (Емузова, 2003). Общая площадь, занимаемая Кабардино-Балкарской республикой, насчитывает 12,5 тыс. кмІ, от общей площади на долю лесопокрытой час-ти
приходится 9,6 %. В геоморфологическом отношении
в республике выделяются четыре района – равнинный,
предгорный, горный и высокогорный.
В течение довольно долгого времени, исследования
микобиоты носили отрывочный характер, в настоящее время для КБР известно 1393 вида грибов. Исследования грибов-микромицетов проводились
Савинцевой З.Д. в 1960–80-х гг., при этом основное внимание уделялось паразитам травянистых пастбищ-ных растений (Савинцева, 1982). В результате, на тер-ритории КБР ею обнаружено и описано 775 видов на 1315 видах цветковых растений. В основном это пара-зитные виды из переноспоровых, сумчатых, главным образом, мучнисторосяных, ржавчинных, головневых и несовершенных грибов, также ранее не известные для микологической науки новые 17 видов.
В настоящее время исследование грибов-микроми-
цетов продолжаются, выявлено 9 родов и 76 телеоморф-ных видов мучнисторосяных грибов (сем. ery
siphaceae )
поражающих 216 видов покрытосеменных растений из 156 родов и 46 семейств. Из них 3 рода ( art
hrocladiella ,
Phyllactinia , Sawadaea ) и 31 вид являются новыми для
региона (Булгаков, Крапивина, 2007).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 72
Начатые нами планомерные исследования макро-
мицетов с 1999 года по 2007 позволили составить ан-
нотированный список видов лесных экосистем, кото-рый насчитывает 542 вида, относящихся к 170 родам, 60 семействам, 22 порядкам и трем классам, 150 видов указываются впервые, для Западной части Централь-ного Кавказа.
Ведущими семействами являются: Tricholomatace-
ae, cortinariaceae, r
ussulaceae , содержащие 213 видов
из 30 родов, что подчеркивает бореальность данной микобиоты.
Большинство крупных родов относятся к крупным
семействам: Cortinariaceae → Cortinarius; Russulaceae → Russula, Lactarius; Tricholomataceae → Mycena, Tricholoma; Coprinaceae → Coprinus; Agaricaceae → Agaricus; Amanitaceae
→ Amanita и др. В родово – ви-дово
м спектре ведущее место занимают – Cortinarius,
Russula, Lactarius, Mycena, типично «лесные рода», со-держащие 105
видов (19,33 % от общего числа видов).
Главная роль в сложении микобиоты принадлежит
бореальному геоэлементу, который содержит 200 ви-дов (36,9
%), на втором месте стоят голарктические
геоэлементы, составляющие 120 видов (22,14 %), а также значительное влияние оказывают неморальные виды 97 (17,89
%).
Следует отметить, важность региональных иссле-
дований динамики видового разнообразия микобиоты, ее состава, структуры, распространения и экологии от-дельных видов, геофизических связей и т.д., что дают возможность сделать выводы о тенденциях изменения численности видов и разработки мер охраны биологи-ческого разнообразия грибов.
НОВЫЕ ДЛЯ УКР АИНЫ ВИДЫ РОДА Pezicula T UL. ET C. TUL.,
СОБР АННЫЕ НА ТЕРРИТОРИИ ХАРЬКОВСКОЙ ЛЕСОСТЕПИ
Красникова О.Н.
Харьковский национальный университет им. в.Н. каразина,
Украина
Одной из наиболее проблемных и малоизученных
групп грибов в Украине являются иноперкулятные дискомицеты. За весь период изучения микобиоты Украины представители этой группы никогда не были объектом глубокого и целенаправленного миколо-гического исследования. В общедоступной научной литературе, посвященной иноперкулятным дискоми-цетам, приводятся достаточно упрощенные описания нескольких «классических» видов. При этом описания видов-двойников, а также критериев их распознавания нередко отсутствуют. В связи с этим сведения о рас-пространении представителей иноперкулятных диско-мицетов в Украине часто отрывочны и противоречивы.
Одним из «классических» видов, который по лите-
ратурным данным считается широко распростренен-ным в Украине, является Helotium citrinum (Hedw
.) fr.
(современное название bispor ella citrina (Batsch) korf
et S.E. Carp.). В 2007 г. нами была проведена критичес-кая ревизия гербарных образцов «bispor
ella citrina »
из научного гербария CWU (Myc). В результате этой работы несколько образцов были реидентифицирова-ны как Pezicula acericola (
peck) peck ex Sacc. et Berl.
и Pezicula aesculea kirschst. Ранее эти виды не были
зарегистрированы на территории Украины.
Вид Pezicula acericola был обнаружен на ветвях
Quercus robur L., НПП «Гомольшанские Леса», Змиевс-
кой р-н, Харьковская обл., Украина, 25.XI.2006 г., CWU (Myc) AS 2663. Вид Pezicula aesculea был обнаружен
на валежной ветви Acer platanoides L., окрестности г. Мерефа, Харьковский р-н, Харьковская обл., Украи-на, 25.
vIII.2006 г., CWU (Myc) AS 1988; на валежном
стволе Acer cf. platanoides L., Плоский Яр, НПП «Го-мольшанские Леса», Змиевской р-н, Харьковская обл., Украина, 17.XI.2007 г., CWU (Myc) AS 2634.Род bisporella
Sacc. относится к семейству
Helotiaceae Rehm. Для него характерны небольшие светлоокрашенные апотеции, которые развиваются преимущественно на обнаженной древесине раз-личных деревьев и кустарников, на старых стромах некоторых пиреномицетов, изредка на мицелии тем-ноцветных гифомицетов. Парафизы простые, ните-видные, в верхней части толстостенные, формиру-ют эксципул с удлиненными клетками. Аскоспоры эллипсоидные или веретеновидные, изначально од-ноклеточные, но при созревании могут иметь одну септу.
Род Pezicula Tul. et C. Tul. относится к семейству
De
rmateaceae fr. Для него характерны небольшие
апотеции различной окраски, которые развиваются на базальной строме и прорываются из под коры на ство-лах и ветвях недавно отмерших деревьев и кустарни-ков. Формированию апотециев предшествует стадия анаморфы типа cry
ptosporiopsis Bubбk et kabбt, для
которой характерны эллипсоидные конидии с закруг-ленными краями и отчетливо выраженным базаль-ным рубчиком, в зрелом состоянии с 1–3 (5) септами. Парафизы разветвленные, тонкостенные, в верхней части желтоватые или слегка буроватые, формируют эксципул из изодиаметрических клеток. Аскоспоры обычно крупнее, чем у видов рода bis
porella , эллип-
соидные или веретеновидные, неравнобокие, часто изогнутые, в зрелом состоянии изредка с 1–3 (5) сеп-тами.
Обнаруженные нами виды Pezicula acericola и P.
аesculea обладают значительным сходством. Одна-
ко, у P. acericola аски 95–135 Ч 17–24 мm, аскоспо-
ры 20–37 Ч 6,5–10,5 мm (в основном 27,1–28,1 Ч 7, 8–8,5 мm). У P. аesculea аски 110–165 Ч15–19 (–21)
Флора и охрана грибов 73
мm, аскоспоры 19–39,5 х 5, 5–10 мm (в основном 26,
6–29, 9 Ч 6, 4–8, 3 мm), часто с крючкообразно изог-нутыми концами. Апикальные клетки парафиз у P. аcericola вздуты до 5–7 (–9, 5) мm, а у P. аesculea до
4, 5 мm.
Ра
бота выполнена под руководством Акулова А.Ю.
ХАР АКТЕРИСТИКА БИОТЫ АФИЛЛОФОРОИДНЫХ ГРИБОВ
ФЛОРИСТИЧЕСКИХ Р АЙОНОВ И БИОГЕОГР АФИЧЕСКИХ
ПРОВИНЦИЙ РЕСПУБЛИКИ КАРЕЛИЯ
Крутов В.И.1, Коткова В. М.2, Бондарцева М.А.2, Руоколайнен А.В.1
1 Институт леса карельского научного центра РАН,
Петрозаводск,
2 Ботанический институт им. в. л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
К настоящему времени на территории Республики
Карелия (РК) выявлено 478 видов афиллофороидных грибов из 156 родов, 54 семейств и 21 порядка по сис-теме, принятой в «Nordic Macromycetes» (1997). На основании исследований авторов в 1990–2007 гг. (Бон-дарцева и др., 2001; Коткова и др., 2006; Крутов и др., 2006; Руоколайнен, Предтеченская, 2007 и др.), лите-ратурных данных и гербарных материалов показаны их представленность и охранный статус в различных флористических районах и соответствующих им био-географических провинциях РК.
Наибольшее количество видов отмечено в следу-
ющих флористических районах и биогеографических пр
овинциях: Заонежском ( karelia onegensis – kon) – 324
вида (70 % от общего числа) из 47 семейств, Кемском
(karelia pomorica occidentalis – kpoc) – 268 видов (56 %)
из 41 семейства, Водлозерском ( karelia transonegensis –
kton) – 200 видов (43 %) из 43 семейств и Олонецком
(karelia olonetsensis – kol) – 199 видов (43 %) из 44 се-
мейств (см. таблицу). Менее изучены к настоящему вре-мени на юго-западе республики районы и провинции: Су
оярвский ( karelia borealis – kb) – 172 вида (37 %) из
39 семейств, Приладожский ( karelia ladogensis – kl) –
163 вида (35 %) из 43 семейств, а на севере – Иманд-
ро
вский (Regio kuusamo – ks) и Топозерский ( karelia
keretina – kk), где всего обнаружено 176 видов (38 %) из
41 семейства. Лишь единичные сборы (37 видов) извес-тн
ы из Выгозерского флористического района ( karelia
pomorica orientalis – kpor). Совершенно неизученной
остается юго-восточная часть Пудожского флористи-че
ского района ( karelia pudogensis – kp).Несмотря на неодинаковую изученность территории,
общим для всех флористических районов и провинций является доминирование 5 семейств, отличающихся на-ибольшим видовым разнообразием: Chaetoporellaceae (средняя
видовая насыщенность 23), phellinaceae и
Schizophyllaceae (по 14, 4), fomitopsidaceae (13, 7) и
phaeolaceae (12, 4). У 12 семейств этот показатель ко-леблет
ся между 5 и 10 видами, у 5 – от 3 до 5, а осталь-
ные 32
семейства (59 %) представлены единичными
видами почти во всех провинциях.
Из общего числа известных к настоящему времени
видов 38 являются очень редкими и нуждающимися в охране (Красная книга Республики Карелия (2007), 74
– специфичными для отдельных провинций и 53
вида считаются индикаторными (таблица). Наиболь-шее их количество представлено в коренных и слабо нарушенных лесных экосистемах особо охраняемых природных территорий: заповедника «Костомукш-ский» и НП «Калевальский» (провинция Kpoc), НП
«Водлозерский» (Kton), заповедника «Кивач» и заказ-ника «Кижские шхеры» (Kon), в меньшей мере – НП
«Паанаярви»
(Ks) и природного парка «Валаамский
архипелаг» (Kl). эти данные лишний раз подтвержда-
ют высокую значимость существующей сети ООПТ для сохранения разнообразия биоты, в том числе афил-лофороидных грибов, в лесных экосистемах республи-ки.
Работа выполнена при частичной финансовой под-
держке РФФИ (гранты 05–04–97524-р-Север, 06–04–49524а и 07–04–01408а) и программы «Биоразнообра-зие».
МАТЕРИАЛЫ К ИЗУЧЕНИЮ БАЗИДИОМИЦЕТОВ ТЕМНОХВОЙНЫХ
ЛЕСОВ ЗАПАДНОГО САЯНА (СЕМ. CORTINARIACEAE )
Крючкова О.Е.
Сибирский федеральный университет, Институт естественных и гуманитарных наук,
красноярск
Биологическое разнообразие макромицетов Юж-
ной Сибири, в том числе и Западного Саяна, до сих пор остается недостаточно изученным. В биоте ага-рикоидных грибов бореальной зоны одним из веду-щих по видовой насыщенности является семейство Cortinariaceae, представители которого являются ми-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 74
коризообразователями и сапротрофами. Были иден-
тифицированы грибы, собранные в 2006–2007 гг на территории двух округов Северной Алтайско-Саян-ской провинции: Осевой Западно-Саянский округ кедровых горно-таежных и подгольцовых лесов (хр. Арадан
– кедровник бруснично-зеленомошный (далее
по тексту – КБЗ), кедровник зеленомошно-осочковый (КЗО), кедровник зеленомошно-долгомошный (КЗД) и Амыльский среднегорный темнохвойных горно-таеж-ных и
черневых лесов (окрестности пос. Танзыбей –
пихтарник хвощово-зеленомошный (ПХЗ), кедровник разнот
равно-зеленомошный (КРЗ)). эти районы ха-
рактеризуются холодным континентальным избыточ-но влажным климатом. Всего отмечен 31 вид: 1.
cortinarius alboviolaceus (pers. : fr.) fr. – КБЗ, КЗД,
на почве, довольно часто.
2. c. armillatus (fr. : f.) fr. – КБЗ, КЗО, КЗД, на почве,
среди мха, довольно часто часто.
3. c. azureus fr. – КБЗ, на почве, очень редко.
4. c. caninus (fr.) fr. – КЗО, на почве, редко.5. c. cinnamomeus (L. : fr.) fr. – КЗД, на почве, среди
мха, редко.
6.
c. collinitus (Sow. : fr.) fr. – КБЗ, на почве, редко.
7. c. croceus (Schaeff.) Bigeard et Guillemin. – ПХЗ, на
почве, на подстилке, редко.
8. c. emollitus fr. – КЗО, на подстилке, редко.
9. c. hemitrichus (pers. : fr.) fr. – КЗО, КЗД, КРЗ, на
почве, довольно часто.
10.
c. junghunii f . – КЗО, на почве, редко.
11. c. mucosus (Bull.: fr.) kichx – КЗО, на почве,
редко.
12.
c. pholideus (fr.: f.:) fr. – КЗД, на почве, довольно
часто.13.
c. rigidus (Scop.) fr. – КБЗ, на почве, редко.
14. c. rubicundulus (Rea) pearson – КЗД на почве, очень
редко.
15.
c. rubricosus (fr.) fr. – КБЗ, на почве, очень редко.
16. c. semisanguinea (fr.) Gillet – КЗД, на почве среди
лишайников, редко.
17. c. sphagneti Sing. – КБЗ, на почве среди мха, редко.
18. c. traganus (fr.: f .:) fr. – ПХЗ, на почве, редко.
19. c. trivialis J. Lange – КБЗ, КЗД, на почве, среди ли-
шайников, довольно часто.
20.
c. venetus (fr.) f. – КБЗ, КЗО, на почве среди мха,
лишайников, довольно часто.
21. Galerina
hypnorum (Schrank : fr.) kьhner – КБЗ,
КЗО, КЗД, на почве, на подстилке, довольно часто.
22. G.
mniophyla (Lasch) kьhner – КБЗ, КЗО, КЗД, на
подстилке, среди мха, довольно часто.
23. G.
pumila (pers.: fr.) M. Lange ex Sing. – КБЗ, КЗД,
на подстилке, среди мха, редко.
24.
inocybe asterospora Quйl. – КЗД, на почве, редко.
25. i. pseudodestricta Stangl et veselsky – ПХЗ, среди
мха, редко.
26
. i. floccuosa (Berc.) Sacc. – ПХЗ, КРЗ, на почве, редко.
27. i. lanuginose (Bull. : fr.) kumm. – КРЗ, на почве,
очень редко.
28.
i. maculatа
Boud. – КЗО, на почве, редко.
29. i. rimosa (Bull. : fr.) kumm. – КРЗ, среди мха, редко.
30. leucocortinarius bulbiger (Alb. et Schw.: fr.) Singer –
КЗО, на почве, довольно часто.
31.
rozites caperata (pers. : fr.) p. karst. – ПХЗ, на поч-
ве, редко. Большинство обнаруженных видов относится к
роду cortinarius
(20 видов), на втором месте inocybe (6
видов), доля других родов незначительна.
НОВЫЕ ВИДЫ РЖАВЧИННЫХ ГРИБОВ
ЗАПАДНО-АЛТАЙСКОГО ЗАПОВЕДНИКА
Кызметова Л.А.
Институт ботаники и фитоинтродукции МоН Рк,
Алма-Ата, казахстан
Территория заповедника (ЗАГПЗ) размещается на
стыке различных регионов – гор Южной Сибири и Центральной Азии, обширных равнинных пространств Западно-Сибирских степей и пустынь Казахстана. Он занимает площадь 56078 га у северо-восточной гра-ницы Восточно-Казахстанской области на террито-рии двух административных районов: Риддерского и Зыряновского. Основные горные хребты: Линейский, Коксинский, Ивановский и Ульбинский, не достигают больших высот и имеют рельеф эрозионного харак-тера. В горах хорошо развита гидрологическая сеть, представленная реками Белая и Черная Уба с прито-ками Сидяшиха, Линейчиха, Каменушка, Палевая. В долинах рек Черная и Белая Уба расположены неболь-шие по площадям мелколиственные леса /1/.
В результате экспедиционных исследований в ЗА-
ГПЗ за период 2006–2007гг. идентифицировано 19 видов ржавчинных грибов, относящихся к 6 родам (Puccinia, ur
omyces, coleosporium, melampsora, Phrag-
midium, Triphragmium) и 5 семействам (Pucciniaceae,
coleosporiaceae, m
elampsoraceae, Phragmidiaceae,
Sphaerophragmiaceae). В основном ржавчинные грибы в исследуемом регионе представлены родами Puccinia
pers.
(9 видов) и uromyces Link. (5 видов), melamp-
sora
Castagne (2 видa), Phragmidium Andersonii, coleo-
sporium Leveille , и
Triphragmium Lk. (по 1 виду). Все
приведенные грибы являются новыми для территории заповедника. Ранее на территории этого заповедника ржавчинные грибы не отмечены /2/.
Выявленные ржавчинные грибы зарегистрированы
на 23 видах питающих растений, распределяющихся между 19 родами и 12 семействами. На 11 видах рас-тений впервые отмечены ржавчинные грибы. Распре-деление ржавчинных грибов по питающим растениям
Флора и охрана грибов 75
достаточно неравномерно. Наибольшее количество
зарегистрировано на представителях семейств Rosa-
ceae, compositae – по 3 вида, liliacea, euphorbiaceae,
Fabaceae , umbelliferae – по 2 вида. На представителях
других семейств ( Saxifragaceae, Salicaceae , caryophyl –
laceae, iridaceae, l
abiatae и ranunculaceae ) отмечено
по 1 виду ржавчинных грибов.
Ниже приводится список ржавчинных грибов с
указанием стадии развития и растения-хозяина.
1. melampsora salicina L ev., II – на Salix sp., 2. m.
eu
phorbiae – dulcis Otth., I – на euphorbia pilosa L., 3.
Puccinia alli (D C.) Rudolphi., П, Ш, – на allium altaicum
pall., 4. P . behenis III – на Silene nutans L., S. repens patr.,
5
. P . chaerophylli pur ton, П, Ш –на anthriscus aemula
(Woron.) Schischk ., 6. P . eriophori Th um., 1 – на Senecio
nemorensis L., 7. P .iridis (DC) Wallr., II – на iris tianschan-
ica (Maxim) vv ld., 8. P . ribis nigri – caricis kleb., I – на
ribes nigrum L., 9. P . saussureae Th um., П – на Saussurea latifolia Ledeb., 10. P . sogdiana kom arov, П, Ш – на Au-
lacospermum anomalum Ledeb., 11. P . ziziphorae Syd.,
II –
на ziziphora clinopodioides Lam., 12. uro myces laevis
koern. , П, Ш – на euphorbia buchtormensis C.A. Mey. ex
Ledeb., на eup horbia sp. 13. u. lycoctoni (kalchbr) Trot-
te
r., III – на aconitum leucostomum Worosch., 14. u. tri-
folii-repentis ( Cast.) Liro, III – на Trifolium hybridum L.,
15. u. veratri ( DC.) Schroet., III – на Veratrum nigrum L.,
16. u. viciae-craccae C onst., II – на Vicia cracca L., 17.
col
eosporium ligulariae Thum., II – на ligularia sibirica
(L.) Cass., 18. Phragmidium tuberculatum J. Muller, П – на
rosa acicularis Lindl., 19. Triphragmium ulmariae Link., I,
iii – Filipendula ulmaria (L.) Maxim.
Литература:1. Заповедники и национальные парки Казахстана.
Алматы, 2006, 284с.
2. Неводовский Г.С. Флора споровых растений Ка-
захстана. Алма-Ата, 1956, 430с.
АГАРИКОИДНЫЕ ГРИБЫ ОКСКОЙ ПОЙМЫ
Левицкая Г.Е.
Институт биофизики клетки РАН,
Московская обл., Пущино
Нашей задачей было составить список агарико-
идных макромицетов, встречающихся в пойме по ле-вобережью Оки от с. Лужки до д. Зиброво (~ 10 км) Серпуховского района Московской области, и проана-лизировать их распределение по частям поймы и ти-пам растительности. Пойма вызвышенно-равнинная, в притеррасной части есть гривистые участки. Прирус-ловая и центральная части поймы заливаются паводка-ми в
апреле почти ежегодно, притеррасная – высокими
паводками 1 раз примерно в 25 лет (последний раз – в 1994 г., ранее – в 1972 г.). Период наших наблюдений 1990–96 гг.
Прирусловая часть поймы характеризуется крат-
ко- (до 10 дней) или среднесрочным (до 1 месяца) регулярным затоплением, высокой скоростью павод-кового течения и отложением песка до нескольких см то
лщиной каждый паводок. Растительность – ивняки,
высокотравные луга. Найден 1 вид грибов flammulina
velutipes – на комле сухой ивы.
Центральная часть поймы затопляется на срок до
1 месяца, а в понижениях и дольше. Наилок откла-дывается тонкодисперсный толщиной несколько мм. Растительность
– злаково-разнотравные сенокосные
луга, разнотравно-злаковые пастбища, пропашные культуры, ивняки с единичными вязами и ольха-ми высокотравные. Грибы: на пастбище -Psathyrella prona, conocybe
subovalis, macr olepiota excoriata ,
lepista
luscina – сапротрофы на гумусе; на кукуруз-
ном
поле – agrocybe molesta – на гумусе; в ивняках –
coprinus comatus, lyophyllum decastens , cystolepiota
seminuda
– сапротрофы на гумусе, Hemipholiota
populnea, Flammulina velutipes – на древесине вяза и
ивы, Pholiota higlandensis – на уг лях.Притеррасная часть заливается нерегулярно и на
коро
ткий срок. Подстилающие породы – известняки,
перекрытые песком, и наличие карста способству-ют
быстрому сходу воды. Растительность – злаково-
разнотравные луга сенокосные с высоким участием степных видов и широколиственный лес с липой, дубом, вязом, осиной, единичными соснами и берё-зами, неморальными и гигрофильными видами в тра-вяно
м ярусе. Грибы: на остепнённых лугах – agaricus
arvensis, conocybe tenera, entoloma hirtum, e. juncinum,
cuphophyllus
russocoriaceus, Gliophorus perplexus, G.
psittacinus , Hygrocybe conica, Pseudohygrocybe ceracea ,
P . phaeococcinea , lepista personata, leucopaxillus
candidus
, l. lepistoides , marasmius oreades, там же,
но у
опушки сложного бора – clitocybe geotropa, c.
metachr
oa, inocybe flocculosa – все сапротрофы на гу-
мусе, за исключением последнего вида, считающегося симбиотрофным; в пойменном лесу -melanophyllum
haematospermum
, Pluteus romellii, armillaria mellea –
на лиственной древесине, entoloma strigosissimum ,
calocybe
gambosa, marasmius wynnei – сапротрофы на
гумусе, collybia dryophila , cystolepiota seminuda – на
подстилке и гумусе, inocybe calospora, i. geophylla –
симбиотрофы, вероятно факультативные.
Таким образом, в прирусловой части поймы усло-
вия крайне неблагоприятны для почвенных видов мак-ромицетов и растут в этих условиях только некоторые ксилотрофы.
В центральной части поймы помимо ксилотрофов,
встречаются быстро растущие сапротрофы на гумусе и углях, успевающие развить мицелий и образовать плоды за 1 вегетационный сезон. Нами найдено только 2 вида са
протрофов на гумусе – macrolepiota excoriata и lepista
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 76
luscina , базидиомы которых отмечались на регулярно за-
ливаемых участках практически ежегодно, т. е. эти виды
переносят среднесрочное (до 1 месяца) затопление. Оба вида встречаются на уплотнённой почве и, вероятно, адаптированы к низкому содержанию кислорода в почве, что делает их более устойчивыми к вымоканию.
Нерегулярное кратковременное заливание лугов в
притеррасной части поймы не оказывает существенно-го влияния на видовой состав агарикоидных макроми-цетов
– здесь на небольшой площади встречается око-
ло половины видов отмеченных на различных, в том числе суходольных, лугах этого района. Леса с теми же условиями заливания имеют сильно обеднённый видовой состав агариковых по сравнению с лесами того же состава вне поймы из-за отсутствия облигат-ных симбиотрофов и сапротрофов на подстилке.
ВИДЫ РОДА cHaeT omium ПОДМОСКОВЬЯ И ИХ ХАР АКТЕРИСТИКА
Линник М.А., Прохоров В.П.
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова, кафедра микологии и альгологии,
Москва
Грибы рода chaetomium , согласно литературным
данным, широко распространённым в наземных эко-системах аскомицетам и входят в группу подстилочных сапротрофов. Они встречаются на растительных остат-ках, древесине, в почве, помёте травоядных животных и птиц и являются важным компонентом пищевых цепей. При хранении в неблагоприятных условиях, они могут развиваться на книгах и документах, изготовленных из бумаги, пергамента, тканях, вызывая их разрушение.
Исследование биоразнообразия видов р. chaetomi-
um
было проведено с использованием метода влажных
камер и инкубирования растительных остатков и по-мёта травоядных животных на минеральных средах. В разных районах Московской области было собрано бо-лее 250 образцов материала для изучения. В результа-те проведённых исследований было выделено и иден-тифицировано 14 видов р. chaetomium
– c. aterrimum
ellis et everh., c. aureum chivers, c. bostrychodes zopf,
c. cochlioides Palliser, c. crispatum (Fuckel) Fuckel, c.
cuniculorum Fuckel, c. elatum Kunze, c. funicola cooke,
c. globosum Kunze, c. longicolle Krzemien. et badura,
c. megalocarpum bainier, c. murorum corda, c. spirale
zopf, c. torulosum bainier.
Большинство известных видов р. Chaetomium, со-
гласно литературным данным, входит в группу ме-зофильных организмов, развивающихся в широком диапазоне температур. Результаты проведёных нами исследований показали, что динамика роста, морфоло-гия колоний и развитие плодовых тел могут изменять-ся в зависимости от температуры инкубирования. Ис-следованы динамика роста и развитие колоний 6 видов р. Chaetomium (С. globosum, C. cochlioides, C. funicola, C. elatum, C. murorum и C. spirale) при разных темпе-рат
урах (15, 25 и 35 °С). Характерные для исследован-
ных видов плодоношения активно формировались при температ
уре 25 °С, которая была оптимальной для раз-
вития видов
этого рода. При температуре 15 °С у всех
видов развивался только вегетативный мицелий. Тем-перат
ура 35 °С оказалась критической для большинс-
тва исследованных видов. Рост колоний с изменённой морфологией отмечен у С. globosum и C. spirale.
Многие представители р. chaetomium
могут ис-
пользовать целлюлозу в качестве источника углерода. эт
а особенность позволяет им успешно колонизиро-
вать целлюлозосодержащие субстраты, в том числе бумагу, ткани и материалы из дерева, вызывая их био-повреждение. В результате проведения исследования активности разрушения бумаги марки КР АФТ видами С. globosum, c.
rectum , c. cochlioides , c. funicola , c.
elatum
, c. murorum и c. spirale и их сравнительного
анализа обнаружена разная степень заселения поверх-ности образцов бумаги и активности её разрушения.
ПОЧВЕННЫЕ МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ
БИОСФЕРНОГО ЗАПОВЕДНИКА АСКАНИЯ – НОВА
Лиховидов В.Е.1, Александрова А.В.2
1 ФГУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии»,
оболенск, Московская обл.
2 Московский государственный университет имени М.в. ломоносова,
Москва
Заповедник Аскания-Нова расположен в степной зоне
юга Украины, в наиболее сухой части Причерноморской низменности. Он создан для сохранения ненарушенных степных экосистем. В заповеднике существует свыше 100 лет участок целинной степи площадью 1560 га с аб-со
лютно-заповедным режимом. это единственный в Ев-
ропе эталон типчаково-ковыльной степи. В течение 2004 –2005 годов нами впервые были проведены исследования почвенных микромицетов заповедника Аскания-Нова. Материал для исследования собран в восьми биотопах:
Флора и охрана грибов 77
– северная часть склона Большого Чапельского пода
(типчаково-ковыльная степь);
– т
ам же (естественная пылевая ванна для копытных
животных);
– пл
акор Большого Чапельского пода (ковыльная степь);
– под Фальц -Фейна, абсолютно заповедная степь (подовый пырей, осока);
– ю
жный склон пода Фальц-Фейна, абсолютно запо-
ведная типчаково-ковыльная степь;
– дендропарк
(можжевеловая, ясеневая, кленовая
рощи). В результате проведения микологических исследо-
ваний выявлено 65 видов почвенных грибов, прина-длежащих к
отделам zygomycota (4), Ascomycota (4) и
анаморфным грибам, связанным с отделом Ascomycota (55), а также стерильный мицелий двух типов. Наибо-лее представленным, как это характерно практически для любых
почв, был род penicillium (14 видов), од-
нако
это составляет только 22 % от всех обнаружен-
ных видов, что согласуется с данными о сокращении доли
рода penicillium в южных почвах. Грибы из родов
Aspergillus и fusarium представлены каждый четырь-
мя видами
(6 %), что также характерно для степных
почв. Довольно большая доля в разнообразии грибов (12 видов,
19 %) приходится на темноокрашенные ги-
фомицеты, участвующие в процессах гумусообразова-ния, многие из них имеют высокое обилие.
Биотопическое распределение почвенных грибов
имеет свои особенности: наибольшее количество ви-дов (19–20) отмечено в биотопах дендропарка; на-именьшее (10
видов) – в типчаково-ковыльной степи.
В других биотопах выявлено от 14 до 18 видов грибов. По численности грибов (КОЕ /1г почвы) биотопы де-ндропарка также намного превосходят другие биотопы (890–1090 тысяч). Наименьшая численность грибов отме
чена для абсолютно – заповедной степи (КОЕ =
330 тысяч). В остальных биотопах заповедника чис-ленность грибов составляет 360–500 тысяч КОЕ.
Выявленные различия в качественном и количест-
венном составе почвенных грибов между изученными биотопами заповедника обусловлены наличием сущес-твенной разницы в степени увлажненности почвы. В дендропарке постоянно действует система орошения древостоев, в то время как степные участки испытыва-ют на себе жесткое влияние особо сухого Асканийско-го физико-географического района.Наиболее встречаемыми видами являются: botryot-
richum
piluliferum Sacc. et Marchal, clonostachys rosea
(Link : f
ries) Schroers, Samuels, Seifert et W. Gams,
Geomyces pannorum var. pannorum (Link) Sigler et Car-
michael, Penicillium citreonigrum Dierckx, P . janczews-
kii zaleski, P viridicatum Westling, P . westlingii zaleski,
Stachybotrys
chartarum (Ehrenberg) S. Hughes и темно-
окрашенный стерильный мицелий.
Из грибов, обладающих целлюлозолитической ак-
тивностью выделены следующие виды: botryotrichum
piluliferum
Sacc. et Marchal, doratomyces stemonitis
(p
ers. : fries) Morton et G. Smith, Stachybotrys char-
tarum (Ehrenberg) S. Hughes, Torula herbarum Link :
fries, c
haetomium sp., Farrowia sp., rhinocladiella sp.
Из хищных гифомицетов найден только arthr obotrys
oligospora f resenius.
Для целей биотехнологии могут представлять инте-
рес как продуценты биопестицидов следующие виды почвенных грибов заповедника: arthr
obotrys oligospo-
ra, clonostachys rosea, Gliocladium catenulatum , Verti-
cillium nigrescens, metar hizium anisopliae , coniothyrium
sp., Paecilomyces carneus, P . lilacinus, P . marquandii, а
также представители родов chaetomium , Trichoderma.
Для проверки этого тезиса была определена инсек-
тицидная активность отдельных штаммов грибов. Опре-деляли москитоцидную активность мицелиальной куль-туры грибов met
arhizium anisopliae F-748 и clonostachys
r
osea F-950 , выращенных на плотной агаризованной сре-
де. У становлено, что при концентрации конидий грибов 1×10
6 активность нативных культур в отношении личи-
нок комаров aed es aegypti по показателю LT50 (среднеле-
та
льное время смертности) составляла 4,0 – 4,1 суток.
Определяли антимикробную активность штам-
ма гриба metar hizium anisopliae F-748 в отношении
бактерий erwinia carotovora (возбудитель бактерио-
зов растений) и Staphylococcus aureus (возбудитель
госпитальных инфекций). Штамм культивировали на
плотной среде Чапека в течение 10–15 дней до начала спороношения. Активность нативной культуры опре-деляли методом агаровых блоков в чашки Петри, со-держащих тест-культуру бактерий. Установлено, что диаметр зоны подавления бактериальных культур со-ставил:
15 мм – для Staphylococcus aureus; 10 мм – для
erwinia carotovora.
Работ
а поддержана грантом МНТЦ № 2338р «эн-
томопатогенные грибы и их метаболиты».
Исследования макромицетов на юге Средней Си-
бири были начаты в конце 19 века. Первые сведения представлены Ф.Тюменом и Н. М. Мартьяновым (Бег-лянова, 1972), обработавшими сборы по Минусинско-му округу, где было выявлено 127 видов макромице-тов. Планомерные исследования шляпочных грибов на ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ МАКРОМИЦЕТОВ НА ЮГЕ СРЕДНЕЙ СИБИРИ
Майнагашева Н.В., Горбунова И.А.
Хакасский гос
ударственный университет им. Н. Ф. катанова,
Абакан
Центральный сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 78
юге Красноярского края были начаты М. И. Бегляно-
вой в 1954 г. и продолжались до 1971 г. Общая пло-щадь исследованной территории равнялась приблизи-тельно 225 тыс.кв.км. В нее вошли административные районы Красноярского края и современной Республи-ки Хакасия (Хакасия приобрела статус Республики 3 июля 1991). В результате данных исследований была собрана самая обширная коллекция в Средней Си-бири, основу которой составили агариковые грибы. Коллекционные сборы макромицетов проходили пре-имущественно в подтаежных лесах и в южной тайге бореальной зоны. Исследованиями также был охвачен редколесно-таежный пояс южной части Енисейского кряжа. Часть материала собрана в степных и горно-таежных поясах Минусинско-Хакасской котловины, эпизодически обследованы Западно-Саянские высоко-горные комплексы. В результате многолетних миколо-гических исследований в южной части Красноярского края М. И. Бегляновой выявлено 769 видов агариковых грибов, отмечено их распространение в Красноярском крае и в мире, указаны съедобные и ядовитые виды, проведены таксономический, экологический и геогра-фический анализ выявленной микобиоты (Беглянова, 1972).
Определенный вклад в изучение макромицетов на
юге Средней Сибири был сделан И.В. Каратыгиным (1
965), э.Х. Пармасто (1965), А.Л. Яворским (1975),
М.В. Ноздренко (1965), Н.В. Перовой (1970), а так-же Л.В. Паршиной и Н.П. Кутафьевой (1976, 1978). В результате суммирования всех сведений о трутовых грибах Средней Сибири (Яворский, 1975) выявлено 119 видов, 7 разновидностей и 47 форм деревораз-рушающих грибов. В публикации М.И. Бегляновой, Н.П. Кутафьевой и др. (1978) содержатся сведения о 43 видах грибов из семейства Hydnaceae. В рабо-те «К флоре гастеромицетов Красноярского края» (Беглянова, 1971) опубликована информация о мес-тонахождениях 38 видов гастероидных грибов, про-израстающих в Средней Сибири. Имеются данные о дискомицетах (49 видов) (Беглянова, 1973) и рогати-ковых грибах (40 видов) (Беглянова, Паршина, 1976) Красноярского края.
Значительно позже новые и интересные сведения о
грибах Средней Сибири были получены Н. В. Перовой при из
учении макромицетов Тувы – в долинных лесах
Западного Танну-Ола (Перова, 1998) и особенно на территории Убсунурского биосферного заповедника (Ханминчун и др., 1997). Из 62 опубликованных для Тувы видов шляпочных грибов, отмечены интересней-шие находки тропической, степной и полупустынной микобиот. Некоторые из них вошли в Красную книгу Республики Тыва (1999).
Для Хакасии известны работы Т. А. Максимо-
вой (1999, 2005), в которых содержатся популярные сведения, а также данные о распространении неко-торых видов грибов Хакасии. В Красную книгу Рес-публики Хакасия занесены 10 видов (Красная книга, 2002).
Наиболее поздней работой по изучению макроми-
цетов на юге Средней Сибири является статья «Гас-теромицеты Западной и Средней Сибири» (Ребриев, Горбунова, 2007), в которой кроме оригинальных дан-ных обобщены и критически проанализированы лите-ратурные источники, посвященные биоте гастероми-цетов Средней Сибири.
Таким образом, на территории юга Средней Си-
бири выявлено более 1000 видов макромицетов. К наиболее слабо изученным районам относятся Хака-сия и Тыва. В 2007 г. начаты исследования агариковых грибов практически неизученного в микологическом отношении заповедника «Хакасский», где на сравни-тельно малой территории сосредоточены практически все растительные пояса обширного Алтае-Саянского экорегиона.
ПРОСТР АНСТВЕННАЯ СТРУКТУР А эПИФИТНЫХ ДРОЖЖЕВЫХ
СООБЩЕСТВ НА ПЛОДАХ SorbuS aucuP aria L.
Максимова И.А.
Московский государственный университет
им. М.в
. ломоносова, факультет почвоведения,
Москва
Обычно наличие или отсутствие тех или иных ви-
дов микроскопических грибов в анализируемом мес-тообитании почти всегда пытаются связать исключи-тельно с определенными факторами среды. Считается, что они вполне однозначно определяют таксономичес-кую
структуру сообществ микромицетов. этим грибы
отличаются от крупных растений и животных, видовой состав которых в значительной степени определяется наличием географических барьеров для их распро-странения. Тем не менее, представляется очевидным, что видовой состав многих эфемерных микробных со-обществ, формирующихся на недолговечных, богатых легкодоступными источниками питания субстратах, должен, прежде всего, зависеть от вероятности пер-воначальной контаминации клетками того или иного вида.
Целью данного исследования была количественная
оценка степени дифференциации сообществ дрожже-вых грибов, обусловленной в основном пространс-твенным положением. Для исследования был выбран модельный
природный субстрат – плоды рябины Sor-
bus aucuparia L., который удовлетворял следующим требованиям: он должен быть максимально стандарт-ным по биохимическому составу, на нем должны фор-
Флора и охрана грибов 79
мироваться многочисленные и разнообразные дрожже-
вые группировки, он должен быть достаточно широко распространен. Плоды рябины отбирали в девяти гео-графических пунктах на территории России и Молдо-вы. В каждом пункте были выбраны три дерева ряби-ны, расстояние между которыми составляло не более 100 м. С каждого дерева было собрано по три щитка плодов и с каждого щитка отобрано по три плода. Ме-тодом посева на сусло-агар анализировали дрожжевое население каждого плода.
Всего на ягодах рябины было обнаружено 20
видов дрожжей и дрожжеподобных грибов, среди которых, как и на большинстве растительных суб-стратов, доминировали широко распространенные эврибионтные и эпифитные виды: Aureobasidium pu
llulans, Cryptococcus spp. ( filobasidiales, Tremel-
lales), Rhodotorula glutinis sensu lato, Sporobolo-myces roseus. В меньшем обилии присутствовали Rhodotorula fujisanensis, Rh. minuta, Leucosporidium scottii, Sporidiobolus salmonicolor, Metschnikowia pulcherrima, Guehomyces pullulans, Rh. mucilaginosa. Интересной особенностью дрожжевого населения рябины является сравнительно высокое обилие те-леоморфных диморфных базидиомицетов cys
tofilo-basidium capitatum , которые обычно тяготеют к поз-
дним стадиям деструкции растительных остатков и постоянно обнаруживаются в лесных подстилках. Результаты проведенного факторного дисперсион-ного гнездового анализа показали, что по мере уве-личения расстояний закономерно увеличивается ва-рьирование общей численности, таксономического разнообразия и относительного обилия доминирую-щих групп дрожжей. Наиболее сходны группиров-ки на плодах внутри одного щитка (средний индекс сх
одства Серенсена – 77 %), несколько меньше
сходство между плодами в разных щитках (60 %),
еще меньше – на разных деревьях в одном пунк-
те (
55 %). Полученные результаты показывают, что
численность и состав отдельной дрожжевой группи-ровки определяется не только совокупностью эколо-гических факторов, но и положением в пространстве, близостью к другим группировкам. Механизм этого явления, по-видимому, заключается во взаимном обсеменении плодов клетками дрожжей. Подобная агрегированность в распределении видов микроор-ганизмов, обусловленная миграцией и клональным расселением, должна учитываться при оценке их разнообразия в природных местообитаниях.
ДИСКОМИЦЕТЫ МОСКВЫ И МОСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ
Милехин Д.И.
Московский Государственный Университет
им. М.в
. ломоносова, кафедра микологии и альгологии,
Москва
В работе представлены результаты изучения ви-
дового разнообразия дискомицетов на территории г. Москвы и Московской области. Материал был собран на территории наиболее крупных лесопарков г. Моск-вы и в лесах Московской области в весенний, летний и осенний периоды с 2003 по 2007 г. Также был исполь-зован материал, собранный Прохоровым В.П., Барсу-ковой Т.Н., и Шкуриной Н.А., которым автор выражает глубокую благодарность.
Среди собранных образцов было идентифици-
ровано 132 вида дискомицетов, принадлежащих к 4 порядкам
– pezizales, Ostropales, Rhytismatales и Leo-
tiales, 10
семействам – Helvellaceae, pyronemataceae,
Sarcoscyphaceae, Acrospermataceae, Leotiaceae, Hyal-oscyphaceae, Orbiliaceae, Sclerotiniaceae, Dermateaceae и Rhytismataceae и 32 родам.
Доминировали представители порядка Leotiales,
главным образом из семейства Leotiaceae (42вида в Москве и 54 вида в Московской области) и семейства Hyaloscyphaceae, (25 видов в Москве и 31 вид в Мос-ковской области). Семейство Dermateaceae было пред-ставлено 9 видами на территории лесопарков Моск-вы и 7 видами в Московской области. Из семейства Orbiliaceae в Москве было найдено 5 видов, в Мос-ко
вской области – 7. Число представителей других
порядков оказалось незначительным. Для порядков Ostropales и Rhytismatales и семейства Sclerotiniaceae обнаружено по 1 виду, а обычно хорошо представлен-ны
й в подобного рода исследованиях порядок p eziza-
les насчитывает всего 6 видов в лесопарках Москвы и 11 видов в Московской области, из которых широко распространен на обследованной территории толь-ко
один – Scutellinia scutellata ( L. : fr.) Lamb., а ос-
тальные характеризуются единичными находками. Не
большое разнообразие грибов из порядка peziza-
les вероятно связано с тем, что они обычно образуют крупные плодовые тела, которые требуют для своего развития продолжительного периода оптимального увлажнения субстрата и сильно чувствительны к вы-таптыванию. Представители порядка Leotiales более устойчивы к засушливым условиям и антропогенной нагрузке.
В целом, территории г. Москвы и Московской об-
ласти характеризуются довольно сходным видовым составом дискомицетов, хотя в Московской области наблюдается несколько большее разнообразие, чем в лесопарках Москвы, что может быть связано с менее интенсивной антропогенной нагрузкой.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 80
Изучение биологического разнообразия является
одной из первостепенных задач современной науки.
Необходимой составляющей этой задачи является изучение видового богатства миксомицетов. Особого внимания в этом отношении заслуживают природоох-ранные территории, в том числе заповедники.
Разнообразие миксомицетов в различных регионах
Украины изучено в неодинаковой степени. В то время как для отдельных регионов Левобережья и Крыма из-ве
стно более 150 видов миксомицетов, для Западной
Лесостепи Украины, по литературным данным, их известно лишь 20 (Borshchow, 1868; Ячевский, 1907; Целле, 1925; Підопличко, 1932).
Одним из важнейших объектов природно-запо-
ведного фонда Западной лесостепи Украины является Государственный природный заповедник «Медобо-ры» (Гримайловский район Тернопольской области). На территории заповедника преобладают широколис-твенные леса, среди которых преобладают дубово-грабовые ле
са (92 % площади), присутствуют также
формации бука (8 %). До настоящего времени иссле-дования миксомицетов на территории заповедника не проводились.
В апреле и сентябре 2007 г. нами были проведены
полевые сборы плодовых тел миксомицетов на тер-ритории заповедника «Медоборы». Также были отоб-раны образцы субстратов для последующего анализа методом влажной камеры.
В результате проведенного исследования были вы-
явлены представители 46 видов (48 внутривидовых таксонов) миксомицетов, принадлежащих к 16 родам, 9 семействам и 5 порядкам. Ниже приводится список обнаруженных видов.pROT
OSTELIALES
ceratiomyxa fruticulosa (O. f . Mull.) T. Macbr.
LICEALES cribraria
cancellata (Batsch.) Nann.- Bremek., c.
violacea
Rex., licea minima fr., l. operculata (Wingate)
G.W.
Martin, lycogala epidendrum (L.) fr., l. terrestre
fr
., reticularia lycoperdon Bull.
pHYSARALES
b
adhamia panicea (fr.) Rostaf., dydimium difforme
(p
ers.) Gray., d. iridis (Ditmar) fr., Fuligo septica (L.) f.
H.
Wigg. var. septica, F . septica var. rufa (L.) f.H. Wigg.,
Physarum album (Bull.) Chevall., Ph. leucopus Link., Ph.
cf. robustum (Lister) Nann.-Bremek., Ph. viride (Bull.)
pers.
STEMONIT
ALES
Stemonitis axifera (Bull.) T.Macbr., S. flavogenita
E. Jahn., S. fusca Roth., S. fusca var. rufescens Lister, S.
smithii T.Macbr ., Stemonitopsis amoena (Nann.-Bremek.)
Nann.-Bremek., S. hyperopta (Meyl.) Nann.-Bremek., S.
typhina ( f.H. Wigg.) Nann.-Bremek.
TRICHIALESar
cyria cinerea (Bull.) pers., a. denudata (L.) Wettst.,
a.
incarnata (pers. ex J. f. Gmel.) pers., a. minuta Bu-
chet, a. obvelata (Oeder) Onsberg, a. pomiformis (Leers)
Rostaf., a. stipata (Schw.) Lister, Hemitrichia calyculata
(Speg.) M.L. f
arr., H. clavata (pers.) Rostaf., H. minor
Lister, H. serpula (Scop.) Rostaf. ex Lister, metatrichia
horrida
B. Ing, m. vesparia (Batsch) Nann.- Bremek. ex
G. W. Martin et Alexop., Perichaena chysosperma (Curr.)
Lister, P . corticalis (Batsch) Rostaf., P . depressa Lib.,
Trichia contorta (Ditmar) Rostaf., T. favoginea (Batsch)
pers., T
. persimilis p. karst., T . scabra Rostaf., T. varia
(p
ers. ex J. f . Gmel.) pers.ВИДОВОЙ СОСТАВ МИКСОМИЦЕТОВ ПРИРОДНОГО
ЗАПОВЕДНИКА МЕДОБОРЫ (УКР АИНА)
Морозова И.И., Леонтьев Д.В.
Харьков
ский национальный университет им. в.Н. каразина,
Харьков
БИОТА АГАРИКОИДНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ ЦЕНТР АЛЬНО-
ЛЕСНОГО ЗАПОВЕДНИКА (ТВЕРСКАЯ ОБЛ.) И УСТЬЯНСКОЙ
НАУЧНОЙ СТАНЦИИ (АРХАНГЕЛЬСКАЯ ОБЛ.)
Мухина Ю.Г.
Московский Государственный Университет им. М.в. ломоносова,
Москва
В 2006–2007 годах были проведены работы по изу-
чению агарикоидных базидиомицетов на территории Устьянской учебно-научной станции географического факультета МГУ (июль-август 2006 года) и в Цент-рально-Лесном Биосферном заповеднике (июль-сен-тябрь 2007 года).
Работы по инвентаризации микобиот различных
территорий имеют большое значение в микологии, так как грибы являются важнейшим компонентом биоце-нозов. Сведения о биоте агарикоидных базидиоми-цетов района исследования крайне ограничены. Для Архангельской области практически отсутствуют сов-ременные данные.
Устьянская станция находится в южной части Ар-
хангельской области в подзоне средней тайги, основ-ные ле
сообразующие породы – picea abies и pinus
Флора и охрана грибов 81
sylvestris, коренные леса почти везде замещены вто-
ричными, в том числе мелколиственными. Централь-но-Лесной заповедник расположен в западной части Тверской области, в подзоне южной тайги, однако рас-тительность заповедника носит переходный характер от южной тайги к хвойно-широколиственным лесам. Таким образом, исследуемые территории расположе-ны в разных зональных подразделениях тайги, поэто-му представляет интерес изучение структуры микоби-от, выявление комплекса общих видов.
Материалами исследований являются собственные
наблюдения и гербарий грибов, собранный во время полевых работ и состоящий из 345 экземпляров. Сбор образцов проводился как маршрутными, так и стацио-нарными методами.
На данном этапе исследований выявлено 97 видов
агарикоидных базидиомицетов, относящихся к 43 ро-дам, 17 семействам, 5 порядкам отдела Basidiomycota. Из них 53 вида собраны в Архангельской области, 68 видов в Тверской области. 24 вида являются общими для двух территорий. Определение видов продолжа-ется.
Ведущую роль в составе биоты шляпочных грибов
районов исследований играют семейства Tricholo-mataceae (21,6
%), Russulaceae (17,5 %), Cortinar-
iaceae (14,4
%), Boletaceae (12,4 %). По количеству
выявленных видов в Центрально-Лесном заповеднике лидируют роды Russula, Cortinarius, Amanita, Lactarius; на террит
ории Устьянской станции – Cortinarius, Myc-
ena, Russula, Leccinum.В трофической структуре биоты агарикоидных
грибов исследуемых территорий ведущую роль иг-ра
ют микоризообразователи, их доля – 65 % (для
Тверской области – 70 %, для Архангельской об-
ла
сти – 58 %). это представители родов Russula,
Cortinarius, Leccinum, Amanita. Также представле-ны
сапротрофы: ксилотрофы (14 %), подстилочные
(11 %), гумусовые (5 %), на опаде (3 %) и бриотро-
фы
(2 %).
Среди различных местообитаний на территории
Устьянской станции наибольшим разнообразием видов отличаются леса со смешанным древостоем: хв
ойные с участием двух пород (ель, сосна) – 17 ви-
дов и хвойные с участием лиственных пород (береза, ос
ина) – 15 видов. В Центрально-Лесном заповедни-
ке наибольшим количеством видов характеризуются березово-еловые и елово-березовые леса (39 видов), еловые леса (22 вида), сосновые и сосново-еловые леса (22 вида).
Среди видов общих для двух территорий мно-
го представителей с широким распространением, обычных для всей таёжной зоны: amanita
muscaria,
a.
rubescens, Setulipes androsaceus, russula claroflava,
leccinum
scabrum, cortinarius semisanguineus , rozites
caperata
, Pleurotus pulmonarius и др. Большая их часть
трофиче
ски связана с pinus sylvestris и picea abies, яв-
ляющимися основными лесообразующими породами в районе исследований, многие виды связаны с Betula sp., populus
tremula, часто встречающимися в составе
древостоя.
НАХОДКА РЕДКОГО ГРИБА muTinuS ra Venelii
(b
ERk. ЕT CURT.) E.fIsCHER В КАЗАХСТАНСКОМ АЛТАЕ
Нам Г.А.
ДГП «Институт ботаники и фитоинтродукции»
Мо
Н Республики казахстан,
Алма-Ата
Осенью 2006 г. на клумбе перед конторой Запад-
но-Алтайского Государственного заповедника науч-ным сотрудником Л.Н Винокуровой. были найдены неск
олько экземпляров редкого гриба – Мутинуса Ра-
венеля (Мutinus ravenelii (Berk. еt Curt.)E. fischer, се-
мейство Phallaceae ). В монографии С.Р . Шварцман и
Н.М.
Филимоновой / 1/, где приводится довольно пол-
ное видовое разнообразие гастеромицетов по Казахс-тану, не только этот вид, но и более распространенный близкий ему вид Мутинус собачий (Мutinus caninus
fr
.) не отмечены. Мutinus caninus внесен в Красную
книгу РСФСР (1988), распространен на Европейской части России, Кавказе, Томской обл., Прибайкалье и Дальнем Востоке /2/.
Ареал распространения Мутинуса Равенеля мень-
ше и Л.В. Гарибова, отмечая его местонахождения в Ленинградской и Московских областях и в Хабаров-ском крае, указывает на редкость этого гриба и на необходимость более тщательного изучения видов этого рода. Мутинус Равенеля также приводится в справочнике, посвященном грибам Северной Европы и Северной части Азии /3/.Находка Мутинуса Равене-ля в Казахстанском Алтае выявило новое место оби-тание этого очень редкого гриба, которое значительно расширило ареал его распространения, а также уве-личило число видов и родов гастеромицетных грибов в Казахстане. Ранее были найдены только представи-тели 2 родов семейства Phallaceae: Phallus и dicty-
o
phora/ 1/.
1. Шварцман С.Р., Филимонова Н.М. Флора спо-
ровых растений Кахзахстана. Алма-Ата: Наука, 1970. 318 с.
2. Гарибова Л.В. Грибы от А до Я. Иллюстрирован-
ный справочник. М.:ЗАО»Фитон+», 2004, с.
3. Янс
ен П. Все о грибах. СПб: ООО «СЗК эО
«Кристалл», 2004. 160 с.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 82
Национальный природный парк «Святые горы»
(Донецкая область, Украина), расположенный в сред-
нем течении реки Северский Донец, был создан в 1997 г. с целью сохранения природных комплексов Донец-ког
о кряжа. Большая часть территории парка (82,6 %)
занята лесами, особого внимания среди которых за-служивают уникальные для степной зоны Украины плакорные и пойменные дубравы, грабово-дубовый лес, а также участки меловых боров, сформированные третичным релик
том pinus cretacea kalen.
Согласно литературным данным, до 2007 г. на тер-
ритории НПП «Святые горы» было известно всего 48 видов афиллофороидных грибов и среди них лишь 8 представителей кортициоидной жизненной формы. Три экспедиции, проведенные нами на территории Национального парка в 2007 г., позволили выявить 47 видов кортициоидных грибов из которых 43 являют-ся новыми для исследуемого парка, а 8 ранее не были зарегистрированы на территории Украины. Все соб-ранные образцы были инсерированы в научный мико-логический гербарий кафедры микологии и фитоим-мунологии ХНУ им. В.Н. Каразина CWU (Myc).
Перечень новых для Украины видов с указанием
локалитета, субстрата, а также номеров гербарных об-разцов приведен ниже.
ath
elia acrospora Jьlich, CWU (Myc) 3484 и 3485 – на
валежных стволах Betula pendula Roth. среднего диамет-ра (3-й стадии разложения), ольхово-березово-тополё-вые колки вблизи западной окраины г. Святогорск.
athelia
bombacina (pers.) Jьlich, CWU (Myc) 3486 –
на усохшей ветви prunus cf. domestica L. малого диа-
метра (3-й стадии разложения), участок с одиночными деревьями сливы на вершине крутого правого берега реки Северский Донец.
botryodasidium
candicans J. Erikss. в стадии ана-
морфы Haplotrichum candicum Eschw, CWU (Myc) 3528
– на валежном стволе pyrus communis L. малого
диаметра (4-й стадии разложения), кленовая дубрава на вершине крутого правого берега реки Северский Донец.
bulbillomyces
farinosus (Bres.) Jьlich c анаморфой
aegerita
candida pers., CWU (Myc) 3605 – на валежной
ветви Alnus glutinosa (L.) Gaertn. малого диаметра (3-й
стадии разложения), ольхово-березовые колки вблизи от автотрассы Студенок-Святогорск.
erythricium
hypnophilum (p . karst.) J. Erikss. et
Hjorstam, CWU (Myc) 3506 – на коре валежной ветви pinus sylvestris L. среднего диаметра (3-й стадии раз-
ложения), сосновые посадки вблизи западной окраины г. Святогорск.
leptospor
omyces septentrionalis (J. Eriks.) krieglst.,
CWU (Myc) 3533 – на валежном стволе populus sp.
среднего диаметра (3-й стадии разложения), ольхово-
березово-тополёвые колки вблизи западной окраины г. Святогорск. Бореальный вид.
Peniophora erikssonii Boidin,
CWU (Myc) 3609 – на
валежной ветви Alnus glutinosa (L.) Gaertn. среднего
диаметра (3-й стадии разложения) а также CWU (Myc) 3610
– на валежной ветви Betula pendula Roth. малого
диаметра (2-й стадии разложения) к юго-востоку от с. Студенок.
Tulasnella violea (Quйl.) Bourdot et Galzin, CWU
(Myc) 3606
– на коре валежного ствола pinus sylvestris
L. малого диаметра (3-й стадии разложения), сосновые
посадки вблизи западной окраины г. Святогорск.; CWU (Myc) 3607
– на валежной ветви неидентифицирован-
ной лиственной породы среднего диаметра (3-й ста-дии разложения), кленово-липово лещиновая дубрава с вкра
плениями populus sp. в низине вблизи скитских
пещер; CWU (Myc) 3608 – на валежном стволе Betula pendula Roth. ольхово-березово-тополёвые колки вбли-зи западной окраины г. Святогорск.НОВЫЕ ДЛЯ УКР АИНЫ ВИДЫ КОРТИЦИОИДНЫХ ГРИБОВ
ИЗ
НАЦИОНАЛЬНОГО ПРИРОДНОГО ПАРКА «СВЯТЫЕ Г ОРЫ»
Ордынец А.В., Акулов А.Ю.
Харьков
ский национальный университет им. в.Н. каразина,
Харьков
ДОПОЛНЕНИЯ К ПОЗНАНИЮ
СУМЧА
ТЫХ ГРИБОВ ТВЕРСКОЙ ОБЛАСТИ
Попов Е.С., Курочкин С.А.
Ботаниче
ский институт им. в. л. к омарова РАН
Тверской Государственный Университет
Первые сведения о грибах современной Тверской
области появились в начале ХХ века. В работе В. Г. Траншеля (1901) указывается более 240 видов аскоми-цетов, собранных в окрестностях станций Бологое и Березайка, в том числе два новых вида ( das
yscyphella
cassandrae Tranzschel и Helminthascus arachnophthora
Tranzschel). С тех пор имеются лишь отрывочные упо-минания об аскомицетах этой территории (Частухин, Николаевская, 1969; Бондарцева, 1986; Курочкин, 2005). В последние годы в различных районах Тверской облас-ти были собраны материалы, позволившие пополнить знания о разнообразии сумчатых грибов этого региона.
В прилагаемом списке 23 видов, новых для Тверс-
кой области, приняты следующие сокращения местоо-
Флора и охрана грибов 83
битаний: б. р. – березняк разнотравный; e. к. – ельник
кисличный; с. з. – сосняк зеленомошный; с. л. – сосняк лишайниковый; с. р. – сосняк разнотравный; с. ч. – со-сняк черничный. Места сборов обозначены числами (Андреа
польский район: 1 – окр. дер. Козлово. Кали-
нинский район:
2 – г. Тверь, окр. Комсомольской рощи;
3 – ж/д станция Брянцево; 4 – ж/д станция Черногубо-во;
5 – окр. дер. Ильино; 6 – окр. дер. Константинов-
ка;
7 – окр. дер. Литвинцево; 8 – окр. дер. Рябеево;
9 – окр. дер. Савватьево; 10 – окр. Нового полиграф-ко
мбината; 11 – окр. пос. Отрадное. Селижаровский
район: 12 – окр. дер. Большая Коша. Старицкий район: 13 – окр. дер. Паньково. Торопецкий район: 14 – окр. биостанции Бубоницы. У домельский район: 15 – окр. г. У домля; 16 –61-й квартал У домельского лесничества). Образцы хранятся в Микологическом гербарии БИН Р АН (LE).
HEL
OTIALES : Geoglossum cookeianum N annf. – 6,
на почве в с. ч., 18.09.2003; Hymenoscyphus epiphyl-
lus (pe rs.) Rehm – 7, на подстилке, 9.09.1999; leotia
lubrica pers. – 11, на почве в е. к., 18.09.2000; Rutstro –
emia bolaris (B atsch) Rehm – 11, на веточках березы в
с. ч. с примесью березы, сент. 2003. H YpOC REALES :
cordyceps militaris (L.) Link – 2, на куколке бабочки-
совки в с. ч., 16.08.1986; c. ophioglossoides – 7, на
плодовых телах Elaphomyces sp. в с. з., сент. 2000; Hypocrea nybergiana T
. Ulvinen et H. Chamb. – 14, на
почве, 10.07.1998 (ранее (Курочкин, 2005) этот вид указывался как Podostroma alutaceum ). pEzIzA
LES :
Gyromitra infula (S chaeff.) Quйl – 7, на гниющих ство-
лах березы в сосняках, авг. 2001; Helvella acetabulum
(L
.) Quйl. – 12, на почве в б. р., 17.06.1994; H. crispa
Sc
op. – 13, на почве в смешанном лесу, IX 2000; H.
lacunosa Afzel. – 1, на почве в с. л., июнь1999; 5, на почве в б. р., сент. 2001; 11, на почве в с. ч., авг.2003; H. macropus (pe
rs.) p. karst. – 9, на почве в с. ч.,
сент. 2001; mel astiza cornubiensis (Berk. et Broome)
J.
Moravec – 4, на почве в с. ч., сент. 2002; otidea
leporina (Batsch: fr .) fuckel var. minor Rehm – 10,
на подстилке в сосняке черничном, vIII 2000; 7, на
подстилке в сосняке черничном, vIII 2004; o. on-
otica (pe rs.) fuckel – 16, на почве в с. з., 03.09.2003;
o. umbrina (Реrs.) Boud. – 6, на почве в сосняках. В
августе–октябре c 1998 по 2003; Peziza echinispora p.
kar
st. – 6, на подстилке в с. ч., на второй год после
пожара, авг. 2003; P. praetervisa B res. – 6, на подстил-
ке в с. ч., на второй год после пожара, 07.09.2003; P.
rapanda pers. – 8, на почве в б. р., 12.06.1999; Plicaria
endocarpoides ( Berk.) Rifai – 10, на подстилке в со-
сняке, после пожара, 07.09.2003; rhi zina undulata
fr. –
повсеместно в сосняках на оголенных корнях
сосны в августе–сентябре, особенно после низовых пожаров; Sarcoscypha austriaca (
Beck) Boud. – 2, на
гнилой древесине в березняке разнотравном, апр. 2003. X YLARIALES :
Poronia punctata ( L.) fr. – 15, на
навозе, авг. 2003 (очень редкий вид, считающийся ис-чезнувшим во многих странах Европы).
Бондарцева М.А. Дереворазрушающие грибы Цен-
трально-лесного заповедника. Нов. сист. низш. раст. Т. 23. 1986.
С. 103–110. – Курочкин С. А. О некоторых
новых и редких макромицетах Тверской области. Вес-тн. ТГУ . Серия «Биология и экология». Вып. 1, 2005. С. 120–121.
– Траншель В.Г. Список грибов, собранных
в Валдайском уезде Новгородской губернии. Тр. пре-сноводн. биол. ст. С.-Пб. о-ва естествоисп. 1901. Т. 1. С. 160–203.
– Частухин В.Я., Николаевская М.А. Био-
логический распад и ресинтез органических веществ в природе. Л., 1969. 326 с.
АГАРИКОВЫЕ ГРИБЫ БИОГЕОГР АФИЧЕСКИХ ПРОВИНЦИЙ КАРЕЛИИ
Предтеченская О.О.
Институт леса карельского научного центра РАН,
Петрозаводск
Изучение биоты агарикоидных макромицетов
(Agaricales s. l., порядки polyporales s.str., Boletales,
Agaricales s.str., Russulales) [13] ведется в Карелии с 30-х годов прошлого века, к настоящему времени вы-явлено 812 видов грибов этой группы из 104 родов и 23 семейств (табл.).
Таблица
Распределение видов грибов по биогеографическим провинциям (флористическим районам) Карелии
Биогеографическая провинция* Флористический
район**Исследованная территория Кол-во видов
(родов/сем-в)
karelia onegensis (
kon) Заонежский Заповедник «Кивач» [1, 9, 15] 455 (83/21)
karelia pomorica occidentalis (
kpoc) Кемский Заповедник «Костомукшский» 96 (32/13)
karelia ladogensis (
kl) Приладожский ПП «Валаамский архипелаг» [2, 3] 216 (45/16)
karelia transonegensis (
kton) Водлозерский НП «Водлозерский» [5], ПЛЗ «Чукозеро» [6] 101 (39/17)
karelia keretina (
kk) Топозерский НП «Паанаярви» [8], ЛЗ «Кузова» [11], ПЛЗ
«Гридино»53 (26/14)
karelia olonetsensis (
kol) Олонецкий Вепсская национальная волость [4] 79 (38/20)
Республика Карелия [1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 15] 812 (104/23)
* по: [12]; ** по: [6].
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 84
До сих пор наиболее изученным являлся район
заповедника «Кивач» (биогеографическая провин-
ция
– БП – kon), где зарегистрировано 56 % от общего
количества видов агарикоидных макромицетов Ка-релии (табл.). В 2005–2007 гг. при поддержке РФФИ (грант № 05–04–97524-р_север-а) проведено изучение микобио
ты заповедника «Костомукшский» (БП kpoc),
природного парка «Валаамский архипелаг» (БП kpoc),
национальных парков «Паанаярви» (БП kk), и «Вод-
лозерский» (БП k
ton) (табл. 1). Находки в БП Regio
kuusamoensis (ks) (Имандровский флористический район), небольшая часть которой на территории Каре-лии примык
ает к БП kk, не выделены из сборов, про-
веденных на территории НП «Паанаярви».
Неисследов
анными остаются БП karelia pudogensis
(kp) (Пудожский флористический район), karelia
borealis (kb) (Суоярвский), karelia pomorica orientalis
(kpor) (Выгозерский). Работы по изучению микобио-ты данных территорий запланированы в 2008–2010 гг. (грант РФФИ № 08–04–98825-р_север-а).
Список литературы1. Бондарцева М.А., Крутов В.И., Лосицкая В.М.,
Яковлев Е.Б., Скороходова С.Б. Грибы заповедника «Ки-вач». (Аннотированный список видов). М., 2001. 90 с.
2. Коваленко А.Е., Морозова О.В., Фомина Е.А.,
Сяркисилта О. Агарикоидные и болетоидные базидио-мицеты о-ва Валаам. I. // Микология и фитопатология. 1998. Т. 32., вып. 2. С. 14–26.
3. Крутов В.И., Предтеченская О.О., Руоколайнен
А.В., Шубин В.И. К изучению биоты макромицетов Валаамского архипелага // Всероссийская конферен-ция с международным участием «Академическая наука и ее роль в развитии производительных сил в север-ных регионах России», посвященная 100-летию со дня открытия первого стационара Российской академии наук (г. Архангельск, 19–22 июня 2006 г.): Сборник до-кладов совещания. Институт экологических проблем Сев
ера УрО Р АН. Архангельск: vCG/DonySuXX, CD-
ROM. 2006.
4. Предтеченская О.О. Шляпочные грибы, дож-
девики и сумчатые грибы // Природные комплексы Вепсской волости: особенности, современное состоя-ние, охрана и использование. Петрозаводск, 2005. С. 141–149.5. Предтеченская О.О. Шляпочные грибы Нацио-
нального парка «Водлозерский» // Водлозерские чте-ния: Естественнонаучные и гуманитарные основы природоохранной, научной и просветительской де-ятельности на охраняемых природных территориях Русского Севера. Материалы науч.-практич. конф., посвященной 15-летию Национального парка «Водло-зерский». Петрозав
одск, 2006. С. 124–128.
6. Предтеченская О.О., Руоколайнен А.В. Грибы //
Материалы инвентаризации природных комплексов и природоохранная оценка территории «Чукозеро». Петрозаводск: КарНЦ РАН, 2007. С. 51–58, 116–128.
7. Раменская М.Л. Анализ флоры Мурманской обл.
и Карелии. Л., 1983. 216 с.
8. Руоколайнен А.В., Предтеченская О.О. Агари-
коидные и афиллофороидные грибы НП «Паанаярви» (Республика Карелия) // Биоразнообразие, охрана и рациональное использование растительных ресурсов Севера: Матер. XI Перфильевских научных чтений, посв
ящ. 125-летию со дня рождения И.А. Перфильева
(1882–1942), Архангельск, 23–25 мая 2007 г. Ч. 1. Ар-хангельск, 2007. С. 130–133.
9. Фрейндлинг М.В. Материалы к флоре шляпоч-
ных грибов заповедника «Кивач» Карело-Финской ССР // Изв. Карело-Финского фил. АН СССР . 1949. № 4. С. 84–97.
10. Шубин В.И. Микоризные грибы Северо-Запада
европейской
части СССР (экологическая характерис-
тика). Петрозаводск, 1988. 215 с.
11. Шубин В.И. Шляпочные грибы островов Бело-
го моря // Культурное и природное наследие островов Белого моря. Петрозаводск, 2002. С. 103–109.
12. Шубин В.И., Крутов В.И. Грибы Карелии и
Мурманской области (эколого-систематический спи-сок). Л.: Наука, 1979. 107 с.
13. Cajander
A.k., Mela A. J. Suomen kasvio. Helsin-
ki, 1906. 763p.
14. Moser M. Die Rцhrlinge und Blдtterpilze ( Poly-
porales, boletales, a
garicales, russulales ). Stuttgart, New
York, 1978. 532 p.
15. Salo k
. kivatsu, luonnonsuojelualue karjalan
ASNT:ssa. (kivatsu, nature reserve in the karelian Auto-
nomic Socialist Republik) // Luonnon Tutkij 1986. a. N 90. p . 100–106.
ОЦЕНКА ВИДОВОГО Р АЗНООБР АЗИЯ ГАСТЕРОМИЦЕТОВ РОССИИ
Ребриев Ю.А.
Южный научный центр РАН,
Ростов-на-Дону
Гастеромицеты – исторически сложившееся на-
звание базидиальных грибов, характеризующихся за-мкнутыми плодовыми телами и пассивным освобож-дением спор. Такие признаки независимо возникали в различных эволюционных линиях базидиомицетов. На сегодняшний день известно около 1200 видов гастеро-мицетов в широком смысле (Hawksworth et al., 1995). На территории бывшего СССР насчитывалось около 250 видов гастеромицетов (Сосин, 1973), такое же ко-личество приводится и для Европы (Demoulin, 1989). Каково видовое разнообразие этой группы в России? Два года назад мы, основываясь на литературных ис-точниках, материалах Микологического гербария БИН Р АН и личной коллекции, насчитывали около 170 ви-
Флора и охрана грибов 85
дов гастеромицетов из 44 родов (Ребриев, 2005). С того
времени наша коллекция значительно пополнилась за счет сборов, любезно предоставленных рядом мико-логов из разных регионов России. Получена ценная информация о гастеромицетах Свердловской области, хранящихся в Гербарии Института экологии растений и животных УрО Р АН. В результате список гастероми-цетов России значительно увеличился, в основном за счет родов bovista, c
yathus, Tulostoma . На сегодняш-
ний день в России насчитывается 207 видов, 50 родов. Наиболее значительные по числу видов семейства: Geastraceae (25), Lycoperdaceae (68), Nidulariaceae (21), Tulostomataceae (22). Несомненно, новые для страны виды будут обнаруживаться и далее. По нашему мне-нию, число видов гастеромицетов, реально произрас-тающих в России, составляет около 250.
К ИЗУЧЕНИЮ БИОТЫ АФИЛЛОФОРОИДНЫХ ГРИБОВ
КОЖ
ОЗЕРСКОГО ПРИРОДНОГО ПАРКА
(АР
ХАНГЕЛЬСКАЯ ОБЛАСТЬ)
Руоколайнен А.В.
Институт леса карельского научного центра РАН,
Петрозаводск
В последние несколько лет активизировались ис-
следования биоты афиллофороидных грибов в Ар-хангельской области (Руоколайнен, Коткова, 2004; Руоколайнен и др., 2006; Ежов, 2006; Ершов, 2006). Однако по сравнению с ближайшими территориями Республик Карелии и Коми она еще остается менее изученной. В настоящее время список афиллофоро-идных грибов Архангельской области с учетом лите-ратурных данных включает более 250 видов (Бондар-цев, 1953; Николаева, 1961; Бондарцева, Пармасто, 1986; Лебедев, 1991; Бондарцева, 1998; Ежов, 1998; Еж
ов, Ершов, 2005; kхljalg, 1996; Niemelд et al., 2001
и др.).
В этом регионе наиболее изучена территория Ко-
жозерского природного парка, где зарегистрировано 176 видов афиллофороидных грибов из 95 родов, 42 семейств и 20 порядков по системе, представленной в «Nordic macromycetes» (1997) с небольшими изме-нениями. Здесь отмечено 14 новых для Архангель-ской области видов: amp
hinema byssoides (pers. : fr.)
J. Erikss., ant rodiella romellii (Donk) Niemelд, Hypho-
derma praetermissum (p. karst.) J. Erikss. et A. Strid.,
Hyphodontia subalutacea (p. karst.) J. Erikss., Hypoch-
niciellum cremeoisabellinum (Litsch.) Hjortstam, Pha-
nerochaete calotricha (p. karst.) J. Erikss. et Ryvarden,
Phlebia segregata (B ourdot et Galzin) parmasto, Phle-
biella christiansenii (par masto) k. H. Larss. et Hjortstam,
Postia balsamea (pe ck) Jьlich, Postia leucomallella
(Murrill) Jьlich, Skeletocutis carneogricea A. David,
Tubulicrinis effugiens (Bourdot et Galzin) Oberw., Vara-
ria investiens (S chwein.) p. karst., Vararia ochroleuca
(Bourdot et Galzin) Donk. Образцы хранятся в мико-логических гербариях Института леса КарНЦ РАН и Института экологических проблем Севера УрО РАН (г. Архангельск).
Ведущими по числу видов являются порядки Hy-
phodermatales –
34 вида, Hymenochaetales – 23, Fomi-
topsidales – 22, Schizophyllales – 16, coriolales – 10
видов. Наибольшее число родов отмечено в семейс-твах Schizophyllaceae (7 родов), chaetopor
ellaceae , coniophoraceae
, coriolaceae и Phaeolaceae (по 5 ро-
дов), bankeraceae , bjerkanderaceae , Fomitopsidaceae и
Gloeocystidiellaceae (по 4 рода). К наиболее крупным
родам относятся Phellinus (13 видов), Postia (9 ви-
дов), Phlebia (8 видов), Skeletocutis (7 видов), Antrodia,
Hyphoderma, Hyphodontia, Phanerochaete , Stereum и
Trichaptum (по 4 вида).
Подав
ляющее большинство (151 вид, или 86 %)
выявленных грибов – сапротрофы, заселяющие су-
хостойную и валежную древесину. Только 13 видов, широко известных как возбудители гнилей, отмечены на живых
деревьях (fomes fomentarius – на березе,
fomitopsis pinicola – на хвойных и лиственных поро-дах, phellinus
chrysoloma и Onnia leporina – на ели, ph.
pini – на сосне, ph. igniarius и ph. conchatus – на иве,
ph. populicola и ph. tremulae – на осине). На подстил-
ке и почве растет 17 видов и 2 вида на плодовых те-лах макромицетов (Antrodiella citrinella и Skeletocutis chrysella).
Максимальное количество видов в Кожозерском
природном парке зарегистрировано на основных ле-со
образующих породах: на ели – 66, на сосне – 56,
на березе – 42. Значительно меньше их на осине –
22, на иве – 19, ольхе – 17 видов. На хвойных поро-
да
х отмечено 97 видов, на лиственных породах – 76
видов.
Среди выявленных афиллофороидных макроми-
цетов парка интересны находки таких редких видов как amylocorticium
subincarnatum, amylocystis lap-
ponica, anomoporia bombycina, dichomitus squalens,
diplomitoporus crustulinus, Haploporus odorus, Hericium coralloides, leucogyrophana montana, Parmastomyces
mollissimus, Phellinus nigrolimitatus, radulodon er-
ikssonii, Steccherinum collabens (Руоколайнен, Коткова, 2004; Руоколайнен, 2006).
В целом биота парка характерна для таежной зоны
северо-запада России. При продолжении исследований список видов может быть существенно дополнен.
Работа выполнена при частичной финансовой под-
держке РФФИ (грант 08–04–98805-р-север-а).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 86
Инвентаризация видового состава грибов Нижнего
Дона осуществлялась в несколько этапов. Более ранний
(первая треть ХХ века) отмечен эпизодическими сбора-ми небольшого числа видов (Требу, 1912; Андреев, 1924). Для 2-го этапа (50–60-е годы) характерны акцент на ин-вентаризацию видов, поражающих древесно-кустарни-ко
вые (работы Л.И. Красова) и цветочно-декоративные
культуры (Л.И. Мовсесян). На современном этапе (с кон-
ца 70-х годов прошлого века) усилия исследователей на-правлены на комплексное изучение состава микобиоты Ни
жнего Дона (работы С.Л. Выщепана, В.А. Русанова,
Ю.А. Ребриева, Т.С. Булгакова. Т.В. Карпенко).
Подводя итоги примерно столетних исследований,
можно говорить о том, что на территории Нижнего Дона зарегистрировано 2090 видов грибов, относя-щихся к 403 родам, 128 семействам, 51 порядкам из 9 классов 6 отделов (по Ainsworth a. Bisbi, 1995).
Соотношение макромицетов (1032 вида) и микро-
мицетов (1058) примерно одинаково. Таксономическая структура характеризуется резким преобладанием ба-зидиальных
грибов (агарикоидные – 559 видов, афил-
лофороидные и
гетеробазидиальные – 302, гастероид-
ные
– 97, ржавчинные – 171, устомицеты – 21), среди
которых важная роль принадлежит ксилотрофам, ми-коризообразователям и биотрофам. К фитопатогенным видам относится и большинство из отд. Deuteromycota (вс
его 555 видов; Hyphomycetes – 199, Coelomycetes –
356). Сумчатые грибы представлены 347 видами, сре-ди которых доминируют представители Erysiphales (80 видов), Dothideales (60), p
ezizales (40), Leotiales (32).
Последствия наблюдаемых трансформаций в составе
микобиоты тесно связаны с выраженными климатичес-кими изменениями. Наблюдаемое повышение по срав-нению с многолетними данными уровня выпадаемых в вегетационный период осадков наряду с более умерен-ной весной и периодическими засухами способствует нарастанию тенденции к увеличению в составе мико-биоты доли грибов, ассоциированных в своем развитии с сосудистыми растениями (микоризообразователей, фитопатогенных видов), что в условиях изменяющегося климата обеспечивает стабильное развитие этих групп.
Некоторое увеличение встречаемости микоризооб-
разователей можно объяснить также возрастной струк-турой искусственных лесонасаждений (возраст неко-торых сосновых посадок превысил 100 лет), а также резким нарушением (в сторону понижения частоты и продолжительности) режима поемности лугов и дли-тельности затопления пойменных лесов.
В то же время старение и нарастание деструктивных
процессов в ряде искусственных насаждений (полеза-щитные лесополосы, городские посадки) приводит к увеличению роли в составе микобиоты трутовых грибов и
облигатных фитопатогенных видов. этому способс-
твуют такие факторы, как резкое увеличение ассорти-мента декоративных растений-интродуцентов, расши-рение круга питающих растений, наблюдаемое вновь повышение уровня загрязнения окружающей среды, связанное с экономическим возрождением региона.
За период вековой инвентаризации видового соста-
ва микобиоты Нижнего Дона удалось достичь уровня выявления флористического разнообразия данного ре-гиона. Однако происходящие в составе региональной микобиоты динамические процессы требуют значи-тельных усилий для более-менее полной ее инвентари-зации и выявления закономерностей трансформации в изменяющихся условиях среды.ИНВЕНТАРИЗАЦИЯ МИКОБИОТЫ НИЖНЕГО ДОНА:
ИТОГИ И ПЕРСПЕКТИВЫ
Русанов В.А.1, Ребриев Ю.А.2, Булгаков Т.С.1
1 ГНо У вПо Южный федеральный университет,
Ростов-на-Дону
2 Южный научный центр РАН,
Ростов-на-Дону
ВИДЫ СЕМЕЙСТВА HYGROpHORACEAE ГОРНЫХ ЛЕСОВ КРЫМА
Саркина И.С.
Никитский ботанический сад – Национальный научный центр,
Ялта
Семейство Hygrophoraceae относится к одному из на-
именее изученных в Крыму семейств порядка Agaricales. Первая публикация, в которой наряду с другими агари-ковыми были приведены 6 видов гигрофоровых грибов полуострова, принадлежит М.Я. Зеровой (1962). П.М. Христюк примерно в это же время (1966) указал еще один вид. В Определителе грибов Украины (Визначник …, 1979) приведено 6 видов семейства Hygrophoraceae
из Горного Крыма. К началу XXI века в Крыму было известно 12 видов, которые вошли в «Аннотированный каталог макромицетов Крыма» (Саркина, 2001). В моно-графии «Гриби природних зон Криму» (Дудка и др., 2004) указывается 13 видов. За последние пять лет нами было зарегистрировано еще 6 представителей семейства.
В настоящее время для Крыма известно 19 видов,
которые согласно Определителю грибов СССР (Кова-ленко, 1989) относятся к родам cup
hophyllus , Hygro-
cybe, Hygrophorus и Pseudohygrocybe : *cuphophyllus
Флора и охрана грибов 87
virgineus (Wulf.: fr.) kovalenko, Hygrocybe coccinea
(S
chaeff.: fr.) p. kumm., H. conica (Scop.: fr .) p. kumm.,
H. psittacina (S chaeff.: fr.) Wuensche, Hygrophorus aga-
thosmus (fr .: Secr.) fr., *H. carpini Grцger, H. chrysodon
(fr.
) fr., H. cossus Sowerby, H. eburneus ( Bull.: fr.) fr., H.
gliocyclus fr. , H. hypothejus fr. , *H. lindtneri Mos., * H.
marzuolus (fr. ) Bres., H. nemoreus ( Lasch) fr., H. olivaceo-
albus (fr .: fr.) fr., *H. penarius fr. , *H. poetarum Heim.,
H. russula (fr .) Quйl., * Pseudohygrocybe constrictospora
(A
rnolds) kovalenko (виды, отмеченные знаком*, для
Крыма указываются впервые). Известный ранее в лите-
ратуре вид Hygrophorus leucophaeus ( Scop.: fr.) fr. поз-
же стали считать сборным (Коваленко, 1989); в Крыму в настоящее время известны два вида, фигурировавшие ра
нее под этим названием – H. carpini и H. lindtneri. В
«Определитель …» (1989) А.Е. Коваленко включил не-которые так называемые провизорные виды, наличие которых предполагалось на территории, входившей в состав СССР . Одним из таких видов является H. poeta-
rum, найденный в сентябре 2003 г. в буковом лесу на
Ангарском перевале, где в наиболее благоприятные для плодоношения годы он встречается локально-массово и создает аспекты. К редким видам относится H. russula ,
все известные места произрастания которого находятся в
пределах ЮБК – в светлых смешанных лесах балок
и прибалочных склонов до высоты 600 м н.у.м. В неко-торых странах Европы этот вид находится под угрозой исчезновения.
Все перечисленные виды были найдены в горной
ча
сти Крыма: 14 видов – в ботанико-географическом
районе Южный берег Крыма (ЮБК), 12 видов – в райо-не
Горный Крым (ГК), один – в районе Крымская Ле-
состепь (КЛс); районы приводятся согласно принятому микологами ботанико-географическому районированию Украины (Вассер, 1992; Дудка и др., 2004). Большинс-тво видов являются компонентами различных лесных сообществ горной части Крыма: в буковых лесах растут
Hygrophorus cossus (ГК) и H. poetarum (ГК); в буковых и
дубовых – H. eburneus (ГК, ЮБК) и H. nemoreus (ГК); в
ду
бовых – H. lindtneri (ЮБК), H. carpini (ГК, ЮБК) и H.
penarius (ЮБК); в сосновых и дубово-сосновых – Hy-
grocybe coccinea (ГК, ЮБК), H. conica (ГК, ЮБК), Hy-
grophorus agathosmus (ГК, ЮБК), H. chrysodon (ЮБК),
H. hypothejus (ГК, ЮБК), H. marzuolus (ЮБК), H. oliva-
ceoalbus (ГК, ЮБК) и H. russula (ЮБК); в лесокультуре
со
сны на яйле – H. gliocyclus . В травянистых раститель-
ных сообществах дубовых и можжевелово-дубовых ред-колесий и лесных полян найдены cup
hophyllus virgineus
(ЮБК), Hygrocybe conica (ГК, ЮБК), H. psittacina (ГК,
ЮБК), Pseudohygrocybe constrictospora (ЮБК); в луго-
во
й степи – Hygrocybe conica (КЛс). В степной зоне по-
луострова к настоящему времени не зарегистрировано ни одного вида семейства.
В Крыму гигрофоровые грибы относятся к группе
осенне-зимних видов и образуют плодовые тела пре-имущественно поздней осенью или ранней зимой, ког-да большинство макромицетов уже заканчивает свое плодоношение. Иногда их можно найти и в январе, особ
енно в годы, когда конец осени – начало зимы бы-
вают теплыми и влажными. Некоторые виды имеют продолжительный период плодоношения, охватываю-щий окт
ябрь – декабрь.
БАЗИДИАЛЬНЫЕ МАКРОМИЦЕТЫ ЛИПЕЦКОЙ ОБЛАСТИ:
СТЕПЕНЬ ИЗУЧЕННОСТИ И ПРОБЛЕМЫ ИХ ОХР АНЫ
Сарычева Л.А.
воронежский университет
заповедник «Галичья Гора», липецкая обл., задонский р-н, п/о Донское
Липецкая область расположена в лесостепной
части Восточно-Европейской равнины, ее площадь составляет 24,1 тыс. км
2. Микологические иссле-
дования на ее территории были начаты лишь в 60-е годы ХХ века, с созданием в заповеднике «Галичья Гора» специализированной лаборатории (Сарычева, 2000).
К
настоящему времени в области выявлено 1405 ви –
дов грибов из 5 отделов, 14 классов, 51 порядка, 139 семейств и 384 родов. Рассмотрение системы грибов в ранге отделов показывает преобладание базидио-мицетов
(Basidiomycota), составляющих 51,5 % (723
видов) от общего количества видов. Базидиальные макромицеты представлены 610 видами, среди кото-рых до
минируют агарикоидные (Agaricales s.l.) – 422
вида и афиллофороидные (Aphyllophorales s.l.) – 139 видов. Гастроидные (Gasteromycetes) макромице-ты представлены 37 видами и гетеробазидиальные (Heterobasidiomycetes)
– 12 видами.Спектр ведущих по количеству видов возглав-
ляют три семейства: Tricholomataceae (115 видов), Cortinariaceae (73) и Russulacee (41), их общая доля в мик
обиоте достигает 38 %. Далее следуют 10 круп-
ных с
емейств, содержащих менее 40 видов: poriaceae
(37), Agaricaceae (26), Coprinaceae (24), Strophariaceae (21), Boletaceae
(20), pluteaceae (19), Lycoperdaceae
(16), Hymenochetaceae (13), Amanitaceae, Bolbitiaceae и Hygrophoraceae (по 12 видов). Средняя видовая на-сыщенность
семейств составляет 9 видов, родов – 3,4
вида, что показывает сравнительно высокое видовое разнообразие изучаемой микобиоты.
Трофическая структура биоты макромицетов пред-
ст
авлена сапротрофами (57,7 %), симбиотрофами
(25,6 %), паразитами с различной степенью облигат-
но
сти (4,9 %) и политрофами (11,8 %). Отмечено значи-
тельное преобладание в составе микобиоты сапротро-фов (352 вида), что характерно для всех региональных микобиот умеренного пояса. Среди них доминируют
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 88
ксилосапротрофы (172 вида), далее следуют гумусо-
вые сапротрофы (89 видов) и подстилочные сапротро-фы (60 видов), развивающиеся на различных фракциях подстилки (соответственно этому выделено 7 групп). Симбиотрофы представлены156 видами, среди кото-рых выделены узкоспециализированные и эврибионт-ные микоризообразователи. Грибы с паразитным типом питания насчитывают 30 видов, основная доля их при-ходится на ксилопаразитов (24 вида) и единично пред-ставлены мико- и бриопаразиты. К группе политрофов относится 72 вида грибов, обладающих симбиотрофно-сапротрофным и полисапротрфным типом питания.
Ядро биоты базидиомицетов региона образуют
виды с обширными ареалами (доминируют мультире-гиональный
– 36,1 %, и голарктический – 27,9 % гео-
графические элементы) с господством макромицетов, приуроченных к лесным сообществам. По характеру биотопического распределения грибов нами выделены 4 о
сновные группы: стенотопные виды (7 %), гемисте-
нот
опные виды (40 %), гемиэвритопные виды (42 %),
эвритопные виды (11 %).
Для выявления основных типов сообществ макроми-
цетов, формирующихся в различных местообитаниях, были использованы возможности кластерного анализа. У становлено, что по сходству видового состава макроми-цетов в обособленные кластеры группируются прежде всего микосообщества широколиственных лесов с учас-тием дуба черешчатого Quercus robur L. (это сообщества
грибов дубово-березовых лесов (374 вида), дубрав (328 видов), дубово-липово-кленовых лесов (308 вида). Высо-кое сходство имеют сообщества мелколиственных лесов (б
ерезняков – 261 вид, ивняков – 153, осинников – 135,
ольшаников – 76 видов) и сосняков (боров – 129 видов,
и суборей – 270 видов). В особую группу объединяются
очень сходные по составу микосообщества открытых су-хих травянистых ценозов: ковыльно-разнотравных сте-пей (45 видов), пастбищ (46 видов) и суходольных лугов (60). К ним достаточно близки сообщества грибов сели-тебно-рудеральных ценозов (70 видов).
Своеобразие и уникальность микобиоты Липецкой
области обусловлена наличием редких видов, обеспече-ние сохранения которых требуют специальных мер. На-иболее редкие представители микобиоты (4 вида сумча-тых и 34 вида базидиальных макромицетов) включены в региональную Красную книгу (Сарычева, Ртищева, 2005). Для оценки возможностей сохранения видового разнообразия грибов ведется планомерное обследова-ние существующих в регионе особо охраняемых при-родных территорий (ООПТ), что является на данном этапе приоритетным направлением исследований. У ста-но
влено, что около половины (48 %) локальных популя-
ций редких видов грибов располагается в пределах уже имеющихся ООПТ. Результаты исследований показали, что особое значение для сохранения редких видов имеет заповедник «Галичья Гора», единственный в восточной части Среднерусской возвышенности. В видовом от-ношении биота макромицетов заповедника составляет 85
,8 % от микобиоты области, что показывает высокий
уровень его репрезентативности. В заповеднике выяв-лено 22 вида грибов, занесенных в списки редких, что со
ставляет 57,9 % охраняемых в области видов.
Нами выделена группа макромицетов, для которых
характерны низкая активность вида в пределах всего ареала, редкость и уязвимость заселяемых местообита-ний, нахождение на границе ареала. Некоторые из них в пределах Центрально-Черноземного региона найдены только на территории Липецкой области. К ним отно-сятся amanita argentea
Huijsman, cor tinarius claroflavus
(fr.
) fr., cortinarius vespertinus (fr.) fr., clavaria zollingera
Lev., leccinium rigidipes O rton., inocybe mixtilis (Britz.)
Sacc., Tremella foliacea per s.: fr., V olvariella pusilla (pe rs.)
Singer, V olvariella hypopithys (fr. ) M.M. Moser.
Особого внимания, с точки зрения охраны, заслужи-
вают грибы, обитающие в таких уязвимых сообществах ка
к дубравы. это связано с тем, что процесс массового
усыхания дуба, охвативший всю европейскую лесостепь, ведет к сокращению площадей местообитаний грибных консортов дуба (Иванов, 1992, Харченко, 2006). В Ли-пецкой области к ним относятся ксилотрофы Sparassis
brevipes, Ganoderma lucidum, Pachykytospora tubercu-losa, Tremella foliacea, симбиотрофы cor
tinarius claro-
fla
vus, cortinarius vespertinus, гумусовый сапротроф
mel
anophyllum haematospermum. Уничтожение степных
сообществ ведет к исчезновению таких уникальных видов как aga
ricus bernardii, endoptychum agaricoides,
langermannia gigantean, Polyporus rhizophilus.
Таким образом, в Липецкой области основными
направлениями охраны видового разнообразия мико-биоты является выявление на основе детальной инвен-таризации всех таксонов группы редких и уязвимых видов, включение их в региональную Красную книгу, организация контроля за состоянием известных их по-пуляций, поиск новых мест их обитания, обеспечение сохранности важнейших местообитаний.
ДЕРЕВОР АЗРУШАЮЩИЕ ГРИБЫ БЕРЕЗНЯКОВ Ю ЖНОГО ПРИУР АЛЬЯ
Сафонова Т.И.
оренбургский государственный педагогический университет,
оренбург
Южное Приуралье находится на стыке лесостепной
и степной природно-климатических зон. Лесостепная и степная зоны сильно отличаются по видовому со-ставу древостоев. В лесостепной зоне представлены практически все лесные формации, существующие в Оренбургской области: сосняки, дубравы, кленовники, липняки, вязовники, березняки, осинники. Древесная растительность степной зоны значительно беднее, и
Флора и охрана грибов 89
преимущественно представлена осинниками и березня-
ками.
Березовые леса широко распространены в регио-
не и, вследствие этого, являются удобным модельным объектом для изучения изменений качественных и ко-личественных характеристик биоты дереворазрушаю-щих грибов в широтном градиенте.
В березовых лесах Южного Приуралья выявлено
98 видов ксилотрофных грибов, представляющих 15 порядков отдела Basidiomycota и относящихся к 56 родам и 26 семействам. К числу крупных порядков относятся Sc
hizophyllales, Hyphodermatales, Coriolales, polypora-
les, Agaricales. Ведущими семействами являются Corio-la
ceae, polyporaceae, Schzophyllaceae, Bjerkanderaceae,
Steccherinaceae, Chaetoporellaceae, Rigidoporaceae. На до
лю ведущих семейств приходится 26,9 % видов, а на
долю одновидовых семейств 38,5 % видов микобиоты.
Крупнейшими родами микобиоты березняков являются Tr
ametes (включает 6 видов), polyporus и Steccherinum
(по 5 видов), Daedaleopsis, phlebia и postia (по 4 вида).
Встречаемость видов в различных березовых лесах
Южного Приуралья разнообразна. Наиболее распро-страненными видами являются Fomes fomentarius (L.
: fr
.) fr., Stereum subtomentosum pouzar , bjerkandera
adusta (Willd. : f r.) p.karst., Fomitopsis pinicola (Sw. :
fr
.) p. karst. Также есть виды представленные на дан-
ной территории единичными находками. К их числу относятся редкие виды (ceriporia
reticulata (Hoffm. :
fr
.) Domaсski, climacodon septenterionalis (fr.) p.karst.,
Hyphodontia flavipora (Berk. et M.A.Curtis ex Cooke) Sheng H.Wu, Polyporus tuberaster (
pers.) fr, Spongipellis
spumeus (Sowerby : f r.) pat., Steccherinum murashkinskyi
(Burt) Maas G., Tyromyces chioneus ( fr. : fr.) p. karst.,
Volvariella bombycina (Schaef f. : fr.) Sing.) и виды, рас-
пространение которых в регионе еще до конца не изу-чено (diplomitoporus
lenis (p. karst.), mycoacia aurea
(f
r.) J.Erikss. et Ryvarden, physisporinus vitreus (pers. :
fr.) p.karst., Porostereum spadiceum (pers. : f r.) Hjort-
stam et Ryv., Postia undosa ( peck) Julich, Skeletocutis
subincarnata ( peck) keller, Tomentella atramentaria Ros-
tr., Tomentella lapida (p ers.) Stalpers).
Вследствие малоизученности последних, они нуж-
даются в контроле численности их популяций, а в пер-спективе могут быть рекомендованы к охране.
cliT ocYbe (fR.) sTAUDE В ТУ ЛЬСКОЙ ОБЛАСТИ
Светашева Т.Ю.
Тульский государственный педагогический университет им. л.Н. Толстого,
Тула
В соответствии с данными Index fungorum (www.
indexfungorum.org) около 70 видов рода clitocybe , из-
вестных в мировой микобиоте, имеют в настоящее время достаточно определенное таксономическое по-ложение.
Изучение рода clitocybe
часто бывает проблема-
тичным. Только несколько видов из рода имеют ярко выраженные систематические признаки. Для большей же части типичны невыразительные макро- и микро-морфологические черты, значительное перекрывание важных систематических характеристик разных видов при одновременном широком варьировании тех же признаков внутри вида. Трудности усугубляются тем, что в имеющихся немногочисленных определителях нет единой точки зрения на синонимику видов, и их таксономическое положение не всегда можно с уве-ренностью
соотнести с данными Index fungorum. это
обстоятельство часто ставит под сомнение точность определения и заставляет производить его ревизию каждый раз при поступлении новых образцов. Поэто-му представляемые здесь сведения о видах в будущем могут быть критически переработаны.
В Тульской области сегодня обнаружено 27 видов
рода, приуроченных к различным типам местообита-ний.
Широколиственные леса: clitocybe
dicolor (pers.:
fr.) J.E. Lange; clitocybe geotropa (Bull.) Quйl.; clito-
cybe
gibba (p ers.: fr.) p. kumm; clitocybe houghtonii (W.
phillips) Dennis; c
litocybe langei Singer ex Hora. Хвойные и смешанные леса: clitocybe brumalis
(fr.) Gillet; clitocybe catinus (fr.) Quйl.; clitocybe cla-
vipes (p ers. : fr.) p. kumm; clitocybe costata kьhner et
Romagn; clitocybe ditopa (fr.) Gillet; clitocybe fragrans
(Sowerby : fr.) p. kumm; clitocybe harmajae Lamoure;
clitocybe
subinvoluta (Batsch) fr.; clitocybe rivulosa
(pers. : fr.) p. kumm; clitocybe squamulosa (pers. : fr.) p.
kumm; clitocybe vibecina (fr.) Quйl.
Мелколиственные леса: clitocybe agrestis Harmaja;
clitocybe diatr
eta (fr.) p . kumm.
Виды, вероятно, не имеющие четкой приурочен-
ности к типу леса: clitocybe candicans (pers. : fr.) p.
kumm; clitocybe metachroa (fr. : fr.) p. kumm; clito-
cybe nebularis
(batsch) Quйl.; clitocybe odora (Bull. :
fr
.) p. kumm; clitocybe phyllophila (pers.: fr.) p. kumm;
clitocybe sinopica (fr.: fr.) p. kumm.; clitocybe umbili-
cata (Schaeff. : fr.) Singer.
Сырые травянистые окраины болот, на торфянистой
почве: clitocybe josserandii Singer .
Разнообразные местообитания с богатой почвой
(вероятно, с некоторой степенью рудеральности): cli-
tocybe dealbata (Sowerby: f r.) p. kumm.
В перечисленный список входят редкие виды,
известные пока только из одной точки и нуждающиеся в уточнении особенностей экологии и распространении: clitocybe costata;
clitocybe harmajae.
Виды, нуждающиеся в уточнении таксономического
положения: cli tocybe langei; clitocybe subinvoluta;
clitocybe umbilicata; clitocybe josserandii.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 90
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ВИДЫ РОДА armillaria В РОССИИ
Селочник Н.Н.
Институт лесоведения РАН,
Москва
Грибы рода armillaria являются наиболее распро-
страненными дереворазрушителями во всех лесных
зонах России и обнаруживаются также в ботанических садах, парках, городских насаждениях, на частных са-довых участках. Распространенный в бывшем СССР единственный вид arm
illaria mellea (vahl.)karst. в 1970-
х в Европе и США был разделен на 5 интерстерильных групп, признанных биологических видами, с помощью генетического теста (mating-test)., считающегося единс-твенно точным методом для определения видов этого ро
да (korhonen, 1978). Идентификация видов armillaria
в бывшем СССР с помощью указанного теста была на-чата М.Г. Радзиевской в конце 1980-х гг. (Радзиевская, Дьяков, 1987). На территории России были идентифи-цированы arm
illaria borealis и armillaria cepistipes в
М
осковском регионе и a. mellea s.s. в Краснодарском
крае. В1990-х гг. появилось сообщение об обнаружении a.
ostoyae на Picea coraniensis н а Дальнем Востоке ( filip
et all., 1993), и a . borealis и a. cepistipes б ыли выявлены
К. Корхоненом на Урале, в Свердловской и Пермской областях (неопубликованные данные). В 2002–2004 гг. автором этой работы, в совместном проекте с Институ-том дендрологии Польской Академии наук, в Московс-кой области были идентифицированы 2 вида arm
illaria
(A. borealis и a. cepistipes ) , ранее указанные здесь М.Г.
Радзиевской, но обнаруженные нами в новых местоо-битаниях региона (лесхозах, лесничествах), и впервые в России в Звенигородском лесхозе Московской области обнаружен a.
ostoyae , являющийся наиболее патоген-
ным представителем этого рода для хвойных пород (Se-lo
chnik, przybyl, Ufnalsky, 2005).В последующие годы
эта работа была продолжена, с участием К. Корхонена (Финский институт леса Академии наук Финляндии), за что мы приносим ему глубокую благодарность. С осе-ни 2004 г. до ноября 2007 г. нами было собрано около 100 образцов базидиом из разных районов Московской, Владимирской, Калужской обл., Республики Мордовия, Воронежской обл., и ряда объектов г. Москвы: Нацио-нального парка «Лосиный остров», Главного ботани-ческого сада Р АН (ГБС), Серебряноборского опытного лесничества Института лесоведения Р АН, лесопарков Бутово, Битца и др.). Из собранных образцов были по-лучены тканевые диплоидные изоляты, споровые отпе-чатки с последующим получением гаплоидных культур, и все изоляты скрещивались с 5 гаплоидными тестера-ми (a.borealis ,
a. cepistipes, a. ostoyae, a.gallica, a. mel-
lea s.s.).
Тесты показали, что в лесах Московской и Влади-
мирской обл., а также парках и садах на территории г. Москвы преобладают 2 вида: a.
borealis и a. cepis-
tipes, и они являются слабопатогенными полифагами умеренной
зоны. эти виды мы находили, как правило,
на пнях и валеже, часто на поверхности земли в траве, а a.
borealis изредка на стволах деревьев и кустарни-
ков. Плодоношение этих видов имеет свои особеннос-ти. Для a.
borealis отмечена летняя генерация в июле.
В сухих условиях она может появиться в августе, но имела место и в необычно холодное и влажное лето 2006 г. Осенняя генерация начинается в конце августа и может продолжаться весь сентябрь и даже в октяб-ре. Плодоношение a. cepistipes проис
ходит позже, чем
a.
borealis, вплоть до ноября. Впервые выявленный в
России a. gallica широко распространен в дубравах
Воронежской обл., в Мордовии, а в Московской обл. и Москве обнаружен в лишь в 2-х местах: в частном саду и на территории ГБС, причем в наших находках местообитание этого вида является, пожалуй, самой северной точкой в Европе. В России был также сделан ряд попыток идентифицировать виды armillaria на
ос-
нове морфологических характеристик плодовых тел, однако, сравнение наших данных с этими указанными в литературе видами приводит к некоторым сомнениям в правильности идентификации последних, что требу-ет проверки с помощью генетического теста. Таким образом, в настоящее время в России, используя mat-ing-test, доказано существование всех 5 биологических видов armillaria ,
указанных в Европе: a. borealis, a.
cepistipes, a. ostoyae, a. gallica, a. mellea s.s.
ЩЕЛЕЛИСТНИК ОБЫКНОВЕННЫЙ
(ScHizoPHYllum commune fR.) В ЛИТВЕ
Снешкене Вилия, Юронис Видмантас
ка
унасский ботанический сад Университета витаутаса великого,
каунас
В процесе определения состояния зеленых насаж-
дений в городах Литвы и интродуцентов в лесах нами отмечено широкое распространение и рост вредонос-ности щелелистника обыкновенного ( Schizophyllum
commune f
r.).Дальнейшей целью работы явилось определение
степени распространения щелелистника в зеленых на-саждениях городов Литвы и на лесных интродуцентах; оценка наносимого им вреда и разработка мер по его сокращению. В качестве обьектов исследований выде-
Флора и охрана грибов 91
лены древесные растения из 3 различных типов насаж-
дений: уличных посадков, парков и лесов.
В 1995–1996 г.г. в городах Литвы проводились ин-
тенсивные обрезки уличных деревьев. Обрезки про-водились зимой, когда затруднено заживление ран. С 1996 г. на деревьях в значительном количестве стал рапространяться щелелистник обыкновенный. Более детальное изучение распространения гриба проводи-лось на одной из улиц города Каунас, где преоблада-ющей породой была липа мелколистная (Tilia cordata Mill.). Распространенность щелелистника определя-лась в период с 1995 по 2007 г. При первом обследова-нии весной 1995 г. (до обрезки) количество деревьев на которых обнаружены плодовые тела гриба составляло 2,7
% от общего числа (367). После сильной обрезки,
проведенной зимой 1996 г., гриб распространился на соседствующие деревья. В тех случаях, когда раны успешно заживлялись, отрастающие побеги нередко выламывались из основания, образовались новые раны, что приводило к повторному заражению. Гриб с каждым годом рапространяется, а состояние деревьев уху
дшается: в 2007 г. на 45,6 % растений обнаружены
плодовые тела гриба. Средний балл интенсивности по-ражения от 1,0±0,0 в 1995 г. достиг 2,0±0,0 в 2007 г.
В парках городов условия роста деревьев более бла-
гоприятны чем на улицах. Однако, если условия роста не являются подходящими для данной породы, они тоже могут пострадать. Проведенные наблюдения на 2 группах состоящих из липы мелколистной и 1 груп-пы липы крупнолистной (T. platyphyllos Scop.), расту-щих в открытых солнечных местах, показали, что они сильно поражены щелелистником обыкновенным. На стволах и крупных ветвях обнаруживаются плодовые тела гриба, кора трескается и большие ее зоны некро-тизируются. Все поражения отмечены на ориентиро-ванных на юг и юго-запад частях стволов.
В лесах Литвы щелелистник обыкновенный являет-
ся обычным сапротрофом и на живых деревьях встре-чается очень редко. При исследованиях состояния ин-тродуцентов нами обнаружены несколько древостоев дуба красного (Quercus rubra L.) со значительным коли-чеством плодовых тел щелелистника. Решающим фак-тором в данном случае явились колебания температур ранней весной. Днем под действием солнечных лучей стволы нагреваются с южной и юго-западной стороны, а ночью температура сильно падает, и кора деревьев трескается. Пораженные места колонизируются щеле-листником, который вызывает поверхностную белую гниль древесины, препядствует заживлению ран и со-здает
условия для настоящих патогенов. До 80 % дуба
красного были обладателями плодовых тел гриба.
Щелелистник обыкновенный очень редко встречает-
ся в густых, влажных лесах, однако часто в сухих и сол-нечных. При попытках выращивания интродуцентов в лесах, а также при посадке новых уличных насаждений в городах, следует учитывать этот фактор. В городах за-селившийся на деревьях щелелистник опасен не только для них, но и для людей и животных. Имеются литера-турные данные, что щелелистник обыкновенный может быть источником их заболеваний. Поэтому ослаблен-ные грибом деревья требуется устранять.
Щелелистник обыкновенный очень устойчив к
фунгицидам, хорошо переносит даже окраску масля-ной краской, которая используется при обрезке. Значи-тельно уменьшить риск заражения уличных деревьев щелелистником могло бы более широкое использова-ние декоративных форм деревьев, не требующих зна-чительных обрезок.
КОПРОТРОФНЫЕ ПЕРИТЕЦИОИДНЫЕ АСКОМИЦЕТЫ
ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ
Сорокина Н.Л., Прохоров В.П.
кафе
дра микологии и альгологии,
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
Перитециоидные аскомицеты составляют массо-
вый и важный компонент копротрофных экосистем. эт
а группа аскомицетов включает пиреномицеты, об-
разующие перитеции с унитуникатными сумками и локулоаскомицеты, с плодовыми телами внешне похо-жими на перитециии, но обладающие битуникатными сумками.
В России копротрофные перитециоидные грибы,
до сих пор остаются группой аскомицетов практичес-ки не изученной, которой отечественные микологи не уделяли специального внимания. Все найденные виды, за исключением Sordaria macrospora и Kernia
nitida , отмечены впервые на территории России.
В настоящей работе было исследовано более 450
образцов помёта 21 вида животных, которые были соб-раны на
территории Европейской части России – от
Кандалакшского р-на Мурманской обл. и до Красно-дарского края. Для выявления плодовых тел был ис-пользован стандартный метод инкубирования образ-цов во влажных камерах с периодом инкубирования 40–50 дней.
В результате проведённых исследований было вы-
явлено 47 видов, относящихся к 12 родам и 6 семейс-твам. Впервые для микофлоры России зарегистрирова-ны пре
дставители 8 родов, среди которых – Arnium – 2,
cercophora – 2, Gelasinospora – 1, Hypocopra – 2, Po-
dospora – 15, Sporormiella – 12, Strattonia – 1, Trich-
odelitschia – 1 вид. Отмечено 45 видов копротрофных
перитециоидных аскомицетов, ранее не известных в России.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 92
Обнаруженные виды широко распространены как
в европейской части России, так и во многих странах
мира. Для 26 видов нами отмечены новые животные, на помёте которых они ранее не были зарегистриро-ваны.
Доминирующее положение по частоте встречае-
мости занимают среди выявленных видов занимают Sporormiella minima, S. intermedia, Podospora curvula ,
P . decipiens , P . pleiospora , Sordaria fimicola и S. lappae .
Наибольшее видовое разнообразие было отмечено на образцах помёта зайца, коровы, лошади, козы и лося. Образцы помёта именно этих животных могут быть использованы для изучения и составления видовых региональных списков перитециоидных аскомицетов.
НОВЫЕ ДАННЫЕ О Р АСПРОСТР АНЕНИИ РЕДКИХ
И ИСЧЕЗАЮЩИХ ВИДОВ ГРИБОВ В УКР АИНЕ
Сухомлин М.Н.1, Бисько Н.А.2, Кутковая О.В.3, Трискиба С.Д.3
1 киевский национальный университет имени Тараса Шевченка,
киев
2 Институт ботаники им. Н.Г. Холодного НАН Украины,
киев
3 Донецкий национальный университет,
Донецк, Украина
Охране грибов в большинстве стран уделяется не-
дост
аточное внимание. это объясняется рядом причин,
среди которых ограниченные сведения относительно биологического разнообразия грибов, а также их роли в функционировании экосистем. Поэтому, выявление и мониторинг редких и исчезающих видов грибов поз-воляет не только уточнять ареал их распространения, но и включать эти территории в систему природоох-ранных объектов.
В последнем издании «Красной книги Украины»
(1996) приведено 439 видов сосудистых растений, ко-торые находятся под угрозой исчезновения, тогда как в 1980 г. их количество составляло приблизительно 150 видов. В это же издание вошли 30 видов макроскопи-ческих грибов. В Красной книге Украины выделяют 4 категории охраняемых видов (Положение о Красной книге Украины, утвержденное Постановлением от 29 октября 1992 г.).
Одиннадцать видов включены в красную книгу,
как исчезающие (категория І), два, как уязвимые виды (категория II). Наибольшая группа относится к редким видам (17)
– категория III. В списках грибов, занесен-
ных в
Красную книгу Украины отсутствуют 0, Iv , v та
vI категории. Семнадцать видов, занесеннях в Крас-ную книгу Украины входят в состав Красной книги СССР .
Нами проведено уточнение списков редких видов
на территории Украины. Установлено 111 видов мак-ромицетов, которые относятся к 2 отделам, 10 поряд-кам, 21 семейству, 50 родам, которые считаются ред-кими, требуют внимания и наблюдений за местами произрастания. э
ти виды не внесены в Красную книгу
Украины, но будут учтены при создании региональных Красных книг.
В результате экспедиционной работы нами уста-
новлены новые места произрастания трех видов, за-несенных в Красную книгу Украины (Sparassis crispa, Grifola fr
ondosa, morchella steppicola) и четырех ред-ких видов макромицетов ( Sparassis laminosа, m orchella
semilibera, morchella elata, Verpa bohemica ). Кроме
того, выявлены новые места произрастания некоторых аскомицетов, представителей семейства mor
chellaceae :
Verpa
conica, morchella conica и mor chella esculenta. А
для десяти видов найдены новые места плодоношения в неустановленных ранее областях. Таким образом, выявленные новые точки произрастания позволили уточнить ареалы распространения редких видов мак-ромицетов.
Однако, сохранение мест плодоношения не дает
уверенности в том, что грибы, которые там произ-растают будут сохранены навсегда. Консервация при-родного разнообразия грибов ex situ рассматривается микологами как один из перспективных подходов со-хранения биоразнообразия. В связи с этим возрастает актуальность коллекций культур, как ботанических садов и микологических банков. Так, нами подготов-лено для введения в коллекцию культур шляпочных грибов Института ботаники им. Н.Г. Холодного НАН Украины семь видов редких грибов и три вида, зане-сенных в Красную книгу Украины ( Sparassis crispa,
Grifola fr
ondosa, morchella steppicola ). Такие виды, как
Sparassis crispa, Sparassis laminosа, Grifola frondosa, Verpa
conica, Verpa bohemica, morchella semilibera,
morchella elata, morchella conica, morchella steppicola
и mor chella esculenta пополнены штаммами из реги-онов, которые ранее не были представлены в коллек-ции.
Таким образом, полученные результаты по распро-
странению редких видов существенно могут попол-нить данные нового выпуска Красной книги Украины, а выделенные в культуру виды макромицетов явля-ются значительным вкладом в сохранение генофонда грибов Украины.
Исследования проводились при финансовой подде-
ржке гранта № 25.5/066 ГФФИ.
Флора и охрана грибов 93
Можжевельник обыкновенный (Juniperus commu-
nis L.) типичный элемент бореальной флоры, широко
распространенной на островах Керетского архипелага Кандалакшского залива Белого моря.
Наши исследования проводились в окрестностях
Морской биологической станции СПбГУ , располо-женной на острове Средний, и близлежащих островах архипелага. Материал был собран в июне 2007г. Спе-циально микромицеты, развивающиеся на хвойных растениях, в том числе и на можжевельнике, ранее в этом районе не изучались.
В результате исследований было обнаружено 10 ви-
дов микромицетов, относящихся к 10 родам, входящих в отделы Ascomycota (роды lophodermium
, mycosphae-
r
ella, davidiella ) и Deuteromycota (роды cytospora , Do-
thiorella , capnophialophora , Taeniolella , cladosporium ,
Trimmatostroma, alternaria ). Лишь два из найденных
нами видов
– lophodermium juniperinum De Not. и
cladosporium
herbarum (pers.) Link отмечались здесь
ранее
(Черепанова и др., 1975). Наблюдения показали, что оба этих вида относятся к числу наиболее распро-страненных микромицетов на хвое можжевельника в этом районе.
К числу интересных находок можно отнести dav
idi-
ella allicina (fr .) Aptroot (синоним mycosphaerella allicina
(fr.
) vest.), обнаруженную как в телеоморфной стадии,
так и в аноморфной стадии развития ( cla dosporium her-
barum ). Ранее этот вид, характеризующийся широким
кругом хозяев, на Juniperus communis не отмечался.
Среди обнаруженных нами видов были и сапротро-
фы, и биотрофы. К биотрофам следует отнести lopho-
dermium
juniperinum , cytospora pinastri fr. вызывающие
заболев
ания растения. Остальные виды – сапротрофы,
обитающие на мертвой хвое. Большинство найденных видов не являются узко специализированными и, ве-роятно, могут быть обнаружены на других субстратах. Исключение составляют lophodermium
juniperinum,
mycosphaer
ella juniperina (Ellis) Tomilin, для которых,
по имеющимся в литературе данным, хвоя можжевель-ника
– единственный подходящий субстрат.МИКРОМИЦЕТЫ ХВОИ МОЖЖЕВЕЛЬНИКА НЕКОТОРЫХ
ОСТРОВОВ КЕРЕТСКОГО АРХИПЕЛПГА
Тобиас А.В., Федосова А.Г.
Санкт-Петербургский государственный университет,
Санкт-Петербург
К ИЗУЧЕНИЮ МАКРОМИЦЕТОВ БОЛОТ ЛЕСНОЙ ЗОНЫ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ
Филиппова Н.В.
Югорский Государственный Университет,
Ханты-Мансийск
Болота Западной Сибири привлекают внимание
все большего числа исследователей в связи с изучени-ем цикла углерода и глобальных изменений климата. эмиссия
из болот метана и углекислого газа напрямую
зависит от жизнедеятельности комплекса редуцентов: специфических анаэробных и аэробных бактерий, ак-тиномицетов, микро- и макромицетов.
В данном сообщении мы остановимся на видовом
разнообразии, обилии, и составе сообществ макроми-цетов, складывающихся в разных типах болот лесной зоны
западной Сибири.
Материал собран в течение двух сезонов на боло-
тах Ханты-Мансийской автономной области и Ямало-Ненецкого автономного округа. Сбор гербария (200 образцов) произво
дился по стандартной методике.
Определение видовой принадлежности проводилось с использованием современных определителей и мо-нографий по отдельным таксонам ряда российских и зарубежных авторов.
Микоценоз мезо- и олиготрофных болот представ-
лен небольшим разнообразием макромицетов (око-ло 50 видов), среди которых есть специфичные для болотных местообитаний виды. Таковы бриотрофы: Galerina (8 видов) , lyophyllum palustris, o
mphalina sphagnicola и ряд симбиотрофов (leccinium holopus,
cortinarius huronensis).
По роли в экосистеме макромицеты болот можно
объединить в несколько трофических групп: 1. сапро-трофы на сфагнумах и других мхах, 2. сапротрофы на опаде, 3. подстилочные сапротрофы, 4. ксилотрофы, 5. симбиотрофы деревьев и кустарничков. В выявленном нами списке наибольшее количество видов в группе сапротрофов сфагнума и симбиотрофов.
В разных типах болот состав макромицетов варьиру-
ет, соответственно мы выделяем три их группировки.
I. Макромицеты сфагновых топей, мочажин грядо-
во-мочажинных комплексов (растительность представ-лена сфагновыми мхами, шейхцерией, вахтой, клюк-вой,
в более богатых участках – осокой), где уровень
стояния воды близок к поверхности. По нашим дан-ным здесь обитает около 20 видов, все они являются сапротрофами. lyophyllum palustr
e наиболее приспо-
соблен к высокой обводненности и часто встречается с высоким обилием в топях, мочажинах и на низких грядах. На мерзлых плоскобугристых болотах ЯНАО нами отмечено высокое обилие Hypholoma elongata в
залитых водой мочажинах. С меньшим обилием ги-фолема встречается и в не мерзлых мочажинах болот
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 94
ХМАО. Галерины (Galerina tibiicystis, G. allospora, G.
stagnina, G. paludosa) и омфалины (omphalina gerardi-
ana, o.
oeniscus) предпочитают возвышенные, менее
обводненные участки, где часто встречаются скопле-ниями. В случае богатого питания в топи формируют-ся осоковые сообщества, на опаде которой многократ-но отмечен marasmius andr
osaceus.
II. Макромицеты сосново-кустарничково-сфагно-
вых болот (рямов), гряд и кочек грядово-мочажинных комплексов. Здесь, в отличие от топей и мочажин, уро-вень воды располагается на глубине 20–70 см ниже поверхности. В составе микофлоры наряду с выше перечисленными видами появляются симбиотрофы деревьев и кустарничков. Общее видовое богатство около 40 видов. Наряду с галеринами обильны здесь паутинники секции Telamonia ( cortinarius
huronen-
sis, c.
croceus, c. olivaceofuscus, c. semisanquineus) и
другие ( cortinarius hemitrichus, c.comptulus, c. ves-
pertinus). cortinarius huronensis поселяется также на
грядах, где нет деревьев, вероятно образуя микоризу с кустарничками. На грядах и кочках изредка встре-чается лаккария (laccaria
laccata , l.pr oxima). Велико участие в сообществах рямов сыроежковых ( lactarius
rufus, r
ussula sp .). На опаде кустарничков и осоки час-
то встречается marasmius androsaceus. Из редко встре-
чающихся видов отмечены mycena sp., Tеlеphora sp.,
Pseudohygrocybe phaeococcinea, P . helobia, Hebeloma helodes, Galerina
hypnorum, G. shagnorum, lactarius
trivialis и др. Кроме олиготрофных древесных болот,
широко распространены мезотрофные, отличающиеся наличием березы, и более разнообразным травостоем. С березой образует микоризу болотный подберезовик leccinium
holopus. В мочажинах таких сообществ нами
однажды было встречено скопление mitrula paludosa.
Здесь с разным обилием также можно встретить все перечисленные ранее виды. Из-за обилия подстилки, древесного опада, велико разнообразие мелких аско-мицетов и миксомицетов, определение которых нами не проводилось. Мелкие аскомицеты также постоянны в ряме, на грядах; на опаде, образуемом пушицей, осо-ками, веточками и листьями кустарничков.
III.Сообщества сырых и заболоченных лесов по со-
ставу макромицетов приближаются к лесным, и нами изучены недостаточно.
АГАРИКОИДНЫЕ ГРИБЫ В МИКОБИОТЕ ЗЕЛЕНЫХ
НАСАЖДЕНИЙ ГОРОДА МИНСКА
Шапорова Я.А.
ГНУ «Институт экспериментальной ботаники им. в.Ф. к упревеча НАН Беларуси»,
Минск
Состояние урбанизированных территорий невоз-
можно оценить без качественной характеристики грибов. В процессе сопряжённой эволюции между растениями и грибами сложились мутуалистические взаимоотношения, и все изменения, происходящие с каждым из компонентов незамедлительно найдут свое отражение на другом. Комплексные исследова-ния урбанизированных территорий (в том числе и города Минска) проводятся в настоящее время доста-точно широко, однако микобиота в полном объёме не изучена. До последнего времени изучение агарикоид-ных макромицетов, их видового состава в Беларуси касалось преимущественно естественных сообществ, незатронутыми микологическими исследованиями в данном аспекте оставались городские экосистемы.
Город Минск занимает территорию общей площа-
дью 305,6 кв. км, из них площадь зеленых насаждений общего пользования (парки, скверы, лесопарки, буль-вары и др.) составляет 5120,4 га, ограниченного поль-зования 4171,77 га, специального пользования 2629,1 га и городские леса 26991,8 га. Зеленые насаждения размещены на территории города неравномерно. На-иболее высокие показатели озеленения имеет Цент-ральный административный район города (обеспечен-ность насаждениями общего пользования составляет 85 кв. м на человека), самые низкие показатели во Фрунзенском и Московском районах (обеспеченность насаждениями общего пользования составляет соот-ветственно 5,9 кв. м и 7,2 кв. м на человека). Насаж-дения общего пользования неоднородны также по ка-честву озеленения и благоустройства. Основная масса зеленых насаждений новой застройки представлена молодыми посадками древесно-кустарниковых пород (на большей части Слепянской водной системы, в пре-делах жилых районов Запад, Юго-Запад, Малиновка, Серебрянка и др.). В составе древесно-кустарничко-вых насаждений есть как местные, так и интродуциро-ванные виды. Ежегодно в городе по различным причи-нам приходится сносить большое количество зеленых насаждений. Чаще всего приходится сносить деревья в неудовлетворительном, аварийном состоянии, про-израстающие в нарушение СНиП, при производстве работ по благоустройству дворовых территорий и пе-рекладке инженерных коммуникаций.
В условиях городской черты зеленые насаждения
подвергаются очень сильному антропогенному прес-сингу. В связи с этим лесопарковые насаждения Мин-ска можно сравнить с естественными ценозами, кото-рые нахо
дятся на Iv и v стадиях дигрессии.
При закладке пробных площадей применялись
два подхода: площадь либо соответствует очертани-ям ценоза, либо имеет прямоугольную (квадратную) форму. Первый способ имеет свои затруднения из-за размытости границ и вариабельности площади це-нозов. Второй способ позволяет сравнивать видовые списки равновеликих участков, а также легко привязы-
Флора и охрана грибов 95
вать границы площадок топически – по живым ство-
лам, пням, сторонам горизонта и т.п. Размер пробной площади индивидуален для каждой группы грибов, и базируется на представлениях о минимум-ареале для выявления характерных видов. Для сапротрофов с мелкими базидиомами нами применяются площадки 20 х 20 м. Такая площадка может быть «вложена» в более крупную площадь, применяемую для изучения симбиотрофных грибов. В неоднородной биоценоти-ческой городской среде малые пробные площади дают представление в основном о типичных для сообщества видах. Для симбиотрофов целесообразно вместо одной площадки 400 м
2 закладывать разбросанно 4 площадки
по 100 м2, что, удобно и для других групп агарикоид-
ных грибов.
Использование маршрутного метода позволило то-
чечно обследовать газоны и дворовые территории.
Всего по результатам наших исследований и дан-
ным мик
ологического гербария ИэБ НАН Белару-
си (MS
k-f) выявлено в скверах, бульварах, парках и
лесопарковых насаждениях города Минска более 160 видов агарикоидных грибов, которые относятся к пяти порядкам, 15 семействам: Agaricaceae Chevall., Ama-
nitaceae Roze, Bolbitiaceae Singer, Coprinaceae Gдum., Entolomataceae kotl.
et pouzar, Hygrophoraceae Lotsy, pluteaceae kotl. & pouzar, Strophariaceae Singer et A.H.
Sm., Tricholomataceae (fayod) R. Heim, Boletaceae Che-
vall., Hygrophoropsidaceae k
ьhner, paxillaceae Lotsy,
Cortinariaceae R. Heim ex pouzar, Lentinaceae Jьlich,
Russulaceae Lotsy, 52 родам.
Наибольшим количеством видов представлены се-
мейства: Tricholomataceae (52 вида), Cortinariaceae (22
вида) Agaricaceae (17 видов). Свои доминирующие по-зиции утрачивают представители порядков Boletales и Russulales.
Микоризообразователи нами отмечены преимущес-
твенно в Центральном ботаническом саду, старых клад-бищах и лесопарковой зоне.
В зоне жилой застройки наиболее часто отмечались
представители семейств agaricaceae и coprinaceae.
Причем
виды coprinus atramentarius (Bull. : fr.) fr. и
coprinus
disseminatus (pers. : fr.) Gray образовывали
базидиомы до первой декады декабря, пока не устано-вились минусовые температуры.
В связи с тем, что в последние годы интенсивно
проводилось омолаживание тополей путем сильной обрезки,
более чем на 50 % деревьев нами обнаружи-
ва
лись следующие виды flammulina velutipes (Curtis :
fr.) Singer, pholiota aurivella (Batsch : fr.) p. kumm. и
pleurotus ostreatus (Jacq. : fr.) p . kumm.
БИОГЕОГР АФИЧЕСКИЕ СВЯЗИ БИОТЫ КЛАВАРИОИДНЫХ ГРИБОВ РОССИИ
Ширяев А.Г.
Институт экологии растений и животных Уро РАН,
екатеринбург
В России известен 231 вид клавариоидных грибов
(Basidiomycota), но знания о распространении данных грибов еще весьма не полны, что не позволяет выяс-нить характер ареалов не только большинства видов, но и крупных таксонов, даже на уровне семейств. Не смотря на это, анализ многолетних исследований этой проблемы, дает нам возможность дать предваритель-ные данные о составе географических групп клавари-оидных грибов России. Наибольшим биологическим разнообразием они отличаются в горных районах Дальнего Востока (168 видов), на Кавказе (165), Ура-ле (161) и Южной Сибири (130). На равнинных тер-ри
ториях биоразнообразие ниже – Европейская часть
(127), Западной (113) и Восточной Сибири (104). На-ибольшее количество видов отмечено в хвойно-ши-роколиственных лесах и южной тайге. Многие виды отмечены исключительно здесь. Несколько меньше видов встречено в центрально-таежных районах. Не смотря, на то, что в крайне северных (тундры), юж-ных (степи и пустыни) и высокогорных районах ви-довое разнообразие не велико, здесь имеются виды, ограниченные в своем распространении только этими регионами. Особое место, в структуре биоты клава-риоидных грибов России занимают виды не встре-ченные за пределами субтропических районов (Сочи, Дербент). Как показывают результаты проведенного нами ана-
лиза, большую часть видов грибов исследуемой группы следует отнести к широко распространенным панголар-кт
ическим, эврирегональным и евроазиатским – 69,1 %.
это сочетается с полным отсутствием эндемичных для
России видов. Особый интерес представляют виды, границы ареалов которых проходят по России. В час-тности, среди них можно выделить «западные» виды клавариоидных грибов, распространенных в Европе, также Северной Америке и Европе, а восточнее Урала отмеченные в единичных экземплярах только на Алтае (6
,3 %). Примером их являются Ceratellopsis terrigena,
Lentaria corticola, pistillaria paradoxa. Другая группа,
«восточных» видов – присутствует в Северной Аме-
ри
ке и Дальнем Востоке – Clavariadelphus americanus,
Ramaria americana, R. xanthosperma – с самыми восточ-
ными находками на Байкале, а также американо-сибирс-ки
е – Clavulinopsis aurantio-cinnabarina, Ramaria foetida –
с восточными местонахождениями на Алтае и Урале. Можно предполагать, что в субарктических районах проходит южная граница ареалов циркумарктического Clavulinopsis arctica, а арктоальпийскими видами явля-ются Clavulinopsis corynoides, Ramariopsis subarctica, Typhula chamaemori. Для Clavulina cartilaginea, Lentaria surculus, Россия, вероятно, являются крайней северной точкой тропического ареала. Среди более крупных таксо-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 3 96
нов, можно предположить, что для родов Lachnocladium
и Deflexula, а также семейства physalacriaceae террито-
рия России является северной границей их распростра-не
ния. Род pistillina является «западным» для России.
Большая часть отмеченных видов являются редкими для России, что также позволяет предположить, что они находятся на границе ареалов.
Таким образом, биота клавариоидных грибов Рос-
сии состоит преимущественно из широко распростра-ненных видов в Северном полушарии, что указывает на принадлежность исследуемой биоты к циркумборе-альной области голарктического царства. Вместе с тем, Россия является важным биогеографическим рубежом, где проходят границы ареалов «западных» европей-ских, «восточных» американо-азиатских, «южных» тропических и «северных» субарктических видов. На наш взгляд, именно в этом и заключается своеобразие биоты клавариоидных грибов России.
О ВСТРЕЧАЕМОСТИ РЕДКИХ ВИДОВ МАКРОМИЦЕТОВ
СЕМЕЙСТВА PHallaceae НА СЕВЕРО-ЗАПАДНОМ КАВКАЗЕ
Шумкова О.А., Криворотов С.Б., Касаннелли Д.П.
кубанский госу
дарственный университет,
краснодар
Северо-Западный Кавказ – уникальный регион, где
разнообразие климатических особенностей, почвенно-го и растительного покровов, подчиненное вертикаль-ной поясности горных ландшафтов, создает «эффект» видового разнообразия. Исходя из этого всесторонние исследования биоты грибов, и в частности, макроми-цетов Северо-Западного Кавказа представляют опре-деленный интерес.
В Красные книги СССР (1984), РСФСР (1988),
Краснодарского края (1994), Республике Адыгея (2000) включены два вида макромицетов: Решеточник крас-ный (clathrus ruber
pers.) и Мутинус собачий ( mutinus
caninus (Hads. : p ers) fr.), которые относятся к отделу
Basidiomycota, классу Basidiomycetes, порядку phalla-
les, семейств
у phallaceae, оба вида тропические.
Род Mutinus включает девять видов. m. caninus рас-
пространен в умеренной зоне Голарктики. В пределах Северо-Западного Кавказа этот вид встречается в ле-сах южного и северного макросклонов Кавказского хребта . Единичные находки отмечены в Геленджик-ском районе в окрестностях хутора Бетта (грабово-моховая, грабово-жасминовая ассоциации) у ручья, в районе реки Мацеста (буково-каштаново-разнотравная ассоциация), в районе реки Хоста (буково-каштаново-папоротниковая ассоциация), в районе города Туапсе (грабово-ясменниковая ассоциация) на разложившей-ся древесине. Несколько экземпляров обнаружено в Апшеронском районе в бассейне реки Мезмай (буко-во-каштаново-папоротниковая, березово-ежевичная ассоциации), в бассейне реки Курджипс (грабово-сам-шитово-моховая ассоциация), бассейне реки Чинарка (буково-мертвоопадная ассоциация), бассейне реки Пшеха (лещиново-моховая и лещиново-разнотравная ассоциации). Кроме того в окрестностях города Горя-чий ключ и верховьях реки Псекупс данный вид отме-чен в дубово-ясменниковой и дубово-грабово-моховой ассоциациях.
Род clathrus
небольшой по объему – 4 вида. За пос-
ледние годы нами были отмечены местонахождения решеточника красного на южном макросклоне Кавказ-ского хребта (в Закавказье), в бассейне реки Мацеста (буково-каштаново-папоротниковая ассоциация), бас-сейне реки Хоста (буково-каштаново-разнотравная ассоциация), районе города Туапсе (грабово-разно-травная ассоциация), районе хутора Бетта (грабово-жасминовая ассоциация). На северном макросклоне Кавказского хребта в районе города Горячий ключ дан-ный вид был отмечен А.Е. Коваленко (1988). В весной 2006 г. c.
ruber был найден в Апшеронском районе, в пойме реки Пшеха, в окрестностях станицы Самурс-кой, в опушечной формации лещиново-моховой ассо-циации. В июле того же года решеточник красный был обнаружен на отрогах хребта Азиш-Тау, в пределах за-казника «Камышанова поляна» (грабово-коротконож-ковая ассоциация, 1300 м. н. у. моря).
Оба вида макромицетов относятся к почвенным
сапрофитам, развиваются на листовом опаде и богатых гумусо
м почвах. эти виды влаголюбивы, теплолюби-
вы. К свету менее требовательны и могут произрастать как под пологом леса, так и на осветленных опушках.
При увеличивающейся рекреационной нагрузке и
вырубке лесов возможна потеря ценопопуляций дан-ных видов, так как они малочисленны. Кроме того в пределах своего ареала эти виды редки. На основании этих фактов необходимо включить m.
caninus и c.
ruber в
список видов требующих, особого внимания
к состоянию их ценопопуляции на Северо-Западном Кавказе.
На территории Ленинградской области РФ находит-
ся большое количество промышленных предприятий
и предприятий топливно-энергетического комплекса, загрязняющих атмосферу. Несмотря на более низкую, чем в городе, концентрацию передвижных источников (автотранспорта), в настоящее время отмечается быст-рый рост парка автомашин и в Ленинградской области, поэтому вклад этих источников в общее загрязнение атмосферы области будет неуклонно возрастать.
Анализ результатов наших исследований с 2005
года показал, что повсеместно в воздухе городов Ле-нинградской области содержатся пыль, оксид азота (Iv
), оксид серы (Iv), сероводород и ряд других опас-
ных загрязняющих веществ. Из специфических загряз-нителей наблюдался повышенный уровень загрязнения воздуха формальдегидом. Например, в Светогорске средняя концентрация этого вещества составила 3,0 ПДК, а
максимальная концентрация – 3,6 ПДК, хотя это
ниже уровня предыдущих лет. Превысили санитарную норму в Светогорске фенол (карболовая кислота) (в 1,9 раза), ок
сида азота (Iv) (в 1,3 раза), сероводорода (в
1,2 раза). Превышение санитарной нормы максималь-ных к
онцентраций по оксиду азота (Iv) наблюдалось
также в городе Кириши (в 3,6 раза), сероводорода – в Сланцах (в 6,2 раза). За последние пять лет возрос уро-вень загрязнения атмосферного воздуха оксидом азота (Iv
) (Выборг, Кингисепп и Луга), оксидом углерода
(II) (угарным газом) (Кириши, Светогорск), снизилось загрязнение в
оздушного бассейна Выборга – оксидом
серы (Iv). Cредние концентрации остальных наблю-даемых примесей остались без изменений. Уровень загрязненности атмосферы в Ленинградской области, несмотря на сравнительно благоприятные для рассе-ивания примесей климатические условия, вызывает определенную тревогу, особенно в городах Кириши, Сланцы и Бокситогорске, на долю которых приходит-ся более половины валовых загрязнений воздушного бассейна. В результате антропогенной деятельности в пределахЛенинградской области на её территории ежегодно
осаждается около 16 тыс. тонн закисляющих веществ, кроме того, более 840 тыс. тонн поступает на террито-рию области вследствие их трансграничного перено-са в пределах Европейского континента. Наибольшее влияние на Ленинградскую область среди стран ближ-не
го зарубежья оказывает эстония, а дальнего зару-
бе
жья – Польша. Между Финляндией и Ленинградской
областью отмечается баланс потоков соединений серы, по
вышенное влияние – относительно оксидов азота и
пониженное – относительно восстановленного азота.
Одновременно часть ежегодно образующихся в Ленинг-радской области эмиссий закисляющих веществ уходит за
пределы её территории: около 70 % экспортируемых
веществ осаждается в ближайших регионах Рос-
сийской Федерации, около 10 процентов экспортиру-ется в Финляндию, остальная часть рассеивается в пределах Восточной Европы.
Прогноз экономического развития Российской Фе-
дерации и Северо-Западного региона России указывает на рост промышленного производства, что повлечёт за собой относительное увеличение объёмов и изменение структуры выбросов. Такой прогноз вызывает необхо-димость разработки приоритетных воздухоохранных мероприятий. По данным проведённых исследований в различных городах Ленинградской области основными контаминантами воздуха производственных и жилых по
мещений являлись микромицеты рода penicillium
(71 %), Aspergillus (39 %) и Cladosporium (17 %). Ми-
но
рный вклад приходится на грибы рода Alternaria (9 %)
и Rhizopus (7 %). Типичный разброс концентраций спор
микромицетов в исследуемых образцах воздуха соста-вил от 100 до 100000 спор / куб. м.
Как и ожидалось (Соболев А.В., Васильева Н.В.),
максимальное содержание спор грибов в помещениях Ленинградской области выявлено на первых этажах зданий. Кроме того, в подвальных помещениях и по-мещениях первых этажей Выборга обнаружен радио-активный радон (до 2 ПДК).Раздел 4
ГРИбы И эКОЛОГИЯ ЧЕЛОВЕКА
ИССЛЕДОВАНИЕ ЗАГРЯЗНЕНИЯ АТМОСФЕРНОГО
ВОЗДУХА ЛЕНИНГР АДСКОЙ ОБЛАСТИ
Дмитриченко О.П., Зачиняев Я.В.
Санкт-Петербургский государственный университет сервиса и экономики,
Санкт-Петербург
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 4 98
Основная функция почвенных микромицетов – де-
струкция органических веществ как природного, так
и антропогенного происхождения. В органогенном горизонте почв высоких широт грибной компонент доминирует над бактериальным, что особенно ярко проявляется в тундре и под еловыми лесами. Длина грибного мицелия достигает здесь сотен метров в 1 г почвы, сырая биомасса 1.0–1.5 т/га.
Выявлена высокая чувствительность почвенных
микроскопических грибов к загрязнению среды оби-тания соединениями фтора. Изменения численности, структуры и состава грибных сообществ в загрязнен-ной почве происходят в результате высокого содержа-ния в ней фтора (от 400 до =/>1200 мг/кг) и значитель-ного снижения ее кислотности (около 2 ед. рН), что связано с нейтрализующим действием содержащихся в выбросах оснований.
В к
омплексе микроорганизмов – аэробионтов
грибная биота так же, как и в комплексе педобионтов, чувствительнее к воздействию воздушных выбросов алюминиевого предприятия, чем его прокариотная со-ставляющая.
Было отмечено, что в условиях воздействия воз-
душных выбросов алюминиевого завода в окружаю-щей среде возрастает доля условно патогенных для человека грибов, вызывающих заболевания органов дыхания, микозы и аллергические реакции.
Изучали способность роста условно патогенных
грибов (17 видов), выделенных из почв, загрязненных фторсодержащими соединениями, при различных зна-чениях темпера
туры: + 5 °С, +27 °С, +37 °С. В качест-
ве сравнительной величины использовали радиальную скорость роста колоний грибов (мм/сут).
Большинство исследуемых грибов отнесены к мезо-
фильным видам,
наиболее хорошо растущим при 27 °С,
со средней радиальной скоростью роста колоний 11,3 ± 2.4 мм/сут (lim 3.3–30.0 мм/сут): Alternaria alternata (f
r.:fr.)keissl., fusarium moniliforme J.Sheld., f. solani
(Mart.)Sacc., f. oxysporum Schltdl., Aspergillus versicolor
(vuill.)Tirab., Aureobasidium pullulans (de Bary)G.
Arnaud, Cladosporium herbarum (pers.)Link, penicillium
aurantiogriseum Dierckx, p.glabrum (Wehmer)Westling,
p.simplicissimum (Oudem.)Thom, p. janthinellum Biourge,
Trichoderma viride pers., T.koningii Oudem., Gliocladium
catenulatum J.C.Gilman et E.v .Abbott.
Виды Alternaria alternata, Aspergillus versicolor,
A. fumigatus,
A. niger, fusarium moniliforme, f. solani,
Gliocladium catenulatum, paecilomyces variotii, peni-
cillium janthinellum обладали способностью расти при 37
°С. Однако из них только 3 вида: Aspergillus
fumigatus, A. niger и paecilomyces variotii лучше раз-
вивались при этой температуре. Средняя радиальная скоро
сть их роста при 37 °С была в 1,5 раза выше,
чем при 27 °С. это дает право уверенно относить их
к группе грибов, патогенных для человека, способ-ных расти при температуре его организма. 11 видов грибов, отнесенных к мезофильной группе, за исклю-чением Aspergillus versicolor, Aureobasidium pullulans, penicillium
janthinellum, Gliocladium catenulatum, обла-
дали
способностью расти при 5 °С, однако скорость их
роста была низкой, в среднем она составляла 0,65 мм/сут, что в 17,5 раз меньше радиальной скорости роста ко
лоний этих грибов при 27 °С. Лучше всего при низ-
кой
температуре развивался fusarium oxysporum, сред-
няя радиальная скорость роста его колоний составила 1,4 мм/сут при 5 °С.
Таким образом, среди условно патогенных мик-
ромицетов, выделенных из фторзагрязненных почв, селек
тированы две группы видов: одна – с характер-
ными чер
тами эвритермных, другая – стенотермных
организмов. Многие из них (11 из 17 видов) способны к росту, хотя и замедленному, при +5
°С, что является
необходимым качеством для поддержания их жизне-способности и активности в условиях Севера.УСЛОВНО ПАТОГЕННЫЕ МИКРОМИЦЕТЫ В ЗАГРЯЗНЕННЫХ
ФТОРСОДЕРЖАЩИМИ СОЕДИНЕНИЯМИ ПОЧВАХ И ИХ
СПОСОБНОСТЬ Р АЗВИВАТЬСЯ ПРИ НИЗКИХ ТЕМПЕР АТУР АХ
Евдокимова Г.А.1, Корнейкова М.В.1, Лебедева Е.В.2
1 Институт проблем промышленной экологии Севера кНЦ РАН,
Апатиты
2 Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ В ПОЧВАХ, ПРИЗЕМНЫХ СЛОЯХ
ВОЗДУХА И СНЕГОВОМ ПОКРОВЕ ГОРОДА МОСКВЫ
Иванова А.Е., Марфенина О.Е., Суханова И.С., Макарова Н.В.
Факуль
тет почвоведения МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
Грибные сообщества в городе отличаются от ми-
кобиоты зональных экосистем. Нами показано, что это может прослеживаться в различных компонентах горо
дских экосистем – почвах, воздухе, снеге. Кроме
того, так как грибы осуществляют процессы деструк-ции различных органических субстратов, а в городах
Грибы и экология человека 99
происходит аккумуляция разнообразных органических
загрязнителей (бытового мусора, пищевых отходов, шерсти, и т.д), это может определять функциональное разнообразие грибных сообществ в городских почвах, и, следовательно, оказывать влияние на экологическую ситуацию в городе.
Целью исследования был анализ присутствия ряда
эколого-трофических групп грибов в городских поч-вах разного возраста и сопряженных с ними средах (приземном воздухе, снеге). Исследовали городские почвы (урбаноземы) возрастом 3, 30, 300 (лет район Тушино, г.Москва). Выделение ряда функциональных групп грибов из почв проводили методами приманок и посевов на питательные среды, из приземного возду-ха
и снега – на питательных средах. Анализ грибного
аэропланктона осуществляли на высоте 0,1 и 1,5 м от поверхности почвы с помощью аспиратора ПУ-1Б.
Установлено, что в городских почвах формируют-
ся грибные сообщества, отличные от ненарушенных почв городского лесопарка по присутствию, разнооб-разию, составу и обилию грибов ряда эколого-трофи-ческих групп. В городе, в почвах часто доминируют эвритопные
виды грибов – aspergillus niger, Fusarium
oxysporum, F .solani, cladosporium cladosporioides. Для
почв жилых районов, в целом, показано меньшее раз-нообразие групп сахаролитических, амилолитичес-ких и разлагающих белок грибов, а также наличие в структуре этих групп нескольких доминирующих по обилию видов, не свойственных ненарушенным зо-нальным дерново-подзолистым почвам. В то же вре-мя в исследованных почвах парка и лесопарка состав и структура этих функциональных групп грибов были близки к зональным почвам. Особо стоит отметить де-градацию (по составу и численности) в городских поч-вах комплекса целлюлозолитических грибов, что осо-бенно резко проявляется в парковой зоне, где ежегодно производится уборка опавшей листвы. Для городских почв также характерен высокий уровень присутствия и разнообразия разлагающих кератинсодержащие суб-страты (волосы, шерсть) грибов, например, artr
oderma
uncinatum, chrysosporium tropicum, не выявленных
в почве лесопарка. Для разных эколого-трофических групп (кроме целлюлозолитических) отмечено значи-тельное увеличение доли потенциально патогенных грибов в почвах жилых кварталов.
Анализ грибного аэропланктона выявил большую
численность и почти вдвое большее разнообразие ви-дов грибов в черте города, чем в лесопарке. При этом в городе по составу видов отмечено более высокое сходство грибных комплексов приземных слоев воз-духа с почвенными сообществами. В разные сезоны в составе аэропланктона доминировали представите-ли родов Сladosporium, Penicillium , постоянно при-
сутствовали фитопатогенные грибы родов Fusarium,
botrytis, n
ectria , а также темноокрашенные аллерген-
ные и токсичные грибы alternaria, Stachybotrys , ста-
бильно выделялся стерильный мицелий. В городском воздухе выявлено большее разнообразие видов родов asper
gillus, Penicillium . Численность грибных КОЕ в
приземных слоях воздуха была в 2–3 раза ниже, чем на высоте 1,5 м, что особенно проявилось в зимний пе-риод. В снеговом покрове доминировали виды родов alternaria,
Phoma, в то же время часто представлены и
микроскопические грибы, встречавшиеся в воздухе.
Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ №
06–04–49636a.
ВОПРОСЫ БЕЗОПАСНОСТИ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ
ЛЮДЕЙ
В ПОМЕЩЕНИЯХ, ПОР АЖЕННЫХ
МИКРО
СКОПИЧЕСКИМИ ГРИБАМИ
Кондратюк Т.А.1
, Наконечная Л.Т.2, Артышкова Л.В.2,
Харкевич Е.С.2, Жданова Н.Н.2
1 киевский национальный университет имени Тараса Шевченко,
киев
2 Институт микробиологии и вирусологии
им. Д.к
. заболотного НАН Украины,
киев
Известно, что деструктивное действие микроми-
цетов на различные строительные материалы и изде-лия, обусловлено, во-первых, агрессивным влиянием на них метаболитов грибов, а во-вторых, грибы раз-рушают эти материалы механически: проникая в поры и микротрещины, способствуют их расширению и возникновению в них опасных напряжений. Извест-но также, что решающее значение для возникновения грибных поражений имеют показатели температурно-влажностного режима внутри помещений, которые, в свою
очередь, зависят от многих составляющих – це-
лостности внешних конструкций здания, исправности водостоков, налаженности работы вентиляционных систем, а также от архитектурно-строительных и конс-трукционных особенностей здания; тепло- и влагоизо-ляционных характеристик строительных материалов; расположение здания среди городской застройки и др. Несмотря на многочисленность публикаций, в которых освещаются проблемы грибных поражений помеще-ний, вопросы, связанные с безопасностью пребывания людей в таких помещениях, остаются актуальными.
Нами проведено 34 обследования зданий различно-
го назначения (помещений библиотек, музеев, офисов, жилых домов, высших учебных заведений), на внут-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 4 100
ренних поверхностях которых (стенах, откосах окон,
потолках) были констатированы факты значительного нарушения их целостности и развития на них микроми-цетов
– вздутия, отслоения, опадания краски, побелки,
штукатурки; пятна и налеты разного цвета, размера и консистенции. Во всех случаях причинами указанных повреждений были разнообразные эксплуатационные и ст
роительные нарушения – неисправность гидроизо-
ляции зданий и вентиляции; протекание крыш; вода в подвалах 1-х этажей; нарушение работы кондиционе-ров, систем отопления; аварии систем тепло- и водо-снабжения; запыленность помещений и пр. Часто на-блюдали наличие пятен затеков на поверхностях стен и потолков. В зданиях, которые были построены 40–50 лет назад и более, замена окон на металлопластиковые конструкции без усовершенствования систем венти-ляции также являлась одной из причин нарушения влажностного режима и развития микроскопических грибов.
В результате проведенных исследований нами вы-
делены в чистую культуру микромицеты, отнесенные после идентификации к 130 видам 46 родов (р.) мик-ро
скопических грибов – отделов zygomycota (12 ви-
дов 4 р.) и Ascomycota (25 видов 16 р.), а также группы Mi
tosporic fungi (классов Hyphomycetes – 86 видов 25 р.,
Coelomycetes – 3 вида 1 р., Agonomycetes – 4 вида). В со-
ставе микобиоты наибольшее количество грибов, пред-ставляющих существенную угрозу как биодеструкторы, обнаружено среди представителей кл. Hyphomycetes. По частоте встречаемости также преобладали предста-вители этого класса, в частности, Acremonium strictum W.
Gams, Alternaria alternata ( fr.) keissl., Aspergillus niger
var niger Tieg., A. versicolor ( vuill.) Tirab., A. ruber Thom
et Church, A.ustus (Bainier) Thom et Church, Cladosporium sh
aerospermum penz., penicillium aurantiogriseum var.
viridicatum (Westling) frisvad et filt., Ulocladium botrytis
preuss. Доминировали A. versicolor (59 %), A. alternata,
C.shaerospermum (53 %), виды р. penicillium.. На бумаж-
ных обоях часто констатировали интенсивное развитие Stachybotrys chartarum (Ehrenb.) S. Hughes в виде чер-ных пятен и наслоений.
У людей, находящихся в помещениях, пораженных
микроскопическими грибами, наблюдались частые проявления аллергических заболеваний, бронхиаль-ной астмы, дерматитов, поражений слизистой оболоч-ки г
лаз, носа и др. Около 50 % выделенных нами видов
грибов, (Mucor plumbeus, Rhizopus oryzae, Aspergillus niger, A. fumigatus, A. flavus, A. versicolor, Geotrichum candidum, Stachybotrys chartarum и многие др.) являют-ся признанными агентами широкого круга различных патологических состояний человека, что указывает на высокую степень опасности длительного пребывания людей в помещениях, пораженных микроскопически-ми грибами.
БИОИНДИКАЦИОННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ
МИКОБИОТЫ ПОМЕЩЕНИЙ
Лихачев А.Н.
Московский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
Составной частью биоаэрозоля воздуха является
комплекс пропагул видов грибов из разных таксоно-мических групп, сформировавшихся в эколого-тро-фических нишах разнообразных биотопов, а также под воздействием различных поллюантов. В итоге, воздействие разнообразных факторов не может не отражаться на биологических свойствах выделяемых культур грибов из аэрозоля воздуха и их трофической специализации при возможном освоении ими субстра-тов в урбанизированных системах. При анализе со-став
а микобиоты воздуха, выявляя санитарно – гиги-
еническое состояние помещений или биодеструкцию ма
териалов, используют, как правило, среды – Чапека,
Гетчинсона, Сабуро. Многочисленные исследования эколого-трофических особенностей представителей микобиоты из разных экосистем позволяют на их ос-нове разработать подходы и методы выявления и био-индикационного потенциала видов микромицетов, способных развиваться в специфических условиях ур-банизированных систем.
Наличие вероятных слабых конвенционных по-
токов воздуха и мест концентрации пропагул грибов по увеличению КОЕ на «транссекте» в помещениях проводили, располагая чашки с разным составом сред ориентированных по сторонам света. Плоскость пита-тельной среды располагали вертикально к вероятному горизонтальному потоку воздуха, а при учете восхо-дящего, чашки ориентировали средой к поверхности пола. Подобные анализы проведены и в зоне приточно отточных систем вентиляции. Используя известные методы учета при проведении экспериментов помимо указанных сред, на основе Чапека приготовлены сре-ды, исходя из композитного состава материалов (обо-ев, картона, гипсокартона), а также сульфат натрия, входящий в состав солей, обеспечивающих водносо-левую нагрузку в стенах. Добавка в среды крахмала, фильтровальной бумаги, кристаллической целлюлозы, NaКMЦ, Д эФ
э-целлюлозы. позволяет выявить разни-
цу в развитии микромицетов на естественных и тех-ногенных материалах, а также культуры, обладающих целлюлозолитической, амилолитической активнос-тью. Со
держание в среде глюкозы, сорбита до 60 %,
NaCl от 0,5 М до 4 М, Na2SO4 от 0, 5 М до 4М, рН среды от 2 до 10 дает возможность обнаружить среди них группы и наличие внутривидового разнообразия (клонов) по степени галофильности, алкотолерант-
Грибы и экология человека 101
ности, осмофильности. Инкубацию культур и матери-
алов, инокулированных «сухим» (отпечаток с газона) и «влажным» (водная суспензия), способом внесения конидий,
проводили при температуре от 0 до 35 °С, от-
носительной
влажности воздуха 40 –60 % и ≥90 %, со-
здаваемой в эксикаторах с помощью концентрирован-ных растворов солей. Степень поражения материалов оценивали по ГОСТ 9.048-89, а также возможность ингибирования прорастания конидий в зависимости от титра инокулюма.
Места и концентрация жизнеспособных пропагул
определяется их переносом даже слабыми конвенци-онными потоками, временем их нахождения в аэро-золе и электростатикой материалов, что отражается на преобладании КОЕ представителей р. Aspergillus, pen
icillum, а также на колонизации материалов. Ана-
ли
з развития колоний микромицетов на средах – Ча-
пека, Гетчинсона, Сабуро в сравнении с ростом на модифицированных средах показал, что только часть представителей микобиоты способна к образованию ко
лоний на селективных средах – это в основном
представители р. Aspergillus, penicillum, Cladospo-
rium, Chaetomoum, Trichoderma. Среди них преобла-дают культуры, имеющие такие же оптимумы боль-шинства исследуемых факторов для своего развития какие свойственны и большинству микромицетов. При инокуляции сред конидиальными суспензиями штаммов, с разными параметрами влияющих факто-ров, выявлены клоны способных расти в широком их диапазоне, обладающих свойствами галофильных, галоацедофильных и ксерофильных видов. Большая часть штаммов обладает с целлюлазной и амилаз-ной активностью. Однако, интенсивность развития и спороношения культур на среде с фильтровальной бумагой, крахмалом значительно превосходит по сравнению с их ростом при внесении кристалличес-кой целлюлозы, NaКMЦ. Особенно резкие измене-ни
я развития отмечено на Д эАэ -целлюлозе. Разви-
тие заносных видов факультативных фитопатогенов Bo
trytis, Alternaria, fusarium происходит на среде с
фильтровальной бумагой, крахмале при оптимальных значениях рН 4–6, температуры 20–26
°С и аw – ≥0,9, а
галофильность очень низка и ограничивается концен-трацией NaCl 0,5 –1 М. Фитопатогенные виды коодап-тированы в большей степени к растениям-хозяевам, что ограничивает их адаптацию к техногенным мате-риалам несодержащих целлюлозу. Отдельные клоны р.
Aspergillus, penicillum, Cladosporium, Chaetomoum,
Trichoderma являются галотолерантными, развитие которых приостанавливается только при концент-рации NaCl ≥ 2М. Значительно меньшая доля куль-тур обладает сульфатредуцирующей способностью. Клоны, обладающие ксерофильностью, выявлены в ос
новном у представителей р. Aspergillus, penicillum,
развитие которых, хотя и замедленное, возможно при a
w – 0,75. Подавляющее число исследуемых видов
относится к гидрофилам и мезофилам, предпочитая гигроскопичные, влагоемкие субстраты с активнос-тью воды в диапозоне a
w 0,85–0,99. Рост на субстрате
с модифицированной целлюлозой, также как и на дру-гих техногенных субстратах, приводит к значитель-ному изменению не только динамики их развития, но и культурально-морфологичнских признаков. Подоб-ные отклонения от нормы отмечены другими иссле-дователями при анализе микобиоты помещений, на пораженных различных материалах или в биотопах с повышенным содержанием тех или иных химичес-ких веществ (Ребрикова, Дмитриева, 2002; Георгие-ва, 2006;Ласхишвили, 2006;Смоляницкая, 2007). Для них характерно не только наличие мощных фермент-ных систем, но и высокая экологическая валентность, а также способность сохранять жизнеспособность в экстремальных условиях существования и роста на отдельных компонентах комбинированных техноген-ных субстратов (Murtoniemi et al., 2003; Лихачев и
др, . 2005). При этом, ведущую роль играет наличие
и доступность свободной воды, что выявлено при использовании сред с высоким осмотическим давле-нием, создаваемого добавкой высокой концентрации гл
юкозы, сорбита и NaCl. это подтверждают и опы-
ты во влажных камерах при «сухом» и «влажном», в виде водной суспензии, нанесения инокулюма на ма-териалы. Наличие водной пленки способствует акти-визации прорастания пропагул. Однако при высоких титрах инокулюма (10
10, 1020) и агрегации конидий
вносимого инокулюма, возможно ингибирование их прорастания, что отражается на степени колониза-ции материлов. При «сухом» способе инокуляции субстратов процесс прорастания конидий растягива-ется во времени и определяется гигроскопичностью и влагоемкостью материала. Изоляты культур, выде-ленных с пораженных материалов, на модифициро-ванных средах с разными добавками, определяющих свойство сред, при их инокуляции суспензией дают, как правило, ровный газон, в отличие от культур, выделенных из аэрозоля воздуха, . формирующих от
дельные колонии. это указывает на вероятность
их «предадаптации» на том или ином естественном субстрате, предшествующего воздействия антропо-генных факторов и последующий отбор видов и их клонов, способствующих формированию микобиоты в условиях урбанизированных систем. Применение модифицированных сред позволяет прогнозировать появление и доминирование видов, штаммов, отбор их клонов с более высокой экологической пластич-ностью, приспособленных к существованию урба-низированной среде. В зависимости от освоения ими субстратов, экстремального воздействия различных факторов их, вероятно, можно подразделить на груп-пы моно или политрофов, способных развиваться на техногенных субстратах, составной частью которых является не только целлюлоза, но и другие компо-зиты. Проведенные исследования подтверждают об-щебиологическую закономерность о том, что любой организм в момент воздействия на него нового фак-тора внешней среды или при освоении новой экони-ши либо резистентен, либо адаптируется, приобретая при этом свойства и изменение норм реакции, что до-стигается за счет вариабельности онтогенетических и физиологических свойств.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 4 102
В последние годы особое внимание уделяется за-
болеваниям человека, вызываемыми оппортунисти-
ческими грибами. По современным представлениям одними из наиболее опасных для человека являются мицелиальные грибы рода asper
gillus. Большинство
видов этих микроскопических грибов являются типич-ными почвенными обитателями. Предполагают, что грибы этого рода могут попадать из внешней среды к человеку и быть возбудителями вторичных микозов. С другой стороны сейчас нет данных о возможности со-хранения и развития в окружающей среде, в том числе и в почвах, культур клинических изолятов оппорту-нистически грибов из организма человека.
Целью нашей работы было выяснение особеннос-
тей развития культур сапротрофного и клинического изолята вида a. sydowii
в различных типах почв.
Вид a. sydowii известен как оппортунистический
мицелиальный гриб, достаточно широко представлен-ный в природной среде и неоднократно выделявшийся из организма человека (со слизистых оболочек ЛОР-органов, как возбудитель глубоких аспергиллезов). Для исследования нами были взяты 2 клинических изолята (один из коллекции NRRL, другой выделен из БАЛ) и 2 сапротрофных изолята (один из выделен из дерново-под
золистой почвы Московской области, а другой – из
арктических льдов). Культуры выращивали на среде Чапека и вносили в образцы почвы при концентрации споровой суспензии спор 1*10
6 спор/мл на 1г почвы.
Для количественного учета динамики внесенных по-пуляций микроскопического гриба в почвах использо-вали определение численности (КОЕ) методом посева и прямой подсчет спор и мицелия методом люминес-центной микроскопии при окраске калькофлюором. Численность гриба учитывали при посеве на 0, 7, 14, 21 сутки эксперимента. Посев проводили из смешан-ного образца (3-х проб) в 5-и кратной повторности. эк
сперименты вели с образцами двух типов почв
(городская почва – урбанозем среднесуглинистый, г. Москва район Тушино; зональная почва – дерново-
подзолистая типичная глубоко оглеенная, лесопарк, Воробьевы горы, г. Москва), отобранных из поверх-ностного горизонта. Стерилизацию почв проводили автоклавированием при 1атм в течение 30 мин. Почву в чашк
ах Петри увлажняли до 60 % от полной влаго-
емкости
На примере штаммов asper gillus sydowii нами впер-
вые показана возможность развития в почвах культур оппортунистических грибов, выделенных как клини-ческие. При этом установлено, что развитие в почвен-ных условиях популяции клинического и сапротроф-ного
изолятов – различается. Для сапротрофного – в
стерильных городских почвах развитие происходило активно за счет нарастания мицелия, а при развитии клиническ
ого – в почвах более интенсивным было
спорообразование.
Важнейшим фактором регуляции развития попу-
ляций этого гриба в почвах является температура и антагонистические свойства почв, что показано в опы-тах со стерильными и нестерильными почвами. Вы-явлено ингибирующее действие нестерильных почв на развитие популяций a.
sydowii, более выраженное
для культуры клинического изолята. Установлено, что из 3-х исследованных температур (19
°С, 25 °С, 30 °С)
оптимальными для развития в почвах культур клини-ческих изолятов являются 25–30
°С, а для сапротроф-
ных
– 25 °С.
Отмечены некоторые отличия в развитии популя-
ций asper gillus sydowii в почвах разного типа. Если в нестерильных дерново-подзолистой почве уровень стабилизации популяций в обоих случаях был на низ-ком уровне, то в городских почвах развитие популяций происходило интенсивнее.ВОЗМОЖНОСТЬ ВЫЖИВАНИЯ И СПОРООБР АЗОВАНИЯ КУ ЛЬТУР
КЛИНИЧЕСКИХ ИЗОЛЯТОВ aSPerGilluS SYdowii
(bAINIER
& sARTORY) THOM & CHURCH В Р АЗЛИЧНЫХ ПОЧВАХ
Наумова Е.М., Марфенина О.Е.
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
ГРИБЫ РОДА al Ternaria В ПРИЗЕМНЫХ СЛОЯХ ВОЗДУХА Г . САМАР А
Овчинникова Т.А., Панкратов Т.А., Петухова Е.А.
Самарский государственный университет,
Самара
Грибы рода alternaria постоянно обнаруживаются в
приземных слоях атмосферного воздуха и часто домини-руют вместе с пенициллами, аспергиллами, мукоральны-ми. В последние годы интерес к экологии данной группы грибов, особенно, в городской среде усиливается вследс-твие высокого аллергенного воздействия спор альтерна-ри
и на органы дыхания человека (Мюллер э. 1995).Целью настоящей работы было выявление коли-
чественного присутствия грибных зачатков альтерна-рии в приземных слоях атмосферного воздуха города Самары и выяснение качественного разнообразия представителей этого рода в теплый летне-осенний период года, а также источников их развития в город-ской среде.
Грибы и экология человека 103
Исследование грибной флоры воздуха па террито-
рии города Самара осуществляли седиментационным
осаждением на агар Чапека. Модельной площадкой, воздух которой тестировался ежегодно служила тер-ритория загородного парка с июня по октябрь 1999 по 2007 года.. Анализировалась также территория двух парковых зон, 2-х автотрасс , 5-ти экологических пос-тов по контролю за состоянием воздуха, равномерно разбросанных на территории города, территория леса на окраине
города, леса в 60 км от города – всего 35
экспозиционных точек.
Доля грибов (по отношению к общей численности
микроорганизмов в посевах) в приземном воздухе го-рода колебалась в течение летне-осенненго периода от 4,4
% до 58,4 % в зависимости от влажности почв и на-
личия органического субстрата. Низкий уровень числа грибных зачатков в приземном воздухе от единичных до 10
% отмечался в сухой период года, обычно с июля
по октябрь, возрастая до максимальных величин в но-ябре. Грибы рода Alternaria являлись постоянным ком-понентом микрофлоры воздуха, чаще их численность сост
авляла более 50 % от общей численности грибов.
За 9-ти летний период исследования микофлоры воз-духа города идентификация 235 колоний Alternaria об-наружила 7 видов ( по Пидопличко Н.М. 1977 г.) .
Доминир
ующими были два вида: A. alternata – ши-
рокораспостраненный вид- сапрофит и A. brassicicola достаточно активный патоген для крестоцветных. Их суммарная доля среди альтернарий составляла око-ло 50
% до 81 %.Доля каждого из остальных видов
(A.chartarum, A. citri, A. concortiale, A. radicina, A. brassicae) не
превышала 31 % или встречались в по-
севах в качестве единичных колоний. В посевах 1999 года анализ 58 колоний альтернарий не выявил при-сутствия наиболее распостраненного сапротрофного или слабопа
тогенного вида – A. alternata. Явно преоб-ладающим видом была A. brassicicola. В последующие годы в разные сезоны доминирующие виды обнаружи-вались приблизительно в равных долях, чаще преобла-дающим видом оставалась альтерная капустолюбная. Столь широкую распостраненность на территории города фитопатогенных грибов A. brassicicola с широ-ким спектром растений- хозяев из семейства крестоц-ветных можно объяснить большим распостранением сорных крестоцветных, что связано с близостью час-тного сектора и «дефектами» злаковых газонов вдоль автострад, по краю которых, иногда густой каймой шириной до1 метра разрастаются представители се-мейства крестоцветных, в частности, Cardaria draba (L.). Сорная растительность представителей семейс-тва крестоцветных, устойчива к засухе, вытаптыванию и загрязнению почв и весьма характерна для лесостеп-ной зоны. Максимальная биомасса сорных крестоц-ветных с коротким !,5- месячным) жизненным циклом приходится на май-июнь. В течение лета отмечается еще 2–3 волны цветения и отмирания части биомассы сорняков, которые и определяют присутствие патоген-ной Alternaria в воздухе города в течение всего теплого периода года. Число грибных зачатков представителей рода Alternaria в куб. м воздуха города колеблется в те-чение теплого периода от 80 до 4670 . Попытка дать ко-личественную оценку присутствия Alternaria в воздухе аспирометрическим методом отбора проб с последую-щим смывом с ацетилцеллюлозных фильтров убедила, что споры плохо смываются и метод отбора проб на фильтры не годится для этой цели.
Таким образом, в осенний период влажных летних
сезонов в нашей лесостепной зоне в воздушной среде города пребывает колоссальное количество спор гри-бов рода alternaria,
что в 3–4 раза превышает предель-
ные значения для открытых территорий для больных атопией (Caretta G. 1992 г.)
Р АСПРОСТР АНЕНИЕ ОППОРТУНИСТИЧЕСКИХ
ГРИБОВ В ПАРКОВОЙ ЗОНЕ Г. КИРОВА
Огородников А.Н.1, Широких А.А. 2
1 ооо ветеринарная клиника «верный друг»,
киров
2 ГУ зональный НИИСХ Северо-востока им. Н.в. Рудницкого,
киров
В наземных экосистемах грибы-микромицеты на-
ходятся в тесной взаимосвязи и взаимодействии с другими организмами. Загрязнение городской среды и антропогенная трансформация сообществ организмов ведёт не только к потере природного видового разно-образия, но и к изменению комплекса микромицетов, входящих в состав сообществ. Одним из негативных последствий этих изменений является широкое рас-пространение в городской среде потенциально пато-генных (оппортунистических) для человека и живот-ных микроскопических грибов.Основным резервуаром микромицетов являет-
ся почва. Городские почвы, по сравнению с почвами сельской местности, характеризуются более тёплым температурным режимом, нейтральной или щелочной реакцией, повышенным содержанием органическо-го вещества. Поэтому в городских почвах создаются благоприятные условия для развития микромицетов. В почвах и сопряжённых средах было выделено более 50 видов грибов, относимых к оппортунистическим (Марфенина и др., 2002). По данным автора, среди изо-лированных микромицетов половина видов известны,
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 4 104
как потенциально патогенные и часто встречающиеся
во внешней среде. Отмечается, что в городской среде содержание спор грибов в приземном слое воздуха мо-жет
быть выше, чем в почве и составляет 60–80 % от
их общего числа в различные сезоны года (Марфени-на, 2005).
Цель нашей
работы – исследовать роль потенци-
ально патогенных грибов в патогенезе дерматомикозов собак, а так же изучить распространение оппортунис-тических грибов в почвах парковой зоны г. Кирова, где часто производится выгул собак.
Исследования проведены в ветеринарной клини-
ке «Верный друг» и лаборатории генетики НИИСХ Северо-Востока. За период с 2005 по 2007 гг. было обследов
ано 120 собак различного возраста и пола –
представителей 19- ти пород. Диагноз устанавливали на основании анамнестических данных, результатов клинического обследования и лабораторных исследо-ваний. Состав микофлоры определяли методом посева клинического материала на питательный агар Сабуро. Образцы подстилки и почвы (0–2 см) на микологичес-кий анализ отбирали в парковой зоне «Александровс-кий сад»: 1-на площадке выгула собак; 2-возле детской площадки; 3-в центральной части парка. Почвенные образцы высевали на агар Чапека со стрептомицином (100 мг/мл). Идентификацию микромицетов проводи-ли по морфологическим и культуральным признакам.
В результате исследований установлено, что из кли-
ническ
ого материала (шерсть, чешуйки кожи) у 90 %
собак с воспалением кожи и поражением волосяного покрова выделяются потенциально патогенные микро-мицеты. При микрокопировании образцов наблюдали развитие мицелия и образование конидий непосредс-твенно на волосе вблизи волосяной сумки и чешуйках кожи. Выявленные при посеве микромицеты были иден-тифицированы как Alternaria alternata, Cladosporium herbarum, Aspergillus flavus, A. fumigates, A. niger Ac
remonium kiliense, fusarium oxysporum, phialophora
pedrosoi, а также дрожжи – Candida, Cryptococcus,
Trichosporon. Наиболее часто из клинического матери-ал
а высевались Alternaria alternata, phialophora pedrosoi,
и дрожжи родов Candida, Cryptococcus. Практически у 95 %
обследованных животных при поражениях кожно-
го и волосяного покровов, а так же при раневых инфек-циях обнаруживались оппортунистические микромице-ты
A. alternata, A. pedrosoi. эти микромицеты (особенно
A. alternata) широко распространены в наземных биоге-оценозах и встречаются на многих видах растений, поч-ве, подстилках, гниющей древесине. A. alternata извест-на как возбудитель заболевания растений, а у человека и животных, особенно при снижении иммунного статуса, она способна вызывать синусит, кератомикоз, подкож-ный феогифомикоз и инвазивные инфекции (Саттон и др., 2001; Аравийский и др., 2004). Кроме того, при гиперсенсибилизации к аллергенам этого микромицета, может возникать атопический дерматит, проявляющий-ся как иммунологически неоднородная группа синдро-мов с одинаковыми клиническими проявлениями (Сер-геева, 2002).С целью выявления источника оппортунистичес-
ких микромицетов в городской среде нами были об-следованы почвы «Александровского сада», как на-иболее излюбленного места выгула собак в г. Кирове. В целом комплекс микромицетов подстилок и почв парка «Александровский сад» похож на комплекс мик-ромицетов почв, характерных для широколиственных лесов. Но в условиях городской среды (поступление органики в виде мусора, фекалий животных, пищевых отходов) он существенно обогащён видами оппорту-нистических грибов. Наибольшая численность и ви-довое разнообразие микромицетов во всех образцах была представлена в подстилке, представляющей со-бой полуразложившийся листовой опад (таблица). В подстилке с площадки для выгула собак обнаружено самое большое видовое разнообразие. Здесь выявле-ны в
озбудитель хромомикоза – Phialophora pedrosoi
и дрожжеподобный гриб Trichosporon sp., которые не
встречались в других образцах подстилок.
Из всего разнообразия микромицетов, обнаружен-
ных в подстилке образца №1 только представителей рода Penicillium (исключая P . marneffei –
эндемик
юго-восточной Азии) (Саттон и др., 2001) не относят к группе патогенных и условно патогенных грибов. В образцах подстилок из других мест отбора образцов видовое разнообразие микромицетов было несколько меньше, но здесь также обнаруживались оппортунис-тические грибы.
Непосредственно в почве численность ниже, а
количество обнаруживаемых видов меньше, чем в подстилках. Но здесь также обнаруживаются потен-циально патогенные микромицеты. Особенно следу-ет отметить постоянное присутствие a.
alternata. По
численности микромицетов и количеству видов почва площадки для выгула собак существенно отличается от других мест от бора образцов. В почвенном образце № 1 обнаружена численность 64Ч10
4 КОЕ/г и выявле-
но 9 видов микромицетов, что в 1,5–2 раза больше чем в других почвенных образцах.
Таким образом, под влиянием антропогенной на-
грузки почвы парка «Александровский сад» могут являться резервуаром потенциально патогенных гри-бов. Постоянный выгул собак, особенно с поврежде-ниями кожных покровов, на территории парка может привести к инфицированию животных и росту забо-леваемости грибковыми инфекциями. На рост оппор-тунистических микозов среди домашних животных прямое влияние оказывает массированное и не всегда оправданное применение антибиотиков. Кроме того, большой популярностью у населения пользуются де-коративные породы животных с дисфункцией иммун-ной системы, которая не в состоянии справляться с бо-лезнетворными агентами. Существенный вклад в рост заболеваемости животных вносит и снижение имму-нитета, обусловленное загрязнением городской среды. Находясь во время выгула в приземном слое воздуха, организм животного получает, по сравнению с челове-ком, значительно больше поллютантов, что не может не сказаться на его иммунном статусе.
Грибы и экология человека 105
Изучение круговорота и трансформации микроэле-
ментов в лесных экосистемах представляет интерес,
как для фундаментальных исследований, так и при решении прикладных задач, информируя о количес-твенных характеристиках этого круговорота, а также о закономерностях этого процесса. В условиях техно-генной нагрузки на территорию данный подход может быть использован в мониторинге окружающей среды.
Основной целью исследований является установ-
ление факторов, влияющих на накопление железа, кобальта, марганца, никеля, свинца, цинка, хрома и мышьяка плодовыми телами ксилотрофных базидио-мицетов. Изучена связь между накоплением элементов в плодовых телах дереворазрушающих грибов и их содержанием в субстрате. Также определена корреля-ционная зависимость между содержанием различных элементов в плодовых телах.
Было установлено, что ксилотрофные макромицеты
проявляют видовую специфичность в аккумуляции пло-довыми телами изучаемых элементов. Выявлены виды-концентраторы изучаемых элементов. Так, содержание железа в плодовых телах Trichaptum abietinum составля-
ет 1882,10 мг/кг при среднем значении 457,93 мг/кг.
В результате исследований было установлено, что
характер субстрата, а именно его видовая принадлеж-ность, оказывает влияние на накопление изучаемых эле-ментов в плодовых телах ксилотрофных макромицетов. Важным вопросом исследований является выявление корреляционной зависимости между содержанием же-леза, кобальта, марганца, никеля, свинца, цинка, хрома и мышьяка в плодовых телах ксилотрофных макроми-цетов и субстрате. Для большинства изученных видов ксилотрофных базидиомицетов корреляционной зави-симости между содержанием железа, кобальта, марган-ца, никеля, свинца, цинка, хрома и мышьяка в плодовых телах ксилотрофных макромицетов и субстрате не об-на
ружено. эта зависимость была установлена для видов
грибов-ксилотрофов aur icularia mesenterica, Fomitopsis
pinicola, Stereum hirsutum Trichaptum abietinum .
Для большинства изучаемых видов ксилотрофных
макромицетов установлены как положительные, так и отрицательные корреляционные зависимости между содержанием
различных элементов. это может быть
связано с синергизмом и антагонизмом этих элементов в базидиомах дереворазрушающих грибов.
Для оценки загрязнения окружающей среды тяже-
лыми металлами могут быть использованы: auricu
–
laria mesenterica, Fomitopsis pinicola, Stereum hirsutum Trichaptum abietinum. Плодовые тела этих видов гри-бов-ксилотрофов устойчивы к гниению и поеданию насекомыми, что делает их удобным объектом монито-ринга окружающей среды.НАКОПЛЕНИЕ НЕКОТОРЫХ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА ПЛОДОВЫМИ
ТЕЛАМИ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
Скобанев А.В.
ФГоУ вПо «Пензенская ГСХА», РЦГЭкиМ по Пензенской области,
Пенза
МИКОБИОТА ПИЩЕВЫХ И ЛЕКАРСТВЕННЫХ СУБСТР АТОВ ИЗ Р АСТЕНИЙ
Скоробогатова Р.А., Шинкель Т.В., Малащицкая Н.В., Жебрак И.С.
Гро
дненский государственный университет имени Янки к упалы,
Беларусь
Микроскопические грибы часто являются уби-
квистными микроорганизмами, развивающимися на поверхности вегетирующих растений. Традиционные методы сбора и хранения растений для использо-вания в пищевых целях и травяной медицине часто приводят к появлению большого количества грибов и образованию микотоксинов в исходном растительном материале. В связи с этим чрезвычайно актуально контролировать рост микромицетов в таких субстра-тах.
В настоящей работе проводилось определение ко-
личественного и качественного состава микромицетов специй, лекарственных трав и готовых пищевых рас-тительных смесей, приобретенных через розничную торговую сеть и аптеки г. Гродно (Беларусь) и г. Белос-тока (Польша).
Видовое определение основных представителей
микромицетов показало зависимость от географичес-Таблица
Численность микромицетов на растительных
субстратах
№
п/пНазвания субстратов и латинское
название растенийКоличество коло-
ний грибов, КОЕ/г
1. Барбарис b erberis vulgaris 58±16
2. У
кроп anethum graveolens 5000±240
3. К
ориандр c oriandrum sativum 1060±106
4. Пет
рушка Petroselinum crispum 280±52
5. Перец черный Piper nigrum 340±120
6. Перец красный c apsicum annum 7300±230
7. Календула calendula offcinalis 830±145
8. Душица
o riganum vulgare 570±33
9. Липа Tilia cordata 70±23
10. Ромашка c hamomilla recutita 5700±360
11. Бузина черная Sambucus nigra 30±3
12. Вероника Veronica officinalis 2130±290
13. Мальва m alva arbor eum 400±57
14. Мак Papaver somniferum 1670±57
15. Изюм Vitis vinifera 80±11
16. Лен l inum usitatissimum 5500±218
17. Т
ыква c ucurbita pepo 2530±338
18. Оре
х грецкий Juglans regia 380±66
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 4 106
кого произрастания растений. Так на растениях, выра-
щенных в Краснодарском крае России и послуживших затем сырьем для изготовления специй, доминируют грибы из родов asper
gillus, mucor. Растительные мате-
риалы, заготавливаемые в Беларуси и Польше, содер-жат, в основном, грибы родов Penicillium, alternaria, T
richoderma, cladosporium, Pullularia. Кроме того,
была обнаружена связь между высотой растений и количеством содержавшихся в них микромицетов: на-ибольшей обсемененностью характеризовались травя-нистые растения и в меньшей степени кустарники и древесные растения.
МИКОТЕСТИРОВАНИЕ ХИМИЧЕСКИХ ВОЗДЕЙСТВИЙ
Терехова В.А.
Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН
лаб
оратория экотоксикологического анализа почв, факультет почвоведения МГУ им. ломоносова,
Москва
Современные тенденции в экологическом контро-
ле вредных воздействий все больше отражают биоти-ческий подход. Химический анализ свидетельствует лишь о
наличии «маркеров» – определенных концен-
траций загрязнителей и ничего не говорит о состо-янии и перспективе развития разных компонентов биоты и экосистемы в целом. Поэтому острой и акту-альной проблемой экологического контроля является выбор информативных биологических показателей и адаптация биологических методов для экоконтроля. Большое значение грибов в обеспечении нормально-го функционирования природных экосистем обуслав-ливает необходимость практического применения ре-зультатов микологических исследований, включения микологических показателей в создающиеся системы биотических, информативных для экологического нормирования воздействий. При этом для практичес-кого использования важны технологии, позволяющие использовать оба методических блока микодиагности-ки
– микоиндикационные методы и биотестирование с
использованием микромицетов.
В докладе предпринята попытка охарактеризовать
возможность применения чистых культур микромице-тов в качестве тест-организмов при анализе экотоксич-ности окружающей среды. Анализируются техничес-кие решения микотестов и «отклики» микромицетов на воздействие химических токсикантов органической природы (нефть и нефтепродукты, гуминовые соеди-нения) и неорганической (тяжелые металлы, отходы фосфогипса, хлориды), полученные в серии лабора-торных экспериментов (совместно с Е., Долбневой, Е. Федосеевой, М. Каниськиным, Т. Семеновой, С. Паца-евой и др.).
Методом газовой хроматографии выявляются нару-
шения интенсивности дыхания у почвенных микроми-цетов при воздействии нефтепродуктов. Люминесцен-тная микроскопия позволяет фиксировать отклонения от контроля в морфо-биологической структуре био-массы микромицетов при воздействии фосфогипса. Сопоставление проросших спор и длины проростков Fusarium oxysporum с
помощью светового микроскопа
в контрольных пробах почв и при воздействии солей тяжелых металлов позволяет охарактеризовать уро-вень
токсичности проб. Сравнение чувствительности
проростков микроконидий F . oxysporum и широко рас-
пространенных в биотестировании природных сред гидробионтов (водоросли Scenedesmus quadricauda,
ракообразных daphnia
magna) на модельный токси-
кант (калий двухромовокислый) показало, что «от-клики» вполне сопоставимы. Учитывая возможности систем цифровой микроскопии, можно заключить, что этот тест наиболее близок к реализации для практичес-ких целей. Спектральные и ростовые характеристики грибной биомассы (в возрасте 1 и 3 нед.), измеренные на спектрофотометре и на спектрофлуориметре, а так-же при развитии грибов разной пигментации на агаро-вых средах, демонстрируют неодинаковые «отклики» на высокие дозы гуминового вещества у окрашенных и неокрашенных видов микромицетов. Так, присутс-твие гумата калия снижает кинетические показатели грибов с черным пигментом и практически не влияет на скорость роста апигментного штамма фузариума.
Все эти трансформации влекут за собой изменения
разнообразия и структурно-функциональной организа-ции биоты в природе. Очевидно, что подобные откло-нения, выявленные в микотестах в лабораторных ус-ловиях, т.е. в режиме, опережающем их проявление in
situ, необходимо учитывать при составлении програм-
мы интегральных оценок вредных воздействий. Также как при обследовании организма человека требуются результаты биохимических лабораторных тестов и ос-мотр врачей-специалистов, в экологическом контроле сочетание результатов лабораторного тестирования, в том числе и в микотест-системах, с биоиндикационны-ми наблюдениями, позволят поставить более точный диагноз природной системе.
Конец двадцатого и начало нынешнего века озна-
меновались важными практическими результатами
широких фундаментальных исследований макромице-тов в нескольких направлениях.
Изучение механизмов формирования генеративной
стадии позволило решить проблему получения плодо-вых тел съедобных грибов в промышленных объемах. Свыше десятка съедобных видов базидиомицетов яв-ляются главными поставщиками грибного пищевого белк
а и плодовых тел – среди них виды Flammulina
velutipes, Grifola
frondosa, Hypsizygus marmoreus, len-
tinula edodes, l
aetiporus sulphureus, Pholiota nameko,
Pleurotus sp., составляют основу мирового производс-тва грибов.
Выявление природы биологической активности
привело
к формированию нового направления – ме-
дицинские макромицеты. На основе установления ха-рактера биологической активности метаболитов таких видов, как Ganoderma lucidum, inonotus
obliquus, Pleu-
rotus sp., Schizophyllum commune, Trametes sp., разра-
ботаны и созданы серии лекарственных препаратов и биодобавок профилактического и лечебного назначе-ния.
Установление механизмов биодеградации с участи-
ем грибов открыло широкие возможности для исполь-зования грибных ферментов в ряде промышленных отраслей. Изучение биохимических механизмов био-деградации и энзиматической активности таких видов базидиомицетов, как cerr
ena unicolor, coriolopsis poly-
zona, bjerkandera
fumosa, Pleurotus ostreatus, Phlebia
radiate, irpeks lacteus, Trametes pubescens, Trametes
versicolor и др., позволило разобраться в спектрах про-дуцируемых оксизимов, отобрать и реконструировать штаммы-продуценты для практического использова-ния.
Наконец, углубление знаний о биологических
свойств
ах патогенных видов, – Heterobasidion anno-sum, Ganoderma lucidum, Peniophora puteana, Serpula lacrimens и др., способствовало разработке мер защи-
ты и борьбы с видами, наносящими значительный эко-номический ущерб.
Объектами большинства перечисленных направ-
лений являются агарикоидные и афиллофороидные виды, относящиеся к группе дереворазрушающих ба-зидиомицетов. Мицелиальные культуры ксилотрофов широко представлены в различных государственных и институтских коллекциях. Среди культур базиди-омицетов в отечественных коллекциях и, в частнос-ти специализированной Коллекции ЛЕ (БИН), они сост
авляют большинство (psurtseva et al., 2007). Для
идентификации культур базидиомицетов используют-ся описания их морфологических и физиологических особенностей на стандартных питательных средах. Развитие техники микроскопирования (световой, элек-тронной, сканирующей) значительно расширило воз-можности изучения специфических микроструктур у базидиальных грибов. Однако, отсутствие атласов макро- и микроструктур даже для наиболее изученных видов базидиомицетов затрудняет возможности их бо-лее широкого практического использования.
В настоящее время во многих лабораториях мира
наряду с классическими морфологическими описа-ниями для определения таксономического статуса культур базидиомицетов используют биохимические, химические и молекулярно-генетические данные, по-лучаемые с помощью различных инструментальных методов анализа. При этом использование изозим-ного анализа, иммунологических методов и элект-рофореза в полиакриламидном геле, основанных на знании биохимических характеристик мицелия, пре-жде всего состава белков и ферментов, позволяет не только идентифицировать различные штаммы и виды базидиомицетов, но и устанавливать корреляционные связи между ними. Так, на основании результатов Раздел 5
КОЛЛЕКцИИ ГРИбОВ РОССИИ
CОВРЕМЕННЫЕ НАПР АВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
И МЕТОДЫ АНАЛИЗА МАКРОМИЦЕТОВ
Белова Н.В.
Ботанический институт им. в. л. к омарова,
Санкт-Петербург
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 5 108
изозимного анализа культур Flammulina из Коллек-
ции ЛЕ (БИН) был уточнен их видовой статус и выяв-
лены близкородственные группы. Изучение спектра окислительных ферментов способствовало верифи-кации видового статуса ряда коллекционных культур ЛЕ (БИН). Результаты электрофоретического анализа позволили разграничить и верифицировать культу-ры близких видов Serpula lacrymans и S. himantioides
(Schmidt, 2007).
Знания о вторичных метаболитах, накопленные за
последние 50–60 лет, успешно применяют при иденти-фикации культур базидиомицетов. Так, хроматографи-ческий анализ индольных и пептидных метаболитов был использован для идентификации плодовых тел и культур грибов родов amanita и Psilocybe
из Коллек-
ции ЛЕ (БИН) (Гуревич, Журкович, 1995; Николаева
и др., 2001). Изучение летучих метаболитов домовых
грибов Serpula lacrymans и coniophora puteana позво-
лило разграничить культуры этих видов (Ewen et al., 2004), а данные о составе жирных кислот были ис-пользованы для идентификации Pleurotus spp., Pha-
nerochaete chrysosporium и Trametes sp. (Dimou et al.,
2002; Schmidt, 2007).
Наиболее широкое развитие и применение при изу-
чении и идентификации базидиомицетов в последние два десятилетия получили молекулярно-генетические методы. Многие дереворазрушающие базидиомицеты были успешно исследованы с помощью полимеразной цепной ре
акции (pCR), как с неспецифичными (RApD),
так и видоспецифичными праймерами (SSpp). При работе с культурами ксилотрофных базидиомицетов RAp
D анализ позволил провести разграничение как на
штаммовом, так и видовом уровне. электрофоретичес-
кий анализ амплифицированных молекул rDNA успеш-но был использован для определения таксономическо-го статуса трудно культивируемых видов, обитающих на древ
есине (v ainio, Hantula, 2000). Для реконструк-
ции филогенеза изучают, как правило, участки DNA, c высокой информативностью и эффективностью. Так, Rf
Lp анализ фрагментов 5,8S и 28S rDNA у штаммов
Pleurotus spp позволил выделить несколько биологи-ческих видов и разобраться с европейскими полипоро-выми базидиомицетами (Schmidt, 2007).
В настоящее время в связи с происходящими гло-
бальными климатическими изменениями чрезвычайно важно развитие экологических исследований макро-мицетов. Температура и влажность, являются важней-шими факторами, регулирующими рост и развитие грибов, и их изменения могут привести к выпадению видов, смене состава и структуры микобиот, усилению агрессивности отдельных видов. Успех проведения подобных исследований и инновационных разработок макромицетов в значительной мере зависит от возмож-ности использования всего комплекса современных методов анализа и изучения макромицетов.
Литература:Гуревич Л.С., Журкович И.К. Токсины некоторых
видов рода amanita p
ers. // Микол и фитопатол. 1995.
Том. 28, вып.1. С.41–50. Николаева О.С., Псурцева Н.В., Белова Н.В. Грибы рода Psilocybe, сохранение
ex situ, изучение, использование. В сб. «Актуальные
проблемы микологии». Тр. БИНИИ. СПбГУ . 2001. С. 151–184. Dimou
D.M., Georgala A., komaitia M., Aggelis
G. Mycelial fatty acid composition of Pleurotus spp. and
its application in the intrageneric differentiation // Mycol. Res. 2002. vol.
106, N8. C. 935–929. Ewen R.J., Jones
p.R.H., Ratcliffe N. v., Spinger-phillips p.T.H. Identifi-
cation by gas chromatography-mass spectrometry of the volatile organic compouns emitted from the wood-rotting fungi Serpula lacrymans and coniophora
puteana , and
from Pinus sylvestris timber // Mycol. Res. 2004. vol. 108,
N7. p. 804–814. psurtseva N.v ., kiyashko A.A., Gachko-
va E.Y
., Belova N.v . Basidiomycetes Culture Collection
LE (BIN). Catalogue of strains. kMk. Scientific press
Ltd. Moscow – St.petersburg. 2007. 115p. Schmidt O. In-door wood-decay basidiomycetes: damage, causal fungi, physiology, identification and characterization, prevention and control
// Mycol. progress. 2007. vol .6. p. 261–279.
vainio EJ., Hantula J. Direct analysis of wood-inhibating
fungi using denaturing gradient gel electrophoresisof am-plified ribosomal
DNA // Mycol. Res. 2000. vol. 104, N8.
p. 927–936.
ИЗУЧЕНИЕ К ОЛЛЕКЦИИ ГРИБОВ РОДА FuSarium
СЕКЦИИ
SPoroTricHiella
Гаврилова О.П.
всероссийский институт защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
В лаборатории микологии и фитопатологии Все-
российского института защиты растений (ВИЗР) собрана коллекция моноклоновых изолятов, включа-ющая шт
аммы грибов f. sporotrichioides (148 штам-
мов), f. poae
(162 штамма), f. langsethiae (31 штамм),
f. kyushuense (2 штамма) различного географическо-
го
происхождения. Коллекция хранится при +4 °С и
−80 °С и постоянно пополняется в результате мико-флористических исследований. Видовая принадлежность штаммов подтверж-
дена с помощью видоспецифичных молекулярных праймеров: fS
pO, f / fSpO, r и fspor, f /lanspo, r для
F .sporotrichioides , IGS /CNL 12 для F . poae, fS pO, f /
fpOW, r и flang f3 / lanspoR1 для F . langsethiae (k on-
stantinova, Yli-Mattila, 2004; Yli-Mattila et al., 2004; Wil-son et al., 2004; Halstensen et al., 2006).
Морфолого-культуральные признаки штаммов изу-
чались на различных питательных средах: картофель-
коллекции грибов России 109
но-сахарозном агаре (КСА), среде Чапека, дрожжево-
пептонном агаре (ДПА), овсяном агаре. Выявлены и описаны морфотипы F . sporotrichioides, F . poae и F .
langsethiae , различающиеся цветом воздушного и суб-
стратного мицелия, пигментацией, интенсивностью спороношения.
Анализ скорости роста грибов при различных
температ
урах (10 – 30°С на КСА) показал, что опти-
мальной температурой для роста штаммов всех видов является 24°С. Вид F . langsethiae характеризуется бо-
лее низкой скоростью роста (5.3 мм/сутки на КСА) по сравнению с быстрорастущими (7.4 мм/сутки на КСА) видами F . sporotrichioides и F . poae. Наибольшая ва-риабельность скорости роста штаммов выявлена при 30°C: F . sporotrichioides –
от 0.6 до 6.5 мм/сутки, F .
poae – от 1.4 до 5.3 мм/сутки и F . langsethiae – от 0.2
до 2.5 мм/сутки.
Для оценки способности штаммов продуцировать
T-2 токсин и диацетоксисцирпенол (ДАС) использует-ся иммуноферментный метод (ELISA). Анализ прово-дится
совместно с коллегами из ВНИИВСэГ (г. Мос-
ква)
– д.б.н. Кононенко Г.П. и к.б.н. Буркиным А.А.
Показано, что F . sporotrichioides (83 штамма) образу-
ет Т-2 токсин в количествах от 224 до 82345 нг/мл, F .
poae (79) от 0 до 158 нг/мл, F . langsethiae (25) от 562 до
55590 нг/мл. Уровни образования ДАС для штаммов F . sporotrichioides сост
авляют 0 – 794 нг/мл, для F . poae 0
–1780 нг/мл, для F . langsethiae 14 – 4075 нг/мл.Оценка патогенных свойств штаммов f. sporotrichi-
oides (50
штаммов), f. poae (50) и f. langsethiae (30)
проводится в лабораторных условиях с использованием 0.004
% водного раствора бензимидазола на отрезках
листьев овса сорта Боррус (Левитин, Михайлова, Афа-насенко, 1981). Степень хлорозов и некрозов определя-ют по 5-балльной шкале на 5 сутки после инокуляции. Для всех видов выявлена значительная вариабельность патогенности штаммов. Патогенные штаммы всех ви-дов вызывают реакцию по типу «некроз», но для боль-шинства
штаммов f. sporotrichioides более характер-
ной является реакция по типу «хлороз».
В целом, отмечен значительный внутривидовой по-
лиморфизм грибов F . sporotrichioides и F . poae по всем
из
ученным признакам. эти виды хорошо адаптируются
в различных условиях, поэтому отмечается их высокая частота встречаемости во всех регионах возделывания зерновых культур (Левитин и др., 1998). Вид F . langs-
ethiae недавно выявлен в странах Северной Европы
(Torp, Nirenberg, 1999) и Северо-западе РФ (Gagkaeva et al., 2006). В 2006г. данный вид обнаружен в образцах зерна из Орловской области и Краснодарского края. По всей видимости, ареал распространения F . langsethiae
постепенно расширяется. Грибы секции Sporotrichiella,
продуцирующие в процессе своей жизнедеятельности
разнообразные микотоксины, имеют важное сельскохо-зяйственное и медицинское значение, поэтому сущест-вует необходимость подробного изучения их свойств.
КОЛЛЕКЦИЯ ЧИСТЫХ КУ ЛЬТУР МАКРО- И МИКРОМИЦЕТОВ
СРЕДНЕЙ СИБИРИ – БАЗА ДЛЯ СОЗДАНИЯ НОВЫХ
БИОТЕХНОЛОГИЙ И ОБР АЗОВАТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА
Громовых Т.И., Садыкова В.С., Ковалева Г.К., Кутафьева Н.П.,
Гайдашев
а И.И., Миронов А.Г., Пашенова Н.В.
cибирский государственный технологический университет,
красноярск
Средняя Сибирь – крупнейший природный регион
России, значительная площадь которого занята лесной растительностью. Лесные экосистемы края образуют два
важнейших компонента – фитоценозы и микоцено-
зы. Необходимость изучения видового состава и гео-графическ
ого распространения и биологии грибов –
продуцентов биологически активных веществ важна для региона, т.к. подобные исследования немногочис-ленны. Среди грибов-продуцентов важны как микро-мицеты, так и макромицеты.
Изучение биоразнообразия грибов в любом регио-
не возможно только при создании целевых коллекций. В последнее десятилетие коллекции культур грибов приобрели особо важное теоретическое и прикладное значение. Во-первых, коллекции чистых культур стали важнейшим источником продуцентов биологически активных веществ и новых видов съедобных грибов для промышленного культивирования в пищевых це-лях. Во-вторых, они служат для сохранения генофонда редких и исчезающих видов. Изучение грибов в регионе находится на этапе сбора
информации о географическом распространении и эко-системной приуроченности видов и требует создания базы данных на основе организованных гербарных кол-лекций и коллекций живых культур. Созданная коллек-ция чистых культур макро- и микромицетов в Сибирском государственном технологическом университете совмес-тно с Институтом леса СО Р АН является важным звеном для пополнения знаний о биологическом и генетическом разнообразии грибов нашей планеты и источником про-мышленно важных штаммов для новых биотехнологий.
Коллекция насчитывает более 700 штаммов микро-
мицетов, принадлежащим к родам Trichoderma Peni-
ci
llium, aspergillus, mucor, rhizopus, acremonium и др.,
обладающих высокой антибиотической и ферментатив-ной активностью. Собрана коллекция штаммов фитопа-тогенных грибов представителей родов Fu
sarium, alter-
na
ria, rhizoctonia, Verticillium, cladosporium, bipolaris,
Pythium, ophyostoma, cerastocystis armillaria, Heteroba-
sidion, Hipholoma .
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 5 110
Изучены биологические и биотехнологические
свойства более 200 изолятов микромицетов, проведен
скрининг наиболее важных штаммов, обладающих высокой антибиотической и ферментативной актив-ностью. Депонированы наиболее активные штаммоы: Trichoderma asperellum МГ-97
(ВКПМ f-765), T.
asperellum МГ-6 (ВКПМ f -878), T. asperellum k-12
(ВКПМ f
-887), T. harzianum Th 5 (ВКПМ f -888) и T.
citrinoviride Th 4 (ВКПМ f-889). Fusarium chlamidos-
sporum (ВКПМ f-8990), Fusarium sambucinum (ВКПМ
f-900), Fusarium.
semitectum (ВКПМ f-901), Fusarium
sporjtrichioides (ВКПМ f -902).
В составе коллекции макромицетов имеются пред-
ставители видов coriolus versicolor, armillariella sp., Fomitopsis pinicola, Piptoporus betulinus, Pleurotes os-
treatus, Kuehneromyces mutabilis, Fomes fomentarius,
Flamulina velutipes, Fomotopsis officinalis, Ganoderma applanatum. Изучен биохимический состав мицелия
и плодовых тел, противомикробная и противоопухо-левая активность штаммов, принадлежащих к видам Piptoporus betulinus, Fomitopsis officinalis, l
aetiporus
sulphureum, coriolus versicolor, Ganoderma applanatum.
На основании проведенных исследований отобраны наиболее перспективные штаммы для депонирования в ВКПМ.
Созданная коллекция является хорошей базой для
образовательного процесса, подготовки научных кад-ров в области микологии и биотехнологии.
СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ДЛИТЕЛЬНОГО ХР АНЕНИЯ ГРИБОВ
Иванушкина Н.Е., Кочкина Г.А., Еремина С.С.,
Афанасьева Т.И., Озерская С.М.
вс
ероссийская коллекция микроорганизмов, ИБФМ РАН,
Пущино
Развитие биотехнологии с использованием мик-
роорганизмов напрямую связано с возрастанием пот-ребности в обеспечении надежного поддержания и сохранения жизнеспособности культур. Для таксоно-мического изучения также очень важно сохранение организмов ex situ. Одним из наиболее эффективных способов такого сохранения микробиологических ре-сурсов является их поддержание в коллекциях чистых культур.
Физиологические и генетические нарушения, ка-
сающиеся экономически важных штаммов, инду-цированные стрессами при консервации культуры различными методами, могут сопровождаться значи-тельными экономическими потерями в биотехноло-гии или неудачами при проведении фундаментальных научных исследований. При выборе метода хранения нужен индивидуальный подход, исходящий из тех-нических возможностей лаборатории, учитывающий экономические критерии и, главное, биологические особенности консервируемого организма.
Традиционные методы хранения, такие как перио-
дические пересевы, хранение под минеральным мас-лом, под водой, в почве являются доступными по цене и не очень затруднительны по исполнению в лабора-торных условиях. Однако пригодность таких методов, и, прежде всего, периодических пересевов, для долго-срочного хранения сомнительна, поскольку генетичес-кая стабильность и другие характеристики культур не могут быть гарантированы.
В другую группу входят более современные мето-
ды, обеспечивающие длительное сохранение не только жизнеспособности, но и генетической стабильности образцов, такие как лиофилизация и низкотемпера-турная консервация. Они активно используются прак-тически во всех национальных коллекциях культур, а также во многих коллекциях промышленных предпри-ятий и научных учреждений.
Грибы Всероссийской коллекции микроорганиз-
мов (ВКМ)
– это коллекция, в которой представлены
все известные классы царства грибов. Фонд составля-ет около 4000 штаммов, которые представляют почти 1500 видов и 450 родов грибов. Для гарантированного сохранения имеющегося фонда обязательным является применение параллельно разных способов хранения для каждого штамма, в том числе, таких как криокон-сервация или лиофилизация.
Лиофилизация осуществляется на установках цен-
трифужного типа с использованием обезжиренного молок
а в качестве протектора. этот метод подходит
для культур с хорошим бесполым или половым спо-роношением. Работы по лиофилизации были начаты в ВКМ в начале 70-х годов XX века. В настоящее вре-мя 80
% штаммов мицелиальных грибов заложено на
хранение лиофильно. Выборочные проверки проде-монстрировали сохранение жизнеспособности после 35 лет хранения, в частности у представителей видов Rhizopus oryzae,
Melanocarpus albomyces, penicillium
variabile, Clonostachys rosea f. catenulata, Thielavia terricola, Trichoderma viride и др.
Криоконсервация проводится в защитных средах с оп-
тимальной для каждой культуры скоростью охлаждения. На
чиная с середины 80-х годов XX века, более 70 % фон-
да ВКМ заложено на хранение с использованием различ-ных программ криоконсервации. У становлено, что через 20 лет хранения жизнеспособность сохраняют предста-вители разных таксономических групп: базидиомице-ты –
pholiota adiposa, Heterobasidion annosum, piptoporus
betulinus, Chondrostereum purpureum, зигомицеты – Cun-
ninghamella japonica, Basidiobolus meristosporus, аскоми-це
ты – Chaetomium elatum, Thielavia terrestris и др.
коллекции грибов России 111
Стремительное развитие биологии и биотехноло-
гии в начале XXI требует от коллекций культур мик-
роорганизмов решения значительно большего объема различных задач по обеспечению научно-исследо-вательских работ фундаментального и прикладного характера, чем это было прежде. Традиционное снаб-жение исследователей только чистыми культурами ме-няется на комплексную работу по информационному сопровождению, стандартизации процессов подде-ржания культур на качественном уровне, обеспече-нию сохранения интеллектуальных прав при передаче штаммов третьим лицам и патентным процедурам. В связи с этими новыми требованиями, подразделением по развитию биотехнологии Организации по экономи-ческ
ому содействию и развитию (ОэСР) в результате
многочисленных обсуждений группами экспертов как стран, входящих в эту организацию, так и стран-пар-тнеров О
эСР была разработана концепция развития
Биологических ресурсных центров или БРЦ (Biologi-cal resource centres, BRC) и подготовлены единые стан-дарты по их оперативной деятельности.
По опре
делению ОэСР Биологические ресурсные
центры
– это существенная часть инфраструктуры,
обеспечивающей развитие биотехнологии. они вклю-
чают провайдеров услуг и депозиторов живых кле-ток, геномов организмов, и информации, касающейся наследственности и функций биологических систем. БРЦ содержат коллекции культивируемых организ-мов (например, микрооорганизмов, клеток растений, животных и человека), воспроизводимые их части (т.е.
геномы, плазмиды, вирусы, ДНк), жизнеспособ-
ных, но пока некультивируемые организмы, клетки и ткани, а также базы данных, содержащие молекуляр-ную, физиологическую и структурную информацию, относящуюся к этим коллекциям и необходимые для их деятельности сведения по биоинформатике. Для того, чтобы обеспечивать поставку биологических материалов и информации, БРЦ должны соответс-твовать высоким стандартам качества и экспер-тизы международного сообщества исследователей и производственников. БРЦ должны обеспечивать доступ к биологическим ресурсам, которые являются основой научных исследований в науках о жизни и раз-вивающейся биотехнологии.
Стандарты деятельности БРЦ разработаны на осно-
ве опыта крупнейших биологических коллекций мира и описывают как общие требования, предъявляемые ко всем БРЦ, так и специализированные требования, отра-жающие специфику работы с конкретным видом биоло-гического материала. В настоящее время эти стандарты уже опубликованы (OECD best practice guidelines for biological resource centres. OECD, 2007, 115 p.).
Особое значение для получения статуса БРЦ име-
ют механизмы национальной сертификации (незави-симого аудита третьей стороной) коллекций культур, ко
торые также разработаны экспертами ОэСР . Одним
из основных принципов сертификации является то, что каждая коллекция должна пройти сертификацию на соответствие как общим, так и специфическим стандартам в зависимости от типа биологических объ-ектов, которые поддерживаются в данной коллекции. При этом сертифицирующий орган должен гаранти-ровать, что процедура сертификации прозрачна и от-крыта для третьих лиц, регулярно повторяется, вклю-чает возможность обжалования решения об отказе в сертификации. Сертификация может быть отозвана в случае, если коллекция не в состоянии выполнить не-обходимые требования соответствующего стандарта. Коллекции биологических ресурсов, получившие сви-детельство национальной сертификации посредством независимого аудита со стороны третьего лица, могут стать членами Глобальной сети биологических ре-сурсных центров, ГСБРЦ (Global Biological Resource Centres Network, GBRCN). Сертифицированные БРЦ должны соответствовать национальному законодатель-ству относительно приобретения, сохранения, исполь-зования и распространения биологических ресурсов и информации о них.БИОЛОГИЧЕСКИЕ РЕСУРСНЫЕ ЦЕНТРЫ –
НОВЫЙ э
ТАП Р АЗВИТИЯ КОЛЛЕКЦИЙ КУ ЛЬТУР
Озерская С.М., Кочкина Г.А., Иванушкина Н.Е.
всероссийская коллекция микроорганизмов, ИБФМ РАН,
Московская область, Пущино
КОЛЛЕКЦИЯ КУ ЛЬТУР ЛЕ (БИН) КАК ОСНОВА ДЛЯ СОХР АНЕНИЯ
ex S
iTu Р АЗНООБР АЗИЯ БАЗИДИАЛЬНЫХ МАКРОМИЦЕТОВ РОССИИ
Псурцева Н.В.
Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
Сохранение макромицетов ex situ, заключающееся
в сохранении их генофонда в чистой культуре, явля-ется составной частью общей проблемы сохранения биологического разнообразия грибов в дополнение к ее т
радиционному подходу – сохранению in situ, т.е. в
естественных местообитаниях. Преимущество сохра-нения ex situ состоит в возможности использования и
приумножения генетических ресурсов макромицетов
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 5 112
для научного и практического применения – фунда-
ментальных микологических исследований, биотех-нологии, медицины и т.д. Ключевую роль в этом иг-рают коллекции культур. Основная цель сохранения ко
ллекционных штаммов – это поддержание их чисто-
ты, жизнеспособности, генетической стабильности и биологической активности. В мире насчитывается 530 коллекций культур в 67 странах, суммарно поддержи-вающих 1371913 штаммов микроорганизмов, из кото-рых грибов
– 467629 штаммов (статистика коллекций,
зарегистрированных в WfCC на 28.02.08).
Коллекция культур базидиомицетов Ботанического
институт
а им. В.Л. Комарова ЛЕ (БИН) является не-
большой,
по меркам WfCC, но уникальной специали-
зированной коллекцией. Она была организована в БИН Р АН на базе Лаборатории биохимии низших растений (ныне Лаб. биохимии грибов) более 50 лет назад для изучения биологически активных веществ и фермен-тов макромицетов. Первыми сохраняемыми культура-ми были штаммы inonotus
obliquus и некоторых других
афиллофороидных грибов
– объектов изучения проти-
воопухолевой активности. До середины 1990-х годов Коллекция имела выраженную тенденцию к сохране-нию макромицетов, обладающих той или иной био-логической активностью и пополнялась, в основном, с учетом проводимых в лаборатории исследований. Однако в конце 90-х была сформулирована концепция развития К
оллекции ЛЕ (БИН), основанная на идее
сохранения ex situ таксономического и экологическо-
го разнообразия базидиальных макромицетов, и Кол-лекция вступила на новый этап своего формирования. План развития включал сохранение и изучение ex situ
базидиальных макромицетов разных эколого-трофи-ческих групп и видов, произрастающих, в основном, на территории России с акцентом на: редкие и исчеза-ющие виды; поддержание в культуре эктомикоризных грибов; виды и штаммы, представляющие интерес для биотехнологии и медицины. Таким образом, в насто-ящее время характерной особенностью Коллекции ЛЕ (БИН), является то, что она специализируется на сохранении в культуре и изучении только разнообра-зия макромицетов. В настоящее время в Коллекции поддерживается около 1500 штаммов 530 видов из 200 родов, 55 семейств и 24 порядков агарикоидных, афиллофороидных и гастероидных грибов (структу-рированных в соответствии с системой, принятой в 9 издании Словаря грибов Айнсворта и Бисби. В конце 2007 г. вышел из печати новый выпуск исправленного и существенно дополненного Каталога штаммов Кол-лекции ку
льтур базидиомицетов ЛЕ (БИН).
Схематично процесс получения и работы с культу-
рами макромицетов в коллекции можно свести к трем стадиям: сбор и идентификация; выделение культур и верификация; культивирование и изучение. Основные исследования, проводимые с коллекционными культу-рами ЛЕ
(БИН), включают: – выявление возможности
сохранения в культуре макромицетов различных так-сонов (прорастание спор и рост вегетативного мице-лия ex situ); –верификацию штаммов с применением
культуральных исследований, получения плодовых тел, скрещивания культур и молекулярного анали-за;
– таксономические задачи, решаемые на основе
морфологических, физиологических, биохимических, генетиче
ских и молекулярных исследований; – изуче-
ние биологической активности сохраняемых культур, включающее поиск и выявление физиолого-биохими-ческих особенностей биосинтеза ферментов, липидов, антибиотиков и других биологически активных со-единений. В результате этих работ были обнаружены новые штаммы, перспективные для биотехнологии и медицины.
Таким образом, коллекционные культуры с успе-
хом используются как для научных, так и практичес-ких целей. По нашим подсчетам, в настоящее время, в России примерно десятая часть видов базидиальных макромицетов, отмеченных в природе, представле-на чистыми
культурами в Коллекции ЛЕ (БИН). это
позволяет надеяться на сохранение, поддержание и использование генетических ресурсов микобиоты макромицетов России. В то же время, очевидно, что работа по сохранению разнообразия макромицетов ex
situ должна быть продолжена.
Исследования проводились при финансовой под-
держке грантов РФФИ: 97–04–49621, 99–04–49825, 03–04–49604, 06–04–49043, 08–04–01612; гранта ИН-ТАС 03–51–5889; программы ОБН Р АН (2006–2008) «Биологические ресурсы: фундаментальные основы рационального использования».
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА КРИОКОНСЕРВАЦИИ
ДЛЯ ХР АНЕНИЯ КУ ЛЬТУР ГРИБОВ
Сафронова В.И., Оследкин Ю.С., Свиридова О.В., Воробьев Н.И.
ГНУ в
сероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии,
Санкт-Петербург – Пушкин
Надежная консервация микроорганизмов, т.е. дол-
госрочное сохранение их в коллекции в неизменном виде, является одной из основных проблем микроби-ологии и микробной биотехнологии. Оптимальными методами долгосрочного хранения микроорганизмов в настоящее время являются криоконсервация (хра-нение при сверхнизких температурах) и лиофильное высушив
ание. эти методы позволяют сохранять куль-
туры дрожжей и мицелиальных грибов в течение не-скольких лет или даже десятилетий. Было показано, что некоторые лиофилизированные виды Aspergillus и fusarium
сохраняли жизнеспособность в течение 33–
коллекции грибов России 113
36 лет. Хранение культур в замороженном состоянии
(криоконсервация) зависит, прежде всего, от темпера-туры хранения. Допустимо использовать температуру –60
– 80 °С. Однако известно, что полную остановку
клеточного метаболизма обеспечивает температура ниже
–150 °С, которая гарантирует генетическую ста-
бильность культур в процессе хранения. Кроме того, при столь низких температурах невозможны процессы рекристаллизации льда, что способствует сохранению жизнеспособности клеток в течение десятилетий. До недавнего времени криоконсервацию биологического материала при ультранизких температурах проводили в жидк
ом азоте (–196 °С) или его парах (–150 °С). На-
иболее предпочтительным и надежным способом кри-оконсервации является использование морозильных камер,
поддерживающих температуру ниже –150 °С.
Культуры микроорганизмов можно хранить при низ-ких или
сверхнизких температурах (–70 – 150 °С) в
иммобилизованном состоянии (на носителях). В ка-честве носителей можно использовать силикагель мар-ки КСМГ (ГОСТ 3956-76, диаметр 3 мм). В целях гарантированного долгосрочного сохра-
нения жизнеспособности и стабильности коллекци-онных культур грибов, а также для их эффективного использования необходимо:
• поддерживать каждый коллекционный штамм не менее чем двумя методами;
• использовать различные резервные системы (раз-ные помещения, морозильные камеры, источники электроснабжения);
• содержать потенциально опасный биологический материал в отдельных резервуарах и соблюдать не-обходимые правила безопасности при работе с ним;
• выполнять регламентные процедуры, связанные с проверкой жизнеспособности и стабильности био-логических объектов, их ре-консервацией и т.д.
• проверять аутентичность культур (наличие основ-ных фенотипических свойств и генетических мар-керов) после длительной консервации или к следу-ющей закладке на хранение;
• создавать компьютерную базу коллекционных дан-ных, доступных широкому кругу пользователей.
ВЫДЕЛЕНИЕ В КУ ЛЬТУРУ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ
ИЗ ПРИРОДНЫХ ПОПУ ЛЯЦИЙ ЮГА ЗАПАДНОЙ СИБИРИ И АЛТАЯ
Теплякова Т.В.1, Михайловская И.Н.1, Горбунова И.А.2
1 Государственный научный центр вирусологии
и биотехно
логии «вектор» Роспотребнадзора,
п. кольцово, Новосибирская область
2 Центральный сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
Высшие базидиальные грибы являются источни-
ком получения ряда важнейших профилактических и лекарственных препаратов, применяемых для восста-новления иммунной системы, борьбы с паразитарны-ми, вирусными инфекциями и онкологическими забо-леваниями.
Природное биоразнообразие грибов позволяет
отобрать наиболее перспективные для применения в медицинских целях. В растительных сообществах юга Западной Сибири и Алтая известно более 2000 видов макромицетов, многие из которых могут представлять большой интерес для изучения биологически актив-ных веществ.
Для выделения грибов в культуру нами использо-
вались как плодовые тела, так и споровые отпечатки, полученные в условиях экспедиции на Алтай.
В ре
зультате проведенной работы в период 2006 –
2007 гг. в чистую культуру из тканей плодовых тел и спор грибов было выделено 15 штаммов из 11 видов грибов: pleurotus
ostreatus, p.pulmonarius, flammulina
velutipes, Trametes versicolor, Laetiporus sulphureus, Ganoderma applanatum, p
luteus cervinus, Agaricus silvi-
cola, Coprinus
comatus, volvariella speciosa, Hypholoma
fasciculare.
Сравнивая два метода, следует отметить, что выде-
ление грибов из споровых отпечатков связано с риском занесения в коллекцию микроскопических клещей, ко-торые могут питаться мицелием многих видов грибов. По сравнению с тканевыми культурами споровые от-печатки требовали более тщательной очистки от гри-бов-микромицетов.
Принадлежность выделенной культуры к грибу-ба-
зидиомицету на первом этапе подтверждалась по на-личию на гифах мицелия пряжек, а также отсутствию конидиального споронощения, типичного для многих несовершенных грибов. Использовали также и такие признаки, как характер роста колоний и грибной за-пах.
Для полной уверенности необходимо получение
плодовых тел грибов, хотя бы в лабораторных усло-ви
ях. это особенно важно для того, чтобы исключить
присутствие в культуре выделенного базидиомицета микофильного гриба. Используя опыт изучения мико-фильных грибов у хищных грибов-гифомицетов (Теп-лякова Т.В., 1999), мы обнаружили микофильные гри-бы
в колониях зимнего опенка ( flammulina velutipes )
и вешенки ( pleurotus ostreatus ). Гифы микофильного
гриба развивались внутри гиф данных видов, в ре-зультате чего от клеток базидиомицетов оставались лишь клеточные стенки. На фоне пустых клеток были хорошо видны тонкие гифы грибов–микофилов. Не-дооценка этого, довольно широко распространенного
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 5 114
в природе явления, может привести к ошибочному
культивированию, особенно в погруженной культу-ре, вместо базидиального гриба паразитирующего в нем гриба-микофила. Известны факты культивирова-ния ложных штаммов, отрицательно отразившиеся на развитии исследований в области промышленной биотехнологии базидиальных грибов (Бухало А.С., 1988 ).
О РЕДКИХ ВИДАХ PenioPHora РОССИИ В КОЛЛЕКЦИИ Msk-f
Юрченко Е.О.
Институт экспериментальной ботаники им. в.Ф. к упревича НАН Беларуси,
Минск
В 1997–2006 гг. автором данного сообщения были
предприняты сборы кортициоидных грибов в Евро-пейской России, на Урале и российской части Кавказа, которые депозитированы в коллекции грибов Гербария Иэ
Б НАНБ (MSk-f). В их числе были обнаружены
три редкие для региона исследования вида из рода Pe-
niophora (peniophoraceae, Russulales, Basidiomycota), опис
ание образцов которых приводится ниже.
p. lilacea
Bourdot & Galzin; собран 6 X 2006 (MSk
6753) на коре опавших ветвей и веточек acer campestre
в байрачном дубняке звездчатковом у хутора Кали-нинский в Шолоховском районе Ростовской области. В пределах ареала (Европа и Закавказье) вид встреча-ется редко.
Плодовое тело распростертое, гладкое, плотно
приросшее, светло-охряное, первоначально с узким беловатым бахромчатым краем, с возрастом сильно трещиноватое; в поперечном сечении от бесцветного до желто-бурого в основании. Базальный слой тонкий или среднеразвитый, из склеенных параллельных гиф или псевдопаренхиматический. Гифы (2–)2.5–4.2 мкм шириной, с тонкой или утолщенной стенкой, пряжки заметны на гифах среди частиц субстрата. Глеоцисти-ды субцилиндрические или веретеновидные (вблизи базального слоя неправильно-пузыревидные), с тонкой или утолщенной при основании (до 3.2 мкм) стенкой, 55–75 Ч 5–12 мкм, трудно отличимые от многочис-ленных базидиол. Встречаются редкие выступающие гифиды шириной 2.2–2.7 мкм. Базидии гиалиновые, тонкостенные, зауженные в средней части, около 65 мкм длиной, 11.5–12.5 мкм шириной, с 4 крупными стеригмами. Базидиоспоры эллиптические или про-долговатые, редко почти яйцевидные, иногда слегка вдавленные с адаксиальной стороны, субгиалиновые, умеренно тонкостенные, 11–15.7 Ч 5.5–8.7 мкм, сред-ний размер 13.16 Ч 6.91 мкм (n = 30), споровый коэф-фициент (отношение длины к ширине, Q) 1.6–2.2.
p. piceae
(pers.) J. Erikss. Собран 29 vII 1998 (MSk
6701) на коре валежа abies nordmanniana в пихтар-
нике папоротниковом в окрестностях селения Закан (бассейн верховьев р. Бол. Лаба) в Урупском районе Карачаево-Черкессии, на высоте 1260 м. По всей веро-ятности, вид приурочен к местам произрастания пих-ты на Кавказе; ареал охватывает также горы Европы и Северную Америку.
Плодовое тело распростертое, бугорчатое, серое
с фиолетовым оттенком, 0.25–0.3 мм толщиной, край отгибается с частицами субстрата. В поперечном сече-нии базидиома с толстым бурым базальным слоем; ги-мений слегка утолщенный, в основании буровато-жел-тый, внезапно отграничен от базального слоя. Гифы базального слоя от горизонтальных вблизи субстрата до псевдопаренхиматических вблизи гимения, плот-но спаянные, 3–6 мкм шириной, тонко- до толстос-тенных, без пряжек. Имеются глеоцистидоподобные элементы, веретеновидные или шиловидные, 40–50 Ч 6.5–7 мкм, с утолщенной стенкой в основании. Лам-процистиды конические или коротковеретеновидные (фузиформные), 15–34 Ч 4.5–12 мкм в инкрустирован-ной части. Базидии без пряжки при основании, почти цилиндрические, гиалиновые, тонкостенные, 24.5–35 Ч 4.2–5 мкм. Базидиоспоры аллантоидные или почти аллантоидные, бесцветные или едва желтоватые, очень тонкостенные или тонкостенные, 8–10.7 Ч 2–2.7 мкм, средние размеры 9.33 Ч 2.22 мкм (n=30), Q = 3.1–4.2.
p. versicolor
(Bres.) Sacc. & p. Syd. Собран 21 vIII
1997 (MSk 4165) на оголенной древесине мертвого
веточного пенька lonicera sp. в Ботаническом саду
Уральского отделения Р АН в г. Екатеринбурге.
Плодовое тело распростертое, гладкое, плотно при-
росшее, темно-охряное до цвета корицы, с возрастом сильно трещиноватое; в вертикальном сечении гиали-новое или субгиалиновое, с тонким псевдопаренхима-тическим слоем в основании. Гифы умеренно тонкос-тенные, с пряжками, 2.7–3 мкм шириной (вздутия до 5.2 мкм). Глеоцистиды от пузыревидных до булавовидных и субцилиндрических, (18–)20–34 Ч 8.2–11.2(–15.5) мкм, с желтоватыми кристаллическими включениями, некоторые с адвентивными септами; в сульфованили-не со слабым пурпурным оттенком. Лампроцистиды многочисленные, мелких до средних размеров, фузи-формные или конические, в инкрустированной части 16.5–25(–32.5) Ч 5.5–9 мкм, желтоватые, Базидии узко булавовидные, бесцветные, тонкостенные, 33–42 Ч 5–7 мкм. Базидиоспоры эллиптические, субгиали-новые, тонкостенные, (4.7–)6–7(–7.5) Ч 3.1–4.1 мкм, средние размеры 6.45 Ч 3.63 мкм (n = 30), Q = 1.4–1.9. P. v
ersicolor известна из стран юго-западной Европы,
с Канарских островов, Ямайки. Образец заметно от-личается от концепции P. versicolor размерами спор
[7.5–11 Ч 4–5.5 мкм согласно Domaсski (1991: 93); 9–11 Ч 4.5–6 согласно Boidin (1994: 326)] и возмож-но, представляет еще не описанный вид из родства P.
versicolor .
Патогенные грибы подвержены окислительному
стрессу с участием активных форм кислорода (АФК).
Последние образуются хозяином в ходе защитных ре-акций или самим грибом под действием экстремаль-ных факторов. Антиоксиданты разрушают АФК, чем могут благоприятствовать выживанию паразита и патологическому процессу в целом. Клетки фитопа-тогенных грибов, как и других организмов, содержат разнообразные антиоксиданты. Из них наименее изу-чены, но представляют особый интерес вещества, ко-торые выделяются грибом в инфекционную каплю и могут быть влиять на взаимоотношения с хозяином в самом начале болезни.
Целью работы было обнаружить внеклеточную
антиокислительную активность спор одного из фито-патогенных грибов и выяснить, достаточна ли она для защиты их от окислительного повреждения.
Объек
том был возбудитель пирикуляриоза риса –
гриб magnaporthe grisea. Диффузты свежеполученных
и проросших спор разных штаммов анализировали на способность разрушать экзогенный супероксидный радикал (в системе ксантиноксидаза + нитросиний тетразолий) или экзогенную перекись водорода (по окислению ABTS или TiCl
4). Определяли также спо-
собность этих диффузатов защищать споры от повреж-дения экзогенными АФК. Для этого добавляли извне перекись водорода или супероксид-генерирующую систему рибофлавин-метионин, или гидроксил-гене-рирующую систему Фентона.
Интенсивный св
ет – природный экстремальный
фактор, повреждение которым опосредовано АФК, и адаптация к которому может осуществляться через антиокислительный аппарат. Поэтому было также изу-чено влияние света на выделение антиоксидантов гри-бом и на его чувствительность к экзогенным АФК.
В диффузатах спор, прораставших 24 ч, была обна-
ружена супероксиддисмутазная и каталазная активнос-ти. Первая была сравнительно низкой, что не позволяло сравнивать разные варианты. Каталазная активность была довольно высокой и примерно одинаковой в диф-фузатах спор, проращенных на листьях риса и на ней-тральной поверхности. Поскольку активность в диф-фузатах незараженных листьев была гораздо ниже, она, скорее всего, повышалась при заражении за счет гриба.
Обнаружено, что носители каталазной активности
выделяются спорами и сразу после смывания спор с мицелия, и впоследствии, во время их прорастания. Кипячение устраняло эту активность почти полно-стью, а
цианид калия и азид натрия – полностью, что
говорит об участи в ней ферментов. Однако, она, по-видимому, не обусловлена каталазой, поскольку была совершенно нечувствительна к аминотриазолу, инги-битору этого фермента.
Искусственно образованные АФК (Н
2О2, О2- и .ОН)
подавляли прорастание спор. эта токсичность ослабля-
лась при добавлении диффузатов других спор того же штамма. По-видимому, защитные свойства диффузатов связаны с их антиокислительной активностью, но не только с той, которая была измерена нами химически, поскольку не было четкой корреляции между каталазной активностью диффузатов разных штаммов и их способ-ностью защищать споры от активных форм кислорода.
Интенсивное освещение спор 5 ч резко подавляло
их прорастание, и этот эффект ослаблялся экзогенны-Раздел 6
ФИзИОЛОГИЯ И бИОхИМИЯ ГРИбОВ
ФИТОПАТОГЕННЫЙ ГРИБ maGnaPorTHe GriSea
ВЫДЕЛЯЕТ АНТИОКСИДАНТЫ, ЗАЩИЩАЮЩИЕ ЕГО
ОТ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ
Абрамова О.С.1, Пасечник Т.Д.2, Аверьянов А.А.2, Лапикова В.П.2,
Гайворонская Л.М.1, Кузнецов Вл.В.1, baker С.J.3
1 Российский университет дружбы народов,
Москва, Россия
2 всероссийский научно исследовательский институт фитопатологии РАСХН,
Московская область, Россия
3 agricultural research Service, uSda,
beltsville, uSa
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 116
ми антиоксидантами. Освещение из 1 ч практически
не влияло на прорастание спор и повышало их толе-рантность к последующему действию АФК, вероятно, за счет адаптивной стимуляции их антиокислительно-го аппарата. Защитные свойства и, в некоторых слу-чаях, каталазная активность диффузатов засвеченных спор также повышались.
Таким образом, прорастающие споры m.
grisea
выделяют в окружающую среду антиоксиданты, раз-рушающие перекись водорода и супероксидный ради-ка
л. эти экзометаболиты могут защищать паразита от
окислительного стресса и быть факторами его выжи-вания и патогенеза на ранних стадиях болезни. Данная активность адаптивна и может меняться под действи-ем факторов среды, например, света.
Работа поддержана грантом №2682 Agricultural Re-
search Service, USDA при посредничестве Междуна-родного научно-технического центра.
ДИНАМИКА НАКОПЛЕНИЯ ОСНОВНЫХ ГРУПП
ХИМИЧЕСКИХ
СОЕДИНЕНИЙ В ПРОЦЕССЕ Р АЗВИТИЯ
ПЛОДОВОГ
О ТЕЛА ТРУТОВИКА СЕРНО-ЖЕЛТОГО –
laeTiPoruS SulPHureuS (bULL.: fR.) MURR.
Агафонова С.В.1, Боровский Г.Б.1, Пензина Т.А.1, Оленников Д.Н.2
1 Сибирский институт физиологии и биохимии растений Со РАН,
Иркутск
2 Институт общей и экспериментальной биологии Со РАН,
Улан-Удэ
В современной фармакологии особое место зани-
мают исследования биологически активных метаболи-тов высших базидиальных грибов с целью изучения их практического применения. Особый интерес в данной области вызывают грибы, являющиеся деструкторами древе
сины. Около 75 % видов от общего числа кси-
лотрофных базидиомицетов способны синтезировать вещества, обладающие лекарственной способностью. В связи с этим становятся актуальными исследова-ния регуляции метаболизма, а также выявление фазы развития плодового тела гриба на которую приходит-ся максимальное содержание биологически активных соединений. В последние десятилетия наибольшее внимание уделяется редким и малоизученным в этом отношении видам.
Ксилотрофный базидиомицет laetiporus
sulphureus
(Bull.: fr
.) Murr. относится к грибам бурой гнили. Ос-
новной ареал l. sulphureus расположен в зоне широко-
лиственных лесов. На территории Сибири данный гриб является редким, но встречается во многих районах и поэтому представляет собой элемент постоянной био-ты. l.
sulphureus легко культивируется как в лабора-торных, так и в природных условиях, в короткий срок образует плодовые тела большой биомассы и обладает выраженной антимикробной, протеолитической и ан-тиоксидантной активностью.
Выделяют четыре стадии онтогенетического раз-
вития высших базидиомицетов: вегетативного роста, зачатков, развития плодовых тел, образования базиди-оспор и старения, характерных для однолетних пло-довых тел. Каждая из этих стадий характеризуется определенным физиологическим состоянием гриба, своеобразными метаболическими процессами и тре-бованиями к условиям среды. Для понимания характе-ра накопления биологически активных соединений в плодовых телах l.
sulphureus в разные периоды роста нами было проведено изучение химического состава плодовых тел гриба в трех фазах роста: фазе образова-ния зачатков плодовых тел (I), фазе зрелых плодовых тел (II) и фазе стареющих плодовых тел (III).
Результаты исследования показали, что органичес-
кие кислоты в плодовых телах находятся L. sulphureus в свободной и связанной формах, общее содержание их со
ставляет 1.21–5.05 %. При определении соотношения
связанных и свободных форм в общей сумме органи-ческих кислот наблюдается следующая тенденция: со-держание свободных кислот минимально в стадии за-ча
тков плодовых тел (1.21 %), увеличивается к середине
вегетации (1.44 %, фаза зрелости), а затем уменьшается
(1.25 %). Для связанных кислот наблюдается обратное:
содержание кислот максимального уровня достигает в пе
риод старения плодового тела гриба (3.80 %); в пе-
риод зрелости плодовых тел уровень связанных орга-ни
ческих кислот оказывается меньшим (1.67 %), чем в
период образования зачатков (2.06 %). На фазу старения
плодовых тел L. sulphureus приходится наибольшее ко-личество общего содержания органических кислот.
Исследования углеводного комплекса в разные
фазы развития плодовых тел L. sulphureus показали, что для свободных углеводов, в том числе маннита, щелочерастворимых полисахаридов и хитина харак-терно накопление в конце периода роста: 25.21, 33.53 и 4.9
% соответственно. Содержание водорастворимых
полисахаридов достигает максимума в период зрелос-ти плодовых тел, данный факт может быть обусловлен необходимостью запаса питательных веществ в пери-од образования базидиоспор.
Также в фазу зрелого плодового тела выявлено
наивысшее со
держание: аминокислот – 1.92 %, липи-
дов
– 1.24 % и каротиноидов – 5.1 % (табл.). Для бел-
ков и фенольных соединений наивысший уровень ха-рактерен для плодовых тел в начале вегетации (табл.).
Физиология и биохимия грибов 117
Таблица
Содержание биологически активных соединений
в плодовых телах l . sulphureus
Фаза развития
плодового телаАминокис-
лоты, %Белки,
%Фено-
лы, %Липи-
ды, %Каротинои-
ды, мг
%
i 1.69 0.46 3.86 0.83 4.37
ii 1.92 0.34 1.95 1.24 5.10
iii 1.81 0.19 1.58 0.75 4.73Полученные данные свидетельствуют о наибольшем
содержании биологически активных веществ в фазе
зрелого плодового тела, что говорит о высокой биосин-тетической активности в данный период развития l.
sulphureus . Полученные сведения имеют практическую
значимость как основание для разработки лекарствен-ных средств из данного вида базидиомицетов.
НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ИССЛЕДОВАНИЮ СОСТАВА КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ ГРИБОВ
Андриянова Д.А., Мейчик Н.Р., Николаева Ю.И., Галанина Л.А., Феофилова Е.П.
Институт микро
биологии имени Н.С. виноградского РАН
Московский Государственный Университет имени М.в. ломоносова,
Москва
Клеточная стенка (КС) мицелиальных грибов явля-
ется наружной структурой, выполняющей важнейшие функции: защищает клетку от действия неблагопри-ятных внешних факторов, контролирует морфогенез и апикальный рост, участвует в репродукции, опре-деляет антигенные и адгезивные свойства. Хотя КС грибов известна более двух столетий, эта структура недостаточна изучена по своему химическому составу. Основными причинами, тормозящими исследования в этом направлении являются: трудность выделения чистой фракции КС и традиционность в методах иден-тификации ее биополимеров. В последние годы разра-батываются в основном методы определения амино-полисахаридов (хитина и хитозана) и их комплексов с глюканами в связи с большой практической значимос-тью этих биополимеров. В настоящем исследовании поставлена цель разработать методы выделения чис-той фракции КС мукоровых грибов, и сделана попыт-ка использовать для определения химического соста-ва биополимеров КС методы, используемые в химии синтетических полимеров, которые в настоящее время начинают широко использоваться для определения со-става биополимеров КС некоторых растений. Отличи-тельной особенностью предлагаемого в работе подхода является исследование полимеров КС как целостного компонента клеточной структуры без использования методов химической деструкции. Работу проводили с мук
оровым грибом Cunninghamella japonica BkMf-
1204 (-), относящимся к классу zygomycetes, порядку Mucorales, семейству Mucoraceae. Выделение КС про-водили путем обработки гомогенизированной в жид-ком азоте биомассы вегетативного мицелия ультразву-ком (установке Ultrasonic disintegrator type UD-20 by Techpan), смесью этилового спирта и хлороформа для извлечения липидов, с последующей стандартизацией клето
чной стенки в цикле 100 мM NaOH – Н2О – 100
мМ HCl – Н2О. Конечную стадию отмывки КС водой
проводили до отсутствия хлорид-ионов в промывных водах. Цитологический анализ с целью установления степени очистки изолированных клеточных стенок проводили методами световой микроскопии. Крите-рием полноты очистки клеточных стенок служило от-сутствие в препарате ядер и их фрагментов (наиболее крупных компонентов протопласта). Ядра окрашивали DAp
I (4’, 6-diamidino-2-phenylindole) по общепринятой
методике. В работе использован моторизованный мик-роск
оп Axioplan 2 imaging MOT («zeiss», Германия) с
программным обеспечением Axiov ision 4.2 («zeiss»,
Германия), оснащенный цифровой камерой AxioCam HRc («
zeiss», Германия). Методом потенциометри-
ческого титрования и методом неводного титрования определили качественный и количественный состава ионогенных групп полимеров КС мукорового гриба. Проведена статистическая обработка эксперименталь-ных данных и выбрана модель для описания кривых потенциометрического титрования КС C.japonica. По-казано, что модель Грегора адекватно описывает полу-ченные экспериментальные кривые.
ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТР АЦИИ ФЕНОЛА НА РОСТ И СИНТЕЗ ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ
ФЕРМЕНТОВ ГРИБОМ len TinuS TiGrinuS И БАКТЕРИЕЙ rHodococcu S
erYTHro
PoliS ПРИ Р АЗДЕЛЬНОМ И СОВМЕСТНОМ КУ ЛЬТИВИРОВАНИИ
Атыкян Н.А., Костина Е.Г., Ревин В.В.
Мор
довский государственный университет имени Н.П. огарева,
Саранск
Фенольные соединения, как известно, являются
одними из самых токсичных и широко распростра-ненных загрязнителей окружающей среды. По встре-чаемости в биосфере и экологической опасности они занимают третье место после тяжелых металлов и нефтепродуктов и являются основными токсичными
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 118
компонентами и/или отходами ряда производств. В
связи с этим количество фенолов в окружающей среде должно быть сведено до минимума. Наряду с модер-низацией традиционных химических методов утили-зации этих веществ, разрабатываются новые методы. Наиболее перспективными в этом плане являются биотехнологические методы по вовлечению специаль-но подобранных ассоциаций микроорганизмов в био-деградацию фенольных соединений. Биодеградация этих со
единений в природе – сложный многоступен-
чатый и черезвычайно длительный, а поэтому и мало-эффективный процесс, осуществляемый сообществом почвенных микроорганизмов. Поскольку лигнолити-ческие грибы известны как эффективные деструкторы разнообразных токсичных веществ и, как показали наши предварительные данные, способны снижать со-держание свободного фенола в культуральной среде, на первом этапе наших исследований мы изучали, как изменяется синтез окислительных ферментов гриба в пр
исутствии 1 и 5 % фенола, при этом в качестве косуб-
страта использовали лигносульфонат в концентрации 0, 5 %
по а.с.в. Отбор проб, определение общей оксидаз-
ной активности (по окислению пирокатехина) и белка осуществляли каждые двое суток. В качестве контроля использовали глюкозную среду без добавления фенола и лигносульфоната. Наши исследования показали, что в вариантах с фенолом, рост культуры гриба был очень слабым, ферментативная активность была ниже или со-поставима с контрольным (на глюкозе), максимум на-блюдался на 6 сутки культивирования.
Различные представители рода rhodococcus
спо-
собны усваивать фенол и хлорфенолы в качестве единственного источника углерода и энергии, что под-тверждает их высокий биодеградивный потенциал и в связи с этим важную роль в биоремедиации загрязнен-ных почв и воды. Поэтому на втором этапе мы про-водили культивирование бактерий r.
erythropolis ВКМ
Ас-858Т при тех же условиях, что и гриб lentinus ti-
grinus. В результате проведенных нами исследований было обнаружено, что культура бактерий активно рас-тет и синтезирует довольно активные оксидазы. При этом наблюдается два пика синтеза ферментов, что связано, по-видимому, с синтезом нескольких изоформ оксидаз.
На следующем этапе мы попробовали объединить
эти две культуры и прокультивировать их совмест-но при тех же условиях. Исследования по влиянию фенола на синтез оксидаз при совместном культиви-ровании rho
dococcus erythropolis и lentinus tigrinus
п
оказали, что переход к совместному культивиро-
ванию не вызывает ингибирования роста культур, а на
против – приводит к синтезу более активных форм
оксидаз. При этом наблюдается 2 пика проявления ак
тивности – первый пик совпадает по времени с
активным синтезом окислительных ферментов Rho-
dococcus erythropolis , а второй пик, по-видимому,
обусловлен синтезом дополнительно и грибных окис-лительных ферментов.
Таким образом, переход к совместному культиви-
рованию rhodococcus
erythropolis и lentinus tigrinus
приводит к синтезу более активных форм оксидаз, при этом ингибирующий эффект фенола на ростовые и синтетические процессы намного ниже, чем при мо-нокультивировании.
ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ПЛОДОВЫХ
ТЕЛ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
Бабицкая В.Г.1, Трухоновец В.В.2, Смирнов Д.А.1, Щерба В.В.1,
Осадчая О.В.1, Филимонова Т.В. 1, Черноок Т.В.1
1Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
2 Институт леса НАН Беларуси,
Гомель
Наиболее известными лекарственными базидио-
мицетами являются грибы родов Ganoderma, lentinus ,
Pleurotus, Hericium, auricularia, Schizophyllum . Они
оказались продуцентами целого ряда биологически ак-тивных веществ: белков, липидов, полисахаридов, ор-ганических кислот, ферментов, витаминов и д.р. Мно-гие из этих соединений являются фармакологически активными и, по сравнению с продуктами химическо-го синтеза, менее токсичными и более эффективными при применении в медицинской практике.
В мире насчитывается около 2 тысяч видов съе-
добных шляпочных грибов, являющихся сырьем для производства целого ряда нутрицевтиков, лекарствен-ных и косметических препаратов. Сегодня производят свыше 5 млн т съедобных грибов на сумму более 10 млрд долларов США. Первое место среди них зани-мает
шампиньон (37,6 %), затем виды рода вешенка
(16,8 %), шии-таке (16,2 %), и т.д. Родиной культивиро-вания большинства съедобных грибов являются Даль-ний Восток и Юго-Восточная Азия. И только вешенку обыкновенную впервые начали выращивать в Европе (в Германии) в начале XX столетия. Активные работы в этом направлении ведутся на Украине. Возрос интерес к выращиванию грибов в России и Беларуси. Однако грибоводство в РБ находится на стадии становления и не в состоянии удовлетворить растущий спрос на
Физиология и биохимия грибов 119
грибную продукцию. Ежегодные объёмы производс-
тва съедобных грибов составляют 300–400 т, что в 30 раз меньше минимальных годовых потребностей рес-публики в этой деликатесной продукции. Выращива-ется всего 2–3 вида. Наибольший интерес в последнее время в Беларуси проявляется не только к вешенке, но и к таким грибам как рейши и зимний опенок, иудино ухо, гериций шиповатый, шии-таке.
Учитывая вышеизложенное, нами был изучен со-
став плодовых тел грибов Ganoderma lucidum, Hericium
erinaceus, Pleur
otus eringia, auricularia auricular-judea
и Schizophyllum commune, выращенных на различных
лигноцеллюлозных субстратах.
На всех использованных субстратах данные гри-
бы синтезируют полноценный комплекс биологичес-ки ак
тивных соединений: белок составляет 10–30 %,
липиды − 2,0–6,0 %, фосфолипиды в липидах дости-гают
30–54 %, полисахариды составляют 7,5–24,6 %,
фенольные соединения − 800–2700 мг %. В липидах грибов преобладают ненасыщенные жирные кислоты (73–80
%), количество кислоты С18:2 − 54–67 %.Лучшим соотношением древесных субстратов для
синтеза биологически активных веществ грибами ока-зались:
для H. erinaceus и p. eringia − рябина-опилки
3:1 и для A. auricular-judea − 5,6:1, для G. lucidum − опилки о
сины – отруби 5,6:1, для S. commune − зерно-
вой
мицелий. экстракты всех грибов обладают высо-
кой
антиокислительной активностью − до 67–95 % по
отношению к ионолу.
В плодовых телах гриба G. lucidum, полученных
по технологии, разработанной Институтом леса НАН Беларуси, содержится полноценный комплекс физио-логически активных соединений. Отличительная осо-бенно
сть этого гриба – высокое содержание феноль-
ных со
единений (1350–2700 мг %). В составе липидов
гриба G. lucidum преобладают полиеновые кислоты (73–84
%) и присутствует значительное количество
фосфолипидов (до 58 %).
Полученные результаты показывают перспектив-
ность использования плодовых тел исследуемых гри-бов для получения препаратов функционального и ле-чебно-профилактического назначения.
ЛИПОФИЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ armillaria cePiSTiPeS Velen.
Баяндина И.И.1, Горбунова И.А.1,
Деревянко А.Г.2, Kукина Т.П.3
1 Центральный сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
2 Новосибирский Государственный Университет,
Новосибирск
3 Новосибирский институт органической химии Со РАН,
Новосибирск
Впервые исследован состав липофильных ком-
понентов плодовых тел базидиального гриба опенка ос
еннего серого (Armillaria cepistipes velen.). этот
преимущественно сапротрофный вид произрастает на пнях лиственных древесных пород и на почве среди травы группами или отдельно. В литературе сведения о химическом составе липофильных компонентов это-го гриба практически отсутствуют.
Сырье заготовлено на юге красноярского края в
сентябре 2006 года.
Для исследования состава плодовые тела грибов
фракционированы вручную на шляпки и ножки, каждая фракция измельчена при помощи шнековой дробилки и проэкстрагирована метил-трет-бутило-вы
м эфиром (МТБ э) в аппарате Сокслета. Липофиль-
ные компоненты отделены от водорастворимых рас-пределительной экстракцией вода: гексан или вода: МТ
Бэ.
Липофильные компоненты исследовали при помо-
щи хроматомасс-спектрометрии. Пробоподготовка за-ключалась в разделении липофильной части экстракта на кислые и нейтральные составляющие путем омы-ления водно-спиртовым раствором щелочи. Кислоты переводили в метиловые эфиры при помощи диазо-метана, нейтральные компоненты исследовали без дериватизации. В составе кислой фракции из ножек грибов идентифицированы алифатические кислоты: пентадекановая, пальмитиновая, пальмитолеиновая, олеиновая, линолевая, линоленовая, стеариновая и тетракозановая. Более половины фракции составляет линолевая кислота. Среди нейтральных компонентов основным является эргостерин, обладающий актив-ностью провитамина D. Кроме него, идентифициро-ваны фунгистерин, эргоста-7, 22-диен-3в-ол, (22Е)-эргоста-5, 7, 9(11), 22-тетраен-3в-ол и сквален. Около 10
% входящих компонентов не удалось однозначно
идентифицировать ввиду отсутствия в базе данных со-ответствующих масс-спектров.
Аналогично исследовали экстракт шляпок
Armillaria cepistipes velen.
Кислоты фракционировали
на свободные и связанные путем экстракции 2 %-ным
водным раствором щелочи. Соотношение свободные:связанные 1:14. Связанные кислоты находятся в сырье в основном в виде жиров и эфиров с эргостерином и другими тритерпеновыми спиртами.
Среди свободных кислот основными являются
олеиновая, линолевая, пальмитиновая, пальмитоле-иновая, стеариновая, тетракозановая и 15-тетрако-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 120
зеновая кислоты. Кроме того, идентифицированы
минорные компоненты: лауриновая, миристиновая, пентадекановая, дегидроабиетиновая, трикозановая, гексакозановая, гексакозеновая, октакозановая, три-ак
онтановая кислоты. Около 5 % фракции составля-
ют тритерпеновые кислоты, состав которых уточня-ется.
Связанные кислоты представлены олеиновой, ли-
нолев
ой (50 % фракции), пальмитиновой, пальмито-
леиноваой, стеариновой кислотами, в сумме состав-ляющими бо
лее 90 %. Среди минорных компонентов
идентифицированы лауриновая, миристиновая, пен-тадекановая, арахиновая, дегидроабиетиновая, тетра-козановая, 15-тетракозеновая, гексакозеновая, гадоле-иновая кислоты. Присутствует следовое количество фенолокислот.
В неомыляемом остатке идентифицированы эр-
гостерин, фунгистерин, эргоста-7, 22-диен-3в-ол, (22Е)-эргоста-5, 7, 9(11), 22-тетраен-3в-ол, ланосте-рин, неоэргостерин, эргоста-5, 8-диен-3в-ол, антраэр-гостатетраенол и сквален. Фракция содежит заметное количество эргона (эргоста-4, 6, 8(14), 22-тетраен-3-она), для которого, согласно литературным данным, установлена цитотоксическая активность, а также до 5
% неустановленных ланостаноидов, масс-спектры
которых отсутствуют в базе данных. Полученные дан-ные позволяют использовать изученное сырье как ис-точник БАВ.
САХАРОЗАМЕНИТЕЛЬ эРИТРИТОЛ ИЗ ПЛОДОВЫХ
ТЕЛ armillaria cePiSTiPeS Velen.
Баяндина И.И.1, Горбунова И.А.1, Деревянко А.Г.2, Kукина Т.П.3
1 Центральный сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
2 Новосибирский Государственный Университет,
Новосибирск
3 Новосибирский институт органической химии Со РАН,
Новосибирск
В современном мире ведется множество работ по
изучению состава грибной клетки, так как многие ее компоненты обладают широким спектром физиологи-ческой активности, не оказывая при этом существен-ных побочных эффектов.
Особый интерес сегодня представляют сахароза-
менители природного происхождения, среди которых большое значение имеют полиолы (маннитол, сорби-тол, ксилитол, эритритол). По сладости они близки к сахарозе, однако их употребление не приводит к зна-чительному повышению уровня глюкозы в крови, что важно для людей, больных диабетом или страдающих от лишнего веса. При этом эритритол (C4H10O4) обладает наиболее выгодным сочетанием данных свойств. Если маннитол, сорбитол, ксилитол при сла-до
сти от 45 до 200 % по сравнению с сахарозой име-
ют калорийность 300–400 ккал/100г, то эритритол, сл
адость которого составляет 70 % от сладости саха-
розы, имеет калорийность 20 ккал/100г. В результате эритритол можно употреблять без риска ожирения и гипергликемии. В силу своих маленьких размеров и компактной структуры он быстро усваивается в ма-лом кишечнике, благодаря чему хорошо переносится желудком и не обладает побочными свойствами, при-сущими другим заменителям: горьким привкусом, слабительным и мочегонным эффектом, не вызывает кариеса.
Одними из источников полиолов являются грибы,
в которых в значительном количестве содержатся ман-нито
л и эритритол. экстракция спиртами приводит к смеси этих полиолов, использование в качестве экс-траг
ента метил-трет-бутилового эфира (МТБэ) позво-
ляет выделить эритритол селективно.
В качестве исследуемого сырья мы использовали
плодовые тела опенка armillaria cepistipes Velen. этот
преимущественно сапротрофный вид произрастает на пнях лиственных древесных пород и на почве среди травы группами или отдельно. Химический состав сы-рья этого вида, широко распространенного в Сибири, практически не изучен.
Сырье заготовлено на юге красноярского края в
сентябре 2006 года.
эк
стракция грибов проводилась МТБэ в аппарате
Сокслета. Измельченные на шнековой дробилке ножки и шляпки грибов экстрагировались и анализировались раздельно. Фракционирование экстракта на липофиль-ные и гидрофильные компоненты при помощи гексана, МТБэ
и воды привело к выпадению белых кристал-
лов с температурой плавления 89–91° С, что совпада-ет с литературными данными по эритритолу. Чистота и строение выделенного соединения подтверждены спектрами ЯМР
1Н и 13С. Следует отметить, что содер-
жание эритритола в ножках грибов в 8–10 раз выше, чем в шляпках.
Селективность метода и доступность грибов дан-
ного вида делает этот способ получения эритритола достаточно технологичным. Использование в качестве сырья мицеллиальной биомассы armillaria
cepistipes
Velen. может повысить рентабельность процесса из-влечения эритритола.
Физиология и биохимия грибов 121
Микроскопические грибы обладают высоким потен-
циалом выживания в экстремальных условиях сущест-
вования, включая субстратное лимитирование, изме-нение влажности, температуры, осмотический стресс, ионизирующее излучение. Высокая резистентность грибов обусловлена способностью клеток противосто-ять стрессорным агентам физической и химической природы и обезвреживать активные формы кислорода (АФК), возникающие в гифах в результате постоянного воздействия неблагоприятных факторов внешней сре-ды. Разнообразие механизмов антиоксидантной защиты (инактивация АФК, снижение образования внутрикле-точных АФК путем изменения метаболических путей, синтез вторичных метаболитов) позволяет клеткам про-тивостоять действию стрессорных факторов. Показано, что наиболее характерными особенностями мицели-альных грибов, приспособившихся к существованию в зоне повышенной радиации, являются агрегация гиф, олиготрофия, способность к образованию пигментов и высокая резистентность к действию Н
2О2.
Целью данной работы было сравнение кинетики
роста гиф у штаммов Р. lilacinus из зон с контрольным и
повышенным уровнем радиации (зона Чернобыльской АэС)
в зависимости от концентрации глюкозы в среде.
Содержание карбонильных групп в белках использова-ли в качестве показателя окислительного стресса.
По
казано, что при выращивании p. lilacinus на сре-
да
х с разным содержанием глюкозы (0–20 %) у кон-
трольного штамма радиальная скорость роста коло-ний в экспоненциальной фазе роста была постоянной (К
rэксп.=0,09±0,01 мм/ч). У штамма из зоны ЧА эС ско-
рость роста в присутствии субстрата была выше, чем у контрольного, и зависела от концентрации глюкозы. Максимальная скорость роста (0,15±0,01 мм/ч) выявля-ла
сь при 0,2 % глюкозы, а в диапазоне от 0,5 до 15 % Кrэксп. составляла 0,12±0,01 мм/ч. Однако длитель-ность экспоненциальной фазы у штамма, устойчивого к ра
диации, была короче. При 20 % глюкозы была отмече-
на задержка начала роста колоний у обоих штаммов на 3, 5–4 суток. Полученные данные показывают, что для штамма чернобыльской зоны характерен выраженный оптимум роста в условиях низкого содержания углерода в среде. Образование пигментов (оксиантрахинонов) у об
оих штаммов p. lilacinus наблюдалось в стационарной
фазе и возрастало при увеличении концентрации глюко-зы в среде. Содержание карбонильных групп в белках у почвенного штамма в отсутствии глюкозы составляло 3,4±0,4 наномоль/мг белка и снижалось по мере воз-растания глюкозы в 2 раза. У устойчивого к излучению штамма в отсутствии глюкозы содержание карбонилов было ниже (2,4±0,1); этот показатель практически не менялся при повышении концентрации глюкозы в сре-де. Обработка мицелия Н2О2 (10мМ, 1 ч) при уровне гл
юкозы в среде 0, 2 % значительно больше повышала
содержание карбонильных групп в белках у контроль-ного штамма (в 2 раза) по сравнению с чернобыльским (н
а 30 %), что согласуется с его более высокой устой-
чивостью к действию Н2О2. Обработка Н2О2 в той же ко
нцентрации при росте мицелия на среде с 2 % глю-
козы вызывала увеличение содержания карбонилов в 2 раза у обоих штаммов. Полученные результаты по-казывают, что у чернобыльского штамма повышенная устойчивость к действию высоких концентраций Н2О2 выявляется при низком содержании глюкозы.
Таким образом, выявленные у чернобыльского штам-
ма P .lilacinus активация роста и повышенная устойчи-
вость к Н
2О2 при низкой концентрации доступного суб-
страта, а также агрегированный рост гиф обеспечили его выживаемость и конкурентноспособность в экстремаль-ных условиях высокого радиоактивного загрязнения.МЕХАНИЗМЫ АДАПТАЦИИ P aecilomYceS lilacinuS (THOM)
sAM
sON К эКСТРЕМАЛЬНЫМ УСЛОВИЯМ СУЩЕСТВОВАНИЯ
Белозерская Т.А.1, Иванова А.Е.2, Гесслер Н.Н.1, Асланиди К.Б.3, Егорова А.С.2
1 Институт биохимии им. А.Н. Баха УРАН,
Москва
2 Факультет почвоведения МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
3 Институт теоретической и экспериментальной биофизики УРАН,
Пущино, Моск. обл.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНЫХ ЗНА ЧЕНИЙ РН И ТЕМПЕР АТУРЫ
ДЛЯ КУ ЛЬТИВИРОВАНИЯ IRpEX LACTEUs fR А-ДОН-02-ПРОДУЦЕНТА
ПРОТЕИНАЗ МОЛОКОСВЕРТЫВАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ
Бойко М.И., Кузнецова И.А., Белун А.В.
Донецкий национальный университет,
Донецк
Среди факторов внешней среды, оказывающих
влияние на рост и биосинтетическую активность гри-бов, важную роль выполняет температура и рН среды (Лилли В.
и Барнетт Г., 1953; Беккер З.э., 1963 и др.).
Каждый вид гриба способен развиваться лишь в опре-деленных температурных пределах и значениях рН. От
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 122
уровня кислотности среды зависит поступление пита-
тельных веществ у клетки гриба и проявление им раз-личных физиологических процессов. Учитывая значе-ние этих факторов для жизни грибов, нами проведены исследования по определению оптимальных значений рН и температуры для роста и биосинтетической ак-тивности
штамма А-Дон-02 Irpex lacteus – нового ак-
тивного продуцента протеиназ молокосвертывающего действия.
Гриб культивировали на глюкозо-пептонной среде
с рН 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8 при температурах 26. 28, 30, 32 и 34
о С.
Установлено, что культуральный фильтрат (КФ)
гриба, произраставшего на питательной среде с рН 2 и температурах 26, 30 и 34
о С молокосвертывающей
активностью (МСА) не обладал, а КФ штамма А-Дон-02, произраставшего при 28 и 32
о С проявил слабую
молокосвертывающую активность.
Молокосвертывающая активность культурального
фильтрата штамма А-Дон-02, произраставшего на сре-де с рН 3 и температуре 28
о С, увеличивалась в 2,3 раза
по сравнению с температурой 30о С и в 6,3 раза, чем
при температуре 32 и 34о С.
Увеличение активности протеиназ молокосверты-
вающего действия I. lacteus А-Дон-02 наблюдалось при его культивировании на средах с рН 4 и температурах в пределах
26 – 34о С. Температура в пределах 28 – 32о С
была оптимальной для синтеза экзопротеиназ штамма А-Дон-02.Активность молокосвертывающего фермента у
гриба, произраставшего на питательных средах с рН 5 снижалась по сравнению с активностью энзима, оп-ределенной при рН 4 и температурах 28, 32 и 34
о С, а
культур, произраставших при рН 5 и температурах 26 и 30
о С находилась на уровне предыдущего варианта
опыта.
Активность протеиназ молокосвертывающего
действия штамма А-Дон-02 при культивировании на средах с рН 6 находится на уровне активности культур, произраставших при рН 4 и температурах 28–32
о С.
Питательная среда с рН 7 и 8 вызывает снижение
активности протеиназ молокосвертывающего дейс-твия у штамма А-Дон-02 I. lacteus.
Накопление биомассы штаммов А-Дон-02 при раз-
ных значениях рН среды происходило с различной скоростью. На средах с рН 2 и 3 образование сухого вещества гриба происходило очень слабо. На средах с рН 4 наибольшее количество биомассы образовыва-лось
при 26, 28 и 32 °С и достоверно меньшее – при 30
и 34 о С. Более активное накопление сухого вещества штаммом А-Дон-02 I. lacteus происходило на средах с рН 7 и 8.
Таким образом, полученные данные свидетельс-
твуют о том, что синтез экзопротеиназ молокосвер-тывающего действия у гриба I. lacteus в наибольшей мере осуществляется при рН 4, а образование био-ма
ссы на средах с рН 7 – 8 и температурах в пределах
28 – 32о.
БИОСИНТЕЗ α-Ν-АЦЕТИЛГ АЛАКТОЗАМИНИДАЗЫ
И α-Г АЛАКТОЗИДАЗЫ AspERGILLUs NIGER
И ВОЗМОЖНОСТИ ЕГО РЕГУ ЛЯЦИИ
Борзова Н.В.
Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного,
киев
Предметом наших исследований были 2 фермен-
та класса гидролаз, подкласса гликозидаз: α-Ν-аце-тилгалактозаминидаза (α-2-ацетамидо-2-дезокси-D-галак
тозид ацетамидодезоксигалактогидролаза – КФ
3.2.1.49) и α-галактозидаза (α-D-галактозид галакто-гидролаза
– КФ 3.2.1.22) aspergillus niger Thom. Изу-
чение синтеза экзоферментов микромицетами имеет не только теоретическое значение (для использования в качестве высокоспецифических агентов при изуче-нии структуры сложных биополимеров), но в первую очередь исключительно важное практическое в связи с широким спектром применения ферментных препа-ратов в новейших медико-технологических процессах: унифицировании эритроцитов ІІ и ІІІ групп крови в донорские эритроциты, ксенотрансплантации, созда-нии тест-систем.
На основании сравнительного изучения 1514
различных штаммов было отобрано 18 штаммов a.
niger , отличающихся наиболее узким спектром гликозидазных активностей в культуральной жид-кости на фоне высоких значений активности α-Ν-ацетилгалактозаминидазы и α-галактозидазы. Фер-ментативную активность определяли по действию на соответствующие п-нитрофенильные субстраты.
Варьирование компонентов среды позволяет полу-чать преимущественно α-Ν-ацетилгалактозамини-дазу или α-галактозидазу.
Показан индуцирующий эффект галактозамина,
глюкозамина, галактозы, мальтозы, сахарозы и глю-козы, который в зависимости от штамма составлял от 50 до
200 %. Значительная активация синтеза α-Ν-аце-
тилгалак
тозаминидазы (от 34 до 180 %) наблюдалась
при использовании в качестве индукторов комплексо-образующих
веществ – нитроаминогуанизона димети-
ламинобенза
льдегида (0,05 %), нитроаминогуанизона
салицилового альдегида (0,1 %), гуанидин карбоната (0,25 %) и гуанидина хлорида (0,1 %). Использование в качестве индуцирующего агента бычьей крови (1 %)
Физиология и биохимия грибов 123
привело к увеличению активности α-Ν-ацетилгалакто-
заминидазы одного из штаммов в 3,6 раза. При внесе-нии в среду роста координационных соединений гер-мания с оксиэтилиминодиуксусной, иминодиянтарной и оксиэтилидендифосфоновой с триоксиглутаровой кислот
ами, в концентрации 0, 1, 0, 01 и 0, 01 % уда-
лось добиться повышения выхода α-галактозидазы на 105,65 и 46
% соответственно.
Было показано, что различные штаммы по раз-
ному реагируют на использование комплексообра-зующих веществ и координационных соединений германия, что может свидетельствовать о том, что их гликозидазные ферментные комплексы отличают-ся по специфичности и механизму действия. И для каждого штамма требуется индивидуальный подбор компонентов питательной среды и поиск индукторов биосинтеза.
В результате нами был отобран один штамм A.
niger, из культуральной жидкости которого, в резуль-та
те очистки в 600 раз с выходом 28 %, был получен
ферментный препарат с α-Ν-ацетилгалактозаминидаз-ной и α-галактозидазной активностями 10,5 и 25 Е/мг белка соответственно.
Полученные результаты предполагают различные
спектры применения получаемых ферментных препа-ратов и включение отобранных штаммов в число пер-спективных продуцентов α-Ν-ацетилгалактозаминида-зы и α-галактозидазы.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОСЦИЛЛЯЦИЙ СКОРОСТИ
АПИКАЛЬНОГО РОСТА МИЦЕЛИЯ У ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ
РОДА ulocladium
Быстрова Е.Ю.1, Панина Л.К.1, Богомолова Е.В.2
1 Санкт-Петербургский государственный университет,
Санкт-Петербург
2 Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
В последние годы получен ряд результатов, де-
монстрирующих колебательный характер апикально-го роста мицелия у 7 видов грибов, представляющих основные
таксономические группы (Oomycetes, zygo-
mycetes, Deuteromycetes, Ascomycetes, Basidiomycetes), с частотой 2,7–14 осцилляций/мин в зависимости от вида [1]. Подобное явление, природа которого до сих пор не вполне ясна, получило название пульсирующе-го роста и интерпретируется, главным образом, как проявление ультрадианных ритмов. Ряд авторов свя-зывает возникновение колебаний с функционировани-ем апикального тельца или периодическими измене-ниями тургора апикального участка клеточной стенки гифы [2]; объясняет их существование возможностью роста апикального участка грибной гифы не только в горизонтальной, но и в вертикальной плоскости [3]; рассматривает пульсирующий рост мицелия как слу-чайные флуктуации, т.н. шум [4].
С помощью цифровой микрофотосъемки с регу-
лярными 5- и 15-минутными интервалами, нами по-лучены данные, свидетельствующие о существовании околочасовых колебаний скорости апикального роста мицелия у видов ulocladium
chartarum и ulocladium
botrytis
. Анализ результатов выявил степенное рас-
пределение периодов флуктуаций скорости роста. При дискретных 5-минутных отсчетах периоды колебаний находились в диапазоне 10–30 минут для обоих ви-дов; при
15-минутных измерениях – варьировали от
30 до 135 мин. (u. chartarum ) и от 30 до 90 мин. (U.
botrytis). Амплитуда осцилляций изменялась от 0,03 до 3,50 мкм/мин (u.
chartarum ) и от 0,37 до 3,40 мкм/мин (u. botrytis). Величина среднего периода колебаний, в отличие от амплитуды, не зависит от состава питатель-ной среды и от скорости роста микромицетов.
В связи со сложностью биологической интерпре-
тации результатов, был проведен анализ временных рядов методами нелинейной динамики, который вклю-чал оценку показателя Херста, доминантных частот, построение частотных спектров колебаний с исполь-зованием быстрого преобразования Фурье. Установле-но, что исследуемые временные последовательности обладают свойством масштабной инвариантности, или скейлинговой структурой: при увеличении масштаба структура колебаний практически повторяется, одна-ко изменение масштабного множителя приводит к со-ответствующему (кратному) изменению характерных периодов. Обнаруженный эффект скейлинга, а также широкополосные частотные спектры колебаний ско-рости роста, не имеющие периодической компоненты, могут указывать на хаотическую природу процесса. Вследствие этого, пульсирующий рост необходимо дифференцировать от истинных ультрадианных рит-мов.
Литература:1. Lopez-
franco R. et al. // proc. Natl. Acad. Sci. USA,
1994. v. 91. p . 12228–12232.
2. Johns et al. // Microbiol. Res., 1999. v. 154. p. 225–
231.
3. Jackson
S.L. // New phytologist, 2001. v. 151. p.
556–560.
4. Sampson k
. et al. // Microbiology, 2003. v. 149. p.
3111–3119.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 124
Группа ксилотрофных грибов, занимает важное
место в структуре растительных и лесных биоценозов,
поскольку наличие лигнолитического ферментного комплекса позволяет им полностью разрушать все ком-поненты древесины. Особые физиологические и био-сферные функции фенолоксидаз предполагают участие этих ферментов в процессе морфогенеза грибов.
Целью настоящего исследования явилось сравни-
тельное исследование комплекса фенолоксидаз (лакказ, тирозиназ, Mn-пероксидаз) представителей двух по-рядков базидиальных гименомицетов len
tinus edodes
(Agaricales) и Grifola frondosa (Aphyllophorales), отно-
сящихся к грибам белой гнили и входящих в экогруп-пу лигнинразрушающих ксилотрофов. Выбор данных объектов не случаен, и обусловлен получением из этих съедобных ксилотрофов целого ряда биологически ак-тивных добавок и ценных медицинских препаратов. Трутовик G. frondosa , маитаке, с экологических пози-
ций является паразитом, крайне редко переходя к сап-ротрофному образу существования. Как правило, гриб поражает старые или ослабленные деревья, достаточно быстро разлагая субстрат. l.
edodes , шиитаке, напротив
является сапротрофом и может колонизировать деревья достаточно долгое время, не вызывая их гибели.
Наличие фенолоксидазной активности у грибов
выявляли по их способности окислять AБTС (2, 2’-азино-бис(3-этилбензотиазолин-6-сульфонат)), диме-токсифенол и сирингальдазин. Наиболее интенсивное окрашивание, которое проявлялось через 5 минут пос-ле внесения субстрата на растущую культуру, наблю-далось у G. frondosa, это свидетельствует о том, что
гриб приспособлен к внеклеточному разложению пи-тательных источников и имеет мощную внеклеточную окислительную систему. Внеклеточные фенолоксида-зы l.
edodes разлагали субстрат медленнее и заметно менее интенсивно. Наши исследования показали, что окислительная способность лакказ и Mn-пероксидаз грифолы превосходит таковую шиитаке. Согласно данным спектрофотометрии, активность Mn-перокси-дазы непигментированного мицелия (НМ) G. frondosa
выше таковой НМ l.
edodes в 2 раза, а активность лак-казы
– в 7 раз. Однако наиболее высокую активность
данные ферменты грифолы проявляют на стадии пиг-ментированного мицелия (ПМ), возрастая в 3 раза. В примордиях (ПР) активность лакказы и Mn-перок-сидазы падает, но все же остается в 2 раза выше, по сравнению с НМ. У шиитаке заметной разницы не на-блюдается, активность Mn-пероксидазы увеличивает-ся в 5 раз только на стадии коричневой мицелиальной пленки (КМП), характерной для данной культуры ста-дией морфогенеза, представленной сплетением силь-но пигментированных гиф. Появление этой структуры предшествует плодоношению и сопровождается высо-кой активностью тирозиназы. Данный фермент не был обнаружен ни на одной стадии гриба G. frondosa. При-
сутствие тирозиназы не отмечено также у параллельно изучавшегося ксилотрофного базидиомицета Pleurotus
ostreatus (вешенка), относящегося, как и шиитаке, к
порядку агариковых грибов, но не образующего пиг-ментированных структур.
Результаты электрофореза в неденатурирующих ус-
ловиях показали, что в зависимости от стадий морфо-генеза менялся и состав фенолоксидазного комплекса. В НМ l. edodes
присутствуют четыре формы лакказы
и три формы Mn-пероксидазы. На стадии КМП по три формы лакказы и Mn-пероксидазы, в ПР три формы лакказы и четыре Mn-пероксидазы. У гриба G. frondosa
две формы лакказы присутствуют на всех стадиях мор-фогенеза, а у ПМ обнаружены также три формы Mn-пероксидазы. Тирозиназа обнаружена только у шиитаке и присутствует на всех этапах жизненного цикла бази-диомицета . В НМ присутствует две формы тирозиназы,
как и на стадии КМП, однако различные по молекуляр-ной массе, в ПР обнаружена одна тирозиназа.
Таким образом, наше исследование показало от-
личия в качественном и количественном составе фе-нолоксидазных комплексов грибов в зависимости от стадии морфогенетического развития, а также меж-видовое различие представителей занимающих одну экологическую нишу. Очевидно, подобные отличия внутри группы грибных организмов, позволяют им из-бежать внутренней конкуренции за пищевой ресурс.ОСОБЕННОСТИ ФЕНОЛОКСИДАЗНОГО КОМПЛЕКСА
В ПРОЦЕССЕ МОРФОГЕНЕЗА КСИЛОТРОФНЫХ
БА
ЗИДИОМИЦЕТОВ Р АЗНЫХ эКОЛОГИЧЕСКИХ ГРУПП
Ветчинкина Е.П., Степанова Л.В., Никитина В.Е.
Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов РАН,
Саратов
СБР АЖИВАНИЕ КР АХМАЛА АМИЛОЛИТИЧЕСКИМИ ДРОЖЖАМИ
Голубев В.И.
ИБФМ РАН, всероссийская коллекция микроорганизмов,
Пущино
Не менее трети из известных к настоящему време-
ни видов дрожжей (около 700) ассимилируют крахмал в аэробных
условиях, однако лишь 4 % их могут его
также сбраживать, как правило, медленно и слабо.
Физиология и биохимия грибов 125
28 амилолитических штаммов дрожжей, поддержи-
ваемые во Всероссийской коллекции микроорганиз-мов (ВКМ) проверены на активность сбраживания растворимого крахмала (Difco) Они относятся к 11 видам ро
дов Candida, Debaryomyces filobasidium,
Saccharomyces, Saccharomycopsis, Schizosaccharomyces и Stephanoascus. Кроме крахмала среда инкубации со-держала (г/л) пептон (10,0), двузамещенный фосфор-нокислый натрий (14,2) и дрожжевой экстракт (2,0).
Судя по скорости и объему накапливаемого углекис-
лого газа, наиболее активные культуры найдены среди штаммов C. lodderae, D. occidentalis, Sacch. cerevisiae, S. capsularis и S. fibuligera. Скорость сбраживания значи-тельно повышается с увеличением температуры инкуба-ци
и (от 20° до 30 °С). Через неделю инкубации при 27 °С
в среде с 2 % коммерческого картофельного крахмала
наиболее активные штаммы в монокультуре накаплива-ли от 2° до 4° этанола, количество которого определяли газохроматографически. Активность сбраживания крах-мала зависит, оказалось, не только от таксономической принадлежности, но и от штамма. C использованием монокультур наиболее высокие значения получены со шт
аммами Sacch. cerevisiae (= Sacch. diastaticus) B kM
Y -416 и D. (= Schwanniomyces) occidentalis B kM Y -1639.
При совместном культивировании этих двух штаммов содержание этанола в среде достигало 9,7°.
СКРИНИНГ МИКРОМИЦЕТОВ, СПОСОБНЫХ Р АЗРУШАТЬ
ЦЕЛЛЮЛОЗОСОДЕРЖАЩИЙ СУБСТР АТ
Жданова Н.Н., Василевская А.И., Олишевская С.В., Айзенберг В.Л.,
Курченко И.Н., Артышкова Л.В., Наконечная Л.Т., Капичон А.П.
Институт микро
биологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАН Украины,
киев
Целлюлоза относится к растительным полисахари-
дам, микробная деградация которой является одним из важнейших звеньев круговорота веществ в природе. Осуществление этого процесса имеет глобальное зна-чение, потому что освобождает поверхность планеты от ежегодно образующихся многомиллионных тонн растительных отходов и древесины. В разрушении целлюлозы участвуют различные группы грибов и бак-терий, среди которых существенная роль принадлежит микроскопическим грибам.
В отделе физиологии и систематики микромице-
тов ИМВ НАН Украины проведены исследования способности ряда микромицетов расти и разрушать целлюлозосодержащий субстрат. Объектами изуче-ния были 640 штаммов, принадлежащие к 148 видам 55 родов микроскопических грибов. Грибы выделены из различных местообитаний, главным образом почв, загрязненных и незагрязненных радионуклидами и ио
нами тяжелых металлов. эксперименты проводили
в условиях стационарного культивирования, единс-твенным источником углерода служили образцы фильтровальной бумаги. Продолжительность опытов 14–30 сут и более.
В процессе культивирования отмечали характер ко-
лонизации грибами целлюлозосодержащего субстра-та, наличие или отсутствие роста в толще питательной среды.
В наибольшем количестве (270 штаммов) были
представлены виды сем.
Moniliaceae, относящиеся к рр. Trichoderma, a
sper-
gillus, Penicillium, Fusarium, Thielavia и др. Среди 64
штаммов 10 видов рода Trichoderma интенсивно росли
и разрушали целлюлозосодержащий субстрат 15 штам-мов T. viride, T. atroviride, T. harzianum, Trichoderma sp.
и из 10 видов (71 штамм) рода asper
gillus – только a.
ustus и a. flavipes. Среди 35 видов (74 штамма) рода Рenicillium наиболее активно разрушали субстрат Pen-
icillium jenseni, P . funiculosum, P . velutinum, P . multicol-or и др. Род Fusarium был представлен 11 видами (56
штаммов), из которых лишь F . oxysporum (7 штаммов)
разрушал субстрат через 21 сут.
Среди представителей сем. Dematiaceae изуче-
но 176 штаммов видов рр. alternaria, a
ureobasidium,
cladosporium, botrytis, ulocladium, Humicola, curvu-
laria и др.). Почти половина видов темнопигментиро-
ванных гифомицетов интенсивно колонизировала суб-страт, но разрушала его в течение более длительного срока (1–3 месяца).
Изученные
виды грибов отделов zygomycota
(mucor plumbeus, m. hiemalis, mortierella vinacea , m.
izabellina и
др.) и большинство видов Ascomycota
(Thermoascus aurantiacus, T. termophylus), как правило, не росли на целлюлозосодержащем субстрате. Среди 9 видов (58 штаммов) рода chaetomium, пре
дставители
которого, по данным литературы, характеризуются вы-сокой целлюлозолитической способностью, деструк-цию целлюлозосодержащего субстрата наблюдали лишь у отдельных штаммов c.
globosum, c. aureum и
c. cochlioides .
Нами уст
ановлено, что почти 10 % от общего коли-
чества изученных штаммов грибов не росли на целлю-лозосодержащем субстрате.
Потенциальная способность грибов рр. alternaria,
Fusarium,
Penicillium разрушать целлюлозосодержа-
щий субстрат была подтверждена в результате про-ведения качественных реакций с использованием карбоксиметилцеллюлозы, о чем свидетельствовало образование зон просветления среды вокруг колоний изученных штаммов грибов.
Отобранные штаммы микромицетов будут прове-
рены на способность расти и разрушать различные типы растительных остатков.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 126
Глюкозооксидаза (ГО) (β-D-глюкозо: О2–1-окси-
доредук
таза, КФ 1.1.3.4.) – фермент класса оксидоре-
дуктаз, катализирующий окисление β-D-глюкозы до
β-D-глюконолактона и пероксида водорода. Фермент
широко используется в пищевой промышленности в качестве антиоксиданта и консерванта, в медицине − в
качестве диагностического и терапевтического средс-тва. В химической промышленности фермент приме-няется для получения гидрохинона, глюконовой кис-лоты и ее солей.
Для создания современных и рентабельных техно-
логий получения препаратов глюкозооксидаз, также как и других ферментов, необходимо наличие высоко-активных продуцентов. В связи с этим большое внима-ние уделяется получению суперпродуцентов фермен-тов с применением традиционных методов мутагенеза и селекции, и современных генно-инженерных ме-тодов, позволяющих конструировать новые штаммы микроорганизмов.
Це
ль работы – получение трансформантов p. ada-
metzii – высокоактивных продуцентов ГО.
В качестве реципиентного штамма использовался
p. adametzii
ЛФ f-2044.1, отобранный ранее в лабора-
тории ферментов Института микробиологии как мор-фологически и биохимически стабильный и активный продуцент ГО. Из ДНК данного гриба выделен и оха-рактеризован ген gox, кодирующий фермент.
В связи со сложностью репликации крупных плаз-
мид для трансформации мицелиальных грибов обычно применяют 2 плазмиды: экспрессирующую и селекти-рующую.
Вектор для экспресии гена gox p. adametzii
ЛФ f-2044.1 в клетках мицелиальных грибов был
сконструирован на основе плазмиды pNOM102, лю-бе
зно предоставленной доктором punt (Нидерланды).
В качестве селектирующей использована плазмида из кита pGreen p35S-NptII, несущая ген неомицин-фос-фотрансферазы II (NptII).
Для проведения трансформации отработана мето-
дика
выделения протопластов p. adametzii ЛФ f-2044.1.
Максимальное количество протопластов получено при обработке 24-часового мицелия гриба препаратом ли-тических ферментов из Trichoderma harzianum (Sigma, L1412–10G) при
25 °С в течении 4 часов в фосфатном
буфере (рН=6,0), содержащем 0,9 М kCl в качестве ос-
мотического стабилизатора.
Трансформацию протопластов гриба выполняли
методом электропорации. Рекомбинантные штаммы отбирались в два этапа: по устойчивости к селекти-рующему агенту и по способности к синтезу ГО в условиях глубинного культивирования. Контроль за переносом генов осуществляли при помощи метода полимеразной цепной реакции (ПЦР). В результате проведенных экспериментов было получено 36 реком-бинантных штаммов
p. adametzii.
Методом ПЦР установлено, что у 19 штаммов про-
шла котрансформация, а 17 штаммов содержали толь-ко вектор, несущий селективный маркер. Анализ обра-зования ГО трансформантами в условиях глубинного культивирования показал, что из 36 трансформантов p.
adametzii только 3 характеризовались пониженной на
3,51–8,77 % продуцирующей способностью мицелия гриба по сравнению с исходной культурой. Повышен-ный в 1,5–2,0 раза уровень синтеза ГО и повышенная в 2,0– 2,5 раза продуцирующая способность мицелия выявлены
у p. adametzii ЛФ f-2044.1.17 и p. adametzii
ЛФ f-2044.1.18. В результате дальнейших исследо-
ваний
установлено, что p. adametzii ЛФ f-2044.1.17
стабильно сохранял уровень синтеза внеклеточной ГО
на протяжении 6 мес хранения, а p. adametzii ЛФ
f-2044.1.18 был вариабелен по указанному признаку.эКСПРЕССИЯ ГЕНА Г ЛЮКОЗООКСИДАЗЫ В КЛЕТКАХ
МИЦЕЛИАЛЬНОГО ГРИБА P . adame Tzii ЛФ f-2044.1
Жуковская Л.А.1, Михайлова Р.В.1, Семашко Т.В.1, Хомич М.Б.1, Ярмолинский Д.Г.2
1 ГНУ «Институт микробиологии НАН Беларуси»,
Минск
2 ГНУ «Институт генетики и цитологии НАН Беларуси»,
Минск
АПОПТОЗ ДРОЖЖЕВЫХ КЛЕТОК
Звягильская Р.А.
Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН,
Москва
Исследование апоптоза находится в настоящее вре-
мя в центре внимания исследователей, поскольку вы-яснилось, что апоптоз, являясь важнейшим обязатель-ным механизмом онтогенеза, морфогенеза у животных и растений, в ряде случаев может усиливать тяжелые поражения организма, вызывая массовую гибель кеток. Установлена центральная роль митохондрий в этом процессе: митохондрии являются и генераторами ак-тивных форм кислорода (АФК), и местом локализации или релокализации (после проведения апоптотичес-кого сигнала) про- и анти-апоптотических факторов. Выявлена
сложная иерархия взаимодействия – и анти-
апоптотических факторов. До относительно недавнего времени полагали, что клеточная смерть по механизму
Физиология и биохимия грибов 127
апоптоза свойственена только многоклеточным эука-
риот
ам (v aux et al., 1996, Huettenbrenner et al., 2003),
поскольку одноклеточные организмы содержат немно-гочисленные гомологи апоптотических факторов мно-гоклеточных. Однако обнаружение новых семейств апоптотических белков позволило обнаружить гомо-логи апоптотических белков в одноклеточных эука-риотах, в том числе и дрожжах (Aravind et al., 1999, koonin
& Aravind, 2002; Гордеева и др., 2004). Более
того, выяснилось, что дрожжи, растущие с высокой скоростью на средах простого состава, имеющих от-носительно малые размеры генома, экспрессирующие гетерологичные белки, являются чрезвычайно удобной моделью не только для функционального анализа уже известных про- и антиапопточеских факторов (см., например, p
riault et al., 2003; Smardova et al., 2005) и
выявления новых, но и для реконструкции в дрожжах целых сигнальных путей млекопитающих (Rodriguez-Escudero et al., 2005). Как следствие, в области изуче-ния апоптоза дрожжей в настоящее время наблюда-ется настоящий бум (см. недавние обзоры Weinberger et al., 2003; Madeo et al., 2004; Ludovico et al., 2005; Low et al., 2005; Gourlay and Ayscough, 2005; Кнорре и др., 2005). Апоптоз у дрожжей мог быть индуцирован ацетатом (Ludovico et al., 2001), высокими концентра-циями полового феромона (Severin and Hyman, 2002; poz
niakovsky et al., 2005; Кнорре и др., 2005), хроно-
логическим старением клеток (Herker et al., 2004), растительным белком осмотином (Narasimhan et al., 2001), УФ, тепловым шоком (Winkler et al., 2002), повреждением ДНК (см. Burhans et al., 2003), рядом мутаций (Yamaki et al., 2001; Qi et al., 2003; Mazzoni et al., 2003) и другими факторами. В ряде случаев выявлены характерные признаки апоптоза: вакуоли-зацию клетки, сокращение объема цитоплазмы, пере-ход фосфатидилсерина из внутреннего в наружный монослой цитоплазматической мембраны (см. Гор-деева и др., 2004; Кнорре и др., 2005), фрагментация ДНК, конденсация хроматина (Madeo et al., 1999; Ludovico et al., 2001), образование АФК (Gross et al., 2000; Laun et al., 2001; Herker et al., 2004; (Madeo et al
., 1999; kampranis et al., 2000; Severin and Hyman
2002; pozniakovsky et al., 2005), выход цитохрома с
(Ludovico et al., 2002). Достоверно найдены в дрож-жах следующие апоптотические белки: метакаспаза (Uren et al., 2000, Madeo et al., 2002), HtrA/Omi про-те
аза ( fahrenkrog et al., 2004), AI f (apoptosis inducing
factor) (Wissing уе фдюб 2004), нуклеаза G (Madeo et al., 2007). Получено указание на ключевую роль ка
скада MA p-киназ в апоптозе дрожжей (Ahn et al.,
2005).
Однако, в отличие от животных и растительных
тканей, где удаления ненужных клеток по механиз-му апоптоза хорошо документировано и осмыслено, смысл запрограммированной смерти индивидуаль-ных клеток в общей клеточной популяции дрожжей не столь очевиден. В большинстве случаев остаются неясными механизмы действия вышеперечисленных факторов, индуцирующих апоптоз у дрожжей, и пос-ледовательность протекающих при этом событий. В частности, требует решения вопрос о том, выполняет ли цитохром с в дрожжах ту же роль, что и у животных
и каковы пути его выхода из митохондрий.
Работа поддержана РФФИ (грант № 06–04–49687).
ИНДУКЦИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОНИЦАЕМОСТИ
ДРОЖЖЕВЫХ МИТОХОНДРИЙ
Зылькова М.В., Ковалева М.В., Суханова Е.И.,
Тренде
лева Т.А., Лейн С.А., Звягильская Р.А.
Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН,
Москва
Исследования последних лет привели к осознанию
того, что митохондрии играют центральную роль не только в обеспечении жизнедеятельности клеток мле-копитающих (запасание энергии, биосинтез гема, же-лезо-серных кластеров, некоторых аминокислот), но и в инициации клеточной смерти по механизму апоп-тоза. И основным механизмом при запуске апоптоза, как полагают, является индукция неспецифической проницаемости внутренней митохондриальной мем-браны (образование мегаканала с диаметром 2,3–2,9 нм), что приводит к набуханию митохондрий, выходу локализованных в межмембранном пространстве про-апоптотических факторов, их активации, и, в конечном итоге, к лизису клеточных структур. Принимается, что в формировании поры участвуют транслокатор адени-новых нуклеотидов внутренней мембраны митохонд-рий, анионный канал внешней мембраны, циклофилин D, локализованный в митохондриальном матриксе, хотя такая точка зрения не является общепризнанной. Открытие канала стимулируется увеличением концен-трации Ca
2+ в матриксе митохондрий, неорганическим
фосфатом, прооксидантами, истощением митохонд-риального пула АТР , деэнергизацией митохондрий и сопровождается сниженим мембранного потенциала и высокоамплитудным набуханием митохондрий. Mg
2+,
адениновые нуклеотиды, антиоксиданты, спермин, циклоспорин А способствуют закрытию поры. Вопрос о том, каким образом происходит индукция неспеци-фической проницаемости в дрожжевых митохондрий остается открытым. В работе использовали прочно-со-пряженные митохондрии дрожжей Yarrowia lipolytica
и endomyces
magnusii, имеющие аэробный тип обмена
и содержащие полностью компетентную дыхательную цепь со всеми тремя пунктами энергетического со-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 128
пряжения. Об образовании поры судили по снижению
величины мембранного потенциала (регистрируемого с по
мощью потенциал-зависимого зонда – сафронина
О) и по высоко-амплитудному набуханию митохон-дрий (регистрируемого при 540 нм). Показано, что дрожжевые митохондрии, в отличие от митохондрий млекопитающих, устойчивы к действию высоких кон-центраций Са
2+ в присутствии агентов, активирующих
пору (см. выше), и, следовательно, лишены классичес-кой поры. Нам не удалось обнаружить и пору, инду-цируемую в митохондриях животных при совместном действии низких концентраций Са
2+ и насыщенных
жирных кислот, Жирные кислоты (пальмитиновая, стеариновая) транспортировались в дрожжевые мито-хондрии через транслоказу адениновых нуклеотидов, вызывали разобщение митохондрий (деполяризацию внутренней митохондриальной мембраны), но не на-бухание митохондрий. Не было обнаружено и поры, индуциремой в митохондриях животных их деэнер-гизацией, истощением пула адениновых нуклеоти-дов, добавлением высоких концентраций фосфата при кислых значениях рН. Совместное действие проокси-дантов
– фениларзиноксида (гидрофобного бифунк-
ционального SH-агента), менадиона (гидрофильного монофункционального SH-агента), и оксалоацетата (оксиданта эндогенного пула NADH) приводило к сни-жению
мембранного потенциала, обращаемому ATp ,
но не к набуханию митохондрий. Единственная пора, которую удалось обнаружить в митохондриях исследо-ванных
видов дрожжей – это ATp-зависимый К+-канал
«животного типа», откываемый в ответ на добавление диазок
сида и GTp и закрываемый добавлением ATp и
5- гидроксидекановой кислоты (показано для дрожже-вых митохондрий впервые). Предполагается участие AT
p-зависимый К+-канала в запуске апоптоза дрожже-
вых клеток в условиях, приводящих к снижению внут-риклето
чной концентрации ATp .
Работа поддержана РФФИ (грант № 06–04–49687).
ДЕЙСТВИЕ ИНГИБИТОРОВ НА МЕЛАНИНОГЕНЕЗ ГРИБОВ
PHellinuS robuSTuS М-10 И inonoT uS obliQuuS В-26
Иконникова Н.В., Щерба В.В., Бабицкая В.Г.
Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
Высшие базидиальные грибы по данным литерату-
ры [1, 2] синтезируют меланин из глютаминилгидрок-сибензена, используя при этом тирозин или диоксифе-нилаланин. Наряду с этим, ароматические соединения могут образовываться и при циклизации различных сахаров. Такие преобразования протекают по схе-ме: глюкоза → дифосфорный эфир седогептулезы → шикимовая кислота → пара-оксибензойная кислота, с последующим образованием различных хинонов и меланина.
В настоящее время пути образования меланина
некоторыми микромицетами в определенной мере изучены, структура меланинов базидиальных грибов остается невыясненой, до сих пор не известны и инги-биторы меланиногенеза у этих грибов.
С этой целью были испытаны химические соеди-
нения, способные влиять на процесс меланиногенеза у Ph. robustus M-10 и i.
оbliquus В-26, а именно аскорби-
новая кислота, ионол (3, 5-ди-(триметил)-гидрохинон), рутин (кверцетин-3-рутинозид), койевая кислота.
Исследования показали, что аскорбиновая кисло-
та, β-ионол и рутин во всех испытанных концентра-
циях (5–125 мкг/мл) не подавляли рост исследуемых базидиомицетов и продукцию пигмента. Внесение
аскорбиновой кислоты и рутина в проверенных кон-центрациях стимулировало активность ферментов, от-ветственных за синтез меланина, что в свою очередь сопровождалось повышением продукции пигментов.
При концентрации аскорбиновой кислоты 50
мкг/мл, активность полифенолоксидазы у грибов Ph.
robustus M-10 и i.
оbliquus В-26 увеличивалась в 1,2–1,3 раза,
лакказы – в 2 раза. Рутин, в испытанных кон-
центрациях стабильно стимулировал активность лак-казы в 1,4–1,6 раз, по
лифенолоксидазы – в 1,2 раза.
Незначительное (~14 %) подавляющее действие
на синтез меланина у изучаемых грибов оказывал ионол в концентрации 25,0–125,0 мкг/мл. Снижение накопления биомассы сопровождалось понижением образования пигмента, что позволяет предположить торможение роста грибной культуры, а не процесса меланиногенеза.
Из испытанных соединений только койевая кислота
в концентрации 1000 мкг/мл практически полностью (на 70–75
%) подавляла активность ферментов поли-
фенолок
сидазного комплекса у ph. robustus M-10 и I.
оbliquus В-26, при этом незначительно влияя на рост культур. Пигментация мицелия, сформировавшегося на среде с ингибитором, отсутствовала.
Таким образом, поскольку койевая кислота действу-
ет на стадии образования пара-оксибензойной кислоты (один из этапов шикиматного пути), показано ингиби-рующее влияние данного химического соединения на меланиногенез исследуемых базидиальных грибов.
Литература1. Stussi H., Rast D.M. The biosynthesis and possible
function of glutaminyl-4-hydroxybenzene in agaricus
bisporus
// p hytochemistry. – 1981. – vol. 20, № 10. – Р .
2347–2352.
2. Wheeler M.N. Comparison of fungal melanin bio-
synthesis in ascomycetes, imperfect and basidiomycetes fungi //
Trans. Brit. Mycol. Soc. – 1983. – vol. 81, №
1. – Р . 29–36.
Физиология и биохимия грибов 129
В последние годы группа ксилотрофных базидио-
мицетов привлекает внимание исследователей как пер-
спективный объект для ряда отраслей биотехнологии. В связи с этим, экология, физиология, биохимия кси-лотрофных базидиомицетов представляют существен-ный интерес. Известно, что на молекулярном уровне адаптационные явления проявляются, в частности, в изменении жирнокислотного состава мембран клеток (Cossins, Sinensky, 1984; Shinitzky, 1984). Стабилиза-ция динамических параметров мембран есть условие нормального протекания физиологических и биохими-ческих процессов в клетке.
Объектами нашего исследования стали мице-
ли
альные культуры fistulina hepatica и Ganoderma
applanatum, выделенные из плодовых тел, собранных в окрестностях г. Пензы. Метиловые эфиры жирных кислот получали непосредственно из воздушно- сухой навески биомассы. Применение внутреннего стандар-та (фенилпальмитата) позволило определить абсолют-ное содержание жирных кислот в пробе. Исследование проводили с использованием метода газожидкостной хроматографии (хроматограф НР 5890, кварцевые ка-пиллярные колонки 15 м Ч0, 25 мм Ч 0, 25 мкм, непод-ви
жная фаза – SpB – 1 полидиметилсилоксан) и супел-
ко
вакс – 10 (термостойкий полиэтиленгликоль), режим
программирования температуры). Культивирование ми-целия проводилось в условиях глубинной культуры при те
мпературе 23 °С (оптимум) и 30 °С (температурный
стресс). Последующий анализ липидной фракции мем-бран показал относительно равное качественное пред-ставительство насыщенных и ненасыщенных жирных кислот. Однако обнаружено, что при оптимальной тем-пературе количественно преобладают ненасыщенные (моноеновые, диеновые). Следует отметить, что выяв-лено наличие изомеров, а также насыщенных жирных кислот с длинной углеродной цепью, помимо тривиаль-ных компонентов, что следует считать особенностью биохимии данных видов. С повышением температуры ку
льтивирования до 30 °С пропорции жирных кислот
менялись: существенно снижалась доля ненасыщенных жирных кислот (линолевой, линоленовой). Полученные данные вполне иллюстрируются также выявленным нами снижением активности ферментов дегидрогеназ. Ферменты дегидрогеназы (в частности, десатуразы) де-сатурируют ненасыщенные жирные кислоты. Для оцен-ки активности названной группы ферментов в наших экспериментах был использован краситель нитросиний тетразолий, который при восстановлении превращается в синий формазан. Краситель добавляли в питательную среду для глубинного культивирования в концентрации 0,
001 %. Последующее окрашивание мицелия оценива-
лось визуально.
За период глубинного роста мицелий изученных ви-
дов приобретал синюю окраску различной интенсив-ности. Для обоих видов выявлено, что при культиви-ровании в условиях повышенной температуры степень окрашивания мицелия была существенно ниже, чем в оптима
льных (23 °С). Межвидовые отличия заключа-
ются в том, что в каждом из вариантов опыта мицелий fistulina
hepatica имел более интенсивную окраску в
сравнении с Ganoderma applanatum.
Таким образом, выявлена достоверная корреляци-
онная зависимость между активностью дегидрогеназ (иллюстрированной степенью интенсивности окраски мицелия) и содержанием в образцах мицелия ненасы-щенных жирных кислот.ИЗУЧЕНИЕ АДАПТАЦИОННОГО СТАТУСА
НЕКОТОРЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ
КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
Ильин Д.Ю.
ФГоУ вПо «Пензенская ГСХА»,
Пенза
АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ
ШТАММОВ ОПЕНКА ЗИМНЕГО
Flammulina V
eluTiPeS (CURT.: fR.) p . kARsT
Кваско Е.Ю.1, Бисько Н.А.2, Паршикова Т.В.1
1 киевский национальный университет имени Тараса Шевченко,
Биологический факультет,
кафедра физиологии и экологии растений,
киев
2 Институт ботаники имени Н. Г. Холодного НАН Украины,
киев
В последнее время расширяются исследования,
связанные с изучением оксидативного стресса у раз-личных групп живых организмов. Во всем мире ведет-ся
поиск источников антиоксидантов – соединений, подавляющих развитие патологических процессов, ин
дуцируемых активными формами кислорода – ос-
новной причиной оксидативного стресса. Поскольку биологически активные вещества природного проис-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 130
хождения обладают рядом преимуществ по сравнению
с их синтетическими аналогами, внимание исследова-телей в основном направлено на изучение природных источников веществ с антиоксидантной активностью.
В связи с интенсивным развитием грибных био-
технологий, возрос интерес к биологически активным веществам, синтезируемых высшими базидиальными грибами. Одним из широко культивируемых съедоб-ных медицинских грибов является опенок зимний Flammulina velutipes (Curt.: fr
.) p.karst, обладающий
антибактериальной, противовирусной, антифунгаль-ной, противоопухолевой, иммуномодулирующей, тромболитической активностями.
Цель данной
работы – изучение антиоксидантной
активности штаммов F . velutipes.
Объектом исследований являлись 12 штаммов
опенка зимнего из коллекции культур шляпочных гри-бов отдела микологии Института ботаники имени Н. Г. Холодного НАН Украины (г. Киев). Чистые мице-лиальные культуры были выделены из дикорастущих плодовых тел, собранных в различных районах Укра-ины и мира.
Используемый метод определения антиоксидантной
активности основан на изучении кинетики окисления восстановленной формы 2, 6-дихлорфенолиндофенола кислородом воздуха в присутствии и отсутствии био-логического материала и расчете величины константы ингибирования биологическим материалом окисления 2, 6-дихлорфенолиндофенола как показателя антиок-сидантной активности.Проведенное ранее изучение динамики антиокси-
дантной активности исследуемых ранее штаммов F .
velutipes показало, что максимального значения пока-
затель активности штаммов данного вида достигает на 7 сутки культивирования. Установлено также, что антиоксидантная активность культуральной жидкости была выше, чем мицелиальной биомассы.
Для проведения анализа штаммы выращивали
ст
ационарно в колбах эрленмейера объемом 100 мл
на жидкой глюкозо-пептонной среде (рН 5,5) в тече-ние 7 суток при температуре 28
°С. В качестве био-
логического материала использовали культуральную жидкость.
Результаты работы позволяют сделать следующие
выводы. Изученные штаммы F . velutipes значительно
отличаются между собой по величине их антиоксидан-тной активности. Так, например, активность штамма 1884 была в 66 раз выше, чем штамма 1880. Уровень антиоксидантной активности образцов культуральной жидкости был наиболее высоким у штаммов 1884, 318, 1860, что в 2, 48–2, 75 р. превышает показатель актив-ности аскорбиновой кислоты (1, 45 ± 0, 04 л/мл∙хв). Необходимо отметить, что значение рН культуральной жидкости в процессе культивирования незначительно изменялось в щелочную сторону по сравнению с ис-ходным показателем.
Кроме этого нами не было отмечено корреляции
между уровнем активности и местом произрастания плодовых тел, являющихся источниками мицелиаль-ных культур изучаемых штаммов.
ПОЛУЧЕНИЕ МУТАНТОВ cur Vularia luna Ta ВКМ f -644
С ПОВЫШЕННОЙ 11β-ГИДРОКСИЛАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
В ОТНОШЕНИИ КОРТЕКСОЛОНА И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ
Коллеров В.В., Шутов А.А., Гулевская С.А., Донова М.В.
Институт биохимии и физиологии микроорганизмов
им. Г.
к. Скрябина РАН,
Пущино
Физиологическая активность 11 β-гидроксилиро-
ванных стероидов определяет их широкое использова-ние в терапии многих заболеваний в качестве проти-вовоспалительных и антиаллергических препаратов. Введение гидроксильной группы в позицию 11 β сте-
роидной молекулы возможно с использованием ми-целиальных грибов, при этом максимальная 11 β-гид-
роксилирующая активность показана для штаммов curvularia lunata (
cochliobolus lunatus).
Фермент, ответственный за введение гидроксиль-
ной группы в позицию 11β, относится к семейству цито
хром-p-450-монооксигеназ (Cyt p-450). Ингиби-
торо
м Cyt p-450 является азольный фунгицид – кето-
коназол. Точечная мутация в гене, ответственном за синтез
Cyt p-450, может привести к азольной устойчи-
вости, обусловленной суперэкспрессией мутантного гена. Однако, мутагенез интактных клеток мицелиаль-ных форм грибов и селекция полученных мутантов не-эффективны вследствие сложного строения клеточной оболочки и многоядерности конидий и мицелиальных фрагментов. Решением проблемы может быть получе-ние одноядерных протопластов.
Целью работы являлась разработка процедуры про-
топластирования мицелиальных клеток curvularia
lu-
nata ВКМ f -644 и получение кетоконазол-устойчивых
мутантов с повышенной 11β-гидроксилазной актив-ностью.
Установлено, что эффективность процедуры про-
топластирования зависит от состава среды, исполь-зованной для культивирования мицелия, возраста культуры, состава осмостабилизирующего буфера и концентрации литического комплекса ферментов.
Физиология и биохимия грибов 131
Максимальный выход протопластов (6,6х105/мл) по-
лучен при использовании мицелия логарифмической фазы роста в сочетании с применением 0,1М фосфат-ного буфера с 1М хлоридом аммония (рН 5.7) и кон-центрацией литического комплекса из Trichoderma harzianum 5 мг/мл. Максимальную степень регенера-ции про
топластов (3,1 %) обеспечивало использование
1М сахарозы.
Полученные после завершения процедуры мута-
генеза и регенерации протопластов 36 клонов были протестированы на наличие 11β-гидроксилазной актив-ности в отношении кортексолона и его производных: 17-ацетата-, 21-ацетата- и 17, 21-диацетата-кортексоло-на. В результате скрининга отобраны 2 мутанта, отли-чающиеся более высоким в сравнении с родительским штаммом, уровнем 11β-гидроксилазной активности в отношении кортексолона. Получены также три му-танта, способные к активному восстановлению 20-ке-тогруппы кортексолона с последующим 11β-гидрокси-лированием восстановленного стероида. Среди этих мутантов выявлен штамм, отличающийся по 11β-гид-роксилазной активностью в отношении 21-ацетата- и 17, 21-диацетата кортексолона: выход гидрокортизона при ег
о использовании на 5–10 и 15–20 % превышал
полученный при трансформации соответствующих субстратов родительским штаммом.
Результаты свидетельствуют о перспективности
использования методов мутагенеза протопластов для получения эффективных биокатализаторов процесса 11β-гидроксилирования стероидов.
ПРОТЕИНАЗА МИКРОМИЦЕТА aSPerGilluS ocHraceuS 513
СО СВОЙСТВАМИ АКТИВАТОР А ПРОТЕИНА
С ПЛАЗМЫ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
Крейер В.Г., Баранова Н.А., Егоров Н.С.
Биол
огический факультет МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
В конце 70-х годов прошлого столетия был от-
крыт выделенный из плазмы крови человека протеин С (ПС)
– профермент сериновой протеиназы, играю-
щий, как оказалось, важную роль в системе гемостаза. Было показано, что ПС активируется в крови путем ограниченного протеолиза тромбином или комплек-сом тромбина с мембранным белком эндотелиальных клеток
– тромбомодулином, превращаясь в активиро-
ванный протеин С (ПСа). Последний проявляет как ан-тикоагулянтные, так и профибринолитические свойс-тва, и его недостаточное содержание в крови может вызывать очень тяжелые тромботические заболевания, вплоть до летальных исходов.
Кроме
известных активаторов ПС – тромбина и
тромбомодулина – из яда редкого вида змей – щито-мордника agkistr
odon contortrix contortrix в 1986 году
был выделен активатор ПС, не требующий участия тро
мбомодулина. этот активатор ПС представляет со-
бой также сериновую протеиназу с Мм 20–40 кДа (по разным данным). В настоящее время этот активатор (препарат «Протак») используется в диагностикумах (в частности, фирмы РЕНАМ) для определения содер-жания ПС в крови людей в биохимических клиничес-ких лабораториях.
На кафедре микробиологии биологического факуль-
тета МГУ им. М.В. Ломоносова впервые в мире была сделана попытка найти продуценты активаторов ПС среди микроорганизмов. В результате обследования большого количества штаммов микромицетов было об-наружено несколько штаммов, синтезирующих внекле-точные протеиназы со способностью активировать ПС, но не обладающие высокой общей протеолитической активностью, а также фибринолитической и активатор-ной по отношению к плазминогену активностями.
Из культуральной жидкости микромицета asper
–
gillus ochraceus 513 методами колоночной аффинной
хроматографии на диасорб-бацитрацине, диасорб–ар-гинине, ионообменной хроматографии на колонке с ДЕАЕ Toyopearl 650М, изоэлектрофокусирования были выделены две протеиназы с изоэлектрическими точками 5,5 и 7,0, обладающие специфической актива-торной активностью по отношению к ПС. Ингибитор-ный анализ подтвердил, что оба фермента являются сериновыми протеиназами (ингибируются ингибито-ром с
ериновых протеиназ – pMSf).
Молекулярная масса, определяемая методом SDS-
электрофореза в ПААГ равна примерно 27 и 35 кДа .
Для количественного анализа активаторной актив-
ности был использован модифицированный нами ме-тод определения ПС фирмы РЕНАМ с использованием синтетическ
ого хромогенного субстрата – pyr-pro-Arg-
pNA, который показал, что активаторная активность выделенных из asper
gillus ochraceus 513 протеиназ со-
поставима с активностью препарата «Протак» из яда щитомордника.
Таким образом, полученные данные свидетельству-
ют о том, что и микроорганизмы, в частности, микро-мицеты способны синтезировать активаторы протеина С, близкие по свойствам с активаторами ПС животно-го происхождения. В связи с этим, в дальнейшем, воз-можно их использование, в частности, в диагностику-мах для определения ПС в крови людей.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 132
Промышленное производство витаминов и ко-
ферментов в основном осуществляется с помощью
микробиологических технологий, которые представ-ляют реальную альтернативу химическому синтезу. Микромицеты широко используются для получения ферментов, антибиотиков, витаминов и т.п. Например blakeslea
trispora служит основой для получения в-ка-
ротина. Современные технологии получения витами-нов и коферментов с использованием грибов являются перспективными. Следует отметить, что грибы сущес-твенно отличаются от других микроорганизмов как по способности синтезировать редкие природные формы биологически активных веществ убихинон Q
10, хитин-
глюкановый комплекс, так и по другим признакам, а именно: они достаточно технологичны, более устой-чивы к экологическим стрессам и для своего роста мо-гут использовать дешевые субстраты.
Целью работы было изучение роста и физиолого-
биохимических особенностей биосинтеза витаминов, коферментов у грибов-продуцентов.
Нами были селекционированы атоксигенные
штаммы микромицетов: Fusarium sambucinum –проду-
цирующий никотиновую кислоту и ее коферментную форму NAD
+ – 6.0 мг/г сухого веса, а также другие
витамины, убихинон Q10; mycelia sterilia – продуцент
тиамина, его производных, а также других витаминов группы В, витамина Е и ряда других полезных ве-ществ. Содержание синтезированных витаминов опре-деляли химическим и микробиологическим методом. Биосинтез никотиновой кислоты был отмечен в экс-поненциальной фазе роста гриба и он предшествовал биосинтезу NAD
+, содержание которого определяли
ферментативным методом с использованием алкоголь-дегидрогеназы. Было установлено действие предшес-твенник
ов биосинтеза витаминов – окситиамина на
синтез тиамина, триптофана, на синтез никотиновой кислоты и на биосинтез кофермента NAD
+. В усло-
виях стимуляции никотиновой кислотой биосинтеза NAD
+ наблюдали морфологические изменения, такие
как раннее образование конидий, интенсификацию роста мицелия. Обнаружено, что в условиях наших эк-спериментов в безклеточном экстракте Fusarium sam-
bucinum, растущего в среде с никотиновой кислотой и
триптофаном активность фермента биосинтеза NAD
+,
NAD-пирофосфорилазы была заингибирована. Оцен-ка активности фермента биосинтеза NAD
+ – трипто-
фанпиролазы наряду с NAD-пирофосфорилазой дало возможность обнаружить существование двух путей биосинтеза NAD
+ в клетке гриба-продуцента. При
внесении в среду выращивания предшественников синтеза витаминов и коферментов и аденозина при-водило к активации NAD
+–пирофосфорилазы, что
приводило к стимуляции запасного пути сверхсин-теза кофермента NAD
+ у Fusarium sambucinum. По-
лученные данные послужили основой для отработки условий культивирования с целью повышения выхода никотиновой кислоты и ее производных, а также дру-гих витаминов. Биомасса гриба Fusarium sambucinum ,
которая содержит такой важный кофермент как NAD
+,
который относится к окислительно-востановительным коферментам, а также другие биологически активные вещества (убихинон, ненасыщенные жирные кислоты) может стать основой для получения препаратов, ока-зывающих благоприятное воздействие на обменные процессы организма и способствующих поддержанию его иммунитета.МИКРОМИЦЕТЫ – ПРОДУЦЕНТЫ ВИТАМИНОВ И КОФЕРМЕНТОВ
Кучмеровская Т.М.1, Супрун С.М.1, Пархоменко Ю.М.1, Черныш И.Ю.1, Харкевич Е.С.2
1 Институт биохимии им. А.в. Палладина НАНУ,
киев
2 Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАНУ,
киев
ВЛИЯНИЕ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ Г ЛИКОПРОТЕИНОВ НА Р АЗМЕР
И ФОРМУ КЛЕТОК ДРОЖЖЕЙ SaccH aromYceS cereViSiae
Лейбо А.И., Егоров С.Н.
Моск
овский государственный университет имени М.в. ломоносова,
биологический факультет,
Москва
Общая масса клеточной стенки (КС) дрожжей мо-
жет
достигать 25 % от массы всей клетки, толщина ее
колеблется в пределах 1000–2500 Ао. Она состоит при-близительно
на 40 % из маннопротеинов и на 2 % – из
хитина, остальное приходится на глюкан.
Несмотря на то, что строение клеточной стенки
дрожжей является предметом многочисленных иссле-дований, структура этой органеллы до сих пор не вы-яснена. Схемы строения КС дрожжей до последнего времени носили формальный характер и демонстриро-вали лишь возможную компановку маннопротеинового и глюканового слоев без учета разнообразных функций, выполняемых этой органеллой. Подобную ситуацию от-части можно объяснить недостаточным уровнем наших знаний о структурной роли белков в стенке дрожжей. Совершенно очевидно, что без их участия невозможно
Физиология и биохимия грибов 133
представить устройство и функционирование такой ди-
намичной структуры, какой является клеточная стенка. По
давляющее больши нство белков клеточной стенки
дрожжей являются гликопротеинами. Лишь в несколь-ких работах сообщается о наличии в клеточной стенке негликозилированных белков.
Кислые фосфатазы дрожжей являются истинными
внеклеточными гликопротеинами и обнаруживаются только в клеточных структурах, связанных с процес-сом везикулярного внеклеточного транспорта бел-ков. Структурная и защитная роль кислой фосфатазы подтверждается также тем, что в клеточной стенке S.
cerevisiae было обнаружено большое количество это-
го фермента, находящегося в энзиматически неактив-ной форме (Schweingruber, 1983). Также показано, что кислая фосфатаза входит в состав выростов, обнару-живаемых на поверхности некоторых видов дрожжей, которые, вероятно участвуют в межклеточных взаимо-действиях (Walther et al., 1984).
В нашей лаборатории показано, что два вида кис-
лых фосфатаз, обнаруженных в клетках дрожжей Sac-
charomyces cerevisiae, транспортируются к клеточной
поверхности разными путями (Шнырева М.Г. Егоров С.Н., 1990). Репрессибельная кислая фосфатаза экс-кретируется в среду культивирования с помощью «лег-кой» фракции секреторных везикул, а конститутивный фермен (кКФ) направляется в клеточную стенку при участии фракции «тяжелых» везикул (Е.И. Блиннико-ва, С.Н. Егоров и др., .2002),
Выявлены существенные различия в размерах кле-
ток, лишенных возможности синтезировать кКФ и при условии синтеза кКФ. Клетки, лишенные кКФ сильно варьируют в размере от гигантских до очень мелких, многие из них имеют уродливую, неправильную фор-му, некоторые клетки агрегируют между собой, что указывает на существенные изменения в структуре КС. После трансформации клеток плазмидой, несущей ген кКФ, они приобретали нормальные естественные формы. Мы делаем вывод о том, что гликопротеин кКФ может влиять на структурную организацию КС двумя способами: либо непосредственно участвовать в организации клеточной стенки дрожжей, либо вы-полняя энзиматическую функцию катализировать гид-ролиз фосфорных соединений, принимающих участие в регуляции синтеза иных структурных компонентов клеточной стенки дрожжей Saccharomyces cerevisiae.
ВЛИЯНИЕ э ФФЕКТОРОВ НА БИОСИНТЕЗ ВНЕКЛЕТОЧНОЙ
ПЕРОКСИДАЗЫ PHellinu S robuSTuS k
Макович О.М., Михайлова Р.В., Лобанок А.Г., Чихаева О.В.
ГНУ «Институт микробиологии НАН Беларуси»,
Минск
Базидиальный гриб Phellinus robustus k продуци-
рует внеклеточную пероксидазу (КФ 1.11.1.7) при по-верхностном росте на среде Линденберга.
Цель работы: исследование влияния предшествен-
ников синтеза и метаболитов простетической группы фермента, меланина, фенольных соединений, лигно-целлюлозных субстратов, поверхностно-активных и ростстимулирующих веществ на биосинтез внекле-точной пероксидазы Ph.robustus k .
У
становлено, что ингибирующий эффект на обра-
зов
ание пероксидазы ph.robustus k оказывают: мемб-
ранодеполяризующие агенты (снижают уровень био-синтеза
фермента на 29–99 %) – 0,1–0,5 % неионнные
поверхностно-активные вещества – Твин-60, 80, Три-тон
Х-305, Х-405, Wp-1339 и 1–3 об. % полярные рас-
творители
– метанол, этанол, пропанол; Тритон Х-100,
Твин-20 и 1-бутанол полностью подавляют рост гриба; 0,2 мМ
производные коричной кислоты (на 9–25 %) –
п-кумаровая, феруловая, синаповая; 0,2 мМ фенолы (на 4–35
%) – катехол, гваякол, пирогаллол; 0,2мМ
бензойная кислота и ее производные (на 1–44 %) – п-аминобензойная, галловая и салициловая кислоты; а такж
е – 0,5 % б-кетоглутаровая кислота, 1 % карбокси-
метилцеллюлоза,
0,01–0,1 % танин, 0,2 мМ DL-трип-
тофан,
2 мМ L-диоксифенилаланин, 0,1–2 % kCl, 1 %
дрожжевой экстракт, соевая мука, молочная сыворотка и пептон. Стимулирующий эффект на биосинтез фермента
оказывают: ростстимулирующие добавки (повышают ур
овень образования пероксидазы в 1,8–2,5 раз) – куку-
рузный, дрожжевой и экстракт солодовых ростков, овся-ная мука и пивное сусло; предшественники биосинтеза по
рфиринов (в 1,03–1,3 раз) – 0, 5 мМ глицин, 0,25–0,5
мМ д-аминолевулиновая кислота, 0, 5 мМ гемин; лигно-це
ллюлозные субстраты (в 1,01–1,8 раз) – лигнин, поли-
фе
пан, 0, 1 % целлюлоза, гуминовые кислоты, экстракты
коры дуба и бука; 0, 2 мМ мономеры-предшественники би
осинтеза лигнина (в 1,02–1,5 раз) – некоторые фено-
лы –
фенол, гидрохинон, резорцин; гидрокси- и метокси-
пр
оизводные бензойной кислоты – п-гидроксибензойная,
протокатеховая, ванилиновая, сиринговая, п-анисовая, вератровая кислоты и вератриловый спирт.
Следу
ет отметить, что 20 мМ L- и DL-тирозин –
предшественник синтеза меланинов – оказывает максимальное стимулирующее действие, биосинтез фермента повышается в 7,2 раза. Показано, что гриб использует тирозин в качестве единственного источ-ника углерода, однако, повышение уровня образования фермента наблюдается только при совместном исполь-зов
ании тирозина и 0,5–1 % глюкозы.
Выполненные исследования позволяют рекомендо-
вать 20 мМ тирозин для введения в питательную среду Ph.robustus k
с целью повышения уровня биосинтеза
внеклеточной пероксидазы грибом.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 134
Каталаза (Н2О2: оксидоредуктаза, КФ 1.11.1.6) ка-
тализирует метаболически значимую реакцию разло-
жения пероксида водорода до молекулярного кислоро-да и воды и является одним из главных компонентов защитной антиоксидантной системы клеток аэробных организмов. Фермент применяется в процессах деток-сикации остаточных количеств Н
2О2, используемого в
технологиях легкой, химической и пищевой промыш-ленности. Перспективно применение каталазы совмес-тно с супероксиддисмутазой в медицине и косметоло-гии. Фермент используется в научных исследованиях и в экологическом мониторинге.
Ранее нами выделен высокоактивный продуцент
внеклеточной каталазы –Penicillium piceum f-648,
оп-
тимизирован состав питательной среды и определены параметры культивирования гриба. Разработка эффек-тивных технологий получения ферментов при исполь-зовании новых продуцентов требует всестороннего исследования их морфолого-биохимических особен-ностей.
Согласно описанию, изложенному в международной
базе данных по систематике грибов GABI Bioscience and CDS
Database of fungal Names (http://www.
indexfungorum.org), мицелиальный гриб Рenicillium
piceum Raper & f ennell относится к типу ascomycota ,
под/типу Pezizomycotina , классу eur otiomycetes , поряд-
ку eur otiales , семейству Trichocomaceae , подсемейству
mitosporic Trichocomaceae . Рenicillium piceum выделя-
ют из воздуха, почвы, лесной подстилки, компоста.
Изучение морфологических особенностей колоний
Рenicillium piceum f
-648 проводили на 7-е сут роста
гриба на агаризованных средах: Чапека, модифициро-ванной
среде Чапека с 6 % глюкозы и сусло-агаре. Ус-
тановлены различия морфологических признаков ко-лоний Рenicillium
piceum f-648 на испытанных средах:
на агаре Чапека – колонии белые, круглые, выпуклые, пушистые, край ровный, пушистый, обратная сторо-на в
центре темно-коричневая; на агаре Чапека с 6 %
глюкозы – колонии белые, круглые, выпуклые, пушис-тые, середина выпуклая, кремового цвета с желтова-тым ободком, край ровный, полупрозрачный, обратная сторона
не окрашена; на сусло-агаре – колонии белые,
круглые, выпуклые, пушистые, радиально-складча-тые, середина вогнутая, обратная сторона темно-жел-тая, край ровный, полупрозрачный. Самая высокая скоро
сть роста Рenicillium piceum f-648 отмечена на
сусло-агаре, в этом случае диаметр колонии гриба со-ставил 28,3 мм.
Установлено, что гриб растет на агаризованных
средах
в диапазоне температур 20–40 °С, с оптимумом
при 30–35 °С. При 5 °С и 45 °С рост гриба отсутствует. Наиболее интенсивное спорообразование у Рenicillium piceum f-648
отмечено на агаризованной среде Чапека
с 6 % глюкозы. Установлено, что жизнеспособность спор Рenicillium piceum f-648 зависит от температуры
выращивания гриба, 100 %-ная выживаемость отмече-на при 26–35
°С.
Показано, что образование каталазы Рenicillium
pi
ceum f-648 не зависит от используемой для выра-
щивания гриба с целью получения спорового посев-ного материала агаризованной питательной среды. При засеве среды конидиями, сформировавшимися пр
и 26–35 °С, отмечен максимальный уровень обра-
зования каталазы грибом при глубинном культивиро-вании.
Таким образом, в результате выполненных иссле-
дований установлены морфолого-физиологические особ
енности Рenicillium piceum f-648 – продуцента
каталазы, показано, что для поддержания гриба наибо-лее благоприятной является модифицированная среда Чапек
а с 6 % глюкозы, оптимальная температура для
роста гриба составляет 30–35 °С.МОРФОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАР АКТЕРИСТИКА
Penicillium
Piceum f-648 – ПРОДУЦЕНТА КАТАЛАЗЫ
Мороз И.В., Михайлова Р.В.
ГНУ «Институт микробиологии НАН Беларуси»,
Минск
ЛИПИДЫ СПОР АНГИОСПОР ГРИБОВ
mucor
ramannianuS И mucor HiemaliS В СВЯЗИ
СО СПОСОБНОСТЬЮ К ДИМОРФНОМУ РОСТУ
Мысякина И.С., Фунтикова Н.С.
Институт микро
биологии им. С.Н. виноградского РАН,
Москва
Мукоровые грибы обладают разной способностью
к диморфизму, который является адаптивной реакци-ей на неблагоприятные условия и повышает шансы на выживание. Основной формой существования му-коровых грибов является мицелий. Показано, что от-дельные штаммы ранее считавшегося мономорфным вида mucor
hiemalis способны к дрожжеподобному
росту в аэробных условиях под влиянием хлорани-линов или в результате длительного культивирования спорогенного мицелия на пшеничных отрубях. Из-
Физиология и биохимия грибов 135
менение характера прорастания спорангиоспор это-
го гриба, которое обусловлено многими факторами, коррелировало с изменениями в составе их липидов, а именно, с изменениями уровней основных структур-ных липидов (фосфолипидов, гликолипидов), резерв-ных липидов (триацилглицеринов, эфиров стеринов) и составом стеринов в условиях длительного культиви-рования спорообразующей культуры. Спорангиоспо-ры m.
hiemalis с истощенным в процессе длительного культивирования липидным пулом и низким содержа-нием эргостерина давали начало как мицелиальному, так и дрожжеподобному росту.
Представители вида m.
ramannianus считаются мо-
номорфными, растут только в виде мицелия и не спо-собны к росту в виде почкующихся клеток (диморфиз-му). Был исследован состав липидов спорангиоспор m.
ramannianus , которые в процессе длительного
выращивания спорогенного мицелия гриба не теряли способности давать начало мицелиальному росту. По-казано, что спорангиоспоры 20-суточной культуры m.
ramannianus
по сравнению со спорами m. hiemalis того
же возраста имели в составе резервных липидов более высокий уровень триацилглицеринов (ТАГ), в составе мембранных липидов
– более высокий уровень фос-
фатидилх
олина (ФХ), а в составе стеринов – низкое
содержание метилированных предшественников эр-гостерина.
Относительное содержание эргостерина в споран-
гиоспорах изучаемых видов было сопоставимо (64 и 51
% соответственно). У M. ramannianus уровень мети-
лированных предшественников эргостерина, в том чис-ле С-14
метилированных – тритерпена эбурикола и 24-метилен-4, 14-диметилхолестерина, был очень низок (2
%), особенно в сравнении со спорами M. hiemalis,
где их уровень достигал 13 %. Кроме того, среди де-метилированных предшественников эргостерина у M. ramannianus основную долю составлял фекостерин (19
%), содержание которого у M. hiemalis было зна-
чительно ниж
е (1,4 %). Соотношение метилированных
стеринов к деметилированным составляло 1:24 (для сравнения, у M. hiemalis в спорах старой 20-суточ-ной к
ультуры – 2:3). По-видимому, для способности
спорангиоспор прорастать в виде мицелия основное значение имеет даже не столько уровень эргостерина, сколько низкий уровень его метилированных предшес-твенников, неспособных к поддержанию необходимой структуры мембран и осуществлению их функций.
На основании представленных данных для оцен-
ки потенциальной способности мукоровых грибов к дрожжеподобному росту предложено учитывать ка-чественные и количественные характеристики липи-дов их спорангиоспор и считать критериями способ-ности спорангиоспор при прорастании давать начало дрожж
еподобному росту: (1) отношение ФэА/ФХ; (2)
уровень эргостерина и отношение метилированных стеринов к деметилированным, а также (3) соотноше-ние фосфолипидов и гликолипидов (ФЛ/ГЛ) и (4) эте-рифицированных и св
ободных стеринов (эС/С).
Мукоровые грибы, спорангиоспоры которых име-
ют
высокое содержание резервных липидов (ТАГ, эС),
а также высокий уровень ФХ и эргостерина в мемб-ранах и
низкий – метилированных предшественников
эргостерина – растут преимущественно в виде мице-лия.
ВОЗР АСТАНИЕ ПЕРОКСИДАЗНОЙ АКТИВНОСТИ КУ ЛЬТУРЫ
Pl.oST
rea TuS (JacQ .:Fr.) Kumm. В ОТВЕТ
НА
СТРЕССОВОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ
Нанагулян С.Г., Авагян И.А., Неркарарян А.В., Минасбекян Л.А.
ерев
анский государственный университет,
биологический факультет,
ереван, Армения
Высшие базидиальные грибы обладают не только
большой питатльной ценностью, но также служат ис-точником биологически активных веществ [1, 2], что их выдвигает на первый план в качестве дешевого сырья для получения фармакологически ценных компонен-тов. Биополимеры клеточных стенок высших грибов недостаточно изучены, хотя обнаружено в них высокое содержание полисахаридов, обладающих выраженной антираковой активностью, а также ряд растительных ферментов, присущим только некоторым видам расте-ний. В pастительных клетках имеется особый вид оpга-нелл, содеpжащих пеpоксидазу и выполняющих защит-ную антимикpобную функцию. Действие пеpоксидазы пpоявляется в пpисутствии пеpоксида водоpода, обpа-зующегося в pастительной клетке. Кpоме того, пеpокси-даза пpинимает участие в синтезе лигнина и в пpоцессе его pазpушения [3]. Уникальные свойства этого феp-мента, хоpошая pаствоpимость в воде, высокая специ-фичность по окислителю, устойчивость пpи хpанении, шиpокий спектp биологической активности обусловли-вают ее пpименение в медицине, науке и технике. В ме-дицине пеpоксидаза пpименяется для диагностики ос-тpых, хpонических, бактеpиальных и виpусных (в том числе СПИД), инфекционных, аллеpгических, аутоим-мунных, эндокpинологических заболеваний и злокачес-твенных новообpазований методом иммунологического анализа [3]. Пеpоксидаза используется также для пpояв-ления гликопpотеидов после пеpиодатного окисления, дл
я синтеза меченых углеpод 14 – пеpоксидаз и в качес-
тве иммуногена пpи синтезе моноклональных антител.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 136
Пероксидаза и нахождение дешевого сырья для вы-
деления этого ценного фермента и послужили стиму-
лом для наших исследований. Мы исследовали такой распространенный в наших лесах дереворазрушающий гриб как Pl.ostreatus . Представляет интерес выделение
пероксидазы из дереворазрушающих грибов, посколь-ку найдено [5], что гpибная пеpоксидаза не является ли
гнин – или Мп-зависимой пеpоксидазой, а отно-
сится к классу секpетоpных гpибных пеpоксидаз типа классических пеpоксидаз pастений. Лигнинолитичес-кая система грибов белой гнили состоит из различных окислительных ферментов : лигнин пероксидаз, марга-нец-зависимых пероксидаз и лакказ. Белые плесневые гр
ибы pleurotus ostreatus вырабатывают как марганец-
зависимые пероксидазы, так и гибридные пероксидазы на
пептонной среде ( pM) [5]. Более того, гибридные пе-
роксидазы обладают каталитической активностью лиг-нин-пероксидаз и марганец-пероксидаз. [6].
В данной работе нами использованы различные
частоты крайне высоких частот электромагнитного из-лучения для модуляции условий произрастания куль-туры гриба на пептонной среде с целью получения культуры гриба с повышенной ферментативной актив-ностью в ответ на стрессовые воздействия окружаю-щей среды. Нами были использованы крейне высокие часто
ты эМИ в диапазоне 45–53 ГГц при различных экспозициях и получены культуры с высокой перокси-дазной активностью. Нами предполагается в дальней-шем использовать такие возможности для модуляции условий выращивания культуры с целью получения высокопродуктивных штаммов базидиомицетных гри-бов для использования их в качестве дешевого фарма-кологичреского сырья.
1. Gunde-Cimerman N. Medicinal value of the genus
pleurotus
/ N. Gunde-Cimerman // Internationa Journal of
Medicinal Mushrooms. 1999. p . 69–80.
2. kawagishi H. A lectin from mycelia of the fungus
Ganoderma lucidum / H. kawagishi, S.I. Mitsunaga, M. Yamawaki // phytochemistry. 1997. v. 44. p . 7–10.
3. Г.Ф. Давыдова, О.А. Ермаков, А.И. Панасенко,
А.М Тищенко Лекарственные препараты из раститель-
ного сырья. Пероксидаза.// Химия растительного сы-рья, 2 (1998) N1 стр.15–18
4. Cohen R., Hadar Y , Yarden O. Transcript and activ-
ity levels
of different pleurotus ostreatus peroxidases are
differentially affected by Mn2+//Environmental Microbiol-
ogy, volume 3 Issue 5
page 312–322, May 2001.
5. Gуmez-Toribiov ., Martнnez A.T., Martнnez M.J.,
Guillйn f. Oxidation of hydroquinones by the versatile
ligninolytic peroxidase from Pleurotus eryngii H2O2 gen-
eration and the influence of Mn2+ .// European Journal of
Biochemistry, (2001), 268(17), 4787–4793.
СКРИНИНГ ГРИБОВ НА СПОСОБНОСТЬ УТИЛИЗИРОВАТЬ АЦК
Никонов И.Н.1, Ячиновский И.С.2, Сафронова В.И.1, Белимов А.А.1
1 всероссийский НИИ сельскохозяйственной микробиологии РАСХН,
Санкт-Петербург
2 Санкт-Петербургский государственный университет,
Санкт-Петербург
АЦК (1-аминоциклопропан-1-карбоксилат) явля-
ется предшественником в биосинтезе фитогормона этилена у растений. Фермент АЦК-деаминаза (КФ: 4.1.99.4) обнаружен у бактерий и грибов и катализиру-ет разложение АЦК до аммиака и альфа-кетобутирата. Данный фермент играет важную роль в стимуляции роста растений ризосферными бактериями (Belimov et al., 2001). Однако в настоящее время информация о грибах, способных утилизировать АЦК, практичес-ки отсутствует. Поэтому поиск грибов-продуцентов АЦК-деаминазы является актуальным.
В работе использовали около 100 штаммов из кол-
лекций непатогенных микроорганизмов сельскохо-зяйственного назначения ВНИИСХМ и лаборатории микологии и фитопатологии ВИЗР . Грибы культивиро-ва
ли при 25 °С в чашках Петри на агаризованной среде
Чапека с модификациями по источнику азота: без азо-та; NaNO3; (NH4)2SO4; или АЦК (300 мг/л). Опреде-ляли скорость роста и культурально-морфологические характеристики. На основе полученных данных расчи-тывали ростовой коэффициент по Бухало (1986). Ути-лизацию АЦК оценивали путём сравнения ростовых коэффициентов на 7 сутки у вариантов без источника азота, с добавлением АЦК или минеральных форм.
Способность грибов рода alternaria
утилизировать
АЦК не была обнаружена. Установлено, что грибы-лигнотрофы родов coriolus
и Trichoderma способны
утилизировать АЦК. У грибов-фитопатогенов рода Fu-
sarium выявлена значительная вариабельность по рос-ту на среде с АЦК. Способность утилизировать АЦК проявилась у F .avenacium, F . culmorum, F . graminearum,
F .equiseti, F . oxysporum, F .poae, F . solani, F . sporotrichoi-des. Обнаружено, что при культивировании на среде с
АЦК виды Fusarium можно разделить на три группы
по культурально-морфологическим признакам. У 2-х штаммов F . culmorum АЦК-деаминазная активность
не выявлена.
Таким образом, способность утилизировать АЦК
является распространенным признаком у представи-телей изученных таксономических и экологических групп грибов. Ряд штаммов отобран для количествен-ного определения активности АЦК-деаминазы.
Работа поддержана грантом РФФИ № 06–04–
49486а.
Физиология и биохимия грибов 137
Лонголитин представляет смесь протеаз, секре-
тируемых сапрофитным низшим грибом Аrthrobotrys
longa, из культуральной жидкости которого препарат выделен и частично очищен.Лонголитин нетоксичен, имеет широкий диапазон активностей, а высокая спе-цифичность
к белкам – компонентам тромба стиму-
лировала поиск и исследование его как возможного тромболитического средства. Действительно тромбо-литический эффект лонголитина обнаружен и подроб-но описан нами in vitro и in vivo как в отношении круп-ных венозных тромбов у крыс в яремной вене после внутривенного введения, так и в опытах на поверхнос-тной краевой вене уха кролика при смазывании препа-ратом тромбированного сегмента сосуда.
Известно, что большинство протеаз, участвующих
в тромбообразовании и тромболизисе, являются гли-копротеинами, белками с ковалентно привязанной к пептиду углеводной цепочкой, существенно влияющей на многие биологические свойства гликопротеина, его активность, клиренс, антигеннность и др. Возможно, что
и лонголитин, состоящий из протеаз – тромболи-
тиков, также имеет в своем составе гликопротеины.
О процессах гликозилирования белков, синтези-
рующихся и секретирующихся грибом Аrth.longa нет данных, однако показано, что прилипание нематод, на которых паразитирует род Arthrobotrys, к сетям, фор-мируемыми гифами другого гриба A.oligospora, свя-зано с наличием на поверхности гиф полисахарида лектина, образующего гликозидные связи с гликопро-теинами кутикулы нематод. Несомненно, что глико-зилирование пептидов и образование гликопротеинов существенно для A.longa, как для всех паразитирую-щих микроорганизмов, хотя бы потому что один из способов стабилизации структуры секретирующихся протеолитических ферментов (возможно и входящих в состав лонголитина) и защита их от аутолиза является связывание ферментов с углеводами с образованием гликопротеинов.
Цель рабо
ты – показать, что в состав препарата
лонголитина входят гликопротеины, обладающие и не обладающие протеолитической активностью
Изучение свойств лонголитина при гелефильтра-
ции на сорбентах Sephacryle S-200 и Sephadex G-100, на ионообменниках ДЕАЕ-целлюлоза и СМ-цел-лю
лоза в том числе в режиме В эЖХ показало, что
препарат не гомогенен, содержит белки не только с протеолитической активностью, все вместе образую-щие довольно прочный гидрофобный комплекс.Со-став белков нестабильный, меняется в зависимости от условий культивирования, включая, возможно, и сезонные влияния.Так препарат весеннего культи-вирования оказался более лабильным, в значитель-ной мере привязываясь к полисахаридной матрице ДЕАЕ- и СМ-целлюлозы в отличие от зимнего об-разца, где только жесткое воздействие 6М мочеви-ны позволило осуществить связывание препарата с матрицей с последующей элюцией его градиентом Nacl (0,2М).Гидрофобность, присущая обоим образ-цам препарата, была исследована обращеннофазовой хроматографией на Octyl-Sepharose, где вся проте-олитическая активность практически оставалась свя-занной с колонкой.Постановка обращенноофазовой ВэЖХ
на колонке phenomenex C Jupiter 300A выяви-
ла присутствие большой фракции белка, соединенно-го, вероятно, с углеводами, т.е. гликопротеина, но не обладающего протеолитической активностью. Трех-кратная рехроматография пика протеолитической активности лонголитина приводила не к его разделе-нию, а к появлению одной и той же фракции (0 пика) с уменьшающейся амплитудой. При спектрофотомет-рии этой фракции обнаружили спектр поглощения 240–200 нм в отличие от типичного пептидного 280 нм
.эксперимент позволил косвенно предположить
присутствие фракции гликопротеинов в составе лон-голитина, содержащей, вероятно, большой компонент углеводных остатков, которые при постоянной рех-роматографии при низких значениях рH постепенно «снимались « с поверхности белка, уменьшая высоту пика на хроматограмме. Для прямого определения присутствия гликопротеинов в составе лонголитина был поставлен электрофорез в ПААГ с последующей специфической окраской реактивом Шиффа.Гли-копротеины окрасились в виде 5 полос у «зимнего» образца мол.массой от 66 до 44 кДа, в то время как в» весенном» лонголитине была всего одна полоса 35кДа. Сопоставляя картину белкового электрофоре-за с электрофорезом, окрашенном на гликопротеины, можно сказать.что большинство белков в «зимнем» препарате являются гликопротеинами . в то время как в «весеннем» их гораздо меньше.Более ранние эксперименты с зимографией ферментов выявили основной протеолитический компонент лонголити-на –
протеазу с мол.массой 35 кДа, которой сопутс-
тв
овал минорный компонент – протеаза с мол.массой
49 кДа.Прочие значения мол. масс, фиксирующихся при различных методах исследований, являются, ве-роятно, результатом модификации основных протеаз и
взаимодействия с ними – частичная деградация,
комплексообразование, образование агрегатов и др. Поскольку значения 35кДа и 49кДа входят в интер-вал мол. масс, полученных в работе для гликопротеи-нов, можно предположить, что протеазы лонголитина тоже являются углеводсодержащими белками, т.е. в состав лонголитина входят гликопротеины как обла-дающие, так и не обладающие протеолитической ак-тивностью.Г ЛИКОПРОТЕИНЫ В СОСТАВЕ ЛОНГОЛИТИНА
Оккельман И.А., Шаркова Т.С.,
Серебрякова Т.Н., Подорольская Л.В.
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова
Москва
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 138
В последнее время все большее внимание уделяется
фотодинамическим деструктивным реакциям, протека-
ющим в биологических системах под действием света длинноволновой ультрафиолетовой (УФ) и видимой об-ла
стей спектра. это вызвано, с одной стороны, важной
ролью фотодинамических процессов в реализации фото-токсических и фотоканцерогенных эффектов в коже че-ло
века при действии солнечного излучения, а с другой – с
разработкой и усовершенствование способов направлен-ного фотоповреждения клеток и биологических структур (при фототерапии опухолей видимым светом в присутс-твии сенсибилизаторов порфириновой природы).
Установлено, что большинство порфиринов обла-
дает существенной каталитической и ферментативной активностью, в силу которой они могут выступать как активаторы или сенсибилизаторы процессов. Исследо-вания последних лет показали, что порфирины обла-дают уникальным свойством модифицировать радиа-ционное поражение объектов.
О молекулярных механизмах фотодинамических
эффектов, сенсибилизируемых эндогенными порфи-ринами (при облучении клеток низкоинтенсивным красным св
етом) известно пока очень мало. это в зна-
чительной мере связано с отсутствием данных о внут-риклеточной локализации порфиринов, выступающих в качестве сенсибилизаторов.
экспериментальные данные, подтверждают, что
именно плазматические мембраны являются одной из главных мишеней повреждающего действия видимого света: облучение дрожжевых клеток видимым светом в присутствии гематопорфирина или протопорфирина приводило к инактивации клеток и повреждению плаз-матических мембран, определяемому по изменению проницаемости их к α-нитрофенил- D-глюкопирано-
зиду. Поскольку действие света в присутствии сенси-билизаторов направлено на те компоненты клетки, в которых сенсибилизатор локализуется, можно пред-положить, что первичные хромофоры локализованы в плазматических мембранах.
Для выяснения связи порфиринов с плазматичес-
кими мембранами нами проведен спектрофлуоримет-рический анализ этих структур после их выделения из дрожжевых клеток.
Согласно спектральному анализу, проведенному
нами на целых клетках, выявлено наличие в клетках дв
ух флуоресцирующих типов порфиринов – копро-
порфиринов (главный максимум флуоресценции при 620 нм) и протопорфиринов (главный максимум при 640 нм). Спектрофлуориметрический анализ изоли-рованных плазматических мембран дрожжей показал, что в плазматических мембранах локализовано вещес-тво, обладающее флуоресценцией в красной области спектра Фп
683. Спектр этой флуоресценции имеет один
максимум при 683 нм. Основной максимум в спектре ее
возбуждения расположен в области 400 нм, что близко совпадает с полосой Соре для порфиринов. Возбужде-
ние света в УФ области спектра с максимумом при 280 нм, соответствующим максимуму поглощения белков, приводило к появлению той же флуоресценции с пиком при 683 нм.
Полученные результаты свидетельствуют о том,
что выявленная нами флуоресценция плазматических мембран обусловлена локализованным в них фотосен-сибилизатором порфириновой природы, отличным от копро- и протопорфиринов, содержащихся в других клеточных структурах.
Более подробное изучение биохимических моди-
фикаций, индуцированных видимым и низкоинтенсив-ным красным светом являются темой наших дальней-ших исследований.ЛОКАЛИЗАЦИЯ В ПЛАЗМАТИЧЕСКИХ МЕМБР АНАХ
ДРО
ЖЖЕЙ НОВОГО ТИПА ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОР А
ПОРФИРИНОВОЙ ПРИРОДЫ
Пиняскина Е.В.
УРАН Прикаспийский институт биологических ресурсов
Дагестанского научного центра РАН,
Махачкала
БИОПОЛИМЕРЫ УГ ЛЕВОДНОЙ ПРИРОДЫ Р АЗЛИЧНЫХ
ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ГРИБОВ РОДА LENTINUs
Пучкова Т.А., Смирнов Д.А., Щерба В.В.
Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
Гриб Lentinus edodes обладает онкостатическим,
гепатопротекторным, антиоксидантным, хемо- и ра-диопротекторным, антимикробным, противовирус-ным, гиполипидемическим и др. действием [1]. Его биологическое действие во многом определяют био-полимеры углеводной природы, составляющие до 50 %
от сухой биомассы и представленные свободны-
ми и связанными сахарами, а также полисахаридами. Исследование полисахаридов глубинного мицелия других представителей р. Lentinus позволит расши-
Физиология и биохимия грибов 139
рить применение этих грибов в медицине и будет
способствовать созданию новых лечебно-профилак-тических препаратов и биологически активных доба-вок к пище.
Проведено сравнительное изучение полисахари-
дов глубинного мицелия и культуральной жидкости грибов р. lentinus: l
. edodes, l. lepideus и l. tigrinus.
Грибы выращивали в погруженной культуре на опти-мизированной
питательной среде. эндополисахариды
из мицелия выделяли по [2], экзополисахариды – из культуральной жидкости по [3]. Гельхроматографию полисахаридов осуществляли на Toyopearl HW-65, колонка 1, 2×45 см. В качестве элюента использовали фосфатный буфер, рН 7,2. Состав углеводов полисаха-ридов (после предварительного гидролиза) определя-ли методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) в виде триметилсилильных производных сахаров.
Более быстрым накоплением биомассы (11,0–14,5 г/
л за 7–9 сут) отличались грибы L. lepideus и L. tigrinus. Для роста всех штаммов L. edodes требовалось 12–14 сут. Максимальное количество эндополисахаридов (9,0–10,2
%) содержалось в биомассе L. lepideus, а са-
мый высокий синтез экзополисахаридов (4,0–5,2 г/л) наблюдался у L. edodes.
В эндополисахаридах грибов присутствовали как
высокомолекулярные: l.
edodes − 1000 кДа, l. lepide-
us − 200–300 кДа, l. tigrinus − 500 кДа, так и низкомо-
лекулярные фракции (Mr<10кДа). В водорастворимых фракциях экзополисахаридов у грибов l.
edodes и l.
tigrinus
преобладают низкомолекулярные полисахари-ды с Mr менее 10 кДа и 10–70 кДа, а в щёлочераство-римых
– высокомолекулярные Mr=500–2000 кДа. Мо-
лекулярная масса водорастворимого экзополисахарида l. lepideus
составила 200–500 кДа.
Полисахариды всех исследованных грибов явля-
ются гетерогликанами, основным мономером которых являет
ся глюкоза (43,6−96,4 %), также присутствуют
манноза (1,5−22,2 %) и галактоза (4,6–11,0). В полиса-харидах
L. lepideus обнаружена арабиноза (1,4–2,3 %).
экзополисахариды L. lepideus содержат высокое (21,8 %), а L. tigrinus небольшое (1,4 %) количество ксилозы. Все исследованные внутри- и внеклеточных полисахариды грибов оказались пептидогликанами с содержанием
белка 0,3–5,9 %. При этом более высокое
его количество отмечено в экзополисахаридах.
Таким образом, проведенные исследования показа-
ли, что представители грибов р. lentinus различаю тся
как по скорости роста в погруженной культуре, так и по образованию биополимеров углеводной природы и их физико-химическим характеристикам.
Литература1.
Reshetnikov S.v ., Wasser S.p ., Tan k.k. Higher
basidiomycetes as a source of antitumour and immunos-
timulating polysaccharides (Rewiev) // Int. J. of Medicinal Mushrooms.
– 2001. – vol. 3, N 4. – p . 361–394.
2. Mizuno T. // Int. J. of Medicinal Mushrooms. –
1999. – vol. 1. – p . 9–29.
3. Babitskaya v.G., Scherba v.v., Mitropolskaya N.Y .,
Bisko N.A. // Int. J. of Medicinal Mushrooms. – 2000. – vol. 2. – p . 51–54.
ИССЛЕДОВАНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ГРУПП
В АКТИВНОМ ЦЕНТРЕ б-L-Р АМНОЗИДАЗ
pENICILLIUM COMMUNE 266
Рзаева О.Н., Варбанец Л.Д.
Институт микробиологии и вирусологии НАН Украины
им.
Д.к. заболотного,
киев
б-L-Рамнозидаза (б-L-рамнозид-рамногидролаза,
К.Ф. 3.2.1.40) – фермент класса гидролаз, который характеризуется специфичностью по отношению к терминальным б-1, 2-, б-1, 4-, и б-1, 6-связанным ос-таткам L-рамнозы, присутствующей в природных глик
оконъюгатах и синтетических гликозидах. эти
свойства фермента используются в фармакологии, кос-метологии, медицине, кондитерской промышленности и виноделии, а также как аналитический инструмент в научно-исследовательских работах для установления структуры углеводсодержащих субстратов.
Очистку фермента проводили путем дробно-
го фракционирования белковой смеси из фильтрата penicillium
commune 266 сульфатом аммония (от 30 до
90 % насыщения), а также ионообменной хроматогра-фией на
DEAE-TSk 650 М геле. Получено два препа-
рата с б-L-рамнозидазной активностью. Оптимум рН обоих ферментов находился в кислой области (4,0 и 4,2 для б-L-рамнозидаз 1 и 2 соответственно), диапа-зон
рабочей температуры от 4 до 70 °С с оптимумом
при 60 °С.
Для управления ферментативным процессом и
смещения реакции в направлении увеличения выхода целевого продукта необходимо установить механизм каталитического действия б-L-рамнозидазы. Одним из подходов является идентификация функциональных групп активного центра фермента, которые принима-ют непосредственное участие в катализе.
На основании анализа кинетических кривых зави-
симости скорости б-L-рамнозидазной реакции от вели-чи
ны рН (рКв1 и рКа1 – 2,8 и 5,7; рКв2 и рКа2 – 3,2 и
5,8, для б-L-рамнозидаз 1 и 2 соответственно), а также результатов экспериментов по фотоокислению можно предположить, что в активном центре б-L-рамнозида-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 140
зы 1 и 2 присутствуют карбоксильная групп С-концевой
аминокислоты и имидазольная группа гистидина. Для идентификации других функциональных групп в актив-ном центре был применен ингибиторный анализ фер-ментативной реакции с использованием ионов метал-лов и специфических химических реагентов. Наиболее су
щественное влияние на б-L-рамнозидазу 1 проявили
катионы Сu2+, Mn2+, Ag+, Hg2+, которые угнетали ее ак
тивность на 45–55 %. б-L-Рамнозидаза 2 полностью
ингибировалась ионами Ba2+ и Mn2+, либо на 45 % –
ионами Ag+и pb2+. Уменьшение активности б-L-рамно-зи
дазы 2 на 53 % при действии на нее арсенита натрия,
возможно, обусловлено наличием близко расположен-ных SH-групп. Снятие ингибиторного эффекта, вызван-ного действием п-ХМБ на б-L-рамнозидазы 1 и 2, та-кими реактиваторами как L-цистеин, в-меркаптоэтанол и дитиотреитол дает возможность предположить, что вблизи активного центра присутствуют сульфгидриль-ные групп, которые, хотя и не участвуют в катализе, однако играют важную роль в поддержании активной конформации молекул ферментов, способствуя прояв-лению б-L-рамнозидазной активности.
ШТАММЫ Penicillium lilacinum ,
ПРОДУЦИРУЮЩИЕ в-ГАЛАКТОЗИДАЗЫ С ОПТИМУМОМ
ДЕЙСТВИЯ В НЕЙТР АЛЬНОЙ СРЕДЕ
Сапунова Л.И., Лобанок А.Г., Тамкович И.О., Костеневич А.А.
Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
Непреходящий интерес исследователей к в-галак-
тозидазам (лактазам, в-D-галактозид-галактогидро-лазам, К.Ф.3.2.1.23) обусловлен их физиологической ролью: в желудочно-кишечном тракте человека и жи-вотных фермент катализирует процесс гидролиза лак-тозы с образованием галактозы и глюкозы. Нарушение синтеза фермента является причиной наследственной непереносимости молока, основной углеводный ком-понент которого представлен лактозой (молочным сахаром). При лактазной недостаточности взрослым и, особенно, детям, а также молодняку сельскохозяйс-твенных животных, в рационе которых значительную долю составляет молоко, показано употребление мо-лочных и других продуктов, пищевых (кормовых) до-бавок с пониженным содержанием лактозы.
Для получения диетических безлактозных молоч-
ных продуктов, а из молочной сыворотки также глю-козо-галактозного сиропа, заменяющего белый сахар в хлебопекарной и кондитерской промышленности, используют препараты в-галактозидаз микробного происхождения. Препараты фермента высокой степе-ни очистки являются также субстанцией для произ-водства фармакологических препаратов, улучшающих пищеварение.
Известно, что свойство синтезировать в-галакто-
зидазы широко распространено среди про- и эукари-отических микроорганизмов. Однако коммерчески наиболее востребованными продуцентами в-галак-тозидаз являются мицелиальные грибы, в основном, представители родов asper
gillus и Penicillium , в том
числе различные природные, а также полученные с использованием методов традиционной генетики или технологий рекомбинантных ДНК штаммы. В отличие от бактерий, грибы продуцируют ферменты, имеющие внеклеточную локализацию и, как правило, гидроли-зующие специфический субстрат преимущественно в кислой среде. Повышенная кислотность питательной среды является также необходимым условием актив-ного синтеза ферментного белка указанной группой микроорганизмов.
Аналогичная закономерность была установлена и в
отношении большинства исследованных нами грибов из Белорусской коллекции непатогенных микроорга-низмов (ГНУ «Институт микробиологии НАН Бела-руси»), за исключением четырех штаммов P .
lilacinum.
Как показали результаты проведенных исследований, культуры указанных грибов активно росли на всех испытанных средах с лактозой или молочной сыво-роткой, в том числе содержащих как физиологически кислые, так и физиологически щелочные источники азотного питания. Отмечаемые при этом невысокий уровень синтеза в-галактозидазы и подщелачивание ку
льтуральной среды до значений рН 8.4–8.5 явились
физиолого-биохимической особенностью рассматри-ваемых штаммов P .
lilacinum. Кроме того, продуци-
руемый ими фермент предпочтительнее гидролизовал специфический субстрат в нейтральной, чем в кислой среде. Так, например, каталитическая активность в-галак
тозидаз указанных грибов при рН 7.0 была в 3–
5 раз более высокой, чем при рН 4.2, что не является характерным свойством ферментов, продуцируемых эукариотическими микроорганизмами.
Таким образом, нами впервые выявлены предста-
вители мицелиальных грибов
– штаммы Penicillium li-
lacinum, синтезирующие β-галактозидазу с оптимумом
действия в нейтральной среде. Указанные эукариоты из-за недостаточно высокого уровня синтеза фермен-та не могут рассматриваться в качестве продуцентов β-галактозидазы, однако могут быть использованы в работах про конструированию рекомбинантных штам-мов как доноры гена, кодирующего синтез нетипич-ного для грибов ферментного белка. Можно полагать, что биокатализаторы с оптимумом действия в ней-тральной среде окажутся особенно востребованными при производстве диетических безлактозных молоч-ных продуктов.
Физиология и биохимия грибов 141
В культуральной жидкости (КЖ) энтомопатоген-
ных грибов cor dyceps militaris , evlachovaea kintrischica ,
T
olypocladium cylindrosporum , Paecilomyces lilacinus об-
наружены протеолитические ферменты и ингибиторы
протеиназ. Грибы выращивали на различных средах, являющихся модификациями среды Чапека, при этом спектр секретируемых соединений определялся соста-вом среды. Так, при выращивании на среде, содержащей кутикулу насекомых, наблюдалось резкое возрастание ферментативной активности, а также секреция проте-иназ, не выделяемых грибами в культуральные среды без содержания кутикулы: значительная активность субтилизиноподобных протеиназ проявилась у P . lilaci-
nus, трипсиноподобных –
у c. militaris и e.kintrischica ,
а
минопептидазная активность была обнаружена в КЖ
T. сylindrosporum . Активность цистеиновых протеиназ
не определилась ни в одном из образцов КЖ.
Ингибиторная активность проявлялась только при
отсутствии ферментативной активности в образце КЖ. Прогревание КЖ показало, что после разрушения фер-ментов определяется лишь незначительная ингибитор-на
я активность. это, возможно, свидетельствует о том, что синтез ферментов препятствует синтезу ингибиторов и наоборот. На среде, содержащей желатину, P . lilacinus
секретировал эффективный ингибитор субтилизинопо-добных протеиназ, а T. cylindrosporum , выращенный на
этой среде, образовывал соединения, подавляющие ак-тивность трипсина и бромелаина. Методом гель-хрома-тографии было показано, что в культуральную среду сек-ретировались два ингибитора с разной специфичностью. Все исследованные штаммы ингибировали цистеиновые протеиназы, при этом все секретируемые ингибиторы были устойчивы к действию пепсина.
Таким образом, выращивание энтомопатогенных
грибов на средах, содержащих кутикулу, обеспечивает максимальный (как количественный, так и качествен-ный) выход ферментов в культуральную среду, так как кутикула является оптимальным субстратом для энто-мопатогенных грибов. Процессы синтеза ингибиторов и ферментов, по-видимому, являются взаимоисключа-ющими. Предполагается, что ингибиторы играют роль в защите грибов от фунгицидного влияния чужерод-ных протеиназ.
Работа поддержана грантами РФФИ и МНТЦ.СЕКРЕТИРУЕМЫЕ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИЕ ФЕРМЕНТЫ И
ИНГИБИТОРЫ ПРОТЕИНАЗ эНТОМОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
Семенова Т.А.1, Дунаевский Я.Е.2, Белозерский М.А.2, Белякова Г.А.1, Борисов Б.А.3, Семенова С.А.4
1 Биологический факультет МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
2 НИИ ФХБ им. А.Н. Белозерского,
Москва
3 Центр паразитологии Института Экологии и Эволюции РАН,
Москва
4 Химический факультет МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
ЛИПИДЫ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ КАК АЛЬТЕРНАТИВНЫЙ
ВИД ТОПЛИВА ДЛЯ ДИЗЕЛЬНОГО ДВИГАТЕЛЯ
Сергеева Я.Э., Галанина Л.А., Феофилова Е.П.
Институт микро
биологии им. С.Н. виноградского РАН,
Москва
В начале ХХI века человечество столкнулось с про-
блемой постепенного и неизбежного исчерпания ми-ровых запасов нефти. По оценке специалистов к 2030 го
ду потребление энергии в мире вырастет на 60 %,
что потребует значительного увеличения запасов топ-лива. Таким образом, возникла проблема поиска иных, альтернативных традиционному источнику энергии нефти источников энергии и топлива, которые были бы регенерируемыми и экологически безопасными.
Одним из наиболее перспективных альтернатив-
ных источников энергии, привлекающим все большее внимание исследователей в последние годы, является так называемый биодизель. Биодизель представляет собой смесь моноалкиловых (чаще всего метиловых или этиловых) эфиров жирных кислот, полученных при трансэтерификации возобновляемых биологичес-ких ресурсов, таких как растительные масла или жи-вотные жиры.
Сегодня в мире широко используется биодизель
полученный на основе масел сельскохозяйственных ку
льтур таких как соя (США, Бразилия), рапс (до 80 %
от всего биодизеля, произведенного в Европе), под-солнечник (ряд стран Европы, в том числе Франция, Италия). Число работ по исследованию возможности получения биодизеля из различных возобновляемых природных источников постоянно растет. Наиболее изучены с этой точки зрения растительные масла (ко-косовое, соевое, рапсовое, оливковое, арахисовое и т.д.), животные жиры изучены в меньшей степени. В послед-нее время в качестве исходного сырья для получения
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 142
биодизеля рассматриваются бактерии, водоросли, а
также олеагенные дрожжи и грибы. Особый интерес в данном контексте представляют мукоровые грибы сем. Cunninghamellaceae, способные к активному синтезу липидов, содержание которых в биомассе может дости-га
ть 50 % (от сухого веса биомассы). Относительно не-
давно было предложено использовать липиды мукоро-вых грибов в качестве исходного сырья для получения биодизеля [Ткачевская Е.П. и др., 2007].
Цель данной
работы – создание основ для биотехно-
логического получения липидов мицелиального гриба Cunninghamella japonica для их дальнейшего использо-вания в качестве исходного сырья для биодизеля. Для чего первоначально проведен скрининг мицелиальных грибов
– представителей различных систематических
групп по определению их олеагенной способности. По результатам скрининга выявлен суперолеагенный продуцент
липидов – мукоровый гриб Cunninghamella
japonica. Проведена модификация питательной среды с целью ее удешевления. Установлено, что отобранный мукоровый гриб на специально подобранной среде, со-держащей в качестве источника азота нитрат аммония, способен накапливать до 16 г/л биомассы и более 7 г/л липидов. Проведенный анализ состава липидов пока-зал, что преобладающей фракцией являются триглице-риды. В результате анализа жирнокислотного состава липидов установлено, что в сумме жирных кислот преобладающей
является олеиновая кислота (до 50 %
от суммы жирных кислот). Также были установлены такие показатели, характерные для биодизеля, как йод-ное число, составившее 86.61 и теплоемкость липидов (теплотв
орная способность) – 37.13 МДж/кг. Данные
показатели соответствует аналогичным показателям наиболее широко используемого биодизеля, получен-ного на основе рапсового масла.
Из обезжиренной биомассы гриба был выделен хи-
тин. Наличие второго продукта ферментации делает процесс получения из мицелиальных грибов альтерна-тивного вида топлива более экономически выгодным.
Таким образом, данное исследование открывает
дальнейшие перспективы для создания биодизеля на основе липидов мукоровых грибов.
МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ
ФЕРМЕНТА ЛАНОСТЕРОЛ – 14 – АЛЬФА-ДЕМЕТИЛАЗЫ
CANDIDA ALbICANs С ИМИДАЗОЛОМ.
Смолина Н.А.1, Маркозашвили Д.Т.2, Батагов А.О.2, Игнатьева С.М.1
1 НИИ медицинской микологии им. П.Н. кашкина СПб МАПо,
Санкт-Петербург
2 ФГУ «Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии им. в.А. Алмазова» ФАвМП,
Санкт-Петербург
У стойчивость к азолиновым антимикотическим
препаратам остается значительной проблемой для та-кого распространенного грибного патогена как Candida albicans. Общей химической группой в молекулах азоли-нов является остаток имидазола. Механизм анитимико-тического действия азолинов на C. albicans обусловлен их химическим взаимодействием с белком ланостерол 14-альфа-деметилазой (ERG11). В данной работе предсказа-на третичная структура данного белка C. albicans, а также построена математическая модель его взаимодействия с имидазолом. На основании расчетных энергетических характеристик химического связывания вычислена конс-танта ингибирования этого фермента имидазолом.Для верификации расчетных методов было про-
ведено моделирование связывания белка-гомолога ланостеро
л – 14 – альфа-деметилазы Mycobacterium
tuberculosis CYp51. Полученное расчетное значение константы ингибирования у CYp51 совпало с экспе-риментально измеренным с погрешностью, не превы-шающей 5
%. Данное соответствие свидетельствует о
потенциальной применимости математических мето-дов, использованных в настоящей работе для оценки эффективности связывания азолиновых антимикоти-ческих препаратов с белком ланостерол 14-альфа-де-метилазой.
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ЛЕКТИНА ТРУТОВИКА GriFola FrondoSa 0917
СО
СПЕЦИФИЧЕСКИМИ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКИМИ АНТИТЕЛАМИ
Степанова Л.В., Бурыгин Г.Л., Никитина В.Е.
Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов РАН,
Саратов
В настоящем исследовании с применением ком-
плекса методических подходов исследована спо-собность ранее полученного и охарактеризованного нами мицелиального лектина трутового гриба Grifola
frondosa 0917 к взаимодействию с гомологичными (специфическими, полученными на чистый препарат
Физиология и биохимия грибов 143
лектина) и негомологичными (неспецифическими; к
О-антигенам некоторых бактерий) поликлональными антителами кролика, а также с коммерческим препара-том г-глобулина человека. Результаты иммунофермен-тного (ИФА) и иммунодот-анализа с использованием фрагментов протеолитически расщепленных антител продемонстрировали связывание лектина с Fab-фраг-
ментами (антигенсвязывающим центром) только гомо-логичных антител, что свидетельствует о проявлении специфического взаимодействия «антиген–антитело». Таким образом, была доказана иммунохимическая спе-
цифичность этого взаимодействия. Тогда как выявлен-ное взаимодействие лектина с негомологичными анти-телами осуществлялось, скорее всего, за счет контакта углеводсвязывающей области лектина с углеводной частью антител (специфическая реакция «лектин–уг-левод»).
Поскольку как лектины, так и антитела являются
частью представляющих активный интерес биосис-тем, установление параметров их взаимодействия с целью понимания явления двойственной биоспеци-фики лектина и уточнения понятия «специфичность» в применении к наблюдаемым взаимодействиям до-статочно важно. С применением расчетных формул, являющихся производными от закона действующих масс, метода серийных разведений, предложенно-го С.А. Бобровником (2003; 2004) для установления параметров лиганд–рецепторного взаимодействия, а также результатов ИФА мы рассчитали константы образования комплексов лектина G. frondosa 0917 с
гомологичными и негомологичными (к О-антигену бактерии Sinorhizobium meliloti p22
1; выбор произ-
вольный) антителами. Расчетные данные показывают, что величины констант связывания K
f лектина с гомо-
логичными антителами в среднем в 1,5 раза выше, чем таковые в случае негомологичных антител. При этом
величины изменения стандартной свободной энергии ∆G
0, рассчитанные через установленные константы
образования (в биологическом смысле – аффиннос-
ти) и характеризующие прочность образующегося комплекса реагентов, практически не отличались. При образовании связи «лектин G. frondosa 0917–го-
мологичные антитела» ∆G
0 в среднем составила −
51,109 кДж/моль при 25°С; ∆G0 комплекса «лектин G.
frondosa 0917– негомологичные антитела» в среднем
равна −50,121 кДж/моль при 25°С. Вероятно, с пози-ций энергетики молекулярных взаимодействий не-льзя назвать взаимодействие лектина с одним типом антител более специфичным, чем с другим, хотя, с учетом более высоких величин констант связывания с гомологичными антителами, последние, очевидно, более конкурентоспособны за образование связей с лектином. Наши расчеты являются иллюстрацией к решению вопроса о том, можно ли по результатам ис-следований на уровне гомогенных веществ, уже не яв-ляющихся частью живой системы, однозначно судить об их функционировании в системе? Контакт лектина с гомологичными антителами, осуществляемый, как было доказано, посредством антигенсвязывающих центров рецептора, в живой системе вызвал бы бло-кирование лектина как антигена, а контакт лектина с негомологичными антителами посредством связей, основанных на случайной пространственной компле-ментарности частей биомолекул определенной кон-формации, провоцировал бы, очевидно, совсем иной отклик системы. В данном случае речь может идти, вероятно, только о биологической специфичности
лектина и антител на уровне физиологических единиц
живой системы , а на молекулярном уровне имеет
место универсализм взаимодействий.
ПОИСК ПРОДУЦЕНТА ВНЕКЛЕТОЧНОЙ ИНУ ЛИНАЗЫ
ГРИБНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
Стойко В.И.1, Айзенберг В.Л.1, Захарченко В.А.1, Капичон А.П.1,
Калашник
С.Н.1, Бурбан А.Ф.2, Коновалова В.В.2
1 Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного
Национальной акад
емии наук Украины (ИМв НАНУ),
киев
2 Национальный университет «киево-Могилянская Академия»,
киев
эффективность биотехнологического производства
определяется использованием высокопродуктивных шт
аммов грибов – продуцентов биологически актив-
ных веществ. Отдел физиологии и систематики микро-мицетов ИМВ НАНУ владеет стратегического значения коллекцией мезо- и термофильных микромицетов, на-считывающей около 8 тыс. культур более 500 видов.
Исследование направлено на поиск продуцента
фермента инулиназы (2, 1- β-Д-фруктозан-фруктано-
гидролазы, КФ 3.2.1.7) грибного происхождения для дальнейшего использования в биотехнологии.Инулиназа гидролизует полифруктозид инулин с
образованием фруктозы. Актуальность процесса обус-ловлена перспективой получения сахаристых веществ, этанола, молочной кислоты путем гидролиза нетради-ционного сельскохозяйственного сырья. Инулиназа также может быть использована для получения фрук-тозы и определения ее содержания в пищевых продук-тах. Наиболее эффективный метод гидролиза инули-на
– ферментативный – под действием инулиназы.
В настоящее время в Украине производство инули-
назы не организовано, что лимитируется отсутствием
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 144
конкурентноспособных продуцентов фермента и при-
водит к необходимости импорта препарата инулиназы высокой стоимости. Среди продуцентов инулиназы известны представители бактерий, грибов, дрожжей. эк
зо-инулиназа грибного происхождения является бо-
лее технологичной в сравнении с бактериальной эндо-инулиназой.
Работ
а по отбору активных изолятов – потенци-
альных
продуцентов фермента – проводилась в отделе
физиологии и систематики микромицетов ИМВ НАНУ . Способность к синтезу инулиназы определялась сре-ди 300 музейных культур микромицетов 40 родов 87 видов. Свойство к секреции экзо-инулиназы в среду культивирования обнаружено у микромицетов разных родов: Penicillium, asper
gillus, acremonium, Fusarium.
В результате направленного ступенчатого скрининга отобраны 2 штамма: Penicillium sp. 225 и asper
gillus
sp.8ТХ 67968. Наибольшее количество активных штаммов обнаружено среди грибов, изолированных, в основном, из почвенных образцов.
Биотехнология производства промышленно-цен-
ных ферментов, таких как инулиназа, требует при-менения корректных методов определения фермен-тативной активности. Поскольку в отечественных и зарубежных изданиях отсутствует подробное описа-ние корректного метода определения инулиназной активности с использованием реактива Самнера, нами была отработана, применительно к микромице-там как объектам исследования, методика определе-ния активности инулиназы, основанная на принципе восстановления редуцирующих сахаров. Методика опубликована в журнале «Биотехнология» (Москва), №5, 2007.
Изучены некоторые физиолого-биохимические
свойства селекционированых штаммов Penicillium
sp. 225 и asper
gillus sp.8ТХ 67968, в том числе: вли-
яние источников углерода, азота и фосфора, количес-тва посевного материала на рост и ферментативную активность грибов. Наивысший синтез внеклеточной инулиназы у отобранных штаммов зафиксирован на средах с сахарозой, глюкозой, арабинозой, фруктозой и цикорием.
Полученные данные будут использованы при под-
боре состава питательной среды и условий культиви-рования микромицетов с перспективой их практичес-кого применения.
ИЗУЧЕНИЕ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ
ГРИБОВ РОДА TRICHODERMA ИЗ АНТРОПОГЕННО
НАРУШЕННЫХ ПОЧВ РТ
Тазетдинова Д.И., Тухбатова Р.И., Шишкин А.В., Рафаилова Э.А.,
Морозова Ю.А., Михайлова И.М., Скворцов Е.В.
ГоУ в
По «казанский государственный университет
им. в
.И. Ульянова-ленина»,
казань
Виды рода Trichoderma применяются во многих об-
ластях промышленности. Из них получают целый ком-плекс гидролазных ферментов, которые используются в целлюлозно-бумажной и пищевой промышленности, в производстве моющих средств, в получении спирта и кормовых добавок, для переработки отходов.
Целью исследования явился поиск штаммов-про-
дуцентов ферментов, перспективных для производства биопрепаратов.
Нами были выделены изоляты грибов рода Tricho-
derma из антропогенно нарушенных почв Юго-Вос-точного региона республики Татарстан.
Выделенные изоляты идентифицированы с использо-
ванием морфологических (идентификация проводилась по Samuel), физиолого-биохимических и молекулярно-генетических методов. Участок ядерной рибосомаль-ной ДНК, содержащий ITS1 и 2 был амплифицирован в реакции ПЦР с использованием комбинации праймеров SR6R (5’-AAG TAG AAG TCG TAA CAA GG-3’) и LR1 (5’-GGT TGG TTT CTT TTC CT-3’).
Активность штаммов Trichoderma, перспективных
для сельского хозяйства, определяется активностью гидролаз, в частности, целлюлаз и протеаз. Также из-вестна способность Trichoderma к синтезу ферментов ксиланаз, способных увеличивать перевариваемость кормов, содержащих рожь и используемых в кормоп-роизводстве как добавки в рационы животных.
Проведено сравнительное изучение протеазной,
целлюлазной и ксиланазной активностей грибов рода Trichoderma при росте на послеспиртовой зерновой барде, которая содержит значительное количество сложных сахаров.
Определение ксиланазной и целлюлазной актив-
ностей
ферментных препаратов проводилось по kцnig
(2002), протеолитической активности – по Каверзне-вой (1971).
В результате исследований показано, что штаммы
обладали в большей степени гидролазной активнос-тью. Высокая ксиланазная и целлюлазная активности отмечены только у двух штаммов.
эти
штаммы могут быть рекомендованы для про-
изводства ферментных препаратов для применения в сельском хозяйстве, животноводстве и промышлен-ности.
Физиология и биохимия грибов 145
В последние десятилетия большое распростране-
ние получили фермен-тые препараты микробиологи-
ческого происхождения: бактериального и грибного. Широка область применения этих ферментов, как для технических целей, так и для непосредственно-го использования в качестве пищевых и кормовых добавок. Высокая специфическая активность таких препаратов и многосторонность действия энзимов обусловили развитие исследований по изучению фер-ментативного спектра грибов-продуцентов, особен-ностей их культивирования и возможных способов применения.
Ферментные препараты получают как метаболиты
при искусственном культивировании их продуцентов: в глубинной или поверхностной культуре, соответс-твенно в жидкой или на плотной питательной среде.
Препараты экзогенных гликозидаз грибного проис-
хождения (продуценты родов Trichoderma, Aspergillus, Mucor, p
enicillum) и актиномицетного (продуценты
родов Actinomyces, Streptomyces) – используются в пищевой и легкой про мышленности, в кормопроиз-
водстве. Гликозидазы микологической природы эф-фективно гидролизуют высокомолекулярные трудно расщепляемые с
оединения, которые выполняют в
растениях защитную функцию. это полис ахариды, со-
ставляющие основу клеточной стенки: целлюлоза, ге-мицеллюло-зы,
лигнин, пектин – которые не расщеп-
ляются высшими животными.
Микроскопические грибы и актиномицеты проду-
цирую
т также активные протеолитические ферменты.
Из числа протеаз микологического проис хождения по
строению каталитического центра можно классифици-ровать те же группы ферментов, которые характерны для других известных протеаз: сериновые, карбок-сильные, металлопротеазы. Тиоловые протеазы у гри-бов находят редко.
Внеклеточные сериновые протеазы синтезируют
штаммы Acremonium, Alternaria, Aspergillus, Cephalo-sporium, fusarium, p
enicillium, Trichoderma, verticilli-
um и др. Сериновые протеазы актиномицетов являют-ся трипсинопо-добными. Расщепляют эфирные связи, а т
акже связи, образованные остатк ами ароматичес-
ких аминокислот, лейцина, метионина. Известно, что неко
торые сериновые протеазы грибов способны рас-
щеплять коллаген и эластин.
Карбоксильные, или кислые протеазы широко рас-
прост
ранены среди микроскопических грибов – родов
Aspergillus, Mucor, penicillum, Trichoderma, Rhizopus
и др. Внеклеточные кислые протеазы грибов расщеп-ляют пептидные связи, образованные ароматическими и другими гидрооб-ными аминокислотами. Гидроли-зуют такие белки, как казеин, гемоглобин, бычий сы-вороточный альбумин, белки сои.Металлопротеазы грибов также имеют широкую
су
бстратную специфичности. Например, протеаза p.
roqueforty расщепляет казеин, гемоглобин, протамин, гистоны, слабо расщепляет эластин, желатин, фибрин (Кислухина О.В., 2002).
В процессе культивирования продуценты обычно
экспре
ссируют в питательную среду не один, а целый
ряд ферментов. Так, внеклеточные протеазы грибов вхо
дят в состав комплексных фер ментных препаратов,
таких как Амилоризин, Амилопроторзин и других. Из культуры Streptomyces griseus получают активный протеолитиче-ский препарат «проназа», который со-держит комплекс сериновых протеаз, позволяющий расщеплять б
елок овальбумин до 87 % (Логинова Т.А.
и др., 1981).
Таким образом, протеолитические ферменты гри-
бов гидролизуют те же белки, что и другие протеазы животного и растительного происхождения. Кроме того, имеются сообщения о способности грибных про-теаз расщеплять такие белки, как коллаген, эластин и кера
тин. эти белки практически не усваиваются желу-
дочно-кишечным трактом высших животных и чело-века, но могут расщепляться некоторыми микроорга-низмами.
Ко
ллаген, кератин и эластин – основные структур-
ные б
елки животных (склеропротеины) – отличаются
механической прочностью и химической инертнос-тью, которая обусловливается их аминокислотным со-ставом и конформацией молекул.
Известны протеазы микологического происхожде-
ния, позволяющие расщеплять склеропротеины (про-дуциру
емые грибами родов Aspergillus, penicillum,
keratinomyces; актиномицетов – A. albus, A. griseus и стрептомицетов – S. fraidiospirallis, S. griseus, S. fulvo-viridis).
При этом различают протеазы по специфичности
их действия
на струк турные белки, как «истинные»
и «неспецифические». «Истинные» склеро-протеазы действуют только на специфические для них субстра-ты и
не расщепляют других белков. Так, «истинные»
коллагеназы, независимо от происхождения, гидро-лизуют коллаген, в том числе нативный, воздействуя на первичную
структ уру белка, и расщепляют амино-
кислотную
цепь в неполярных участках молекулы по
связям (-х-гли-).
«Неспецифические» коллагеназы (коллагенолити-
ческие ферменты), гидролизуют как коллаген, в боль-шей степени
денатурированный, так и др угие белко-
вые субстраты, разрушая межмолекулярные связи. При это
м образуются пептиды с нетипичным для коллагена
содержанием аминокислот, не содержащие пролина, оксипро
лина и оксилизина, но имеющие в своем соста-
ве аминокислоты, способные образовывать внутри- и ФЕРМЕНТНЫЕ ПРЕПАР АТЫ МИКОЛОГИЧЕСКОЙ ПРИРОДЫ
Телишевская Л.Я., Овчинников Р.С.
ФГУ «в
ГНкИ»,
Москва
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 146
межмолекулярные св язи – тирозин, лизин, кетокисло-
ты (Н.С. Демина и др., 1996).
Названные выше микромицеты и актиномицеты, спо-
собные гидролизо-вать структурные белки, вырабатыва-
ют, как правило, неспефицические склеропротеазы.
Истинные коллагеназы и другие специфические
ск
леропротеазы пр одуцируют патогенные грибы
дерматофиты, для которых эти ферменты явл яются
факторами вирулентности, обеспечивая инвазию возбудителя (М. Asahi et al., 1985, B.R. Mignon et al., 1998). О способности этих микроорганизмов проду-цировать склеропротеазы сообщали разные авторы: J. Rippon (1964) выделил коллагеназу из культураль-ной жидкости Trichophyton schoenleinii, R.J. Yu et al. (1
968) – кератиназу из Т. mentagrophytes; W.C. Day et
al. (1968) – кератиназу из Т. granulosum; Т. Muhsin et
al., (1997) – кератиназу из Т. me ntagrophytes и эласта-
зу
из Т. verrucosum и М. gypseum; v. Meevotisom et al.,
(1979), M. Asahi et al., (1985) – эластазу из Т. rubrum.
Нами была установлена возможность получения
активного комплекса протеаз структурных белков (склеропротеаз) при культивировании грибов-дерма-тофитов родов Trichophyton (T. verrucosum, T. mentag-rophytes, Т. equinum) и Microsporum (M. cam’s, M. gyp-seum) ( Телишевская Л.Я. и др., 2005).Препараты грибных протеаз находят применение
для пищевых
и кор мовых целей, используются для
ферментативного гидролиза белковых су бстратов с
целью получения белковых гидролизатов. Очищенные кислые про-теазы из аспергиллов используют в качес-тве
препаратов для пищевой про мышленности и ме-
дицины.
Как показали наши результаты, препараты скле-
ропротеаз могут быть использованы для технических целей, в
частности для обработки кожевенного сырья.
При этом было показано, что в зависимости от исполь-зуемых штаммов-продуцентов, возможно получение различных препара
тов с заданными свойствами для
варьирования параметров готовой продукции (Овчин-
ников
Р .С. и др., 2004). Препараты склеропротеаз были
испытаны также для гидролиза коллагенсодержа-щих рыбных отходов с целью их утилизации.
Таким образом, микромицеты и актиномицеты яв-
ляются продуцентами активных ферментных систем разной специфично
сти и используются для по лучения
ферментных препаратов: гликозидаз, протеаз, пепти-даз и
др. Пат огенные грибы дерматофиты продуци-
руют специфические склеропротеазы: коллагеназу, кера
тиназу, эластазу – и позволяют получать активные
комплексные препараты этих энзимов.
СОСТАВ МЕМБР АННЫХ ЛИПИДОВ И ПРОТЕКТОРНЫХ
УГ ЛЕВОДОВ МИЦЕЛИАЛЬНОГО ГРИБА aSP erGilluS niGer
ПРИ Р АЗЛИЧНЫХ ТЕПЛОВЫХ ВОЗДЕЙСТВИЯХ
Терёшина В.М., Меморская А.С.,
Котлова Е.Р., Феофилова Е.П.
Институт микро
биологии им. С.Н. виноградского РАН,
Москва
В отличие от тепловых воздействий в зоне толе-
рантности, после теплового шока (ТШ) значительно увеличивается устойчивость погруженной культуры Aspergillus niger к летальному тепловому шоку. Для выявления роли мембранных липидов и растворимых углеводов цитозоля в приобретении мицелием a.
niger
термоустойчивости проведено сравнительное изуче-ние их состава после тепловых воздействий в зоне то-лерантности и теплового шока.
Разделение полярных липидов способом двумер-
ной ТСХ в системе Бенинга позволило выявить 12 ком-понентов:
9 фосфолипидов и 3 – сфингогликолипида,
тогда как глицерогликолипиды отсутствовали. Полно-стью идентифицирован состав фосфолипидов: массив-ные фо
сфолипиды – фосфатидилэтаноламин, фосфа-
тидилхолин, кардиолипин и фосфатидная кислота; ми
норные – фосфатидилсерин, фосфатидилинозит,
лизофосфатидилэтаноламин, лизофосфатидилхолин и фосфатидилглицерин. Обнаружено три сфингогли-колипида, обозначенные как СФ1, СФ2 и СФ3, сре-ди которых доминирует СФ1. В условиях ТШ и под воздействием температуры в зоне толерантности, не-зависимо от фазы развития, в мембранных липидах пр
оисходят однотипные изменения – увеличивается
количество фосфатидной кислоты и сфинголипидов, тогда как соотношение фосфатидилэтаноламин/фос-фатидилхолин не претерпевает существенных изме-нений
Состав жирных кислот четырех массивных фос-
фолипидов имеет общие черты: основными являются пальмитиновая и эруковая жирные кислоты, присутс-твуют также стеариновая, олеиновая и линолевая кис-лоты. Оба типа тепловых воздействий не приводят к росту уровня насыщенных жирных кислот в составе массивных фосфолипидов и, вследствие этого к сни-жению степени их ненасыщенности.
Нейтральные липиды гриба представлены в основ-
ном стеринами, свободными жирными кислотами, ди- и триацилглицеринами. Обнаружено, что ТШ вызыва-ет увеличение доли триацилглицеринов и уменьшение относительного содержания свободных жирных кис-лот. Доля стеринов в условиях ТШ различной длитель-ности и в зоне толерантности близка к контрольному варианту.
Физиология и биохимия грибов 147
Растворимые углеводы погруженного мицелия
гриба составляют 6–15 % от сухой массы и пред-
ставлены глюкозой, дисахаридом трегалозой и рядом
по
лиолов – глицерином, эритритом, арабитом, ман-
нитом и инозитом. Основным углеводом цитозоля в оптимальных температурных условиях является ма
ннит. В трофофазе его доля достигает 70–85 % от
суммы углеводов, а в идиофазе – вдвое ниже. Кроме
этого, для трофофазы характерно присутствие в ми-целии заметного количества глицерина, а для идио-фа
зы – этитрита и арабита. В трофофазе количество
трегалозы варьирует от следовых количеств до 5 % от
суммы углеводов, в идиофазе может достигать 10 %.
В условиях ТШ на стадии трофофазы уже через один ча
с содержание трегалозы достигает 13 % от суммы
углеводов и увеличивается через три часа до 35 %. На стадии идиофазы ТШ в течение шести часов приво-ди
т к доминированию (60 % от суммы) этого дисаха-
рида в составе углеводов цитозоля. Важно отметить, что при выращивании гриба в зоне толерантности в течение трех часов не наблюдалось повышения уров-ня трегалозы.
Таким образом, в отличие от однотипных измене-
ний полярных липидов в условиях ТШ и тепловых воздействий в зоне толерантности, уровень трегалозы в составе растворимых углеводов мицелия возрастает только в условиях ТШ. Таким образом, кроме трегало-зы, по-видимому, существенную роль в приобретении термоустойчивости могут выполнять также сфингог-ликолипиды. Полученные данные обсуждаются с по-зиций существующих гипотез адаптации к тепловому шоку.
ИЗУЧЕНИЕ ЛИПОКСИГЕНАЗНОЙ АКТИВНОСТИ
У ПРЕДСТАВИТЕЛЯ НИЗШИХ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ
СЕМЕЙСТВА Pillobolaceae – Pilaira anomala
Ткачевская Е.П.1, Сергеева Я.Э.2, Ларкина Е.А.1
1 ГоУ вПо Московская государственная академия
тонкой химиче
ской технологии им. М.в. ломоносова,
Москва
2 Институт микробиологии им. С.Н. виноградского РАН,
Москва
Исследование регуляции метаболизма биопроду-
центов тесно связано как с решением фундаменталь-ных научных вопросов, так и с практическими реко-мендациями по организации биотехнологического процесса. В этой связи представляется интересным изучение ферментных систем микробных биопроду-центов, что у грибов сем. Pilobolaceae практически не
изучалась.
В нашей работе выявлена липоксигеназная актив-
ность у представителя низших мицелиальных грибов семейства Pillobolaceae – Pilaira
anomala – активно-
го продуцента полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК). Из биомассы гриба, выращенной на сре-де благоприятной для синтеза липидов [1], выделен ферментный препарат, обладающий липоксигеназной активностью. Объектом исследования являлась отсе-лекционированная сотрудниками Института микро-биологии им. С.Н. Виноградского Р АН (к.б.н. Коно-ва
И.В., к.б.н. Галанина Л.А. и к.х.н. Сергеева Я.э.)
культура Pilaira anomala из коллекции ИБФМ им.
К.Г.
Скрябина Р АН.
Для определения липоксигеназной активности гри-
ба из биомассы Pilaira anomala выделяли ферментный
препарат, как ранее описано в нашей работе с оомице-том [2]. Концентрацию белка в препарате микробного фермента определяли по Бредфорду [3]. Отсутствие примесей гемовых соединений (например, цитохро-моксидаз) в препарате микробного фермента контро-лировали по отсутствию оптического поглощения в элек
тронном спектре препарата в области 370 – 460 нм
(спектрофотометр JASCO Uv 7800 Series, Япония).
Гель-электрофорез в системе Дэвиса и Лэммли
[4, 5] применяли для контроля чистоты и оценки мо-лекулярной массы микробного фермента с использо-ванием белков-свидетелей с известными значениями молекулярных масс. Для дифференциации ферментов, ответственных за оксигенацию жирных кислот, были использованы ингибиторы определенных оксигеназ.
Липоксигеназная активность Pilaira anomala изу-
чалась согласно ранее описанным методам [2, 6]. При этом липоксигеназная активность Pilaira anomala при
ферментативном окислении линолеата определялась как полярографическим методом (путем электрохими-ческой регистрации поглощённого О
2 с помощью элек-
тро
да Кларка (оксиграф эксперт 001, Россия)), так и
спектрофотометрическим методом (спектрофотометр JASCO U
v 7800 Series, Япония) по накоплению гид-
ропероксидов линолевой кислоты, сопровождаемому ростом оптического поглощения при 234 нм. Спектро-фотометрически фиксировали также усиление погло-щения раствора фермента (при 280 нм и 3309 нм) при его взаимодействии с субстратом, как описано ранее [2]. Химическую модификацию выделенной из клеток исследуемого зигомицета липоксигеназы по остаткам триптофана проводили согласно описанному в литера-туре методу[7].
Известно, что уровень ПНЖК в клетках зависит
как от активности ферментов, участвующих в биосин-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 148
тезе жирных кислот, в том числе как ответственных за
синтез длинноцепочечных ПНЖК, системы элонгаз и десатураз, так и от ферментных систем, участвующих в липидном метаболизме, в частности в конверсион-ных процессах окисления жирных кислот в перекис-ные соединения.
С целью исследования подобной оксигеназной ак-
тивности из биомассы изучаемого зигомицета Pilaira
anomala, выращенного на среде, благоприятной для
роста и синтеза ПНЖК впервые был выделен фермент-ный препарат, обладающий липоксигеназной активнос-тью. С использованием индометацина и нордигидро-гуаретовой кислоты ингибиторов циклооксигеназной и липоксигеназной активности соответственно было установлено, что активность ферментного препарата Pilaira anomala не подавлялась индометацином, но по-
давлялась нордигидрогуаретовой кислотой, что указы-вает на липоксигеназную активность препарата.
Определено, что концентрация белка в препара-
те составила 1.66±0.06 мг/мд, молекулярная масса по данным гель-э
лектрофореза – 120 kDa.
эксперименты по определению удельной актив-
ности выделенного препарата липоксигеназы (при его взаимодействии с линолеатом) показали, что: получен-ный ферментный препарат стабилен в температурном интерва
ле от 15 до 30 °С; рН-зависимость липоксиге-
назной активности в фосфатном буфере с использова-нием в качестве субстрата линолевой кислоты пред-ставляла собой кривую с 2-мя оптимумами: наиболее выраженным
при рН 6.5 и менее – при рН 9.5, при
значениях рН выше 11.0 наблюдалась полная потеря активности фермента. Предпочтительным субстратом для активности липоксигеназы являлась свободная, а не этерифицированная форма ненасыщенной кисло-ты. С использованием в качестве субстрата линолевой кислоты была измерена удельная активность фермен-та, средний уровень активности липоксигеназы соста-вил 2.51±0.19 мкм гидропероксидов/(мин
∙ мг белка).
Ранее при работе с оомицетом Pythium debaryanum
было выявлено повышение уровня ПНЖК в сумме жирных кислот липидов при росте оомицета на среде с экзогенным витамином К
1 [8], который в модельной
системе ферментативного окисления линолеата инги-бировал липоксигеназную активность [2]. В данной работе было зафиксировано аналогичное действие витамина К
1 на активность ферментного препарата
липоксигеназы Pilaira anomala. эт о может быть свя-
зано как с воздействием витамина К1 с теми участками
молекулы фермента, которые определяют проявление липоксигеназной активности.
Согласно имеющимся на данный момент литера-
турным данным на активность фермента могут оказы-вать влияние гидрофобные взаимодействия пептидных фрагментов белка с высоким содержанием гидрофоб-ных аминокислот, расположенных вблизи активного центра фермента, с различными высокомолекуляр-ными соединениями (например, α-токоферолом), при этом особое внимание уделялось такой гидрофобной аминокислоте как триптофан [9, 10]. Возможность образования таких гидрофобных взаимодействий с витаминами группы К ранее не рассматривалась. В связи с этим, было проведено изучение возможности образования подобных комплексов in vitro на примере модельных
систем двух типов: I – витамин К1 : ами-
нокислот
а (триптофан) или II – витамин К1 : препарат
липоксигеназы, выделенный из клеток исследуемого зигомицета, используя метод флуоресценции. Было обнаружено, что препарат липоксигеназы гриба про-являл заметную флуоресценцию даже при небольшой концентрации белка. При добавлении к фиксированно-му количеству белка аликвот витамина К1 интенсив-ность флуоресценции раствора липоксигеназы умень-шалась пропорционально увеличению концентрации витамина. Аналогичная тенденция была зафиксирова-на и в модельной системе витамин К1 : триптофан. Ре-зультаты проведенных исследований взаимодействия фермента с гидрофобным витамином К1 согласуются с полученными данными по полярографическому кон-тролю активности фермента. Полученные результаты позволили предположить, что влияние витамина К1 на микробную липоксигеназу вероятно может быть связано с гидрофобными взаимодействиями пептид-ного фрагмента фермента, содержащим такую гидро-фобную аминокислоту, как триптофан, и витамином. Для проверки этого предположения на первом этапе исследования была проведена химическая модифика-ция выделенной из клеток исследуемого зигомицета липоксигеназы по остаткам триптофана (реакция вза-имодействия с 2-гидрокси-5-нитробензилбромидом) [7]. У дельная активность модифицированной формы липоксиг
еназы была лишь на 11.4 % ниже удельной
активности исходной формы белка. Таким образом, предположении о ключевой роли триптофана в обра-зовании гидрофобных взаимодействий витамин К1-липоксиг
еназа зигомицета pilaira anomala не нашло
подтверждения, механизм подобного взаимодействия остается открытым для дальнейших исследований.
Список литературы1. С
ергеева Я.э., Конова И.В., Галанина Л.А., Гага-
рина А.Б.,
Евтеева Н.М. – Биологически активные ли-
пиды грибов
семейства pilobolaceae // Микробиология.
2006. Т.75. №1. С.22–28.
2. Дюкова В.И., Демчева Е.А., Ткачевская Е.П.,
Серг
еева Я.э., Галанина Л.А., Конова И.В., Евстигне-
ева
Р .П. – Влияние витамина К1 на липоксигеназную
активность pythium debaryanum – продуцента полине-
насыщенных жирных кислот // Биотехнология. 2003. №6. С.17–23.
3. Справочник биохимика, пер. с англ. / под ред
Дюсон Р
., эллиот Д., эллиот У ., Джонс К. /М. Мир,
1991, 544 С.
4. Davies
B.J. – Disc electrophoresis – II. Method and
application to human serum proteins. // Ann.N.Y .Acad.Sci., 1964, v.121, p.404–427
5. Laemmli
U.k. – Cleavage of structural proteins dur-
ing the assembly of the head of bacteriophage T4. // Na-ture, 1970, v.227, p.680–685
6. Schewe
Т., kuhn II., Rappoport S. – Lipoxygenases:
measurement, characterization and properties.// prosta-
glandins and related substances, a practical approach / Eds.
Физиология и биохимия грибов 149
Benedetto C., McDonald-Gibson R.G., Nigam S., Slater
T.f. – Washington DC:IRL press Oxford, CHApTER 13,
1987, p .229- 242.
7. Dan S. Tawfik – Modification of Tryptophan with
2-Hydroxy-5-Nitrobenzylbromide // in protein protocols
Handbook (ed. J.M.Walker), 2nd edition, Humana press,
2002, p.481–482.
8. С
ергеева Я.э., Галанина Л.А., Ткачевская Е.П.,
Конова И.В., Жукова Е.э., Евстигнеева Р .П. – Влияние витамина К
1 и его функциональных аналогов различ-
ной молекулярной структуры на рост и липидные ха-рактеристики p
ythium debarianum. // Биотехнология,
2001, №4, с.32–45.9. Redanna p.,
Whelan J., Burgers J.R., et.al. – The role
of vitamin E and selenium on arachidonic by way of the 5-lipoxygenase parthway. // Ann.N.Y .Acad.Sci, 1989, v.570, р.136–145.
10
. Hughes R. k, West S.I., Lawson D.M., fairhurst
S.A., Sanchez R.O., Hough p., Robinson B.H., Casey
R. – probing a novel potato lipoxygenase with dual
positional specificity reveals primary determinants of substrate binding and requirements for a surface hydro-phobic loop and has implications for the role of lipoxy-genases in tubers // Biochem. J., 2001, v.353, p.345–355.
ОСОБЕННОСТИ РОСТА И ПОТРЕБЛЕНИЯ
Г ЛЮК
ОЗЫ НЕКОТОРЫМИ ШТАММАМИ aSPerGilluS
VerSicolor (vUILL.) TIRAbOsCHI
Тугай Т.И., Василевская А.И., Артышкова Л.В., Тарасова М.В., Наконечная Л.Т.
Институт микро
биологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАН Украины,
киев
Aspergillus versicolor относится к повсеместно
встречающимся виду микроскопических грибов. Он был изолирован из многих типов почв разных клима-тических зон, жилых и промышленных помещений, техногенных субстратов и является причинным аген-том ряда микозов. Нами, впервые, в течение многих лет этот вид выделялся из помещений 4-го блока с раз-ными уровнями радиоактивного загрязнения (от 20 до 100000 мР/час), что свидетельствует о его способнос-ти выживать при высоких уровнях радиационной на-грузки и в условиях жесткой лимитации по основным источникам питания и энергии. В этой связи для того, чтобы оценить уровень адаптационных возможностей этого вида, было проведено изучение характера роста и эффективности потребления субстрата в сравнитель-ном аспекте у штаммов A. versicolor, выделенными из разных по уровню радиоактивности помещений 4-го блока и контрольных штаммов, выделенных из чистых отно
сительно радионуклидов местообитаний. экспе-
рименты проводили в условиях стационарного куль-тивирования
штаммов при 25 ± 2 °С на средах с кон-
центрациями глюкозы (как единственного источника углерода) от 20 г/л (контроль) до 0,01 г/л. В работе данные представлены на примере четырех штаммов A. versicolor, выделенных из радиоактивных помещений 4-го блока с уровнем радиоактивности 55мР/час, 250 мР/час, 500 мР/час и 100000 мР/час, соответственно, и двух контрольных штаммов. У каждого штамма A. versicolor определяли: количество образовавшейся биомассы, морфологию культур (на средах с содер-жанием глюкозы 0,1 и 0,01 г/л), величины рН, ос-таточные количества глюкозы и наличие оптически активных метаболитов в культуральной жидкости. Показан характер накопления биомассы штаммами A. versicolor в динамике (3–21 сут) их стационарного культивирования. Наибольшие различия в продолжи-тельности логарифмической и стационарной фаз роста у изученных штаммов выявлены при росте на среде с исходной концентрацией глюкозы 20 г/л. При умень-шении в среде концентрации глюкозы до 5,0–0,25 г/л достоверных изменений в характере их кривых роста не выявлено. По накоплению биомассы контрольные штаммы занимали промежуточное положение между штаммами-экстремофилами, к концу эксперимента в ку
льтуральной жидкости оставалось порядка 10–15 %
от исходного содержания глюкозы.
Нами был проведен анализ эффективности ис-
пользования субстрата изученными штаммами a.
versicolor , базируясь на величине их экономических
коэффициентов потребления глюкозы на средах с разными ее концентрациями. Показано, что у всех штаммов, выделенных из радиоактивных помещений при низких концентрациях глюкозы (0,25 г/л) сфор-мировалась способность к повышенному усвоению субстрата (в 3–4 раза) в сравнении с контрольными штаммами. При этом не выявлено зависимости эко-номических коэффициентов от уровня радиоактив-ности мест их выделения. При росте на средах с концентрацией глюкозы от 1г/л до 20г/л у штаммов, выделенных из 4-го блока и контрольных, не выявле-но достоверной разницы в величине эффективности усвоения ими субстрата.
Предлагаются возможные объяснения этого факта.
Полученные результаты могут рассматриваться как свидетельство увеличения карботолерантности у изу-ченных штаммов a.
versicolor , длительное время на-
ходившихся в условиях повышенного радиационного фона в сравнении с контрольными штаммами, выде-ленными из
чистых территорий. это обстоятельство
наряду с другими факторами, позволяет им выживать и существовать в экстремальных условиях помещений с высоким радиационным фоном.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 150
Из мицелия гриба G. lucidum, выращенного ме-
тодом погруженного культивирования, экстракцией
щелочью и последующим фракционированием с по-мощью реактива Фелинга выделены линейный (1→3)-б-D-глюкан и разветвленный ксиломаннан, содер-жащий главную цепь из (1→3)-связанных остатков б-D-маннопиранозы, большая часть которых замещена по положению 4 единичными остатками в-D-ксилопи-ранозы или дисахаридными остатками в-D-Manp-(1→3)-в-D-Xylp-(1→. Строение полисахаридов установ-лено с помощью спектроскопии ЯМР в сочетании с методами метилирования и периодатного окисления. Интересной особенностью ксиломаннана является одновременное присутствие в полисахариде остатков б-D-маннопиранозы и в-D-маннопиранозы (первые образуют главную цепь, а вторые представляют собой концевые невосстанавливающие остатки дисахарид-ных боковых ответвлений).
Линейные (1→3)-б-D-глюканы выделяли ранее из
многих грибов, в том числе и из G. lucidum . Извест-но, что они обладают сравнительно невысокой проти-воопухолевой активностью, но эта активность может быть существенно улучшена путем химической моди-фикации молекул полисахарида, например, с помощью сульфатирования или карбоксиметилирования. Кси-ломаннаны, подобные выделенным в данной работе, встречаются реже и изучены слабее.
Противоопухолевая активность выделенного кси-
ломаннана была изучена в опытах in vivo на модели привитого подкожно лимфолейкоза Р388 мышам гиб-ридам BD
f1. При введении ксиломаннана в дозе 2 мг/
кг/сутки торможение роста опухоли составило 86 %. Противоопухолевое действие ксиломаннана было достоверно выше активности исходной щелочераст-воримой фракции и фракции водорастворимых поли-сахаридов, выделенных из погруженного мицелия G. lucidum. В изученных дозах от 1 до 5 мг/кг/сутки до-стоверного различия в действии ксиломаннана обнару-жено не было. Торможение роста опухоли составляло 71–86
%.СТРОЕНИЕ И ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ
Р АСТВОРИМЫХ В ЩЕЛОЧИ ПОЛИСАХАРИДОВ
ИЗ МИЦЕЛИЯ Ganoderma lucidum
Усов А.И.1, Евсенко М.С.1,2, Шашков А.С.1, Автономова А.В.2,
Краснопольская Л.М.2, Исакова Е.Б.2, Бухман В.М.2
1 Институт органической химии имени Н.Д. зелинского РАН,
Москва
2 Научно-исследовательский институт по изысканию
новых антибиотиков имени
Г.Ф. Гаузе РАМН,
Москва
ОСОБЕННОСТИ ПРОТЕКАНИЯ ФОТОЗАВИСИМЫХ ПРОЦЕССОВ
У МУТАНТ
ОВ NEUROspORA CRAssA С ПОВРЕЖДЕНИЯМИ
АЗОТНОГО МЕТАБОЛИЗМА
Филиппович С.Ю., Бачурина Г.П.
Институт биохимии им.А.Н. Баха РАН,
Москва
neurospora crassa – уникальный микроорганизм
для биохимического изучения явлений фотоморфоге-неза, однако роль азотного метаболизма в этих процес-сах практически не изучена. Исследованы особеннос-ти св
етозависимых процессов – образования бесполых
спор и биосинтеза каротиноидов в мицелии – у дико-го типа аскомицета и его мутантов с повреждениями азотного метаболизма. Использовали мутант гриба с повреждением структурного гена nit-6 (кодирует нит-
ратредуктазу) и мутант по контролирующему гену nit
–2 (отсутствуют активности нитритредуктазы и нит-ратредуктазы). У указанных мутантов n.crassa
интен-
сивность выброса анионов нитрита (NO2-) и нитрата (
NO3-) может служить для количественной оценки ак-
тивности NO-синтазного механизма в клетке.
Обнаружено, что после 30-минутной экспозиции
мицелия мутанта гриба nit-6 на свету, представляющей собой лаг-фазу фотоиндукции каротиногенеза, концен-трация нитрита в среде культивирования возрастала в полтора раза по сравнению с темновым контролем. Учитывая, что в данном штамме N.crassa нитратредук-таза активна, а нитритредуктаза блокирована, этот факт косвенно свидетельствует об участии NO-синтазы в фоторегуляции каротиногенеза. Вместе с тем, световая обработка мицелия гриба в присутствии ингибитора NO-синтазной реакции, 1-N-иминоэтил-L-лизина, взя-того в широком диапазоне концентраций, практически не сказывалась на фотоиндукции биосинтеза кароти-ноидов в клетках N.crassa. Проверено действие донора оксида
азота – нитрозоглутатиона (GSNO) – на указан-
ный процесс. Введение GSNO в среду перед началом 4-х часового освещения до конечной концентрации от 0,05мМ до 2 мМ не сказывалось фотоиндукции каро-тиногенеза при использовании клеток nit-6 штамма
Физиология и биохимия грибов 151
гриба. Вместе с тем, в присутствии 0,2 мМ GSNO био-
синтез
каротиноидов возрастает на 24 %, а введение 2
мМ донора NO уменьшает его на 18 % при инкубации с клетками дикого типа N.crassa.
При изучении фотостимуляции конидиогенеза в
мицелии исследовали зависимость изменения числа жизнеспособных конидий, образовавшихся на 1 см
2
поверхностной культуры трех указанных штаммов аскомицета, от роста на среде с различными источ-никами азота. После 24 час роста мицелий освещали в течение 2-х часов и через сутки определяли число образовавшихся конидий при помощи плейтинга. В качестве единственного источника азота применяли хлористый аммоний или нитрат аммония или нитрат натрия. При росте мицелия дикого типа на среде с 50 мМ-ным хлористым аммонием количество конидий образовавшихся в темноте и после освещения прак-тически одинаково. При использовании же нитрата натрия в той же концентрации отмечается значитель-ная фотостимуляция конидиогенеза в клетках этого же штамма. При росте на 50 мМ-ном нитрате аммония наблюдается двукратное увеличение конидий при фо-тостимуляции процесса как для wt-987, так и для nit-2
штаммов, но, в противоположность этому, у мутан-та nit-6 n.crassa
после освещения культуры конидии
практически не образуются. Отработанная физиологи-ческая модель может быть в дальнейшем использована для более детального изучения возможности влияния ферментов азотного метаболизма на процесс фотости-мулируемого конидиогенеза.
Работа выполнена при поддержке РФФИ, проек-
ты
– 06–04–90599-БНТС_а и 07–04–00460-а
СВОЙСТВА ГЕМАГГ ЛЮТИНИРУЮЩЕГО ПРОТЕОГ ЛИКАНА,
ВЫДЕЛЕННОГО ИЗ КУ ЛЬТУР АЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ
БА
ЗИДИОМИЦЕТА LENTUNUs EDODEs
Цивилева О.М., Никитина В.Е.,
Лощинина Е.А., Макаров О.Е.
Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов РАН,
Саратов
К числу перспективных микологических объектов
для поверхностного и глубинного культивирования с целью получения дополнительного источника белка, биологически активных соединений безусловно отно-сится ксилотрофный базидиомицет lentinus
edodes. О
наличии лектинов у lentinus edodes (Berk.) Sing [ len-
tinula
edodes (Berk.) p egler] (шиитаке) информация
крайне ограничена, а данные о препаратах внекле-точных лектинов ксилотрофных базидиомицетов от-сутствуют. После обнаружения, выделения и очистки экзолектинов l.
edodes [1, 2] представляло интерес
выявить какие-либо регуляторы их биологической ак-тивности,
причем изучить не только эффекторы – ком-
поненты синтетических сред культивирования, но и обнаружить какие-либо эндогенные низкомолекуляр-ные регуляторы внеклеточной лектиновой активности, внешние условия их биосинтеза и проявления.
Вн
еклеточный лектин (L2) из L. edodes f-249 –
протеогликан с моносубъединичной структурой, молекулярной массой 37 кДа. L2 содержит в своем со
ставе (90,3 ± 1,0) % (m/m) углеводов, предстален-
ны
х глюкозой (73 % общей массы углеводной части
молекулы лектина) и галактозой (27 % общей массы
углеводной части молекулы лектина). В L2 высоко содержание полярных аминокислот, прежде всего As
х – около 42 % от суммы аминокислот. элемент-
ный анализ (на содержание азота) показал, что Asх пр
исутствует в виде Asn. Менее 10 % в L2 других
полярных аминокислот: Glх, Lys, Arg. Для L2 индекс по
лярности равен 56,7 %. Высокое содержание Asn
в составе L2 согласуется с нашими данными о поло-жительном эффекте Asn в отношении формирования коричневой мицелиальной пленки L. edodes в глу-бинной культуре. Кроме того, высокий уровень Asn в L2 наряду с составом углеводной части молекулы (Glc и Gal) позволяют отнести этот лектин к N-аспа-рагинсвязанным, имеющим N-гликозидную связь в молекуле протеогликана. Белковая часть связывается с углеводной через Asn [3].
Поскольку в литературе нет сведений о регулятор-
ной активности гликолипидов в отношении лектино-вой активности, соответствующий поиск изначально не проводился нами целенаправленно среди гликоли-пидов, и привел к положительным результатам лишь в связи с обнаружением изменения активности лектинов при очистке. Используя экстракцию растворителями внеклеточного лектина L2 L. edodes на промежуточной стадии его очистки, мы получили препарат (обозначен-ный нами S3), содержащий галактозу и две жирные кис-ло
ты С8:0 и С9:0 (28 и 72 % от суммы соответственно).
Можно высказать предположение о возможной
роли S3 как одного из регуляторов активности вне-
клеточных лектинов. Кроме корреляции накопления в мицелии компонентов S3 с увеличением лектиновой
активности, о возможном участии гликолипида в ре-гуляции этой активности говорят результаты других наших наблюдений. В смесях препаратов S3 + l2 при
одинаковой массовой концентрации компонентов титр гемагглютинации возрастает в 16 раз (собственной ге-магглютинирующей активности S3 не проявляет). В
ходе процедуры очистки препарата l2 удельная актив-
ность его проходит через максимум на промежуточной стадии, на которой l2 связан с S3, а затем заметно сни-
жается по мере дальнейшей очистки l2.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 152
Актуальность исследования физиолого-биохи-
мических особенностей грибов, в том числе бази-
диальных, в связи с образованием липидов вызвана общебиологическим их значением и возможностью практического использования как источников фар-макологически ценных их компонентов: полинена-сыщенных жирных кислот, фосфолипидов, провита-минов, стероидных соединений и др. Как известно, образование липидов микроорганизмами и их состав в большой степени зависят от внешних факторов среды (компонентов питательной среды, условий культиви-рования и др.). Однако влияние этих факторов на коли-чественный и качественный состав липидов у высших мицелиальных грибов, выращиваемых глубинным способом, практически не изучено.
Целью настоящей работы явилось выявление фак-
торов и условий культивирования, способствующих одновременно активизации роста, синтезу липидов и их биоактивных компонентов у высших мицелиаль-ных грибов.
В качестве объектов исследования использованы
грибы Ganoderma lucidum , laetiporus sulphureus
класса
bas
idiomycetes и cordyceps militaris класса ascomycetes.
На
основании изучения физиологических потреб-
ностей исследуемых грибов установлено, что наибо-лее активный рост, синтез липидов, фосфолипидов, полиеновых жирных кислот у всех исследованных базидиальных грибов происходит при использовании органических форм азота, у аскомицета c.
militaris –
неорганических и при соотношении С/N 17:1.
Определена возможность замены в стандартной
питательной среде дефицитных и дорогостоящих компонентов на вторичные продукты по переработке се
льскохозяйственного сырья – молочную сыворотку,
свекловичную мелассу, крахмал, а также продукты му-комольной и маслоперерабатывающей промышленнос-ти, которые составили основу промышленных сред. Установлено, что влияние температуры куль-
тивирования, рН питательной среды и аэрации на рост и образование липидов исследуемых грибов, неоднозначно и зависит от их индивидуальных осо-бенностей. Температурный оптимум для наиболее активного роста и синтеза липидов грибом l.
sulphu-
reus отмечен при 26–28 °С. Для G. lucidum максимум
накопления липидов наблюдается при температуре 30–32
°С, в то время как биомассы – при 26–28 °С.
Наиболее благоприятный температурный режим для синтеза липидов грибом c.
militaris – 26–28 °С, био-
ма
ссы – 20–22 °С. В липидах исследованных базиди-
ом
ицетов выявлена общая тенденция – увеличение
их ненасыщенности при низкотемпературных режи-мах выращивания за счет усиления синтеза линоле-вой кислоты (С
18:2), тогда как у аскомицета c. militaris
ненасыщенность липидов возрастала с повышением температуры культивирования. Изменение рН сре-ды в пределах, обеспечивающих нормальный рост, существенно не сказалось на накоплении липидов и их ненасыщенности. Максимальное накопления био-массы, с одновременно высоким выходом фармако-логически ценных метаболитов липидной природы наблюдалось при умеренной аэрации (скорость рас-тв
орения кислорода – 0,120 – 0,160 гО2/л/ч).
Использование подобранных сред и оптимизиро-
ванных условий культивирования позволило у иссле-дованных грибов увеличить выход биомассы до 12–18 г/л, липидов
– до 14–25 % в пересчете на сухие вещес-
тва
мицелия, фосфолипидов – до 4 – 6 %, что в 1,5–2
раза выше, чем на стандартных полусинтетических средах. В составе жирных кислот базидиальных гри-бов удалось сохранить высокий удельный вес эссен-циальной
линолевой кислоты в пределах 70–80 % от
суммы жирных кислот, а у аскомицета C. militaris по-высить ее
содержание до 40–55 %, что в 4–5 раз выше,
чем на стандартной среде.Список литературы1. T
sivileva O.M., Nikitina v.E., Garibova L.v ., Igna-
tov v.v. // Intern. Microbiol. 2001. v. 4. № 1.
p. 41–45.
2. Никитина В.Е., Цивилева О.М., Бабицкая В.Г.,
Щерба В.В., Пучкова Т.А. // Успехи медицинской ми-кологии. Том IX / Под общей научной редакцией акад. Р АЕН Ю.В. Сергеева. М.: Национальная академия ми-кологии, 2007. С. 247–251.
3. К
оваленко э.А. // Микробиологический журнал.
1997. Т. 59. № 5. С. 3–6.
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ОБР АЗОВАНИЯ
ЛИПИДОВ ВЫСШИМИ МИЦЕЛИАЛЬНЫМИ ГРИБАМИ
Черноок Т.В., Гвоздкова Т.С., Щерба В.В., Филимонова Т.В., Осадчая О.В.
Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
Физиология и биохимия грибов 153
Гликоцерамиды (ГлЦер) принадлежат к обширной
группе сфинголипидов, которая объединяет порядка
тысячи различных соединений, обладающих широким спектром биологической активности. В исследованиях, проведенных на животных объектах, было показано, что оказывая определенное воздействие на работу Ca
2+
– каналов, активность MA p-киназ, фосфолипаз С и D и
некоторых других ферментов, связанных с трансдукци-ей сигнала, ГлЦер и продукты их гидролиза регулируют процессы роста, пролиферации, дифференцировки и гибели клеток. Кроме того, они влияют на клеточную адгезию, регулируют активность мембранных рецепто-ров, действуют на везикулярный транспорт липидов.
Относительно роли ГлЦер в регуляции процессов
роста и развития грибов известно меньше. Установле-но, что ГлЦер, содержащие метилсфингодиенин, инги-бируют активность ДНК-полимераз б-типа и влияют на экспрессию генов, кодирующих 8- и 9-прокаспазы. Результатом этих реакций является ускорение клеточ-ной дифференцировки и инициация плодоношения (Mizushina et al., 1998).
На патогенном грибе Sporothrix schenckii , было по-
казано, что переход этого организма с мицелиальной стадии развития на дрожжевую сопровождается струк-турной модификацией некоторых ГлЦер – обычные для грибов моногексозилцерамиды, содержащие глюкозу, метилсфингодиенин и жирную кислоту, трансформи-руются в галактозилцерамиды (Toledo et al., 2000). Кроме того, если у мицелиальной формы гриба преоб-ладали ГлЦер с С
18:0(ОН) жирнокислотным остатком, то
у дрожжевой доминировали соединения с моноеновой С
18:1(ОН) кислотой. Недавно установлено, что помимо
жирнокислотной и гликозидной групп, в пост-синте-тические модификации, связанные с дифференциров-кой, может вовлекаться и наиболее консервативная часть молекулы ГлЦер – сфингоидное основание. На микопатогене Fonsecaea pedrosoi было показано, что
замедление роста вегетативного мицелия и формиро-вание склероциев может происходить на фоне обра-зования ГлЦер с метилсфингодиенином, содержащим дополнительный кислород (Nimrichter et al., 2005). Авторам данной работы не удалось установить в ка-кой форме реализована кислородная функция. Позднее это было сделано членами нашего коллектива. С по-мощью методов GC-MS и ESI-MS/MS было показано, что по мере роста и развития некоторых видов грибов происходит замена окисленных ГлЦер, содержащих 2-амино-1,3-дигидрокси-4-эпокси-9-метил-8-октадецен в качестве сфингоидного основания, на обычные для этих ор
ганизмов ГлЦер ( kotlova et al., 2007).Одним из эффективных методов, позволяющих оце-
нить роль канонических и модифицированных форм ГлЦер в регуляции процессов жизнедеятельности гри-бов является ингибиторный анализ. Среди более чем 200 известных ингибиторов метаболизма ГлЦер на-ибольшее распространение, в силу своей универсаль-ности и эффективности, получили мириоцин (ингиби-тор серин-пальмитоил трансферазы, катализирующей начальный этап синтеза ГлЦер), соединения из группы фумонизинов (ингибиторы церамид синтазы), а так-же производные морфолина – синтетические аналоги природных церамидов, влияющие непосредственно на гликозилирование церамидов.
В настоящей работе мы исследовали влияние 1-
фенил-2-деканоиламино-3-морфолино-1-пропанола (p
DMp) на ростовую активность, морфологию и со-
став основных мембранных липидов, включая ГлЦер, базидиального гриба Flammulina velutipes . В экспери-
ментах использовали 7-14 сут поверхностные куль-туры, выращенные на твердой и жидкой средах. В перво
м случае обработку раствором 100 мкМ pDMp
проводили регулярно в течение всего срока культиви-рования
мицелия. Во втором – 100 мкМ pDMp вводили
в среду культивирования непосредственно перед ино-куляцией. Согласно полученным результатам в первые 2-7 с
ут культивирования pDMp снижал интенсивность
роста F . velutipes, что особенно отчетливо проявлялось при выращивании культур на сусло-агаре. В дальней-шем скорость роста выравнивалась и к 14 сут не усту-пала (на твердой среде) или даже становилась выше (на жидкой среде) интенсивности роста контрольных ку
льтур. На морфологическом уровне действие pDMp
выражалось в усилении процессов дифференцировки гиф и активации конидиогенеза. В культурах, выра-щенных в
присутствии pDMp , в большем количестве
встречались толстостенные раздутые гифы с зернис-тым содержимым, относительное содержание тонкос-тенных однородных гиф было сравнительно невелико.
Интересно,
что pDMp не оказал существенного
влияния на содержание и интенсивность обмена Гл-Цер. Ни в одном из экспериментов нами не зарегис-трировано ни уменьшения концентрации ни торможе-ния синтеза соединений данного класса. Напротив, у 14 суточных культур, выращенных на жидкой среде, отмечено увеличение содержания ГлЦер, содержа-щих глюкозу, метилсфингодиенин (2-амино-1,3-дигид-рокси-9-метил-4,8-октадекадиен) и С
18:0, С18:1, С16:0(ОН),
С18:0(ОН) жирные кислоты. Кроме того, действие pDMp
проявилось в усилении синтеза фосфатидных кислот (ФК) и фосфатидилсеринов (ФС). В результате концен-К ВОПРОСУ О ДЕЙСТВИИ ИНГИБИТОРОВ СИНТЕЗА
Г ЛИКОЦЕР АМИДОВ НА РОСТ , МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ
ХАР АКТЕРИСТИКИ И ЛИПИДНЫЙ СОСТАВ ГРИБОВ
Котлова Е.Р.1, Сеник С.В.2, Кияшко А.А.1, Шаварда А.Л.1
1 Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
2 Санкт-Петербургский государственный университет,
Санкт-Петербург
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 6 154
трация ФК увеличилась в более чем 4 раза, а содер-
жание ФС
– в 1.5-2 раза. Следует отметить, что про-
изводные морфолина ранее успешно использовались в экспериментах с asper
gillus nidulans и a. fumigatus ,
где они подавляли прорастание спор, тормозили рост мицелия и одновременно редуцировали образование ГлЦер (Levery et al., 2002). При этом ингибиторы этого класса оказались абсолютно неэффективными в отно-шении гликозилцерамид синтаз ustilago
maydis , can-
dida
albicans и Pichia pastoris (Hillig et al., 2005). Таким
образом, гликозилцерамид синтазы грибов могут быть невосприимчивы к производным морфолина, в том числе к p
DMp . Тем не менее pDMp может действовать
на обмен фосфолипидов, усиливая синтез таких регу-ляторных соединений, как ФК и ФС.
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ
(проект № 06-04-49043).
Hilling I., Warnecke D., Heinz E. An inhibitor of
glucosylceramide synthase inhibits the human enzyme, but not enzymes from other organisms // Biosci. Biotechnol. Bi
ochem. 2005. v. 69. p. 1782.
kotlova E.R., Senik S.v ., kцcher T., Shavarda
A.L., Sinyutina N.f ., psurtseva N.v ., zubarev R.A.
Glycosylceramides from Flammulina velutipes : variety of molecular species, metabolism and involvement in fungal differentiation // Chem.
phys. Lipid. 2007. v. 149. p . 82.
Levery S.B., Momany M., Lindsey R., Toledo M.S.,
Shayman J.A., f
uller M., Brooks k., Doong R.L., Straus
A.H., Takahashi H.k. Disruption of the glucosylceramide biosynthetic pathway in asper
gillus nidulans and
asper
gillus fumigatus by inhibitors of UDp-Glc:ceramide
glucosyltransferase strongly affects spore germination, cell cycle,
and hyphal growth // fEBS Letters. 2002. v.
525. p . 59.
Mizushina Y ., Hanashima L., Yamaguchi T.,
Takemura
M., Sugawara f., Saneyoshi M., Matsukage
A., Yoshida S., Sakaguchi k. A mushroom fruiting body-
inducing substance inhibits activities of replicative DNA polymerases // Biochem. Biophys. Res. Communicat. 1998. vol. 249. p . 17.
N
imrichter L., Cerqueira M.D., Leitao E.A., Miranda
k.,
Nakayasu E.S., Almeida S.R., Almeida I.C., Alviano
C.S., Barreto-Bergter E., Rodriges M.L. Structure, cellular distribution, antigenicity, and biological functions of Fonsecaea pedrosoi ceramide monohexosides // Infection
an
d Immunity. 2005. v. 73. p. 7860.
Toledo M.S., Levery S.B., Straus A.H., Takahashi H. k.
Dimorphic expression of cerebrosides in the mycopathogen Sporothrix schenckii /
/ J Lipid Res. 2000. v. 41. N. 5. p. 797.
Armillaria spp. cause an important disease known as
Armillaria root rot on woody plants in throughout the
world. The disease is important in natural forests, com-mercial forests plantation, and horticultural crops and in agriculture. In Iran, 15 plant species were as hosts for Ar-millaria species. The genus armillaria
infected armeniaca
vulgaris
Lam., Juglans regia L., amygdalus communis L.,
Pyrus communis L., malus domestica Borkh., Populus
nigra L., Fagus orientalis Lipsky, Quercus castaneifolia
C.A.Mey., alnus subcordata C.A.Mey., Platanus orienta-
lis L., citrus aurantium L., abies alba Mill., diospyr os
lotus L., Parrotia persica C.A.Mey. and some other plants.
In order to control, it is necessary that the casual agent were identified on different species of host.
The aim of this study was to determine hosts and iden-
tification species of Armillaria in Iran. Symptoms of the Armillaria root rot are expressed in several ways. The in-fected plant may die after a period. The Armillaria spp. causes a white rot. White or cream-colored mycelia were present between bark and wood of roots and trunk below soil surface. Rhizomorphs may also be present. The in-fected Salvia glutinosa L. and Gleditsia caspia Desf. were collected from Mazandaran province. The samples were placed on
2 % Malt extract agar (MEA), incubated and
maintained at 22±1°C. Identification was done on the basis of morphological characteristics and pairing tests.
In field study, mycelial fan and dichotomous rhizo-
morphs were appeared. Diploid and haploid isolates paired with two or three known haploid testers from Europe and Asia at least three times. Sexual compatibility was evalu-ated after 6 to 8 weeks based on differences in cultures morphology of haploid colonies from white, with aerial mycelium (fluffy) to brownish, without aerial mycelium (crustose). The isolates did not pair with any of tester strains. Compatibility test was done between the isolates and the result showed, they are two different species. This is the first report of the new hosts of armillaria sp.
from
Iran.Раздел 7
ФИТОПАТОГЕННыЕ ГРИбы
INTRODUCTION THE NEW HOsTs Of armillaria spp . fROM IRAN
dalili S. a. r. 1, nanagulyan S.G.2, alavi S. V . 1
1 department of Plant Protection, agricultural and natural
resour
ce research center of mazandaran,
Sari, iran
2 ереванский государственный университет, кафедра ботаники
ереван Армения
fIRsT REpORT Of CHARCOAL ROT DIsEAsE OCCURRENCE ON
sEsAME pLANTs CAUsED bY macroPHomina PHaSeolina ,
AND DETERMINATION O
f THE fUNGUs IsOLATEs REACTION IN
THE pOTAssIUM CHLORATE MEDIUM IN NORTH IRAN
rayatpanah S.1, nanagulyan S.G.2, alavi S.V .1
1 department of Plant Protection, agricultural and natural resources
resear
ch center of mazandaran,
Sari, iran
2 ереванский государственный университет, кафедра ботаники
ереван Армения
Sesame (Sesamum indicum L.) is planted as a spring
crop in north of Iran. In August 2007, symptoms of charcoal rot disease were observed on sesame plants in Mazandaran province. Symptoms on mature plants consisted of longitu-dinal dark brown lesions on stems at soil line, wilting and premature plant death. Spherical microsclerotia were ob-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 156
served underneath the epidermis and on exterior of the tap
root. In severe infection sterility of pod was occurred. The in
fected samples were surface sterilized in 0.5 % NaOCl for
2 min., blotted with filter papers, dried in a forced air oven fo
r 24 hour at 28°C and then were placed in petri dishes con-
ta
ining potato dextrose agar ( pDA). The fungus produced
numerous dark and oblong sclerotia in the isolation medium after 3 days of incubation at 30°C in darkness. In 7 days-old cultures, sclerotia ranged in size from 70 to 107.5 µm long by 55 to 95 µm wide. Based on the above characteristics, the fungus was determined as Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid. Temperature for optimum growth was 35°C.
The pathogenicity of M. phaseolina isolates was de-
termined using the artificially infected sesame plants. Soil infected with
5 % of microsclerotia inoculums (w/w) and
then sesame seeds sown there. forty days after sowing,
symptoms were appeared on artificially infected sesame plants same as on the infected field plants. M. phaseolina was reisolated from the inoculated plants. Six isolates of M. phaseolina obtained from infected sesame plants in fields were cultured in a minimal medium containing 120 mM potassium chlorate, and the growth manners were ex-amined.
The isolates were divided in two growth groups: sensi-
tive with feathery growth and resistant with dense growth on the medium. On the basis of our knowledge, this is the first report about occurrence of sesame charcoal rot dis-ease, caused by M. phaseolina in Iran.
pATHOGENIC fUNGI IN THE RHIzOspHERE
Of
HEALTHY LOOkING pOT -pLANTs
Stankeviciene a.1, lugauskas a.2
1 Kaunas botanical Garden of Vytautas magnus university
2 chemistry institute
Decorative pot-plants’ import into Lithuania from oth-
er countries
(the Netherlands, Germany, poland and other)
has recently increased therefore it is necessary to keep the decorativeness of imported healthy plants for as long as it is possible. The aim of this work was to discover the de-caying and dieing causes of imported plants.
In 1999–2007 micological researches were performed
on rhizosphere of 58 taxons belonging to 48 species and 30
genera pot-plants. The high quality plants brought from the Netherlands in pots in peat substrate enriched with slowly melting mineral fertilizers were investigated. These plants were grown under optimal conditions, which satisfied en-vironment temperature and substrata humidity needs of every single plant species.
from
58 investigated plant species, in the rhizosphere
of 18 % plants were found pathogenic fungi potential caus-ing agents of plant diseases belonging to 4 genera:
• verticilium album
(philodendron erubescens), v. aboa-
trum (Ctenathe
pilosa), v. dahliae (Maranta leuconeu-
ra), verticillium sp. (f
icus benjamina)
• pythium acanthicum (Aglaonema commutatum, Guz-
mania lingulata), p.
aristosporum (Aglaonema commu-
tatum), p. diclinum
(Aglaonema commutatum), p. de-
baryanum (Maranta
leuconeura), p. irregulare (Dracena
marginata), pythium sp. (Ctenathe pilosa, Euphorbia
trigona, ficus elastica)
• fusarium gibbosum (Cordyline fruticosa), f. javani-
cum (Y
ucca elephantipes), f. oxysporum (Dracaena
marginata), f. redolens (Euphorbia trigona), f. semi-
tectum (Dracaena
fragrans, Cordyline fruticosa), fu-
sarium sp. (Cordyline fruticosa),
• Thielaviopsis basicola (Cordyline fruticosa).Calculated relative density of fungi species (RD), i.e.
the percentage expression of relation of propagules num-ber of one species with the number of all species iso-lated in the same sample. Mostly infected were the rhi-zo
spheres of Ctenathe pilosa with propagules of pythium
sp. and ficus benjamina – with propagules of verticillium
sp. (RD 9 %). from Aglaonema commutatum, Guzmania
lingulata at a different time were isolated pythium genus
species and their RD was the lowest in this investiga-ti
on (3 %). Releative density of propagules of pathogenic
fungi isolated from rhizosphere of other plants differed fr
om 4–6 %.
In one sample there was detected Thielaviopsis basico-
la (RD5
%) from the rhizosphere of plant Cordyline fruti-
cosa. These Bromeliaceae family plants require advanced care and often in the rhizosphere of healthy looking plants the pathogens’ propagules of several species are detected. Diversity of isolated micromycete species differed de-pending on the growth conditions.
Being under unfavourable growth conditions plants
get weaker and pathogens’ activity increases. Much high-er pathogens’ detection and diversity was found after in-vestigating plants after transportation, in shops or stores under unfavourable growth conditions (low air humidity, too low temperature, overdried substrata), after a month or longer had above-ground part injures (leaves were spotty, slightly dried, yellowed, tended to fall) (article: A.
Stankeviciene, J. varkuleviciene. pathogenic micro-
mycete species functioning in the rhizosphere of sick pot-plants growing in peat substrate. In: Agronomy Re-se
arch. vol. – 4 (Special issue) (2006), p.393–396. ISSN
1406–894X.).
Фитопатогенные грибы 157
Особенностью патогенеза мучнистой росы пше-
ницы яв
ляется образование гало – локальной зоны в
сайте проникновения в клетку растения-хозяина. Ко-
нидия erysiphe graminis tritici dc. f.sp. tritici Marchal,
прорастая образует первичную ростковую трубку и ап-прессорий, в зонах контакта которых с эпидермальной клеткой пшеницы формируются соответственно малое гало и большое гало.
Активные формы кислорода образуются во время
патогенеза и играют важную роль в регуляции взаимо-действия растения и патогена. Для исследования роли окислительного взрыва в развитии мучнистой росы инфицированные отделенные листья пшеницы обра-батывали растворами перекиси водорода и 3-амино-1, 2, 4-триазола (3-АТА). 3-АТА является ингибитором пероксидазы и каталазы и способствует увеличению концентрации эндогенной перекиси водорода.
Для цитохимического обнаружения гало через 48 ч
после инфицирования участки эпидермиса снимали с абаксиальной стороны листа и окрашивали амидочер-ным. Определение размеров большого и малого гало, а также расстояния между ними было выполнено по цифровым изображениям, выведенным с микроскопа Carl zeiss
на компьютер с использованием пакета про-
грамм Image J. Количество колоний (пустул) мучнис-той росы подсчитывали на абаксиальной и адаксиаль-ной стороне инфицированных листьев пшеницы через 5–6 суток после инокуляции.
эк
зогенная перекись водорода и 3-АТА повыша-
ли устойчивость пшеницы к возбудителю мучнистой росы и существенно снижали интенсивность образо-вания колоний. Гало в контроле представляли собой окрашенную зону округлой или эллиптической формы вокруг места проникновения патогена синего и крас-ного цвета диаметром 50–150 мкМ. При обработке ис-следуемыми веществами происходило увеличение их размеров и характера окраски, иногда обесцвечивание и возникновение зональности или дополнительного внутреннего кольца. Также наблюдали увеличение расстояния между большим и малым гало, что, по-видимому, отражало аномальную дифференциацию инфекционных структур патогена (израстание) при индукции защитных реакций под действием переки-си водорода и 3-АТА. Аналогичное израстание ранее наблюдали при прорастании мучнисторосяного пато-гена на листьях устойчивых растений (Мишина и др., 2001).
Таким образом, размеры и структура гало, выяв-
ляемые в местах контакта патогена с эпидермисом растения-хозяина, а также расстояние между ними из-меняются под действием факторов, влияющих на пато-генез. Полученные данные свидетельствуют о важной роли активных форм кислорода в патогенезе мучнис-той росы. Появление более крупных гало с кольцевой зональностью и нарушение дифференциации инфек-ционных структур патогена, по-видимому, связано с увеличением уровня активных форм кислорода на на-чальных этапах взаимодействия растения пшеницы и возбудителя мучнистой росы.ВЛИЯНИЕ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА
И 3-АМИНО-1, 2, 4-
ТРИАЗОЛА НА Р АЗВИТИЕ
МУЧНИСТОЙ
РОСЫ ПШЕНИЦЫ
Аветисян Г.А., Бабоша А.В.
Гл
авный ботанический сад им. Н.в. Цицина РАН,
Москва
ПУТИ И СПОСОБЫ ПРЕДОТВР АЩЕНИЯ ИНВАЗИЙ
ЧУЖЕРОДНЫХ ФИТОПАТОГЕНОВ
Александров И.Н.
ФГУ «всероссийский центр карантина растений»,
Быково, Московская область
Миграция фитопатогенных микроорганизмов и
проникновение их в новые регионы осуществляется при участии различных агентов. В одних случаях в роли этих агентов выступают ветер (анемохория), вода (гидрохория), птицы и насекомые (зоохория), в других случаях функцию переноса инфекционного начала осуществляет человек (антропохория).
Возбудитель ржавчины хризантем Puccinia horiana
после проникновения из Японии в Европу, продолжал распространяться по ее территории с помощью ветра. этим
же способом шло расселение в Европе возбу-дителя ложной мучнистой росы табака Peronospora
tabacina (Кирюхина, 1961). По предположению ряда
исследователей в распространении возбудителя бак-териального ожога розоцветных культур erwinia
amy-
lovora по европейскому континенту значимую роль
играли птицы.
Однако межконтинентальные миграции фитопа-
тогенных организмов в подавляющем большинстве случаев происходят при содействии человека во время перевозок семян и посадочного материала, с различий продукцией и упаковочным материалом, являющихся
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 158
предметами торгового обмена между странами (Гор-
ленко, 1975). Проблема интродукции и связанная с ней инвазия фитопатогенных организмов стали особенно актуальными в наши дни в связи с предстоящим вступ-лением России в ВТО. Членство в этой организации еще более интенсифицирует международный обмен товарами, в том числе семенами и посадочным мате-риалом, что может повлечь за собой угрозу проникно-вения чужеродных патогенов на территорию Российс-кой Федерации.
Первичная преднамеренная интродукция или пос-
ледующие интродукции того или иного чужеродного вида, который может стать инвазивным, не должны происходить без разрешения со стороны компетент-ного органа принимающего государства. Прежде чем будет принято решение относительно того, следует ли позволить предлагаемую интродукцию в страну, нуж-но провести надлежащий анализ рисков, включающий оценку воздействия на окружающую среду. Необхо-димо предпринимать все возможное для разрешения интродукции только тех видов, угроза со стороны ко-торых для биоразнообразия является маловероятной. Разрешение на интродукцию может сопровождаться рядом условий (подготовка планов по смягчению пос-ледствий, процедур мониторинга, требований по лока-лизации и др.).
Секторальная деятельность, как, например, судо-
ходство, включая слив водяного балласта, наземный и воздушный транспорт, туризм и другое, нередко ведут к непреднамеренным интродукциям. Следует учиты-вать риск непреднамеренной интродукции чужерод-ных видов и в соответствующих случаях проводить анализ рисков, связанных с интродукцией этих видов.
Предотвращение интродукции считается, как пра-
вило, более рентабельным и экологически оправдан-ным, чем меры, применяемые вслед за интродукцией и укоренением чужеродного вида. Если же интродукция этих видов все-таки имела место, необходимо опера-тивно применять меры по их искоренению на ранних этапах, когда их популяции невелики и локализова-ны. Поэтому чрезвычайно полезным могут оказаться системы раннего обнаружения, нацеленные на точки наиболее вероятного проникновения, с последующим мониторингом.
Среди фитосанитарных мер, предшествующих вво-
зу, центральное место отводится анализу фитосани-тарного риска возбудителя болезни, который включает данные, определяющие карантинный статус вида и соответствующие регламентации при ввозе раститель-ных м
атериалов. эти совокупные данные положены в
основу формирования импортного карантинного раз-решения. Управление службы фитосанитарного надзо-ра РФ, в рамках двухсторонней договоренности стран, может командировать своих специалистов в страну-эк-спортер для проведения аудита фитосанитарного над-зора материалов, осуществляемого в этой стране.
Документами и мероприятиями, регулирующими
ввоз растительных материалов, являются различные типы фитосанитарных сертификатов и дополнений к ним, а также акт и свидетельство, подтверждающие результаты проведенного досмотра и экспертизы этих материалов. Фитосанитарный сертификат является свидетельством того, что экспортируемый материал подвергся фитосанитарному мониторингу на нали-чие карантинных организмов, включая лабораторную проверку, а также гарантией того, что данный груз свободен от этих организмов. Первичный досмотр и экспертиза растительного материала при пересечении границы являются одним из составных элементов мо-ниторинга, позволяющим выявить чужеродный орга-низм еще до момента его проникновения на террито-рию страны.
К фитосанитарным мерам, применяемым после
ввоза растительной продукции, относятся повтор-ная проверка по месту их поступления, включающая инспектирование мест складирования, мониторинг посевов, насаждений и материалов на выявление ин-вазивных видов, проверка семенного и посадочного материала на карантинных участках, и в интродукци-онно-карантинных питомниках.
Если интродукция инвазивных видов все же име-
ла место, необходимо принимать меры по смягчению неблагоприятных последствий, такие как искоренение, лока
лизация и регулирование. эти меры должны про-
водиться без риска для людей, окружающей среды и сельского хозяйства и быть приемлемыми с этической точки зрения. Меры по смягчению последствий сле-дует принимать на самых ранних этапах инвазии на основе подхода, основанного на принципе предосто-рожности. В этой связи раннее выявление новых инт-родукций потенциально инвазивных или установлен-ных инвазивных видов имеет важное значение, и его необходимо сочетать с возможностью принятия пос-ледующих оперативных мер. Однако в большинстве случаев меры по искоренению трудновыполнимы, что вынуждает принимать меры по локализации и меры долгосрочного регулирования
Одной из фитосанитарных технологий, обеспечи-
вающей локализацию и долгосрочное регулирование карантинного организма является использование ус-тойчивых сортов. Применение этой технологии поз-волило локализовать и в результате долгосрочного регулирования вытеснить из агробиоценозов возбуди-теля ю
жного гельминтоспориоза кукурузы – bipolaris
maydis race T. эт а же технология способствует в зна-
чительной степени локализации другого карантинного организм
а – возбудителя рака картофеля Synchytrium
endobioticum.
Биоценотическая регуляция может быть усилена за
счет восстановления структуры площадей, введение в ротацию культур, играющих роль фитосанитарных регуляторов. Именно этими регуляторами являются злаковые культуры (сорго, овёс, кукуруза, и др.), спо-собствующие снижению запасов почвенной инфекции возбудителя техасской крневой гнили (Phymatotrichop-sis omnivora), фомопсиса подсолнечника ( diaporthe
helianthi ),
головни картофеля (Thecaphora solani) и
других видов. Снижению численности почвенной по-пуляции возбудителя сухой гнили кукурузы Stenocar-
pella maydis способствует послеуборочная обработка
Фитопатогенные грибы 159
почвы, включающая измельчение растительных остат-
ков дисковыми боронами и последующую зяблевую вспашку (Christensen, Wilcoxson, 1967).
эф
фективное регулирование часто достигается ис-
пользованием комплексных методов, применяемых в соответствии с существующими нормативными поло-жениями и международными нормами. Защита семеч-ковых культур от возбудителя бактериального ожога (e.
amylovora) может быть обеспечена использовани-ем толерантных сортов, обрезкой пораженных побегов и лечением ран, использованием средств химического контроля, а в отдельных странах, в дополнение пере-численным, применением биологических средств за-щиты (v an der
zwet, Beer, 1995).
СЕПТОРИЕВЫЕ ГРИБЫ – ПАТОГЕНЫ РОЗОЦВЕТНЫХ
Андрианова Т.В.
Институт ботаники им. Н.Г. Холодного НАН Украины,
киев
Септориевые грибы, приуроченные в качестве
субстрата к растениям семейства Rosaceae, остаются недостаточно исследованными. Изучение таксономии и распространения грибов этой группы затруднено в связи со скудностью типовых гербарных материалов, наличием большого числа близкородственных к роду Septoria Sacc. видов и обусловленных этим неверно атрибутированных гербарных образцов. На совре-менном этапе решение вопросов систематики септо-риевых грибов, приуроченных в своем развитии к ро-зоцветным, невозможно молекулярно-генетическими методами в связи с путаницей в исходных материалах и необходимостью дальнейшего накопления данных.
В семействе Rosaceae, признанном монофилетичес-
ким, в настоящее время насчитывают около 90 родов и более
3 тыс. видов (potter et al., 2007). Для септорие-
вых грибов наиболее характерна родовая или близко-родственная родовая специфичность, поэтому законо-мерно, что более 90 видовых таксонов рода Septoria
описано на представителях семейства розоцветных, и только 8 из них являются анаморфами представителей аскомицетного рода mycosphaer
ella Johanson. Около
половины известных таксонов этой группы септори-евых грибов регистрировалось на территории стран бывшего СНГ (Тетеревникова-Бабаян, 1974, 1987), хотя согласно современным взглядам число видов этих анаморфных грибов значительно меньше. Следу-ет отметить, что для многих стран умеренного клима-та, которые меньше по площади, приводятся данные о незначительном числе таксонов рода Septoria на ро-
зоцв
етных: в Норвегии – 8 (Jшrstad, 1965), в Чехии – 4
(Cejp, Jechova, 1967), в Румынии – 16 (Rгdulescu et al., 1973), в Болгарии – 11 (Ванев и др., 1997), в Корее – 6 (Shin, Sameva, 2004). Согласно предварительным на-блюдениям в Украине представлено 16 анаморф из рода Septoria этой группы (Андріанова 1999). Осу-
ществленные автором таксономические и экспедици-онные исследования уточнили число видов и подтвер-дили распространение в Украине на представителях розоцветных лишь 13 анаморф из рода Septoria, 5 из
которых являются стадиями микосфереллоидных го-ломорф.
В результате проведенного сравнительного изуче-
ния эксикат и типовых образцов, материалов различ-ных гербариев установлено, что Septoria aucupariae
Bres., S. sieversiae Sгvul. et Sandu , S. quevillensis Sacc.,
а также разновидность S. crataegi var. crataegi-mo-
nogynae Sгvul. et Sandu не являются самостоятель-
ными видами или разновидностями, и относятся к синонимам соответствующих видов. Показано, что таксоны Septoria agrimoniicola Bondartsev, S. cratae-
gicola Bondartsev et Tranzchel, S. potentillica Thьm. не
являются синонимами или вариантами развития не-которых других видов грибов рода Septoria , а пред-
ставляют отдельные, самостоятельные виды. В целом следует отметить, что для большинства септориевых грибов, использующих в качестве субстрата виды розоцветных, характерна большая вариабельность ст
роения конидиом – от закрытых пикнидиальных
до разрывающихся и широкооткрытых, близких по строению к ацервуляльным ложам; конидиогенных кл
еток – от голобластических простых или симпо-
диальных до перкуррентно пролиферирующих по не
сколько раз; конидий – от коротких до длинных у
одного и того же вида, часто вариабельных по тону светлой окраски, а также значительной представлен-ности видов с широкоцилиндрическими или цилинд-рическими конидиями.
Вероятно, такая морфологическая нестабильность
и многообразие в этой группе грибов рода Septoria
связаны с проходящим в ней активным видообразо-ванием, сопряженным с эволюционными процессами в семействе Rosaceae. Тем более, что для этих гри-бов о
тмечены большие различия в ареалах – от узких
внутриконтинентальных до широких космополитных, наличие значительного числа анателеоморф, и харак-терная для ряда достаточно распространенных видов эпизодичность встречаемости.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 160
Ложная мучнистая роса или милдью, вызываемая
облигатным грибным паразитом Plasmopara halstedii
(f
arl.) Berl. et de Toni (син. Plasmopara helianthi
Novot.),
– одно из наиболее вредоносных заболеваний
подсолнечника и в благоприятные для гриба годы мо-
жет приводить к значительным потерям урожая. Пато-ген характеризуется разнообразием расового состава популяций и поражает подсолнечник практически во всех странах его возделывания. По последним данным (Gulya, 2007) в мире насчитывается до 36 патотипов гриба, но в разных странах их количество и распро-странённость значительно варьируют. В России до недавнего времени структура популяций возбудителя болезни была практически неизучена, хотя исследова-ниями Якуткина и Ахтуловой (2002) были выявлены в Белгородской области расы 100, 300, 310, 730. Обшир-ная коллекция (свыше 1000 изолятов) гриба была соб-рана и идентифицирована нами в период 2004–2007 гг. в Краснодарском крае, республике Адыгея и отде-льных районах Ростовской области. В соответствии с международными стандартами было идентифицирова-но 7 рас: 100, 300, 310, 330, 700, 710, 730 (Антонова и др., 2005, 2006). Из них по своей распространённости экономическую значимость для указанных регионов в настоящее время имеют расы 330, 710, 730, что требует проведения селекции подсолнечника на устойчивость к этим патотипам. Расы 100, 300, 310 имеют редкую встречаемость, скудное спороношение, их трудно раз-множать и поддерживать в искусственных условиях. Поэтому их статус определён как незначимый. Раса700 была обнаружена в четырёх районах Краснодарского края (Выселковский, Лабинский, Крыловской, поля ВНИМК). Однако статус её пока неясен: является ли она исчезающей или, появившись недавно, не успела занять достаточный ареал.
Из экономически значимых раса 330 распространена
повсеместно, в частности, в 11изученных районах Крас-нодарского края. Она доминирует в Каневском, Крылов-ском Курганинском районах, на полях ВНИИМК в ок-рестностях г. Краснодара. Раса 710 обнаружена в семи районах края: У спенском, Курганинском, Лабинском, Каневском, Крыловском, полях ВНИИМК и доминиру-ет в Выселковском районе. На отдельных полях этого района преобладает раса 730, которая также обнару-жена в пяти перечисленных районах, за исключением Курганинского и У спенского. В Шовгеновском районе республики Адыгея доминирует раса 710 и примерно в одинаковом соотношении встречаются расы 330, 700 и 730. В Миллеровском районе Ростовской области обна-ружены те же патотипы с преобладанием расы 330.Было выполнено морфометрическое изучение зоо-
спорангиев 67 изолятов рас 330, 700, 710, 730, собран-ных с различных генотипов подсолнечника. Зооспо-рами каждого изолята отдельно были инокулированы проростки сорта подсолнечника ВНИИМК 8883. При проявлении спороношения брали соскоб зооспоранги-ев с верхней стороны семядольных листьев пророст-ков в одинаковых условиях температуры и влажнос-ти через каждые 24 часа в течение 6 суток. Измеряли длину и ширину зооспорангиев и вычисляли индекс их соотношения. Наибольший размах варьирования индекса соотношения длины и ширины зооспорангиев наблюдался у расы 330. Её доверительный интервал включал в себя пределы варьирования индексов дру-гих изученных рас. При этом доверительный интервал этого индекса у расы 700 не перекрывался с интерва-лами рас 710 и 730. Кроме измерения индексов соот-ношения длины и ширины зооспорангиев учитывали также их форму. Для изолятов расы 700 было типично, что уже в первые сутки развития наблюдалось много зрелых зооспорангиев грушевидной формы. У расы 710 такая форма зооспорангиев отсутствовала вовсе на протяжении всех шести суток наблюдения. У рас 330 и 730 зооспорангии такой формы появлялись из округ-лых по мере их созревания наряду с лимоновидными, ланцетовидными, овальными и яйцевидными.
Анализ
21 RApD-локуса ДНК методом ПЦР у рас
300, 330, 700, 710 и 730 показал по 13 праймерам отли-чия расы 300 от остальных. Различия состояли в нали-чии-отсутствии фракций ДНК. Так, например, праймер Op
J13 выявил у этой расы фракции длиной 330, 480
и 710 пар нуклеотидов, отсутствующие у других рас. Быстрое выявление отличий расы 300 от остальных по 13 локусам из 21 может быть связано с её происхож-дением с другого континента. Как известно, раса 300 соответствует расе 2 по старой номенклатуре или Red River valley,
об наруженной впервые в долине Красной
реки штатов Северная Дакота и Миннесота в Америке и прилегающей части Канады (Квебек). Со временем она была завезена с семенами на Европейский кон-тинент, в частности, во Францию. Результаты нашего анализа свидетельствуют, что остальные изученные расы не
могут иметь происхождение от расы 300. эти
расы по двадцати праймерам имели одинаковые фрак-ции, за
исключением одного OpG06, который выявил
внутрирасовый полиморфизм у рас 300, 330 и 730 по наличию-отсутствию фракции ДНК длиной 1125 пар нуклеотидов. Было изучено двенадцать различных изолятов расы 710 из пяти разных районов Краснодар-ског
о края. Все показали наличие этой фракции. это ПОЛИМОРФИЗМ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛОЖНОЙ МУЧНИСТОЙ
РОСЫ ПОДСОЛНЕЧНИКА Pla SmoP ara HalSTedii (f ARL.)
bERL.& DE TONY В РЕГИОНАХ СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
Антонова Т.С., Ивебор М.В., Гучетль С.З., Арасланова Н.М.,
Челюстникова Т.А., Рамазанова С.З.
Гос
ударственное научное учреждение всероссийский научно-исследовательский
институт масличных ку
льтур им. в.С. Пустовойта Россельхозакадемии,
краснодар
Фитопатогенные грибы 161
может свидетельствовать о стабильно мономорфном
состоянии расы 710 в данном локусе. Любопытно, что все изученные изоляты расы 330 из Каневского райо-на, в котором она доминирует практически в чистом виде, не имеют этой фракции. У изолятов же расы 330 из Выселковского района, где доминирует раса 710, эта фракция имеется. Можно предположить, что в дан-ном случае мы имеем дело с гибридизацией рас 330 и 710. В то же время изоляты расы 730 из Выселковского района отличаются как преимущественно наличием, так и отсутствием этой фракции, а вот изоляты с полей ВНИИМК чаще не имеют её. Вопрос является ли раса 730 продуктом гибридизации рас 330 и 710 остаётся пока открытым. Вместе с тем четыре изолята расы 700 из трёх разных районов Краснодарского края, все име-ют фракцию 1125 пар нуклеотидов. Однако такая вы-борка изолятов всё-таки мала, чтобы с уверенностью утверждать, что раса 700, как и 710-я стабильно моно-морфна в данном локусе с наличием фракции.
Таким образом, установлено, что в настоящее вре-
мя Краснодарском крае и республике Адыгея три расы P . halstedii : 330, 710 и 730 являются экономически зна-чимыми для культуры подсолнечника. Раса 330 широ-ко распространена повсеместно, с доминированием в большинстве изученных районов. Однако в Высел-ковском районе Краснодарского края и Шовгеновском республики Адыгея доминирует раса 710 с преоблада-нием на отдельных полях расы 730. Применение мор-фометрического изучения зооспорангиев из локального спороношении на верхней части семядолей проростков подсолнечника выявило обширную изменчивость расы 330 по их размерам и форме, что может быть связано с её широким распространением. Выделилась раса 710 по отсутствию зооспорангиев грушевидной формы, имеющихся у других рас. Раса 710 выделилась также ст
абильно мономорфным состоянием локуса O pG06
1125. Обсуждаются причины полиморфизма этого локу-
са у рас 330 и 730. С применением ПЦР анализа ДНК 13
RApD-праймеров из 21 изученных выявили отличия
расы 300 от остальных, что свидетельствует о том, что она не может быть их родоначальником.
эти
исследования выполнены при финансовой под-
держке РФФИ и Администрации
Краснодарского края. Грант 06–04–96641.
МЕЖДУНАРОДНЫЙ НАБОР СОРТОВ-ДИФФЕРЕНЦИАТОРОВ ДЛЯ
АНАЛИЗА ПОПУ ЛЯЦИЙ PYreno PHora TereS f . TereS
Афанасенко О.С.1, Ялли М.2, Пиншмидт Х.3, Филатова О.А.1, Платс Г.4
1 всероссийский институт защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
2 Центр Сельскохозяйственных исследований Финляндии
3 Аархусский Университет,
Дания
4 Эрмитажная исследовательская станция,
квинсленд, Австралия
Сетчатая пятнистость вредоносное заболевание
ячменя, распространенное повсеместно в ареале воз-делывания культуры. Возбудителем является гриб Py-
renophora teres Drechsler f. teres Smedeg. (анаморфа
dr
echslera teres (Sacc.) Shoemaker). Популяции возбу-
дителя болезни отличаются высокой гетерогенностью по признаку вирулентности и узколокальным распре-делением в пространстве. Для проведения глобальных исследований популяций патогена необходимо нали-чие стандартного набора сортов-дифференциаторов. Решение о создании такого набора было принято на II международной конференции по пятнистостям лис-тьев ячменя в 2002 г. в ИКАРДА (Алеппо, Сирия). В исследования включены 16 сортов и образцов ячменя различного происхождения, которые ранее входили в локальные наборы сортов-дифференциаторов в усло-виях различных стран и континентов: Canadian Lake Shore, Harbin, к-8755, к-20019, CI 4207, CI 739, Tifang, Diamond, CI
9825, CI 5791, CI 9819, Beecher, prior, CI
9214, Corvetta, Skiff. Для выбора универсально воспри-имчивого контроля в исследования были включены три сорт
а: pirkka, Harrington и Haruna Nijo. Вирулентность
18 образцов популяций P . teres из различных агрокли-матических зон России и 10 образцов из стран Запад-ной Европы (всего 870 моноконидиальных изолятов) была изучена на наборе из 16 образцов ячменя.
Все изученные образцы обладали способностью
дифференцировать популяции гриба. Выявлена вы-сокая
гетерогенность популяций p. teres по признаку
вирулентности. Например, 43 патотипа выявлено при анализе 70 изолятов патогена из Северо-западного района РФ в 2005 г., 31 патотип среди 34 изолятов из популяции Западной Сибири, 21 патотип среди 25 изолятов из Чехии и т.д. Одним из важных критериев для выбора сортов-дифференциаторов является их эф-фективность при проведении сравнительного анализа географических популяций возбудителя. Лучшими по этому критерию являлись образцы ячменя: Canadian Lake Shore
(0–28 % вирулентных изолятов в различных
популяциях p. teres), Harbin (0–50 %), к-8755 (0–36 %),
CI 4207 (0–43 %), Tifang (0–28 %), CI 9825 (0–48 %), CI 5791 (0–25 %), CI 9819 (0–13.5 %), prior (0–57 %),
CI 9214 (0–44 %). Например, в 2002 г., вирулентных к сорту prior изолятов не было обнаружено в популяци-
ях p. teres
из Уральского региона России, в то время
как в Чехии, Германии и Швеции, их число составляло
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 162
57.1, 30, 5 и 33.3 %, соответственно. Противополож-
ные значения в этом же году были получены для образ-ца CI 9819: в образцах популяций из Чехии, Германии и Швеции, вирулентных изолятов к этому образцу не было выявлено, тогда как в уральской популяции чис-ло виру
лентных изолятов составляло 5 %.
По результатам кластерного анализа некоторые
образцы были объединены в отдельные кластеры, что свидетельствовало о сходстве их реакции на изучен-ные изоляты. Анализ «важности» каждого образца для определения уровня гетерогенности популяций показал, что количество выявляемых рас уменьша-ется при исключении из набора каждого образца, но уровень разнообразия популяции уменьшается незна-чительно при «выбраковке» отдельных образцов из ка
ждого кластера. эти результаты позволят миними-
зировать количество образцов в стандартном наборе сортов-дифференциаторов. Каждый из 3-х изученных восприимчивых сортов может быть использован в ка-честве восприимчивого контроля, так как по сходству реакций на заражение различными изолятами сорта pir
kka, Harrington и Haruna Nijo были объединены в
один кластер.
Следующим этапом исследований будет выявление
тождественности генов устойчивости у изученных об-разцов ячменя.
ВИДОВОЙ СОСТАВ И ПАТОГЕННОСТЬ ГРИБОВ РОДА
FuSarium lK:Fr . – КОНТАМИНАНТОВ КОЛОСЬЕВ ОЗИМОЙ
ПШЕНИЦЫ В ЮЖНОЙ СТЕПИ УКР АИНЫ
Бабаянц О.В.
Селекционно-генетический институт –
Национальный центр семеноведения и сортоизучения,
одесса
Исследования микобиоты колосьев пшеницы на
юге Украины проводятся более 15 лет. В зависимости от складывающихся климатических условий в разные годы видовой состав микромицетов, заселяющих ко-лосья озимой пшеницы, претерпевает изменения. В общем за годы исследований на колосьях обнаружено и идентифицировано более 70 различных видов мик-ромицетов, которые представлены родами Alternaria Nees., fusarium
Lk:fr., Drechslera Ito, Botrytis Mich.,
Septoria fr., Stemphilium Wallr., Aureobasidium viala
et Boy., Stachybotrys, Rhizoctonia DC, penicillium Lk.,
Myrothecium Tode, Acremonium Lk: fr., Aspergillus Lk.,
Mucor Mich. emend Ehrenb., Absidia Lk., Cylindrocarpon Wr., Gliocladium Cda, Trichothecium Lk. Среди группы выделенных микромицетов наибольший интерес как реальные и потенциальные возбудители заболеваний колосьев и зерна озимой пшеницы представляют гри-бы ро
да fusarium. За все годы нами идентифициро-
вано
более 25 видов этого рода, а именно – fusarium
graminearum Schwabe, f.culmorum (Sm.) Sacc.,
f.macroceras Wr. et Rg, f. oxysporum Schlecht. emend
Snyd. et Hans., f.gibbosum App et Wr. emend Bilai,
f.sambucinum fuck., f.poae (pk.) Wr., f.moniliforme
Sheld, f.avenaceum (fr.) Sacc., f.sporotrichioides (Sherb.)
Bilai, f.tricinctum (Cda) Wr., Booth, а также ряд других.
На протяжении всех лет исследований доминирующи-ми по
югу Украины были виды fusarium graminearum,
f.culmorum, f.macroceras. В степи Крыма стабильно до-
минирую
т виды fusarium macroceras и f graminearum.
Во влажные прохладные годы, как правило, возрастает доля f.culmorum
и f.sporotrichioidei, когда влажно и
тепло – преобладают f.macroceras и f.tricinctum. По на-
шим данным в годы засухи или недостаточного увлаж-нения общее
количество выделенных видов fusarium
резко сокращается до 2 –3-х с наиболее патогенным их штаммовым набором. Как правило, в наиболее засушливые
годы чаще всего выделяются fusarium
graminearum и f.macroceras. Фузариоз колоса и зерна
(ранний) развивается с большей или меньшей интен-сивностью в зависимости от того, насколько благопри-ятны условия для развития патогена были в период с начала цветения до начала налива зерновки. Второй „критический» период для успешной реализации пато-генног
о потенциала фузариев – это фаза молочной до
восковой спелости зерновки. В результате исследова-ний патогенных свойств видов и штаммов установили, что
внутри рода fusarium, равно как и внутри видов
этого рода есть высокопатогенные, патогенные, сред-непатогенные, слабопатогенные и непатогенные штам-мы. Непатогенные и слабопатогенные часто обладают ростстимулирующими свойствами. Наиболее высо-кий процент
патогенных штаммов – в пределах видов
fusarium graminearum, f.culmorum, f.macroceras, сре-
ди них непатогенных и слабопатогенных изолятов не обнару
жено. Более того, среди штаммов f.macroceras
обнаружены лишь от очень высокопатогенных до па-тогенных. В течение 15 лет на искусственно создава-емых фонах фузариозного полевого питомника, как модели возможных фузариозных эпифитотий, нами исследованы более 200 различных комбинаций фу-зариев. Установлено, что наиболее агрессивны па-тогенные комплексы фузариев, сочетающие в себе fusarium
graminearum+ f.culmorum + f.macroceras или
fusarium graminearum+ f .culmorum+ f .sporotrichioides,
или fusarium graminearum+ f.macroceras+f .tricinctum.
Уменьшают общий уровень патогенности комплекса виды fusarium
oxysporum var.orthoceras, f.sambucinum
var.minus, если они сочетаются с fusarium graminearum
или с f.culmorum и f.macroceras . Наиболее жестокие
эпифитотии фузариоза колоса в природе развивались
Фитопатогенные грибы 163
при сочетании fusarium graminearum+ f.macroceras
(степной Крым, 1988г.). Тогда пораженные фузариями
посевы озимой твердой пшеницы сорта Парус одес-ский на площади 80 га сожгли на корню. В 2006 г. В Одесской области (Украина) фузариоз колоса, вызван-ный к
омплексом fusarium graminearum+ f.culmorum +
f.sporotrichioides привел к недобору урожая до 60 %. Убранное зерно имело высокий уровень фузариотокси-нов, в связи с чем было использовано на технические цели. По результатам наших исследований установле-но, чт
о между некоторыми видами fusarium отмечены
конкурентные и антагонистические взаимоотношения, что возможно использовать при ограничении вредо-носности видов для пшеницы.
НЕМОНОТОННОСТЬ ЗАВИСИМОСТИ ДОЗА-э ФФЕКТ
КАК
ПРИЧИНА НЕОДНОЗНА ЧНОСТИ ИММУНОМОДУ ЛИРУЮЩИХ
СВОЙСТВ ЦИТОКИНИНОВ
Бабоша А.В., Рябченко А.С., Аветисян Т.В.
Гл
авный ботанический сад им. Н.в. Цицина РАН,
Москва
Известно, что фитогормональная регуляция игра-
ет важную роль в процессах взаимодействия расте-ния и патогена, что особенно важно при облигатном паразитизме. Одним из методов, позволяющих судить о роли фитогормонов в патогенезе, является исследо-вание их иммуномодулирующих свойств. Однако по-пытки реализации идеи использовать экзогенные фи-тогормоны в качестве индукторов устойчивости дали неоднозначные результаты. Широкое применение различных веществ с иммуномодулирующей актив-ностью также наталкивается на трудности, связанные с нестабильностью, а подчас и разнонаправленностью их действия. Одной из причин этих явлений, вероят-но, является нелинейная и немонотонная зависимость иммуномодулирующих свойств от концентрации, а также изменение формы концентрационной кривой при изменении физиологического состояния растения-хозяина.
Целью данной работы – изучение характера
концентрационной зависимости действия экзогенного зеатина на развитие возбудителя мучнистой росы пше-ницы Erysiphe graminis f.sp. tritici Marchal.
Растения пшеницы Triticum aestivum L. (сорта Заря
и Хакасская), а также пшенично-эгилопсных линий (из коллекции «Арсенал» НИИСХ ЦРНЗ) выращивали на растворе Кнопа в рулонах фильтровальной бумаги в течение 10–14 сут. Серии концентраций цитокининов добавляли в питательный раствор непосредственно после инфицирования растений. Отделенные инокули-рованные листья инкубировали в чашках Петри на пла-ву. Учитывали суммарное число колоний мучнистой росы на абаксиальной и адаксиальной поверхностях 1-го листа. Растительный материал для сканирующей элек
тронной микроскопии фиксировали в 4 % глута-
рово
м альдегиде и 2 % четырехокиси осмия и затем
обезвоживали в серии спиртов и ацетоне, высушива-ли при критической точке, проводили Au-напыление. Подсчитывали количество микроколоний, проросших и непроросших конидий патогена в 20–40 полях зре-ния микроскопа по 0,6 мм
2 каждое.
Показано, что зависимость поверхностной плот-
ности колоний от концентрации цитокинина немо-нотонна и нелинейна. Из более чем 50 концентра-ционных кривых, полученных в разных условиях и с применением разных цитокининов, примерно в по-ловине случаев на графике присутствовали в той или иной мере выраженные 3 зоны: 2 пика максимальной восприимчивости (0.25–1.5 мкМ и 3–9 мкМ) и об-ласть максимальной устойчивости (1,5–3 мкМ). При изменении условий эксперимента (тип цитокинина, условия освещения и минерального питания, одно-временная обработка иммуномодуляторами иной природы) форма кривой и положение пиков изменя-лись. Аналогичная закономерность была свойственна и росту микроколоний на ранних этапах патогенеза. Так у восприимчивого сорта Хакасская максималь-ная плотность микроколоний через 72 ч после ино-куляции патогена имела место при обработке листьев 0,5–1 и 3–4,5 мкМ зеатина. На более позднем этапе эта тенденция полностью сохранялась, и происходил только количественный рост плотности за счет раз-вития новых колоний из более поздно прорастающих конидий. Зеатин стимулировал прорастание конидий и образование аппрессориальных инфекционных ст
руктур с максимумом активности при 1 мкМ для
сорта Хакасская и 3 мкМ зеатина у пшенично-эги-лопсной линии.
Построена математическая модель, отражающая
основные особенности влияния экзогенных цитоки-нинов на восприимчивость проростков пшеницы к возбудителю мучнистой росы: многофазность, вариа-бельность при изменении условий эксперимента и раз-нонаправленность иммуномодулирующего действия. При этом форма концентрационной кривой, соответс-твующей данной модели, меняется при изменении па-раметров, соответствующих притоку и расходованию цитокининов. На основе предложенной модели вы-сказаны гипотезы, объясняющие роль цитокининов в регуляции процесса патогенеза в данной патосистеме, неоднозначное действие некоторых иммуномодулято-ров, а также ранее известные экспериментальные дан-ные о корреляции между устойчивостью и содержани-ем цитокининов.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 164
В последние годы отмечено изменение в фитопа-
тогенном комплексе болезней озимой пшеницы. Поя-
вились такие болезни как фузариозный ожог листья , бактериозы листьев и колоса. При этом остается опас-ность накопления инфекции фузариоза колоса, септо-риоза, твердой и пыльной головни, корневых гнилей.
В связи с этим возрастает необходимость разработ-
ки новых эффективных систем защиты растений. При этом большое внимание уделяется биологическому методу, который предусматривает поиск и отбор вы-соко
эффективных штаммов микробов – антагонистов,
перспективных для основы биопрепаратов, используе-мых в защите сельскохозяйственных культур от болез-ней разной этиологии.
На протяжении 2000–2007 гг. систематически, в
период вегетации, учитывая проявление болезней, проводили отбор образцов растений озимой пшеницы на фитоучастке Агрономической исследовательской станции Национального аграрного университета (Ва-сильковский район, Киевская область).
В разные фазы развития озимой пшеницы нами
было идентифицировано 26 видов микромицетов из от
делов zygomycota, Ascomycota и группы Anamorphic
fungi. Предтавители отдела zygomycota выделялись
преимущественно в весенний период развития расте-ний (фаза цветения), в то время как виды Anamorphic fungi: alternaria
alternata, bipolaris sorokiniana , рода
Fusarium изолировались на протяжении всего вегета-
ционного периода.
Группа анаморфных грибов была наиболее разно-
образной по видовому составу, в котором преоблада-ли пре
дставители родов penicillium (9,6 % от общего
количества исследованных штаммов), Trichothecium (5,4
%), Trichoderma (6,2 %), fusarium (20,4 %),
Alternaria (19,3 %), Cladosporium (6,8 %), Bipolaris (11,7 %) и Mycelia sterilia (orange) (2,4 %).
В результате многоступенчатого скрининга были
отобраны штаммы микромицетов, характеризующие-ся высокой антагонистической активностью в отноше-нии фит
опатогенных грибов – компонентов микобиты
озимой пшеницы.
Антимикробная активность изолированных штам-
мов находилась в прямой зависимости от фазы онто-гене
за растений озимой пшеницы. Высокоактивны-
ми
продуцентами антибиотических веществ были
грибы, выделенные в фазах цветения и полной зре-лости
(в среднем зоны угнетения роста тест – культур
составляли 12–18 мм в диаметре). При этом микроми-цеты, изолированные в фазе молочной зрелости ха-рактеризовались низким уровнем активности в отно-шении те
ст – объектов, зона угнетения роста которых
составляла 5–11 мм.
На наш взгляд, это можно объяснить влиянием
климатических условий и изменением в химическом составе растительных клеток озимой пшеницы, в оп-ределенной фазе её развития, а также межвидовой конкуренцией компонентов микоценоза филопланы озимой пшеницы.
Выделенные культуры антагонистов являются пер-
спективными для дальнейшего изучения, определения их роли в формировании микобиоты озимой пшеницы во время вегетации, а также при хранении зерна.
Полученные нами результаты свидетельствуют о
возможности использовании новых антагонистов в защите озимой пшеницы от болезней грибной этиоло-гии.ПОИСК И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГРИБОВ АНТАГОНИСТОВ
ДЛЯ
БОРЬБЫ С ФАКУ ЛЬТАТИВНЫМИ ПАР АЗИТАМИ
ОЗИМОЙ
ПШЕНИЦЫ
Башта Е.В.
Национальный аграрный университет,
киев
ОБР АЗОВАНИЕ ЦИННИОЛА ГРИБОМ
alTernaria
cirSinoxiae И ЕГО ФИТОТОКСИЧЕСКАЯ
АКТИВНОСТЬ ДЛЯ БОДЯКА ПОЛЕВОГО
Берестецкий А.О.1, Юзихин О.С.1,2, Каткова А.С.2, Добродумов А.А.3
1 всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений РАСХН,
Санкт-Петербург, Пушкин
2 Санкт-Петербургская государственная лесотехническая академия
3 Институт высокомолекулярных соединений РАН,
Санкт-Петербург
Фитопатогенные грибы рода alternaria являются
возбудителями заболеваний многих культурных, ди-корастущих и сорных растений. Хорошо известна их способность к образованию физиологически активных веществ, в частности, фитотоксинов, которые играют значительную роль в инфицировании растений (Бе-ляков
а, Левкина, 1990, 1992). эти метаболиты доста-
точно давно привлекают внимание как гербицидные вещества природного происхождения (Берестецкий, Боровков, 1985; Берестецкий, 2008). Например, неко-
Фитопатогенные грибы 165
торые фитотоксины a. alternata (fr.) keissl. – тенток-
син и
AAL-токсин – рассматриваются как прототи-
пы новых гербицидов (Abbas et al., 1992, Duke et al.,
2002). Для данного исследования мы избрали гриб a.
cirsinoxiae
E.G. Simmons et Mortensen, который извес-
тен как потенциальный микогербицид против бодяка полевого ( cirsium
arvense (L.) Scop.), обладающий вы-
сокой патогенностью и специализацией (Green et al., 2001; Gannibal, Levitin, 2007; Ганнибал, Берестецкий, 2008). В задачи исследования входило подобрать пита-тельную среду и продолжительность поверхностного культивирования штамма С-363 a.
cirsinoxiae для по-
лучения токсичного культурального фильтрата, выде-ление и идентификация фитотоксинов из него, оценка их биологической активности. В зависимости от со-става среды (концентрации источника углерода и ком-плексности), пик фитотоксической активности культу-рального фильтрата наблюдали на 14–28 сутки роста. Выделение фитотоксинов проводили из 21-суточного культурального фильтрата, полученного в результате роста гриба на глюкозо-аспарагиновой жидкой сре-де. После очистки эфирного экстракта культуральной жидкости при помощи колоночной и тонкослойной хроматографии получено индивидуальное вещество с фитотоксическими свойствами, которое по своим спектральным характеристикам идентифицировано как
цинниол – типичный метаболит крупноспоро-
вых видов грибов из рода alternaria . Подтверждена
неспецифическая активность этого тетракетида в от-ношении растений различных семейств. Определена минимальная концентрация цинниола для поражения листьев бодяка полевого (2 мкг). Предполагается, что a.
cirsinoxiae С-363 способен также продуцировать
фитотоксины, которые отличаются от цинниола как по структуре, так и селективности. Работа выполнена при поддержке гранта МНТЦ № 2939.
ФИТОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ГРИБА SePT oria cirSii –
ПОТЕНЦИАЛЬНОГО МИКОГЕРБИЦИДА
ПРОТИВ БОДЯКА ПОЛЕВОГО
Берестецкий А.О., Кашина С.А.
вс
ероссийский научно-исследовательский институт
защиты растений РАСХН,
Санкт-Петербург, Пушкин
Гриб Septoria cirsii Niessl. является узкоспециализи-
рованным патогеном бодяка полевого (Cirsium arvense s.l.), что предполагает его возможное использование для биологической борьбы с этим трудноискоренимым сорным растением. Однако для того, чтобы вызвать высокий уровень развития болезни при искусственном заражении бодяка конидиями данного гриба, требует-ся достаточно продолжительный (около 24 ч) период увлажнения листьев (Berestetski, 2000), что, конечно, встречается нечасто в полевых условиях. Как извест-но, многие фитопатогенные грибы способны образо-вывать фитотоксины, которые являются факторами их пат
огенности. эти метаболиты могут быть использо-
ваны в для создания новых экологически безопасных гербицидов как альтернатива живым микроорганиз-мам. Кроме того, изучение токсинов S. cirsii было бы интересно как вклад в хемосистематику грибов рода Septoria. Целью работы было оценить фитотоксичес-кую активность культурального фильтрата (ФАКФ) и экстрактов из него при глубинном и поверхностном культивировании ряда штаммов S. cirsii на различных жидких питательных средах. Результаты исследований показали, что ФАКФ 11-суточной глубинной культуры S. cirsii для корней проростков бодяка зависела от кон-центрации углерода и соотношения источников угле-рода
и азота в среде. ФАКФ (до 30 % подавления роста
по сравнению с контролем) отмечена при соотноше-нии C:N=24:1– 48:1 и концентрации источника углеро-да (сахарозы) в среде не менее 20 г/л. При понижении концентрации источника углерода в среде культураль-ный фильтрат не обладал ФА или стимулировал рост корней бодяка. При поверхностном культивировании гриба в плоских сосудах на модифицированной среде Чапека заметная ФАКФ для листовых дисков бодяка (некрозы около 1 мм в диаметре) отмечена лишь на 35 сутки роста, в то время как на 21-е сутки ФАКФ была незна
чительная. этилацетатные экстракты из 35-суточ-
ного культурального фильтрата в концентрации 5 мг/мл показали способность вызывать сильные некрозы на листовых дисках бодяка: до 3 мм в диаметре на све-ту
и 2 мм – в темноте. Возможно, действие некоторых
токсинов S. cirsii зависит от наличия света, что харак-терно для таких фотореактивных метаболитов грибов как церкоспорин (продуценты Cercospora spp.), эльси-нохром (Elsinoe spp., Stagonospora convolvuli), рубел-лин (Ramularia
collo-cygni) и другие. экстракты были
фитотоксичными для листьев 8 других видов растений из различных семейств, однако листья бодяка полево-го оказались наиболее чувствительными к метаболи-там S. cirsii. Таким образом, можно предположить, что экстракты из культуральной жидкости S. cirsii могут содержать смесь специфических и неспецифических фитотоксинов. Из последних, в них может присутство-вать в-нитропропионовая кислота, выделенная ранее, и известная у различных микромицетов (Herschenhorn et al., 1993).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 166
Состав рабочей жидкости для применения мико-
пестицидов путем опрыскивания может включать в
себ
я растительные и минеральные масла (от 0.05 %
до 50 %), которые улучшают удерживаемость и пре-дотвращают быстрое испарение инфекционных ка-пель на гидрофобной поверхности целевых объектов. Добавка растительных масел в препараты для приме-нения микогербицидов позволяет значительно повы-сить их эффективность: снизить как инфекционную нагрузку, так и зависимость развития болезни от вы-сокой
влажности воздуха. это показано многочислен-
ными исследованиями с различными видами грибов, например: Alternaria cassiae, Stagonospora convolvuli, Ascochyta pteridis, Colletotrichum gloeosporioides f. sp. aeschinomene и других. В некоторых случаях выявле-на утеря селективности ранее узкоспециализирован-ным патогеном. Причины расширения вирулентности указанных микогербицидов за счет добавления расти-тельного масла еще до конца не выяснены. В данной работе мы использовали один из патогенов бодяка по-левог
о (Cirsium arvense s.l.) – гриб Stagonospora cirsii
Davis, перспективный для биологической борьбы с этим сорняком. Добавление нерафинированного куку-рузног
о масла (≥6 % от объема) значительно повыша-
ло эффективность эмульсии, содержащей 50 г/л мице-лия S. cirsii C-163 (гибель розеток бодяка на 2–3 сутки после обработки), по сравнению с водной суспензией мицелия (незначительное развитие некрозов листьев на 7-е сутки). Более того, специализация эмульсион-ных препаратов заметно расширялась по сравнению конидиальным инокулюмом гриба, примененного в виде водной суспензии. Известно, что некоторые рас-тительные масла в определенной концентрации сами по себе обладают фитотоксическим эффектом. Однако в контроле без гриба кукурузное масло было фитотоксич-ным для бодяка и некоторых других растений лишь в ко
нцентрации ≥12 %. Было предположено, что мицелий
S. cirsii способен образовывать липофильный фитоток-син, активность которого повышается при добавлении в мицелиальную суспензию растительного масла. Из ми-целия гриба, полученного на зерновом субстрате, путем экстракции смесью вода:ацетон и диэтиловым эфиром, после очистки экстрактов при помощи колоночной и тонкослойной хроматографии выделен низкомолеку-лярный фитотоксин, обладающий неселективной фито-токсической активностью. Изучение его ЯМР спектров по
казало его отличие от стагонолида – известного фи-
тотоксина, выделенного из культурального фильтрата S.
cirsii (Yuzikhin etl., 2007, J.Agric. food Chem.). Таким
образом, повышенная активность и неселективность эмульсионных препаратов микогербицидов может быть объяснена повышенной доступностью липофильных фитотоксинов, содержащихся в мицелии или спорах грибов, которые могут участвовать в патогенезе и ус-корять инфекционный процесс. Работа выполнена при по
ддержке грантов Европейского Сообщества ( fp 6,
контракт № fOOD-CT-2003–001687), Президента РФ
(МК-6611.2006.4) и МНТЦ (№ 2939).ФИТОТОКСИЧНОСТЬ эМУ ЛЬСИОННЫХ ПРЕПАР АТОВ ПОТЕНЦИАЛЬНОГО
МИКОГЕРБИЦИДА НА ОСНОВЕ МИЦЕЛИЯ ГРИБА ST aG onoSPora cirSii
Берестецкий А.О.1, Сокорнова С.В.1, Кунгурцева О.В.1,
Юзихин О.С.1,2, Каткова А.С.2, Авилкин А.3, Добродумов А.А.4
1 всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений РАСХН,
Санкт-Петербург, Пушкин
2 Санкт-Петербургская государственная лесотехническая академия
3 Санкт-Петербургский государственный технологический институт
4 Институт высокомолекулярных соединений РАН,
Санкт-Петербург
ВИДОВОЙ СОСТАВ МИКРОМИЦЕТОВ НА БОДЯКЕ ПОЛЕВОМ И
ОЦЕНКА ПАТОГЕННЫХ СВОЙСТВ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ
Берестецкий А.О., Бильдер И.В., Гагкаева Т.Ю.,
Ганнибал
Ф.Б., Гасич Е.Л., Левитин М.М., Хлопунова Л.Б.
всероссийский институт защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
Бодяк полевой (Cirsium arvense (L.) Scop. s.l.) рас-
пространен на всей территории России, сопредельных странах и является одним из основных сорняков в по-сев
ах сельскохозяйственных культур. эффективные и
экологически безопасные меры борьбы с бодяком не разработ
аны. Цель настоящих исследований – провес-
ти анализ видового состава микромицетов, паразити-рующих на бодяке полевом, и отобрать виды и штам-мы, перспективные для разработки биологического препарата для борьбы с ним. Сборы патогенов бодяка полевого проводили в 2005–2006 годах на Северном Кавказе, в Центральной части России, на Северо-запа-де и Дальнем Востоке, а также в Киргизии и Молдове.
В результате наших исследований на территории
России и сопредельных государств на бодяке полевом выявлено 36 видов микромицетов. Повсеместно с вы-
Фитопатогенные грибы 167
сокой частотой встречались виды Fusarium и alternar –
ia, а также Puccinia punctiformis. В европейской части
РФ преобладали F . avenaceum, F . sporotrichioides, F .
solani, a.
tenuissima и комплекс видов a. infectoria. На
Дальнем Востоке доминировали F . sporotrichioides и a.
tenuissima
. В центральной зоне Европейской части РФ
с высокой частотой встречались листовые патогены
Septoria cirsii и Phoma exigua var. exigua (=ascochyta
sonchi
). На северо-западе РФ повсеместно распро-
странена пятнистость листьев, вызываемая ramularia
cynarae
. На дальневосточных образцах идентифици-
рованы следующие возбудители заболеваний бодяка полевого: ramularia
cynarae, P . punctiformis, Phyl-
losticta cirsii, S. cirsii, Stagonospora cirsii, Ph. exigua var. exigua, b
otrytis cinerea и другие микромицеты. В
Киргизии на бодяке был обнаружен гриб alternaria
cirsinoxia,
что является первой находкой для Евразии.
Видовая принадлежность некоторых штаммов грибов подтверждена с использованием молекулярных мето-дов.
Создана коллекция чистых культур грибов, выде-
ленных из различных частей бодяка полевого, и состо-ящая из 207 штаммов 31 вида микромицетов. Наиболее широко в коллекции представлены штаммы Septoria
cirsii, Ph. exigua var. exigua, а также виды Fusarium, a
s-
cochyta и alternaria .В лабораторных и вегетационных условия прове-
дена оценка патогенных свойств некоторых видов гри-бов. При инокуляции растений бодяка конидиальной су
спензией phoma exigua var. exigua в концентрации
107 конидий/мл на 4 сутки было поражено 60–95 % по-
верхности листьев. При инокуляции бодяка суспензией спор Alternaria cirsinoxia (5Ч104 конидий/мл) через 2–3 суток появлялись хорошо заметные симптомы. Через 7 суток после инокуляции большая часть листьев нижне-го и среднего яруса отмирала. Кроме бодяка штамм A. cirsinoxia заражал другие растения семейства астровых: лопух и цикорий. Однако степень поражения бодяка была существенно выше, чем растений других видов.
Выявлено наличие узкой специализации у некото-
рых штаммов F . solani и F . oxysporum –
возбудителей
увядания и корневой гнили бодяка. Патогенность этих штаммов была значительно выше по отношению к бо-дяку, чем к другим растениям. При инокуляции рас-тений показано отсутствие заражения осота полевого, пшеницы и слабое заражение салата листового и то-мата. Ещё одним перспективным агентом биоконтро-ля бодяка является Stagonospora cirsii. Штаммы этого
гриба обладают высокой агрессивностью и узкой суб-стратной специализацией.
Исследования выполнены при поддержке МНТЦ
(проект № 2939).
ГРИБЫ РОДА monilinia HONEY
НА ПЛОДОВЫХ КУ ЛЬТУР АХ В РОССИИ
Бильдер И.В.
всероссийский институт защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
Монилиоз плодовых культур вызывают три вида
грибов, сходных по своим морфологическим харак-теристикам: monilinia
fructicola (G. Wint.) Honey, m.
laxa
(Aderh. et Ruhl) Honey и m. fructigena Honey. На
территории России А.А. Овчинниковой (1937), Н.И. Петрушевой (1953), А. А. Аблокатовой (1956), Т.М. Хохряковой (1964, 1974) и рядом других авторов были обнару
жены два вида – m. fructigena и m. laxa. Третий
вид
– m. fructicola , впервые найден на американским
континенте (Hewitt et al., 1939; Cornin, 1963), а затем обнаружен в Северной Африке, Южной Азии, Океа-нии и
недавно в Китае (zhu, Chen et al., 2005; Bosshaed
et al., 2006). Для европейских стран вид m. fructicola
являет
ся карантинным (OEpp/EppO, 1990, 1999), од-
нако в последние годы он обнаружен и на этой терри-тории (OE
pp/EppO, 2002; Bosshaed et al., 2006).
С 2005 года проводится сбор и выделение в чистую
культуру грибов рода monilinia из различных регионов
России и сопредельных государств, поражающих се-мечковые и косточковые плодовые культуры. К насто-ящему времени выделено 105 штаммов, из которых, 36
– из Ленинградской области, 34 – из Калининградс-
кой
и 23 – с Дальнего Востока, остальные 10 регионов
представлены 1–3 штаммами. Штаммы выделены из плодов, соцветий и побегов
семи
видов растений: Malus domestica Borkh. (58 %
штаммов), prunus domestica L. (31 %), Cerasus vulgaris
Mill., (5 %), Sorbus aucuparia L. (3 %), Armeniaca vulgaris Lam. (2 %), pyrus communis L. (2 %) и persica
vulgaris Mill. (1 %).
С поверхности свежих и высохших плодов без
предварительной поверхностной стерилизации, брали кусочек спородохии и наносили его уколом в чашку Петри на картофельно-сахарозный агар (КСА). Вы-деление штаммов из пораженных соцветий и побегов прово
дилось после поверхностной стерилизации 0,1 %
раствором AgNO3. Из каждого изолята рода Monilinia получали моноспоровый изолят, который использова-ли в дальнейших исследованиях.
Английским ученым С. Р . Ланом (Lane, 2002)
разработан ключ различий для идентификации трех морфологически сходных видов рода monilinia
(m.
fructigena , m. laxa и M. fructicola ), включающего семь
характеристик (цвет колонии, скорость роста, интен-сивность споруляции, концентрические круги спору-ляции, характер края колонии, розеточность, темные дуги). Все эти признаки были использованы нами при идентификации коллекционных штаммов.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 168
Доминирующим видом во всех обследованных
районах является вид M. fructigena, на его долю при-
хо
дится 72,4 % коллекционных штаммов. Из пло-
довых культур Северо-западного региона выделено 76 %
, а из Приморского края 15 % штаммов этого
вида. Больше всего штаммов вида M. laxa выделено из образцов, собранных в Ленинградской области (5), а остальные регионы представлены 1–2 штам-мами.
Впервые для России идентифицирован вид M.
fructicola, выделенный из растительного материала, собранного на Дальнем Востоке. Частота встречае-мости
этого вида в указанном регионе составила 90 %.
Вид M. laxa на этой территории не выявлен.
Большинство штаммов M. fructigena выделено из
Malus domestica
(70 %) и prunus domestica (22 %). Все
штаммы видов M. fructigena и M. fructicola выделе-ны из плодов, а вид M. laxa изолирован как из плодов (58
%), так и из соцветий (25 %) и побегов (17 %) раз-
личных плодовых культур.
В результате проведенных исследований 7 коллек-
ционных штаммов остались неопределенными, так как не соответствовали ни к одному описанию трёх названных видов.
ВИДОВОЙ СОСТАВ ГРИБОВ ПОР АЖАЮЩИХ ОЗИМОЕ
ТРИТИКАЛЕ В УСЛОВИЯХ БЕЛАРУСИ
Буга С.Ф., Жуковский А.Г.
РУП «Институт защиты растений»,
Минский район, п. Прилуки
Озимое тритикале относительно «молодая» зерно-
вая культура, которая возделывается на полях респуб-лики с момента районирования первого отечественно-го сорта Дар Баларуссии в 1989 г. В настоящее время пос
евные площади культуры составляют 18–19 % зер-
нового клина. По мере расширения посевных площа-дей озимого тритикале обнаруживается все большее количество возбудителей болезней. Наиболее широко распрост
ранены и вредоносны снежная плесень – ос-
новной в
озбудитель Microdochium nivale (fr.) Samuels
& I.C. Hallett; обыкновенная корневая гниль – 10 видов грибов – возбудителей: f. culmorum (W. G.
Sm.) Sacc, f. poae (peck) Wollen, f. sporotrichioides
Sherb., f. oxysporum (Schlecht), f. avenaceum (fr.)
Sacc., f. sambucinum fuck., f. heterosporum Nees ex
fr., f. graminearum Schwabe f. verticillioides (Sacc.)
Nirenberg (син. f. moniliforme), f. gibbosum App. et Wr.
emend Bilai.; церкоспореллезная прикорневая гниль – pseudocercosporella herpotrichoides (fron) Deigton; септориоз листьев и колоса – Septoria nodorum (Berk), поражает листья, колос и зерновки, гриб Septoria tritici Roberge
ex Desm – встречается в основном на листьях
озимого тритикале. При поражении озимого тритикале фузариозом колоса, помимо возбудителей грибов рода fusarium,
отмеченных при поражении обыкновенной
корневой гнилью, встречаются грибы f. semitectum
Berc.et Rav. и гриб Microdochium nivale. Ежегодно отмечается поражение листового аппарата возбудите-лями б
урой ржавчины – puccinia recondite Roberge и
мучнистой росы – Blumeria graminis (DC.) Speer. Впер-вые для условий республики в вегетационном сезоне 2001 года было отмечено поражение культуры жел-той
ржавчиной – puccinia striiformis Westend., а в 2004
году – поражение ринхоспориозом – Rhynchosporium secalis (Oud.) J.J. Davis.
Таким образом, озимое тритикале в условиях Рес-
публики Беларусь поражается комплексом болезней характерных для озимой пшеницы и озимой ржи.
ПАТОГЕННЫЕ ГРИБЫ ОТДЕЛА deuTeromYcoT a НА
ИНТРОДУЦИРОВАННЫХ Р АСТЕНИЯХ КАЗАХСТАНА
Валиева Б.Г.
Институт ботаники и фитоинтродукции МоН Республики казахстан,
Алма-Ата
Состав питающих растений, на которых были отме-
чены анаморфные грибы, наиболее разнообразен. Они отмечены на 170 видах интродуцированных растениях, 46 семейств, 76 родов. Из порядка mel
anconiales выяв-
лено 36 видов микромицетов. Из порядка Sphaeropsida-
le
s – 176 видов грибов. К наиболее распространенным
патогенным грибам относятся следующие виды.
ascochyta
symphoricarpi pass. На листьях формиру-
ются многочисленные, от светлых до темно-коричне-вых, пятнышки, иногда с более светлой или буро-фи-олетовой каймой. Развитие болезни наблюдается до конца
вегетации растений. Сильно поражаемый вид –
Symphoricarpus albus (L.) Blake. Отмечен устойчивый вид
– S. orbiculatus Moench
mar
ssonina juglandis (Lib.) Magnus – гриб в сильной
степени поражает листья, побеги, околоплодники видов семейства Juglandaceae . Выявлены сильнопоражаемые
виды: Juglans intermedia, J. rupestris f. major Torr. Средне-
по
ражаемые – J. rupestris Engelm. Перспективными и на-
иболее устойчивыми являются J.nigra L. и J. cinerea L.
Фитопатогенные грибы 169
marssonina populi (Lib.) Magnus. На листьях фор-
мируются округлые, темные пятна. Гриб вызывает
преждевременное усыхание листьев. Устойчивый вид
– Populus trichocarpa Hook.
mar
ssonina rosae (Lib.) Died. Листья желтеют, те-
ряют тургор и преждевременно осыпаются. Поража-ются видовые и сортовые розы в течение всего веге-тационного периода. Устойчивых сортов и видов не выявлено.
Phyllosticta rosarum pass.
Гриб поражает листья,
стебли, что приводит к преждевременному засыханию. В сильной
степени поражаются виды – rosa acicularis
Lindl., r. kokanica ( Regel) Regel ex Juz ., r. oxyacanha
M. Bieb., r. spinosissima L.Septoria crataegicola Bondartsev & Tranzschel – на
листьях появляются буровато-коричневые, сливаю-щиеся пятна. Болезнь способствует сокращению ас-симиляционной поверхности листьев, что приводит к усыханию и раннему осыпанию листьев. Сильнопора-жаемый вид
– crataegus altaica (Ledeb. Ex Loud.), c.
dahurica
koehne & Schneid.
Stigmina
carpophila (Lev .) v.B. Ellis. Гриб поража-
ет практически все косточковые, произрастающие в ботанических садах Казахстана. Заболеванию подвер-жены виды armeniaca
manshurica (Maxim.) Skvorts.,
a.vulgaris
Lam., cerasus japonica (Thunb.) Lois., cydo-
nia
oblonga Mill. И другие виды. Устойчивые сорта и
виды не выявлены.
ФИТОФТОРОЗ ДРЕВЕСНЫХ ПОРОД
Веденяпина Е.Г.
Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
Фитофтороз – опасная, часто смертельная болезнь
растений, вызываемая грибоподобными микроорганиз-ма
ми – оомицетами из р. phytophthora. Среди предста-
вителей этой особой группы фитопатогенов встречают-ся как высокоспециализированные виды, поражающие ра
стения одного семейства или даже один вид ( ph.infes-
ta
ns, ph.sojae), так и виды с широкой специализацией,
способные вызывать заболевание более, чем у 2000 ви
дов растений ( ph.cinnamomi). Древесные растения
в основном поражаются почвообитающими видами фи
тофтор с широким кругом растений-хозяев. эти фи-
тофторы способны существовать в почве более менее длительные периоды времени, колонизировать расти-тельные остатки и при определенных условиях пора-жать корни растений. Генетические и экологические механизмы превращения безобидного обитателя почв в страшную уничтожающую силу до сих пор малопо-нятны. Особенно опасна такая ситуация в природных экосистемах. Примером может служить недавно опи-са
нный вид ph. ramorum, вызвавший «синдром внезап-
ной смерти» ценнейших дубрав на больших площадях в Калифорнии. Позднее этот вид был обнаружен в других штатах, а потом и в Европе. В настоящее время в США ежегодно выделяется 7.5 миллионов долларов на иссле-до
вания только ph.ramorum. В нашей стране состояние
изученности этой важной группы фитопатогенов мини-ма
льное. Симптомы заболеваия – редукция корневой
системы, начинающаяся с разрушения тонких латераль-ных корней, появление язв и темных пятен на корневой шейке, стволе и ветвях, вилт побегов, хлороз. Часто происходит внезапное усыхание дерева либо кустар-ника без видимых симптомов. Трудности обнаружения, вы
деления и идентификации возбудителя – причины
слабой изученности проблемы, без всякого сомнения существующей и в нашей стране. Распространение фи-тофторозов корневых систем, приводящих к усыханию ценных лесных экосистем, рассмотрено на примере ре-ликтовых кащтановых лесов Абхазии (Castanea sativa) и дубрав, образуемых дубом монгольским (Quercus mongolica) в Сихоте-Алинском заповеднике на русском Дальнем Востоке. Наши данные, полученные при об-следовании почв двух разных экосистем, показали, что фитофторы присутствуют только в почвах нарушенных фитоценозов. Нарушение естественных ценозов, по-ви-димому, сопровождается резким повышением плотнос-ти популяции фитопатогена, что увеличивает опасность его распространения.
Нами было показано, что общее изменение струк-
туры популяции фитофтор, обусловлено специфи-ческими взаимодействиями с почвенными микроор-ганизмами. Мы пытались выяснить, как действуют виды фитофторовых в системе организмов, колони-зирующих их пропагулы в почве. Результаты выявили следующие закономерности: 1) мицелий и зооспоран-гии колонизируются преимущественно бактериями и ак
тиномицетами, в то время как ооспоры – также
и микромицетами; 2) сравнение колонизации разных видов в одном и том же субстрате выявило видоспе-цифичность этого процесса; 3)колонизация пропагул в разных почвах приводит к различным результатам: от полного разрушения пропагулы до поддерживания жизнеспособности инокулюма на определенном уров-не; 4) процесс колонизации включает сукцессии мик-робных сообществ, причем основное воздействие на иноку
люм гриба оказывают сообщества – первичные
колонизаторы. Любое нарушение экосистемы немед-ленно отражается на структуре и функциях микробных сообществ, из которых сообщества микромицетов на-иболее показательны. А изменения баланса в сообщес-твах, имеющих самый тесный контакт с пропагулами фитопатогена (вовлекающихся в микрозону с метабо-литами пропагул или же колонизирующих их), может привести к резкому изменению численности, жизнен-ного цикла и стратегии почвообитающих фитофтор.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 170
Известно, что ареал каштана съедобного на Кавказе
катастрофически сокращается. Одной из многих при-
чин этого феномена является почвообитающий ооми-цет Рh.cinnamomi, вызывающий корневую гниль, чер-нильную болезнь и, как следствие, суховершинность деревьев и их окончательное усыхание. В начале 80-х гг. мы исследовали почвы каштановых лесов Тквар-чельского и Геджирского лесничеств Очамчирского лесхоза, где каштан часто суховершинит. Усыхание каштана съедобного наблюдалось на всех площадках, где
брали образцы почв. Но ph.cinnamomi обнаружи-
ли только в пробах, взятых в нарушенных ценозах. На высоте 900м н. у.м. в Геджирском лесничестве на по-логом склоне в редкостойном каштаннике лет за 10 до проводимого исследования был разбит питомник для выращивания сеянцев каштана, вскоре полностью по-гибший. Наибольшая относительная плотность попу-ляции фитофторы обнаружена именно на этой площад-ке
(64 %). Патоген выявлен также вдоль проложенной
дороги, где распределение популяции было преры-вистым. В
Ткварчельском лесничестве ph.cinnamomi
обнаружен только в почвах участка густых посадок кашт
ана. этот патогенный вид ни разу не удалось вы-
делить из почв ненарушенных лесных фитоценозов.
Аналогичные результаты были получены при иссле-
довании усыхания дуба монгольского в Сихоте-Алин-ско
м заповеднике. Дуб монгольский – одна из самых
распространенных ценных широколиственных пород Дальнего Востока, в Сихоте-Алинском заповеднике сост
авляет 13,1 % кедрово-широколиственных ксеро-
мезофильных и мезофильных лесов, расположенных на высоте 200–500 м н.у.м.. По словам работников за-поведника, усыхание природных лесов дуба монголь-ского стало отмечаться с конца 70-х гг. 20-го века. Од-нако, возбудитель заболевания оставался неизвестен. Наше обследование выявило четкую очаговость усы-хания Q.mongolica, причем очаги были тем или иным образо
м связаны с нарушением экосистемы – проло-
жена дорога, произведена вырубка, устроен питомник. Исследование почв очага усыхания, его границ и почв вне о
чага показало 100 % частоту встречаемости фи-
тофторовых грибов в ризосфере усыхающих дубов и дубов без признаков поражения, но растущих внутри очага. В ризосфере погибших дубов частота встречае-мости фит
офтор снижается (30 %). Вне ризосферы, на
открытых местах в центре и на границах очага частота вст
речаемости видов фитофтор 10–25 %. На расстоя-
нии 15, 500 и 3000 м от очага фитофторовые грибы не обнаруживаются. В этих почвах мы идентифицирова-ли 3
вида рода phytophthora: ph.gonapodyides petersen
& Buisman, ph.megasperma Dreсhsler и ph.europaea
E.M.Hansen & T.Jung . С наличием почвообитающих интро
дуцированных видов фитофтор (ph.cinnamomi,
ph.cambivora, ph.lateralis ) всегда ассоциировались вы-
сокие уровни гибели древостоев в лесных экосистемах . Последние исследования этиологии усыхания дубрав ( Brasier, 1996; Jung et Blaschke, 1996; Jung et al., 2000; vettraino et
al., 2002) выявили существование в поч-
ве достаточно разнообразного сообщества фитофтор, включающего до 10 видов, присутствующих как в здо-ровых, так и в усыхающих древостоях. Роль этих видов в патогенезе лесных экосистем только начинает прояс-няться. Наши данные, полученные при обследовании почв двух разных экосистем, позволяют сделать пред-положение об относительно недавней интродукции фитофтор в лесные экосистемы с инфицированным посадочным материалом из питомника, или каким-то иным путем при нарушении экосистемы. Но посколь-ку современные методы детекции фитофтор в почве не обладают большой чувствительностью, нельзя исклю-чить возможность существования этих видов в почвах ненарушенных фитоценозов, где плотность популяции могла быть ниже определяемых величин. Нарушение естественных ценозов, по-видимому, сопровождается резким повышением плотности популяции фитопато-гена, что увеличивает опасность его распространения.
Пути распространения фитофтор в почвах природ-
ных лесов подробно были изучены в Австралии и на Гавайских островах, где поражение лесных массивов этими грибами стало принимать угрожающие размеры (Erwin, Ribeiro, 1996). Патогены могут переноситься с инфицированной почвой на растительном материале, почвообрабатывающих орудиях, лесозаготовительной технике, на колесах транспортных машин, ботинках людей и копытах диких животных. На большие рас-стояния почвообитающие фитофторы могут распро-страняться с потоками воды в сезон ливневых дождей, а также вдоль дренажных канав.
Таким образом, наличие таких серьезных патоге-
нов, как фитофторовые грибы, в почвах лесных эко-систем, учитывая множество и разнообразие путей их переноса, а также потенциальную восприимчивость к ним многих лесных пород, представляет большую опасность. Необходимо было подробное изучение свя-зи экологических факторов с поведением патогена в почве и механизмами сохранения его популяций в не-благоприятные периоды в различных лесных фитоце-нозах.
Мы
изучали поведение популяции ph.cinnamomi в
почвах участка с посадками 40 различных лесных по-род на Абхазской научно-исследовательской лесной опытной станции (Веденяпина, 1985). Оказалось, что на небольшой площади, на исходно одних и тех же по своим физико-химическим свойствам почвах различ-ные фитоценозы формируют почвы как благоприятные дл
я развития популяции патогенна – кондуктивные, так
и супрессивные – подавляющие его. Например, почвы
фитоценоза с лавром благородным можно назвать кон-ду
ктивными: 100 %-ное поражение древостоя, высокая
смертность деревьев (78 %), максимальная плотность
популяции патогенна, быстрое и обильное образование бесполого спороношения, интенсификация процессов прорастания с образованием активно растущего мице-ли
я, 100 %-ная выживаемость на растительных остат-
ках. Примером супрессивных почв может служить поч-ва фитоценоза с криптомерией японской: заболевания растений нет, гриб из почвы не выделяется, мицелий, помещенный в почву, быстро гибнет и лизируется. На исследуемом участке формируются почвы разной сте-пени супрессивности, что может фундаментально ме-
Фитопатогенные грибы 171
нять структуру популяции, в частности ее жизненный
цикл: в фитоценозе с буком восточным наблюдалось образование ооспор, несмотря на то, что популяция, по нашим данным, гомогенна по типу совместимости А2
. ph.cinnamomi – гетероталличный вид и в норме для
образования половой стадии необходимо скрещивание мицелиев различных типов совместимости.
Нами было показано, что самофертильность, как и
общее изменение структуры популяции, обусловлена специфическими взаимодействиями с микроорганиз-мами конкретного фитоценоза. Образование ооспор, способность колонизировать растительные остатки в по
чве – основные экологические механизмы, спо-
собствующие выживанию и сохранению популяции в неблагоприятных условиях среды. Реакции фитофтор в сообще
стве почвенных микроорганизмов – важней-
шая часть экологии этих фитопатогенов. Мы пытались выяснить, как действуют виды фитофторовых в сис-теме организмов, их окружающих, т.е. колонизирую-щих их
пропагулы в почве, на примере двух видов –
Ph.cinnamomi и Ph .infestans (mont.)debary . Результаты
многочисленных опытов с различными почвами выяви-ли следующие закономерности: 1) мицелий и зооспо-рангии колонизируются преимущественно бактерия-ми и
актиномицетами, в то время как ооспоры – также
и микромицетами; 2) сравнение колонизации разных видов в одном и том же субстрате выявило видоспе-цифичность этого процесса; 3)колонизация пропагул в разных почвах приводит к различным результатам: от полного разрушения пропагулы до поддерживания жизнеспособности инокулюма на определенном уров-не; 4) процесс колонизации включает сукцессии мик-робных сообществ, причем основное воздействие на иноку
люм гриба оказывают сообщества – первичные
колонизаторы; 5) видовое разнообразие сообществ – колонизаторов гораздо ниже такового сообществ, вы-севаемых из соответствующего почвенного образца, и более того, виды-колонизаторы могут и не выделяться из почвенных образцов.
Таким образом, очевидно, какое огромное влия-
ние оказывает сообщество микроорганизмов на фун-кционирование популяций фитофтор в почвах. Любое нарушение экосистемы в результате антропогенного воздействия немедленно отражается на структуре и функциях микробных сообществ, из которых сооб-щества микромицетов наиболее показательны (Мар-фенина, 2005). А изменения баланса в сообществах, имеющих самый тесный контакт с пропагулами фито-патогена (вовлекающихся в микрозону с метаболита-ми пропагул или же колонизирующих их), может при-вести к резкому изменению численности, жизненного цикла и стратегии фитофтор, превратив их из более менее безобидного почвенного микромицета в страш-ную уничтожающую силу.
ЛитератураВеденяпина
Е.Г. phytophthora cinnamomi Rands в
почвах каштановых лесов Абхазии// Лесоведение.1985. №1. С.57–60.
Веденяпина
Е.Г. Популяция phytophthora cinnamo-
mi Rands в почвах различных фитоценозов// Миколо-гия и фитопатология.1985.Т19, в.4. С.322–329.
Марфенина О.Е. Антропогенная экология почвен-
ных грибов.2005.М., Медицина для всех. 195с.
Тугуши К.Л. Причины сокращения ареала каштана
съедобного на Кавказе// Лесоведение.1980.№6. С.59–66.
Brasier C.M. p
hytophthora cinnamomi and oak decline
in southern Europe//Annales des Sci.forestiers. 1996. v.53.p .347–358.
Erwin D.C., Ribeiro O.k. phytophthora Diseases
Worldwide. 1996. ApS press, St.paul.563p.
Jung T., Blaschke H. phytophthora root rot in declining
forest trees//phyton (Austria).1996.v .36.p .95–102.
Jung T., Blaschke H., Oswald W. Involvment of
phytophthora
species in Central European oak decline
and the effect of site factors on the disease// plant
pathology.2000.v .49. p .706–718.
vettraino A.M., Barzanti p., Bianko M.C., Ragezzi
A., Capretti p., Anselini N., vannini A. Occurrence of
phytophthora species in oak stands in Italy and their association with declining oak trees//forest pathology.2002.
v.32. p .19–28.
НЕКОТОРЫЕ ХАР АКТЕРИСТИКИ АССОЦИАЦИИ
ФИТОПАТОГЕННОГО ГРИБА Ver Ticillium daHliae
И mY cobacTerium sp . В СВЯЗИ С ПАТОГЕННОСТЬЮ ГРИБА
Власова Т.А., Агеева И.В., Колесникова В.Ф., Кузнецов Л.В.
Моск
овский Государственный Университет им. М.в. ломоносова,
Биол
огический факультет, каф. физиологии растений,
Москва
Verticillium dahliae kleb., является одним из самых
растространенных и вредоносных фитопатогеных гри-бов и вызывает увядание (вилт) многих растений. В моноконидиальных культурах V .dahliae , выделенных
из пораженных им растений хлопчатника (Gossypium
hirsutum), обнаружили ассоциированную с грибом бак-терию. эт
а бактерия была выделена и идентифициро-вана как mycobacterium sp.; были описаны некоторые
ее культурально–морфологические характеристики и обнаружены несколько различающихся форм. Колонии чистых и содержащих бактерии культур гриба различа-лись визуально. Однако микроскопическое исследова-ние не выявило явных различий ультраструктуры ми-целия гриба в чистых и смешанных культурах. В ряде
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 172
случаев обнаруживался тесный контакт гиф V .dahliae
и клеток mycobacterium , при этом не было признаков
лизиса клеточных стенок ни мицелия, ни бактерии, и
внутри гиф бактерии не наблюдались.
В смешанных культурах гриба и бактерии в жид-
кой среде заметно изменялась скорость роста как па-тогенного, так и непатогенного изолятов V .dahliae по
сравнению с чистыми культурами: выраженная сти-муляция роста и развития имела место при 26–28°° C, в то время как при 35–37°°C происходило резкое подавление роста. В смешанных культурах также со-кращался период прорастания конидий, причем у па-тогенного изолята V .dahliae это было более выражено,
чем у непатогенного. Интенсивное развитие и большее ускорение прорастания конидий патогенного изолята в смешанных культурах можно объяснить предполо-жительно более активным использованием этим гри-бом метаболитов бактерии, в частности, свободных жирных кисло
т и аминокислот. это согласуется с теми
ранее полученными данными, что патогенный изолят V .dahliae в чистой культуре более активно выделял и
использовал собственные экзометаболиты, в том чис-ле свободные жирные кислоты, повышенное содержа-ние которых во внеклеточной среде существенно для стабилизации мембранных систем клеток.При инфицировании нескольких сортов хлопчат-
ника чистыми и смешанными культурами патогенного изолята V .dahliae симптомы заболевания были прак-
тически одинаковыми. В случае инокуляции корней хлопчатника смешанной культурой гриба и бактерии инкубационный период заражения мог сокращаться по сравнению с инокуляцией чистой культурой V .dahliae .
Возможно, это является следствием стимуляции бакте-рией разрастания гриба в растении. Однако методами световой и электронной микроскопии не было выяв-лено видимых различий в процессе проникновения гриба в клетки корня растения и в ультраструктуре ми-целия внутри тканей корня. В растительных клетках, содержащих гифы гриба, бактерий не наблюдалось.
Известно, что в естественных условиях заболева-
емость хлопчатника вилтом при температурах выше 35°C значительно уменьшается. Возможно, что обна-
руженное в опытах ингибирование роста V .dahliae под
действием myc
obacterium является одним из факторов
снижения заболеваемости растений при высоких тем-пературах.
Таким образом, отношения в изучаемой ассоциации
могут расцениваться как симбиотические, но представ-ляет интерес также дальнейшее изучение myc
obacterium
как потенциального агента биоконтроля V .dahliae .
ВСТРЕЧАЕМОСТЬ ГРИБОВ РОДА FuSarium НА БОДЯКЕ (CIRsIUM spp.)
Гагкаева Т.Ю., Бильдер И.В., Берестецкий А.О.
вс
ероссийский институт защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
Грибы рода Fusarium являются гемибиотрофными
патогенами, обитающими на различных растениях. Многие виды этого рода наносят значительный ущерб сельскохозяйственным растениям, снижая качество и количество получаемого урожая. Нередко они поража-ют и дикорастущие, в том числе и сорные растения. Сорняки, в силу своей распространенности и длитель-ного периода вегетации, могут служить резерваторами инфекции культурных растений. С другой стороны, специализированные формы Fusarium spp. могут быть
использованы для биологической борьбы с нежела-тельной растительностью. Цель проведенных исследо-ваний
– собрать и описать грибы рода Fusarium, вызы-
вающие пятнистости листьев, гнили стеблей, соцветий и к
орней бодяка полевого – одного из наиболее вредо-
носных сорных растений на территории России.
Сбор растений с симптомами заболеваний произ-
водился путем маршрутных обследований (2003–2006 гг.). На территории Европейской части РФ сборы рас-тений проводились в Северо-западном (Ленинградская и Псковская области) и Северо-Кавказком регионах (Краснодарский и Ставропольский края, республики Северная Осетия и Адыгея, Ростовская область), Ор-ловской, Воронежской и Самарской областях, а также на Украине, в Молдове и юго-западной части Финлян-дии. На азиатской территории РФ сборы велись в Ха-баровском и Приморском краях, Кемеровской и Ново-сибирской областях, а также на территориях Киргизии и северо-запада Китая.
Выделение микромицетов проводили из свежих
или засушенных частей растений на агаризованной питательной среде после поверхностной стерилизации ткани. Для идентификации использовали следующие определители: Gerlach, Nirenberg (1982), Nelson et al. (1983), Leslie, Summerell (2006). Коллекция штаммов грибов хранится в лаборатории микологии и фитопа-тологии ВИЗР.
Коллекция чистых культур грибов, выделенных из
различных частей бодяка собранного на европейской территории, насчитывает 183 штамма 15 видов рода fusarium.
Наибольшее количество штаммов относят-
ся к
видам f. avenaceum (28.9 %), f. sporotrichioides
(20.2 %) и f. solani sensu lato (13.1 %). Встречае-
мость
остальных видов колебалась от 1 до 7.1 %: f.
acuminatum, f. cerealis, f. culmorum, f. dimerum, f.
heterosporum, f. equiseti, f. oxysporum, f. semitectum, f.
sambucinum, f. tricinctum, комплекс грибов G. fujikuroi
(f. proliferatum, f . nygamai).
Коллекция чистых культур, собранных с бодяка рас-
тущего на азиатской территории, состоит из 63 штам-мов 11 видов грибов. Доминирующим видом является f. sporotrichioides
с частотой встречаемости – 26.8 %.
Фитопатогенные грибы 173
Также с высокой частотой встречаются f. semitectum
(14.3 %), f. equiseti (14.3 %), f. acuminatum (12.5 %)
и f. solani s.l. (10.6 %). Виды f. avenaceum, f. cerealis,
f. heterosporum, f. oxysporum встречались с частотой
3–7 %.
Из корневой системы бодяка с некротическими
пятнами и потемнением сосудов, приводящими к увя-
данию растений выделены следующие виды: F . avena-
ceum, F . equiseti, F . nigamai. F . oxysporum, F .solani s.l., F .
sporotrichioides. Из соцветий бодяка выделены виды F .
acuminatum, F . avenaceum, F . equiseti, F . semitectum, F . sporotrichioides. Впервые на территории России выяв-
лены виды
грибов – F . nygamai (Ставропольский край)
и F . cerealis (Дальний Восток, Северная Осетия).
Вредоносность грибов Fusarium для дикорастущих
многолетних растений изучена недостаточно. Визуально, наличие многочисленных пятнистостей листьев и стеб-лей фузариозной этиологии не оказывают существенно-го влияния на высоту и мощность растений. Для корне-отпрысковых видов снижение семенной продуктивности вряд ли может существенно снизить распространенность растений. Вероятно, наиболее перспективными для сни-жения стеблестоя растений, являются заболевания под-земных органов растений. Способность грибов рода Fusarium синтезировать фитотоксины также может быть
использована для ограничения численности сорной рас-тительности. Однако во всех случаях применения аген-тов биоконтроля или их метаболитов проблемными оста-ются вопросы их хозяино-специфичности.
Исследования выполнены при частичной подде-
ржке
ЕС (проект № fOOD-CT-2003-001687) и МНТЦ
(проект № 2939).
К ВОПРОСУ О СПЕЦИАЛИЗАЦИИ AsCOCHYTA sONCHI (sACC.) GROvE
Гасич Е.Л., Хлопунова Л.Б., Левитин М.М.
вс
ероссийский научно-исследовательский институт защиты растений (вИзР),
С.-Петербург, Пушкин
Бодяк полевой (Cirsium arvense (L.) Scop.) и осот
полевой (Sonchus arvensis L.) являются многолетними корнеотпрысковыми сорняками вредоносными в посе-вах многих сельскохозяйственных культур, как в нашей ст
ране, так и за рубежом. эти виды относятся к труд-
ноискоренимым при использовании обычных агротех-нических и химических методов борьбы, поэтому боль-шое внимание уделяется разработке биологического метода их контроля при помощи фитопатогенных гри-бов. В качестве возможных агентов биоконтроля этих сорняков изучались следующие фитопатогенные гри-бы: Stagonospora cirsii (Berestetskiy et al., 2005; Gasich, Berestetskiy, 2006; Berestetskiy et al., 2007), Septoria cirsii (Berestetskiy et al., 2007), Ascochyta sonchi, A. tussilagi-nis (Berestetskiy, Smolyaniniva, 1998; Berestetskiy, 2000), Sc
lerotinia sclerotiorum (Brosten, Sands, 1986), phomopsis
cirsii (Leth, Andreasen, 2007), Alternaria cirsinoxia (Green, Bailey, 2000, 2001; Green et al., 2001; Levitin et al., 2007; Gannibal, Levitin, 2007). В наших исследованиях был выявлен некоторых микогербицидный потенциал у 2-х штаммов Ascochyta sonchi: м-8 (выделен А.О. Берестец-ким из бодяка полевого) и 17.49
3 (выделен Е.Л. Гасич
из осота полевого) (Gasich et al., 2007). Одним из важ-нейших качеств, которым должны обладать фитопато-генные грибы, используемые как микогербициды для подавления сорных растений, является их безопасность для окружающей среды и в первую очередь для эконо-мически значимых растений. Изучена специализация штаммов м-8 и 17.49
3 Ascochyta sonchi для 52 видов
растений из 49 родов, 25 семейств. Инокулировали по 3 растения каждого вида. На 4 листа растения наносили по 4 капли споровой суспензии. С одной стороны лис-товой пластинки предварительно делали иглой 2 укола, вторая половина листа оставалась неповрежденной. Инокулированные растения помещали на 48 часов во влажную камеру. Оба штамма поражали Callistephus chinensis, Tussilago farfara, Cirsium vulgare, C. arvense, Lycopersicon esculentum, Lagenaria siceraria, Ocimum basilikum. Отмечены некоторые различия в приуро-ченности к тем или иным растениям-хозяевам, так, например, штамм 17.49
3 поражал Solanum tuberosum,
но не поражал Cucurbita pero, Tagetes erecta и Daucus sativus и в меньшей степени поражал Lagenaria sicer-aria и Cirsium arvense. В большинстве случаев штаммы приводили к развитию некрозов только на поврежден-ных и стареющих тканях растений. На листьях Lage-naria siceraria и Lycopersicon esculentum при инокуля-ции их штаммом м-8 симптомы развивались не только в местах повреждения, но также и на неповрежденной листовой пластинке. В лабораторных условиях изуче-на специализация штаммов м-8 и 17.49
3 для 3-х неде-
льных растений
Glycine max, Helianthus annuus, zea
mays, Triticum aestivum, Hordeum vulgare, Solanum tu-berosum, Lycopersicon esculentum, Ocimum basilikum. Растения опрыскивали споровой суспензией до появ-ления сливающихся капель. После инокуляции расте-ния помещали на 48 часов во влажную камеру. Штам-мы м-8 и 17.49
3 в сильной степени поражали Ocimum
basilikum, Helianthus annuus, zea mays, в несколько
меньшей степени – Glycine max и Lycopersicon escul-entum. Triticum aestivum, Hordeum vulgare и Solanum tuberosum поражались в очень слабой степени. Таким образом, штаммы Ascochyta sonchi, выделенные из бодяка и осота не является узкоспециализированным, хотя характеризуется некоторой специфичностью, из-бирательно поражая отдельные виды ряда семейств (Asteraceae, Apiaceae, Lamiaceae, Cucurbitaceae, Rosa-ceae, Solanaceae
и poaceae). Вследствие способности
Ascochyta sonchi поражать экономически значимые растения применение его как микогербицида имеет ог-раниченные возможности. Работа выполнена при под-держке гранта МНТЦ 2939.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 174
Доступность сырья наркотикосодержащих расте-
ний способствует росту наркобизнеса. В научной ли-
тературе имеются сообщения о разработках средств биоконтроля для борьбы с незаконными посевами P .
somniferum L.:
в Европе и Италии (Buckingham – GR,
pecora – p, Rizza – A, 1983), в США (Hebbar, Lums-
den, Levis
at all., 1998; Connick, Daigle, pepperman at
all., 1998; Bailey, Apel-Birkhold и др., 2000). Однако в дальнейшем не было сообщений об успешности и селек
тивности (Bailey, 1995; keates, kostman, et al.,
2000) данных методов (США) к мишенному объекту. В России, по данным Коломбет Л.В. (2007), начат поиск потенциа
льных агентов биоконтроля. В ИГэБР АН
РУз разработан уникальный, не имеющий аналогов в мире, эффективный в расширенном интервале темпе-ратуры и влажности, без создания дополнительного увлажнения, экологически безопасный метод биокон-троля незаконных посевов мака опийного и маслич-ного
с использованием штаммов – киллеров гриба P .
papaveracea, выделенных в феврале 1991 года с. н. с. Глуховой Л. А Для оценки на экологическую безопас-ность
использовали аскомицет (штамм – киллер С-6-3)
Pleospora papaveracea (De Not.) Sacc., анаморфа Den-
dryphion penicillatum (Corda) fries, синонимы: brachy-
cladium penicillatum c
orda, dendryphion papaveris
(Sawada) Sawada, Helminthosporium papaveris Sawada .;
инертные носители для приготовления формул гриба; сорта и биотипы мака культурного из Самаркандской и Сурхандарьинской областей Узбекистана, из Тад-жикистана, Киргизии, 22 провинций Республики Аф-ганистан, России, Бирмы; дикорастущие растения из семейства Рapaveraceaе – Papaver arenarium
Bielb.;
Hypecоum pendulum L.; Papaver hybridum; roemeria re-
fracta (Stew.) ; Papaver pavonium Schrenk; P . rhoeas L.;
chelidonium
majus L.; растения из родов coridalis, Fu-
maria и Papaver agremone из рода papaver L.; близко-
родственные виды; 239 видов экономически значимых,
лекарственных, декоративных и сорных растений из 61
– го семейства, исследованных в контролируемых
условиях фитотрона в Узбекистане и 52 вида растений их 24 семейств, протестированных к патогену в естес-твенных условиях Кыргызской Республики.
Семена культур получены из ВИРа, ботанического
сада, Уз НИХИ, собраны в природе и приобретены на рынке, при исследовании древесных и кустарниковых культур использовали молодую поросль. Перед посе-вом в гончарные глиняные горшочки (вазоны) семена обрабатывали системным протравителем из группы триаз
олов – раксилом (фирма Байер, Германия) – из
расчета 1.5 г/кг семян. В стадии 3 – 5 листьев растения испытуемых культур инфицировали методом опрыс-кивания микогербицидной композицией из пульвери-затора до полного смачивания листьев и помещали в оптимальные для проявления болезни условия.. На 1 м
2 площади с растениями расходовали 50 мл суспен-
зии, с титром 1 х 10 6 жизнеспособных конидий гриба.
Контролем являлись незараженные растения культур и зараженные растения мака. Учет пораженности и ми-кологический анализ инфицированных тканей прово-дили на
5 – й, 10 – й и 25 –й дни после инокуляции и в
конце вегетации.
Все сорта и биотипы мака культурного поражались
в сильной степени, дикорастущие растения из семейс-тва p
apaveraceae – Roemeria refracta (Stew.)DC, papaver
pavoninum Schrenk papaver rhoeas L – в слабой степе-
ни
– до 5 – 8 % некрозов листовой пластинки.
Все 239 видов растений из 61 – го семейства в
Узбекистане и и 52 вида растений из 24-х семейств в Кыргызской Республике проявили полную иммун-ность,
контрольные растения мака погибли на 3 – 4
день после инокуляции, причиной гибели послужил гриб P . papaveracea, реизолированный из эндоткани
растений. Контроль исследованных растений оста-вался здоровым. Таким образом, была подтверждена селективность и экологическая безопасность агента к широкому кругу растений.ОПРЕДЕЛЕНИЕ эКОЛОГИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ АСКОМИЦЕТА
PleoSPora PaPaVeracea (DE NOT.) sACC. МЕТОДОМ ЦЕНТРИФУЖНОГО
ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКОГО СКРИНИНГА К ШИРОКОМУ КРУГУ Р АСТЕНИЙ
Глухова Л.А., Адукаримов А.А.
Институт генетики и экспериментальной биологии растений
Академии Наук Республики Узбекистан,
Ташкент, Узбекистан
ВНУТРИВИДОВОЙ ПОЛИМОРФИЗМ ВОЗБУДИТЕЛЯ Р АКА КОРЫ КАШТАНА
(crYPHonec Tria ParaSiTica (MURR.) b ARR.) НА СЕВЕРНОМ КАВКАЗЕ
Гринько Н.Н.
ГНУ «Адлерская опытная станция» вИР им. Н.И.вавилова,
Сочи
К числу факторов, обусловливающих деградацию
и усыхание лесов каштана посевного ( castanea sativa
Mill.) на Северном Кавказе, относится прогрессирую-щее развитие Cryphonectria parasitica (syn. endothia
parasitica
(Murr.) And. & And.). Гриб, инфицируя мо-
лодые ветви и стволы, вызывает «ржавчинность» и
Фитопатогенные грибы 175
распад гладкой коры. Дальнейшее паразитирование в
камбии бледно-бурого «веера» мицелия способствует некротизации, гипертрофии, разрушению и отслаива-нию пораженных тканей, что приводит к суховершин-ности и увяданию деревьев.
К настоящему времени структура природных по-
пуляций С. parasitica достаточно подробно изучена в
различных регионах
мира (Muсoz, Gobos, 1991; peever
et al., 2000; Heiniger, Schmid, Rigling, 2001; Langmeer, 2003). В нашей стране, несмотря на высокую вредо-носность заболевания, подобные исследования прак-тически не проводились (Придня, 2005).
В 2005–2007гг. нами впервые дана оценка внутри-
видового разнообразия c.
parasitica на основе анализа
инфекционного материала, собранного в 385 географи-ческих точках ареала каштана посевного в Кавказском биосферном заповеднике, Сочинском национальном парке и лесхозах причерноморской зоны, в Краснодаре. В соответствии с районами выборок, расположенных с юга на север и варьирующих по высоте над уровнем моря, оценив
али 5 популяций патогена – Адлерскую
(с. Бестужевка, Вардане – Верино и Липники – подно-жие горы Сахарная головка), Сочинскую (с. Каштаны, склон горы Большой Ахун и Ореховские водопады), Краснополянскую (с. Аибга, Ермоловка и Кепша), Ла-заревскую (с. Солохаул, Тгагапш и Солоники) и Крас-нодарскую (территория «зеленой» зоны жилого масси-ва Кубанского ГАУ). Изоляты гриба в чистую культуру выделяли с колоний, полученных при инкубировании стерильных кусочков пораженной коры (1,5–2мм) на кар
тофельно-глюкозном агаре. Культурально – мор-
фологические признаки 3395 изолятов учитывали на 9 сут. роста при t= 24–26
oС на КГА. Описание колоний
проводили по Неегарду (Дьяков, 1998), а пигмента-ции
– по шкале Бондарцева в модификации Кутафье-
вой (2003). Показатели внутривидового разнообразия и степень сходства популяций определяли по методике Животовского (1982). Для тестирования изолятов c.
parasitica
на вегетативную совместимость использова-
ли методику (Дьяков, Долгова, 1995). Интенсивность ингибирования роста колоний сращиваемых изолятов рассчитывали по формуле (Heuvel, 1970).
Исследования выявили многообразие цветовых от-
тенков изолятов C. parasitica с преобладанием колоний оранжевой и желтой пигментации. Для популяционно-го анализа, исходя из четко различающихся между со-бой тонов, нами выделено 6 морфотипов: оранжевый ж7 (aur), рыжеватый з5 (ruf), золотисто-желтый г3 (lut), охряный и5 (ochr), терракотовый з6 (test), беловатый в5 (alb). Состав и соотношение морфотипов варьировало в зависимости от анализируемых популяций, но мак-симальное их содержание представлено в Адлерской. Популяция характеризовалась более высоким средним числом (µ=4,79±0,061) и долей редких морфотипов (h=0,202±0,005). Доминировали морфотипы aur и ruf с част
отой встречаемости соответственно 47 и 21 %, а
к более редким относился alb, который не обнаружен в других популяциях. В Сочинской популяции встреча-лось 5 морфотипов, а в Краснополянской и Лазаревс-кой
– по 4. Более северная Краснодарская популяция существенно отличалась от южной Адлерской по сред-нему числу (µ=2,75±0, 046) и доле редких морфотипов (h=0, 083±0,015).
В соответствии с характером роста колоний c.
parasitica
дифференцированы пушистые, шерстистые
и бархатистые морфотипы. В популяциях превалиро-ва
ли aur – шерстистые морфотипы, средней частотой
встречаемости отличались lut – пушистые, а споради-чески фик
сировались – ochr и alb – бархатистые.
Нами установлена высокая отрицательная корре-
ляционная зависимость между пигментацией анали-зируемых морфотипов c.
parasitica и количеством
формир
ующихся пикнид (r = – 0,969±0,121), которая
описывается уравнением регрессии У= 94,9–15,5х; где У
– количество пикнид (шт./см2), х – окраска морфо-
типа. Максимальным и минимальным продуцировани-ем отличались aur и alb морфотипы, формирующие в среднем 79–83 и 2–6 шт./см
2 пикнид соответственно.
Сравнительный парный анализ средних час-
тот выделенных морфотипов показал высокий уро-вень сходства Адлерской и Сочинской популяций (r=0,909±0,012), а
низкий – Адлерской и Краснодарс-
кой (r=0,641±0,017). По нашему мнению, на гетероген-ность структуры популяций c.
parasitica оказывают
влияние абиотические факторы внешней среды, воз-растной полиморфизм каштана посевного в смешан-ных хвойно-широколиственных формациях и наличие толерантных к патогену генотипов castanea
sativa Mill.
var. gregarius (Придня, 2005). Общеизвестно, что сме-
шанные посадки морфологически различных видов, увеличивая расстояние между восприимчивыми рас-тениями, ограничивают механическое перемещение инокулюма и способствуют генетической изоляции патогена. В частности, формирование Краснодарской популяции c.
parasitica происходило не в естествен-
ных лесах каштана посевного, а в монокультурных на-саждениях, представленных 165 деревьями.
Природным маркером генетической гетерогенности
популяций фитопатогенных грибов считается вегета-тивная несовместимость изолятов. Многолетний пов-семестный анализ структуры популяций C. parasitica на наличие вегетативно совместимых групп обуслов-лен поиском гиповирулентных изолятов (Gobbi, Locci, 1989; Geli, 1992; Bisseger, Ridling, Heiniger, 1997; peever
et al., 2000; Liu et al., 2002), представляющих
практический интерес в биологическом контроле развития па
тогена (Mc Donald, fulbright, 1991; Shain,
Miller, 1992; Milgroom, 1995; Celiker, Onoglur, 2001; Radуcz, 2002). Парное сращивание на КГА в чашках Петри 710 изолятов, выделенных нами из различных популяций C. parasitica, выявило вегетативную не-совме
стимость у 98,3 %. Наблюдался бордюр или от-
та
лкивание – отсутствие мицелия на границе между
изолятами и барраж – линия из мертвых клеток в зоне контакта двух колоний с формирующимися пикнида-ми. Бор
дюр – замедление роста колоний изолятов к
центру чашки Петри, проявлялся слабым (W=0–10 %), средним (N=10–30 %) и сильным (S>30 %) уровнем антагонизма. Существенно не различаясь по популя-циям, степень антагонистического влияния находилась
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 176
в зависимости от морфотипов: ruf – ruf (W), aur – ruf
(N), aur – aur (S). Барраж, с варьирующей шириной и конфигурацией полос несовместимости, фиксировал-ся при сокультивировании изолятов всех морфотипов в
различных комбинациях. Совместимыми – слия-
ние колоний и отсутствие разграничительных линий, ок
азались 12 изолятов, составивших 1,7 % от числа
анализируемых. Сращивание их в 144 комбинациях выявило реакцию совместимости только в парах изо-ля
тов равнозначных морфотипов (lut – lut, ochr-ochr,
test-test и alb-alb). В комбинациях слабопигментиро-ва
нных alb – изолятов с более интенсивно окрашен-
ны
ми – lut, ochr и test наблюдался барраж. Исходя
из аналогии о сопряженности анормальной морфо-логии изолятов C. parasitica с гиповирулентностью (Anagnostakis, 1992; Bisseger, Heiniger, 1997), можно пр
едположить наличие в геноме alb – морфотипов,
отличающихся пониженной пигментацией и спору-ляцией, двухцепочной РНК. Вместе с тем, получен-ные нами предварительные данные, согласующиеся с литературными сведениями (Cortesi, Milgroom, 1998; Juhasova, Bornadoviиova, 2001; Double, Mac Donald, 2002), позволяют считать, что успешная трансмиссия гиповируса в вирулентные изоляты маловероятна, пос-кольку ограничивается вегетативной несовместимос-ть
ю, спорадической встречаемостью alb – морфоти-
пов в природной популяции C. parasitica и характером пространственного размещения каштана посевного в смешанных с достаточно большим разнообразием древесных пород лесах Северного Кавказа.
ФИТОПАТОГЕННЫЕ ГРИБЫ И БОЛЕЗНИ ЧЕЛОВЕКА
Данилова Т.А., Левитин М.М., Мироненко Н.В.
Санкт-Петербургский государственный технологический институт
вс
ероссийский институт защиты растений,
Санкт-Петербург
Среди фитопатогенных микроорганизмов известны
грибы, способные не только поражать растения, но и вызыва
ть микозы и микотоксикозы человека. это, пре-
жде всего, виды claviceps, Fusarium, alternaria, Peni-
cillium, asper
gillus. Одним из первых заболеваний че-
ловека, вызванных фитопатогенами, было отравление спорыньей
– эрготизм. Склероции c. purpurea содер-
жат высокотоксичные алкалоиды (эрготоксин, эргота-мин, эргометрин) и биогенные амины (гистамин, тира-мин и
др.). эти соединения могут поражать нервную
систему (судорожная форма) или нервно-сосудистый аппарат (гангренозная форма). Гриб F . sporotrichi-
oides известен как возбудитель фузариоза зерновых культур. В 1932 г. впервые описано заболевание лю-дей
– алиментарно-токсическая алейкия. В патогенезе
алиментарно-токсической алейкии преобладают деге-неративные изменения клеток костного мозга, быстро приводящие к его аплазии с развитием лейкопении, анемии и тромбоцитопении, иммунодефицитного со-стояния и сепсиса. Причиной болезни является зерно, зараженное F . sporotrichioides. С высокой частотой
встречаемости это заболевание проявилось в 40-е годы в западной Сибири, на Алтае и Казахстане. Грибы р. Fusarium могут проникать непосредственно в органы
человека, размножаться, вызывать оппортунистичес-кие микозы и продуцировать микотоксины. Особую опасность представляю F . oxysporum и F . solani. В час-
тности, экспериментально показано, что одни и те же штаммы F . oxysporum вызывают увядание (вилт) тома-
тов и гибель мышей при инъекции микроконидиями гриба. Виды alternaria, вызыв
ающие поражение зла-
ков, пасленовых, масличных, плодово-ягодных и дру-гих культур, могут быть причиной микозов уха и око-лоносовых пазух у человека. В сельскохозяйственном производстве и на биотехнологических микробиоло-гических предприятиях возросло число аллергических заболеваний, вызванных грибами alternaria, c
ladospo-
rium, e
picoccum, aspergillus, Penicillium.
Поскольку первичным источником распростра-
нения опасных для человека фитопатогенных грибов являются больные растения и сельскохозяйствен-ная продукция, необходимо обратить особое внима-ние на оздоровление фитосанитарной обстановки на сельскохозяйственных посевах. В настоящее время она неблагополучна. Спорынья распространена пов-семе
стно. На отдельных полях до 5 % растений ржи
поражено спорыньей. В период созревания озимых зерновых культур, в годы с частыми осадками и обиль-ными росами, на колосьях развиваются сапротро-фы
– Alternaria, Cladosporium, Aspergillus, penicillium.
В отдельные годы до 100 % семенных партий заспоре-ны с
апротрофными видами грибов. Ежегодно до 25 %
зерна пшеницы, ячменя, ржи и овса заражены токси-генными
грибами р. fusarium и Alternaria. Из сельско-
хозяйственных культур, почвы, с воздушными потока-ми, с насекомыми грибы попадают в растительную и животную продукцию, а затем в организм человека. При этом особенно подвержены грибным инфекциям люди, страдающие иммунной недостаточностью или иммуннодефицитом.
Совершенно очевидно, что необходимо проведение
углубленных работ по выяснению путей проникно-вения к человеку из окружающей среды опасных для него фитопатогенов, условий развития их в челове-ческом организме и механизмов взаимоотношений в системе фит
опатогенные грибы – животные и человек.
это должны быть комплексные исследования специа-листов разного профиля. Но, в первую очередь необ-ходимо понять, насколько универсальны возможности различных изолятов одного вида гриба в проявлении
Фитопатогенные грибы 177
Начало нынешнего века характеризуется все нарас-
тающей дестабилизацией фитосанитарной ситуации в
агроландшафт
ах. это явление связано со структурны-
ми и качественными изменениями в агроценозе, при которых малозначимые виды становятся экономичес-ки значимыми.
В Краснодарском НИИСХ им. П.П.Лукьяненко ис-
следованиями по изучению популяции возбудителей гнилей в Краснодарском крае занимаются с семидеся-тах годов, а с 1998года предпринята попытка изучения популяции в Западном Предкавказье. Для этого в 1998–2006 годах были проведены маршрутные обследова-ния посевов озимой пшеницы в 64-х районах. Работа выполнялась совместно с Краснодарской, Ставрополь-ской краевыми и Ростовской областной станциями за-щиты растений. Отбор образцов проводили дважды за сезон: в фазе кущения и в фазе налива зерна.
В результате многолетнего микологического мони-
торинга из растений озимой пшеницы были выделе-ны и идентифицированы 40 видов и разновидностей грибов. В таксономическом положении выделенные грибы представляют два царства: грибоподобные ор-ганизмы
(Chromista) и настоящие грибы (fungi), три
отдела: Oomycota, Ascomycota, zygomycota и группу
Anamorpha fungi (mitosporic fungi). Наиболее пред-ставленной группой по трофности, от выделенных грибов, оказались некротрофы. Нами установлено, что в условиях Западного Предкавказья грибы из рода Rhizoctonia, вызывающие гниль озимой пшеницы име-ют тенденцию к нарастанию в соотношении с другими патогенами. Грибы из р. Rhizoctonia представлены не-ско
лькими разновидностями: Rhizoctonia solani kuhn.
Teleomorph – Thanatephorus cucumeris (A.B. frank) Donk, Rhizoctonia cerealis van der Hoeven. Teleomorph –
Ceratobasidium cereale D. Murray & L.L. Burpee и Rhizoctonia oryzae ; Rhizoctonia zeae . С пораженных гнилью растений озимой пшеницы Rhizoctonia была выделена после всех изучаемых предшественников, за исклю
чением черного пара – где они небыли выде-
лены. Так, в Ростовской области по предшественнику озимая пшеница в зависимости от года и района час-тота встречаемости этих грибов в общем комплексе возб
удителей гнилей колебалась от 1 до 19,5 %. По
предшественнику горох – от 0,5 до 5,5 %, а по пред-шеств
еннику кукуруза от 3 до 13 %.
Грибы рода Rhizoctonia выделялись нами из расте-
ний озимой пшеницы, начиная с фазы прорастания и до фазы полной спелости зерна. При этом в фазе куще-ния грибы из этого рода по отношению к другим воз-будителям гнилей занимали, в зависимости от года, от 0,5 до 16
%, а в фазе налива зерна от 17,5 до 38,5 %.
Грибы из рода Gaeumannomyces – представлены
Gaeumannomyces graminis var. tritici и Gaeumannomy-
ces graminis var. avenae.
Фузарии широко представленны в патокомплексе
гнилей о
собенно в фазе кущения – трубкования. Не-
обходимо отметить, что в последние годы отмечает-ся тенденция к увеличению частоты встречаемости и процентного соотношения таксикогенных видов этого рода: Fusarium graminearum, F . verticillioides (F . monili-
forme) и F . sporotrichioides.
Многолетний фитоманиторинг и систематизация
полученных данных позволили провести фитосани-тарное картирование и обозначить в пределах террито-рии Западного Предкавказья различные по значимости и вредоносности зоны.межорганизменного паразитизма и связано ли это с генетической специализацией патогенов. Ответить на эти вопросы помогут в первую очередь молекулярные исследования.
ГНИЛИ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ В ЗАПАДНОМ ПРЕДКАВКАЗЬЕ
Жалиева Л.Д.
Государственное научное учреждение,
красно
дарский НИИСХ им. П. П. лукьяненко,
краснодар
СР АВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ Р АЗНЫХ ВИДОВ ГРИБОВ
ИЗ РОДА Fu Sarium ПО ПАТОГЕННЫМ СВОЙСТВАМ
Жемчужина Н.С., Киселева m.И., Коваленко e.Д.
всероссийский НИИ фитопатологии,
Московская область, п/о Большие в яземы
Проведены исследования по изучению патоген-
ных свойств различных видов и штаммов грибов рода fusarium
– возбудителей корневой гнили ячменя и пше-
ницы. Материалом для исследований служили следу-ющие виды, вызывающие корневую гниль зерновых: fusarium
gibbosum, fusarium lateritium, fusarium nivale,
fusarium sambucinum. Патогенные свойства грибных штаммов определяли на проростках ячменя сортa За-зерский 85 и проростках пшеницы сорта Немчиновс-кая 24. Результаты исследований показали, что между
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 178
штаммами фузариумов имеются как межвидовые, так
и внутривидовые различия по патогенности. Наиболь-шей патогенностью характеризовались штаммы вида f.nivale. Сре
ди штаммов f.nivale и f.lateritium наблю-
дались внутривидовые различия по патогенности. Так,
штаммы f.nivale p-2003 и МЗ-7-06 ингибировали
рост корней и колеоптилей ячменя на величину около 30
%, корней и колеоптилей пшеницы – на 5,3–21,6 %.
Штамм f.nivale M-2 оказался наиболее вредоносным
из числа исследованных – обработка семян суспензи-ей спор этого штамма уменьшала длину колеоптилей и к
орней ячменя на 55,4 % и 91,8 % соответственно,
длину колеоптилей и корней пшеницы – на 31,6 % и на 88,7 %. Штаммы f.lateritium К 1491 и МЗ-9-06 ин-
гибирова
ли рост проростков ячменя на 52,9–62,7 %, практически не влияя на проростки пшеницы, в то время как штамм МЗ-19/2 в данном опыте не проявил патогенных свойств. В большинстве случаев наблю-далось более сильное ингибирование роста корней по сравнению с надземной частью, что также вполне объ-яснимо, т
ак как гриба рода fusarium являются патоге-
нами, поражающими в основном корневую систему растений. Следует отметить, что количество образуе-мых штаммами спор не коррелировало с патогеннос-тью. Интенсивно
спорулирующие штаммы f.gibbosum
не проявили патогенных свойств, также как и штамм f.lateritium МЗ-19/2,
дающий 1,6х106 спор на милли-
литр
суспензии, тогда как штаммы f.lateritium К 1491 и
МЗ-9-06, образующие 0,5–0,6 х 104 спор, существенно подавляли рост проростков ячменя.
ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ ГРИБА uSTilaGo zeae (bEskM.)
UNGER В МЕЖ ВЕГЕТАЦИОННЫЙ ПЕРИОД КАК ИСТОЧНИК
ИНФЕКЦИИ ПУЗЫРЧАТОЙ ГОЛОВНИ КУКУРУЗЫ
Жердецкая Т.Н., Жуковская А.А.
РУП «Институт защиты растений»,
п. Прилуки, Республика Беларусь
Гриб ustilago zeae является возбудителем пузырча-
той головни кукурузы. По принятой систематике вид ustilago
zeae (Beskm.) Unger относится к царству гри-
бов (m ycota ), отделу – настоящие грибы ( eumycota ),
классу
– базидиомицеты (basidiomycetes ), подклассу –
телиобазидиомицеты (Teliobasidiomycetidae), поряд-
ку
– головневые (ustilaginale s), семейству – устилаги-
новые (ustilaginaceae ), ро ду – устилаго (ustilago).
Показано биологическое значение формирования
сорусов гриба ust ilago zeae (Beskm.) Unger и структур
(отдельные скопления спор, механическое скопление сп
ор – комочков ) телиоспор в прорастании и сохранении
их жизнеспособности в межвегетационный период.
Впервые определены условия и способы перези-
мовки гриба в агроценозах, а также влияние доми-нирующих абиотических факторов на прорастание телиоспор. Отмечено явление диморфизма прораста-ния части телиоспор базидиями или инфекционными гифами. Выявлены морфологические формы прорас-тания телиоспор типичными 4-х клеточными базиди-ями с соединенными между собой базидиоспорами и отдельными базидиоспорами, а также их размеры в зависимости от гидротермических условий проращи-вания.
Впервые установлен первичный источник инфек-
ции пузырчатой головни кукурузы в виде пораженных растительных остатков (комочки телиоспор в головне-вых вздутиях), сохраняющихся на полях культуры пос-ле перезимовки.
НОВЫЕ ГР АНИЦЫ АРЕАЛОВ МАЛОИЗВЕСТНЫХ ГРИБОВ,
ВЫЗЫВАЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЯ ХВОЙНЫХ ПОРОД
Жуков Е.А., Жуков А.М.
вс
ероссийский НИИ лесоводства и механизации лесного хозяйства,
Пушкино, Московская обл.
На основании материалов региональных лесопато-
логических обследований и лабораторного микологи-ческого анализа образцов болезней древесных пород установлены факты расширения границ ареалов мало-известных для России фитопатогенных грибов, вызы-вающих заболевания хвойных пород в естественных и искусственных насаждениях (Жуков А.М., Жуков Е.А., Гниненко Ю.И., 2004, 2006, 2007). Существует опас-ность расширения на территории России ареала пато-генного гриба mycosphaer
ella dearnessii Barr. (=Scirria
acicola Siggers.) и его анаморфы lecanosticta acicola
(Thum)H.Syd. Гриб вызывает бурую пятнистость и от-мирание хвои. М.deаrnessii обнаружен на о.Сахалин,
на черноморском побережье Северо-Западного Кав-каза в естественных молодняках и лесных культурах сосны обыкновенной (пос. Восточный), сосны пи-цундской (пос. Лазаревский). В ряде регионов России обнаружен потенциально опасный возбудитель забо-
Фитопатогенные грибы 179
левания хвойных пород – гриб dothistroma septospora
(Dorog.)Morelet (=d.pini Hulb.). d.septospora вызыва-
ет пятнистый ожог хвои. Нами установлено развитие
этого гриба на территории Национального парка (НП) «Марий Чодра», Яльчинском лесничестве (Республика Марий эл)) на
сосне обыкновенной, в Сочинском НП
на хвое сосны пицундской (Адлерское лесничество), в Красноярском крае на хвое сосны обыкновенной (НП «Шушенский бор», Перовское лесничество). На хвой-ных породах, выращиваемых в лесных питомниках и искусственных насаждениях развивается Scleroderris
lagerbergii Gremmen с анаморфой brunchorstia
pinea
(k
arst.) Hoehn. Гриб вызывает «побеговый рак хвой-
ных пород» и найден на о.Сахалин (поражает моло-дые со
сновые культуры), в Республике Марий эл, а
также на черноморском побережье Кавказа на соснах пицундской и обыкновенной, в культурах сосны и лесных питомниках Красноярского края на кедре си-бирском. Достаточно опасными патогенами на соснах признаны виды cyclaneusma
minus (Butin) diCosmo et
al. и c.niveum (pers.) diCosmo et al. Оба эти вида най-
дены нами в 2003 г. на территории Сочинского НП на хвое сосен обыкновенной и пицундской (Адлерское и Лазаревское лесничества). В сосняках Красноярс-кого края найден c.minus
, поражающий хвою сосны
обыкновенной (Заповедник «Столбы» и Большемур-тинский лесхоз). Гриб diplodia
pinea (Desm.) kickx.
найден в окрестностях г.Краснодара, на побегах сосны обыкновенной и черной, на черноморском побережье Северо-Западного Кавказа (г.Сочи, пос.Лазаревский) на секвойе вечнозеленой, тисе ягодном, кипарисе, кедре ливанском, соснах обыкновенной и пицунд-ской. В европейской части России d.pinea
найден на сосне обыкновенной в лесных питомниках Тверс-кой, Ульяновской и Московской областей. Развитие гриба обнаружено также на сосне обыкновенной в Красноярском крае (НП «Шушенский бор»). Грибы Pestalotia hartigii Tub. и P.funerea Desm. известны как
возбудители заболеваний деревьев хвойных пород. P.hartigii ранее отмечался на северо-западе России и
был обнаружен в лесных питомниках Западной Сиби-ри (Новосибирская обл.), Красноярском крае (Боль-шемуртинский, Тинский лесхозы), где он поврежда-ет сеянцы сосны, ели и кедра. P.hartigii обнаружен
также в лесных питомниках Тверской и Московской областей на сеянцах сосны и ели, в Краснодарском крае, на Черноморском побережье Северо-Западного Кавказа на усыхающей хвое сосны черной, пицунд-ской и обыкновенной. P.funerea обнаружен нами в
2003 г. на Черноморском побережье Северо-Западно-го Кавказа на кипарисе, криптомерии, секвойе, кипа-рисовике и сосне пицундской (пос.Лазаревский). В г.Сочи P.funerea повреждает тис ягодный и кипарис.
В условиях Подмосковья P.funerea был найден на Ju-
niperus sp. В лесных питомниках Тверской и Москов-
ской областей нами отмечено появление и развитие малоизвестного патогенного почвенного гриба cyl
in-
drocarpon destructans (zi ns.)Scholten., который вызы-
вает заболевание корневых систем и гибель сеянцев и саженцев ели. Все названные грибы необходимо отнести к объектам внешнего и внутреннего каранти-на. Появление таких фитопатогенных грибов в реги-онах, где они ранее известны не были, ставит перед национальными службами лесозащиты и карантина растений новые задачи по надзору, профилактике и разработке мер борьбы с этими грибами.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ PYTHium oliGandrum
ДЛЯ
ЗАЩИТЫ Р АСТЕНИЙ ОТ ФИТОПАТОГЕНОВ
Ибрагимова С.А., Сивова Н.Н.
ГоУ в
По «Мордовский госуниверситет им. Н.П. огарева»,
Саранск
Задачей современного сельскохозяйственного рас-
тениеводства является защита выращиваемых культур от болезней, в частности, от заболеваний, вызываемых фитопатогенными грибами. Рассматриваемый ооми-цет Pythium oligandrum d
reschler является микопа-
разитом широкого круга почвенных фитопатогенов, вызывающих серьезные заболевания у экономически важных
сельскохозяйственных культур. Ант агонизм,
осуществляемый P .oligandrum, включает действие
гидролитических ферментов на клеточную стенку и/или продукцию антибиотиков и зависит от вида-хозяина. Демонстрация in vitro того, что целлюлазы, продуц
ируемые P . oligandrum, могут играть определя-
ющую роль в биоконтроле Phitophthora spp. , являет-
ся побудительным мотивом развития использования этог
о организ ма и его ферментов в качестве агента в
коммерческих целях. Чешскими учеными был создан препарат Polyversum на основе P . oligandrum. Замачи-
вание семян растений в биопрепарате Polyversum при-
водило к сильному подавлению фитофторы на стеблях и корневой гнили культурных растений.
В настоящее время на кафедре биотехнологии
ведутся научно- исследовательские работы по изу-чению гриба P. oligandrum . Изучены культурально-
морфологические свойства гриба при культивирова-нии на средах различного состава. Было показано, что изучаемую культуру гриба следует выращивать и хранить на кукурузном агаре при 35
°С. Подобраны
оптимальные источники углеродного и азотного пи-тания, также состав питательных сред обеспечиваю-щих максимальное накопление грибной биомассы в глубинной культуре.
Учитывая,
что обработка семян – это самый эффек-
тивный метод защиты растений от инфекции в началь-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 180
ных фазах развития растений, проводили замачивание
опытных образцов семян томата в культуральной жид-ко
сти p. oligandrum непосредственно перед посадкой.
Опытные растения по своему развитию не отличались от контрольных образцов (необработанные семяна). Более того, отмечена большая скорость роста, боль-шая суммарная площадь листьев у 1-месячных расте-ний (25 см
2 против 18 см2 у контроля). Также опытные растения лучше переносили снижение температуры окру
жающей среды (5–8 °С), имитирующее заморозки
на почве.
Вышесказанное свидетельствует о возможном по-
вышении иммунного статуса у растений, выросших из обработанных семян и действии гриба P . oligandrum
как индуктора защитных реакций у молодых расте-ний.
РЖАВЧИННЫЕ ГРИБЫ – ПАР АЗИТЫ ЦВЕТОЧНО-
ДЕКОР АТИВНЫХ Р АСТЕНИЙ НИЖНЕГО ДОНА
Карпенко Т.В., Русанов В.А.
Южный федеральный университет,
Ростов-на-Дону
Цветочно-декоративные культуры, используемые в
озеленении в Ростовской области, часто повреждаются заболеваниями, в т. ч. и грибного происхождения. Изу-чением этого вопроса в 60–70-х годах ХХ века занима-лась Мовсесян Л. И. Исследование грибных патогенов декоративных растений проводилось В.А.Русановым в рамках общей инвентаризации грибов Нижнего Дона.
В ходе нашего исследования в 2004–2007 гг. на
территории Нижнего Дона зафиксировано 90 видов и форм грибов, развивающихся на 105 видах цветочно-декоративных растений, используемых для озеленения городов, а также на растениях местной флоры, имею-щих перспективное декоративное значение. Из общего числа зарегистрированных видов 23 являются ржав-чинными грибами,
что составляет 25,5 % всей мико-
биоты декоративных растений.
Заболевания, вызываемые ржавчинными грибами,
причиняют значительный вред цветочным культурам. Поражение растений ржавчиной сопровождается появ-лением на листьях, а иногда и на других органах пус-тул гриба, окруженных ореолом бесхлорофилльной ткани. э
то приводит к сокращению ассимиляционной
поверхности и, следовательно, к ослаблению расте-ний, деформации и интенсивному опадению листьев. Декоративность пораженных экземпляров резко сни-жается, надземная часть часто отмирает.
На территории Нижнего Дона повсеместно рас-
прост
раненна ржавчина алтея и мальвы (puccinia
malvacearum Bertero ex Mont.), ирисов (puccinia iridis Wallr., puccinia melanopsis p. Syd. & Syd.), фиалки
(puccinia violae (Schumach.) DC.). Менее распростра-нена ржав
чина львиного зева (puccinia antirrhini Dietel
& Holw.), незабудки (puccinia isiacae (Thьm.) G. Winter) и барвинка (puccinia vincae Berk.).
Наиболее вредоносными ржавчинными грибами явля-
ются Uromyces armeriae (Schltdl.) Lйv., поражающий кер-меки (Limonium platyphyllum Lincz., L. gmelinii (Willd.) O. kun
tze.) и 3 вида грибов рода phragmidium ( phragmidium
tuberculatum Jul. Mьll., phragmidium mucronatum ( pers.)
Schltdl., phragmidium rosae-pimpinellifoliae Dietel), по-
ражающие Rosa spp. Для больных растений характерно преждевременное пожелтение и опадание листьев, вы-сыхание стеблей и опадение бутонов, что приводит к полной потере декоративных свойств.
Некоторые виды ржавчинных грибов распростра-
нены в
о влажных местах (ржавчина ирисов (puccinia
iridis Wallr.), львиного зева (puccinia antirrhini Dietel & Holw.), другие, наоборот, проявляют наивысшую вре-доносность в сухих местообитаниях (ржавчина эре-мурус
а (puccinia eremuri kom.). Временем появления
наибольшего количества этих грибов на Нижнем Дону является август.
Из ассортимента цветочных культур ржавчинные
грибы выявлены на 33 видах растений, относящихся к 19 родам 16 семейств высших растений. Наиболее поражаемыми культурами, имеющими большое эконо-мическое значение на территории Нижнего Дона, явля-ются 6 видов ирисов, 9 видов роз и 2 вида хризантем.
НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ БИОэКОЛОГИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ
АЛЬТЕРНАРИОЗА КАРТОФЕЛЯ В ЛЕСОСТЕПИ СРЕДНЕГО ПОВОЛЖЬЯ
Кинчарова М.Н., Соколова А.И.
Самарская государственная сельскохозяйственная академия,
кинель
Грибы рода alternaria вызывают альтернариоз или
бурую пятнистость пасленовых культур, вредонос-ность которого заключается в снижении урожая из-за преждевременного отмирания пораженной ботвы и ги-бели клубней при хранении. Кроме того, альтернариоз играет важную роль в комплексе возникновения гни-
Фитопатогенные грибы 181
лей, открывая доступ в клубень возбудителям других
сухих и мокрых гнилей.
У грибов alternaria четк о выражены признаки фа-
культативного паразита: хорошо растет и развивается на искусственных питательных средах, в качестве ис-точников питания может использовать растительные остатки разных сельскохозяйственных культур. За последние годы характер развития и вредоносность альтернариоза в Самарской области существенно воз-росли. В связи с этим особое значение приобретают вопросы, связанные с изучением биологических осо-бенностей данного возбудителя.
Целью наших исследований явилось изучение осо-
бенностей развития альтернариоза на картофеле в ле-состепи Среднего Поволжья. В течение вегетации были обследованы на поражение альтернариозом 43 сорта отечественной и иностранной селекции. В дальнейшем для изучения были взяты сорта со средней, наименьшей, наибольшей и часто встречаемой степенью поражения.
Учет показателей водного режима показал, что при
поражении растений альтернариозом резко снижается их водоудерживающая способность, особенно ярко это выражено у сортов У дача и Пикассо. В конце вегета-ции происходит резкое снижение этого показателя у восприимчивых сортов.
Различными исследователями выделяется группа
«стрессовых» аминокислот, принимающих участие в адаптивном ответе растительного организма на стрес-соры. Их содержание существенно повышается при различных воздействиях на организм, в том числе и на внедрение патогена. В наших исследованиях коли-чество свободного пролина значительно варьировало в зависимости от сорта, его устойчивости или воспри-имчивости к возбудителю заболевания. Заражение рас-тений картофеля сортов Пикассо и Космос альтерна-риозом повышало содержание свободного пролина в листьях, а у восприимчивых сортов (Елизавета и У да-ча) на начальных этапах заражения содержание проли-на снижалось, а затем по мере развития болезни резко повышалось.
Активность ферментов пероксидазы и полифено-
локсидазы повышалась при поражении растений воз-будителем альтернариоза у восприимчивых сортов, и снижалась у относительно устойчивых. Причем отме-чено, что активность пероксидазы у отдельных сортов на первых стадиях развития болезни сначала резко падала, а в дальнейшем существенно возрастала (на 200–400
%). У других сортов, таких как Космос, Ра-
синка
– вначале резко повышалась, а затем постепенно
снижалась. В отношении активности полифенолокси-дазы по этим сортам наблюдалась совершенно проти-воположная тенденция (т.е. постепенное и устойчивое снижение активности фермента).
Установлена также положительная корреляционная
зависимость между баллом поражения растений аль-тернариозом, содержанием фотосинтетических пиг-ментов и урожайностью.
По результатам клубневого анализа у сортов Пикас-
со и У дача возбудитель альтернариоза способствовал большему поражению клубней паршой обыкновен-ной, а также растрескиванию и уродливости клубней. Анализ урожайных данных показал, что у всех сортов снижается продуктивность на 25–54 ц/га. Отмечено, что наибольшее снижение урожая было у раннеспело-го сорта У дача.
Таким образом, раннеспелые сорта картофеля силь-
нее поражаются альтернариозом, что способствует снижению урожайности и повышает восприимчивость растений к другим болезням. Поэтому необходимо на-чинать профилактические обработки против альтер-нариоза как можно раньше и с ранних и раннеспелых сортов.
ОСОБЕННОСТИ Р АЗВИТИЯ НЕКРОТРОФНЫХ ГРИБОВ boTr YTiS cinerea
pER
s. И ScleroTinia ScleroTiorum (LIb.) DE bARY НА ФАСОЛИ
Кирик Н.Н., Пиковский М.И.
Национальный аграрный университет,
киев
В условиях Украины грибы-некротрофы botrytis
cinerea pers. и Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary
паразитируют на многих сельскохозяйственных ку
льтурах. Вызываемые ими болезни – серая и белая
гнили являються причиной значительных потер урожая и снижения его качества.
Согласно наших наблюдений серая и белая гнили
являються одними из самых распространенных забо-леваний фасоли обыкновенной (Phaseolus vulgaris L.). В то же время эти болезни на данной культуре не изу-чены.
Целью нашей работы являлось исследование сим-
птоматики серой и белой гнили, а также морфогенеза грибов b.
cinerea и S. sclerotiorum на растениях фасоли. Опыты проводили в условиях Агрономической опыт-ной станции Национального аграрного университета.
Нами установлено, что начальное появление се-
рой гнили на растениях фасоли приурочено к периоду массового цветения. Большое количество опадающих отмерших лепестков, задерживаясь на разных органах растений (листовых пластинах, черешках, стеблях, пло-доносах), способствую развитию на них гриба b.
cine-
rea. На зрелых листьях фасоли симптомы серой гнили,
ка
к правило, типичные – в местах внедрения гриба об-
разуется серый пушистый налет. В дальнейшем возмож-но скручивание листовых пластинок. На молодых бобах паразитирование возбудителя также начинается с мест, на которых задержались зараженные остатки лепестков.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 182
Пораженные стебли фасоли покрываются обильным ко-
нидиальным спороношением гриба, обесцвечиваются и часто надламываются. В середине и в конце вегетации фасоли паразитирование b.
cinerea наблюдается так-
же на бобах, кончики которых контактируют с почвой. Если бобы поражаются в период созревания, участки, на которых развивается гриб, покрываются обильным серым налетом. В конце вегетационного периода на пораженных бобах отмечено малочисленное формиро-вание склероциев патогена. При поражении бобов ин-фицируются также семена, которые теряют блеск, ста-новятся морщинистыми и трухлявыми.
Симптомы белой гнили наблюдались в период об-
разования бобов. Болезнь, прежде всего, проявлялась в основе растений возле поверхности почвы. При пора-жении основы стеблей, растения увядали и отмирали. Наблюдалось также локальное образование на боль-ных участках грибницы S. sclerotiorum. Начальные
симптомы болезни на пораженных бобах характеризу-ются образованием водянистых мокрых пятен. В даль-нейшем, последние постепенно покрывались белой ватообразной грибницей патогена. При сухой погоде, ткани, на которых поверхностная грибница еще не сформировалась, приобретали шоколадно-бурый или желто-зеленый цвет на фоне здоровых травянисто зе-леных участков. Формирование склероциев грибом S.
sclerotiorum на поверхности пораженных бобов фасо-ли довольно интенсивное. Сначала они округлые, а со временем приобретают удлиненную и неправильную конфигурацию. Склероции можно обнаружить внут-ри инфицированных бобов. Склероциальная масса продуцируется из мицелия гриба, который заполняет межсеменные пространства. Пораженные белой гни-лью семена фасоли теряют блеск, а на их поверхности также могут формироваться склероции.
Таким образом, начало паразитирования гриба b.
ciner
ea на фасоли приурочено к периоду массового
цветения растений, а S. sclerotiorum – периоду образо-
вания и развития бобов. Симптоматика серой и белой гнили фасоли характеризуется разнообразными диа-гностическими признаками. На пораженных растени-ях грибы формируют следующие морфологические структуры: мицелий, конидиальное спороношение (b.
ciner
ea), а также склероции.
ОЦЕНКА УСТОЙЧИВОСТИ К БУРОЙ РЖАВЧИНЕ СОРТОВ
ПШЕНИЦЫ ИЗ КОЛЛЕКЦИИ UsDA-ARs
Киселева m.И., Куркова Н.Н., Жемчужина Н.С., Щербик А.А., Коваленко e.Д.
всероссийский НИИ фитопатологии,
Московская область, п/о Большие в яземы
В инфекционном питомнике Всероссийского на-
учно-исследовательского института фитопатологии на фоне искусственного заражения растений прове-дена оценка устойчивости 628 сортов яровой мягкой (Triticum aestivum subsp. aestivum) и твердой (T. turgi-
dum subsp. durum) пшеницы из коллекции USDA-ARS,
Germplasm Resources Information Network, США к воз-будителю бурой ржавчины ( Puccinia triticina e
rikks) .
Коллекция яровой пшеницы включала сорта из стран Северной (США, Канада) и Южной Америки (Арген-тина, Бразилия, Мексика, Уругвай), Азии (Индия) и Европы (Югославия).
Все образцы в полевых условиях изучали на фоне
искусственного заражения московской популяцией гриба. В фазе трубкования образцы пшеницы были инокулированы смесью спор с тальком в отношении 1:100. В качестве стандарта по восприимчивости ис-пользовали яровой сорт Хакасская. Интенсивность по-ражения растений определяли по модифицированной шкале Кобба (1948). Кроме этого в условиях теплицы проведена оценка устойчивости к бурой ржавчине этих же образцов в фазе всходов.
Среди 319 образцов пшеницы Triticum aestivum на-
ибольшее количество устойчивых образцов пшеницы к бурой ржавчине было из США, Бразилии и Мекси-ки. Из 78 образцов яровой мягкой пшеницы Triticum aestivum из
США 29,5 %, практически не поражались
ржавчиной. Среди образцов Triticum aestivum из Кана-ды не было выявлено устойчивых, восприимчивость к местной
популяции бурой ржавчины проявили 70,6 %
образцов. По уровню поражения сорта пшеницы из Южной Америки чаще относили к группе с возраст-ной устойчивостью. Образцы пшеницы, принадлежа-щие виду Triticum turgidum subsp. durum, отличались более высокой устойчивостью к бурой ржавчине, чем образцы вида Triticum aestivum. Так, количество ус-тойчивых к бурой ржавчине образцов твердой пшени-цы ко
лебалось от 58,4 % (США) до 80 % (Канада).
На основании данных по оценке устойчивости
сортов яровой мягкой и твердой пшеницы в период вегетации в условиях иммунологического питомника и в ювенильной стадии в условиях теплицы, образцы были условно подразделены по типу устойчивости на четыре группы:
– уст
ойчивые (Triticum aestivum – 19,7 %, Triticum
turgidum subsp. durum – 67,6 %) – интенсивность поражения 0–20 %, тип реакции 0;12;
– с признаками возрастной устойчивости (Triticum aestivum – 22,6 %, Triticum turgidum subsp. durum – 22,7 %). Образцы характеризовались восприимчи-вым типом реакции в фазе проростков и устойчи-во
стью – в фазе флаг листа.
– с признаками частичной устойчивости (Triticum aestivum – 18,4 %, Triticum turgidum subsp. durum – 5,5 %) – конечная интенсивность поражения 20–60 %, тип реакции восприимчивый;
Фитопатогенные грибы 183
– восприимчивые (Triticum aestivum – 39,1 %,
Triticum turgidum subsp. durum – 4,2 %) – интенсив-ность пораж
ения 80 % и выше, тип реакции 4.
В результате исследований установлено, что сор-
та из разных регионов мира, хранящихся в коллекции NSGC, значительно различались по устойчивости в условиях питомника ВНИИФ. Наибольшую устойчи-вость к патогену проявляли образцы Triticum turgidum
subsp. durum из США, Канады, Мексики.
КОРНЕВЫЕ И СТВОЛОВЫЕ ГНИЛИ СОСНЫ (pINUs sYL vEsTRIs) В ГОРОДСКИХ
ЛЕСОПАРКАХ В УСЛОВИЯХ АНТРОПОГЕННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ
Колтунов Е.В.1, Залесов С.В.2, Лаишевцев Р.Н.2
1 Ботанический сад Уро РАН,
екатеринбург
2 Уральский государственный лесотехнический университет,
екатеринбург
Уровень и масштабы антропогенного воздействия
на лесонасаждения городов, в том числе, городские лесопарки и пригородные леса, постоянно возрастают. эт
о сопровождается снижением устойчивости древос-
тоев к инфекционным болезням, ростом заболеваемос-ти их корневыми и стволовыми гнилями. В результате снижается рекреационная ценность лесопарков, воз-растает опасность возникновения ветровалов и угроза постепенной деградации лесопарков. Учитывая пол-ное отсутствие достоверных данных по этой пробле-ме по лесопаркам г. Екатеринбурга и исключительную важность получения таких данных для разработки адекватной стратегии лесоводства, лесозащитных мероприятий мы провели комплексное лесопатологи-ческое обследование 4 лесопарков г. Екатеринбурга на пораженность древостоев корневыми и стволовыми гнилями (Юго-Западный, им. Лесоводов России, Шар-ташский, Нижне-Исетский).
При лесопатологическом обследовании исполь-
зовали как метод закладки пробных площадей, так и маршрутный. Проводился анализ состояния древосто-ев, отмечали усыхание, отпад, наличие очагов усыха-ния, а, также, проводили анализ пораженности гниля-ми живых деревьев, используя отбор кернов из ствола и всех корневых лап, измерение площади поражения (по диаметру), стадии развития процесса, анализ ме-ханических свойств пораженных участков древесины, агрессивности штаммов патогенов. Необходимость столь детального анализа была обусловлена тем, что стандартный метод лесопатологического обследова-ния, широко используемый в лесном хозяйстве, в ус-ловиях городских лесопарков и пригородных лесов не давал адекватных результатов. Получались, в основном значительно заниженные результаты. Вследствие этого возникла необходимость проведения более детального анализа пораженности гнилями живых деревьев.
Как показали результаты, в двух лесопарках (Юго-
Западный, им. Лесоводов России) был выявлен вы-сокий уровень пораженности сосны корневыми и ство
ловыми гнилями (до 80 %), а, также, обнаружены
деревья, одновременно пораженные и корневой и ство-ловой
гнилями. эти лесопарки отличались особенно
высоким уровнем загрязнения техногенными факто-рами, а, также, возрастной структурой древостоев. В их составе доминировали перестойные сосны. У пора-женных стволовой гнилью деревьев в Юго-Западном лесопарке преобладала центральная стволовая гниль с небо
льшой зоной поражения (57 %). Количество де-
ревьев с периферической гнилью или одновременно с периферической и центральной, было значительно ниже
(29 и 14 %). В лесопарке Имени Лесоводов Рос-
сии также обнаружено доминирование деревьев, по-раженных
центральной стволовой гнилью (73–80 %).
Анализ площади поражения древесины показал, что, примерно, половина деревьев сосны характеризова-лись слабой
и средней степенью поражения (до 40 %
площади корня). Почти такое же количество деревьев имели зна
чительную степень поражения 50–70 %. Как
показали результаты, 60 % пораженных корневой гни-лью деревьев сосны находились в начальной стадии развития инфекционного проце
сса, 40 % – в средней.
У 40 % пораженных деревьев имеются признаки
начала снижения механической прочности древеси-ны в месте поражения корневой гнилью. Учитывая довольно значительную площадь поражения корней (по диаметру), можно предположить высокую потен-циальную опасность этих параметров с точки зрения возникновения ветровалов.
Кроме того, нами были обнаружены высокие уров-
ни техногенного загрязнения лесопарков. Так загряз-нения по
чв Mn в 47 раз, Cu – в 4,2 раза, Ni – в 2,5 раза
превышали ПДК (подвижные формы). Содержание железа в почве наиболее загрязненных городских ле-сопарков, в среднем, в 20 раз выше таковой в почве со-сняка аналогичного типа леса и возраста за пределами импактной зоны.
В Шварташском и Нижне-Исетском лесопарках, в
которых средний возраст сосны был заметно ниже, а уровень техногенного загрязнения был менее значитель-ным, выявлены и менее значительные уровни поражен-ности сосны корневыми и стволовыми гнилями. Так, в Нижне-Исетском лесопарке пораженность деревьев со-сн
ы корневой гнилью колебалась от 0 до 30 %. При этом
18,7 % деревьев сосны в кварталах вообще не пораже-
ны
корневой гнилью, 37,5 % были поражены на 5–10 %;
по 18,7 % – на 15 и 20 % и лишь 6 % – на 30 %. Анализ
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 184
площади поражения древесины показал, что, примерно,
половина древостоев сосны характеризовались слабой и ср
едней степенью поражения (до 40 % площади корня).
Примерно, столько же древостоев имели значительную ст
епень поражения 50–70 %. Как показали результаты,
60 % пораженных корневой гнилью древостоев сосны
находились в начальной стадии развития инфекционно-го
процесса, 40 % – в средней. Стволовой гнилью дре-
востои не были поражены, за исключением единичных деревьев в одном из кварталов.
Как
показали результаты, у 40 % пораженных
древостоев имеются признаки начала снижения ме-ханической прочности древесины в месте поражения корневой гнилью. Учитывая довольно значительную площадь поражения корня (по диаметру), это пред-ставляет потенциальную опасность с точки зрения опасности ветровалов.
При обследовании лесопарков действующих и за-
тухших очагов корневой гнили не обнаружено. Отпад сосны не превышал величины естественного отпада. эт
о, а, также, отсутствие усыхающих деревьев на про-
бных площадях, по нашему мнению, также свидетель-ствует о том, что, несмотря на заметное техногенное и антропогенное воздействие на фитоценозы лесопарка, развитие инфекционного процесса достаточно мед-ленное. Древостои, хотя и ослаблены, но в целом на-ходятся пока в устойчивом состоянии и угроза распада древостоев пока отсутствует.
В целом детальные лесопатологические обследова-
ния убедительно показали, что в наиболее загрязненных городских лесопарках с преобладанием перестойных деревьев, лесопатологическая обстановка неблагопо-лучна и требуются мероприятия по проведению рубок реконструкции и другие. Состояние древостоев в двух других лесопарках значительно лучше. По нашему мне-нию, это обусловлено меньшим уровнем техногенного загрязнения, значительно меньшими рекреационными нагрузками и менее значительным возрастом сосняков (65 лет), тогда как в Юго-Западном лесопарке (88 лет).
Следовательно, различия в пораженности сосны в
городских лесопарках не были взаимосвязаны с уров-нем техногенного загрязнения лесопарков, а были обусловлены, в основном, разницей в среднем возрас-те древостоев.
В то же время, по нашему мнению, высокая пора-
женность сосны корневой и стволовой гнилью в го-родских лесопарках не может служить основанием для снижения площади лесопарков, массовой вырубки древостоев, строительства на территории лесопарков различных сооружений. В этих условиях результаты лесопатологических обследований не могут быть ос-нованием для признания этой группы лесонасаждений малоценными, бесперспективными, вследствие того, что основной ценностью городских лесопарков являет-ся их эстетическая, рекреационная, средозащитная, вет-розащитная ценность, а, также, способность городских лесопарков к снижению уровня техногенного загрязне-ния, уровня шума, повышению уровня климатического комфорта. Все эти ценные свойства городских лесопар-ков полностью сохраняются. Поэтому лесоводствен-ные мероприятия могут быть направлены только на частичную реконструкцию древостоев без уменьшения общей площади городских лесопарков и снижения их полезных свойств. Наиболее важной проблемой, спо-собствующей сохранению и повышению устойчивости лесопарков мы считаем разработку общей стратегии реконструкции и омоложения древостоев и снижение уровня техногенного загрязнения городской среды.
ВЛИЯНИЕ РИЗОТОРФИНА НА ПОР АЖЕННОСТЬ Р АЗЛИЧНЫХ
СОРТОВ ГОРОХА АЛЬТЕРНАРИОЗОМ В СРЕДНЕМ ПОВОЛЖЬЕ
Космынина О.Н., Кошелева А.Б., Кинчарова М.Н.
Самарская государственная сельскохозяйственная академия,
кинель
Горох – наиболее важная зернобобовая культура
России. Горох, занимает важное место, как в питании людей, так и в кормлении сельскохозяйственных жи-вотных, также он имеет большое агротехническое зна-чение. Повышение устойчивости растений к различ-ным патогенам играет одну из самых важных ролей в сельском хозяйстве, так как потери урожая гороха от боле
зней могут достигать 30 % и более. Наибольший
вред гороху в основных районах его возделывания причиняют грибные болезни. В Самарской области в последнее годы к наиболее вредоносным грибным за-болеваниям добавился еще и альтернариоз. Развитие болезни зависит от особенностей растения, вида пато-генного организма и условий окружающей среды.
Учет степени пораженности гороха начинался в
конце молочной спелости зерна, с повторностью через каждые 7 дней. Для получения сведений о поражении болезнями гороха проводились обследования участ-ков по 0,25 м2 в трехкратной повторности. Растения в пробе
брались подряд, без выбора. элементами учета
являлись: распространенность болезни (в %) и интен-сивность развития болезни (в баллах). Учет проводил-ся на корню.
В опыте изучалось 6 сортов гороха двух видов: по-
севной (Pisum sativum): ус
атые сорта – Флагман 7, Са-
марец,
Мадонна и листочковые сорта – Воронежский,
Новокуйбышевский, и полевой (Pisum arvense) (Уса-тый крот). Кроме вышеуказанных сортов исследова-ния проводили также на одной дикорастущей местной форме
гороха посевного – Мушунг 1881; на 3 сортах
ВИР – Витязь 6631, Ахалкалакский 6060 и Бн 1923. Часть семян, перед посевом, была обработана ризотор-
Фитопатогенные грибы 185
фином. Каждый грамм ризоторфина содержал не ме-
нее 2.5 млрд. жизнеспособных клеток с высокой кон-курентоспособностью и интенсивной азотфиксацией. Доза препарата составляла 200 г/га. Посев проводился через 2 часа после обработки семян.
Проведенными исследованиями установлено, что
альтернариоз проявлялся в виде темно-бурых разрас-тающихся пятен, часто расположенных по краям лис-тьев. При сильном заражении листья усыхали, кроши-лись и опадали. Подобная пятнистость образовывалась на черешках листьев и стеблях. При окольцевании стебля, верхние части растения усыхали. Альтерна-риоз в большей степени проявлялся на усатых сортах. Наиболее сильно был поражен заболеванием сорт Ма-донна. Предпосевная обработка семян ризоторфином оказала влияние на более интенсивное развитие болез-ни на Усатом кроте и Мушунге 1881 и на листочковых сортах ВИР Ахалкалакский 6060 и Бн 1923. При этом сильнее поражались стебли, затем листья и прилистни-ки, и меньше всего бобы. Наибольшую устойчивость к заболеванию проявил сорт ВИР Витязь 6631.
Корреляционный анализ показал обратную зави-
симость между степенью поражения заболеванием и количеством клубеньков. Для листочковых сортов ко
эффициент корреляции составил – 0,44, для уса-
тых сор
тов – 0,63. Поэтому можно предположить, что
развитие азотфиксирующего аппарата предупреждает развитие такого заболевания как альтернариоз.
Корреляционный анализ выявил также обратную
зависимость между степенью поражения заболева-нием и урожайностью. Коэффициент корреляции для листочковых и усатых сортов составил соответствен-но
– 0,52 и – 0,64. Т. е. развитие заболевания ведет к
существенному снижению урожайности культуры.
ГРИБ GaeumannomYceS GraminiS vAR. TriTici –
ВОЗБУДИТЕЛЬ ОФИОБОЛЕЗА ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ:
МЕТОДЫ ИЗОЛЯЦИИ И ИДЕНТИФИКАЦИИ
Крючкова Л.А.
Институт физиологии растений и генетики НАН Украины,
киев
Озимую пшеницу поражает около ста паразити-
ческих микроорганизмов, из которых более половины составляют микроскопические грибы. К сожалению, несмотря на высокую вредоносность болезней, вызы-ваемых некоторыми грибами, их изучению не уделя-ется достаточного внимания. И объясняется это в пер-вую очередь сложностями, которые возникают при их изоляции и идентификации.
Среди таких грибов особый интерес представля-
ет гриб Gaeumannomyces graminis var. tritici –
возбу-
дитель офиоболеза. Ряд исследований, посвященных разработке эффективных методов выделения его в чис-тую культуру (Пономарева, 1970, Зражевская, 1980, Лесовой и др., 1985, 1986, Кольнобрицкий, Бондарь, 1989, Шупикова, Кольнобрицкий, 1989) не увенчались успехом. И объясняется это, прежде всего, низкой кон-курентоспособностью гриба по сравнению с другими микроск
опическими грибами – сапрофитами, которые
заселяют ткани корневой системы, отмирающие в про-цессе старения.
Исходя из этого, необходимым условием есть
жесткая предварительная дезинфекция пораженной тк
ани. Мы в своих исследованиях используем 1 %-
ный раствор AgNO3 на протяжении 30 секунд или 5–
10 %-ный раствор гипохрорида натрия на протяже-
нии 5 минут.
При использовании AgNO3 его излишек осажда-
ется
5 %-ным раствором NaCl. После дезинфекции
корни ополаскивают стерильной водой и просушива-ют
фильтровальной бумагой. Отрезки корней по 2 – 3
равномерно размещают на картофельно-глюкозный агар, инкубируют на протяжении 5–7 суток, после чего выросшие за это время колонии грибов рассматривают под микроскопом (х350–700).
Идентификацию гриба G.graminis var. trititci про-
водят на основании характера гиф по краям колоний: под микроскопом они спирально согнутые или даже спирально закрученные (curled colony edges). Для получения моноизолятов использовали кончики гиф (hyphal tip), которые отрезали и пересевали в другие чашки Петри с картофельно-глюкозным агаром. Ко-лонии G.graminis var. trititci не имеют характерных
признаков: они сначала серые, со временем темнеют. Спорообразование в культуре также проблематично, поэт
ому характер гиф – единственный признак, за ко-
торым обнаруживают возбудителя.
Однако для подтверждения диагноза необходимо
также проверить патогенность изолятов. Только вос-производство симптомов болезни при искусственном заражении растений пшеницы патогеном, согласно пос-тулатам Коха, даст возможность утверждать о правиль-но
сти диагностики. это связано еще и с тем, что в почве
присутствуют родственные G.graminis var. trititci виды и
подвиды, похожие и по культуральным признакам, и по мо
рфологии гиф. это – G.graminis var. avenae , G.graminis
var. graminis, G. cylindrosporum и др. Однако, согласно
данным литературы, только G.graminis var. trititci спосо-
бен разрушать проводящую систему растений, закупори-вая сосуды как боковых, так и главных корней.
Нами также установлено, что изоляции возбудите-
ля в чистую культуру должна предшествовать визуаль-ная диагностика, в частности, выявление заболевания на корнях со слабой степенью поражения. При силь-ном поражении, когда болезнь уже распространилась
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 186
В 1975 г. в издательстве Московского Университета
вышла книга М. В. Горленко «Миграции фитопатоген-
ных микроорганизмов». В книги описываются различ-ные типы миграции фитопатогенов: межконтиненталь-ные и внутриконтинентальные передвижения, миграции внутри страны, между отдельными хозяйствами или по-лями севооборотов, а также из природных очагов. Вы-ход этой книги стимулировал интерес многих фитопа-тологов к проведению популяционных исследований.
За прошедшие с тех пор годы в ВИЗР проведены
обширные популяционные исследования грибов Puc-
cinia triticina,
Pyrenophora teres, P . tritici-repentis, co-
chliobolus sativus, r
hynchosporium secalis, видов родов
Fusarium и a lternaria .
При сравнении
межконтинентальных популяций p.
teres (северо-американских и европейских) показано, что уровень их сходства по признаку вирулентности не превышает 40
%. Внутри континента могут формиро-
ваться узколокальные популяции. Сравнительный ана-лиз нек
оторых европейских популяций p. teres показал
полное отсутствие сходства по признаку вирулентнос-ти между выборками клонов из Польши и Чехии, а также между популяциями Чехии, Беларуси и России. Значительные различия между популяциями были подтв
ерждены с помощью AfLp и УП-ПЦР маркеров.
На территории Европы существует единая популя-
ция P . triticina – возбудителя бурой ржавчины пшеницы.
О
на значительно отличается по составу фенотипов от
популяции, расположенной в азиатской части России. Миграция спор между европейской и азиатской по-пуляциями отсутствует или незначительна. Миграци-онные возможности патогенов могут ограничиваться различного рода физическими барьерами (горы, водные бассейны, леса и др.), что приводит к появлению изо-лированных популяций возбудителя болезни. Изоли-рованные популяции P . tritici обнаружены на Дальнем
Востоке, Средней Азии, и в Закавказье. С использова-нием физиологических, биохимических и молекуляр-ных маркеров выявлены существенные различия между популяциями P . tritici-repentis, F . graminearum и a. tenui-
s
sima различного географического происхождения.
На формирование новых локальных популяций
могут отражаться наблюдаемые за последние годы изменения климата. Виды типичные для южных реги-онов
– F . graminearum и P . tritici-repentis появились не-
давно на северо-западе России. Вероятно, грибы были завезены с семенами, а в связи с потеплением климата в этом регионе адаптировались к новым условиям. С эпидемиологических позиций интерес представляют миграции па
тогенов с дикорастущих растений – резер-
ваторов инфекции. К ним относятся, например, грибы рода Fusarium, обладающие широкой специализацией.
Молекулярный анализ видов F . sporotrichioides с диких
и культурных растений показал их идентичность.
Проблемы миграции фитопатогенных микроорга-
низмов, поднятые в книге М.В.Горленко, остаются ис-ключительно актуальными. Они важны не только для понимания природы появления новых болезней или рас возбудителей на той или иной территории, но и для формирования представления о структуре и ареале популяции. В конечном итоге, это фундаментальные сведения для стратегии территориального размещения генов устойчивости и разработки систем защиты рас-тений в целом.на прикорневую часть стебля, выявлению возбудителя, действительно, мешает заселение отмерших тканей более конкурентоспособными сапрофитами, и даже жесткие методы предварительной дезинфекции не позволяют выявить колонии патогена среди колоний других грибов на твердых питательных средах.
МИГР АЦИИ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ И АРЕАЛЫ ПОПУ ЛЯЦИЙ
Левитин М.М., Новожилов К.В., Афанас енко О.С., Михайлова Л.А.,
Мироненко
Н.В., Гагкаева Т.Ю., Ганнибал Ф.Б.
всероссийский институт защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
ВИРУ ЛЕНТНОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ СТЕБЛЕВОЙ
РЖАВЧИНЫ ПШЕНИЦЫ Puccinia GraminiS f.sp. Tri Tici
В
НЕКОТОРЫХ РЕГИОНАХ Р ОССИИ В 2006 ГОДУ
Лекомцева С.Н., Волкова В.Т., Зайцева Л.Г., Чайка М.Н.
Московский государственный университет им. М.в. ломоносова,
кафедра микологии и альгологии,
Москва
Мониторинг вирулентности Puccinia graminis f.sp.
tritici проводится нами ежегодно на одних и тех же
уч
астках в трех регионах России – Центральная Рос-сия (Московская обл.), Северный Кавказ (Ростовская обл.) и Западная Сибирь (Томская обл.). В зависимос-ти от условий сезона и наличия инфекционного нача-
Фитопатогенные грибы 187
ла уровень развития болезни может быть различным.
Как показали многолетние наблюдения, как правило, инфекция на пшенице и других зерновых культурах в полевых условиях проявляется в виде отдельных групп, состоящих из нескольких растений, поражен-ных ржавчиной. При неблагоприятных для развития гриба условиях пораженные ржавчиной растения обнаруживаются, как правило, только на отдельных сортах пшеницы, отличающихся высоким уровнем восприимчивости к патогену. К таковым можно от-нести сорта пшеницы Альбидум 28 и Альбидум 43, ежегодно поражаемые стеблевой ржавчины в Ростов-ской области.
Сезон 2006 г. был относительно благоприятным
для развития гриба на пшенице. Определение рас про-водилось стандартным методом путем искусственно-го заражения моноурединиальными изолятами гриба 16-и изогенных линий пшеницы с известными генами устойчивости в условиях теплицы (Roelfs, Martens, 1988). В популяции гриба из разных регионов России выявлено
14 рас p. graminis f.sp. tritici. Расы, частота
которых составила более 8 %, были отнесены к до-минирующим, расы с меньшей частотой, к редким. В 2006 г
. доминировали расы TkNT с генами вирулент-
ности
– р 5, 21, 9e, 7b, 6, 8a, 9g, 36, 30, 9a, 9d, 10, Tmp
(46 %), TkNS – р 5, 21, 9e, 7b, 6, 8a, 9g, 36, 30, 9a, 9d, 10 (11 %) и TkpT – р 5, 21, 9e, 7b, 6, 8a, 9g, 36, 30, 13, 9a,
9d, 10, Tmp (8 %). Близкими к ним по частоте встреча-емости
были расы TkST – р 5, 21, 9e, 7b, 6, 8a, 9g, 36,
30, 9a, 9d, 10, Tmp и TTNT – 5, 21, 9e, 7b, 11, 6, 8a, 9g,
36, 30, 9a, 9d, 10, Tmp по 7 % .
Частота редких рас в популяциях возбудителя, ве-
роятно, может свидетельствовать о нестабильности состава популяций гриба, связанной с разной вос-приимчивостью сортов растения-хозяина к расам, с различными требованиями к условиям среды и чувс-твительностью отдельных генов вирулентности к тем-пературе, освещенности и т.п.
Анализ состава рас показал, что в 2006 г. в Цент-
ральной России доля редких рас была одинаковой на барбарисе,
пшенице и ячмене (22 – 23 %); на Север-
ном Кавказе частота доминирующих рас была ниже, чем ре
дких (43 и 57 % соответственно). На диких ви-
дах злаков в указанных регионах соотношение доми-нирующих
и редких рас было одинаковым (66 и 34 %
соответственно). На барбарисе в Западной Сибири за-фиксированы только доминирующие расы.
Оценка устойчивости изогенных линий пшеницы
показала, что большинство из них, за исключением Sr 11, Sr 9b и Sr 13, в 2006 г. оказались восприимчивыми к стеблевой ржавчине.
Учитывая высокий инфекционный потенциал воз-
будителя мониторинг вирулентности и расового соста-ва гриба является крайне важным для прогноза появ-ления новых рас патогена для контроля эпифитотий стеблевой ржавчины.
ГОР ЛЕНКО МИХАИЛ В ЛАДИМИРОВИЧ
Лекомцева С.Н.
Московский государственный университет им. М.в. ломоносова,
кафедра микологии и альгологии,
Москва
12 июня 2008 г. исполняется 100 лет со дня рож-
дения Мих
аила Владимировича Горленко – выдающе-
гося русского миколога и фитопатолога, профессора, заведующего кафедрой микологии и альгологии (низ-ших растений) Московского университета, члена-кор-респондента Р АН, заслуженного деятеля науки РФ, лауреата премии имени М.В. Ломоносова.
М.В. Горленко окончил Воронежский университет,
где специализировался по ботанике. Интерес М.В. к низшим растениям сформировался под влиянием про-фессора
Б.М. Козо-Полянского – крупного специалис-
та в области эволюционной ботаники.
С 1929 по 1941 гг. работал на Воронежской станции
защиты растений вначале в должности фитопатолога, а затем директора станции. С 1941 по 1955 гг. на Мос-ковской станции защиты растений в должности заве-дующего лабораторией бактериозов растений, а затем заведующего станцией.
В 1946 г. профессор Л.И. Курсанов пригласил М.В.
Горленко читать спецкурсы на кафедре низших расте-ний МГУ . После кончины Л.И. Курсанова в 1955 г. М.В. Горленко возглавил кафедру. Он воспринял и продол-жал развивать традиционные направления в педагоги-ческой и научной работе кафедры. Наряду с базовыми курс
ами – низших растений, микологии и альгологии,
которые читались самим М.В. и другими преподава-телями к
афедры, он читает спецкурсы – иммунитет
растений, общая и частная фитопатология, руководит студенческими и аспирантскими работами. М.В. со-зда
л ряд учебников и книг – «Иммунитет растений»,
«Сельскохозяйственная фитопатология», «Мучнисто-росяные грибы Московской области», «Макромицеты Звенигородской биостанции МГУ» (совместно с И.И. Сидоровой), «Миграции фитопатогенных микроорга-низмов», «История фитопатологии в СССР», был глав-ным редактором и автором ряда разделов в изданиях «Жизнь растений» (том 2) и «Курс низших растений».
С созданием лабораторной базы в новом здании
Биологического факультета на Ленинских горах в 1955 г. на кафедре под руководством М.В. были значительно расширены экспериментальные исследования, посвя-щенные различным вопросам микологии, альгологии и фитопатологии. Проводятся исследования по физио-логии и эволюции паразитизма у грибов и бактерий,
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 188
специализации, изменчивости и генетике фитопато-
генных грибов, цитологии грибов и водорослей. Изу-чают
ся – физиология больного растения и иммунитет,
почвенные грибы как антагонисты фитопатогенных организмов, антибиотики грибного происхождения и их использование для защиты растений. Продолжают-ся исследования культивируемых грибов и микобиоты растений и почвы. Проводится изучение грибов, раз-вивающих
ся на абиогенных субстратах – промышлен-
ных материалах, произведениях искусства, книгах и т.п.
М.В. Горленко внес существенный вклад в понима-
ние жизненных циклов облигатных фитопатогенных грибов, физиологию паразитизма, изменчивость гри-бов и бактерий, исследование биоты мучнисторося-ных и агариковых грибов.
Ведя большую работу на кафедре, М.В. активно
участвовал в научно-педагогической и общественной жизни факультета, Московского университета, учреж-дений Академии Наук и ВАСХНИЛ. Он возглавлял от-деление общей биологии факультета, Ученый совет по защите диссертаций по ботанике, был председателем секции биологии Научно-технического совета МВО СССР , заместителем председателя секции защиты рас-тений ВАСХНИЛ, членом ВАКа. Совместно с Акаде-мией Наук СССР М.В. Горленко был одним из учреди-телей и первым главным редактором академического журнала «Микология и фитопатология». Он был чле-ном редколлегий ряда журналов. Среди них «Научные доклады высшей школы», «Общая биология», «За-щита растений» и др. М.В. Горленко был избран чле-ном-корреспондентом Академии Наук, награжден ор-денами Ленина и Трудового Красного Знамени, имел различные почетные звания.
Многочисленные выпускники кафедры учени-
ки М.В. Горленко работают во многих учреждениях страны и за рубежом и многие из них достигли значи-тельных успехов в своей профессиональной деятель-ности. М.В. Горленко прожил большую интересную творческую научную жизнь. Поэтому память о нем жива для многих людей, с которыми его сталкивала судьба.
sCLEROpHOMA spp. НА СОСНЕ В НОВГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ
Лесовская С. Г., Константинов А.В.
Новгородский государственный университет имени Ярослава Мудрого,
великий Новгород
Склерофомоз сосны описан в Польше, Германии,
Казахстане и России (Оренбургская и Ленинградская области) в конце 70-х и начале 80-х годов как болезнь лесных
питомников и культур. Возбудитель – несовер-
шенный гриб Sclerophoma pithyophila (Corda) v. Hohn. развивающийся на хвое и молодых побегах текущего года, чаще на верхних мутовках.
В 2003 году на территории Валдайского лесхоза
Новгородской области впервые был обнаружен и опи-сан данный гриб в культурах сосны 2001 года закладки на площади 8,7 га.
Патографические признаки поражения обнаружи-
ваю
тся в течении вегетационного периода – с мая по
октябрь. Побеги принимают S-образную форму, одна-ко изменения окраски не наблюдается. В отдельных случаях на таких побегах можно наблюдать вытянутые до 1,5 см тёмно-бурые некротические отмершие учас-тки. Хвоя при этом не имеет признаков поражения, что затрудняет диагностику заболевания. Кора побегов трескается, шелушится.
Микроскопическое исследование эпидермиса по-
бегов и оснований хвоинок выявило наличие прорвав-шихся чёрно-бурых, овальных пикнид. Одновременно на хвоинках наблюдались бурые перетяжки, выше ко-торых кончики бурели.
В результате отмирания побегов при сильном и не-
однократном поражении происходит потеря прироста в высоту и деревья становятся многовершинными. Ис-точником инфекции являются отмершие побеги с раз-вивающимся на них грибом.
В настоящий период болезнь изучена недостаточно
и наши исследования не расходятся с мнениями дру-гих авторов по вопросу распространения заболевания в лесорастительных условиях с песчаными и супес-чаными почвами. Развитию болезни благоприятству-ют загущенная посадка, а также тёплая и засушливая погода, которая наблюдалась в регионе в течении ряда последних лет.
В связи с возможностью появления эпифитотий
этой болезни актуальным является изучение динамики развития патогена в связи с различными экологически-ми условиями в Новгородской области, а также роли побеговьюнов в этом процессе.
Фитопатогенные грибы 189
Видовое разнообразие и ареал грибов рода Fusarium
наиболее широко исследованы на злаках, в меньшей
степени
– в ризосфере и ризоплане сеянцев в лесных
питомниках. Степень распространения и сохраняе-мость различных видов рода Fusarium обеспечивается
их биологическим циклом развития и существенно за-висит от биоэкологических, географических и почвен-ных условий региона.
Исследование видового разнообразия осуществля-
ли в почвенных, растительных и семенных образцах, полученных из 18 лесных питомников, которые распо-ложены в четырех лесорастительных зонах Средней Сибири (Красноярский край) и двух лесораститель-ных зонах Южной Сибири (Республика Тыва). Почвы исследуемых питомников характеризуются хорошей обеспеченностью гумусом, значение рН варьирует от нейтрального до кислого; при повышенной влажности и высокой плотности сеянцев создаются благоприят-ные условия для активного распространения возбуди-телей фузариоза.
Видовой состав и представленность видов рода
Fusarium в Средней и Южной Сибири существенно различаются, при этом определяющими факторами их распространения, вероятно, являются экологичес-кие условия выращивания и породный состав сеянцев хвойных. Максимальное количество видов (11) отме-чено в
одной лесорастительной зоне – травяные леса
с островами лесостепи, что, обусловлено наиболее благоприятным сочетанием различных экологических факторов.
В почвах большинства лесных питомников Сред-
ней Сибири доминирует вид Fusarium sporotrichioides;
типичным частым является F . chlamydosporum; ти-
пичными ре
дкими и случайными – F . oxysporum, F .
semitectum, F . sambucinum, F . dimerum, F . heterosporum
и F . lateritium. На растительных тканях превалируют
виды F . avenaceum и F . verticillioides , реже встреча-ют
ся – F .acuminatum, F . nivale, F . solani, F .oxysporum
и F . chlamydosporum . На семенах Picea obovata L.,
larix
sibirica L. и Pinus sylvestris L. доминирует вид
F . sporotrichioides, регулярно присутствуют виды
F . avenaceum, F . heterosporum, F . verticillioides, F . oxysporum, F . solani и F . sporotrichioides; ре
дко – F .
chlamydosporum и F . semitectum.
В почвах лесных питомников Южной Сибири
виды рода Fusarium не входит в ядро доминирующих
видов; типичными частыми являются F . equiseti и F .
heterosporum, типичными ре дкими – F . lateritium, F .
chlamydosporum и F . culmorum. На семенном и расти-
тельном материале larix sibirica L. регулярно присутс-
твуют виды F . sambucinum, F . oxysporum , реже встреча-
ют
ся – F . verticillioides и F . chlamydosporum.
Штаммы, распространенные в почвах и расти-
тельных остатках, характеризуются различными тем-пературными оптимумами. Установлены внутри- и межвидовые различия по радиальной скорости роста при различных температурах (5–35±2 °С). Для боль-шинства изученных штаммов оптимальная температу-ра составила 20±2 °С, длительность культивировании до выхода на стационарную фазу роста 6–9 суток. При температ
уре 10 и 35±2 °С скорость роста большинс-
тва штаммов замедляется в среднем в 2–2,2 раза, од-нако обнаружены эвритермные культуры, растущие в широком температурном диапазоне без достоверных отличий.
Таким образом, устойчивость некоторых сибир-
ских штаммов к резким температурным колебаниям, способность синтезировать токсины и ферменты ли-тического действия, сохраняемость и распростране-ние в виде хламидоспор и склероциев, а также высо-кая плотность популяций в почве, на растительном и семенном материале создают потенциальные резерву-ары инфекции и угрозу возникновения эпифитотий в лесных питомниках.ВИДОВОЙ СОСТАВ ГРИБОВ РОДА FuSarium В ЛЕСНЫХ
ПИТОМНИКАХ СРЕДНЕЙ И ЮЖНОЙ СИБИРИ
Литовка Ю.А.1, Шалаева Т.А.2
1 Сибирский государственный технологический университет,
красноярск
2 Сибирский федеральный университет,
красноярск
ИЗУЧЕНИЕ МИКОПАР АЗИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МИКРООРГАНИЗМОВ –
АНТОГОНИСТОВ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
Лукаткин А.А., Ибрагимова С.А.
Мор
довский государственный университет им. Н.П.огарева, Биологический факультет,
Саранск
Инфекционность паразитарных болезней обуслов-
лено способностью фитопатогенных организмов вызы-вать заражение, а также быстрым и массовым размно-жением и распространением их от больных растений к здоровым. Инфекционные болезни растений значи-тельно снижают продуктивность сельскохозяйствен-ных культур и ухудшают качество собранного урожая. Биологическая защита растений составляет направлен-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 190
ное использование эволюционно сложившихся в при-
роде межвидовых взаимоотношений. Преимущества органических веществ, метаболитов живых существ перед
пестицидами и химическими удобрениями – это
их комплексное позитивное действие и высокая эф-фективность, что позволяет вносить биопрепараты в минимальных дозах. Являясь природными вещества-ми, они не накапливаются в окружающей среде и лег-ко утилизируются в ней. Часть необходимых веществ можно не вносить в готовом виде, а производить пря-мо на месте потребления, используя живые существа. Естественно, для этой цели более пригодны микроор-ганизмы.
На кафедре биотехнологии ведутся работы по под-
бору оптимальных условий культивирования бактерий рода Pseudomonas на послеспиртовой барде и ооми-
цета Pythium oliigandrum, и их влиянию на фитопато-
генные грибы. Было проведено совместное культиви-рование Pseudomonas и Pythium с фитопатогенными
грибами botrytis ciner
ea и Fusarium spp. Антагонизм,
осуществляемый P . oliigandrum, включает действие
гидролитических ферментов на клеточную стенку и зависит от вида-хозяина. Из-за своих сильных микро-паразитических и конкурентных способностей, подав-ляет рост и развитие многих почвенных патогенных грибов, вызывающих выпревание и гниение корней и нижней части растений. Антагонистические свойства бактерий Pseudomonas обусловлены не только синте-зом антибиотиков, но представляют собой сложный комплекс, включающий образование белковых соеди-нений и пептидов группы бактериоцинов и микроци-нов, литических ферментов, сидерофоров и других биологически активных соединений.
При сов
местном культивировании p. oliigandrum и
fusarium spp. до 3-х суток роста отмечался рост пос-
леднего. В свою очередь Р . oliigandrum формировал разветвленный мицелий, стелющийся по всей поверх-ности
среды. При соприкосновении с которым fusari-
um spp. прекратил рост и в дальнейшем не развивался. При сов
местном культивировании pythium oliigandrum
и Botrytis cinerea нами не было отмечено антогонисти-ческого воздействия.
При к
ультивировании на среде Чапека-Докса pseu-
domonas и Botrytis cinerea было ярко выражено антого-нистическое влияние бактерий. При контакте грибных гиф с бактериями наблюдалось отсутствие зоны роста гриба. В дальнейшем развитие гриба полностью по-давлялось при тесном взаимодействии с бактериями. При сов
местном культивировании pseudomonas spp. и
fusarium отрицательное воздействие бактерий на раз-витие гриба проявлялось в большей степени.
Результаты проведенной работы показали, что
ст
епень воздействия бактерий pseudomonas и ооми-
це
та p. oliigandrum на рост и развитие грибов Botrytis
cinerea и fusarium spp. различна зависит от вида фи-
топатогена.
МОЛЕКУ ЛЯРНЫЕ ПОДХОДЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ
РЖАНОЙ ФОРМЫ ВОЗБУДИТЕЛЯ СТЕБЛЕВОЙ РЖАВЧИНЫ
ЗЛАКОВ Puccinia G raminiS f.sp. SecaliS
Малеева Ю.В.
кафедра молекулярной биологии
Биол
огического факультета МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
В России, где значительные площади заняты
рожью, ежегодно отмечается развитие стеблевой ржав-чины ржи.
Возбудитель этого заболевания – P . grami-
nis f.sp. secalis – биотрофный базидиомицет, имеющий
довольно широкий круг растений-хозяев. Гриб, пере-зимовав в урединиостадии на диких злаках, часто ста-новится источником инфекции в агроценозах. Кроме того, на диких злаках существуют «собственные» спе-циальные формы, например, P . graminis f.sp. agropyri и
другие (Ульянищев, 1975).
Анализ первичной последовательности ITS участ-
ка
области рибосомных генов не позволил (zambino,
Szabo, 1993) дифференцировать ржаную и пшеничную формы P .graminis, разделив вид на две подгруппы:
1
– P .graminis ff.sp. secalis, tritici и 2 – P .graminis ff.sp.
avenae, dactylis , lolii, poae. По нашим данным (Мале-
ева и др., 2005) по сиквенсу того же участка отлича-ются изоляты ржаной формы P .graminis, собранные с
разных злаков (Phleum, lolium, e
lytrigia ). эти изоляты
четко отличаются и по RApD-спектрам.Для P . graminis с помощью рестрикционного анали-
за и гибридизации по Саузерну с плазмидой, содержа-щей гены рРНК аскомицета neur
ospora crassa, постро-
ена физическая карта области рибосомных генов, и по данным сравнительного анализа первичной структуры этой области в 3’-спейсере (IGR-1), примыкающем к гену большой субъединицы рибосомы, локализован ген
5S РНК (kim et al., 1992). В этой работе описан
полиморфизм IGR-1 спейсера для разных рас гриба.
По нашим данным IGR-1 участок области рибо-
сомных генов может быть использован для выявления ржаной формы возбудителя стеблевой ржавчины зла-ков среди изолятов гриба на уредостадии (Сколотнева и др., 2008). Молекулярная характеристика особенно важна именно для ржаной формы P .graminis, т.к. оха-
рактеризовать изменчивость P . graminis f.sp. secalis
по частотам генов вирулентности, в отличие от пше-ничной и овсяной форм, нельзя из-за нестабильности сортов-дифференциаторов перекрестно-опыляемого растения ржи.
Фитопатогенные грибы 191
Рибосомные гены эукариот представлены в гено-
ме тандемно расположенными кластерами, каждая
единица которых содержит нетранскрибируемую ли-дерную последовательность с промотором и точкой начала транскрипции, гены малой и большой субъ-единиц рибосомы, транскрибируемый спейсер между ними, часто содержащий ген 5,8S, и спейсер с точкой терминации транскрипции. Часто встречаются псев-догены и малоактивные копии. Межгенные спейсеры насыщены регуляторными элементами, повторами, вторичная структура которых важна для узнавания белковыми факторами, обеспечивающими точность вырезания и последующего сплайсинга РНК при со-зревании транскриптов. Приспособление паразита к определенным условиям существования на питающем растении может, по-видимому, приводить к структур-ному полиморфизму в регуляторных участках области рибосомных генов, обеспечивая различную скорость и динамику синтеза белка в различных условиях, что особенно важно при различных условиях зимовки гри-ба и при переходе от одной стадии жизненного цикла к другой.
УСТОЙЧИВОСТЬ СОРТОВ ХЛОПЧАТНИКА ВИДА
G.Hir
SuTum L. И G.barbaden Se L. К ВИЛТУ
НА ИСКУССТВЕННО-ИНФЕКЦИОННОМ ФОНЕ
Мамедова Н.Х.
Институт Генетических Ресурсов НАНА,
Баку, Азербайджан
Хлопчатник – Gossipium L. является ведущей куль-
турой в сельском хозяйстве, и на современном этапе социального и экономического развития поднятие уро-жайности хлопковых плантаций приобретает важное значение. Растущий спрос на хлопковую продукцию стимулирует генетико-селекционную работу с культу-рой хлопчатника.
Интенсивность земледелия предъявляет к вновь
создаваемым сортам хлопчатника видов G.hirsutum L.
и G.barbadense L. особые требования.. Они должны
быть высокопродуктивными, отзывчивыми на удоб-рения, иметь высокое качество волокна, обладать ус-тойчивостью к вилту, черной корневой гнили и другим болезням, т.е. отличаться комплексом признаков, опре-деляющих их пригодность для возделывания и требо-ваний текстильной промышленности.
Особо важным признаком у сортов хлопчатника
является вилтоустойчивость. Как известно, вертицил-лезный вилт наносит большой ущерб хлопководству. Ежегодно потери урожая составляют около 600 тыс тонн хлопк
а-сырца.
Возбудитель вертициллезного вилта хлопчатни-
ка
– гриб Verticillium dahliae klebahn. э то почвенный
организм из класса несовершенных грибов, поражает 400 видов растений, относящихся к различным се-мействам. Признаком заболевания является появление желтоватых пятен на листьях нижнего яруса куста, которые беспорядочно разбросаны по листовой плас-тинке, оставляя лишь небольшую зеленую часть око-ло жилок. Затем листья буреют и подсыхают с обра-зованием никрозов. Болезнь распространяется снизу вверх, охватывая новые листья, которые засыхают и постепенно опадают.
Нами проводилась фитопатологическая оценка
вилтоустойчивости коллекционных сортов хлопчатни-ка, относящихся к видам G.hirsutum L. и G.barbadense
L. на искусственно зараженном фоне, отличающиеся различными происхождениями и хозяйственно-полез-ными признаками.
Из вида G.hirsutum L. было исследовано 335, а из
вида G.barbadense L. 135 сортообразцов хлопчатника. Оценка устойчивости сортов к болезни проводилась по методике Т.Л.Доброзраковой. Наблюдения прово-дились на различных этапах вегетационного развития хл
опчатника.
Оценка устойчивости сортов хлопчатника пока-
зала различную чувствительность растений к болез-ни, что позволило выявить наиболее устойчивые. Из вида G.hirsutum L. 200 сортов были толерантными, чт
о составило 59,7 %, 68 сортов – восприимчивыми
т.е. 20,3 % и 16 сильновосприимчивыми – 4,8 %.
По виду G.barbadense L. 72 сорта были толерант-
ными
– 53,3 %, восприимчивыми были – 7 сортов т.е.
5,2 % и сильновосприимчивыми 2 сорта, что состави-ло 1,5
%.
Устойчивость к вертициллезному вилту объясняет-
ся экологическим происхождением и генетическими свойствами образца. Считается, что свойство устойчи-вости при внутрисортовом скрещивании повышается. Также устойчивость хлопчатника к вилту значитель-но зависит от варьирования окружающих природных условий, создаваемых вегетационными поливами, применением минеральных удобрений и другими ме-роприятиями. Начало появления фитоалексинов, за-щитной реакции растений на внедрение паразита при заражении устойчивого и неустойчивого сортов оди-наково, однако продолжительность образования их у устойчивых сортов большая.
Как видно из наших данных у вида хлопчатника
G.barbadense L. процент поражаемости был намно-го ниже, чем у вида G.hirsutum L. то есть сорта вида
G.barbadense L. более устойчивы к этому парази-
ту
. это можно объяснить тем, что возбудитель вилта
грибки V .dahliae klebahn не паразитирует на видах
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 192
Исследования грибов, обитающих в пораженных
корнях лекарственных и прянных растений проводи-
лись в натуральных биотопах и коллекциях Станции полевых опытов Института ботаники, Ботанических садов Вильнюcского университета и Университета Витаутаса Великого, Института садоводства и овоще-водства. Для анализа были собраны образцы 23 видов (arthemisia
dranunculus L., dracocephalum moldavicum
L., Hyssopus officinalis L., lavandula angustifolia Mill,
majorana
hortensis Moench., marrurbium vulgare L.,
melisa
officinalis L., mentha x piperita ‘Иernolistnaja’,
m. x piperita ‘zgadka’, monarda didyma L., origanum
vulgar
e L., nepeta catara l., Prunella vulgaris l.,
Seturëja hortensis L., Salvia officinalis L., Thymus x
citriodorus (p ers.) Schreb., T. x oblongifolium Opiz., T.
pannonicus All., T. pulegioides L., T. serpyllium L. em.
fries, T
. sibthorpii Berth., T. vulgaris L., Thymus sp.) рас-
тений семейства lamiaceae Lindl. Из пораженных кор-
ней собранных растений по общепринятым методикам выделенные монокультуры были определены по их культуральным и морфологическим признакам и вы-числена частота встречаемости (ЧВ) и относительная плотность (ОП) выявленных видов.
Результаты исследований показали, что микобиота
корней лекарственных и прянных растений обильна и разнообразна. В пораженных корнях исследуемых рас-тений обнаружены микромицеты 44 таксонов, прина-длежаших к 28 родам (Acremoniella Sacc., Acremonium Link, Alternaria
Nees, Aspergillus Link, Botrytis p.
Micheli ex pers., Chaetomium kunze: fr., Cylindrocarpon
Wollenw., Cladosporium Link, Chrysosporium Corda, Dendryphion W
allr., fusarium Link, Gliocladium Corda,
Monilia Bonord., Mortierella Coem., Nattrassia B. Sutton et Dyko, p
enicillium Link, phytophthora de Bary, phoma
Sacc., phomopsis (Sacc.) Bubбk, Rhizoctonia DC, Septonema Corda, Sporidesmium Link: fr., Sporotrichum
Link: fr., Wallr., Talaromyces C. R. Benj., Thielaviopsis
Went., Trichoderma pers.: fr., Ulocladium preuss,
verticillium Nees). Среди них наиболее часто встре-
чались
Talaromyces flavus (klцcker) Stolk et Samson
(ЧВ 38,8 %, ОП 12,7 %), phoma spp. (ЧВ 35,8 %,
ОП 11,7 %), Rhizoctonia spр.(ЧВ 23,9 %, OП 7,8 %), Alternaria alternata (fr.) keissl. (ЧВ 19,4 %, ОП 6,3 %).
эти микромицеты были обнаружены в корнях 13, 8, 12 и 10 видов исследуемых растений, соответственно.
Cpeди наиболее часто встречаемых были и мик-
ромицеты
рода fusarium: ОП их изолятов достигала
33,2 %. Десять видов и три разновидности микроми-цетов, принадлежащих этому роду, были выявлены в пораженных корнях исследуемых растений. Наиболее часто
встречались fusarium avenaceum (fr.) Sacc. (ЧВ
25,4 %), f. sambucinum var. sambucinum fuckel (ЧВ
19,4 %), f. oxysporum Schltdl. (ЧВ 17,9 %), изоляты ко-
торых
составили 61,8 % от общего числа fusarium изо-
лятов.
Часто встречались f. oxysporum var. orthoceras
(Appel et Wollenw.) Bilai (ЧВ 9,0 %), f. solani (Mart.)
Sacc. (ЧВ 7,5 %), f. sambucinum fuckel (ЧВ 6,0 %). Фу-
зарии были обнаружены в корнях 17 видов растений.
Исследования показали, что в корнях лекарственных
и прянных растений семейства lam iaceae обитает ком-
плекс микромицетов, спеди которых встречаются как паразиты, активно участвующие в процессе поражения и разрушения корней, так и сапротрофы, усиливаю-щие разрушение пораженных корней, не являясь пер-вичной причиной этого процесса. В корнях ori
ganum
vulgare обнаружены микромицеты 23, в корнях Thymus
x
citriodorus – 14, T. pulegioides – 13, T. pannonicus . – 10
таксонов. ori ganum vulgare и Thymus spp. являются най-
более чувствительными к воздействию возбудителей корневых гнилей и сильно ими поражаются.G.barbadense L. э
тот вид имеет устойчивый ген про-
тив вилта и может быть использован в гибридизации в качестве доноров устойчивости к вертициллезному вилту.
МИКОБИОТА ЛЮПИНА БОТАНИЧЕСКИХ САДОВ ГОРОДА ВОРОНЕЖА
Мелькумова Е.А., Мануковская Т.В.
вороне
жский государственный аграрный университет им. к. Д. Глинки,
воронеж, Россия
Род Lupinus L. объединяет разнообразие травя-
нистых однолетних и многолетних растений, кото-рые незаменимы в качестве высокобелковых кормо-вых, пищевых, почвоулучшающих и декоративных культур. Однако люпин достаточно сильно воспри-имчив к микозам. Для успешной защиты от них не-обходимо идентифицировать патогены с учетом их биологии.ГРИБЫ ОБИТАЮЩИЕ В ПОР АЖЕННЫХ КОРНЯХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ
И ПРЯННЫХ Р АСТЕНИЙ СЕМЕЙСТВА lamiaceae LINDL.
Мачкинайте Р.
Институт ботаники,
вильнюс, литва
Фитопатогенные грибы 193
Изучение микозов на видах рода Lupinus L. про-
водилась на коллекционных участках ботанических
садов Воронежского государственного университета (ВГУ) им. проф. Б.М. Козо-Полянского, Воронежского госагроуниверситета (ВГАУ) им. проф. Б.А. Келлера, а также на биостанции Воронежского государственного педуниверситета (ВГПУ) и Воронежской областной станции юных натуралистов.
В ботанических садах созданы коллекции раз-
личных видов люпина, семена которых получены из Ближнего зарубежья: Украины (г. Житомир), Беларуси (г. Минск), Грузии (г. Тбилиси).
На коллекционных участках ботанического сада
ВГУ представлены 14 видов Lupinus L., происходящих из трех генцентров: Северо- и Южноамериканских и Средиземноморского. В коллекции ботанического сада ВГАУ есть виды не встречающиеся в ботаничес-ком саду ВГУ .
В результате микологических обследований 14 видов
рода Lupinus L. выявлено 29 видов грибов, относящихся к 26 родам, 10 семействам, 6 порядкам, и 3 классам.
Класс Ascomycetes представлен 5 видами: Erysiphe
communis Grev
. f. lupini Roum., Axinia spadicea fuck.,
Mycosphaerella sp. Johans, physalospora coccodes ( Lev.)
Sacc., pleospora leguminum fuck. Sacc. Для вида Е.
communis f. lupini Roum. Имеет место конидиальная стадия Oidium sp., относящийся к классу Deuteromyce-tes. Для Mycosphaerella sp. анаморфой служит Septoria kaznowskii M. Nikol.Класс
Basidiomycetes представлен только одним
видом: Uromyces lupinucola Bub.
Самым многочисленным в видовом отношении яв-
ляется класс Deuteromycetes.
Наибольшее число насчитывает порядок Monili-
al
es, представленный 14 видами: fusarium avenaceum
(fr) Sacc., fusarium sp., penicillium sp. Link, Ramularia
lupini Davis., Alternaria fasciculata (Cke. et Ell) Jones. еt Cr
out., A. tenuis Ness., Ceratophorum setosum kirchn.,
Cladosporium sp. Link, fumago vagans pers., Hel-
mi
nthosporium rhopaloides fr., Heterosporium herbarum
Sacc., Hormiscium sp. Barnett., papularia sphaerosper-
ma
( pers.) v. Hohn., Stemphylium sarciniforme ( Gav.)
Wiltsch.
Порядок Sphaeropsidales представлен 7 видами: Ca-
marosporium sp.
Schulz., Macrophoma sp. Berg. et vogl.,
phoma herbarum West., phomopsis leptostromiforme (
kuhn.) Bub., phyllosticta lupini Siem., phyllosticta lupini-
cola Roth., Septoria k
aznowskii M. Nikol.
Самым малочисленным в видовом отношении яв-
ляется порядок Melanconiales, содержащий всего два вида: Cylindrosporium
lupini Ell. et Ev., vermicularia de-
matium ( p
ers.) fr.
Наиболее распространенными и вредоносны-
ми возбудителями в условиях г. Воронежа являются Uromyces lupinicola, Ceratophorum setosum и Septoria kaz
nowskii. Для этих видов грибов прослежен ритм
развития в течение вегетационного сезона, изучены отдельные факторы среды и их специализация.
ПОПУ ЛЯЦИИ PHYT oPHTHora inFeST anS В РЕСПУБЛИКЕ МАРИЙ эЛ
Милютина Д.И., Шеин С.А., Апрышко В.П., Еланский С.Н.
Моск
овский государственный университет им. ломоносова,
Москва
phytophthora infestans (Mont). de Bary – возбуди-
тель фитофтороза картофеля и томата, одной из самых вредоносных болезней этих растений во всем мире. В картофелеводческих регионах России фитофтороз вызывает
потери в среднем 10 % урожая картофеля, а
в эпифитотийные годы – до 30 %. Потери урожая то-матов при эпифитотийном развитии в центральных и северо–западных регионах РФ и в Беларуси могут до-стигать
100 %. Сведения о структуре популяций воз-
будителя фитофтороза интересны не только в теорети-ческом плане, но и важны при разработке схем защиты культур от заболевания.
Выделения из
олятов в республике Марий эл про-
водились в 2004 и 2007 годах. В 2004 году проведе-но выделение из пораженных фитофторозом плодов то
мата, в 2007 году – из листьев картофеля и плодов
томата. Всего выделено 125 изолятов (17 в 2004 и 61 в 2007 году). У всех выделенных изолятов был опреде-лен тип
спаривания, у выделенных в 2007 году – также
спектр изоферментов пептидазы. Часть изолятов была протестирована на устойчивость к фунгицидам мета-лаксил и манкоцеб.Изучение типов спаривания исследованных штам-
мов проводилось на агаризованной овсяной среде ме-тодом попарного сращивания с тестерными штаммами с известным типом спаривания. Определение устойчи-во
сти к фунгицидам – на агаризованной овсяной среде
с добавлением различных концентраций фунгицида относительно скорости роста на среде без фунгицида. Изучение спектров изоферментов пептидазы с помо-щью электрофоретического разделения на целлюлозо-ацетатных гелях (Elansky, Smirnov, 2004).
Проведенные исследования показали, что в Марий
эл в
стречаются штаммы с обоими типами спаривания.
Соотношение А1:А2 составило в 2004 году (выделение с пло
дов томата) 35:65, в 2007 году – с плодов томата
47:53, с листьев картофеля – 25:75.
Локус pep1 был представлен двумя генотипа-
ми:100/100 и 92/100 (один изолят с листьев картофе-ля), причем 100/100 встречался гораздо чаще. Штам-мов с генотипом 92/92 среди исследованных не было обнару
жено. Локус pep2 был представлен тремя ге-
нотипами: 100/100, 100/112 и 112/112. Соотношение 100/100:100/112:112/112 составило в 2007 году: на по-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 194
пуляции с плодов томата 50:8:42, с листьев картофе-
ля
– 60:40:0.
На основании типов спаривания и спектра изо-
ферментов пептидазы был проведен генотипический анализ. Для удобства учета генотипы были закодиро-ваны согласно следующей схеме (тип спаривания: ге-нотип p
ep 1: генотип pep 2): А1:100/100:100/100=111,
А1:100/100:100/112=112, А1:100/100:112/112=113, А2:100/100:100/100=211, А2:100/100:100/112=212. В популяции
Марий эл с плодов томата (2007 г.) встре-
чались
генотипы 111 (6 %), 112 (6 %), 113 (47 %), 211
(35 %), 212 (6 %), с листьев картофеля – 111(7 %), 112 (7 %), 211 (36 %), 212 (43 %).
Во всех исследованных популяциях присутствова-
ли штаммы, различающиеся по уровням устойчивости к фунгицидам металаксил и манкоцеб. В некоторых пораженных фитофторозом растительных образцах были обнаружены ооспоры, что свидетельствует в пользу возможности полового процесса и гибридиза-ции в естественных условиях.
Таким образом, можно констатировать, что попу-
ляции P . infestans в республике Марий эл
отличаются
высоким генотипическим разнообразием. Проанализи-ровав сравнительно небольшие выборки из популяций на плодах томата и на листьях картофеля, мы выявили штаммы, различающиеся по типам спаривания, гено-типам изоферментов пептидазы, устойчивости к фун-гицидам. Высокое генотипическое разнообразие может способствовать появлению в результате полового про-цесса высокоагрессивных и устойчивых к фунгицидам штаммов. Работа выполнена при поддержке грантов РФФИ 07–04–96622 р_поволжье_а и 07–04–00274.
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ СТРУКТУР А ПОПУ ЛЯЦИЙ
COCHLIOb
OLUs sATIvUs, ПАР АЗИТИРУЮЩИХ НА ПШЕНИЦЕ
Мироненко Н.В., Смурова С.Г., Михайлова Л.А.
ГНУ в
сероссийский НИИ защиты растений,
Санкт-Петербург-Пушкин
Гриб c. sativus является возбудителем темно-бурой
пятнистости ячменя и пшеницы и вызывает значи-тельные потери урожая (Wilcoxson et al., 1990; Здра-жевская, Шугуров, 1991). В патосистеме пшеница-c.sativus
дифференциальные отношения отсутствуют
либо очень слабые (Михайлова и др., 2002; Duveiller, Altamarino, 2000), что делает невозможным изучение популяций патогена, поражающих пшеницу, по ви-рулентности. Поэтому для изучения структуры попу-ляций c.
sativus целесообразно использовать молеку-лярные маркеры, которые могут дать информацию о степени генетической изменчивости внутри и между популяциями патогена и роли влияния географическо-го фактора и генотипа растения-хозяина на структуру популяций.
Целью данного исследования было оценить сте-
пень генетического разнообразия с помощью метода RAp
D в группах изолятов c. sativus, выделенных из
пораженных листьев образцов пшеницы разного гео-графического происхождения.
Материалом исследования служили группы моно-
конидиальных изолятов гриба, выделенных из листьев пшеницы, пораженных темно-бурой пятнистостью: 14 изолятов из Ленинградской обл., 16 из Приморского края, и 13 из Хейлунцзянской провинции Китая.
Изоляты трех популяций генотипировали с помо-
щь
ю праймера O pI-10. Анализ генетической измен-
чивости проводили по 10 полученным с этим прай-мером полиморфным фрагментам. Популяции Китая и Приморского края характеризовались наличием вы-со
кой клональной фракции (76,9 и 81,3 %) в отличие
от популяции из Ленинградской области, в которой кл
ональная фракция составила всего 7,1 %. Самое
высокое генетическое разнообразие (13 генотипов) обнаружено в популяции из Ленинградской обл. На основании этих данных можно сделать вывод о су-ществовании генетических различий между популя-цией патогена из Ленинградской обл. и 2-мя другими популяциями.
Генетически родственные популяции Китая и При-
морского края изучили также с использованием двух других
случайных праймеров – Op A-20 и Op A-08.
Всего (вместе с праймером OpI-10) было выявлено 24 RApD локуса, из которых 11 были полиморфными. На основании полиморфизма продуктов амплифика-ции было идентифицировано 13 генотипов. Основную часть изолятов из Приморского края составила кло-нальная
фракция (62.5 %). В группе китайских изоля-
тов клональная фракция оказалась значительно мень-шей
– 15,4 %. В обоих группах выявлены уникальные
генотипы, за счет которых, видимо, получен высокий индекс
генетической дифференциации fST = 0.25, что
свидетельствует о существовании достоверных разли-чий между этими популяциями.
Таким образом, географически отдаленные популя-
ции c.sativus имею
т различную генетическую струк-
туру. Очевидно, что различия в генотипическом соста-ве популяций должны также отражаться на свойствах вирулентности и агрессивности изолятов, их составля-ющих.
Фитопатогенные грибы 195
Гемибиотрофный патоген – аскомицет cochliobolus
sativus (Ito & k uribayashi) Drechs. ex Dastur (анаморфа:
bipolaris sorokiniana (Sacc.: Sorok.) Shoem.) является
возбудителем темно-бурой пятнистости у многих зла-ковых. В природе не обнаружена совершенная стадия гриба, но ее можно получить в лабораторных услови-ях. Дифференциальные взаимоотношения доказаны в пат
осистеме ячмень – c. sativus (Левитин и др., 1985;
valjavec-Gratian, Stef
fenson, 1997), но они остаются
сомнительными для другой патосистемы – пшени-ца
– c. sativus (Михайлова и др., 2002; Duveiller, Alt-
amarino, 2000). Тем не менее, нам удалось подобрать изоляты гриба с различной вирулентностью к устой-чивой канадской линии пшеницы 181–5.
Целью исследования было изучение наследования
признака вирулентности к данной линии у изолятов c.
sativus. Для этого были поставлены скрещивания
между вирулентными и авирулентными к линии 181–5 изолятами гриба.
Наследование признака вирулентности к линии
181–5 было изучено в потомстве от двух скрещива-ний
– Lb7 (авирулентный к 181–5) х 7T-48 (вирулентно-
го
к 181–5) и ND90pr (авирулентный) х ND93–1 (виру-
лентный). Расщепление по вирулентности в потомстве от скрещивания Lb7 х 7T-48 составило 31а:14в, что близко к теоретически ожидаемому расщеплению 3:1 (ч
2 =0,78, p≥0,05) и соответствует дигенному наследо-
ванию признака или наличию 2-х доминантных генов авирулентности у изолята Lb7.
Расщепление по вирулентности в аскоспоровом
пот
омстве от скрещивания ND90pr х ND93–1 было
равным 44а:17в, что также близко к теоретически ожи-даемому
расщеплению 3:1 (ч2 =0,25, p≥0,05), соот-ветствует дигенному наследованию признака, т.е. су-ществованию 2-х доминантных генов авирулентности у изо
лята ND90pr.
Функциональный тест на аллелизм у этого гриба
выполнить невозможно, поскольку он является гап-лоидом в течение всего жизненного цикла, за исклю-чением зиготы, образующейся в момент оплодотворе-ния. К этому грибу применим рекомбинационный тест на аллелизм (в данном случае на идентичность генов авирулентности), который заключается в анализе рас-щеплений по вирулентности в аскоспоровом потомс-тве гриба к устойчивой линии пшеницы 181–5.
Для объяснения результатов расщепления в потомс-
тве 2-х выше названных скрещиваний было выдвину-то 3-х гипотезы: 1) оба авирулентных изолята Lb7 и ND90p
r имеют идентичные гены авирулентности к ли-
нии 181–5; 2) каждый изолят имеет по 2 независимых гена авирулентности (всего 4 гена авирулентности); 3) каждый изолят имеет один общий и один независимый ген авирулентности (всего 3 гена). Для проверки этих гипотез было поставлено скрещивание между двумя авирулентными к линии 181–5 «родительскими» изо-лятами
Lb7 и ND90pr. В потомстве от данного скре-
щивания получено расщепление по вирулентности к линии
181–5 – 57а:2в, что близко к теоретически
ожидаемому расщеплению 15:1 и соответствует четы-рехгенному наследованию признака (ч
2 =0,19, p≥0,05)
у гаплоидного организма, т.е. доказывает существова-ние у каждого изолята 2-х независимых генов авиру-лентности.
Данное исследование является первым необходи-
мым этапом в изучении генетики взаимоотношений в патосистеме пшеница-C.sativus.НАСЛЕДОВАНИЕ ВИРУ ЛЕНТНОСТИ К УСТОЙЧИВОЙ ЛИНИИ
ПШЕНИЦЫ 181–5 У ИЗОЛЯТОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТЕМНО-
БУР
ОЙ ПЯТНИСТОСТИ COCHLIObOLUs sATIvUs
Мироненко Н.В., Михайлова Л.А.
ГНУ в
сероссийский НИИ защиты растений,
Санкт-Петербург, Пушкин
СТРУКТУР А ПОПУ ЛЯЦИЙ ВОЗБУДИТЕЛЯ Р АКА КАРТОФЕЛЯ
ПО ДНК МАРКЕР АМ И ВИРУ ЛЕНТНОСТИ
Мироненко Н.В., Хютти А.В., Афанасенко О.С.
ГНУ всероссийский НИИ защиты растений,
Санкт-Петербург-Пушкин
Выявление закономерностей микроэволюцион-
ных процессов в популяциях паразитов является од-ной из основных проблем современной фитопатоло-гии. Возбудитель рака картофеля, хитридиомицетный гриб
– Synchytrium endobioticum (Schilb.) p ercival – об-
лигатный внутриклеточный паразит, который является сложным объектом для популяционных исследований. Молекулярно-генетические исследования этого важ-ного карантинного объекта касались только разработ-ки молекулярной диагностики вида паразита в почве и растении (Levesque et al., 2005; Niepold, Stachewicz, 2004; van den Boogert et al., 2005; Abdullahi et al., 2005). Исследования этого паразита на популяционном уров-не с использованием молекулярных маркеров отсутс-твуют.
Целью данной работы являлось изучение структу-
ры популяций возбудителя рака картофеля различного географического происхождения с помощью методов
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 196
генотипирования RApD (Williams et al., 1990) и УП-
ПЦР (Булат, Мироненко, 1990).
Материалом исследования служили раковые нарос-
ты четырех популяций из Ленинградской и Московс-кой обл., Белоруссии и Украины.
ДНК из раковых наростов является смесью ДНК
паразита и растения-хозяина. Наличие ДНК паразита в смешанных образцах ДНК было доказано методом ПЦР с видоспецифичными для S. endobioticum прай-мерами (van den Boogert et al., 2005). Диагностические для паразита продукты амплификации размером 472 п.о. были обнаружены только в образцах ДНК раковых наростов, но отсутствовали в здоровом растении.
Спектры ДНК раковых наростов, амплифициро-
ванной со случайными праймерами, оказались очень сходными (или идентичными) со спектрами ДНК растения-хозяина. Продукты амплификации раковых наростов, отсутствующие в «контрольных» спектрах ДНК здорового растения, можно считать результатом амплификации ДНК паразита.
При генотипировании образцов 4-х популяций па-
разита с помощью 4-х подобранных праймеров было получено всего 6 полиморфных продуктов амплифи-кации, наличие (или отсутствие) которых характеризу-ет генотип паразита, доминирующий в анализируемом наросте. Всего среди 38 взятых в анализ раковых на-ростов выявлено 19 генотипов, которые неравномер-но распределились между популяциями. Распределе-ние генотипов паразита свидетельствует о локальном характере каждой популяции и отсутствии миграции между ними, что вполне объяснимо с позиций каран-тинного надсмотра за очагами инфекции.
Несмотря на то, что с использованием фитопатоло-
гического теста все 4 популяции отнесены к одному перво
му патотипу, с помощью RApD и УП-ПЦР ана-
лизов обнаружена генотипическая изменчивость внут-ри и между популяциями.
Полученные результаты позволяют предполагать
существование генетических различий между индиви-дуумами паразита внутри популяции, а также разли-чий между популяциями. В дальнейшем планируется использовать для ПЦР анализа образцы ДНК, получен-ные из наростов, образовавшихся от заражения клуб-ней отдельными «летними» зооспорангиями.
СР АВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПОПУ ЛЯЦИЙ PYrenoPHora TriTici-
rePenTiS ПО ПРИЗНАКУ ВИРУ ЛЕНТНОСТИ И RApD-МАРКЕР АМ
Михайлова Л.А., Тернюк И.Г., Мироненко Н.В.
ГНУ в
сероссийский НИИ защиты растений,
Санкт-Петербург, Пушкин
Желтая пятнистость, возбудителем которой являет-
ся аскомицет Pyrenophora tritici=repentis (Died.) Drechs,
в известна в России с 80-годов прошлого века. Пер-вые эпифитотии этой болезни отмечены на Северном Кавказе. Задача нашего исследования состояла в опре-делении структуры популяций патогена по вирулент-ности, сходства и различий популяций и уровня их ге-нетического разнообразия, что является необходимым условием создания сортов пшеницы с эффективной и стабильной устойчивостью к болезни. В 2006–2007 гг. изучены популяции, собранные в России в Краснодар-ском крае, на Северо-западе (Псковская и Новгородс-кая обл.), в Дагестане, в Омске, в Казахстане, в Канаде по признакам токсинообразования (Lamari, Bernier, 1989), виру
лентности и RApD-маркерам.
В канадском образце популяции обнаружены три
ра
сы, из которых раса 2, образующая токсин некроза ptr
ToxA, является доминирующей (70 %), а также изоляты
расы 1 (10 %) (токсин некроза ptr ToxA и токсин хлоро-
за
ptr ToxC) и расы 4 (не образующей токсины). В образ-
цах российских популяций обнаружены расы 1, 2, 4, 5 (ptr
ToxB), 6 ( ptr ToxC, ptr ToxB), 7 ( ptr ToxA, ptr ToxB)
и 8 ( ptr ToxA, ptr ToxC, ptr ToxB), из которых расы 1 и
2 являются доминирующими. Таким образом, изоляты канадской популяции образуют лишь два токсина, тог-да как изоляты из популяций, выделенных из пшени-цы, выращиваемой на территории Европейской части Ро
ссии, Финляндии и Казахстана – четыре токсина. это предполагает, что при наблюдающемся нарастании рас-пространения и развития желтой пятнистости на терри-тории Евразии вредоносность ее может оказаться выше, чем на североамериканском континенте.
При сравнении выборок изолятов по вирулентнос-
ти к 11 сортам пшеницы дополнительного набора диф-ференциаторов определено, что канадская популяция менее вирулентна, чем любая из популяций России, Казахстана и Финляндии. Средний показатель типа инфекции на этих сортах для канадских изолятов оце-нива
лся в пределах 0.40 – 3.20 балла, тогда как для де-
рбент
ской популяции – в пределах 0.92 – 3.58, красно-
дарской
– 1.14 – 4.00, северо-западной – 1.14 – 4.07.
эпифитотии желтой пятнистости в Канаде извес-
тны с 70-х годов прошлого века, тогда как на Север-ном
Кавказе – с 80-х годов. В северо-западном регионе
России, развитие болезни достигло заметного уровня лишь в последние 3–4 года. По нашему мнению, на-иболее высокой вирулентностью характеризуются изоляты из более молодых популяций. В нашем экспе-рименте популяции России, Казахстана и Финляндии более вирулентны, чем популяция Канады, популяции северо-западного региона более вирулентны, чем по-пуляции Краснодарского края и Дагестана.
Сходство между фенотипическим составом популя-
ций, оцененное по критерию Л. А. Животовского (1979), было низким как между близко расположенными попу-ляциями, к примеру, между популяциями Краснодарс-
Фитопатогенные грибы 197
кого края и Дагестана, так и далеко удаленными канад-
ской и европейскими, казахстанской и европейскими, а также популяциями северо-запада и юга России.
Различия между географически отдаленными по-
пуляциями
патогена показаны также с помощью RApD анализа (fST=0, 26–0,57). Высокая степень различий
по фенотипам вирулентности и ДНК-маркерам свиде-тельствует о малой вероятности обмена мигрантами между популяциями.
ПАТОГЕННАЯ МИКОБИОТА ЛЮЦЕРНЫ В УСЛОВИЯХ АРМЕНИИ
Нанагюлян С.Г., Согоян Е.Ю.
ерев
анский государственный университет, кафедра ботаники,
ереван, Армения
В Армении из бобовых кормовых культур распро-
странены виды клевера, люцерны, эспарцета, вики, донника и другие. Многие виды люцерны подвержены грибным заболеваниям. Поражаются различные части растений
– корни, корневая шейка, стебли, листья и
соцветия, что иногда приводит к полной гибели расте-ния. Грибные болезни обычно резко снижают урожай зеленой массы, вызывая преждевременное усыхание и отмирание растений.
Многолетние сборы и наблюдения грибных заболе-
ваний люцерны в Армении показали, что наиболее вре-доносной болезнью, ежегодно встречающейся во всех эколого-флористических областях Армении, является бу-рая пятнистость, вызываемая грибом Pseudopeziza medi-
ca
ginis ( lib.) Sacc. , которая наносит наибольший вред в
ни
зменной и, значительно меньший – в горной и высоко-
горной зонах. Гриб поражает несколько видов люцерны, но
особенно страдает культивируемый вид люцерны –
medicago sativa l. и дикорастущий вид – m. lupulina l.,
остальные же поражаются значительно меньше.
Широкое распространение в республике имеет воз-
будитель ржавчины Uromyces striatus J. Schrцt., пора-жающий как культивируемую люцерну, так и дикорас-тущие виды (М. coerulea Less., M. hemicycla Grossh. и др.), который обильно развиваясь на листьях и стеблях, подвергает растения сильной деформации. Причем, наибольшую вредоносность вызывают уредо- и телей-тостадии гриба. Помимо данного возбудителя, в ра-ботах В.Г.Траншеля (1939) приводится еще один вид, вызывающий
ржавчину люцерны – Uromyces magnusii kleb., который был обнаружен им в небольших коли-чествах в окрестностях Еревана.
Из менее вредоносных болезней следует отметить
насто
ящую мучнистую росу (возбудители – Leveillula
taurica (Lйv.) G. Arnaud.; Erysiphe pisi DC. var. pisi) и ложную
мучнистую росу (peronospora aestivalis Syd.),
которые наносят вред лишь в годы, особо благоприятс-твующие их развитию. Помимо люцерны Erysiphe pisi var. pisi поражает также растения донника (Melilotus), горо
ха (pisum), вики (v icia) и некоторых других пред-
ставителей
семейства fabaceae. Патоген часто разви-
вается в стадии анаморфы. Возбудители настоящей мучнистой росы люцерны, обладающие выносливос-тью к засушливым условиям, весьма распространены в засушливых условиях Армении.
Ка
к и все ложно-мучнисторосяные грибы, peronospo-
ra aestivalis для своего развития требует высокую влаж-ность, поэтому во всех местах произрастания болезнь развивается в весенние месяцы и дает вспышку осенью при повышении относительной влажности воздуха.
Помимо перечисленных, в Армении обнаруже-
ны т
акже следующие виды патогенных грибов –
Ascochyta pisi Lib.; Cercospora medicaginis Ellis & Everh.; phyllosticta
medicaginis (fuckel) Sacc.; Ramularia
medicaginis Bondartsev & Lebedeva.
Таким образом, на дикорастущих и посевных видах
люцерны обнаружено всего 11 видов паразитных гри-бов. Наиболее подверженными к грибным болезням являются виды medicago
sativa l. (7 видов), m. lupu-
lina l
. (6 видов), М. coerulea l ess. (4 вида).
АНАМОРФА эРИЗИФАЛЬНЫХ ГРИБОВ – ВСЕГДА ОБЛИГАТНЫЙ ПАР АЗИТ?
Осипян Л.Л.
ереванский государственный университет, кафедра ботаники,
Армения, ереван
Способ питания грибов охватывает разные степени
проявления паразитизма и сапротрофизма от облигат-ной до факультативной.
эризифа
льные грибы традиционно рассматрива-
ются как облигатные паразиты. Между тем грибы эти в цикле развития формируют две стадии: половую су
мчатую -телeоморфу и бесполую – анаморфу. Извес-тно, что большинство эризифальных проходят полный цикл развития, но есть виды, у которых телeоморфа или развивается редко и не играет существенной роли, или вовсе не обнаруживается. Последние идентифи-цирую
тся как митоспоровые гифомицеты. это, естес-
твенно, отражается на образе жизни и характере спо-соба питания.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 198
Если образ жизни эризифальных грибов всегда
соответствует облигатному паразитизму, то степень
паразитизма у гифомицетов достаточно вариабельна. Часто можно наблюдать как на одном и том же рас-тении паразитный гифомицет, например Ramularia menticola Sacc. и мн. др., развиваясь на живых зеленых листьях, продолжает обильно спороносить на нижних усыхающих листьях.
Исходя из традиционных представлений, эри-
зифальный
гриб Sphaerotheca pannosa (Wallr.: fr.)
Lйv. – возбудитель мучнистой росы плодов персика, как облигатный паразит не должен продолжать расти на сорванных и подвергнутых хранению плодах. Од-нако обычно он развивается в бесполой конидиальной стадии, относимой к гифомицетам, как Oidium leuco-conium Desm. Вероятно, этим и следует объяснить, что после сбора на спелых плодах персика с едва заметны-ми признаками поражения в период их хранения мож-но наблюдать интенсивный рост мицелиально-кониди-ального налета.
В связи с этим, возникает вопрос о дискуссионности
принадлежности эризифальных грибов к облигатным паразитам в тех случаях, когда в цикле развития гриба доминирует анаморфная, т. е. гифомицетная стадия.
ИНТЕГРИРОВАННАЯ ИНФОРМАЦИОННО-АНАЛИТИЧЕСКАЯ БАЗА
«МИКОМИЦЕТЫ ЗЛАКОВЫХ КУ ЛЬТУР В Р АЗЛИЧНЫХ
ПОЧВЕННО
-КЛИМАТИЧЕСКИХ ЗОНАХ КР АСНОЯРСКОГО КР АЯ»
Платонова Ю.В., Сорокатая Е.И.
ФГоУ в
По «красноярский государственный аграрный университет»,
красноярск
В связи с возникновением новых требований к за-
щите растений, основанных на принципах экономи-ческой эффективности и экологической безопасности, появляется необходимость гораздо большей информа-тивности всех параметров системы защитных мероп-риятий. Именно поэтому, в XXI столетии наиболее перспективными будут считаться информационные технологии, в силу того, что традиционные методы за-щиты растений не позволяют использовать и анализи-ровать необходимый объем информации.
Опыт нашей страны и других зарубежных стран
свидетельствует о возможности обеспечения сельских товаропроизводителей информацией о фитосанитарном состоянии полей в виде баз данных. Многие зарубеж-ные фирмы реализуют различные базы по направлени-ям защиты растений (описание вредных организмов на отдельных культурах, методов защиты растений, пести-цидов и условий их применения) на лазерных дисках.
В последнее время в Красноярском крае все чаще
развиваются концепции региональных решений в об-ласти защиты растений на основе использования стан-дартных программных комплексов, доступных, отно-сительно простых в обращении, а также позволяющие решать конкретные региональные и сельскохозяйс-твенные задачи.
Создание подобных баз, применительно к любой из
зон исследования предусматривает проведение обшир-ных микофлористических и гербологических обследо-ваний территории, таксономических исследований по идентификации видового состава патогенов, создание и поддержание крупных коллекций патогенных мик-роорганизмов, проведение фитопатологических работ по определению патогенности грибов и их специали-зации, токсикологические исследования, генетико-се-лекционные и биотехнологические работы.
Таким образом, на базе Красноярского государс-
твенного аграрного университета была разработана интегрированная информационно-аналитическая база (ИИАБ) «Микомицеты злаковых культур в различных почвенно-климатических зонах Красноярского края». Данная база является важным этапом в решении реги-ональных вопросов по части создания банков данных в области такой сложной информационной сферы на-учной и практической деятельности, которой является защита растений.
В целом, база данных представляет собой набор за-
писей и файлов, которые организованы специальным способом. Для управления большим массивом инфор-мации необходимо сохранить связь между файлами и предоставить возможность пользователям корректи-ровать весь объем данных в соответствии с характе-ристиками региона исследования. Интегрированная информационно-аналитическая база «Микомицеты злаковых культур в различных почвенно-климатичес-ких зонах Красноярского края»» предназначена для своевременного принятия решений на уровне отде-льного района края.
База обеспечивает пользователя информационно-
аналитическими данными за 3-летний период иссле-дования зерновых культур с различных (восточной, западной, северной, южной и центральной) террито-рий Красноярского края. Материал базы представлен в виде картосхем, рисунков, фотографий микромицетов, а также описательной части районов исследования и, непосредственно, микроскопических грибов.
Основные функции базы: 1) комплексная оцен-
ка данных микробиологического анализа зерновых культур Красноярского края; 2) упрощенная система поиска информации по хозяйствам, районам и зонам края; 3) возможность своевременного планирования, предварительного контроля и анализа уже имеющихся данных на основании: обоснования микробиологичес-ких данных по зонам края; подготовки своевременных методов борьбы с патогенами.
Фитопатогенные грибы 199
Основные задачи базы: 1) систематизировать дан-
ные по фитопатогенам Красноярского края; 2) усо-
вершенствовать систему поиска источников инфек-ционного начала; 3) подготовить материал для начала мониторинговых исследований.
В итоге на основе ИИАБ планируется составление
электронных карт распространенности исследуемых объектов, в частности микромицетов. Упрощенный механизм работы базы позволяет даже начинающе-му пользователю компьютером познакомиться с ос-новными позициями ИИАБ микромицетов Красно-ярского края и найти необходимую информацию о различных микроскопических грибах, в частности р. Fusarium .
АГРЕССИВНОСТЬ ШТАММОВ PHYT oPHTHora inFeST anS ИЗ БЕЛАРУСИ
Пляхневич М.П.
РУП «Научно-практический центр Национальной Академии наук
Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству»,
Самохваловичи, Минский район
Фитофтороз, вызываемый оомицетом phytophthora
infestans (Mont.) de Bary, продолжает оставаться самым
вредоносным заболеванием картофеля в Беларуси. В го
ды эпифитотий потери урожая составляют 50 % и
выше, причём эпифитотийное развитие болезни в пос-леднее время наблюдается через каждые 1–1,5 года (Иванюк, 2005). За последние 40 лет в биоэкологии возбудителя заболевания произошли серьёзные измене-ния, связанные с повышением его экологической плас-тичности, адаптивности и патогенных свойств. Совре-менные популяции отличаются от старых регулярным прохождением полового процесса, более высоким гене-тическим разнообразием и, как следствие, повышенной агрессивностью, что позволяет им преодолевать защит-ные реакции ранее устойчивых сортов.
Материалом для исследований служило 50 изоля-
тов P . infestans, собранных
в августе 2006 и 2007гг во
время маршрутных обследований посадок картофеля всех областей республики. Определение агрессивнос-ти штаммов проводили на клубневых дисках воспри-имчивого к фитофторозу сорта Дельфин на основе мето
дики А.Н. Смирнова (Смирнов, 2007). Опреде-
ляли следующие компоненты агрессивности: частота инфекции, размер некроза, интенсивность спороноше-ния, латентный и инкубационный периоды, итоговый индекс агрессивности. Результаты по последнему по-казателю ранжировали, что позволило выделить мало- умеренно- и высокоагрессивные штаммы.
Агрессивно
сть белорусских штаммов p. infestans
варьирует в широких пределах. Среди исследованных изо
лятов малоагрессивных было 29,6 %, умеренно-
агрессивных
– 41,1, а высокоагрессивных – 29,3 %. В
популяциях из разных регионов республики доля мало-, умеренно- и высокоагрессивных форм существенно не различается (р=0, 6, ч2-тест). Показано угнетающее воздействие фунгицидов на агрессивные свойства воз-будителя заболевания. Так, штаммы, выделенные из популяций p.
infestans из личных подсобных хозяйств,
где отсутствовал фунгицидный прессинг, оказались в целом более агрессивными, чем изоляты, собранные с полей сельскохозяйственных предприятий, на которых было проведено 4–5 фунгицидных обработок. Статис-тически достоверные различия между этими штам-мами установлены для показателей инкубационного периода, интенсивности спороношения и итогового индекс
а агрессивности (p<0,05, ANOv A). Тем не ме-
нее, следует отметить, что среди изолятов, собранных в обрабатываемых фунгицидами посадках картофеля, шесть штаммов обладали высокой агрессивностью. эт
о свидетельствует о том, что даже в условиях жёс-
ткого фунгицидного прессинга в популяциях патогена встречаются высокоагрессивные формы.
Литература1. Иванюк В.Г., Банадысев С.А., Журомский Г.К.
(2005) Защита картофеля от вредителей, болезней и сорняков. Минск: Белпринт.
2. Смирнов А.Н. (2007) Характеристика мексиканс-
ких штаммов Phytophthora infestans из долины Толука.
І. Агрессивность // Микология и фитопатология. Том 41, вып. 1.
ДИНАМИКА ПОПУ ЛЯЦИОННОЙ СТРУКТУРЫ CLADOspORIUM
fUL vUM COOkE (fUL vIA fUL vA (COOkE) CIfERRI) В
БЕЛАРУСИ ПО ПРИЗНАКУ ВИРУ ЛЕНТНОСТИ
Поликсенова В.Д.
Белорусский государственный университет,
Минск
Последовательный мониторинг расового соста-
ва возбудителя бурой пятнистости листьев томата на территории бывшего СССР был начат с 1968 г. С раз-ной длительностью он проводился в Ленинградской,
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 200
Московской области, в Литве, Молдавии, Украине и
Беларуси. Первоначальная структура популяции c.
fulvum
в разных регионах была схожа и представлена
теми же расами 0, 1, 3, 1.3, что и в Польше, Италии, Болгарии, отчасти в Венгрии и Чехословакии. К концу 1970-х гг. в Ленинградской области появились расы 2, 1.2, 4 и 2.4 (Симон, 1979). В 1981 г. там же зарегист-рирована сложная раса 1.(2).3.4 на гибриде Revermun. В 1980-х гг. в селекцентрах Литвы, Украины отмечено расширение спектра вирулентности (Барткайте, 1983) и усложнение рас (Скляревская, Дрокин, 1987, 1991). В Молдавии с 1970-х гг. расовый состав патогена ос-тался неизменным: здесь по-прежнему выявляются расы 1 и 1.3 (Демидов, Садыкина, 2000). По мнению авторов, причиной простого внутривидового состава являются высокие летние температуры, которые пре-пятствуют появлению новых рас. Регулярное наблю-дение за структурой популяции в Подмосковье (селек-центр на базе ВНИИ овощного хозяйства) показало присутствие с 1973 г. по 1993 г. рас 1 и 3, с 1994 г. расы 4, поз
днее – рас 2 и 5. Отмечены симптомы поражения
на тест-сортах с геном cf 9 (Игнатова, 2001). Данные о
структуре популяции в Ленинградской области не из-менились (Власова, 2004).
В Беларуси за тридцатилетний период системати-
ческого анализа внутривидовой структуры c.
fulvum
идентифицирована 41 раса с различной степенью ви-рулентности.
В целом с 1972 г. наблюдалось постепенное услож-
нение расового состава: от рас, способных преодоле-вать 1–2 гена устойчивости, до рас, преодолевающих 6–7 генов. В 1972–1978 гг. в популяции патогена ре-гистрировались преимущественно простые расы (от 76,9
% до 100 %) и небольшое число рас, преодолева-
ющих 2
гена устойчивости (от 4,8 до 23,1 %). С 1982
г. в белорусской популяции появились и с тех пор ста-бильно присутствуют расы с тремя генами вирулент-ности. Среди всех идентифицированных изолятов на их долю прих
одится 26,6 %).
В 1981 г. и 1984 г. впервые отмечены единичные
изоляты с четырьмя генами вирулентности. Однако уже с 1987 г. расы с подобным диапазоном вирулен-тности становятся характерным компонентом попу-ляции C. fulvum. Наиболее часто встречаются расы 1.2.3.4 и 1.(2).3.4 (со слабой реакцией заражений на Cf2). Они
представляют 58,5 % всех изолятов, способ-
ных преодолевать 4 гена устойчивости. Всего таких изо
лятов 18,7 %.
Изоляты с пятью и более генами вирулентности
вст
речались редко (около 2 %). В целом спектр виру-
лентности рас расширяется, что выражается в увели-чении числа генов вирулентности в расчете на 1 изолят (от 1,1 в 1978 г. до 4,2 в 2000 г.).
Количество рас, фиксируемых в вегетационном се-
зоне, варьирует. Однако отмечено, что при появлении нового гена вирулентности общее число рас вначале возрастает в связи с появлением новых сложных рас с различной комбинацией генов, а в последующие годы снижается и стабилизируется за счет доминирования 1–3 из вновь образовавшихся рас. Так, при появлении в 1981 г. расы, преодолевающей ген устойчивости 4, число рас, идентифицируемых за год, увеличилось с 2–4 до 5–7, а затем снизилось до 1–2 к 1995 г. После появления в 1996 г. гена вирулентности 5 число рас в сезоне увеличилось до 5–6, а с появлением нового гена вирулентности 6 в 2001 г. количество зарегист-рированных рас достигло 10 и стало постепенно сни-жаться. Раса, преодолевающая ген устойчивости cf
6,
поражает лишь маркированный образец, полученный из Центра генетических ресурсов в Вагенингене, но не поражает линию f
77–38 в составе дифференциаторов,
имеющихся у фитопатологов Беларуси и России.
Р АННИЕ эТАПЫ ВЗАИМООТНОШЕНИЙ ПАТОГЕНА
И ХОЗЯИНА ПРИ ПОР АЖЕНИИ ЯБЛОНИ ПАРШОЙ
Рахимова Е.В.
Институт ботаники и фитоинтродукции МоН Рк,
Алма-Ата, казахстан
Критическим условием для установления совмес-
тимых отношений патогена и ходяина и дальнейшей успешной колонизации последнего является адгезия, которая осуществляется с помощью экстрацеллюляр-ного матрикса, выделяемого как самой конидией, так и ее ростковой трубкой. Интенсивность выделения экстрацеллюлярного матрикса ростковыми трубками значительно выше, чем у конидий, и слой матрикса ростковых трубок более широкий. Именно поэтому адгезивные свойства проросших конидий выражены значительно сильнее.
Целью исследований было изучение начальных
этапов инфекционного процесса при поражении ябло-ни паршой. В ходе работы применяли традиционные классические методы световой и трансмиссионной электронной микроскопии.
При прорастании конидий возбудителя парши ( Spi-
locaea pomi fr
.) в капле воды (при температуре 24°С),
через 1,15 ч на апикальном конце конидий наблюда-ется просветление клеточной стенки с последующим небольшим вздутием. В дальнейшем здесь образуется довольно длинная ростковая трубка с характерным из-гибом в своей базальной части. Трубка чаще всего не септирована, но может содержать одну септу в зоне из-гиба, и обязательно отделена септой от конидии. Каж-дая конидия образует только одну ростковую трубку.
При прорастании конидий возбудителя парши яб-
лони на поверхности растения-хозяина в зоне контак-
Фитопатогенные грибы 201
та можно различить отложения экстрацеллюлярного
матрикса. Образующаяся позже ростковая трубка совсем короткая, но с характерным изгибом. По-ви-димому изгиб служит для направления растущего апекса ростковой трубки к поверхности растения-хозяина. Длина ростковой трубки обычно не превы-шает меньший диаметр (ширину) конидии. Достигая поверхности хозяина, ростковая трубка образует с ней плотный контакт. Проникновение патогена может осуществляться как прямым путем, так и с образо-ва
нием аппрессория – хорошо заметного расширения
на конце ростковой трубки. В зоне контакта ростко-вой трубки или аппрессория с поверхностью хозяина виден экстрацеллюлярный матрикс и ферментативное разрушение кутикулы хозяина. При механическом от-делении конидий патогена от поверхности хозяина с помощью препаровальной иглы на конце ростковой трубки или аппрессория также наблюдаются тяжи матрикса.
При анализе электронно-микроскопических сним-
ков обнаружено, что толщина экстрацеллюлярного матрикса варьирует в зависимости от способа фикса-ции и метода контрастирования. Однако, толщина мат-рикса ростковой трубки всегда превосходит таковую матрикса конидии. При больших увеличениях видно, что на конце ростковой трубки или аппрессория об-разуется тонкая инфекционная гифа, которая затем с помощью механического давления и ферментов, на-копленных в экстрацеллюлярном матриксе, проникает через кутикулу хозяина.
Таким образом, несмотря на различные условия
прорастания, конидии и их ростковые трубки выде-ляют экстрацеллюлярный матрикс, обеспечивающий плотный контакт патогена и хозяина.
МИКОБИОТА ЗЕРНА ЯЧМЕНЯ УКР АИНЫ И ЕЕ ТОКСИГЕННОСТЬ
Рухляда В.В., Андрийчук А.В.
Белоцерковский национальный аграрный университет,
Белая Церковь, киевская обл., Украина
Ячмень – ценная кормовая культура, в 1кг зерна
которой содержится 1,15 кормовые единицы, 85 г пе-реваримог
о протеина, 9–12 % белка и 70–75 % углево-
дов. Зерно ячменя полноценное за аминокислотным составом, включая особенно дефицитные аминокис-лоты
– лизин и триптофан. Однако ценные качества
зерна ухудшаются при контаминации его токсигенны-ми микромицетами вследствие снижения содержания крахмала и белка, а также накопления микотоксинов, вызывающих у сельскохозяйственных животных ми-котоксикозы.
Поскольку на сегодняшний день микобиота зерна
ячменя, выращенного в Украине, и ее токсигенность изученная недостаточно, нами была поставленная за-дача по изучению этого вопроса в разных физико-гео-графических регионах.
Материал и методика исследований. Объектом ис-
следования были 100 образцов зерна ячменя урожая 2003
– 2004 гг., отобранные в зоне Полесья, Лесостепи
и Степи, а также 67 культур грибов рода Fusarіum и
15
– рода aspergillus , выделеных из ячменя.
Выделение грибов проводили методом посева зер-
на на
агар Чапека, а идентификацию чистых культур –
на основании культурально-морфологических свойств с использованием определителей грибов. Полученные результаты исследований обрабатывали статистичес-ки, используя критерии Фишера.
Токсичность 67 изолятов Fusarіum spp. определяли
микробиологическим методом, 22 штамма исследова-ли на
способность продуцировать Т-2, f- 2 токсины,
DON и монилиформин методом ТСХ, для чего их куль-тивировали в 100 мл колбах на 10 г стерильного и ув-лажненного зерна ячменя. Продукцию охратоксина А, койевой, пеницилловой и аспергиловой кислот, а также афлатоксинов изучали у 15 изолятов рода Aspergіllus методами ТСХ и ВЖХ путем культивирования на саха-розно-дрожжевой среде (Львова Л.С. и др., 1978). Спо-собность синтезировать охратоксин А исследовали у штаммов a.
nіger и a. ochraceus, культивируемых на
зерновых субстратах.
Результаты исследований и их обсуждение. Мико-
логическими исследованиями были выделены микро-мицеты отнесенные к 16-ти родам и представленные 27-ми видами и 6-ью разновидностями.
Наиболее часто в зерне встречались грибы рода
Alternarіa и Aspergіllus, которые были обнаружены в 89
% пробах. Среди аспергил доминирующими были
A. flavus Lk: fr. (78 %) и A. fumіgatus fres. (52 %), а в
зерне ячменя из автономной республики Крым конта-минация грибом A. flavus на протяжении двух лет со-став
ляла 100 %. A. nіger van Tіegh. на протяжении двух
лет был частым контаминантом и встречался от 30 до 50
% проб, а A. candidus zk:fr., A. flavipes (Bain.et Sart.)
Thom. et Church., A. ochraceus Wilhelm, A. terreus Thom вст
речались редко (2–7 %).
Мукоральные грибы выделялись с 88 % иссле-
дованных проб и были представлены 4- мя видами, среди которых доминирующим был Rhіzopus oryzae Went., постоянными контаминантами были Absіdіa corymbіfera (Cohn) Sacc. et A. Trotter, Rhіzopus stolonіfer (Ehrenb.) vuіll. var
. stolonіfer (10 – 30 %), а гриб Absіdіa
spіnosa Lendner var. spіnosa встречался очень редко. К доминир
ующим принадлежали грибы родов phoma,
penіcіllіum и Drechslera, причем гриб penіcіllіum
glandіcola (Oudem.) Seіfert et Samson постоянно встре-чался на зерне ячменя. Остальные виды пенициллиев, что не были идентифицированы до вида, обнаружива-ли в 48
% проб.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 202
Грибы рода fusarіum контаминировали 56 % об-
разцов зерна и были представлены 5- ю видами и
5- ю
разновидностями. fusarіum sambucіnum fuck. и
f. sporotrіchіella Bіlaі var. poae (peck) Wr. постоянно
встречались на зерне ячменя, а остальные были ред-чайшими. Гриб Monascus ruber van Tіegh. был посто-янным к
онтаминантом и выделялся в 32 % исследован-
ных проб, а все другие микромицеты принадлежали к группе редчайших.
В контаминации зерна ячменя грибами рода
Fusarіum и Penіcіllіum наблюдается закономерность:
чаще всего они выделялись из зерна, выращенного на Полесье; реже из зерна Лесостепи и наименее контами-нированным был ячмень из зоны Степи. Аспергилы же чаще встречались в зерне южных регионов. Разность степени контаминации фузариями и пенициллами зер-на, выращенного в разных зонах, была достоверной. Такое распределение микобиоты можно объяснить климатическими условиями разных физико-географи-ческих регионов Украины.
Токсикологическим исследованием фузариев
было установлено, что токсичные свойства выявле-ны у
23 штаммов (34,3 %). Из них Т-2 токсин про-
дуцирова
ли 22 изолята видов f. sporotrіchіella var. poae, f. sambucіnum, f. oxysporum, f. semіtectum, f.
gіbbossum var. bullatum; зеараленон – 9 штаммов видов f. culmorum, f. sporotrіchіella var. poae, f. sambucіnum,
f. oxysporum; ДОН – 3 штамма (f . culmorum, f.
sporotrіchіella var. poae, f. oxysporum), а монилифор-
мин
– 3 (f . sambucіnum и f . oxysporum).
Из 15 штаммов аспергил пенициловую кислоту про-
дуцировали 2 штамма a. flavus, а продуцентами охра-
токсина А были a. ochraceus и 2 штамма a. nіger . Нами
впервые на территории Украины выявлены штаммы a.
nіger, продуцирующие охратоксин А. 4 штамма a.
flavus
синтезировали коевую кислоту. Кроме того, все
исследованные изоляты a. flavus были продуцентами
аспергиловой кислоты, однако ни один из них не син-тезировал афлатоксинов.
Таким образом, проведенными исследованиями
зерна ячменя из разных физико-географических ре-гионах Украины установлена достоверная разница в контаминации грибами родов Fusarіum и Penіcіllіum
в зависимости от региона выращивания. Впервые в Украине в составе микобиоты зерна ячменя выявлены штаммы a.
nіger , которые синтезировали охратоксин
А. эт
а информация может быть использована для объ-
ективной оценки качества зерновой продукции.
ВЛИЯНИЕ эКЗОГЕННОГО ЗЕАТИНА
НА
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ Р АЗВИТИЯ КОЛОНИЙ
ВОЗБУДИТЕЛЯ МУЧНИСТОЙ РОСЫ ПШЕНИЦЫ
Рябченко А.С., Аветисян Т.В., Аветисян Г.А., Бабоша А.В.
Гл
авный ботанический сад им. Н.в. Цицина РАН,
Москва
Одним из ключевых факторов при облигатном па-
разитизме являются фитогормоны цитокининового типа. Конидии и мицелий многих патогенов, в т.ч. и мучнисторосяных (erysiphe
cichoracearum (Талиева и
др., 1991)), накапливают цитокининовые вещества в количествах, во много раз превышающих их содержа-ние в растительных тканях. По-видимому, на опреде-ленных стадиях инфекционного процесса цитокинины патогена, являющиеся экзогенными по отношению к растению-хозяину, составляют существенную часть цитокининового пула больного растения. Таким обра-зом, использование экзогенных фитогормонов в опре-деленной степени может моделировать процессы, про-исходящие при инфицировании.
Целью данной работы являлось изучение методом
сканирующей электронной микроскопии действия эк-зогенного зеатина на развитие колоний возбудителя мучнистой росы пшеницы erysiphe
graminis f.sp. tritici
Marchal.
В работе использовали растения мягкой пшеницы
Triticum aestivum L. восприимчивого сорта Хакас-ская, а также дисомнодополненную пшенично-эги-лопсную линию (из коллекции «Арсенал» НИИСХ ЦРНЗ), 56/99i устойчивую (сверхчувствительность) к мучнисторосяному патогену. Отделенные листья 10–12-суточных проростков инокулировали возбудите-лем мучнистой росы и инкубировали в чашках Петри на плаву адаксиальной стороной вверх на растворах зеатина в концентрациях 0,25–4,5 мкМ. Раститель-ный материал для сканирующей электронной микро-скопии фиксировали через 72 ч и 6 суток с момента ин
фицирования в 4 % растворе глутарового альдегида
и затем в 2 %-ом растворе четырехокиси осмия, обез-
воживали в серии спиртов и ацетоне и высушивали при критической точке. Образцы напыляли золотом и просматривали на сканирующем электронном мик-ро
скопе LEO-1430 vp. Размеры микроколоний вдоль
и поперек антиклинальных стенок эпидермальных клеток листа определяли по цифровым фотографиям с использованием программы Image J, путем наложе-ния трафарета эллипсовидной формы, соответствую-щего форме колонии.
Исследования показали, что экзогенный зеатин
оказывает влияние на вегетативный рост гиф мицелия возбудителя мучнистой росы и форму колоний. Дейс-твие различных концентраций фитогормона различно для направлений роста колоний вдоль и поперек анти-клинальных
клеточных стенок растения-хозяина. это
проявлялось в заметно более удлиненных зрелых коло-ниях (через 6 суток после инфицирования) на листьях
Фитопатогенные грибы 203
обеих форм пшеницы и соответствовало максимуму
при концентрации экзогенного зеатина 1 мкМ на кон-центрационной кривой соотношения длины и ширины колонии («коэффициент формы»). Концентрационные кривые коэффициента формы колонии, полученные по данным измерений через 6 суток и 72 ч после инфици-рования, различны, что свидетельствует о различии в закономерностях соотношения роста в продольном и поперечном направлениях на разных этапах патогене-за. Для молодых колоний (72 ч после инфицирования) тенденции в изменении формы колоний были проти-воположны у восприимчивых и устойчивых растений. эт
о происходило вследствие высокой степени ингиби-
рования поперечного роста гиф у первых и продольно-го роста у вторых при концентрациях зеатина 1.5 мкМ и выше.
Полученные данные позволяют установить вза-
имосвязь визуальной картины патогенеза с некото-рыми патологическими и защитными процессами и дают возможность дифференциального контроля раз-личных фаз патогенеза с использованием фитогормо-нов.
РОЛЬ ГРИБОВ РОДА fUsARIUM В ПАТОГЕНЕЗЕ
КОРНЕВОЙ СИСТЕМЫ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ
Селиванова Г.А.
ГНУ вНИИ сахарной свеклы и сахара им. А.л. Мазлумова,
Рамонь, воронежская обл.
Гнили, поражающие корнеплоды сахарной свеклы
в течение вегетационного периода, наносят хозяйствам немалый ущерб, выраженный в потере урожая и саха-ра, и в снижении их устойчивости к кагатной гнили. В преобладающем большинстве случаев возбудителями корневых гнилей являются микроскопические грибы, которые в изобилии населяют корнеобитаемые слои почвы.
В ЦЧО наибольшее распространение имеет сухая
фузариозная гниль корнеплодов, вызываемая грибами рода Fusarium. Фузариозная гниль развивается обыч-
но снаружи, в местах повреждений почвообитающими вредителями:
или вследствие нарушения целостности
корневой системы, сбоку или в хвостовой части. По-раженный участок приобретает бурую окраску; уп-лощается, вдавливается, по мере развития инфекции покрывает
ся крупными трещинами, иногда с белым
войлоком мицелия. При инфицировании хвостовой части может произойти полное сгнивание хвоста; при этом корнеплод приобретает округлую форму, рост его прекращается. В корнеплодах с признаками фузариоз-ной гнили, как правило, выражен и некроз централь-ного сосудистого пучка.
Пораженные растения в поле выделяются сильным
привяданием листьев в жаркие дневные часы, а так-же усыханием листового аппарата, начинающегося с нижних листьев. Наиболее интенсивное развитие фу-зариозной гнили сахарной свеклы происходит в июле, когда высокая температура и обычная в это время года засуха ослабляют растения, что благоприятствует проникновению и паразитированию грибов в тканях корнеплодов. Выпады растений от фузариоза могут сост
авлять до 30 %.
В составе возбудителей фузариозной гнили корнеп-
лодов
преобладает f. solani. Обилие этого вида превы-
шает 50
%, а частота составляет 100 %. Из других ви-
дов в
стречается f. oxysporum с частотой 70 %, реже –f .
javanicum (25 %), f. gibbosum (20 %), f. affine (20 %), f. argillaceum (13 %). Обычным спутником фузариозной гнили являются грибы рода Gliocladium: G. zalesrii и
G. radicicola, которые, как правило, выделяются в ком-плексе с грибами f . solani и f . oxysporum.
Исследование поражений корневой системы на
ранних стадиях онтогенеза сахарной свеклы (пророс-тк
и в фазах вилочки и1 – 2 пар настоящих листьев)
показало, что грибы рода fusarium доминируют и в
составе корнееда (80 – 90 % от суммы выделенных
грибов), но с другим соотношением видов. В про-ро
стках наиболее часто встречаются f. oxisporum,
f. sporotrichiella, f. gibbosum. По мере развития кор-
невой системы соотношение видов патокомплекса ме
няется: возрастает доля участия f. solani, а такие
виды как f. gibbosum, f. sambucinum, f. sporotrichiella
играют все менее заметную роль в патогенезе. Так,
если в составе корнееда встречаемость f. solani
7,5 – 19,0 %, в перелинявших корнях – 18,0 – 35,7 %,
а в корнеплодах, пораженных фузариозной гнилью, –
41,3 – 65,9 %.
В составе микофлоры корнееда второе место по
часто
те встречаемости после грибов рода Fusarium
занимает alternaria alternata, реже выделяются Phoma
betae, cylindr o
carpon destructans, rhisoctonia solani и
Penicillium sp ..
. Для ограничения развития корневых гнилей са-
харной свеклы чрезвычайно важным моментом явля-ется ведение правильных севооборотов с насыщен-ностью
не более 25 % и посевом свеклы после озимой
пшеницы, что снижает инфекционную нагрузку почвы патогенными для свеклы видами фузариумов. Другой важный момент в борьбе с корневыми гнилями –ис-пользование в производстве устойчивых сортов и гиб-ридов, к которым относится большинство российских гибридов, а
из импортных – Победа, Флорес, Шериф.
В целом, гибриды иностранной селекции характеризу-ются меньшей устойчивостью к гнилям корнеплодов по сравнению с российскими.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 204
Токсические соединения, продуцируемые фито-
патогенными организмами, способны изменять барь-
ерно-транспортные характеристики мембраны рас-тительной клетки. Грибы рода Fusarium выделяют в
ткани растения и при культивировании in vitro в куль-
туральную среду большое количество токсических веществ (ликомаразмин, аспергилломаразмин А, ас-
пергилломаразмин в, дегидрофузариевая кислота, фу-
зариевая
кислота и др.). экзогенные соединения могут
взаимодействовать с компонентами мембраны непос-редственно. Кроме того, поступая в клетки, эти вещес-тва способны нарушать нормальный ход метаболичес-ких процессов, что может отразиться на структуре и функциях мембран. В связи с этим, целью проведен-ных нами исследований явилось изучение изменений ионных потоков через плазмаллему клеток nitella
flexilis ,
происходящих под воздействием токсичных
метаболитов, продуцируемых различными изолятами микромицета F . oxysporum f. lycopersici . Исследование
электрических характеристик мембраны харовой во-доросли проводилось с использованием стандартной микроэлектродной техники согласно методике элект-роальгологического анализа (Юрин В.М. и др., 1991). эк
сперименты проводились в режиме фиксации тока
на плазмалемме клеток nitella flexilis. Процедура из-
мерения сопротивления клетки (ℜ) сводилась к ре-гистрации величины сдвига разности электрических потенциалов (∆Ψ) при подаче прямоугольного гипер-поляризующего импульса тока продолжительностью 1–2 с. В качестве контроля использовалась искусст-венная прудовая вода (ИПВ), содержание калия в кото-рой было повышено и находилось в интервале между 10
–4 моль/л и 4∙10–4 моль/л в зависимости от величины
коэффициента разведения культуральной жидкости (КЖ). эк
спериментальные растворы готовились на ос-
нове ИПВ, не содержащей калия.
Установлено, что КЖ отдельных изолятов F .
oxysporum f. lycopersici вызывают заметные измене-
ния электрических параметров плазмалеммы клеток nitella
flexilis уже при разбавлении этих жидкостей в
соотношении 1/500. Однако выраженная электрофизи-ологическая реакция клеток nitella
flexilis на указан-
ное воздействие отмечалась при разбавлении 1/100 и ниже. Разбавление 1/500 следует считать пороговым, поскольку в этом случае достигается минимальная концентрация веществ, содержащихся в КЖ, вызываю-щих отклонения электрофизиологических параметров от контрольных значений. Мембранотропное действие КЖ изучаемых изолятов F . oxysporum f. lycopersici раз-
личались как по пороговым концентрациям, так и по качественным показателям электрофизиологической реакции. Вероятно, это служит отражением состава и содержания токсических веществ в КЖ изолятов гри-ба.
В ходе работы нами было исследовано влияние КЖ
изолятов F . oxysporum f. lycopersici в разведении 1/50
на электрофизиологические параметры плазмалеммы nitella
flexilis. Воздействие продолжалось в течение
30 мин, после чего следовал 30-мин отмыв. Нами не было выявлено корреляционной зависимости между величиной и направлением изменений сопротивления плазмалеммы и ее потенциала и обратимостью этих процессов с одной стороны, и степенью агрессивнос-ти изолятов с другой. Не прослеживалось и четкой корреляции указанных показателей с величиной про-дукции фузариевой кислоты. Однако, были выявлены некоторые закономерности. Вытяжка КЖ изолята Т10, не продуцирующего фузариевую кислоту, не вызывала никаких изменений в величинах мембранного сопро-тивления и потенциала. В то же время изоляты Т2 и Т6, КЖ которых характеризовалась сравнимыми по ве-личине (ДR = +10,7 ± 1,6; ДR = –10,4 ± 3,4), хотя про-тивоположными по направлению, воздействиями на электрические параметры плазмалеммы, различались по степени агрессивности (средне- и высокоагрессив-ный, соответственно) и продукции фузариевой кис-лоты (мкг/мл: 233,84 ± 0,14 и 609,15 ± 0,25, соответс-твенно). Изолят Т18, характеризующийся наиболее значительными (ДR = +15,4 ± 4,1), хотя и обратимыми, сдвигами электрофизиологических параметров плаз-малеммы, относится к слабоагрессивным со средней продукцией фузариевой кислоты (мкг/мл: 367,50 ± 0,28). Таким образом, изменения электрофизиологи-ческих параметров плазмалеммы имели сложную ди-намику. Под влиянием КЖ одних изолятов отмечались быстрые сдвиги и установление новых значений элек-трофизиологических параметров, КЖ других изолятов действовали достаточно медленно. В некоторых слу-чаях регистрировалась весьма сложная электрофизи-ологическая реакция мембраны, которая описывалась изменениями как скорости, так и направления сдвигов ее электрофизиологических параметров в зависимости от экспозиции клеток харовых водорослей в экспери-ментальных средах.ДЕЙСТВИЕ ТОКСИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ FuSarium oxYSPorum
f. lYco
PerSici (sACC.) sNYDER AND HANsEN НА э ЛЕКТРИЧЕСКИЕ
ПАР АМЕТРЫ ПЛАЗМАЛЛЕМЫ Р АСТИТЕЛЬНОЙ КЛЕТКИ
Сидорова С.Г., Кудряшова В.А.
Белорусский государственный университет,
Минск
Фитопатогенные грибы 205
Биотроф Puccinia graminis pers. (Basidiomycota,
Urediniomycetes, Uredinales) отличается высоким
уровнем внутривидовой изменчивости. Для оценки микроэволюционных процессов биотрофных видов недостаточно морфологических признаков. Оценка изменчив
ости пшеничной и ржаной форм – P .graminis
f.sp. tritici (pgt) и P .graminis f.sp.secalis (p gs), наиболее
распространенных на территории России, была про-ведена с использованием белковых и молекулярных маркеров, способных обеспечить большое количество значимых признаков и широко применяемых в миро-вой практике микологических исследований.
Скорость эволюции межгенных спейсеров области
рибосо
мных генов (транскрибирумых – ITS, ETS, и не-
транскрибир
уемых – IGR) позволяет использовать эти
участки генома в качестве молекулярных маркеров для оценки изменчивости внутривидовых структур ржав-чинных грибов. В наших исследованиях длина ITS-участка области рибосомных генов оказалась одинако-вой среди изученных изолятов Pgt и Pgs. Выявленная
IGR-изменчивость изолятов позволила отличить спе-циальные формы (ржаную и пшеничную) P .graminis
при развитии на различных злаках.
Применение неспецифических праймеров, на чем
основ
ан метод RApD-pCR, повышает количество ана-
лизиру
емых признаков (pCR-продуктов) и обеспечи-
вает информацией об индивидуальных особенностях генома. Чувствительность метода отвечает требовани-ям исследований, касающихся изменчивости внутри отдельных специализированных форм ржавчинных грибов. Обнар
уженный нами полиморфизм RApD-
маркеров позволил выделить индивидуальные группы среди изолятов ржаной и пшеничной форм P .graminis.Среди изолятов Pgt , представляющих домини-
ру
ющую расу (T kNT) на территории России в 2005
году, были зафиксированы высокий уровень RA pD-
и МДГ-изменчивости (вариабельность изофермента малатдегидрогеназы) и идентичность специфических IGR-фенотипов. Низкое соответствие между группи-ровками, выделенными на основе вирулентности, мо-ле
кулярных RA pD-, IGR- и МДГ – маркеров, говорит
в пользу участия генетической рекомбинации той или иной природы в определении структуры популяции патогена на территории России. Такая закономер-ность обычно прослеживается для популяций ржав-чинных грибов, в формировании которых активную роль играет половой процесс или парасексуальная рекомбинация.
Комплексный подход к исследованию генетичес-
кой изменчивости позволил выделить факторы, влия-ющие на дифференциацию сложного вида P .graminis.
Выявлены различные по структуре группировки среди изолятов Pgt (из Московской, Томской, Ростовской и
Киевской областей). Приспособленность к среде оби-тания, которой для паразитического гриба является растение-хозяин, явилась главным фактором, обус-лавливающим полиморфизм исследованных изолятов пшеничной и ржаной формы P .graminis. Показана фор-
мообразующая роль альтернативного хозяина berberis
spp. на территории Московской, Томской, Киевской областей, а также зарегистрирована клональная груп-пировка изолятов с ограниченным числом парасексу-альных обменов в Ростовской области.
Работа выполнена при поддержке Российского
фонда фундаментальных исследований и программы «Интеграция»ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БЕЛКОВЫХ И МОЛЕКУ ЛЯРНЫХ МАРКЕРОВ ПРИ
ОЦЕНКЕ ВНУТРИВИДОВОЙ ИЗМЕНЧИВОСТИ Puccinia GraminiS pERs.
Сколотнева Е.С., Инсарова И.Д., Малеева Ю.В., Лекомцева С.Н.
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова, кафедра микологии и альгологии,
Москва
СОПРЯЖЕННОСТЬ КУ ЛЬТУР АЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ
ПРИЗНАКОВ С ПАТОГЕННОСТЬЮ ИЗОЛЯТОВ ГРИБА boTr YTiS
cinerea pER s:fR., ВЫДЕЛЕННЫХ С ПАСЛЕНОВЫХ КУ ЛЬТУР
Стадниченко М.А., Поликсенова В.Д.
Белорусский государственный университет,
Минск
Проблема ботритиоза (возбудитель – botrytis cine-
rea pers: fr.) привлекает внимание фитопатологов как
в Беларуси, так и за ее пределами. Заболевание, вы-зываемое патогеном, приводит к снижению урожая и товарных качеств многих сельскохозяйственных куль-тур. Патоген очень полиморфен, быстро адаптируется к факторам среды, что свидетельствует об интенсив-ных микроэволюционных процессах в популяции воз-будителя. В литературе неоднократно отмечается, что популяция гриба b.
cinerea неоднородна по многим
признакам в связи с высокой степенью гетерокарио-тичности мицелия и конидий.
Некоторые исследователи отмечают сопряжен-
ность культурально-морфологических признаков со степенью патогенности (Лихачев, 2000). Целью нашей работы было изучить структуру популяции гриба b.
ci-
nerea по культурально-морфологическим признакам и патогенности (агрессивности), а именно рассмотреть
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 206
характер роста и интенсивность спороношения мо-
носпоровых изолятов возбудителя на искусственных питательных средах и дать характеристику изолятов гриба по способности вызывать поражение растений при искусственном заражении. Изоляты патогена были выделены из пораженных растений томата, перца и баклажана открытого и защищенного грунта Минс-кого района в 2003–2006 гг. В рамках изучения куль-туральных особенностей изолятов были рассмотрены динамика линейного роста колоний и спорообразова-тельная активность на картофельно-глюкозной среде, полноценной среде для культивирования микроорга-низмов и агаризованной среде Чапека. Полученные нами данные указывают на гетерогенность популяции b.
сinerea по признакам скорости роста и интенсивнос-
ти спороношения.
Для оценки патогенности гриба b. cinerea проводи-
ли искусственное заражение изолированных листьев. В предварительных исследованиях была установлена минимальная инфекционная нагрузка, способная вызы-вать некрозы и хлорозы отделенных листьев растений. Суспензию спор изолятов в концентрации 100–120 спор в поле зрения микроскопа Ч 100 готовили в растворе глюкозы с добавлением дигидрофосфата калия. Отде-ленные листья томатов сорта Персей, Пралеска и Пе-рамога 165 помещали в условия влажной камеры. Учет балла поражения проводили на 5 и 8 сутки. Результа-ты исследований подтвердили, что популяция гриба b.
cinerea полиморфна также и по патогенности. Хотя
средний балл поражения варьировал незначительно, но по интенсивности спороношения отмечены изоляты, репродуктивная способность которых была выше, что может способствовать более быстрому развитию и рас-пространению гриба. Более агрессивные изоляты ха-рактеризовались как медленно- или среднерастущие на искусственных питательных средах со средним показа-телем спороношения. Возможно, агрессивные изоляты являются более специализированными к питающему растению, соответственно на искусственных средах их рост и развитие замедляется, что свойственно грибам с более выраженным паразитизмом.
Полученные результаты свидетельствуют о сопря-
женности морфолого-культуральных признаков и па-тогенности. Исследования в данной области позволя-ют более глубоко понять особенности взаимодействия патогена и растения-хозяина, что может быть исполь-зовано для дальнейшей оценки устойчивости паслено-вых культур к ботритиозу.
МИКОБИОТА РИЗОСФЕРЫ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ
Стогниенко О.И.
всероссийский НИИ сахарной свеклы и сахара им. А.л. Мазлумова РАСХН,
воронежская обл., Рамонь
Сахарная свекла – основной источник сахарозы,
а также глюкозы и фруктозы. Все органы содержат те или
иные количества моно – и дисахаров на всех
этапах органогенеза. это и обуславливает обильную
и разнообразную микофлору, проявляющую свойства паразитизма, выраженного в той или иной степени, или ведущей сапрофитный образ жизни на всех ор-ганах сахарной свеклы, ризоплане, ризосфере. Кор-неплоды сахарной свеклы выделяют в почву сахара, аминокислоты, биологически активные вещества, что определяет видовое разнообразие микобиоты почв свекловичного агроценоза.
Фитопатогенные грибы, являющиеся возбудителя-
ми болезней корневой системы сахарной свеклы, это, как правило, ризосферные грибы, которые поражают корнеплоды при ослаблении растения биотическими и абиотическими факторами, проникают через ранки и трещинки в коре. Для уточнения микобиоты ризосфе-ры сахарной свеклы и ее сезонной динамики были проведены наши исследования.
Отборы проб проводились в 3-ю декаду мая (фаза
3-х настоящих листьев сахарной свеклы, массовое раз-витие корнееда), 2 декада июля (массовое развитие корневых гнилей), 1 декада октября (выкопка свеклы) в четырехпольном свекловичном севообороте на черно-земе выщелоченном. Количественный и качественный учет почвенных грибов проводился методом разведе-ний, с высевом четвертого разведения на питательные среды в трехкратной повторности: Чапека, кукуруз-ный, почвенный агар, Гетчинсона, сусло-агар.
В мае из ризосферы проростков сахарной свеклы
были выделены следующие виды микроскопических грибов: типичные
– fusarium, Mortierella lignicola,
penicillium, phoma betae, Cladosporim fasciculatum,
Rhizopus nigricans, Tritiraceum roseum; редко встре-чаемыеTorula herbarum, Trichoderma viride, Mucor, Rhizoctonia solani, Aspergillus niger, Alternaria alternata. Комплекс фитопатогенных микромицетов, выделенных из пораженных корнеедом корней в фазу семядольных листьев: fusarium,
встречаемость 91,7 %, phoma betae.,
Mucor ssp. – 25 %, Mortierella ssp. – 16,7 %; penicillium
ssp., A. alternata, R. nigricans, Aphanomyces ssp., phytium
ssp. – 8 %; В фазу 2-х пар настоящих листьев умень-шается
встречаемость грибов рода fusarium до 54 %,
phoma betae – до 15 %, Alternaria alternata – до 6 %, уве-личивает
ся встречаемость penicillium ssp. и Mortierella
ssp. до 18 %, а также были выделены из зон поражения грибы родов Cladosporim ssp.(12 %), Trichoderma ssp. (15 %), Aspergillus ssp.(12 %) Acremonium ssp.(3 %), Rhizoctonia ssp. (6 %).
В июле увеличивается численность и видовое раз-
нообразие ро
да fusarium, где доминируют f. solani,
f. oxysporum. К редко встречаемым видам добавля-
ются Сhetomium globosum, Dirinocladium terreum. В
Фитопатогенные грибы 207
мае – июне в ризосфере сахарной свеклы очень широ-
ко представлен род Mortierella. В июле фитопатокомп-лекс возбудителей корневых гнилей был представлен видами ро
да fusarium (наиболее часто встречаемые f.
oxysporum (32 %), f. solani (65 %), penicillium (14 %),
Mortierella (26 %), Mucor (5 %).
В октябре видовой состав ризосферы сахарной
свеклы обедняется (не обнаружены alternaria alternata, Tritiraceum roseum, Torula herbarum, rhizoctonia solani,
Сhetomium globosum, dirinocladium terreum); увеличи-
вается численность и частота встречаемости Fusarium
sp., Penicillium sp., Trichoderma и mortier ella. К редко
встречаемым видам добавляется bipolaris sorociniana.
Ризосферная микобиота является источником кагатной гнили сахарной свеклы.
КУ ЛЬТУР АЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ И ФИЗИОЛОГО-
БИОХИМИЧЕСКИЙ СТАТУС cercoSP ora beTicola sACC.
Стогниенко О.И.1, Мелькумова Е.А.2
1 всероссийский НИИ сахарной свеклы и сахара им. А.л. Мазлумова РАСХН,
воронежская обл., Рамонь
2 воронежский ГАУ им. к.Д. Глинки,
воронеж
Cercospora beticola Sacc. – возбудитель церкоспо-
розной пятнистости листьев сахарной свеклы. Заболе-вание, приносившее наибольший вред в странах Сре-диземноморья и южной зоны свекловодства России и Украины, стало в последние годы прогрессировать в Центральном Черноземье. Потери продуктивности культуры на относительно устойчивых и восприимчи-вых сортах в годы с сильным развитием болезни до-хо
дят до 30–50 %. Для целей селекции на иммунитет
выделены в чистую культуру 35 изолятов, из которых аборигенные идентифицированы 5 штаммов (Стог-ниенко, Мелькумова, Корниенко, 2006). Коллекция чистых культур C. beticola также существует в Ни-дерландах
(IRS) – более 60 изолятов из Нидерландов,
США, Италии (v ereijssen, 2004), в Украине (IЦБ) – 7
изолятов (Сюмка, 2006).
В результате проведенных исследований получены
данные, свидетельствующие о том, что аборигенные популяции c.
beticola гетерогенны и представлены раз-
ными биотипами, характеризующимися разнообраз-ными культурально-морфологическими признаками, отличающиеся по агрессивности и вирулентности.
Подобраны питательные среды и режимы культи-
вирования, на которых патоген активно развивается и сп
ороносит (температура 25–27 °С, продолжительность
светового периода 15 часов). В искусственных условиях получено конидиальное спороношение патогена. При инфицировании спорово-мицелиальной суспензией в полевых условиях все спорогенные штаммы оказались вирулентными с разной степенью агрессивности.
Установлено, что первичное заражение сахарной
свеклы 1-го года жизни в условиях севера Воронеж-ской
области происходит в 3 декаде июня – 1 декаде
июля. Инкубационный период после первичного ин-фицирования составляет около 30 дней. Инкубацион-ный перио
д вторичного заражения – примерно 20 дней
в зависимости от погодных условий. При благопри-ятных погодных условиях для развития церкоспороза наблюдаются 2 волны развития болезни с пиками в 3 декаде августа и в сентябре. Штаммы c.
beticola выделяют токсины, мишенью
действия, которых являются устьица листьев сахарной свеклы. Под их воздействием они вначале открыва-ются, а при более продолжительном действии деге-нерируют и гибнут. Активность токсинов приводит к потере тургора и увяданию листовой пластины. Сте-пень токсичности штаммов c
. beticola различна, что
обуславливает их агрессивность и может служить до-казательством наличия физиологических рас. Сущес-твует устойчивость сахарной свеклы к воздействию токсинов различных штаммов c.
beticola , определен-
ная биохимическими особенностями взаимодействия патоген-хозяин, что свидетельствует о расоспецифич-ной устойчивости к церкоспорозу.
Выявлено, что при длительном хранении в усло-
виях пониженных температурах штаммы после во-зобновления роста образуют колонии с новыми куль-туральными признаками (мутируют). Таким образом, можно предположить, что фактором изменчивости патогена является пониженная положительная темпе-ратура в сапро-трофный период цикла развития.
Установлено, что патоген может существовать в
почве в мицелиальной форме. Одним из этапов цикла развития является проникновение мицелия гриба из почвы или с околоплодника семени в корешок пророс-тка, с дальнейшим поражением корешка, гипокотиля и семядольных листьев.
По к
омплексу характерных признаков – не обнару-
жена телеоморфа, гриб образует несколько вегетатив-ных генераций за сезон, затрачивает достаточно энер-гии на размножение конидиями, имеет минимальное развитие мицелия
в тканях растений – c. beticola мож-
но отнести к разряду r-стратегов.
На основе метода инфицирования отрезков лис-
ть
ев (person, 1957) нами разработана методика экс-
пресс-скрининга устойчивости сахарной свеклы к церкоспорозу (Стогниенко, Мелькумова, Корниен-ко, 2006), которая позволяет выделять формы с вер-тикальной и горизонтальной устойчивостью к пато-гену.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 208
Низкотемпературные склероциальные грибные па-
разиты растений родов Typhula и Sclerotinia входят в
состав патогенов, вызывающих снежную плесень, т.е.
грибов, развивающихся на растениях под снеговым покровом. Исследования, проведенные нами с 1999 года, позволили установить ареалы обитания этих па-тогенов, установить круг их растений-хозяев, обнару-жить новый
для России вид – Sclerotinia nivalis I.Saito.
При исследованиях нами широко использовались бо-танические сады России, в которых, как правило, про-израстают интродуцируемые растения.
У грибов рода Typhula отмечено только 3 парази-
та растений: T. ishikariensis, T. incarnata и T. phacor-
rhiza. Последний чаще сапротроф, а его паразитарные
штаммы отмечены только в Канаде. Активно эволю-ционизирующий психрофильный вид T. ishikariensis
различными исследователями делился на отдельные виды, разновидности и группы. Мы пользовались последней классификацией Мацумото (1997), разде-лившего этот комплексный вид на два вида: T. ishika-
tiensis species 1 и T. ishikatiensis species 2. Первый вид
отмечен нами в Европейской части России (от Курска на юге и Кольском п-ве на севере), Урале, Западной Сибири и Дальнем Востоке. Второй вид найден нами в России только на Дальнем Востоке (Камчатка, Са-халин) и в рефугиуме ледникового периода в предго-рьях Хамар-Дабана (Прибайкалье). Первый вид был способен поражать растения 96 видов, относящихся к 53 родам из 18 семейств (Alliaceae, Asteraceae, Bor-raginaceae, Brassicaceae, Campanulaceae, Cannabaceae, Caryophyllaceae, Crassulaceae,
Cyperaceae, fabaceae,
Hemerocalidaceae, Hyacinthaceae, Iridaceae, Labiatae, Liliaceae, poaceae, p
inaceae, polemoniaceae и Rosaceae),
второй – только растения сем. poaceae. Нами было ге-
нетически подтверждено, что виды T. humulina kuzn.
и T
. graminearum Gulaev, поражающие, соответствен-
но, хмель (Humulus lupulus) и сеянцы сосны 1-го года (Pinus sylvestris ), являются синонимами T. ishikariensis
species 1. э
тот вид способен поражать как надземные, так и подземные органы растений (корни тюльпанов, корневища хмеля), образовывать в почве вторичные склероции, сбрасывая с себя старую оболочку, засе-ленную почвенной биотой.
Психрофильный факультативный паразит T. incar-
nata отмечен в Европейской части РФ на юге от гор
Кавказа до Кольского п-ва на севере, на Урале, Даль-нем Востоке, но отсутствовал в местах с холодным и резко континентальным климатом, в отличие от T. ishi-
kariensis species 1, отмеченного нами в Новосибирске,
Томске и даже Анадыре.
Обнаруженный нами впервые в России психрот-
рофный патоген Sclerotinia nivalis был нами отмечен
в Нечерноземной зоне РФ, Северо-западе, Средней Волге, Урале, Западной Сибири и Дальнем Востоке. Гриб обладает широкой специализацией и способен поражать растения 81 вида, относящихся к 51 роду из 20 семейств (Apiaceae, Asteraceae, Borraginaceae, Brassicaceae, Campanulaceae, Caryophyllaceae, Crassu-la
ceae, Dipsaceae, fabaceae, Gentinaceae, Hammame-
lidaceae, Hemerocalidaceae, Hyacinthaceae, Iridaceae, Li
liaceae, plantaginaceae, polemoniaceae, Ranunculace-
ae, Rosaceae и Scrophullariaceae). Мы предполагаем, что описанный в Голландии вид S. bulborum (Wakk.)
Sacc. и в Канаде S. sativa Drayton et Growes, признан-
ны
е в монографии Кон ( kohn, 1979) как «недостаточ-
но описанные виды» и отнесенные ею к синонимам мезофила S. minor Jagger, вследствие чего эти виды
почти исчезли из научной литературы, являются си-нонимами S. nivalis.
Нами была подтверждена ненадежность таксоно-
мического критерия некротрофного вида S. borealis
ка
к узкоспециализированного патогенна сем. poaceae.
Гриб отмечен на 28 видах растений 17-ти родов и 8-ми семейств (Alliaceae, Asteraceae, Brassicaceae, Campanu-la
ceae, fabaceae, Iridaceae, pinaceae и poaceae). В север-
ных районах РФ S. borealis не был нами отмечен только
в районах с экстремально холодными зимами, напри-мер, в Якутске.НИЗКОТЕМПЕР АТУРНЫЕ СКЛЕРОЦИАЛЬНЫЕ ГРИБНЫЕ
ПАР АЗИТЫ РОДОВ TYPHula И Sclero Tinia В РОССИИ
Ткаченко О.Б.1, Хошино Т.2, Сайто И.2
1 Главный ботанический сад им. Н.в.Цицина РАН,
Москва
2 Национальный НИИ прикладной индустрии и технологии,
Саппоро, Япония
ЛИСТОВЫЕ ИНФЕКЦИИ ДРЕВЕСНЫХ Р АСТЕНИЙ
В УРБАНИЗИРОВАННОЙ СРЕДЕ
Томошевич М.А.
Центральный Сибирский ботанический сад Со РАН,
Новосибирск
Растения – базовый компонент урбоэкосистемы.
Важнейшим условием создания эффективных зеленых насаждений является подбор устойчивого ассортимен-та. К наиболее весомым показателям качеств растений
Фитопатогенные грибы 209
относятся их защитные свойства, декоративность и ус-
тойчивость к условиям среды.
В последние годы в городах сибирского региона
наблюдается интенсивное нарастание численности па-тогенов, вызывающих заболевания листьев. Система мониторинга состояния зеленого фонда должна скла-дываться из следующих этапов: выявление видового состава патогенов; изучение их экологических особен-ностей; разработка защитных мероприятий с учетом биологии патогенов, погодных условий и др.
В связи с этим целью исследований являлось осу-
ществление первого этапа мониторинга, а именно ин-вентаризация листовых инфекций древесных растений в различных ландшафтных объектах г. Новосибирска.
Обследования городских зеленых насаждений в
2004–2007 гг. выявили большое разнообразие видово-го состава возбудителей болезней. Всего на древесных растениях выявлено 77 микромицетов, вызывающих листовые инфекции.
Наибольшее число видов зарегистрировано на
растениях родов Rosa, Populus
– по 10, berberis- 9 ,
caragana
–8, Tilia и c rataegus – по 7, betula – 6, на рас-
тениях остальных родов отмечено 4 вида и меньше.
В структуре патогенных микромицетов отдел
Basidiomycota пре
дставлен 10 видами (13,6 % от об-
щего числа), относящимися к порядкам Uredinales и polyporales.
Наибольшее число видов имеют роды
phragmidium (3) и Melampsora (2).
Большинство идентифицированных видов отно-
сится
к отделу Ascomycota – 67 видов, или 86,6 % от
общего числа выделенных видов. Порядок Erysiphales включает 17 патогенов. К роду Erysiphe относится 10 видов,
к podosphaera – 3, к phyllactinia – 2, а роды
Microsphaera, Sawadaea включают по 1 виду.В общем, спектре отдела Ascomycota значитель-
на до
ля патогенов, вызывающих пятнистости (74 %).
Среди них преобладают возбудители заболеваний (30 видов (61
%)), имеющие пикнидиальные и стромати-
ческие конидиомы. Микромицеты с пикнидиальными конидиомами в городских насаждениях представлены 16 видами,
из которых преобладают phyllosticta (6) и
Ascochyta (4). Среди выявленных возбудителей бо-лезней значительна доля и представителей грибов со строматическими конидиомами, где наиболее пред-ставлены роды Gloeosporium (3), Cylindrosporium (2), Coryneum (2).
В последние годы в городе резко возросла поража-
емость растений грибами р. cer
cospora, leptoxyphium,
cladosporium, Fusicladium.
В единичных случаях отмечены следующие за-
болевания: ржавчина шиповников ( Phragmidium
rosae-rugosae kasai), барбариса (Puccinia graminis)
пятнистости листьев шиповников (cladosporium variabile ),
миндаля (mycosphaer ella cerasella ) и калины
(cer cospora opuli), шиповников (diplocarpon rosae),
барбариса ( ascochyta berberidina), бузины ( Phoma
exigua).
Установлено, что видовой состав возбудителей бо-
лезней зависит от видового разнообразия древесных растений и степени состояния объектов озеленения. Уличные посадки, насаждения бульваров, скверов и парков даже одного и того же района существенно отличаются по видовому составу патогенов и еще в большей мере по интенсивности развития отдельных возбудителей болезней. Последнее, скорее всего, зави-сит от времени появления болезни, агрессивности ее возбудителя и специфического микроклимата данного объекта.
РОЛЬ ВНЕКЛЕТОЧНОЙ КАТАЛАЗЫ В ВИРУ ЛЕНТНОСТИ
ШТАММОВ SePT oria nodorum
Трошина Н.Б., Сурина О.Б., Яруллина Л.Г., Максимов И.В.
Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук,
Уфа
Известно, что при контакте клеток растения и кле-
ток фитопатогена происходит генерация АФК, в высо-ких концентрациях токсичных как для растительных клеток, так и для патогена. Показано, что важную роль в поддержании низкого уровня АФК, в особенности пе-роксида водорода, и у растений и у грибов играют ката-лазы. Следовательно, в условиях низкого уровня АФК появляется возможность отключения механизмов окси-дативного взрыва, что может неблагоприятно отразится на защитных системах растений и способствовать их ин-фицированию. В связи с этим были изучены активность каталазы в культуральном фильтрате штаммов Septoria
nodorum разной вирулентности, а также их рост и раз-
витие под влиянием Н
2О2 в среде культивирования.
Действительно, ранее нами было показано, что при
инокуляции листьев пшеницы высоко вирулентным штаммом S. nodorum продукция Н2О2 была заметно сни-
жена в зоне локализации патогена. В то же время ин-фицирование низко вирулентным штаммом вызывает интенсивную продукцию АФК на ранних этапах патоге-неза, приводящее к снижению интенсивности развития болезни. Исследования показали, что в культуральном фильтрате высоко вирулентного штамма 9МН актив-ность каталазы была в несколько раз выше, чем у низ-ковирулентного штамма 4ВД. Вероятно, способность к повышенному синтезу и секреции экстраклеточных форм каталазы штаммами S. nodorum с высокой виру-
лентностью способствует гашению окислительного взрыва в растительных тканях на ранних этапах инфи-цирования и тем самым, успешному развитию гриба.
Результаты исследований показали, что контроль-
ные колонии низковирулентного штамма 4ВД росли
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 210
медленнее, чем колонии высоковирулентного штамма
9МН. Присутствие в среде культивирования Н2О2 в
концентрации 20 мкМ стимулировало рост и развитие исследуемых штаммов гриба, что выразилось в увели-чении диаметра колоний. Более того, у штамма 9МН, культивируемого как на среде без Н
2О2, так и в при-
сутствии Н2О2 в концентрации 20 мкМ, спороношение
наблюдалось в один и тот же срок – через 15 сут от на-чала опыта. Однако, пероксид водорода многократно увеличивал количество пикнид гриба. Интенсивность спороношения в опыте заметно превышала уровень контроля. Если у штамма 4ВД в контрольных колони-ях спороношение отмечалось только через 20 сут, то в присутствии Н
2О2 в концентрации 20 мкМ инициация
спороношения отмечалась через 18 сут от начала опы-та. Таким образом, пероксид водорода в концентрации 20 мкМ инициировал развитие обоих исследуемых штаммов
гриба, причем более ярко – рост и развитие штамма 9МН. Таким образом, способность к успеш-ному росту и развитию штаммов S. nodorum в при-
сутствии Н
2О2 можно объяснить высокой активностью
внеклеточной каталазы.
Итак, нами впервые показано, что штаммам гриба
S. nodorum свойственна секреция в среду культивиро-
вания каталазы. При этом в среде культивирования вы-соко вирулентного штамма 9МН активность фермента была существенно выше, чем у низко вирулентного штамма 4ВД. Вероятно, способность к секреции ка-талазы способствовала активному росту и развитию штаммов в присутствии пероксида водорода. Посколь-ку особенно ярко это проявлялось у штамма 9МН, то можно предположить, что через продукцию этого ме-таболита гриб регулирует содержание пероксида водо-рода в инфицированных растительных тканях.
Работа выполнялась при частичной финансовой
поддержке РФФИ (проект №05–04–48310-а).
ВЛИЯНИЕ САЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ НА РОСТ И Р АЗВИТИЕ
ВОЗБУ
ДИТЕЛЯ ПЫЛЬНОЙ ГОЛОВНИ u. TriTici
В
СОВМЕСТНЫХ КУ ЛЬТУР АХ С КАЛЛУСАМИ ПШЕНИЦЫ
Трошина Н.Б., Сурина О.Б., Максимов И.В.
Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН,
Уфа
Возбудители головневых относятся к патогенам,
значительно снижающим урожайность зерновых куль-тур. Механизмы формирования устойчивости растений пшеницы к возбудителям твердой и пыльной головни остаются мало изученными [Ярошенко, Зубко, 1966; Trione, 1972; Исаев, 1988]. В связи с этим представ-ляется перспективным создание совместных культур каллусов пшеницы с возбудителем пыльной головни ustilago
tritici для исследований защитных механиз-
мов растительных клеток при инфицировании.
Результаты наших наблюдений показали, что спо-
ры u. tritici начинали прорастать через 3 – 4 сут после инокуляции каллусов мягкой пшеницы сорта Жница. Через 15 сут после инокуляции каллусов наблюдался не только мицелий гриба, но и не проросшие споры и споры с короткими ростковыми трубками, то есть прорастание спор было несинхронным. Образую-щийся воздушный мицелий был кремово-серого цве-та, дрожжеподобный, в начале наблюдений растущий медленно, а затем быстро, в течение 2–3 недель, пок-рывающий поверхность каллусов. Гифы воздушного мицелия росли по поверхности каллусов, часто распо-лагаясь упорядоченно в горизонтальном и вертикаль-ном направлениях.
Мицелий рос не только по поверхности, но и внут-
ри каллусов, главным образом в межклеточном про-странстве рыхло расположенных паренхимных клеток и не инфицировал плотно расположенные паренхим-ные и меристематические клетки. Через 30 сут после инокуляции на воздушном мицелии и мицелии, раз-вивающемся вблизи поверхности каллусов, начинали образовываться споры. Через 60 сут после инокуляции их диаметр был таким же, как и у спор, использован-ных для инокуляции каллусов. Сходные результаты были по
лучены Кау с соавторами [kaur et al., 1990],
изучавшими развитие карнальской головни neovossa
indica
(порядок ustilaginales ) на каллусах пшеницы. В
цитируемой работе отмечено, что гриб n. indica в те-
чение 8
– 10 сут после инокуляции образовывал обиль-
ный б
елый мицелий, который позднее, через 16 – 18
сут после инокуляции, преобразовывался в кремопо-добную слизистую массу, а через 8 недель после ино-куляции формировал хламидоспоры.
Таким образом, нами получены длительно культи-
вируемые совместные культуры каллусов пшеницы с возбудителем пыльной головни. Успех в создании сов-местной культуры связан, вероятно, с удачным выбо-ром фитопатогенного гриба, чье проникновение в кал-лус, как и в растения пшеницы, осуществляется через межклетники [Трунов, 1962]. Известно, что большинс-тво биотрофных грибов проникает в растение преиму-щественно через устьица. Подтверждает сказанное один из редких фактов получения длительно культи-вируемой совместной культуры каллусов пшеницы именно с
возбудителем головневых – возбудителем
карнальской головни злаков [kaur et al., 1990].
Салициловая кислота известна как индуктор защит-
ных реакций растений [Shakirova et al., 2003]. Наши наблюдения показали, что в контроле мицелий u.
trit-
ici так быстро рос на поверхности каллусов, что уже
Фитопатогенные грибы 211
через 20 сут после инфицирования масса инфициро-
ванных каллусов вдвое превышала уровень контроля. Введение СК в среду культивирования каллусов зна-чительно тормозило рост гриба. Таким образом, нами впервые прослежен полный цикл развития u.
tritici в
совместной с этим патогеном культуре каллусов пше-ницы. Салициловая кислота приводила к ослаблению развития гриба в каллусах, что демонстрирует возмож-ность использования каллусных культур с этим пато-геном для скрининга эффективных индукторов устой-чивости нового поколения.
Работа выполнялась при частичной финансовой
поддержке РФФИ (проект №05–04–48310-а).
РЕЗУ ЛЬТАТЫ ПОЛЕВЫХ ИСПЫТАНИЙ
НЕКОТОРЫХ ГРИБОВ-АНТАГОНИСТОВ КОРНЕВЫХ
ГНИЛЕЙ ДРЕВЕСНЫХ ПОРОД
Федоров Н.И., Звягинцев В.Б.
Белорусский государственный технологический университет
Биологический метод ограничения вредоносности
корневых гнилей древесных пород основан на сниже-нии количества субстрата, пригодного для развития патогенов, в виде древесины пней и корней путем за-селения их специально отобранными штаммами сап-ротрофных грибов-антагонистов. Хорошо прорабо-танный отечественными исследователями в 70–80 гг. прошлого века и показавший высокую эффективность, биологический метод не нашел повсеместного распро-странения в практике лесозащиты того времени. Зна-чительная современная площадь очагов корневых гни-лей в
Беларуси (только в сосняках более 120 тыс. га)
заставляет вести поиск и внедрение эффективных мер ограничения вредоносности данной болезни. Интен-сификация лесного хозяйства в нашей стране повыша-ет экономическую и экологическую целесообразность биологических методов защиты леса. Актуальным становится подбор перспективных видов и штаммов антагонистов корневых гнилей, определение резуль-тативных способов их внесения, и выявление влияния данного лесозащитного мероприятия на рост и устой-чивость насаждений.
В лабораторных условиях наибольшую антаго-
нистическую активность к возбудителям корневых гнилей
– грибам из родов Heterobasidion и armillaria –
проявили штаммы следующих ксилотрофов: Phlebi-
opsis gigantea ( fr.) Julich, coniophora cerebella Schr.,
Pleurotus ostrеatus (Jacq. et fr.) kumm.
Инокуляцию свежесрубленных пней проводили
на сплошных вырубках сосновых и смешанных со-сново-елово-мягколиственных насаждений в осенний и весенний периоды. Ph.
gigantea, c. cerebella вноси-
лись в виде водной суспензии спор (10 млн. шт./л) на пни хвойных пород (сосна, ель), а P .
ostrеatus – в виде
мицелия, выращенного на смеси опилок и зерноот-ходов, на пни лиственных пород (береза, осина, ива, ольха, ясень). Все пни диаметром более 10 см после обработки прикрывалась дисками из древесины для предотвращения подсыхания инокулюма. Всего было обработ
ано более 1500 пней. эффективность обработ-
ки оценивалась осенью 2006 г. по прошествии одного вегетационного периода. Успешной колонизации антагонистами подверга-
лись сре
дние (D = 14–24 см) и крупные (D > 24 см)
пни как сосны, так и ели. Процент заселенных пней варьиров
ал по категориям крупности от 76 до 94 %.
Мелкие (D < 14 см) пни имели не высокий процент за-селения
(до 59 %). Древесина их быстро подсыхала и,
очевидно, становилась непригодной для прорастания спор и развития мицелия вносимых ксилотрофов. Та-кая же тенденция наметилась и при анализе процента площади покрытия поверхности пней мицелием ан-тагониста. Особенностью является меньшая площадь покрытия пней сосны по сравнению с другими порода-ми из-за хорошо развитого ядра, смолистая древесина которого высокоустойчива к биодеструкции. Несколь-ко снижало процент покрытия пней ели мицелием ан-тагониста наличие у некоторых из них ядровой гнили, вызванной преимущественно патогенным грибом из рода Heterobasidion. Оба антагониста были способны колонизировать древесину, находящуюся в первой и второй стадии гниения. Наличие в ядровой части пней гнили третьей стадии исключало развитие антагонис-та. Достоверных различий оцениваемых показателей при осенней и весенней инокуляции не выявлено.
Внес
ение мицелия гриба p. ostrеatus, выращенного
на смеси опилок и зерноотходов, показало практичес-ки 100
% приживаемости на пнях всех рассмотренных
лиственных пород. При сохранности прикрывающих дисков мицелий антагониста обильно разрастался по поверхности, и повсеместно отмечались места его внедрения в древесину пня.
Таким образом, отобранные в лабораторных усло-
виях штаммы дереворазрушающих грибов антагонис-тов корневых гнилей показали высокую способность к колонизации свежесрубленных пней в весенний и осенний периоды и могут быть рекомендованы к практическому использованию в комплексе лесоза-щитных мероприятий. Для выявления эффективности данного метода ограничения вредоносности корне-вых гнилей и длительности его воздействия необхо-димо продолжить наблюдения за фитосанитарным состоянием сосновых лесных культур, высаженных на этом участке.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 212
Важным направлением развития защиты расте-
ний от болезней является применение биологического
метода и, следовательно, постоянный поиск и расши-рение круга потенциальных агентов биологической защиты, а также углубление знаний об их биологии. Цель наст
оящей работы – выявление антагонистов фи-
топатогенных грибов Fusarium oxysporum f. lycopersici
(Sacc.) Snyder and Hansen (возбудитель фузариозного увядания томатов) и Penicillium glaucum Link (возбуди-
тель зеленой плесени растений) среди сапротрофных почвенных грибов р. Trichoderma ( Trichoderma viride
408, T. viride 434, T. hamatum 431).
Исследования были проведены на кафедре бота-
ники биологического факультета БГУ . Изоляты фи-топатогенных грибов F . oxysporum f. lycopersici и P .
glaucum получены из коллекции кафедры ботаники
БГУ ,
а грибов р. Trichoderma – из коллекции лабора-
тории микологии ГНУ «Институт экспериментальной ботаники им. В.Ф. Купревича НАН Беларуси». В эк-сперименте использовался метод встречных колоний при культивировании грибов на картофельно-глюкоз-ной агаризованной среде (Бабушкина, 1974). Произво-дился одновременный и разновременный (интервал 4 сут.) посев грибов с расстоянием 4 см между центрами колоний.
В результате работы установлено, что все исследо-
ванные нами штаммы р. Trichoderma являются антаго-нистами
грибам p. glaucum и f. oxysporum f. lycopersici
и оказывают на них ингибирующее действие в той или иной степени, что зависит от штамма гриба р. Trichoderma, вида гриба-патогена и модификации по-сев
а. Наибольшее ингибирование грибов p. glaucum
и f. oxysporum f. lycopersici (96,7–100,0 %) наблюда-
лось при предварительном посеве на субстрат грибов р. Trichoderma всех изучаемых штаммов. Наименьший показатель ингибирования обоих патогенов грибами р. Trichoderma отмечен при предварительном посеве патогенов.
Наиболее
сильным антагонистом гриба f. oxysporum
f. lycopersici из числа изученных при одновременном посеве оказался гриб T. viride 434, максимально инги-бирующий рост патогена (показатель ингибирования 78,6
%). При предварительном нанесении грибов р.
Trichoderma на субстрат почти полное ингибирование гриба f. oxysporum
f. lycopersici (96,7–99,1 %) осущес-
твили практически все представители р. Trichoderma. При пре
дварительном посеве гриба f. oxysporum f. lycopersici максимальное его ингибирование (43,3 %) отмечено при взаимодействии с грибами T. viride 434 и T. hamatum 431. Наиболее сильным антагонистом гри-ба p. glaucum
из числа изученных при одновременном
посеве оказался T. hamatum 431 (показатель ингибиро-вания
80,9 %). При предварительном нанесении гри-
бов р. Trichoderma на субстрат почти полное ингибиро-вание
патогена p. glaucum осуществляли практически
все грибы р. Trichoderma (98,5–100,0 %). При предва-
рительном
посеве гриба p. glaucum максимальное ин-
гибирование
патогена (56,7 %) отмечено при взаимо-
действии его с грибом T. hamatum 431. Максимальная степень нарастания колоний грибов р. Trichoderma на колонии патогенов (4 балла) наблюдалась для обоих патогенов и всех изучаемых грибов р. Trichoderma при предварительном посеве последних. Типы взаимоот-ношений грибов p.
glaucum и f. oxysporum f. lycopersici
с антагонистами р. Trichoderma были охарактеризова-ны нами как территориальный антагонизм либо вза-имный антагонизм (Гринько, Успенская, 1987). При одновременном посеве грибов и в случае предвари-тельного
посева p. glaucum и f. oxysporum f. lycopersici
наблюдалось угнетение грибов р. Trichoderma пато-генными микромицетами (показатель ингибирования 48,1–91,8
%). Явление угнетения потенциальных анта-
гонистов фитопатогенами и условия такого угнетения необходимо учитывать в дальнейшей работе по отбору высокоактивных антагонистов и разработке способов их использования.
Микроскопирование мицелия, конидиеносцев фи-
топатогенов не позволило установить внедрения в их клетки гиф изучаемых грибов р. Тrichoderma. Анта-гонистическая активность исследуемых нами грибов рода Тrichoderma в отношении грибов P . glaucum и
F. oxysporum f. lycopersici может быть обусловлена
не разрушением клеток патогенов внедряющимися в них гифами антагонистов, a продукцией последними антибиотиков и способностью к быстрой колонизации субстрата.
Впервые выявленные высокоантагонистичные гри-
бам P . glaucum и F. oxysporum f. lycopersici штаммы
Trichoderma viride 408, T. hamatum 431, T. viride 434
должны быть изучены в системе «патоген-растение-антагонист», что может при дальнейших исследовани-ях иметь выход в создании на их основе экологически безопасных препаратов биоконтроля данных патоге-нов в агрофитоценозах.ПОЧВЕННЫЕ ГРИБЫ РОДА TRICHODERMA – АНТАГОНИСТЫ
ВРЕДОНОСНЫХ ФИТОПАТОГЕНОВ
Храмцов А.К., Шевчук Е.С., Юркевич А.Ю.
Белорусский государственный университет,
Минск
Фитопатогенные грибы 213
Охрана территории Российской Федерации от ка-
рантинных и опасных болезней растений, способных
нанести значительный экономический ущерб народно-му хозяйству, имеет важное государственное значение. Проникновение патогенных микроорганизмов в новые регионы и страны может осуществляться различны-ми способами. Подавляющее число микроорганизмов мигрируют и проникают в новые районы с семенным и посадочным материалом. В связи этим одной из важ-ных задач федеральных государственных учреждений, подведомственных Россельхознадзору, является прове-дение мониторинга лесонасаждений древесных культур на выявление карантинных и других заболеваний.
К числу наиболее опасных патогенов дуба и сосны,
отсутствующих на территории России, являются возбу-дители сосудистого микоза дуба ( cеr
atocystis fagacearum
(bretz.) Hunt. ), рака стволов и ветвей сосны ( atr opellis
pinicola zeller & Goodding и a. Piniphilla ( we ir.) lohman
& cash ) и коричневого пятнистого ожога хвои сосны
(mycosphaerella dearnessii m.e. bar.).эти виды вклю-
чены в «Перечень вредителей растений, возбудителей болезней растений, растений (сорняков), имеющих ка-рантинное значение для Российской Федерации».
В 2006–2007 г.г. специалисты ФГУ «ВНИИКР»
провели выборочные обследования лесонасаждений дуба и сосны в Орловской, Калининградской, Москов-ской, Самарской и Ульяновской областях. Отобранные образцы доставлялись в ФГУ «ВНИИКР», где прово-дилась диагностика заболеваний и идентификация их возбудителей путем анатомического, биологического и микроскопического анализов.
При обследовании в ГУНП «Орловское Полесье»
Орлов
ской области, местами, было выявлено до 90 %
усохших дубов разных возрастов, у единичных дере-вьев были облиственны на вершине лишь отдельные ветки. У некоторых дубов отмечено отслаивание коры в комлевой части. На отобранных образцах дуба (вы-сечки из корней и ствола, фрагменты веток) на про-дольном срезе были обнаружены пораженные сосуды в виде черных или коричневых штрихов, а на попе-речных срезах они выглядели в виде темных, почти черных, сплошных или прерывистых колец или отде-льных черных точек. На некоторых высечках, взятых из корней дуба, во влажной камере сформировались черные шаровидные перитеции. Данные плодовые тела характерны для рода Ophiostoma. При пассажах гриба на картофельно-глюкозном агаре были выявле-ны конидиальные спороношения Hyalodendron roboris Georg. et Teod. и Cephalosporium sp. которые по культу-рально-морфологическим признакам совпадали с опи-санием этих возбудителей в литературе (Орлова, Голо-дная, 1959; Wilson 1967; Anonymous, 1990). Позднее образовалась телеоморфа гриба, идентифицированная как Ophiostoma roboris Georg. et Teod.. Кроме того, из древесины дуба был выделен возбудитель фузариоза fusarium
semitectum Berk.. На основании полученных
данных можно предположить, что эти патогены яви-лись одной из причин сосудистого усыхания дубов.
По результатам анализов образцов, представлен-
ных из Калининградской и Московской областей, со-став фитопатогенов, локализующихся в сосудистой системе дуба, был сходен с выявленным в Орловской обасти. В образцах дуба из Калининградской области также был выявлен возбудитель сосудистого микоза в телеоморфной и анаморфной стадиях. Помимо на-званных патогенов в древесине дуба присутствова-ли ряд других микроорганизмов (alternaria
alternata
(Fr.) Keissler, . Phomopsis quercella died ., coniothyrium
с
оnicola Kestergr., Fusarium sp . и др.), а в Самарской
и Ульяновской областях почти во всех образцах дуба отмечено присутствие гриба Trichoderma viride Pers ..
На пораженной хвое и веточках сосны обыкно-
венной из Московской, Ульяновской и Самарской об-ластей были выявлены lop
hodermium pinastri chev.,
cоleosporium sonchi-arvensis wint., Phacidium infestans
Karst ., Gloeosporium sp., Pestalotia funerea de sm., вы-
зывающие пятнистости, отмирание и опадение хвои. Наряду с грибами патогенами на усохшей хвое обнару-жены Hormiscium pinophilum al
l., Stigmina sp. и Hormo –
nema sp . Наиболее часто встречаемыми возбудителями
на хвое из Самарской и Ульяновской областей были Do-
th
ichiza ferruginosa Sacc., diplodia pinea ( desm.)Kickx. .
В настоящее время возбудитель диплодиоза является
достаточно опасным и широко распространенным ви-дом, поражающим хвою, ветви и шишки.
Кроме того, на хвое в Московской и Ульяновской
областях было обнаружено малоизвестное в РФ забо-левание –дотистромоз или красная пятнистость хвои, вызываемый dothistr
oma pini Hulb.. Основными симп-
томами заболевания являются появление на хвоинках красных полос, а в дальнейшем ее пожелтение и опа-дение. Возбудитель поражает различные виды сосны, особенно P .passasiana d
. don, вызывая массовое от-
мирание и опадение хвои. d. pini также обнаружен на
хво
е сеянцев кедра. этот патоген широко распростра-
нен во многих странах мира и является карантинным объектом, включенным в список А2 Европейской и Средиземноморской организации по защите растений (ЕОКЗР). Вместе с тем, в последние годы это заболева-ние отмечено в Волгоградской и Ростовской областях, Краснодарск
ом (районы Сочи – Адлер) и Красноярс-
ко
м краях, а также республике Марий э л.
В ходе проведенных обследований карантинных
объектов выявлено не было. На основании получен-ных результатов считаем целесообразным продолже-ние мониторинга древесных насаждений.ПАТОГЕННАЯ МИКРОФЛОР А ДРЕВЕСНЫХ КУ ЛЬТУР
В ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ
Шероколава Н.А., Скрипка О.В., Александров И.Н., Дудченко И.П., Сурина Т.А., Никифоров С.В.
ФГУ всероссийский центр карантина растений (ФГУ «вНИИкР»),
п. Быково, Московская обл.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 7 214
В результате проведенных исследований было ус-
тановлено что большую роль в гибели виноградников,
поврежденных филлоксерой играют микроорганизмы. Так как в процессе гниения и гибели корней виног-рада, который является вторичным патологическим процессом было установлено наличие как фитопато-генных грибов и бактерий, так и сапрофитных грибов. В ряде районов Азербайджана нами был определен видовой состав микроорганизмов (грибы и бактерии) участвующих в гниении корней винограда, поражен-ных филлоксерой.
В настоящее время исследования проводились в
других эколого-географических зонах Азербайджана, в которых брались образцы для определения видового состава микроорганизмов (грибы и бактерии) участву-ющих в процессе гниения корней сортов и форм ви-нограда, пораженных филлоксерой.
В Тертерском районе у сортов винограда Хин-
догни, Баяншира, Тебризи и Мадраса брали образцы корней для анализа. Микроорганизмы, выделенные из пораженных филлоксерой корней винограда сорта Хиндогни, со
ставляли 98 %. Из них 27 % относились к
фитопатогенным грибам рода Gliocladium, 13 % к роду Cylindrocarpon и 40 % к роду fusarium. А также бак-
терии ро
да pseudomonas составляли 10 %, а бактерии
относящиеся к роду Bacillus – 8 %. У этого сорта сап-рофитные грибы не встречались.
Микроорганизмы выделенные из корней винограда
сорта Баяншира, пораженного филлоксерой составля-ли 100
%. Из них фитопатогенные грибы, относящи-
еся
к роду Gliocladium – 15 %, Cylindrocarpon – 17 %
и относящиеся к роду fusarium – 23 %. А также на
корнях этого сорта фитопатогенные бактерии рода pseudomonas
составляли 12 %, а бактерии рода
Bacillus – 15 %. Кроме того, у сорта Баяншира было ус-танов
лено, наличие сапрофитных грибов penicillium –
2,5 %, Mucor – 6,5 %, Absidia – 5 %, Molissia – 4 %,
Rhacodiella – 3 %.
Микроорганизмы выделенные из пораженных фил-
локсерой корней винограда сорта Тебризи составили 94
%. Из них фитопатогенные грибы, относящиеся к
роду Gliocladium составляли – 33 %, Cylindrocarpon- 25 %, fusarium – 10 %. Фитопатогенных бактерии, от-
носящих
ся к роду pseudomonas было 6 %, а Bacillus –
15 %. В то же время из корней винограда сорта Тебризи были выделены сапрофитные грибы рода penicillium –
2,5 % и Absidia – 2,5 %.
У пораженных филлоксерой корней винограда сор-
та Мадраса выделенные микроорганизмы составляли 88
%. Из них фитопатогенные грибы рода Gliocladium
составили – 22 %, Cylindrocarpon – 11 %, а грибы от-носящие
ся к роду fusarium –19 %. Кроме того у этого
сорта были выделены фитопатогенные бактерии рода Bacillus в
количестве 5 % и pseudomonas – 15 %. А так-
же на корнях винограда сорта Мадраса присутствова-ли с
апрофитные грибы рода penicillium – 3 %, Mucor –
3 %, Absidia – 4 %, Molissia – 3 % и Rhacodiella –3 %.
В результате исследования было установлено, что
видовой состав микроорганизмов (грибы и бактерии), выделенные из корней сортов винограда пораженных филлоксерой в различных экологических зонах Азер-байджана, был приблизительно одинаковым. Поэтому, можно сказать, что в условиях Азербайджана причи-ной гниения корней и гибели сортов и форм винограда являю
тся эти микроорганизмы. Выделенные нами
грибы и бактерии были использованы для создания комплексно-инфекционного фона с целью проведения иммунологической оценки устойчивости к филлоксе-ре и микроорганизмам сортов и форм винограда в раз-личных эколого-географических зонах Азербайджана.ФИТОПАТОГЕННЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ –
ВОЗБУДИТЕЛИ ГНИЕНИЯ КОРНЕЙ ВИНОГР АДА, ПОВРЕЖДЕННЫХ
ФИЛЛОКСЕРОЙ В УСЛОВИЯХ АЗЕРБАЙДЖАНА
Шихлинский Г.М., Хияви К.Г.
Институт Генетических Ресурсов НАНА,
Баку, Азербайджан
Мелкие млекопитающие являются обычным ком-
понентом наземных экосистем. Они перемещаются
в толще лесной подстилки, создают и поддерживают норовую сеть, используют в качестве убежищ дупла и прикорневые полости, связывая опад и макропоры почвы. Шерсть мелких млекопитающих представляет собой идеальный материал для сбора спор развиваю-щихся грибов в толще опада и перемещении их на зна-чительные расстояния. Тем не менее, распространение спор сапротрофных микромицетов на шерсти до сих пор мало исследовано. Целью нашей работы является изучение видового состава микромицетов, переноси-мых на шерсти мелких млекопитающих.
Исследования проводились в Старицком районе
Тверской области. В исследованных местообитаниях на-иболее многочисленны два эвритопных вида землероек: бурозубка обыкновенная Sorex araneus и малая бурозуб-
ка S. minutus , а также два лесных вида бурозубка средняя
S. caecutiens и рыжая полевка cle
thrionomys glareolus .
Образцы шерсти мелких млекопитающих брали во вре-мя учетов на стационарных линиях живоловок. Пробы шерсти были исследованы с помощью сканирующего электронного микроскопа и показано, что на шерстин-ках присутствуют споры грибов. На снимках хорошо ви
дны различные способы их прикрепления. это как
механическое зацепление, при котором споры перено-сятся на незначительное расстояние и вскоре стряхива-ются в субстрат, так и приклеивание к шерсти.
Мы сравнивали видовой состав микромицетов,
выделенных из подстилки в изученных местообита-ниях, и высеянных с шерсти мелких млекопитающих. В результате работы обнаружено 203 вида грибов: 47 видов (23,2
%) – отмечены только в подстилке, 95 ви-
дов (46,8
%) – были общие для подстилки и шерсти, 61
вид (30,1 %) – выделялся исключительно с шерсти. На шерсти отмечено достоверно большая встречаемость спор грибов имеющих клейкую оболочку, так же на шерсти выше обилие коремиальных видов, и видов, имеющих крупные сложно устроенные конидиеносцы. Возможно, это облегчает попадание спор на шкурку.
Практически все виды, отмеченные в почве с высо-
кой частотой встречаемости, были выделены и с шерс-ти. На зверьков не попали в основном виды из группы редких и случайных, которые могли находиться в под-стилке в покоящемся, а не в активно развивающемся состоянии. Группу видов обнаруженных на зверьках и не выявленная в собранных образцах подстилки мож-но разделить на две части: виды, развивающиеся в местах связанных с жизнедеятельностью мелких мле-копит
ающих (кератинофильные виды – arachniotus
aurantiacus, acr emonium atrogriseum, Pithoascus
schumacheri, myxotrichum setosum, Petriella setifera,
Scopulariopsis candida; к опрофильные виды – mucor
plasmaticus, Penicillium coprophillun ) и виды, обитаю-
щие в местах посещаемых зверьками, но не миколога-ми, собирающими образцы.
Вторая группа включает очень много интересных
видов, крайне редко выделяемых стандартными мето-дами это, например, микофильные виды ( cladobotryum
varium,
Sporotrichum fungorum), анаморфные грибы,
участвующие в разложении древесины ( bactr odesmium
betulicola , chr omelosporium fulvum, cladosporium mac-
rocarpum, rhinocladiella atrovirens, Septonema pseu-
dobinum), а также стерильные мицелии нескольких типов с пряжками, возможно принадлежащие дерево-разрушающим базидиомицетам, и Spiniger meineckel-
lus, который является анаморфой опасного паразита хвойных
деревьев – корневой губки Heterobasidion
annosum. Таким образом, мелкие млекопитающие, пе-ремещаясь между больными и здоровыми деревьями, могут вносить существенный вклад в распространение дереворазрушающих и патогенных грибов в лесу.Раздел 8
эКОЛОГИЯ ГРИбОВ
ОСОБЕННОСТИ ВИДОВОГО СОСТАВА МИКРОМИЦЕТОВ,
Р АСПРОСТР АНЯЕМЫХ НА ШЕРСТИ МЕЛКИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ
Александрова А.В.1, Александров Д.Ю.2
1 МГУ имени М.в. ломоносова, Биологический факультет,
Москва
2 Институт Проблем Экологии и Эволюции РАН,
Москва
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 216
Микромицеты связаны биоценотическими связями
с различными организмами, в том числе с растения-
ми. А
ссоциации микромицетов с пыльцой растений –
практически не изученный раздел микологии. Одним из наиболее распространенных в средней полосе Рос-сии деревьев является береза повислая ( betula
pendula
Roth). Пыльца березы относится к ведущим аллерге-нам данног
о региона. это и обусловило выбор объекта
нашего исследования.
Цель рабо
ты – изучить микобиоту пыльцы березы
повислой ( b. pendula ).
Было исследовано 54 образца пыльцы березы по-
вислой (B.
pendula), произрастающей в разных районах
г. Москвы и Московской области. Выделено 24 вида микромицетов из 12 родов. Абсолютно доминировали Aureobasidium pullulans
(de Bary) G. Arnaud и вид, близ-
кий к
Quambalaria cyanescens (de Hoog & G.A. de vries)
z.W. de Beer, Begerow & R. Bauer (синоним Sporothrix cyanescens de Hoog & G.A. de vries, Cerinosterus
cyanescens (de Hoog & G.A. de vries) R.T. Moore). Мик-ромицет
A. pullulans является часто встречающимся на
листьях различных растений. Q. cyanescens известен как фитопатоген, вызывающий болезни побегов рас-тений рода Eucalyptus и близкого ему рода Corymbia. Данные об
ассоциации Q. cyanescens с B. pendula в ли-
тературе отсутствуют. Встречаемость и удельное оби-лие доминирующих микромицетов на пыльце березы сост
авляли 100 и 41 % для A. pullulans и 67 и 53 % для
Q. cyanescens соответственно. Доля других видов не превышала 2 % от общего обилия всех выявленных грибов. Численность микромицетов варьировала от 1,7Ч103 до 7,2Ч104 КОЕ/г пыльцы и в среднем состав-ляла 2,0Ч104 КОЕ/г пыльцы.
Таким образом, на пыльце березы могут присутс-
твовать различные микромицеты, достигая численнос-ти 10
4 КОЕ/г пыльцы. Ассоциацию пыльцы с микро-
мицетами необходимо учитывать при стандартизации пыльцевых аллергенов. Впервые получены данные об ассоциации Q.
cyanescens с b. pendula, что требует
дальнейшего изучения.МИКРОМИЦЕТЫ, АССОЦИИРОВАННЫЕ С ПЫЛЬЦОЙ
БЕРЕЗЫ ПОВИСЛОЙ (beTula Pendula ROTH)
Антропова А.Б.1, Биланенко Е.Н.2, Мокеева В.Л.2, Чекунова Л.Н.2, Желтикова Т.М.1
1 ГУ НИИ вакцин и сывороток имени И.И.Мечникова РАМН,
Москва
2 МГУ имени М.в. ломоносова, Биологический факультет,
Москва
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ШИРОТНО-ЗОНАЛЬНЫХ СПЕКТРОВ ВИДОВОГО СОСТАВА
КСИЛОМИКОКОМПЛЕКСА ПРИ ИНДИКАЦИИ СОСТОЯНИЯ ЛЕСА
Арефьев С. П.
Институт проблем освоения Севера Со РАН,
Тюмень
На примере Betula-ксиломикокомплекса рассмот-
рен способ индикации лесорастительных условий и состояния леса, основанный на сопоставлении видо-вой структуры конкретного ксиломикокомплекса (це-нокомплекса) со спектром зональных ксиломикоком-плексов (типов), построенных по всей совокупности 223 исследованных в Западной Сибири участков Вы-делено три функциональных группы грибов: 1) ство-ловые транскортикальные и паразитические виды, 2) веточно-вершинные транскортикальные виды, 3) ранево-рудеральные виды. Для сопоставления взяты betula -ценок
омплексы 14 различных лесных участков
природного парка «Нумто» (Ханты-Мансийский авто-номный округ), относимого к подзоне северной тайги.
Большинство ценокомплексов парка имеет макси-
мальное сходство с зональными типами гипоарктичес-ких редколесий или северной тайги. Ценокомплексы наиболее
производительных лесов (v бонитет) – с
типами северной и средней тайги в равной мере, це-ноко
мплексы угнетенных криволесий – с типами ред-
колесий и лесотундры, ценокомплекс антропогенного криво
лесья – с лесотундровым типом. В обе стороны
от максимума спектральных кривых сходство умень-шается, но для ценокомплексов из наиболее произво-дительных лесов прослеживается довольно высокое сходство даже с подтаежным и лесостепным типами. Коридор абсолютных значений сходства весьма ши-рок, особенно высоки они для ценокомплексов естес-твенных. Ценокомплексы импактных зон поселений, вырубок, гарей имеют низкий уровень сходства со все-ми зональными типами.
Картины сходства функциональных ценогруппи-
ровок грибов с их зональными типами существенно отличаются от описанной выше. Например, для раз-ных ценогруппировок вершинных грибов характерно большое единообразие спектральных кривых сходства как
по их форме, так и по абсолютным значениям. это
обусловлено погодно-климатическими факторами, едиными для рассматриваемой территории и лимити-рующими данную ценогруппировку, развивающуюся в мелких субстратах с наименее автономной внутрен-ней средой. Сравнительно высокие показатели сходс-
Экология грибов 217
тва этих ценогруппировок с их южными зональными
типами и низкие с северными индицируют сухость биотопа (лишайниковые типы леса, горельник), про-тивоположная ситуация свидетельствует о влажности ботопа.
Анализ сходства стволовых ценогруппировок с зо-
нальными типами позволяет оценить, прежде всего, бонитет и возраст леса. Низкие абсолютные показа-тели сходства раневых ценогруппировок с зональны-ми типами свидетельствуют об усыхании древостоя вследствие пожаров или неблагоприятных эдафичес-ких условий, напротив, высокие показатели сходства могут свидетельствовать о физиологической устойчи-вости леса.
АНТАГОНИСТИЧЕСКИЕ ВЗАИМООТНОШЕНИЯ АГАРИКОИДНЫХ
МАКРОМИЦЕТОВ И МИКРОМИЦЕТОВ-БИОДЕСТРУКТОРОВ В эКСПЕРИМЕНТЕ
Баринова К.В.1, Власов Д.Ю.1, Псурцева Н.В.2
1 Санкт-Петербургский государственный университет
2 Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
Микроскопические грибы являются одними из са-
мых активных агентов биоповреждений в антропоген-ной среде. Кроме того, развиваясь на различных типах промышленных и строительных материалов, они мо-гут представлять серьёзную опасность для здоровья людей. На сегодняшний день поиск новых средств за-
щиты о
т микромицетов – биодеструкторов направлен
на разработку экологически безопасных способов, не связанных с использованием токсичных для челове-ка и животных соединений (часто содержащих ртуть, олово, свинец, мышьяк и некоторые другие тяжелые металлы). Одним из возможных способов является использование антибиотических веществ, обладаю-щих фунгицидным действием. Среди продуцентов таких веществ известны различные бактерии, а также многие грибы. Антифунгальной активностью облада-ет значительная часть антибиотиков, продуцируемых базидиомицетами, в особенности агарикоидными гри-бами (Шиврина, 1965; Великанов, Сидорова, 1983; Си-
дорова, Великанов, 2000).
В настоящей работе начато изучение антимико-
тических свойств базидиальных макромицетов. На основании анализа литературных данных и собствен-ных наблюдений для исследования было выбрано 10 штаммов агарикоидных макромицетов (из коллекции БИН Р АН): из рода agr
ocybe – a. aegerita 0552, a. firma
1783, a. praecox 0631, a. sphaleromorpha 1603; 1653;
1832; 2167, а также lampter omyces japonicus 0491, Ma-
rasmius scorodonius 1514 и Pholiota squarrosa 1791.
Биологическая активность этих грибов оценивалась в отношении микромицетов-биодеструкторов из отдела deutor
omycota – aspergillus versicolor 127, Penicillium
spinulosum 19/06, ulocladium chartarum 17/06 (из кол-
лекции БиНИИ СПбГУ).
Для выявления антибиотической активности грибов
был использован метод совместной культуры (Лилли, Барнетт, 1953). При этом в чашку Петри на среду сус-ло-агар (рН 5,8–6,0) производился посев агарикоидно-го гриба, а через 10 суток осуществлялся посев в эту же чашку одного из трех микромицетов.
На основании полученных результатов было описа-
но взаимодействие разных видов макро- и микромице-тов в условиях совместной культуры. Анализ данных позволил выявить восемь основных типов взаимо-отношений, хотя практически в каждой комбинации были отмечены индивидуальные особенности. При-водим характеристику выявленных типов и подтипов взаимоотношений грибов в совместной культуре.
Тип I. При контакте колоний рост микромицета ос-
танавливается, макромицет продолжает расти поверх колонии микромицета: 1-й подтип –
без задержки в
росте макромицета (agr ocybe aegerita 0552 + asper gil-
lus versicolor 127; agr ocybe aegerita 0552 + u. charta-
rum 17/06; agr ocybe sphaleromorpha 1832 + asper gillus
versicolor 127; agr ocybe sphaleromorpha 1832 + Penicil-
lium spinulosum 19/06; agr ocybe sphaleromorpha 1832
+ u. chartarum 17/06; agr ocybe sphaleromorpha 2167 +
Penicillium spinulosum 19/06; agr ocybe sphaleromorpha
2167 + u. chartarum 17/06; l. japonicus 0491 + Penicil-
lium spinulosum 19/06; m. scorodonius 1514 + u. char-
tarum 17/06; Pholiota squarrosa 1791 + Penicillium spi-
nulosum 19/06; Pholiota squarrosa 1791 + u. chartarum
17/06), 2-й подтип – с задержкой роста макромицета
при контакте с колоний микромицета ( agrocybe aegeri-
ta 0552 + Penicillium spinulosum 19/06; agr ocybe spha-
leromorpha 1653 + asper gillus versicolor 127; agr ocybe
sphaleromorpha 1653 + u. chartarum 17/06; agr ocybe
sphaleromorpha 2167 + asper gillus versicolor 127; l. ja-
ponicus 0491 + asper gillus versicolor 127).
Тип II. После соприкосновения рост колоний пре-
кращается, через некоторое время мицелий микроми-цета, находящийся в контакте с макромицетом лизиру-ется. Мицелий макромицета при этом медленно растет поверх колонии микромицета или нарастает только на край его колонии (
agrocybe sphaleromorpha 1653+Pe-
nicillium spinulosum 19/06; agr ocybe praecox 0631+u .
chartarum 17/06; m. scorodonius 1514+Penicillium spi-
nulosum 19/06).
Тип III. После соприкосновения рост колоний
прекращается (обоюдное подавление при контакте) (a
grocybe firma 1791+u . chartarum 17/06; agr ocybe
praecox 0631+Penicillium spinulosum 19/06; agr ocybe
sphaleromorpha 1603+ Penicillium spinulosum 19/06;
agr
ocybe sphaleromorpha 1603+u . chartarum 17/06).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 218
Тип Iv . Обоюдное подавление на расстоянии: рост
колоний прекращается, между ними образуется зона
ингибирования (agr ocybe firma 1791+a spergillus versi-
color 127; agr ocybe firma 1791+Penicillium spinulosum
19/06).
Тип v.
Обоюдное подавление на расстоянии: рост
колоний замедляется, но не прекращается полностью, зона ингибирования не образуется, края двух колоний смыкаются ( Pholiota squarrosa 1791+a
spergillus versi-
color 127).
Тип v
I. Подавление макромицета микромицетом
при контакте, на краю колонии макромицета образу-ется выемка (
agrocybe praecox 0631+a spergillus versi-
color 127).
Тип v
II. Подавление макромицета микромицетом
на расстоянии, на краю колонии макромицета образу-ется выемка ( agr
ocybe sphaleromorpha 1603+a spergil-
lus versicolor 127).
Тип v
III. Подавление роста микромицета на рас-
стоянии с последующим нарастанием мицелия макро-мицета на колонию микромицета (l.
japonicus 0491+u.
chartarum 17/06;
m. scorodonius 1514+ asper gillus ver-
sicolor 127).
Самым распространённым является первый тип
взаимоотношений
(56 %). Вторым по встречаемос-
ти ок
азался тип III (13 %). Встречаемость остальных
вариантов не превышала 10 %. Наиболее заметное влияние на микромицеты было установлено для мак-ромицетов Agrocybe aegerita 0552; A. firma 1783; A. sphaleromorpha 1832; 2167; Lampteromyces japonicus 0491; Marasmius scorodonius 1514.
Среди микромицетов антагонистическое действие в
отношении агарикоидных проявлял только asper
gillus
versicolor 127. Под влиянием метаболитов микроми-
цетов, выделяемых в среду, наблюдались морфологи-ческие изменения колоний некоторых макромицетов: образование мицелиального валика на краю колоний agr
ocybe firma 1783, изменения внешней линии коло-
нии agr ocybe sphaleromorpha 1653 и др.Оценка антифунгальной активности метаболитов
грибов проводилась путем посева тест-объекта на агаризованную питательную среду, содержащую про-дукты жизнедеятельности антагониста (Пестинская, 1958). Для получения культуральных фильтратов, со-держащих метаболиты макромицетов, осуществляли культивирование агарикоидных грибов глубинным способо
м на жидком сусле (1,5 %) на ротационной
качалке (180 об/мин) при температуре 25 °С. Полу-ченный фильтрат смешивали со средой сусло-агар, ох-лажденной до
45 °С, в соотношении 1:3. эксперимен-
тальную среду разливали в чашки Петри диаметром 40 мм и высевали исследуемые микромицеты. Анти-биотическую активность грибов проверяли на 10 день культивирования.
В результате было установлено, что метаболиты
базидиомицетов agr
ocybe aegerita 0552; agr ocybe firma
1783; agr ocybe sphaleromorpha 1832; 2167 оказывают ингибирующее действие на рост и развитие asper
gillus
versicolor 127; ulocladium chartarum 17/06; Penicillium
spinulosum 19/06, а также, в ряде случаев, влияют на их
спороношение и морфологические признаки.
Наиболее значительное фунгистатическое дейс-
твие было характерно для культурального фильтрата Agrocybe aegerita 0552. Его добавление в среду замед-ляло скорость роста Ulocladium chartarum 17/06 на 37
%, Aspergillus versicolor 127 на 36 % и penicillium
spinulosum 19/06 на 18 %.
Таким образом, было показано, что все изученные
макромицеты в той или иной степени обладают антаго-нистической активностью в отношении микромицетов-биодеструкторов. Наиболее выраженное антагонисти-ческое действие проявляли agr
ocybe aegerita 0552; a.
firma 1783; a. sphaleromorpha 1832; 2167; lam pteromy-
ces japonicus 0491 и marasmius scorodonius 1514.
эти
грибы представляют интерес для дальнейшего
изучения их антибиотических свойств.
Работа выполнялась при поддержке гранта РФФИ
06–04–49043.
ОСОБЕННОСТИ эКОЛОГИИ ГИФОМИЦЕТОВ В ХВОЙНЫХ ЛЕСАХ БЕЛАРУСИ
Беломесяцева Д.Б., Шабашова Т.Г.
Институт эк
спериментальной ботаники им. в.Ф. к упревича,
Минск
В процессе изучения микобиоты хвойных пород Бе-
ларуси (1998–2007 гг.) было установлено, что наиболее значительную по количеству видов часть микобиоты различных типов сосняков составляют гифомицеты, и что непосредственно в консорцию сосны обыкновен-ной входит 157 видов гифомицетов. Таким образом, можно сказать, что они составляют наиболее значитель-ную часть всех микроскопических грибов, связанных с со
сной (47.5 % от общего количества видов).
Около 40 видов гифомицетов колонизируют раз-
личные живые и отмирающие наземные части расте-ний сосны. В качестве характерного примера можно привести такие сапротрофные виды, как Arthrobotrys arthrobotryoides (Berl.) Lindau (на коре отмерших ветвей ках), Chalara affinis Sacc. (на опавшей хвое), Cheiromycella microscopica
(p. karst.) S. Hughes (на
коре отмерших ветвей), Endophragmiella pinicola (M.B. Ellis) S. Hughes (на опавшей хвое), Harpographium fasciculatum Sacc. (на опавшей хвое), Hormiactella asetosa Hol.-Jech. (на коре отмерших ветвей), Septonema fasciculare (Corda)
S. Hughes (на коре отмерших вет-
вей),
Sesquicillium candelabrum (Bonord.) W. Gams (на
хвое), Thysanophora penicillioides (Roum.) W.B. kendr. (на опавшей хвое).
Экология грибов 219
Еще 115 видов гифомицетов выделяется непосредс-
твенно с поверхности корней или (в некоторых случа-
ях) из глубины корневых тканей. Те же виды, хотя и в меньшем количестве, выделяются из наземных тканей сосны, в которых находятся в эндофитном состоянии. Примером могут служить виды Acremonium butyri (J.f.H.
Beyma) W. Gams, Botryosporium diffusum (Grev.)
Corda, Gonytrichum macrocladum (Sacc.) S. Hughes, Haplaria grisea Schwein., Humicola nigrescens Omvik, Oidiodendron maius
G.L. Barron, phaeoisaria clavulata
(Grove) E.W. Mason & S. Hughes, Rhinocladiella atrovirens Nannf., Scopulariopsis brevicaulis (Sacc.) Bainier.
Согласно полученным данным, количество видов
темноокрашенных, дематиевых гифомицетов и гифо-мицетов монилиоидных присутствующих в консорции сосны обыкновенной соотносится как 1:2. Значитель-ное превалирование последних связано в первую оче-редь с наличием в микобиоте представителей 6 круп-ных ро
дов: Aspergillus E.M. fries, Gliocladium Corda,
paecilomyces Bainier, penicillium Link, Trichoderma
persoon и verticillium Nees. Так, например, из кор-
ней нами было выделено в культуру 27 видов рода penicillium. э
то различие в количественном составе
темно- и светлоокрашенных гифомицетов представля-ет собой вполне характерное явление для хвойных по-род произрастающих на дерново-подзолистых почвах.
Как видно из вышеприведенных примеров, подав-
ляющие большинство гифомицетов являются сапро-трофами и развиваются на отмирающих частях расте-ний сосны, а также на поверхности и в тканях корней.
Их состав имеет значительное сходство с общей
группой микромицетов децидуофилов.
Количество видов-биотрофов среди гифомицетов
крайне ограничено. К ним относятся Brachysporium nigrum, pseudocercospora
deightonii и Sesquicillium
candelabrum. На живых растениях могут при благо-приятных для них условиях обильно развиваться такие виды гифо
мицетов, как Alternaria alternata (fr.) keissl.,
Botrytis cinerea pers. и Cladosporium cladosporioides
(fresen.) G.A. de vries. В некоторых случаях, как прави-
ло, на
ослабленных сеянцах 1-го года C. cladosporioides
. может вызывать поражение по типу кладоспори-оза или темно-оливковой плесени. В свою очередь B.
cinerea также может выступать как возбудитель се-
рой плесени сеянцев сосны (как показал в своих ра-ботах Н.И. Федоров, обычно этим заболеванием пора-жаются сеянцы, культивируемые под полиэтиленовой пленкой, где нарушен режим полива и проветривания, а также в перегущенных посадках).
РОЛЬ ДИСКОМИЦЕТОВ В Р АСТИТЕЛЬНЫХ ЦЕНОЗАХ
Богачева А.В.
Биолого-почвенный институт Дво РАН,
владивосток
Мы выделяем шесть основных функций дискоми-
цетов в жизнеобеспечении растительных сообществ. Во-первых, дискомицеты в биогеоценозе играют роль деструкторов, утилизаторов растительных остатков. На листовом опаде прошлого года развиваются 25 видов дискомицетов. Характерными признаками этих грибов являются формирование на одном субстрате несколь-ких мелких по размеру плодовых тел до 2 мм в диамет-ре. На перепревшем опаде развивается уже до 42 видов дискомицетов. Характерными признаками этих грибов являются формирование одиночных крупных плодовых тел до 250 мм высотой и 100 мм в диаметре. Иногда на конгломерате из остатков листвы разросшаяся грибни-ца развивает по нескольку аском одновременно. Что касается утилизации веточного опада и валежной дре-весины, то по нашим наблюдениям, дискомицеты осу-ществляют первую стадию их разложения. Во время заключительной стадии деструкции древесины глав-ная роль переходит к кортикофильным дискомицетам, которые поселяются на коре упавших стволов и ветвей деревьев и, обладая всем необходимым набором фер-ментов, довершают процесс деструкции самых трудно-разлагаемых элементов стволов и ветвей. Вторая фун-кц
ия дискомицетов – усиление конкурентоспособности
высших растений в борьбе за минеральные вещества, вступая с ними в симбиотические связи. Дискомицеты, способные вступать в симбиоз с высшими растениями, встречаются в небольшом количестве почти во всех би
оценозах региона. это представители Helvellaceae,
mor
chellaceae, Pezizaceae . Однако судить об этом можно
лишь категориями вероятности, поскольку очень трудно без специального ДНК-анализа определить гифы какого гриба оплели покровную ткань окончаний молодых кор-ней и проникли в межклетники. В-третьих, некоторые дискомицеты, поселяясь на живых растениях, ограни-чивают до некоторой степени их рост, при понижении сопротивляемости способствуют гибели ослабленного организма и, в конечном итоге, утилизируют его отмер-ши
е останки. Южная часть Дальнего Востока – это соб-
рание отрогов нескольких горных систем, покрытых, большей частью, лесами. По результатам исследований отмечается наибольшее заселение грибами лесов ниж-него высотного пояса. Особенно сильно поражаются дeревья, произрастающие на переувлажненных, слабо дренированных участках речных долин, а также дере-вья, ослабленные пожаром. Высокогорные ельники, ка-менноберезники, заросли кедрового стланика заселены незначительно. Копротрофные дискомицеты разлагают продукты жизнедеятельности травоядных, хищных, грызунов и птиц, населяющих растительные сообщес-тва. В этом заключается следующая важная функция дискомицетов в растительных сообществах. На се-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 220
годняшний день в биоте региона зарегистрировано 54
вида. С растительными ценозами копротрофы связаны опосредованно. Пятая немаловажная функция диско-ми
цетов – подготовка к заселению растениями после-
пожарных территорий. Карбоникольные дискомицеты успешно распространяются по дальневосточному ре-гиону вслед многочисленным ежегодным пожарам. На-почвенные дискомицеты представляют собой важный компонент гетеротрофного блока сообществ почвенных ор
ганизмов. это, в основном, все гумусо-подстилочные
дискомицеты. С их участием идут, по всей вероятности, био- и геохимические процессы разрушения горных по-род и минералов, оструктуривание почвы, утилизации растительных остатков и формирования почвенного перегноя, поставляя в почвообразовательный процесс органические кислоты.
Все вышеперечисленные функции отражаются на
трофической структуре биоты дискомицетов дальне-восточного региона. Доминирующее положение за-нимаю
т сапротрофы (49 %). Широко представлены
напочвенные дискомицеты (21 %). Потенциальные микоризообразователи составляют 10 %. Доля копро-трофных
(9 %), условно-патогенных (6 %) и карбони-
ко
льных видов (5 %) также весьма значительна.
эКОМОРФОЛОГИЯ ГРИБОВ
Бондарцева М.А.
Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН
Для каждого отдельного вида в экономии
природы имеется только определенное число
мест
Эрнст Геккель
Расселение грибов в пространстве определяется
географическим и экологическим факторами. В гео-
графическом расселении основное значение имеет способность видов выживать при определенном ре-жиме температуры и влажности, при наличии или отсутствии смены сезонов, причем решающую роль играют пессимальные значения. Участие в экосисте-мах различного уровня определяется адаптационными характеристиками грибов, выработанными в процессе эволюции. Для грибов как гетеротрофов, потребляю-щих субстрат, на котором они поселяются, физиолого-биохимическая и морфологическая формы адаптации одинаково важны. Посредством мицелия, погружен-ного в субстрат, осуществляется питание гриба. В почве, живом дереве, слабо разрушенной валежной древесине, в некоторых видах животных субстратов мицелий может сохраняться годы и десятки лет, под-держивая присутствие вида в данной экосистеме, а также способствуя локальному распространению. Од-нако функция размножения, расселения в пространс-тве, освоения новых субстратов и экологических ниш, несомненно, связана с органами спороношения. В природных экологических нишах грибы находятся в тесном соседстве и взаимодействии с многочислен-ными представителями других царств органического мира. Согласно принципу «плотной упаковки» Мак-Артура в естественных сообществах организмы стре-мятся использовать все возможности для существо-вания, предоставляемые средой, и максимизировать биопродуктивность в конкретном биотопе. Процесс «упаковки» или дифференциации экологических ниш ведет к снижению конкуренции в сообществе, разделу ресурсов, пространства и функциональной специали-зации организмов. В этой ситуации особую роль иг-рает морфологическое строение организма и особенно органов размножения. Согласно последней класси-фикации, разработанной рядом авторов (Hibbett et al., 2007) к «низшим» отделам царства грибов относятся chytridiomycota, n
eocallimastigomycota, blastocladio-
mycota, micr
osporidia, Glomeromycota . Высшие грибы
представлены отделами ascomycota и basidiomycota .
«Низшие»
грибы имеют неклеточный мицелий, не об-
разуют плодовых тел, размножаются в основном ана-морфами, представленными большим разнообразием форм, тогда как телиоморфы довольно однородны морфологически и имеют значение в переживании не-благоприятных условий. Аскомицеты и базидиомице-ты имеют многоклеточный мицелий и образуют пло-довые тела, обеспечивающие защиту развивающихся спор. У аскомицетов большая часть жизни проходит в гаплофазе. В их жизненном цикле, особенно у пирено-мицетов, анаморфы играют большую роль в размно-жении, причем во многих случаях бесполые споры, также как и половые, развиваются внутри плодовых тел (соответственно, пикнид и перитециев). Половые споры, как и у низших грибов, в ряде случаев служат для переживания неблагоприятных условий (засухи, перезимовки). Плодовые тела дискомицетов значи-тельно более разнообразны по форме и размерам, чем у пиреномицетов, многие из них имеют макроскопи-ческие размеры. Жизненный цикл базидиомицетов протекает в основном в дикариофазе. Ржавчинные и головневые базидиомицеты (ustilaginomycotina,
Puc-
ciniomycotina ) имеют сложный жизненный цикл, пло-
довых тел не образуют и используют кроющие ткани растения для защиты незрелых спор. Агарикомицеты в широком смысле (agaricomycotina )
почти не имеют
анаморф, диплоидизация сведена к сближению ядер в дикарионе, слияние ядер и последующее редукцион-ное деление осуществляется без формирования спе-циализиров
анных органов. эта группа грибов отлича-
ется максимальным разнообразием плодовых тел, они способны расти на многих субстратах, включая живые деревья, многие из них являются микоризообразовате-лями. Базидиомицеты играют ведущую роль в лесных
Экология грибов 221
экосистемах, хотя многие базидиальные макромицеты
растут и в других условиях (луга, степи, даже пусты-ни). Морфологическое разнообразие базидиом обес-печивает им присутствие во всех эконишах и на всех этапах деструкции органики в лесных ценозах.
Адаптация к среде обитания выражается в харак-
теристиках морфотипов, которые наилучшим образом вписываются в сообщество, максимально используя имеющиеся возможности для поддержания числен-ности в данном местообитании и расселения в про-странстве. Близкие по строению или внешне сходные морфотипы могут встречаться у родственных или фи-логенетически отдаленных групп грибов. В последнем случае эт
о результат параллельного развития – образо-
вание в процессе эволюции адаптивных структур. От-бор экоморф определяется прежде всего субстратом. Плодовые тела, в зависимости от возможных сроков существования, построены из тонкостенных или тол-стостенных гиф, имеющих дифференциацию или нет. На почве растут виды с однолетними (существующи-ми один сезон) базидиомами, поэтому их гифальное строение представлено немногими типами дифферен-циации тонкостенных гиф. На стволах живых дере-вьев и мало разрушенном валеже плодовое тело гри-ба может существовать несколько, а иногда и много сезонов, поэтому его конструкция может быть более сложной. Многолетние плодовые тела обычно состо-ят из толстостенных дифференцированных гиф. При всем разнообразии экоморф грибов их строение свя-зано с условиями распространения спор в определен-ных сит
уациях, – активным или пассивным. Активное
распространение предполагает возможность «вылета» в свободное пространство. При наличии открытого гимения (дискомицеты, кортициоидные, цифелловые грибы и др.) отстрел спор как правило достигает этой цели. Если же гимений расположен на стенках трубо-чек или пластинок (трутовики, болетовые, агариковые грибы), то гименофор должен быть положительно геотропичным и в случае изменения положения пло-дового тела имеются механизмы восстановления его ориентации (изгиб ножки, неравномерный рост сте-рильной части сидячей шляпки). В водной среде ос-вободившиеся споры грибов подхватываются и разно-сятся течением. Поэтому их стенки обычно снабжены различными выростами, облегчающими свободное плавание. Покоящиеся споры низших грибов, развива-ющиеся непосредственно на мицелии, обычно доволь-но крупного размера и снабжены очень толстой, часто орнаментированной оболочкой, способной долгое вре-мя выдерживать неблагоприятные условия.
эти
примеры показывают, насколько разнообразны
могут быть формы адаптации грибов к условиям су-ществ
ования, но все они подчинены одной задаче – вы-
живания и расселения в пространстве и во времени.
Работа поддержана грантом РФФИ 06–04–49524 и
программой «Биоразнообразие».
К ХАР АКТЕРИСТИКЕ МЕЖПОПУ ЛЯЦИОННЫХ ОТНОШЕНИЙ ГРИБОВ
И АКТИНОМИЦЕТОВ В ЧЕРНОЗЕМЕ И ПОДЗОЛИСТОЙ ПОЧВЕ
Виноградова К.А.1, Александрова А.В.1, Лихачева А.А.2, Кожевин П.А.2
1 МГУ имени М. в. ломоносова, биологический факультет,
Москва
2 МГУ имени М. в. ломоносова, факультет почвоведения,
Москва
Грибы и актиномицеты, являющиеся типичными
обитателями различных почв, рассматриваются как на-иболее важные члены почвенной микробиоты. И те, и другие обладают мицелиальной организацией, характе-ризуются сложным жизненным циклом развития, вклю-чающим образование спор, и способны к интенсивному синтезу самых разнообразных биологически активных ве
ществ. экологические ниши этих двух групп орга-
низмов частично перекрываются, что делает весьма значимым вопрос о характере их межпопуляционных взаимодействий в связи с возможным влиянием на структуру и функционирование микробного почвенно-го сообщества. Появление исследований и научно-прак-тических разработок, касающихся, с одной стороны, влияния представителей токсичных грибов на структу-ру почвенного микробиологического сообщества и на состояние растительного покрова а, с другой стороны, развитие современных работ по поискам и внедрению в сельскохозяйственную практику биофунгицидов стреп-томицетного происхождения, свидетельствует в пользу большого интереса к этим исследованиям. Тем не менее, механизмы межпопуляционных взаимодействий грибов и актиномицетов в почве in situ недостаточно изучены.
Наша работа посвящена анализу взаимоотношений
аборигенных грибов и актиномицетов в черноземе и дерново-подзолистой почве. Проведен анализ числен-ности и таксономического состава этих организмов. Изучен характер действия выделенных актиномицетов на аборигенные грибы, являющихся представителя-ми различных эколого-трофических групп и преоб-ладающих в исследуемых почвах. Актиномицетное сообщество чернозема состоит преимущественно из представителей рода Streptomyces, иные роды акти-номицет
ов составляют от 5.6 % до 21.4 % на разных
использованных средах, при этом активными агентами воздействия на грибы являются только представители рода Streptomyces. В аборигенном актиномицетном сообществе чернозема явно преобладают те, которые способны стимулировать рост и/или образование спор грибов: их обнаружено в три раза больше, чем антаго-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 222
нистов (33.5 % против 11.6 %). Из чернозема выделены
актиномицеты – хитинолитики на селективной среде с хитином (маркерный компонент грибной биомассы). Среди них были и те, которые угнетают рост абори-генных грибов. Однако подавляющее большинство хитинолитик
ов- антагонистов (80 %) обладают лишь
слабой способностью угнетать рост 1–2 грибов, и ос-новной функциональной особенностью черноземного актиномицетного сообщества является способность к стимуляции аборигенного грибного сообщества.
Кластерный анализ положительного и отрицатель-
ного механизмов регуляции грибов актиномицетами дал возможность произвести группирование популяций грибов по критерию взаимодействия с актиномицетами. эти
группировки в первом приближении можно рас-
сматривать как частные экологические ниши. Отмечено, что каждый полученный кластер вошли виды грибов, близкие по физиолого-трофическим характеристикам. Например, в один и тот же кластер вошли виды, универ-сальные для всех сельскохозяйственных почв, требую-щие большой влажности для своего развития и связан-ны
е с растениями – фитопатогены Fusarium oxysporum
и F . solani , и ризосферный вид mor tierella sp ., улучшаю-
щий питание растений. В состав другого кластера вошли виды, способные расти при низкой активности воды и вы
соких температурах – фитопатогенные F . flocciferum и
V erticillium chlamydosporium и сапротрофный Penicillium
chrysogenum, участвующий в самоочищении почв от пес-
тицидов и других загрязняющих веществ. Из полученных данных следует, что в каждый вы-
явленный
кластер могут входить виды – как оказыва-
ющие благоприятное действие на плодородие почв и растения, так и виды, патогенные для растений. Таким образом, в характеристику биофунгицидов следует включать и данные о их действии не только на подле-жащий элиминироваю вид, но и на аборигенные виды, чтобы не нанести вреда функционированию почвенно-го грибного сообщества.
Для подзолистой почвы зафиксирована иная карти-
на межпопуляционных взаимодействий актиномице-тов и грибов. В отличие от чернозема случаи стимуля-ции роста грибов единичны, и в основном наблюдается подавление аборигенной микофлоры. Преимущест-венным типом воздействия является угнетение обра-зования спор грибов. Интересно, что для каждого из изученных аборигенных грибов был характерен свой тип «ответа» на воздействие актиномицетов. Напри-мер, для P . simplicissimum и P.
albidum, помимо угнете-
ния роста и спорообразования, отмечено и изменение биохимической активности, что проявляется в особен-ностях пигментации грибов по сравнению с контро-лем. Например, наблюдается утрата типичной окрас-ки споровой массы, или появление темноокрашенной зоны в области контакта растущих культур Penicillium
с определенными стрептомицетами. Таким образом, показаны существенные отличия межпопуляционных взаимоотношений актиномицетов и грибов из черно-зема и подзолистой почвы.
ДИНАМИКА ЗАСЕЛЕНИЯ ИЗМЕЛЬЧЕННОЙ
ДРЕВЕСИНЫ
ВЕТОК МИКРОМИЦЕТАМИ
В
ДЕРНОВО-СЛАБОПОДЗОЛИСТОЙ ПОЧВЕ
Волощук Н.М.
Национальный аграрный университет,
киев
По существующим в современном лесоводстве тех-
нологиям в почву в качестве органического удобрения может вноситься измельченная древесина веток (ИДВ). При этом выявлено более эффективное действие лист-венных пород, чем хвойных. По данным многих иссле-дователей, использование ИДВ активизирует развитие дереворазрушающих грибов, которые содействуют не только обновлению трофических связей и круговороту питательных веществ, а также принимают участие в биоочищении антропогенно загрязненных почв. В свя-зи с этим, исследование возможности рационального использования лесных ресурсов для защиты биосфе-ры от загрязнения химическими агентами, повышение плодородия почв, представляет большой интерес и требует изучения видового состава микобиоты ИДВ и выяснения её роли в разложении древесины как актив-ных компонентов окружающей среды.
Во время контакта измельченной древесины с поч-
вой формируются микоценозы с высокой разрушающей способностью. Грибы связаны непосредственно с вы-сшими растениями на всех стадиях их развития и отми-рания, а также с органическими веществами раститель-ного происхождения на всех этапах их разложения.
В течение 16 месяцев исследовано динамику засе-
ления ИДВ a.
platanoides , a. tataricum и Q. robur мик-
ромицетами, а также изменения их видового состава в процессе разложения древесины в дерново-слабопод-золистой почве.
Из образцов измельченной древесины веток, вне-
сенной в почву, было выделено и идентифицировано 81 вид микромицетов из 48 родов, в таксономической структуре которых доминировали Anamorphic fungi (55 видов,
67,9 %). Менее представленными были от-
делы Ascomycota
(13 видов, 16,1 %), zygomycota (10,
12,3 %) и Oomycota (3 вида, 3,7 %).
Из древесины a. tataricum и a. platanoides было
изолировано 54 и 52 вида грибов соответственно, а из образцов ИДВ Q. robur – 49.
Экология грибов 223
Высоким показателем коэффициента общего за-
селения микромицетами в первые два месяца пребы-
вания в почве характеризовалась ИДВ A. tataricum (33,3
%), а наименьшим – Q. robur (12,5 %). В течение
следующих 14 месяцев наибольшая заселенность гри-бами наблюдалась на древесине веток Q. robur.
Изучение динамики заселения ИДВ во время ин-
кубации в почве микромицетами показало, что в пер-вые два месяца её основными колонизаторами были rhizopus
stolonifer и Trichoderma viride, после четы-
рех
– T. viride , через десять месяцев – d oratomyces
stemonitis. На двенадцатый месяц пребывания измель-ченной древесины в почве доминирующими видами становятся Fusarium gibbosum, arthrinium
sphaero-
spermum и cladosporium herbarum , на четырнадца-
тый и
шестнадцатый месяцы – mycelia sterilia (alba) и
cladosporium herbarum
.
Определена закономерность в изменении видово-
го состава микромицетов во время разложения ИДВ в дерново-слабоподзолистой почве. Так, в первые меся-цы её разрушения были выделены rhizopus
arrhizus,
r. stolonifer, Penicillium wortmannii, Trichoderma viride, mycelia sterilia (alba), Gilmaniella humicola, dora-
tomyces stemonitis, a
rthrinium sphaerospermum, bys-
sochlamys nivea, c
haetomium globosum и Fusarium
verticillioides . По мере разложения доминирующими
видами становятся chaetomium cochlioides , micr oascus
cinereus, Trichoderma harzianum, Fusarium gibbosum и
особенно cladosporium herbarum, в то время как мик-
ромицет Thielavia terrestris был выявлен только через
год пребывания ИДВ в почве.
Во время инкубации ИДВ в почве установлено
появление ряда микромицетов из родов alysidium ,
cladophialophora
, cor dana, dactylaria , Gonitrichum ,
Hadrotrichum, Harzia, Hermatomyces, monodictys , Pleu –
rophragmium, Polischema, Selenosporella , Trimmatostro-
ma и Veronaea, которые отсутствовали на свежеотоб-
ранной ИДВ и в образцах почвы без древесины.
ВЛИЯНИЕ РИЗОСФЕРЫ, МИКОРИЗОСФЕРЫ И ГИФОСФЕРЫ
СИМБИОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ НА ВИДОВОЕ
Р АЗНООБР АЗИЕ ПОЧВООБИТАЮЩИХ МИКРОМИЦЕТОВ
Воронина Е.Ю.
МГУ имени М.в. ломоносова, Биологический ф-т,
каф. микологии и альгологии,
Москва
В лесных экосистемах умеренных широт эктоми-
кориза
(эМ) имеет большое значение, так как ее об-
разует большинство древесных растений. Образую-щие эМ
грибы вносят значительный вклад в массу
мицелия в почве, участвуют в круговоротах веществ и оказывают заметное влияние на почвенные микро-организмы (МО), вызывая изменения как численнос-ти, так и таксономической структуры их сообществ. В данной
работе было исследовано влияние эМ ели
и березы и мицелия базидиомицетов – симбиотрофов (БС) на видовое разнообразие почвенных микроми-цетов в природных условиях. Исследование проводи-лось на территории лесного массива Звенигородской биостанции МГУ на стационарных площадках 10х10 м в ельнике мертвопокровном. Были поставлены две серии экспериментов для выявления микоризосферно-го
эффекта: оценка влияния микоризосферы (М) эМ
по сравнению с ризосферой (Р) и контролем (почвой и подстилкой без корней, К) в разных почвенных го-ризонтах (подстилка, гумусоаккумулятивный гори-зонт и подзол) и оценка влияния М по сравнению со свобо
дным мицелием (гифосфера – зона вблизи бази-
диомы
– ПТ и на расстоянии от плодового тела – Г) в
колониях 15 доминантных видов БС ели и березы. В качестве К в последнем случае бралась почва вне пре-делов колонии. Контуры колоний определялись путем многолетнего картирования плодовых тел БС на про-бных площадях.Влияние М, Р , ПТ и Г на биоразнообразие почво-
обитающих микромицетов, оцениваемое с использо-ванием индексов разнообразия Шеннона (Н) и Сим-псона, в большинстве случаев носило статистически достоверный характер. Индекс Симпсона имел более широкий диапазон варьирования сравнительно с Н, но, преимущественно, значения обеих мер разнооб-разия изменялись синхронно. Между категориями К, М и Р наблюдались достоверные по критерию Стью-дента различия в видовом разнообразии почвообита-ющих микромицетов. Наиболее высокие его значения отмечены в свободной почве (К), наиболее низкие, не-смот
ря на максимальную численность МО – в Р , что,
возможно, связано с конкуренцией в этом местообита-нии за ресурсы, предоставляемые корневой системой растения. Микоризосфера достоверно отличалась от прочих местообитаний, в ней видовое разнообразие было ниже, чем в К, но превышало значения для Р . По-добное соотношение выявлено для рассматриваемых почвенных горизонтов и подстилки для корневых сис-тем обеих древесных пород.
При рассмотрении влияния свободного мицелия
БС различных видов и сравнения микоризосферного эффекта с гифосферным выявлена видовая специфика направленности влияния колоний БС. Наиболее часто встречалось статистически достоверное снижение био-разнообразия микромицетов в Г и М сравнительно с К, т.е. однонаправленное действие обоих эффектов ( Ama-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 224
nita citrina var. citrina , laccaria laccata , lactarius auran-
t
iacus , l. camphoratus ) , но в ряде случаев в М отмечено
более резкое снижение биоразнообразия сравнительно
с Г (amanita rubescens v ar. rubescen s, co rtinarius flexipes ,
Hebeloma crustuliniforme ). Возможен и противополож-
ны
й вариант – М эффект, заключающийся в повышении
разнообразия по сравнению с К и Г ( lac tarius flexuosus
var. flexuosus, Tricholoma fulvum ). Интересной особен-
ностью действия на разнообразие микромицетов обла-дала зона свободного мицелия вблизи базидиомы (ПТ). Для большинства исследованных видов БС это место-обитание характеризовалось высоким разнообразием микромицетов, сопоставимым с К или даже превыша-ющим значения в свободной почве, и почти всегда пре-вышающим значение для Г. Резкое снижение видового разнообразия почвообитающих микромицетов в зоне ПТ по сравнению с прочими проанализированными зонами колоний отмечено для can
tharellus cibarius var.
cibarius и leccinum scabrum var. scabrum . Полученные
данные свидетельствуют о разнообразии типов влия-ния зоны М (даже видов БС, принадлежащих к одному роду) на видовое разнообразие сообществ почвообита-ющих микромицетов. Например, влияние свободного мицелия (зона Г) представителей рода lac
tarius может
заключаться как в статистически значимом снижении биоразнообразия почвообитающих микромицетов по сравнению с контрольной почвой, так и в достоверном его повышении.
Таким образом, микоризосферный эффект может в
природных условиях проявляться различно для разных видов БС, что обусловливает невозможность выявле-ния единой универсальной закономерности и необхо-димость проведения в каждом случае специального исследования.
МАКРОМИЦЕТЫ – БИОИНДИКАТОРЫ
Р АДИАЦИОННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ УКР АИНЫ
Гродзинская А.А.1, Сырчин С.А.2, Кучма Н.Д.3
1 Институт ботаники им. Н.Г.Холодного НАН Украины,
киев
2 Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к.заболотного НАН Украины,
киев
3 Институт агроэкологии УААН,
киев
Биоиндикация как метод оценки экологического
состояния окружающей среды получил в последние годы достаточно широкое распространение. Способ-ность некоторых видов макромицетов накапливать тяжелые металлы, радионуклиды и другие конта-минанты позволяет использовать их как удобный объект в биоиндикационных исследованиях. Мето-дом гамма-спектрометрии определяли активность
137Сs в 2018 образцах плодовых тел дикорастущих
Basidiomycetes (146 видов) и субстратов, собран-ны
х в 2000 – 2007 гг. в 73 местообитаниях Киевс-
кой (включая Чернобыльскую зону), Житомирской, Черниговской, Волынской, Ровенской, Черкасской и Закарпатской областей Украины. В образцах грибов из Зоны отчуждения радиохимическим методом оп-ределяли содержание
90Sr. Мозаичность загрязнения
природных ландшафтов чернобыльскими выпадени-ями усложняет прогнозную оценку накопления гри-бами радионуклидов. Уровни накопления связаны с конкретной радиоэкологической ситуацией в месте пр
оизрастания – плотностью загрязнения, миграци-
ей радионуклидов по почвенному профилю, типом почв, гидрорежимом, метеоусловиями, глубиной за-легания мицелия, а также видоспецифичностью на-копления и экологической приуроченностью гриба. В целом, видоспецифичность накопления радиоцезия проявлялась в виде тенденции возрастания уровней ак
кумуляции радиоцезия в ряду – лигнотрофы→ гу-
мусовые сапротрофы→подстилочные сапротрофы→микосимбиотрофы (Вассер и др., 1995; Grodzinskaya et al., 1995; 2003).
Определены виды-гипераккумуляторы радиоцезия,
включающие представителей микосимбиотрофных семейств
Сortinariaceae, Russulaceae, Boletaceae, paxil-
laceae, Gomphidiaceae и Hydnaceae. Наиболее подходя-щими объектами для длительного радиоэкологическо-го мониторинга являются широко распространенные в ле
сных экосистемах Украины – Xerocomus badius
(fr.:fr.)kьhn. ex Gilb., Lactarius rufus (Scop.:fr.)fr. и paxillus involutus (Batsch.:fr.)fr.
90Sr грибы накаплива-
ют в меньшей степени. В образцах плодовых тел из 10-км з
оны ЧА эС соотношение 137Сs/ 90Sr находилось
в пределах от 7,5 до 10000. Применение макромице-тов-биоиндикаторов является экспресс-методом для оценки риска употребления грибов в данном регионе, прогнозирования ситуации с загрязнением радиоцези-ем почв, других дикорастущих грибов и ягод. Однако, их использование не дает статистически достоверной оценки загрязнения территории, учитывая высокие уровни вариабельности накопления, наблюдаемые даже у плодовых тел одного вида из одного сбора и местообитания.
Экология грибов 225
Пещеры как среда обитания живых организмов,
имеют ряд специфических особенностей, оказыва-
ющих воздействие на физиологию и морфологию их обитателей и, в конечном итоге, определяющих свое-образие подземных экотопов, в состав которых входят представители практически всех крупных таксонов живых организмов. Среди основных направлений ис-следований в области спелеомикологии наиболее раз-работанным можно считать санитарно-эпидемиоло-гическое направление. Более редки работы в области изучения биоразнообразия и поисков способов защиты памятников архитектуры от биоповреждений. Таким образом, разнообразие и закономерности распростра-нения пещерных грибов остаются малоизученными.
Целью данной работы было изучение почвенных
микромицетов пещер искусственного происхождения. Исследовался видовой состав почвенных микромице-тов небольшого малопосещаемого участка заброшен-ных Старицких (Тверская обл., Старицкий район) и Никитских каменоломен (юг Московской обл.). Об-разцы грунта анализировали методом почвенных раз-ведений. Культивирование осуществлялось при двух различных температурах: комнатной (+22°С) и пони-женной (+10°С).
Из 40 образцов грунтов заброшенных каменоломен
было выделено 68 видов грибов (2 вида зигомицетов, 5 видов аскомицетов и 61 вид анамофных грибов). Среднее количество КОЕ в исследованных образцах составляло от 13,5 ± 3 тыс. на 1 г сухого грунта (грот Лузина Никитских каменоломен) до 78,2 ±15 тыс. (грот
2 Старицких каменоломен). 40 % выделенных
видов были отмечены нами только при одной темпе-ратуре, что свидетельствует о целесообразности ис-пользования метода выделения грибов из пещерных грунтов при двух разных температурах (пониженной и комнатной).
Из грота 1 Старицких каменоломен выделено 30 ви-
дов грибов; из грота 2 Старицких каменоломен выделе-но 24 вида. В обоих гротах доминируют виды Geomyces pannorum и wardomyces anomalus. Из грота Зоопарк
Никит
ских каменоломен выделено 18 видов грибов,
доминируют виды Geomyces pannorum, три вида рода
Penicillium , а также mortier ella hyalina . Из грота Лу-
зина Никитских каменоломен было выделено 23 вида грибов. Доминируют холоморфные виды аскомицетов, образующие клейстотеции eupenicillium
javanicum и
Talaromyces flavus , и анаморфные виды aur eobasidium
sp., P . sclerotiorum , T richoderma polysporum , и стериль-
ный светлоокрашенный мицелий. Видовой состав и количество КОЕ почвенных грибов в грунтах Стариц-ких гротов богаче, чем в грунтах Никитских гротов, но грунты Никитских каменоломен характеризуется большей выравненностью обилий видов и, соответс-твенно, значительно более высокими показателями разнообразия по сравнению с видовым составом грун-тов Старицких гротов.
Итак, можно условно разделить 4 исследованных
грот
а на две группы – гроты, в которых с большим
отрывом доминирует вид Geomyces pannorum (грот 1,
грот 2, грот Зоопарк) и гроты, в которых доминиру-ют холоморфные аскомицеты (грот Лузина, домини-рующие: eupenicillium
javanicum, Talaromyces flavus ,
частые: westerdykella ornata, chaetomium globosum).
Возникает вопрос, чем может быть объяснено по-добное разделение. Единственный известный нам фактор, отличающий гроты Старицких каменоломен и грот Зоопарк от грота Лузина это затапливаемость (затапливаемым является грот Лузина, в отличие от остальных трех). Таким образом, из представленных данных можно сделать вывод, что регулярные навод-нения влияют на видовой состав микромицетов под-земных полостей, в частности, приводят к появлению холоморфных видов среди доминирующих и частых. Также можно предполагать, что для не затапливаемых пещер искусственного происхождения, условия кото-рых более-менее сходны с условиями в исследованных пещерах, характерно доминирование вида Geomyces
pannorum.МИКРОМИЦЕТЫ ПЕЩЕР ИСКУССТВЕННОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
Демидова Л.А., Александрова А.В.
МГУ имени М. в
. ломоносова, Биологический факультет,
Москва
МИКРОМИЦЕТЫ (HYpHOMYCETEs, COELOMYCETEs)
ХВОЙНЫХ ЛЕСОВ ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА
Егорова Л.Н.
Биолого-почвенный институт Дво РАН,
владивосток
По результатам микологического мониторинга на
Дальнем Востоке обнаружено более 500 видов грибов из различных систематических групп ( zyg
omycota, as-
comycota , basidiomycota, an amorphic fungi ), развива-
ющихся на хвойных древесных породах или ассоции-рованных с ними (Егорова, Азбукина, Богачева и др., 2006). Микромицеты, входящие в состав группы Ana-
morphic fungi , включают в себя представителей классов
Hyphomycetes и coelomycetes, о
битающих на хвое, вет-
вях, коре, древесине, опаде и валеже, а также в почве.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 226
Сбор образцов анаморфных грибов проводился
как на антропогенно трансформированных, так и на
охраняемых территориях, в основном, в заповедниках региона: Уссурийском, Лазовском, Сихотэ-Алинском, «Кедровая падь» (Приморский край), Большехехцир-ском, Комсомольском (Хабаровский край), Зейском, Хинганском (Амурская область), Бастак (Еврейская автономная область), Кроноцком (Камчатская об-ласть), Курильском (Сахалинская область), а также на территориях Ботанического сада-института ДВО Р АН (г. Владивосток) и его Сахалинского (г. Южно-Саха-линск) и Амурского (г. Благовещенск) филиалов.
Проведена ревизия видового состава анаморфных
грибов, обитающих на надземных органах хвойных дре-весных пород региона (Бункина, Коваль, Нелен, 1971; Коваль, 1972; Нелен, Аблакатова, 1974; Бункина, На-зарова, 1978; Семан, Давыдкина, 1984; Мельник, 1990, 1997, 2000; Егорова, 1990, 2005, 2006, 2007). По резуль-татам ревизии в настоящее время на Дальнем Востоке зарегистрировано 90 видов из 62 родов анаморфных грибов, в том числе 65 видов из 40 родов Hyphomycetes
и 26 видов из 22 родов coe
lomycetes . Выявленные гри-
бы развиваются на 16 видах хвойных: abi es holophylla
Maxim., a. nephrolepis (Trautv.) Maxim., a. sachalinen-
sis fr. Schmidt, a. sibirica Ledeb., larix c ajanderi Mayr,
l.
gmelinii (Rupr.) Rupr., l. leptolepis (Siebold. et zucc.)
Gord., l. lubarskii Sukach., l. kamtschatica (Rupr.) Carr.,
l.
olgensis A. Henry, l. sibirica Ledeb., Picea abies (L.)
kar
st., P . ajanensis ( Lindl. et Gord.) fisch ex Carr., Pinus
koraiensis Siebold et zu cc., P . pumila (pal l.) Regel, P . syl-
vestris L. На пихтах найден 21 вид анаморфных грибов
из родов cir renalia, capnobotrys, Seiridium, Stegonspo-
riopsis, Toxosporium и т.д., на соснах – 20 видов грибов
из родов arthrinium, ba ctrodesmium, cheiromycella, dic-
ty
osporium, diplococcium, Helicoon, Pseudocenangium и
т.
д., на лиственницах – 19 видов из родов aposphaeria,
chloridium, Pycnidiella, Trimmatostroma, xylohypha и т.д.,
на
елях – 11 видов из родов conoplea, cryptoclyne, co-
ni
othyrium, discosia и т.д. На хвое обнаружено 30 видов
гр
ибов, на ветвях – 22 вида, на коре и древесине – 20 ви-
дов. Выявленные грибы в большинстве своем являются сапротрофами. Раннее опадение хвои пихты вызывают cap
nobotrys neesii S. Hughes и cyt ospora pinastri fr.,
ус
ыхание ветвей сосны кедровой корейской – Phoma
eguttulata p. ka rst., усыхание ветвей пихты – cytospora
abietis Sacc.
Более 200 видов микромицетов выделено из почв
хвойных лесов (Егорова, 1986, 1990, 1999, 2004, 2006), занимающих большую часть территории Дальнего Востока и представленных светлохвойными листвен-ничными, темнохвойными пихтово-еловыми и хвой-но-широколиственными формациями. В почвенном покрове лиственничных лесов материковой части ре-гиона преобладают мерзлотно-таежные светлоземы и перегнойно-карбонатные почвы, микобиота которых включает
, в основном, грибы рода penicillium (до 85 %
всех изолятов и более половины видового состава), а также темноцветные гифомицеты из родов Clado-sporium, Trichocladium, Aureobasidium, Oidiodendron, Gliomastix, Humicola. По частоте встречаемости до-минирую
т такие виды, как penicillium aurantiogriseum
Dierckx, p. lanosum Westling, Oidiodendron flavum
Szilv., Aureobasidium pullulans (de Bary) G. Arnaud, Cladosporium cladosporioides (f
resen.) G. A. de vries.
В почвах стелющихся лесов-зарослей кедрового
стланика, особенно характерных для заносимых сне-гами склонов гор, к вышеперечисленным доминантам присоединяется гифомицет Geomyces pannorum (Link)
Sigler et J. W. Arnaud. Из почв лиственничных лесов Амурской области выделены микромицеты, обладаю-щие способностью к биосорбции золота из располо-женных в этой зоне россыпных и рудных месторож-дений. Способность к аккумуляции тонкодисперсного золота выявлена у 33 видов из 13 родов почвенных грибов. Впервые высокие сорбционные свойства обна-ружены у представителей родов oidiodendr
on, Phoma,
alternaria (Жилин, Егорова, Куимова, 2004).
Преобладание грибов рода Penicillium характер-
но и для микобиоты буротаежных почв зоны еловых и пихтово-еловых лесов региона, где широко распро-странены такие виды, как Penicillium canescens Sopp,
P . waksmanii k.
M. zalessky, P . verrucosum Dierckx, P .
granulatum Bainier, а также asper gillus versicolor (vuill.)
Tirab., acr emonium butyri (J. f. H. Beima) W. Gams, Do-
ratomyces stemonitis ( pers.) f. J. Morton et G. Sm., Gony-
trichum macrocladum (Sacc.) S. Hughes, cylindr ocarpon
destructans (zinssm.) Scholten, Gliomastix guttuliformis
J. C.
Br. et W. B. kendr. В дерновых почвах Камчат-
ки под ельниками и лиственничниками отмечены та-кие виды, как Paecilomyces carneus (Duche et Heim)
A. H. S. Br., P . marquandii (Massee) S. Hughes, eladia
saccula
(E. Dale) G. Sm., Verticillium chlamydosporium
Goddard, Scopulariopsis acremonium (Delacr .) vuill. Из
подзолистых почв Сахалина выделены редкие виды: rhinocladium
sporotrichoides kamyschko, cylindrofora
hoffmannii Dasz., Scolecobasidium tshawytschae (Doty et
D. W. Slater) McGinnis et Ajello, catenularia pidoplic-
zkoi (z hdanova) M. A. Litv.
В бурых лесных почвах кедрово-широколиствен-
ных ле
сов содержание грибов рода penicillium снижа-
ется
до 50 %, увеличивается разнообразие других ги-
фомицетов, аскомицетов и зигомицетов. Доминируют по част
оте встречаемости такие виды, как p. spinulosum
Thom, p . janczewskii k. M. zalessky, p . thomii Maire.
Выявлен комплекс почвообитающих анаморфных
грибов-возб
удителей болезней сеянцев хвойных – 25
видов. Из больных сеянцев чаще всего выделяются грибы рода Fusarium, видовой состав которых доста-
точно разнообразен: F . acuminatum Ellis et Everh., F .
avenaceum (fr.) Sacc., F
. culmorum (W. G. Sm.) Sacc., F .
equiseti (Corda) Sacc., F. heterosporum Nees et T. Nees,
F . incarnatum (Desm.) Sacc., F . javanicum koord., F .
lateritium Nees, F . moniliforme J. Sheld., F . oxysporum
Schltdl., F . sambucinum fuckel, F . solani Mart., F . spo-
rotrichioides Sherb. Фузариоз сеянцев хвойных может
проявляться как по типу очагового поражения, так и по типу массового полегания или увядания. Обладая широкой специализацией микромицеты рода Fusarium
поражают сеянцы всех возделываемых хвойных пород во всех субрегионах Дальнего Востока. Вторая преоб-
Экология грибов 227
ладающая группа возбудителей заболеваний сеянцев
хвойных – это грибы родов cylindrocarpon (c. destruc-
tans (zinssm.) Scholten, c . candidum (Link) Wollenw., c.
didymium
(Harting) Wollenw.) и Gliocladium (G. delique-
scens Sopp, G. virens J. H. Mill., Giddens et A. A. f oster,
G. roseum Bainier), вызывающие поражение сеянцев,
протекающее по типу фузариозного. Более редкие пат
огены – cylindrocladium scoparium Morgan и myr o-
thecium verrucaria (Alb. et Schwein.) Ditmar. Периоди-чески регистрируется в регионе плесневение сеянцев, вызванное возбудителем серой гнили botrytis
cinerea
pers.
и сапротрофными почвообитающими грибами
рода Penicillium – P . vulpinum (Cooke et Massee) Seif-ert et Samson, P . aurantiogriseum Dierckx, p. duclauxii
Delacr. Довсходовую гибель семян и проростков хвой-ных в условиях Дальнего Востока вызывают, как пра-вило, грибы родов Fusarium и Penicillium. Сопутству-
ющая микобиота представлена обычно гифомицетами asper
gillus niger Tiegh. , a. flavus Link, cladosporium
cladosporioides
( fresen.) G. A. de vries, alternaria al-
ternata (fr.) k eissl., Trichothecium roseum (p ers.) Link,
а также зигомицетами mucor racemosus fresen., m. hie-
malis Wehmer, m. circinelloides Tiegh., rhizopus stoloni-
fer (Ehrenb.) vuill. Развитию этих грибов способствуют
любые факторы, понижающие устойчивость семян, особенно резкие колебания температуры и влажности.
ВЛИЯНИЕ ИНТРОДУКЦИИ cor YnebacTerium GluT amicum
В ПОЧВУ НА ИЗМЕНЕНИЕ СТРУКТУРЫ КОМПЛЕКСА
МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ГРИБОВ
Жебрак И.С., Скоробогатова Р.А., Кожевин П.А.
Гро
дненский государственный университет имени Янки к упалы,
Гродно
Московский государственный университет имени М.в. ломоносова,
Москва
В настоящей работе изучалось влияние внесения
в почву культуры Corynebacterium glutamicum с глю-козой и без неё на структуру комплекса почвенных микроскопических грибов. Вносимая популяция C. glutamicum рассматривалась как агент биологическо-го загрязнения окружающей среды. В лабораторных микрокосмах использовали пахотный слой дерново-подзолистой почвы района застройки завода медицин-ских препаратов г. Скиделя (Беларусь), на котором C. glutamicum применяется в качестве продуцента высо-коочищенных аминокислот. C. glutamicum вносили в нестерильную почву в концентрации 109 кл/г. Почва при эт
ом увлажнялась до 60 % от полной влагоёмкос-
ти. Для учета микромицетов использовали метод по-сева на плотную питательную среду Чапека с сахаро-зой. Оценку состояния комплекса микроскопических грибов проводили с помощью определения индекса структурного разнообразия Шеннона, интегрального показателя радиальной скорости роста почвенных гри-бов, выделяющих
ся на разных этапах сукцессии – 3, 7,
15, 35 суток.
Как показано в таблице, самые низкие значения ин-
декса Шеннона наблюдаются на 3-и сутки, так как в структуре комплекса микромицетов доминируют гри-бы со средней радиальной скоростью роста 0,15 мм/час преимущественно из рода Penicillium . Наиболее
значительное увеличение индекса Шеннона приходит-ся на 7-е сутки от начала сукцессии, так как в этот пе-риод наблюдается увеличение в структуре комплекса микромицетов числа классов грибов с более высокой радиальной скоростью роста, принадлежащих в родам Trichoderma,
Fusarium, mucor и др. В дальнейшие сро-
ки опыта происходит постепенное снижение величины индекса Шеннона и приближения её значения к исход-ному. Наиболее высокие значения индекса Шеннона отмечаются в почве с глюкозой. Скорее всего это объ-ясняется тем, что внесение легко доступного субстра-та в почву стимулирует прорастание спор и приводит к усложнению структуры комплекса микроскопических грибов в почве и увеличению их биоразнообразия.
Одновременно, полученные результаты показыва-
ют, что моделированное нами биологическое загрязне-ние почвы путем интродукции c.
glutamicum не отли-
чается от других внешних воздействий на почву и не оказывает заметного влияния на функционирования комплекса микроскопических грибов.
Таблица
Изменение индекса разнообразия Шеннона для комплекса почвенных грибов
Варианты опыта Время после внесения c. glutamicum (с утки)
3 7 15 35
Почва (контроль) 0,841 1,181 1,112 1,050
Почв
а + глюкоза 2 % 0,720 1,297 1,296 1,201
Почва + c . glutamicum 109кл/г 0,735 1,058 0,987 0,811
Почв
а + C. glutamicum 109кл/г + глюкоза 2 % 0,701 1,005 0,934 0,866
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 228
Территория Тверской области расположена в лес-
ной зоне, в подзоне южной тайги, переходящей в сме-
шанные широколиственно-хвойные леса. Массивы лесов
покрывают более половины (54 %) ее площади
(4,5 млн. га). Еловые леса занимают около 25 % общей площади лесов. Произрастая на более плодородных почвах по сравнению с сосновыми лесами, ельники, тем не менее отличается бедностью состава флоры, т.к. влияют особые экологические условия, которые создаю
тся под пологом ели обыкновенной (picea abies
(L.) karst. В Андреапольском, Нелидовском, Осташ-
ковском и Фировском районах области встречается такж
е ель финская – picea x fennica (Regel) kom. (p .
abies x p.obovata) (Миняев, Конечная, 1976; Симачева,
1980; Цвелев, 2000).
Ельники бореальные характерны для центральных
и с
еверных районов области. Подлесок редкий – из
рябины, жимолости, крушины и др. В травяно-кустар-ничковом покрове доминирует кислица и др. таежные виды. В моховом покрове преобладают зеленые мхи (плевроциум, птилиум или дикранум). Чаще других встречаются ельники зеленомошники, ельники кис-личники и ельники черничники.
Ельники субнеморальные встречаются в Осташков-
ском и Максатихинском районах. Древостой преиму-щественно смешанный. В подлеске встречаются как бореальные (черемуха, рябина, ива), так и немораль-ные виды (лещина, бересклет). Травяно-кустарничко-вый ярус представлен в той или иной степени таеж-ными, боровыми, неморальными и луговыми видами. Наиболее распространены ельники разнотравные и ельники березово-кислично-зеленчуковые.
Ельники неморальные широко представлены в за-
падных районах Тверской области. Древостой обра-зован елью, иногда с примесью мелколиственных или широколиственных пород (береза, осина, дуб, ясень, липа). Подлесок и травяно-кустарничковый покров состоит из бореальных и неморальных видов. Наибо-лее часто встречаются ельники березово-черничные с липой и ельники лещиново-осиновые с дубом, кленом и ясенем.
Многолетние исследования микобиоты лесных эко-
систем Тверской области показали, что с Picea abies (L.)
kar
st., связано тем или иным способом 144 вида и в.т.
макромицетов. Из них 37 видов и в.т. – микоризообра-
зователи (рр. ama nita, cortinarius, lactarius, russula,
Suillus и др.), 52 вида и в.т. – сапротрофы на подстилке,
гумусе и на древесине (рр. lyo phyllum, clitocybe, col-
ly
bia, mycena, Panellus, Paxillus и др.). Отдельно была
выделена группа трутовых грибов, которая составила 55 видов и в.т. Из них 18 видов отдают ели предпочте-ние среди других субстратов, причем три вида являются облигатными стенотрофами, т.е. встречаются только на ели ( Skeletocutis uralensis (pi
ll.) kotl. et pousar, Pycno-
porellus fulgens (fr .) Donk, oligoporus undosus (peck)
Gilb. et Ryv.).Доминантными видами в ельниках высту-пают : Fomitopsis pinicola (
Sw.: fr.) karst., F . rosea (Alb.
et
Schwein. et fr) karst., Trichaptum abietinum ( Dicks.: fr.)
Ryv., T. fusco-violaceum ( Ehrenb.: fr.) Ryv.
Обследованные ельники характеризуются разно-
образным видовым составом макромицетов, причем его увеличение наблюдается с возрастом древостоя. Состав доминантов в разных типах леса тоже меня-ется. э
то зависит не только от возрастного состояния
ели, но и теми факторами, оказывающими влияние на фитоценозы, где на первое место выходят антропоген-ные. Изучая видовой состав макромицетов, связанных консортивно с елью обыкновенной (микоризообразо-ватели, ксилотрофы и др. группы) можно будет судить о нарушенности местообитаний.
Миняев Н.А., Конечная Г.Ю. Флора Центрально-
Лесного государственного заповедника. Л., 1976. 104 с.
– Симачева Е.В. Дополнительные материалы к фло-
ре Центрально-лесного государственного заповедника (Калининская область)//Вестн.ЛГУ . Вып.1, № 3, 1980. С. 67–70.
– Цвелев Н.Н.Определитель сосудистых рас-
тений Северо-Запада России (Ленинградская, Псковс-кая и Новгородская области). СПб., 2000. 781 с.КОНСОРТИВНЫЕ СВЯЗИ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА Picea A.D IETR .,
И ГРИБОВ-МАКР
ОМИЦЕТОВ В ЛЕСНЫХ эКОСИСТЕМАХ ТВЕРСКОЙ ОБЛАСТИ
Медведев А.Г., Курочкин С.А.
Тверской институт экологии и права,
Тверь
Тверской Государственный Университет,
Тверь
ВЛИЯНИЕ СПЛОШНОЙ САНИТАРНОЙ РУБКИ ХВОЙНОГО
ЛЕСА НА КОМПЛЕКС ПОЧВЕННЫХ МИКРОМИЦЕТОВ
Мовчан Д.Д., Александрова А.В.
МГУ имени М.в
. ломоносова, Биологический факультет,
Москва
Природные экосистемы периодически подвергают-
ся различным нарушениям, вызываемым как естест-венными, так и антропогенными факторами, которые повреждают подстилку и верхние горизонты почвы и
Экология грибов 229
оказывают большое влияние на все обитающие там ор-
ганизмы. При нарушении происходит либо частичное уничтожение исходного сообщества, либо появление чужеродных элементов, нарушающих сложившее-ся равновесие. Следствием обоих типов нарушений является инициация восстановительных сукцессий, ведущих к сильным изменениям качественного и ко-личественного состава мико- и микробиоты, которые исключают или ограничивают со временем действие повреждающих факторов. Одним из наиболее сильных антропогенных факторов в лесах являются сплошные рубки, приводящие к резкой смене растительного пок-рова.
В связи с этим, целью нашей работы стало изучение
влияния сплошной санитарной вырубки елового леса на почвенную микобиоту. Исследования проведены на Звенигородской Биологической Станции МГУ в пери-од с 2002 по 2006 гг. Выбор места работы обусловлен тем, что лесной стационар ЗБС изучается ботаниками, почвоведами, зоологами, микологами с 40-х годов 20-ого столетия, поэтому хорошо известна история разви-тия микобиоты, флоры и фауны на протяжении многих десятилетий
На исследуемом участке наблюдаются все типы
нарушений (от полного выжигания территории, до повреждения почвенного покрова в результате тре-левки древесины), что дает возможность более полно изучить последствия рубки, зарождение и развитие восстановительных процессов в почве. Материал вы-делялся из образцов, взятых на месте вырубки с за-крепленных площадок. Площадки разбивались в мес-тах с различными типами нарушений и имели размер 2Ч2 метра. Обработка была выполнена стандартны-ми микологическими методами посева из почвенных разведений.Всего в результате работы было выявлено 98 видов
микромицет
ов: относящихся к отделам zygomycota
(9 видов), Ascomycota (3 видов), анаморфные грибы (светлоокрашенные и темноокрашенные гифомице-ты
– 77 видов, целомицеты – 6 вида) и 3 типа стериль-
ных мицелиев.
Наибольшее видовое разнообразие – 60
видов наблюдалось в контроле и на осветленном учас-тке леса, на местах с нарушенным почвенным покро-вом (старые кострища и следы трелевки) количество видов снижает
ся – 54 и 52, и самое низкое в местах
скопления порубочных остатков – только 42 вида.
Видовой состав почвенных микромицетов на вы-
рубке претерпевал существенные изменения. Наибо-лее чувствительными из доминирующих в контроле видов оказались: Paecilomyces carneus, mortier
ella
isabellina , Penicillium janczewskii , beauveria bassiana и
Tolypocladium inflatum, частота встречаемости которых существенно сокращалась или они совсем выпадали на определенных участках. Напротив, представленность присутствующих в контроле absidia
cylindrospora ,
Geomyces pannorum, Phoma sp. и особенно видов
рода Trichoderma сильно возросла на вырубке. Встре-
чаемость видов mortier ella ramanniana , Penicillium
simplicissimum и P . albidum не претерпела существен-
ных из
менений по сравнению с контролем.
На вырубке стали преобладать некоторые виды,
отсутствующие или входящие в группу случайных в контроле это: Trichoderma citrinoviride и Sesquicillium
candelabrum (на порубочных остатках), aur
eobasidium
pullulans и mucor hiemalis (кострища), Fusarium sp. (на
осветленном участке).
Таким образом, сплошная санитарная рубка леса
ведет к сокращению видового разнообразия почвен-ных микромицетов и существенным перестройкам в их видовой структуре.
РАСПРЕДЕЛЕНИЕ АГАРИКОИДНЫХ
БА
ЗИДИОМИЦЕТОВ ВИШЕРСКОГО ЗАПОВЕДНИКА
ПО АБСОЛЮТНЫМ ВЫСОТАМ
Мухутдинов О.И.
Пермский государственный педагогический университет,
Пермь.
Исследования проводились на территории Вишер-
ского заповедника (Пермский край) в период с 2003 по 2006 год. Всего на территории заповедника к настоя-щему времени идентифицировано 340 видов агарико-идных базидиомицетов. Было отмечено 53 новых вида, которые ранее не встречались на территории Пермско-го края.
Схема высотной поясности растительности запо-
ведника «Вишерский» (Белковская и др., 2004) вклю-чает три пояса и шесть подпоясов:
I. По
яс темнохвойной тайги – от 240 до 600 м над
у.м. В нем выделено два подпояса:
1) нижний
(предгорный) – от 240 до 350 м – высо-
ко
ствольной (20 м), сомкнутой (70–80 %) елово-пих-тов
ой с примесью кедра (pinus sibirica) зеленомошной
тайги.
2) собств
енно горный – от 350 до 600 м – крупно-
папоротниковый и высокотравной елово-пихтовой с примесью
березы (20–30 %) и кедра, менее сомкнутой
(40–60 %) и более низкоствольной (15–17 м) тайги.
II. Подгольцовый пояс – от 600 до 900 (1000) м. В
нем выделяется четыре подпояса:
1) прямоствольного, кривовершинного, хвойно-бе-
рез
ового редколесья со значительной (не менее 30 %)
примесью кедра. Высота древостоя в среднем 10 м, сомкнут
ость крон 20–30 %. Приурочен к высотам
600–700 м.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 230
2) предгольцового низкорослого (2–5 м), разрежен-
ного
(сомкнутость 10 %), преимущественного березо-
вого (Betula tortuosa) криволесья. Приурочен к высо-
там 700–800 м.
3) высокотравных и мелкотравных мезофильных
лугов. Развит в пределах и выше границы криволесья, на высотах 700–850 м.
4) горных пустошей и субальпийских кустарни-
ков.
Весьма характерен для всех горных хребтов – 700
(800)–900 (1000) м.
III. Пояс горных тундр: моховых, лишайниковых,
куст
арничковых, каменистых – располагается выше
1000 м.
Подавляющие большинство найденных и опреде-
ленных грибов были собраны в поясе темнохвойной тайги
– более 95 % (325 видов) видов от всей выяв-
ленной мик
обиоты заповедника. Из них – 6 видов в
предгорном поясе, а 319 – в собственно горном. Ин-тересно заметить, что представители трех ведущих по численности семейств Cortinariaceae, Russulaceae и Tricholomataceae встречаются на высотах от 240 до 800 м над у.м. С другой стороны, семейства Coprinaceae, Amanitaceae, Entolomataceae и Hygrophoraceae в ус-ловиях Вишерского заповедника приурочены к собс-твенно горному подпоясу пояса темнохвойной тай-ги
– представители этих семейств были собраны на
высотах от 350 до 600 м над у.м.
Подгольцовый пояс является бедным в микологи-
ческом плане. На высотах от 600 до 900 метров обна-ру
жено всего 15 видов, что составляет около 4 % от
всей выявленной микобиоты.
В поясе горных тундр не было найдено ни одного
образца.
Большая часть новых для территории края видов
были собраны
на высоте от 444 м до 680 м над у.м. эти
высоты соответствуют собственно горному подпоясу пояса темнохвойной тайги и подпоясу прямоствольно-го, кривовершинного, хвойно-березового редколесья со значительной примесью сосны сибирской подголь-цового пояса.
ЦЕНОТИЧЕСКАЯ РОЛЬ И АКТИВИЗАЦИЯ ПАТОГЕННЫХ СВОЙСТВ
ARMILLARIA MELLEA sENsU LATO
В ХВОЙНЫХ ЛЕСАХ ЮГА ВОСТОЧНОЙ СИБИРИ
Павлов И.Н., Губарев П.В., Миронов А.Г., Барабанова О.А., Агеев А.А.
Сибирский государственный технологический университет,
красноярск
В таежных лесах факультативным паразитам и
сапротрофам принадлежит особая роль. Наряду с де-струкцией органических остатков растений они яв-ляются важной частью гомеостатического механизма леса (Одум, 1986). Несмотря на их малую долю в со-ставе экосистемы, управляющий эффект на общий по-ток энергии (запас фитомассы) чрезвычайно высок.
В последнее десятилетие на территории южной
тайги в границах Красноярского края отмечена интен-сивная куртинная гибель сосны обыкновенной, ели сибирской, пихты сибирской. Усыханию подвержены деревья всех классов Крафта. Погибают экземпляры, не испытывающие каких-либо признаков угнетения, с хорошо развитой кроной. По комплексу диагности-ческих признаков к основной причине гибели отнесе-ны виды, входящие в комплекс Armillaria mellea s.l. (в первую
очередь – A. borealis, A. ostoyae). Наибольшая
вредоносность опенка установлена в спелых и приспе-вающих сосняках сформировавшихся на маломощных почвах, подстилаемых твердыми горными породами, после рубок главного пользования, находящихся в зоне хронического атмосферного загрязнения и интен-сивного рекреационного воздействия.
При анализе появления очагов усыхания сосны на
различных элементах рельефа в сочетании с исследо-ванием глубины корнеобитаемого слоя установлена устойчивая закономерность. На вершинах сопок, с очень мелким быстро пересыхающим корнеобита-емым слоем (крайне неблагоприятно для развития опенка), а также на глубоких почвах (высокая устой-чивость хозяина) практически отсутствует гибель де-ревьев. Наиболее неблагоприятные для сосны условия складываются на неглубоких почвах (корнеобитае-мый слой до 30 см) подстилаемых твердыми горны-ми породами недоступными для корневой системы. В данном случае сосна образует корневую систему с редуцированным стержневым корнем (установлено при многочисленной корчевке пней при строительстве дороги). В молодом возрасте насаждение развивает-ся как высокопродуктивное. Далее, при превышении эдафического потенциала, наступают стрессовые ус-ловия снижающие устойчивость к А. mellea s.l. Допол-нительным необходимым условием развития болезни является умеренная влажность почвы. Очаги усыхания отсутствуют в местах, где осадки быстро уходят вниз по склону.
Смена коренных типов леса и антропогенное воз-
действие являются первичными факторами снижения общей устойчивости лесных ценозов. Изменение кли-мата, в свою очередь, создавая более благоприятные условия для развития болезней и вредителей, способс-твует росту поражающего биотического воздействия на растения. По данным Cредне-Сибирского межре-гионального территориального управления по гидро-метеорологии и мониторингу окружающей среды, для исследуемой территории характерен рост температу-ры приземного слоя воздуха, наиболее существенный в последние два десятилетия. Более теплая зима со-
Экология грибов 231
здает лучшие условия для зимовки вредителей и бо-
лезней. Значительный рост температуры воздуха в мае (су
мма эффективных температур >5 °С возросла на
90о С) обеспечивает более раннее начало роста опенка и увеличение продолжительности его вегетационного периода.
Смена коренных типов леса, антропогенное воз-
действие, глобальное изменение климата способс-твует росту поражающего биотического воздейс-твия на растения и являются определяющими для активации механизма разрушения древостоя вклю-чающего следующие этапы: дальнейшее ослабление отдельных деревьев в результате напряженной внут-риценотической конкуренции, воздействия рака-серянки → формирование условий благоприятс-твующих заражению и массовому воспроизводству патогенна сопровождается ростом вирулентности и агрессивности опенка → значительно ослабленные корневыми патогенами деревья не могут сопротив-ляться стволовым вредителям (малому и большому сосновым лубоедам) в период их массового размно-жения и погибают.
ПЕРВАЯ НАХОДКА РЕДКОГО ВИДА
SY
zYGoSPora TumeF acienS (GINNs ET sUNHEDE) GINNs
НА УКР
АИНЕ
Прилуцкий О.В., Акулов А.Ю.
Харьков
ский национальный университет им. в.Н. каразина,
Харьков
Род Syzygospora G.W. Martin (Syzygosporaceae
Jьlich, T
remellales fr., Tremellomycetes Hibbett, Matheny
et Binder, Basidiomycota Bold ex R. T. Moore), создан-ный в 1937 г., объединяет микопаразитические дрожал-ковые грибы с несептированными 2–8 стеригмовыми гетеробазидиями и базидиоспорами, размещенными в цепочках. Представители этого рода часто формируют характерные мозговидные галлы на поверхности тал-лома или плодовых тел гриба-хозяина, однако у неко-торых видов они относительно слабо развиты.
На сегодняшний день в составе рода Syzygospora
описано 16 видов. Лихенофильными свойствами об-ладают виды: S. bachmannii Diederich, S. parmeliicola
Diederich и S.
physciacearum Diederich. Первый вид
отмечен как паразит на cladonia mitis Sandst. (Cla-
doniaceae), второй на Hypotrachyna bogotensis ( vain.)
Hale (parmeliaceae), а третий на представителях родов
Physcia, Physconia и Heterodermia (p hysciaceae). Вид
S. sorana Hauerslev является паразитом на плодовых
телах сумчатого гриба ascocoryne sarcoides (Jacq.) J.W.
Groves et
D.E. Wilson (Helotiaceae). Вид S. lapponica
Miettinen et k
otir. описан как паразит на плодовых те-
лах трутовика antr odia infirma Renvall et Niemelд (Mer-
ipilaceae). Виды S. mycophaga (M.p . Christ.) Hauerslev и
S. pallida (Hauerslev) Ginns развиваются на базидиомах
кортициоидных грибов из рода Peniophora (p eniopho-
raceae).
Несколько видов рода Syzygospora являются парази-
тами
шляпочных грибов. В частности, S. marasmoidea
Ginns и S. subsolida Ginns развиваются на базидиомах
marasmius spp.,
а S. norvegica Ginns – на rhodocollybia
butyracea (Bull.: f r.) Lennox (Marasmiaceae). Три вида:
S. effibulata (Ginns et Sunhede) Ginns, S. mycetophila
(p
eck) Ginns и S. tumefaciens (Ginns et Sunhede) Ginns
используют в качестве субстрата представителей рода Gymnopus (pers.) Roussel (Tricholomataceae), преиму-
ще
ственно Gymnopus dryophilus (Bull.) Murrill.Три вида, а именно S. alba G.W. Martin, S. niva-
lis Chee J. Chen, Oberwinkler et z .C. Chen. и S. solida
(Berthier) Ginns были описаны на растительных остат-ках и почве и некоторое время считались сапротрофа-ми. Однако, по крайней мере для одного из этих видов (S.
alba) в 1981 г. было доказано, что он питается за
счет мицелия других грибов, которые развиваются в древесине.
Представители рода Syzygospora были обнаруже-
ны в различных регионах Земного шара. Значительная часть видов была описана относительно недавно на территории Дании, Норвегии, Италии и Финляндии и с тех пор они больше нигде не были обнаружены. Некоторые «классические» представители рода, такие как S.
effibulata, S. mycetophila и S. tumefaciens призна-
ны редкими и включены в Красные списки ряда стран Западной и Центральной Европы. В Украине до сих пор ни один вид рода Syzygospora не был зарегистри-
рован.
В ию
ле 2007 г. при исследовании территории На-
ционального природного парка «Гомольшанские леса» нами было обнаружено одно плодовое тело Gymnopus
dryophilus (Bull.) Murrill., пораженное микофильным грибом Syzygospora tumefaciens (Ginns et Sunhede)
Ginns. Соответствующий образец был инсерирован в научный гербарий кафедры микологии и фитоиммуно-логии Харьковского университета им. В.Н. Каразина под номером CWU (Myc) 2960.
По данным литературы, ранее этот вид был обна-
ружен в странах Западной и Центральной Европы. Достоверные данные об обнаружении этого вида в России и других странах Восточной Европы нам не известны. Учитавая высокий природоохранный ста-тус вида S. tumefaciens в ряде европейских стран, а
также редкость этого вида в Украине, мы рекоменду-ем включить этот вид в новое издание «Красной кни-ги Украины».
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 232
Способы распространения спор почвенных грибов
до сих пор остаются мало изучены, роль мелких млеко-
питающих в этом процессе ранее практически не рас-сматривалась, единичные работы касались в основном только условно патогенных и кератинофильных видов, а на сапротрофные грибы внимания не обращали.
В центральной части европейской России, в част-
ности в Тверской и сопредельных областях, большие площади, ранее обрабатываемых сельскохозяйствен-ных угодий, были заброшены. В связи с этим, на них начались процессы восстановления растительности, сопровождающиеся не только сменой растительных ассоциаций, но и изменением почв и состава почвоо-битающих организмов. Целью нашей работы было оха-рактеризовать смену комплексов почвенных микроско-пических грибов в ходе вторичной восстановительной сукцессии, происходящую при зарастании заброшен-ных сельскохозяйственных территорий, и выявить воз-можное участие в этом процессе мелких млекопитаю-щих. В основу работы положен материал, собранный в августе 2006 года, на юго-западе Тверской области. Было изучено три смежных биотопа: коренной ельник, молодой березняк 10–12 летнего возраста, возникший на месте поля и луг, используемый как сенокос. Об-разцы почвы собирали по общепринятой методике на трансекте, по 10 образцов в каждом биотопе. Обработ-ку материала проводили стандартным методом посева на твердые питательные среды.
В исследованных местообитаниях было обнару-
жено 124 вида микромицетов, относящихся к отделам zygomycota
(10 видов), Ascomycota (8 видов), анамор-
фные грибы (светлоокрашенные и темноокрашенные гифомицеты
– 99 видов, целомицеты – 4 вида) и 3 типа
стерильных мицелиев. При этом 96 видов были найде-ны на шерсти зверьков.
Доминирующими видами в лесу являются Penicilli-
um simplicissimum, Paecilomyces carneus и Trichoderma asperellum. На лугу – Penicillium
chrysogenum и Tricho-
derma hamatum . В молодом березняке доминируют
Trichoderma hamatum (как на лугу), Paecilomyces car-
neus (как в лесу) и mortier ella hyalina . В зарастающей
части поля происходит как бы смешивание видов, оби-тающих в почве поля и леса.
Изменение численности и видового состава микро-
мицетов в ходе восстановительных сукцессий подчи-нялись следующим закономерностям:
• Численность грибных пропагул самая высокая в ста-бильном предклимаксном сообществе, характерном дл
я данной природной зоны. Самая низкая – в био-
топе, нарушенном хозяйственной деятельностью. На переходной стадии восстановления раститель-ности численность грибов имеет промежуточное значение.
• Видовое разнообразие почвенных грибов наиболь-шее на стадии зарастания поля, несколько снижает-ся в ненарушенном ценозе, и самое низкое на лугу.
• Комплекс видов микромицетов зарастающей части поля имеет промежуточный состав, то есть в него входят как виды, характерные для луга, так и виды, доминирующие в коренном лесу.Показано, что землеройка бурозубка обыкновенная
Sorex araneus, являясь эвритопным видом, свободно перемещается и переносит на шкурке споры некото-рых видов грибов через изученные местообитания. Так, например, со зверьков в поле выделялись лесные виды: Penicillium simplicissimum, beauveria
bassiana, P .
raistrickii , P . variabile и P . aurantiogriseum . Напротив, в
лесу на шкурках встречались виды типичные для луга: arthrinium
phaeospermum и chaetomium homopilatum .
Таким образом, можно предположить, что обыкновен-ная бурозубка способна переносить споры некоторых сапротрофных микроскопических грибов и, участво-вать в смене комплексов почвенных грибов при сук-цессионных изменениях растительных ассоциаций.СМЕНА КОМПЛЕКСОВ ПОЧВЕННЫХ ГРИБОВ ПРИ ЗАР АСТАНИИ
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ТЕРРИТОРИЙ И ВОЗМОЖНОЕ
УЧАСТИЕ В
эТОМ ПРОЦЕССЕ МЕЛКИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ
Романова С.С.1, Александрова А.В.1, Александров Д.Ю.2
1 МГУ,
Москва
2 ИПЭЭ РАН,
Москва
МИКОИНДИКАЦИЯ УСТОЙЧИВОСТИ ЛЕСОВ
В ЮЖНОМ ПРИУР АЛЬЕ
Сафонов М.А.
оренбургский государственный педагогический университет,
оренбург
Оценка устойчивости лесных экосистем является
необходимым элементом системы управления ими. В качестве индикаторов устойчивости могут высту-пать не только состояние древостоев и фитоценозов в целом, но и, в частности, характеристики редуцен-тов. Наиболее специализированными редуцентами
Экология грибов 233
лесов являются ксилотрофные базидиальные грибы,
способные самостоятельно производить деструк-цию стойких лигнин-целлюлозных соединений.
Наиболее достоверными индикаторами являются
отдельные виды грибов, отличающиеся высокой чувс-твительностью по отношению к тем или иным факто-рам и исчезающие из сообщества при их интенсифика-ции (Исаева, 2004). Можно предположить, что и леса, в которых обитает большое количество чувствитель-ных видов, менее подвержены вредным воздействиям и могут рассматриваться в качестве особо ценных лес-ных массивов.
Впервые ксилотрофные грибы в качестве индика-
торов уровня антропогенной трансформации лесов были использованы Х. Котирантой и Т. Нёмеле (1996), создавшими оценочные (индикаторные) шкалы для хвойных лесов Финляндии. В их шкале наиболее цен-ными (коренными, устойчивыми) являлись леса, в ко-торых сохранилось максимальное количество редких видов грибов, в особенности реликтовых и эндемич-ных. Их сохранность подтверждает стабильность ус-ловий в данных лесных экосистемах и низкий уровень антропогенной нагрузки на них. Следовательно, при использовании данной системы решаются сразу две задачи
– выявление наиболее ценных лесных массивов
и сохранение в них редких видов грибов.
Для оценки устойчивости лесных экосистем пос-
редством учета редких видов ксилотрофных грибов мы испо
льзовали балльную оценку (наличие 1 вида – 1
балл). Чем выше балльность системы, тем ниже уро-вень ее нарушенности. В соответствии с этой систе-мой была проведена оценка состояния лесных экосис-тем Южного Приуралья.
Первоначально были выявлены виды ксилотроф-
ных грибов, которые могут рассматриваться в качестве индикаторов особо ценных лесных массивов.
В регионе к видам-индикаторам устойчивых со-
сн
овых лесов мы относим Dichomitus squalens ( karst.) Reid, popodaedalea pini (Brot.: fr.) Murrill, postia fragi-
li
s (fr.) Julich, postia hibernica (Berk.&Broome) Julich,
p.leucomallella (Murrill) Julich, p.septentrionalis ( vam-
po
la) Renvall, postia sericeomollis (Jьlich, postia stiptica
(pers.: fr.) Jьlich. Для малоизмененных широколист-
венных лесов характерны такие виды как Hymeno-ch
aete cinnamomea ( fr) Bres., H. corrugatа ( fr.: fr.)pil.,
porodaedalea conchata ( pers.: fr) fiasson & Niemella,
postia subcaesia (David) Jьlich, p.tephroleuca ( fr.)
Jьlich, Tyromyces fissilis (Berk. & M.A.Curtis) Donk., Xylobolus subpileatus (Berk. & Curt.) Boidin. В мелко-лиственных лесах с низкой степенью антропогенной де
градации отмечены piptoporus pseudobetulinus (Mu-
ra
sh. ex pilat) pilat, Steccherinum murashkinskyi (Burt)
Maas G.
Анализ встречаемости этих видов в лесах региона
показал, что большинство лесов области малоустой-чивы и сильно изменены человеком. Наиболее устой-чивые лесные экосистемы отмечены в Бузулукском бору; Тюльганском, Саракташском и Бугурусланском районах, отличающихся значительной лесистостью и относительно удаленных от крупных населенных пунктов.
Подавляющее большинство указанных видов было
отмечено нами на территории лесов, официально при-знанных особо ценными лесными массивами, что под-тверждает значимость придания им подобного стату-са.
Некоторые виды отмечались и в других лесах. это
является основанием для проведения специальных изысканий для рассмотрения вопроса о придании этим лесам статуса особо охраняемых природных террито-рий.
Дальнейшая разработка региональной системы
микоиндикации позволит существенно объективизи-ровать данные о состоянии среды региона и, в особен-ности, о состоянии лесных экосистем, как одного из наиболее угрожаемых типов ландшафтов для степной зоны Евразии.
ИНФОРМАЦИОННОЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ МИКРОМИЦЕТОВ
И БАКТЕРИЙ В эКОЛОГИЧЕСКИХ НИШАХ С
ЛИГНОЦЕЛЛЮЛОЗНЫМИ ОРГАНИЧЕСКИМИ СУБСТР АТАМИ
Свиридова О.В.1, Воробьев Н.И.1, Петров В.Б.1,
Ковалева Н.М.1, Никонов И.Н.1, Русакова И.В.2
1 ГНУ всероссийский научно-исследовательский институт
сельскохозяйственной микробиологии,
Санкт-Петербург-Пушкин
2 вНИИПТИо У,
владимир
Микроскопические грибы, входящие в почвенный
биоценоз, постоянно разносятся воздушными и водны-ми потоками в экосистемах. Поэтому почва содержит полный набор патогенной и непатогенной микрофло-ры. Всякие попытки сокращения численности пато-генной микрофлоры в природных экосистемах мало эффективны. В нашей работе мы использовали идею вовлечения патогенных и непатогенных микромицетов в деструктивную деятельность по разложению лигно-целлюлозных
органических субстратов. этим приемом
мы решаем две задачи. С одной стороны, микроорга-низмы оказываются занятыми в гумификации расти-тельных остатков, и этим повышают почвенное плодо-родие. С другой стороны, микроорганизмы выполняют
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 234
общую деструктивную функцию и не переключаются
на биологическую атаку здоровых растительных и жи-вотных организмов.
В природе, как правило, разложение органических
субстратов, содержащих лигноцеллюлозных компо-ненты, происходит медленно и не направленно. Для эффективной деструкции необходимо объединение микромицетов, актиномицетов и бактерий в специ-альную трофическую цепь микроорганизмов (ТЦМ), в которой может осуществляться их взаимная энер-гетическая поддержка и разложение субстрата по за-данной схеме. В естественных почвенных условиях вероятность образования ТЦМ чрезвычайно мала. Це-лью данных исследований являлся поиск условий, при которых может происходить конформация микроорга-низмов вокруг заданной гумификационной функции и трансмиссия этой функции на почвенный биоценоз.
В нашей работе исследовались ТЦМ, содержащие
микромицеты родов Trichoderma, Penicillium (T.viride pers., P
. chrysogenium Thom., P. albocinerascens Maubl.)
и бактерии родов bacillus, Pseudomonas, Flavobacte-
rium, cellulosomonas . Для формирования ТЦМ введен
оригинальный технологический этап: инокуляции со-ломы зерновых культур в специальных лабораторных условиях. После этого этапа микробиологический ком-плекс, активно работающий по заданной ТЦМ, поме-щается в почву. Мы полагаем, что этот прием приводит к трансмиссии гумификационной функции комплекса на почвенный биоценоз, и микроорганизмы оказыва-ются задействованными в полезной деятельности.
Отмечено, что в начальной стадии микромицеты
Trichoderma viride pers.
участвуют в деструкции во-
локон субстрата. На следующей стадии совместно с бактериями и актиномицетами участвуют микромице-ты рода Penicillium, являющиеся продуцентами окси-
редуктаз. В исследованной биосистеме наблюдалось тесное взаимодействие микробов и растения (двусто-ронние положительные обратные связи), способству-ющее преобразованию исходных лигноцеллюлозных органических субстратов до гумусовых форм по слож-ной схеме с подключением для этих целей потоков уг-лерода (из СО
2) и азота (N2).
Таким образом, концепция информационного про-
граммирования микробных комплексов, в частности микромицетов с бактериями, позволяет решать много-плановые задачи защитно-экологического значения.
АКТИНОМИЦЕТЫ В ГИФОСФЕРЕ АГАРИКОИДНЫХ
БАЗИДИОМИЦЕТОВ В ЛЕСНЫХ эКОСИСТЕМАХ
Сидорова И.И., Александрова А.В., Виноградова К.А., Воронина Е.Ю.
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
Гифосфера представляет специфические место-
обитания, существование и пространственную ор-ганизацию которых обеспечивает активно функцио-нирующий мицелий грибов. Мицелий агарикоидных базидиомицетов (АБ) из разных эколого-трофических групп доминирует в почве и подстилке в течение зна-чительной части периода вегетации и занимает в лес-ных экосистемах большие пространства. В почве он может быть представлен в виде мицелиальных матов разного размера, кольцевых колоний, обычно много-летних, диффузного мицелия с разной продолжитель-ностью существования и мицелиальных тяжей и ризо-морф. (Велик
анов, Сидорова, 2003; fricker et al., 2008).
Биомасса свободного мицелия составляет от 1,5–2 т до 6
т/га (v elikanov, 1989). Под влиянием почвенного
мицелия происходят резкие изменения свойств почвы. В гифосферу поступают из мицелия многочисленные органические соединения, в том числе биологически активные вещества.. В гифосфере осуществляются как контактные, так и аллелохимические взаимодействия АБ с почвенной биотой. Поэтому естественен интерес к микробиологии гифосферы.
К настоящему времени установлено, что симбио-
трофные и сапротрофные АБ активно влияют на чис-ленность и таксономическую структуру сообществ мик-ромицетов и одноклеточных бактерий почв и подстилки (Сидорова, Великанов, 1997; Великанов, Сидорова, 1998, 2002; Timonen, Marschner, 2005; Timonen, Hurek, 2006), однако об их селективном действии на мицели-альные бактерии (актиномицеты) известно мало.
Целью наших исследований был анализ влияния
АБ агарикоидных базидиомицетов из разных таксоно-мических и эколого-трофических групп на актиноми-цеты. Действие на эту группу почвенной микробиоты было изучено нами у 26 видов АБ, принадлежащих к 15 родам из 6 семейств и 3 порядков. 56 видов, при-надлежащих к 24 родам из 13 семейств и 6 порядков. В выборке были представлены преимушественно сим-биотрофы (16 видов) и подстилочные сапротрофы (8 видов). Образцы почв отбирали в гифосфере в карти-рованных колониях видов в заказнике Звенигородской биостанции Московского университета (Московская обл.). Контролем служили образцы, взятые вне коло-ний. Определяли численность КОЕ актиномицетов путем посева из разведений на казеин-глицериновой среде с нистатином и налидиксовой к-той.
42,3
% изученных видов не влияли статистически
достоверно на численность КОЕ актиномицетов. В гифос
фере 50 % видов наблюдали сокращение чис-
ленности
КОЕ этой группы, а в 7,7 % – ее возраста-
ние. Если же сравнивать действие на актиномицеты представителей разных эколого-трофических групп (симбиотрофов и подстилочных сапротрофов), можно отметить отсутствие среди симбиотрофов стимуляции.
Экология грибов 235
актиноми цетов и значительное преобладание видов,
ингибирующих их развитие. Что же касается подсти-лочных сапротрофов, среди них довольно высока доля неактивных видов.
Сравнительный анализ распределения численнос-
ти КОЕ актиномицетов на трансектах кольцевых коло-ний подстилочных сапротрофов clitocybe
geotropa и
lepista
nuda показал, что в зоне активного роста ми-
целия наблюдается сокращение численности КОЕ ак-тиномицетов (~ в 3,7 и 4,2 раза соответственно). Иные закономерности отмечены в центре колонии, где нахо-дится отмерший мицелий АБ и происходят процессы его деструкции. В отсутствие прессинга активного мицелия происходит существенная перестройка сооб-щества почвенных микроорганизмов, различающаяся, однако, у сравниваемых видов. У c.geotr
opa : возраста-
ет число КОЕ актиномицетов, в ~ 2 раза превышающее его значение в зоне активного роста мицелия, однако, не достигающее их численности в контроле. Здесь же наблюдается небольшой рост числа КОЕ микромице-тов. В центре колоний l .nuda
происходит дальнейший
рост числа КОЕ актиномицетов, значительно превы-шающего его значение в контроле, сопровождающийся сокращением численности КОЕ микромицетов. Тем не менее, в центре кольцевых колоний обоих видов, где постоянно происходит поступление отмирающего ми-целия по мере продвижения его фронта, показано уве-личение численности актиномицетов, которое можно связать с повышением содержания хитина клеточных стенок грибов в этой зоне. Рост популяции актиноми-цетов в почве после внесения хитина хорошо известен (Полянская, Звягинцев, 1984; Звягинцев, Зенова, 2001; Boniecka-Ratajczak et
al., 1992). это согласуется с про-
исходящим накоплением актиномицетов-антагонистов и миколитиков, обнаруженным нами в центре колоний l.nuda
(Великанов, Сидорова, 2003).
Анализ таксономической структуры сообществ акти-
номицетов, выделяемых на казеин-глицериновой среде, в колонии C.geotropa и в контрольной почве (Виногра-дова и др., 2008, в печати ).. указывает на преобладание представителей рода Streptomyces. Численное преобла-дание стрептомицетов среди почвенного актиномицет-ного сообщества лесных экосистем отмечено многими авторами (Зенова и др., 1996; Звягинцев, Зенова, 2001; Виноградова и др., 2007). Как в контрольных образцах, так и во всех зонах колонии в стрептомицетном комп-лексе абсолютно доминируют представители секции Ci
nereus, серии Chromogenes, составляющие от 74 % в
зоне активного роста мицелия до 90 % под базидиома-
ми
(в контроле – 77 %). В контрольных образцах обна-
ружены характерные для лесной подстилки стрептоми-цеты из секции Cinereus серии Achromogenеs, секции Albus серий Albus и Albocoloratus, секции Helvoloflavus се
рии Helvolus, а также секции Roseus серии fuscus,
секции Cinereus серии Aureus, секции Helvoloflavus се-ри
и flavus, составляющие преимущественно минорный
компонент актиномицетных комплексов. Актиномице-ты других родов в контроле обнаружены не были
В различных зонах кольцевой колонии наблюдаются
изменения таксономической структуры сообществ ак-тиномицетов по сравнению с контролем. Среди них в первую очередь следует отметить появление с невысо-ким относительным обилием представителей олигоспо-ровых актиномицетов Te
traspora – в зоне активного рос-
та мицелия, act inomadura – под базидиомами и в центре
колонии, в последней также – mic romonospora ; во всех
зонах колонии обнаружена Saccharopolyspora . Выявле-
на элиминация в некоторых зонах колонии видов с низ-ким относительным обилием (например, относящихся к секции Helvoloflavus серии Flavus – во всех зонах,
с
екции cinereus серий achromogenеs и Aureus , секции
Helvoloflavus серий Helvolus и Flavus, секции albus се-
рии albus – под базидиомами). У становлены изменения относительного обилия представителей некоторых дру-гих секций и серий, особенно в центре колонии.
Полученные нами данные показывают, что для
актиномицетов не харктерно преимущественно одно-типное влияниие АБ на численность их КОЕ, как это отмечено для бактерий и микромицетов. Даже в коль-цевых колониях подстилочных сапротрофов, сходных по структуре и биомассе мицелия в почве наблюдают-ся существенные различия
в развитии актиномицетов в центре колоний и их
влиянии на восстановление численности микромице-тов в этой зоне. В различных зонах кольцевых колоний подстилочных сапротрофов происходят изменения таксономической структуры сообществ актиноми це-тов. Исследования таких локальных местообитаний, как разные зоны колоний АБ, позволяют выявить представителей актиномицетов, плотность популяции которых крайне низка в контрольной почве или они в ней не развиваются.
Исследование выполнено при частичной финансо-
вой поддержке гранта РФФИ –№ 07–04–00698а.
ОСНОВНЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ПРЕОБР АЗОВАНИЯ СООБЩЕСТВ
КСИЛОТРОФНЫХ ГРИБОВ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ
ПРИРОДНО-КЛИМАТИЧЕСКИХ И АНТРОПОГЕННЫХ ФАКТОРОВ
Ставишенко И.В.
Институт экологии растений и животных Уро РАН,
екатеринбург
В естественных, а также в подвергающихся антро-
погенному воздействию лесах Урала и Западной Сиби-ри были изучены основные ценопараметры функцио-нальной структуры комплексов ксилотрофных грибов:
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 236
таксономический состав, генеративная (численность
базидиом), конкурентная (численность видов в много-видовых микоценоячейках) и фитопатогенная актив-ность.
Типы антропогенных воздействий включали: влия-
ние разливов нефти, разливов минерализованных вод с примесью нефти, продуктов неполного сгорания уг-леводородов в газовых факелах, выбросов фтористых соединений, тяжелых металлов и сернистого ангидри-да, рекреации и хозяйственных рубок.
Воздействие природно-климатических факторов
на структуру микоценокомплексов рассмотрено на участках леса в высотном градиенте горных массивов Большой и Малый Сутук, Денежкин Камень (Средний и Северный Урал).
В результате исследований на участках леса в пес-
симальных условиях обитания и под воздействием техногенных загрязнений установлено:- обеднение видового разнообразия микоценоком-
плексов;
– доминирование видов с ресупинатными пленча-
тыми и арахноидными плодовыми телами, развиваю-щимися преимущественно в соприкасающихся с поч-вой нижних частях субстрата;
– подавление генеративной активности;- подавление конкурентной активности;- усиление фитопатогенной активности.Описание функциональной структуры ценоми-
кокомплексов позволило выявить толерантнтные к некоторым типам техногенного воздействия виды, увеличивающие численность в подвергающихся за-грязнению районах. В лесных экосистемах с высокой рекреационной нагрузкой отмечено появление синант-ропных видов, увеличение численности экологически пластичных видов, а также эксплерентных, характер-ных для ранних этапов разложения древесины.
СТРУКТУР А И ФУНКЦИИ ГРИБНОГО КОМПЛЕКСА
ЛЕСНОГО БИОГЕОЦЕНОЗА
Стороженко В.Г.
Институт лесоведения РАН,
с. Успенское, одинцовский р-н Московской обл.
Лесную экосистему в лесоведении принято рас-
сматривать как сообщество особей автотрофов и ге-теротрофов, обьединенных в единый организм, соци-альную структуру, в которой количественный состав и функциональные задачи всех её участников взаи-мообусловлены консортивными связям. Грибная ге-теротрофная компонента лесного биогеоценоза явля-ется одной из его важнейших структур, отвечающей за процессы утилизации биомассы и принимающей непосредственное участие в формировании других структур лесного сообщества. Если первый тезис не оспарив
ается, то второй – формирующая функция
грибной биоты – подвергается сомнению и нередко от-рицанию. Между тем именно задачам формирования структур автотрофов обязана существованию в биоте грибных гетеротрофов обширная группа грибов, об-ладающих свойствами паразитизма, факультативного сапрофитизма и факультативного паразитизма. Задачи утилизации биомассы ксилотрофами и задачи форми-рования структур автотрофов в общем функциониро-вании грибной биоты тесно переплетены между собой и связаны со структурой самого микоценоза.
Структура лесного микоценоза складывается из
нескольких микогоризонтов, отличающихся составом грибов различной пищевой специализации, их эколо-гическими и функциональными особенностями. За-дача утилизации отмершей биомассы с выделением СО
2, энергии и воды решается в микогоризонте валежа
и верхнем слое почвы, включающим грибы, разлага-ющие древесину стволов, пней и корней древесного отпада, опад и другие фрагменты отмерших организ-мов биоты. При этом древесный отпад не входит ни в состав фитоценоза, ни в состав почвы и может трак-товаться как отделная ценотическая структура лесного биогеоценоза.
Микогоризонт стволового слоя сложен из видов
грибов биотрофного дереворазрушающего комплек-са, обладающих в разной степени факультативными свойствами. Такие виды могут поражать как живые деревья, вызывая их гниль, ослабление и гибель, так и проявлять сапрофитические свойства, продолжая фун-кционировать в составе ксилотрофов, разлагая перехо-дящую в
валеж, древесину. эта группа грибов мико-
ценоза рассматривается как структура, отвечающая за процессы ослабления деревьев и перевода определен-ного их количества из состава автотрофов в категорию древесного отпада.
Микогоризонт фотосинтезирующего слоя насыщен
облигатными паразитами. В экологическом строении микоценоза во всех микогоризонтах выделяются сико-синузии, отличающиеся видовым составом грибов, обо-со
бленностью в пространстве и во времени – синузии
листа, хвои, раковой раны, гнили ствола, корня и т.д.
Оценка деятельности грибов дереворазрушающе-
го биотрофного комплекса диаметрально различается с позиций эволюционных задач лесного сообщества и потребностей человека в промышленном сырье. С антропоцентрических позиций они вызывают болезни лесов и снижают хозяйственную ценность древосто-ев. С эволюционных позиций их присутствие в лесном биогеоценозе обязательно, а их деятельность следует рааматривать как восстановление в кратчайшие сроки необходимого баланса в функционировании лесно-го сообщества. Таким образом, понимание отличий в
Экология грибов 237
Несмотря на усилия исследователей, процесс раз-
ложения древесины грибами остаётся сравнительно
малоизученным. В частности, имеется дефицит дан-ных, касающихся баланса этого процесса, реализуемо-го в конкретных экосистемах леса.
В настоящей работе изучали разложение древеси-
ны грибами в сосняках Серебряноборского опытного лесничества Института лесоведения Р АН. В ходе мар-шрутных учётов были определены видовой состав и степень распространения (условная встречаемость) плодовых тел грибов на древесных остатках сосны. При картировании двух специально заложенных пос-тоянных пробных площадей у находящихся в их грани-цах древесных остатков измерялись длина и диаметр.
Из 16 древесных остатков, разрушаемых разными
видами макромицетов, наиболее распространённых в лесу и занимающих доминирующее положение в тол-ще древесины, были взяты образцы гнили для лабора-то
рного анализа. эти древесные остатки имели разные
стадии разложения валежа, установленные по шкале В.Г.Стороженко (1992). В лаборатории титрометричес-ки, по методу В.А.Соловьёва(1983), определяли интен-сивность выделения углекислоты из гнили. Методами, принятыми в древесиноведении, определяли влажность по объёму и базисную плотность образцов гнили.
Для расчёта баланса использовали уравнение кси-
лолиза, предложенное В.А.Соловьёвым (1992). Вы-числяли запас древесных остатков, объём накоплен-ной в древесине влаги, биомассу эндогенного мицелия грибов, выход тепловой энергии.
Условную встречаемость плодовых тел грибов
рассчитыв
али, приняв за 100 % общее количество уч-
тённых на маршрутах древесных остатков. При вы-числении объёмов древесных остатков использовали формулу объёма цилиндра и таблицы объёмов, при-нятые в лесной таксации. Объём накопленной влаги найден как разница «объёмной» влажности древесины на конечной и начальной стадиях её разложения гри-бами, умноженная на объём древесного остатка. Био-масса мицелия определена как произведение экспери-ментально установленной Рипачеком и Навратиловой (1971) величины содержания мицелия в древесине на объём древесины, разрушаемой грибами в исследуе-мом сосновом бору. Выход тепла рассчитан умножени-ем массы разрушаемой древесины на величину «тепло-вой» константы, приведённой В.А.Соловьёвым (1992). В свою очередь, масса этой древесины получена как сумма произведений показателей базисной плотности древесины на её объёмы, разрушаемые каждым видом гриба в отдельности и вычисленные исходя из услов-ной встречаемости грибов.
В видовом составе грибов-дереворазрушителей
выявлено резко выраженное доминирование гриба Trichaptum
abietinum (D.: fr.) Ryv., что можно объяс-
нить морфологическими особенностями древесных остатков и структурой древостоя изучаемой экосисте-мы леса.
Оказалось, что при разложении не более чем 11,5
м
3/га древесных остатков в их толще будет накоплено
не менее 1,9 кг (в пересчёте на углерод) эндогенного мицелия грибов и, в среднем, 0,4 м
3 «микогенной» вла-
ги; в окружающую среду выделится около 4,4 кг СО2 (в
пересчёте на углерод) и 58,7х109 Дж тепла. Кроме того,
выяснилось, что максимальный выход продуктов раз-ложения древесины наблюдается на II стадии разложе-ния валежа по шкале В.Г.Стороженко, когда активно функционируют грибы из группы «истинных дерево-разрушителей»;
второй, менее заметный пик – на Iv
стадии разложения, когда субстрат освоен грибами-гу-мификаторами.оценках деятельности, функциональных задач грибов дереворазрушающей биотрофной группы подводит нас к необходимости учета этих задач при планировании структуры лесов и ведении в них лесного хозяйства.
БАЛАНС ПРОЦЕССА Р АЗЛОЖЕНИЯ ДРЕВЕСИНЫ
ГРИБАМИ В эКОСИСТЕМЕ СОСНОВОГО БОР А
Темнухин В.Б.
кафедра экологии и природопользования
Нижегородского государственного архитектурно-строительного университета,
Нижний Новгород
ПОЧВЕННАЯ МИКРОБИОТА ВТОРИЧНОГО БЕРЕЗНЯКА СРЕДНЕЙ ТАЙГИ
Хабибуллина Ф.М., Лиханова И.А.
Институт Био
логии к оми НЦ Уро РАН,
Сыктывкар
Исследования микробного комплекса почвы после-
рубочного березняка проводились в Сыктывдинском районе Республики Коми. Древостой состоит из Betula pubescens и
B. pendula с примесью pinus sylvestris и
picea obovata. Сомкнутость крон – 0.7. Проективное покрытие травяно-кустарничкового покрова, где до-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 238
минирует Aegopodium podagraria, – 65–95 %. Моховой
покров выражен слабо. Почва слабодерновая, слабоо-подзоленная суглинистая.
Образцы почв для микробиологического анализа от-
бирали
из верхнего горизонта почвы – органо-аккуму-
лятивного (АоА1), который характеризуется довольно высокой кислотностью (рНводн.- 4.9), максимальным, по отношению к остальным почвенным горизонтам, содержанием элементов-биогенов (содержание гуму-са
– 9.4 %, гидролизуемого азота – 6.8 мг/100 г в.с.п.).
В органогенно-аккумулятивном слое почвы берез-
няка выделено 49 видов микромицетов, из 17 родов, а также три формы стерильного мицелия. Подавляющее число видов
относится к несовершенным грибам – 28
видов из 12 родов; зигомицеты представлены 12 ви-дами родов absidia, m
ucor, mortierella, Thamnidium,
аско
мицеты – 4 видами рода chaetomium , класс
coelomycetes
– 1 видом рода Phoma. В целом по ви-
довому разнообразию преобладают пенициллы (14 видов).
Комплекс типичных видов грибов органогенно-
го слоя включает 3 доминирующих вида (включая 1 «вид» стерильных форм), 10 частых, 16 редких. В чис-ло доминантов входят mucor
racemosus, mortierella
ramanniana и светлоокрашенные формы стерильного
мицелия Мycelia sterilia. Сре ди частых – mucor globo-
sus, m.
hiemalis, chaetomium globosum, Paecilomyces
variotii, Penicillium camemberti, Trichoderma koningii, T. lignorum.
Количество прокариотических микроорганизмов
органогенных слоев почвы березняка, согласно дан-ным полученным путем высева на плотные среды, в среднем составляло 52.3 млн.кл./1г.в.с.п., количество грибов
– 334 тыс. КОЕ/1г. в.с.п. Согласно же данным
полученным методом люминесцентной микроскопии количество бактерий, отмеченное в подстилке берез-няка, составило 2.2 млрд.кл./г., количество спор гри-бов
– 6.6 млн.спор/г, мицелий грибов – 839.6 м/г, ми-
целий актино
мицетов – 134.8 м/г в.с.п.Максимальная биомасса в органо-аккумулятивном
горизонте отмечена у грибов (3.3 мг/г), при этом со-отношение мицелия и спор составляло в процентах 98.1/1.9. Биомасса бактерий (0.04 мг/г) и актиномице-тов
(0.005 мг/г) составляет 1.3 % от общей биомассы
микроорганизмов.
Исследования основных физиологических групп
микроорганизмов показали преобладание в органоге-ном слое сахаролитиков (количество которых в разные сезоны колебалось от 0.3 до 67.2 млн. КОЕ/г. в.с.п.) и аммонификаторов (от 7 до 33 млн. КОЕ/г. в.с.п.), что свидетельствует о более активном потреблении ор-ганических веществ, а не минеральных. Количество нитрификаторов не превышало 0.35 млн. КОЕ/г. в.с.п. Соотношение количества аммонификаторов к нитри-фикаторам очень низкое, что свидетельствует о затор-моженности процессов минерализации растительных остатков, их накопления в подстилке, что достаточно важно для функционирования экосистем Севера в усло-виях промывного режима. Минимальная численность среди физиологических групп отмечена у группы цел-люлозолитиков (0.0012–0.0028 млн. КОЕ/г. в.с.п.).
Таким образом, изучение микромицетов органо-ак-
кумулятивного слоя почвы послерубочного березняка показало их высокое видовое разнообразие (49 видов и три формы стерильного мицелия). В органогенном горизонте отмечено резкое преобладание мицелия грибов. Прокариоты (бактерии и актиномицеты) мало харак
терны и составляют 1.3 % от общей биомассы
микроорганизмов. Основными факторами, лимитиру-ющими их активность, являются сильнокислая реак-ция трудноминерализуемого субстрата и низкая теп-лообеспеченность почвы. Основными деструкторами органики в данных экосистемах являются почвенные микромицеты, которые находятся в основном в вегета-тивной форме развития (мицелий). Процесс деструк-ции органического вещества в березняке заторможен, о чем свидетельствует соотношение количества фи-зиологических групп микроорганизмов.
ПОЧВЕННЫЕ МИКРОМИЦЕТЫ В КОРЕННЫХ
СТАРОВОЗР АСТНЫХ СРЕДНЕТАЕЖНЫХ ЕЛОВЫХ ЛЕСАХ
Хабибуллина Ф.М
Институт Биологии к оми НЦ Уро РАН,
Сыктывкар
Исследования почвенных грибов проводились в
подзоне средней тайги на Максимовском почвенном стационаре Института биологии, расположенном в 12 км к юго-западу от г. Сыктывкара. Для изучения микромицетов был выбран ряд почв в единой кате-не, характеризующейся нарастанием гидроморфизма: (П) типичная
подзолистая (AO – A1A2h – A2Bth –
A22 – A2B – B1 – B2) под ельником чернично-зелено-мошным; (Ппг) подзолистая поверхностно-глееватая (AO
– A2h – A2g – A2B – B1 – B2 – BCg) под ельни-
ко
м зеленомошным; (Пб1) торфянисто – подзолис-то
– глееватая (O1 – O2 – A2hg – A21g – A22g – A2Bg)
под березово-еловым долгомошно-сфагновым лесом; (Пб2) т
орфяно-подзолисто-глеевая почвы (01 – 02-
03 – A2hg – B1 – B2g) под березово-еловым сфагно-вым лесом, занимающие соответственно 40, 40, 15 и 5
% площади стационара.
Исследованные подзолистые почвы отличаются
высокой кислотностью, слабой насыщенностью ос-нованиями и низкой обменной способностью. Им ха-рактерна резко выраженная приуроченность наиболее активных биологических процессов к верхней части
Экология грибов 239
профиля, основная масса корней растений расположе-
на в подстилке, где сосредоточены также основные за-пасы наиболее доступной микроорганизмам пищи. В изучаемых почвах складываются неодинаковые усло-вия для развития микробиоты. Исходя из соотношения С/N в болотно-подзолистых почвах они оказываются наиболее жесткими, а в типичной подзолистой и по-верхно
стно-глееватой – относительно более благопри-
ятными для жизнедеятельности микроорганизмов.
Анализ распределения микроорганизмов по поч-
венным горизонтам данных биогеоценозов, проведен-ный на основании результатов двух методов: прямого люмине
сцентного и посева – позволил выявить общие
закономерности. Они заключаются в максимальной концентрации микроорганизмов в органогенном го-ризонте, с дальнейшим постепенным сокращением их численности по почвенному профилю. Во всех типах подзолистых почв преобладает биомасса грибного ми-целия (до
99 %). Она в 80–90 раз выше биомассы гриб-
ных спор и в 600–1000 раз превосходит бактериальную массу. Почвы в порядке возрастания запасов биомассы микроорганизмов располагаются следующим образом: торф
яно-подзолисто-глеевая (Пб1) – торфянисто-под-
зо
листо-глееватая (Пб1) – подзолистая поверхностно-
глееватая (Ппг) – типичная подзолистая (П).
Биота микромицетов подзолистых почв насчитыва-
ет 73 вида (включая стерильные формы), принадлежа-щих к 18 родам из классов zygomycetes, a
scomycetes, Hyphomycetes, basidiomycetes. Для нее характерны
следующие особенности: многочисленность различ-ных форм стерильного мицелия; преобладание пени-циллов по
численности и видовому разнообразию – 29
видов из 73; постоянное присутствие мукоровых гри-бов и видов из рода Trichoderma;
– единичная встре-
чаемость представителей asper gillus; доминирование
видов chaetomium среди целлюлозоразрушающих
микроорганизмов.
Сравнение микобиот исследуемых почв показало,
что по мере усиления степени гидроморфизма наблю-дается уменьшение количества и сужение видового разнообразия микромицетов. Среди обследованных сообществ наибольшее количество грибов и их разно-образие наблюдаются в типичной подзолистой почве. В отличие от типично подзолистой в подзолистой по-верхностно-глееватой почве видовой состав микроми-цетов в верхней части подстилки был несколько бед-нее, чем в нижележащем ее слое.
Наибольшее сходство комплексов видов микроми-
цетов по Жаккару наблюдалось в парах: почвенные группировки
(П) – (Ппг), (Ппг) – (Пб1), (Пб1) с (Пб2)
(51 % и более), наименьшее – демонстрировали ти-пичная подзолистая почва (П) с торфяно-подзолисто-глеев
ой (Пб2) (21 %). Степень сходства выделенных
комплексов в значительной мере отражает сходство и различие исследованных почв по физико-химическим свойствам, гидротермическим условиям.
МИКРОМИЦЕТЫ РИЗОСФЕРЫ И МЕЖДУРЯДИЙ ЛАВАНДЫ
УЗКОЛИСТОЙ В УСЛОВИЯХ ИНТРОДУКЦИИ
Элланская Н.Э., Юношева Е.П.
Национальный ботанический сад им.Н.Н. Гришко НАН Украины,
киев
На современном этапе, когда остро стоит вопрос о
сохранении биоразнообразия, возникла необходимость поиска новых видов широкого полифункционального использования. К таким растениям относятся арома-тические виды. Они сочетают в себе эфиромасличные и декоративные качества, что является очень ценным не только для промышленного производства, но и для использования их в ландшафтном дизайне при озеле-нении населенных пунктов, зон отдыха и оздоровле-ния. К таким культурам относится лаванда узколистая (lavandula angustifolia
l.).
В Национальный ботанический сад им. Н.Н. Гриш-
ко НАН Украины этот интродуцент завезен из Крымс-ких совхозов. В местах промышленного выращивания лаванды проводились исследования ее аллелопати-ческих и микробиологических особенностей (Юрчак, 2005), но в зоне Лесостепи Украины, где она довольно хорошо растет и репродуцирует много лет, такие ра-боты отсутствуют. При переносе растений в другие регионы меняются их экологические характеристики, поэтому информация относительно их аллелопатичес-кой активности и толерантности, а также изучение ди-намики и закономерностей формирования микробного ценоза почв является довольно важной.
В течение 2005–2006 гг. мы изучали динамику
численности микроорганизмов основных таксономи-ческих групп ризосферы и междурядий двух сортов лаванды
8–9-летнего возраста – Южнобережная и
Рекорд. Микробиологические исследования показали активное участие почвенных микромицетов в жизне-деятельности микробоценоза почв этой культуры.
Анализируя полученные данные видового состава
грибов по фазам развития лаванды нужно отметить, что в ризосфере и междурядьях он очень разнообразен как качественно, так и количественно. Среди обнару-женных в исследованных почвах видов преобладали представители митоспоровых грибов. Максималь-ную численность микромицетов мы наблюдали вес-ной
– в фазу отрастания растений лаванды. Доминан-
тами выступали виды родов Gliocladium, Trichoderma,
Fusarium и Penicillium , причем последний отличался
большим спектром пигментированных видов.
В фазу цветения лаванды количество микромице-
тов снижалось во всех опытных вариантах. Такая же
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 8 240
закономерность наблюдается и у других ароматичес-
ких растений (шалфей, мята) (Юрчак, 2005). Возрас-тает роль представителей меланинсодержащих грибов родов alternaria, c
ladosporium, Phoma , Torula. По-ви-
димому, корневые выделения и летучие соединения ла-ванды в период наибольшей активности всех фермен-тативных процессов подавляют развитие этой группы микроорганизмов.
В послеуборочный период происходит увеличение
численности микромицетов в почве лаванды, что сви-детельствует об активном участии грибов в разложе-нии труднодоступных соединений, накапливающихся к концу вегетации. Наблюдается наличие большого разнообразия видов, среди которых могут быть проду-центы как фитотоксических так и агрономически цен-ных соединений, а также потенциальных фитопатоге-нов. Ними могут быть: alternaria alternata
(fr.: f r.) von
keissl., aspergillus ochraceus Wilhelm, cladosporium
cladosporioides (f r.) de vries, Fusarium oxysporum Schl.:
fr
., F . solani (Mart.) Sacc., Penicillium expansum l ink, P .
funiculosum Thom, P . rugulosum Thom, способность
которых продуцировать фитотоксические соединения представлена в специальной литературе. Возможно,
они могут создавать неблагоприятный аллелопатичес-кий режим в корнеобитаемой среде лаванды, что тре-бует дальнейших исследований.
Мукоровые грибы, являясь типичными r- стратега-
ми, выделялись в равной степени в течение всего пери-ода вегетации лаванды.Характерной особенностью почв лаванды является
наличие видов, относящихся к роду asper
gillus (asp.
ochraceus W
ilhelm, реже asp . candidus link: Fr.) и пол-
ное их отсутствие в контрольных образцах.
Как известно, специфика группировок грибов мо-
жет быть обусловлена различием состава и интен-сивности корневых выделений, их индуцирующим эффектом на прорастание пропагул грибов, количест-вом отмирающих клеток корня. Корневые выделения лаванды существенно влияли на микробный состав ризосферы. Об этом свидетельствует тот факт, что в междурядьях во все фазы вегетации грибов было в 1.5
– 2 раза больше, чем в ризосфере. И хотя ризосфера
по количеству микромицетов беднее, чем междурядья, однако видовой состав их значительно разнообразней.
Мы не наблюдали существенной разницы по чис-
ленности и видовому составу почвенных грибов ис-следованных сортов лаванды. В ризосфере и междуря-дьях сорта Рекорд отмечено некоторое превалирование грибов рода Penicillium в фазу отрастания растений
лаванды
и меланинсодержащих видов – в послеубо-
рочный период.
Таким образом, в результате проведенной работы
по изучению грибной биоты почв ризосферы и меж-дурядий лаванды узколистой, интродуцированной в Лесостепи Украины, получены данные о численности и видовом составе микромицетов, установлены сук-цессионные изменения микобиоты по фазам развития лаванды.
Плесневые грибы широко распространены в ок-
ружающем нас мире. С гигиенической точки зрения
наибольшую опасность для здоровья представляют их ток
сические метаболиты – микотоксины, поступаю-
щие с продуктами питания в организм человека. Среди множества (более 300) видов открытых микотоксинов реальная опасность для здоровья человека показана лишь для малой их части: афлатоксинов, трихотецено-вых микотоксинов (дезоксиниваленола, Т-2 токсина), охратоксина А, патулина, зеараленона и фумонизи-нов. Литературные данные свидетельствуют о конта-минации микотоксинами продуктов питания, широко используемых в повседневном рационе, а также об их выраженных токсических свойствах.
В процессе технологической обработки не удается
полностью избавиться от контаминации микотоксинами продовольственного сырья, что отводит ведущую роль в профилактике их поступления в организм человека сис-теме контроля содержания микотоксинов в продуктах пи-тания. Основой данной системы является гигиеническое нормирование, призванное предотвратить реализацию продукции, опасной для здоровья потребителя.
Гигиенические нормативы имеют не только сани-
тарное значение, но и играют все более возрастающую роль в международной торговле. В связи с этим воз-никает необходимость гармонизации отечественного законодательства в области гигиенического нормиро-вания с аналогичными международными правовыми актами, в первую очередь Европейского Союза.
В настоящее время в России существуют законода-
тельно утвержденные (СанПиН 2.3.2.1078–01 «Гигие-нические требования безопасности и пищевой ценнос-ти пищевых продуктов») гигиенические нормативы на содержание в пищевых продуктах афлатоксинов В
1 и
М1, дезоксиниваленола, Т-2 токсина, патулина, зеара-
ленона. Данные нормативы в большинстве своем соот-ветствуют европейскому законодательству.
Однако такие приоритетные микотоксины, как ох-
ратоксин А и фумонизины В
1 и В2 до настоящего вре-
мени не были представлены в отечественном санитар-ном законодательстве.
В результате проведенной работы нами была пока-
зана актуальность проблемы контаминации охраток-сином А и фумонизинами В
1 и В2 продовольственного
сырья и пищевых продуктов, проведена оценка риска для здоровья населения РФ поступления данных ми-котоксинов с продуктами питания, предложены гармо-низированные с международными правовыми актами гигиенические нормативы содержания охратоксина А, фумонизинов В
1 и В2 в пищевых продуктах.Раздел 9
МИКОТОКСИКОЛОГИЯ
ГИГИЕНИЧЕСКОЕ НОРМИРОВАНИЕ ОХР АТОКСИНА А
И
ФУМОНИЗИНОВ В1 И В2 С ПОЗИЦИЙ ГАРМОНИЗАЦИИ ОТЕЧЕСТВЕННОГО
И
МЕЖДУНАРОДНОГО САНИТАРНОГО ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВА
Аксёнов И.В., Седова И.Б., Захарова Л.П.
ГУ НИИ питания РАМН,
Москва
БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИНДИКАЦИИ СТАХИБОТРИОТОКСИНОВ
Андриенко Е.В., Зайченко А.М., Лысенко Т.Г.
Институт микро
биологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАН Украины,
киев
Сапрофитные грибы рода Stachybotrys повсеместно
распространены в природе, преимущественно на суб-стратах с высоким содержанием целлюлозы, таких как сено,
солома, растительные остатки, древесина. эти
грибы являются причиной стахиботриотоксикоза – тя-желого заболевания людей и животных, а также имеют
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 242
отношение к проявлениям так называемого «синдрома
больных зданий». Они продуцируют комплекс токси-ческих веществ различной химической природы: мак-роциклические трихотецены, триховерролы, триховер-рины, стахиботрины, спиролактоны и спиролактамы и др. В связи с этим, подбор тест-систем для экспресс-диагностики токсичности штаммов Stachybotrys явля-ется актуальным. В качестве тест-объектов использо-вали 20 штаммов различных видов дрожжей, штамм Сhlorella vulgaris
62,6 штаммов одноклеточных и нит-
чатых цианобактерий, семена огурцов, редиса, пшени-цы и кукурузы. Активность в отношении теплокров-ных определяли методом кожной пробы. Препараты стахиботриотоксинов получали стандартным методом трехкратной экстракции хлороформом с последующей очисткой диэтиловым эфиром и н-гексаном. Из сухих обе
звоженных препаратов готовили 1 % этанольные
растворы, которые затем тестировали.
Показано, что изученные 49 штаммов Stachybotrys
chartarum (Ehrenb.:Lk) Hughes по активности мож-но раз
делить на несколько характерных групп: 51 %
штаммов оказывал комплексное действие, которое проявлялось в совокупности антифунгальной актив-ности
и токсичности для растений (8,5 % штаммов),
либо антифунгальной активности и токсичности для живо
тных (19,1 % штаммов), либо антифунгальной
активности и токсичности как для растений, так и для живо
тных (23,4 % штаммов); 17 % штаммов вызыва-
ли только дерматоцидную реакцию (кожная проба на кролик
ах); 29,8 % штаммов не проявили активности
ни в одном из исследованных тестов. Среди изучен-ных индикаторных тест-культур дрожжевые штаммы kluyveromyces
marxianus 724 и 726 были самыми чувс-
твительными к препаратам Stachybotrys (диаметр зон задержки роста составлял от 9 до 25 мм), в то время как у других изученных штаммов дрожжей и хлорел-лы чувствительность к этим препаратам проявлялась в меньшей мере и значительно реже. Поэтому штаммы k.
marxianus 724 и 726 могут быть рекомендованы для
практического использования в ветеринарных лабора-ториях для оценки токсико-санитарной безопасности кормов для животных и профилактики стахиботрио-токсикоза.
Нами также проведен поиск индикаторных тест-
культур среди прокариотических микроводорослей, относящихся к разным таксономическим группам. Только культура сине-зеленой водоросли Synechococ-
cus cedrorum была чувствительна к действию токсинов
Stachybotrys. Диаметр зон задержки роста культур ва-рьировал в широком диапазоне (от 11 до 30 мм), а в жидкой среде токсический эффект легко фиксировался визуально по изменению окраски культуральной жид-кости от темно-синей до бледно-желтой.
Препараты стахиботриотоксинов оказывали выра-
женное фитотоксическое действие на семена огурцов, редиса, пшеницы и кукурузы. В концентрации от 200 мкг/мл и
выше они угнетали рост корней на 70 %, а
проростков на 45 %, а в концентрации 20 мкг/мл, как правило, стимулировали рост корней и проростков. Наиболее чувствительными были семена кукурузы, а наименее
– пшеницы. Данные фитотоксической актив-
ности, полученные на высших растениях, согласуются с таковыми для Сhlorella vulgaris.
На основании полученных данных можно сделать
выво
д, что детекция стахиботрио токсинов при помощи
таких тест-культур, как дрожжи (в частности, K. marx-
ianus), является с практической точки зрения наиболее
удобной и быстрой. Штамм сине-зеленой водоросли S. cedrorum 1 может быть достаточно перспективным в качестве тест-объекта, но его недостатком является до-статочно медленный тем роста по сравнению с дрож-жами и хлореллой. Для изучения фитотоксической ак-тивности удобнее, дешевле и нагляднее использовать Сhlorella vulgaris. В отдельных случаях для получения
более точных результатов необходимы дополнитель-ные методы токсико-биологических исследований.
ФУМОНИЗИН В1 ВЛИЯЕТ НА КЛЕТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ex ViVo
Аристархова Т.В.1, Пичугина Л.В.2, Мастернак Т.Б.2, Мартынова Е.А.1
1 ГУ НИИ питания РАМН,
Москва
2 ГНЦ Институт Иммунологии МзСР РФ,
Москва
Микотоксин Фумонизин в1 (fB1) – это вторичный
метаболит плесневых грибов Fusarium moniliforme, F .
proliferatum и некоторых других родственных им ви-дов. Т
оксическое и канцерогенное действие fB1 про-
является при употреблении человеком продуктов из зараженного зерна. Характерной локализацией опу-холевого роста является рак пищевода, диагностиро-ванный в высоком проценте среди коренного населе-ния нескольких районов КНДР и ЮАР , где уровень конт
аминации fB1 посевных площадей превышает
в несколько раз предельно допустимые нормы. Ре-акция жив
отных на корм, зараженный fB1, является
видо- и типоспецифической: у лошадей fB1 вызывает
энцефаломаляцию, у свиней – отек легких и т.д. В на-стоящее время известно более десятка мишеней дейс-твия фумонизина В1 на уровне клетки и субклеточных структур. Ранее мы показали, что следовые количес-тва [
14C]фумонизина В1 определяются в плазме кро-
ви экспериментальных мышей в период до 96 часов [martinova e
., adv. exp. med. biol., 1996, 391: 331–342].
эт
о позволяет предположить возможное влияние fB1
на клетки крови человека.
Микотоксикология 243
Целью работы было изучение влияния fB1 на
клетки периферической крови человека ex vivo .
Методы. Исследование проведено на клетках крови
людей
(n = 54) – пациентов Института иммунологии.
Мононуклеары выделяли на градиенте Фиколл-Ве-
рографина, а нейтрофилы и другие популяции клеток крови
– на градиенте Перколла. Далее клетки отмы-
ва
ли, переносили в среду RpMI-1640 и инкубировали
(t+37 °С, 5 % СО2) с добавлением fB1. эффекты fB1
регистрировали по изменению состояния плазмати-ческой мембраны, плотности рецепторов, генерации супероксидного аниона, а также по индукции апопто-за (образование олигонуклеосомальных фрагментов ДНК, определяемых на проточном цитометре по вклю-чению пропидиума иодида). Анализ полученных дан-ных проведен в НИИ питания по программе Biostat.
Ре
зультаты. Установлено, что действие fB1 на
клетки периферической крови человека носит дозо- и время-зависимый характер, а также определяется ин-дивидуальным состоянием людей и наличием заболе-ваний
крови. fB1 был эффективен в концентрации ≥
3×10–6 М. Наиболее чувствительными к fB1 популя-
циями клеток периферической крови человека являют-ся нейтрофилы и бластные клетки, в которых апоптоз определялся
при минимальных концентрациях fB1 и
краткосрочной инкубации. Генерация супероксидного аниона нейт
рофилами изучалась в люминол – зависи-
мой х
емилюминесценции. fB1 дозо-зависимо угне-
тал люминесценцию нейтрофилов. При исследовании общего пула мононуклеаров крови обнаружено, что количественные показатели реакции хемилюминес-ценции в
ответ на fB1 зависят от соотношения клеток
разных популяций и субпопуляций, что указывает на специфическ
ое действие fB1 в отношении клеток раз-ного типа. Реакция плазматической мембраны регист-рирова
лась после 15-минутного контакта fB1 с клет-
ками крови, что выражалось в изменении плотности рецепторов и нарушении интернализации рецепторов. Наиболее
выраженное влияние fB1 оказывал на мемб-
раны нейт
рофилов (чистота выделения клеток ~98 %).
Для суммарного пула лимфоцитов, не разделенных на су
бпопуляции, показано, что действие fB1 зависит от
индивидуальных особенностей человека. Среди об-следованных пациентов была выделена группа людей, у к
оторых fB1 вызывал выраженные изменения и вы-
сокий процент апоптоза. При последующем изучении анамнеза больных, формулы крови и иммунного стату-са обнаружено, что большинство из них имели имму-нодефициты разного типа. При изучении крови доно-ров, у которых не было выявлено иммунодефицитного состояния или бактериальной и вирусной инфекции, установ
лено, что fB1 оказывал менее выраженное ток-
сическое действие по сравнению с больными людьми. Тем
не менее, при изучении влияния fB1 на очищен-
ные популяции клеток крови выявлены общие законо-мерности, выражающиеся в обязательном проявлении ток
сического действия fB1 при его высокой концент-
рации в среде инкубации и при длительном контакте с клетками крови.
выв
оды. Контакт Фумонизина в1 с клетками, вы-
деленными из периферической крови человека, при-водит к изменению состояния плазматической мемб-раны, нарушению генерации супероксидного аниона, нарушению состояния рецепторного аппарата, что обусловливает гибель клеток при высокой концент-ра
ции фумонизина. Токсические эффекты fB1 наибо-
лее выражены для нейтрофилов и делящихся клеток крови.
ПРОБОПОДГОТОВКА КР АСНЫХ ВИН МЕТОДОМ
ТВЕРДО
ФАЗНОЙ эКСТР АКЦИИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ОХР АТОКСИНА А МЕТОДОМ ПОЛЯРИЗАЦИОННОГО
ФЛУОРЕСЦЕНТНОГО ИММУНОАНАЛИЗА
Белоглазова Н.В., Еремин С.А., Сахаров И.Ю.
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
Охратоксин А (ОТА) – один из наиболее опасных
для здоровья человека микотоксинов, обладающий те-ратогенным и генотоксичным действием. Он является частым, но нежелательным «гостем» в продуктах пи-тания человека. Поступление ОТА с пищей ослабля-ет иммунитет человека, приводит к злокачественному перерождению клеток, что и делает проблему его оп-ределения в продуктах питания очень актуальной. Од-ним из возможных путей поступления ОТА в организм человека является его потребление вместе с красным вином.
Наиболее часто для определения ОТА использу-
ют
ся методы Вэ ЖХ с флуориметрическим или масс-спектрометрическим детектированием. Однако хро-матографические методы, наряду с неоспоримыми достоинствами, обладают также рядом существенных недостатков (дороговизна аппаратуры, длительность проведения анализа). С другой стороны, поляризаци-онный флуоресцентный иммуноанализ (ПФИА) харак-теризуется быстротой, высокой точностью, простотой проведения анализа, а также высокой специфичнос-тью, что позволяет использовать этот метод для скри-нинга ОТА в большом числе образцов. Однако опреде-ление его в красном вине методом ПФИА затруднено наличием матричного эффекта, вызванного присутс-твующими в вине красителями.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 244
Для нивелирования матричного эффекта красно-
го вина нами разработаны методики его пробопод-
готовки методом твердофазной экстракции, где в качестве адсорбентов были использованы диверган и
хитозан – природные белковые полисахариды.
Выбраны оптимальные условия проведения пробо-подготовки образца: время экстракции диверганом составило 15 минут при концентрации его, равной 20 %
, тогда как для хитозана удовлетворительный
результат экстрагирования достигался через 12 ча-со
в (концентрация адсорбента –10 %). Так же оп-ределена пара антиген-антитело (флуоресцентно меченный трейсер, моноклональные кроличьи ан-титела на ОТА), на основе которой разработана ме-тодика определения ОТА в очищенном от фонового влияния красном вине. Построены градуировочные кривые для нахождения аналита в вине, были рас-считаны метрологические характеристики метода. Количество связываемого сорбентом ОТА контро-лировалось методом «введено-найдено»: процент от
крытия составил 78 % при использовании хито-
за
на и 72 % – дивергана.
МИКОТОКСИНЫ В НАПИТКАХ БРОЖЕНИЯ
Буркин А.А., Кононенко Г.П.
ГНУ в
НИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии РАСХН,
Москва
Загрязненность напитков брожения микотоксинами
является предметом пристального внимания исследо-вателей во всем мире в связи со значительными масш-табами их производства. Изучение этой проблемы для российского рынка еще только начинается, и активно развивающаяся методология иммуноферментного ана-лиза (ИФА) открывает для этого широкие возможнос-ти (Буркин, Кононенко, 2007). В данном сообщении представлены обобщенные результаты обследования напитк
ов массового потребления – отечественного
пива и кваса различных марок и изготовителей, образ-цы которых были отобраны в торговой сети г. Москвы в октябре-ноябре 2006 г. и в марте-апреле 2007 года.
В исследованных образцах пива выявлена обшир-
ная сочетанная загрязненность такими известными токсичными метаболитами грибов asper
gillus и Peni-
cillium как циклопиазоновая кислота (47/47, 2.5 – 41.8
нг/мл),
микофеноловая кислота (35/36, 0.20 – 1.90 нг/
мл), цитринин ( 45/48, 0.16 – 1.59 нг/мл), стеригмато-цистин (35/48,
0.04 – 0.16 нг/мл) и pR-токсин (26/38,
0.60 – 3.20 нг/мл). Высокая частота обнаружения ус-тановлена также для трихотеценов фузариогенной природы
– Т-2 токсина (33/48, 0.16 – 3.10 нг/мл) и де-
зок
синиваленола (29/35, 0.8 – 11.8 нг/мл). Те же мико-
токсины были обнаружены в двух производственных образцах нео
хмеленного пивного сусла – циклопиазо-
новая кислота (9.93, 12.6 нг/мл), микофеноловая кис-лота (0.57, 1.22 нг/мл), цитринин (0.98, 1.55 нг/мл), стеригматоцистин (0.24, 0.27 нг/мл), Т-2 токсин (0.86, 3.61 нг/мл), дезоксиниваленол (1.57, 35.6 нг/мл), при это
м один из образцов содержал pR-токсин в концен-
трации 2.52 нг/мл. Для выделенных из сусла культур asper
gillus niger, aspergillus versicolor и Penicillium sp.
была подтверждена способность к синтезу циклопиа-зоновой кислоты (13 нг/мл), микофеноловой кислоты (19 нг/мл), цитринина (5 нг/мл), стеригматоцистина (9 и 7600
нг/мл) и pR-токсина (600 и 660 нг/мл). Сведе-
ния о загрязненности пива дезоксиниваленолом ранее были получены в Канаде (Scott, 1996), европейских странах
(Niessen et al., 1993; papadopoulou-Bouraoui et
al., 2004), в Корее (ShimWonBo et al., 1997) и Аргенти-не (Molto et al., 2000).
Фузариотоксины зеараленон и фумониизин В
1 в
пиве встречались редко – в 9-ти образцах (0.16 – 0.44 нг/мл) и в одном образце (0.8 нг/мл) из 48 исследован-ных, что вполне соответствовало данным зарубежных исследователей (ShimWonBo et al., 1997; Dasko et al., 2005). Анализ охратоксина А, афлатоксина В
1 и диа-
цетоксисцирпенола с чувствительностью 0.16, 0.08 и 0.8 нг/мл не дал положительных результатов, что было вполне ожидаемым. Так, для охратоксина А известно либо частое выявление в пиве крайне низких уровней содержания
от 0.011 до 0.185 нг/мл в Италии (v isconti
et al., 2000), Бельгии (Tangni et al., 2002), Бразилии (p
rado et al., 2003), Японии (kawamura, 2005), либо
его полное отсутствие, в частности в Словакии (Das-ko et al., 2005), даже при использовании специальных сверхчувствительных методов. В образцах кваса при существенных различиях по степени загрязненности были выявлены те же микотоксины, для которых ус-тановлена наибольшая частота встречаемости в пиве. Факт контаминации пива и кваса циклопиазоновой и микофеноловой кислотами, цитринином, стеригмато-цистином, p
R-токсином и Т-2 токсином сообщается
нами впервые.
Таким образом, значительная загрязненность мико-
токсинами напитков, представленных на российском рынке, является серьезной проблемой и может быть следствием недостаточного внимания к контролю ка-чества используемого зернового сырья, а также нару-шений санитарно-гигиенических требований в техно-логии их производства.
Микотоксикология 245
эргоалкалоиды, токсины грибов рода claviceps,
являются широко известным фактором риска для че-
ловека и животных. Несмотря на предложенное мно-гообразие физико-химических методов для анализа за-грязненности сельскохозяйственной продукции (Scott, Lawrence, 1980; k
lug, 1986; Rottinghaus et al., 1991; Hill
et al., 1993; Craig et al., 1994), на практике они остают-ся мало востребованными. Более успешной альтерна-тивой становится иммуноферментный анализ (ИФА), разработка которого описана в серии работ американс-ких иссле
дователей (Shelby, kelley, 1990–92; Hill, 1994,
1997; Shelby et al., 1998) и продолжается в настоящее время (Schnitzius et al., 2001).
В ходе иммунизации животных конъюгированным
антигеном на основе карбоксилсодержащего произ-водного эргометрина нами получены поликлональные кроличьи антитела, которые в условиях непрямого твердофазного конкурентного ИФА обеспечивают определение
гаптена в концентрациях 0.1 – 10 нг/мл
буферного раствора, содержащего 10 % ацетонитрила. Исследование специфичности антител в отношении эргоновина
и его пептидного аналога эрготамина –
действующих веществ двух фармацевтических препа-рат
ов – эргометрина (Sanavita, Франция) и белласпона
(Leciva, Чехия), показало, что эти алкалоиды с общим структурным фрагментом эрголина имеют линейный эффект торможения связывания антител в диапазоне концент
раций 0.1 – 10 нг/мл. Практически одинаковая
избирательность анализа в отношении эргометрина (ИК50 = 0.63 нг/мл) и эрготамина (ИК50 = 0.87 нг/мл), по-видимому, явилась следствием удачного экрани-рования участка связующего звена между гаптеном и макромолекулярным носителем в иммуногене. Инте-ресно отметить и при этом трудно объяснить тот факт, что для метилэргометрина, выделенного из препарата метилэргобревин (Hemofarm D.D., Югославия), пере-крестная реактивность в этих же условиях составила вс
его 2 %.
Соединения ∆8, 9-клавинового ряда, имеющие раз-
личия в кольце D по характеру замещения или при-сутствию двойной связи, в этих условиях оказывали заметный эффект торможения связывания, степень выраженности которого закономерно снижалась по мере накопления структурных отличий от гаптена. Для веществ с единственным заместителем при С
8 в
кольце D – элимоклавина, агроклавина или лишенного двойной связи фестуклавина, а также для чаноклави-на-I с раскрытым D-циклом, значения ИК
50 составляли
10 – 100 нг/мл. Изофумигаклавин А, фумигаклавин Б и эпоксиагроклавин-I, содержащие второй замести-тель при С
9, узнавались хуже (ИК50 соответствовали
диапазону от 100 до 1000 нг/мл). Для димеров эпокси-агроклавина-I, агроклавина-I и эпоксиагроклавина-I, а также для аурантиоклавина, мелеагрина и рокефорти-на, имеющих иной характер замещения в этом кольце, значения ИК
50 превышали 1000 нг/мл.
Высокая специфичность антител к представителям
двух основных типов классических эргоалкалоидов, а также аналогичных им по строению клавиновых ал-калоидов, открывает перспективу их использования в аналитических тест-системах. Ранее описанные анти-тела к эрготамину, конъюгированному с альбумином в реакции Манниха, были реактивными в отношении его аналогов, но у большинства других эргоалкалои-дов сро
дство к ним не превышало 1 % (Shelby, kelley,
1990). Для моноклональных антител, индуцирован-ных на гемисукцинат эргоновина, ингибирование свя-зывания веществами с неизмененным циклическим фрагментом эрголина, в том числе и пептидными эр-гоалкалоидами, происходило при концентрациях на 4
– 6 порядков больших, чем у гаптена (Shelby, kelley,
1991).эРГОАЛКАЛОИДЫ: ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ
Буркин А.А., Кононенко Г.П.
ГНУ в
НИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии РАСХН,
Москва
ОЦЕНКА АДСОРБЦИОННЫХ СВОЙСТВ эНТЕРОСОРБЕНТОВ IN
vITRO В ОТНОШЕНИИ МИКОТОКСИНА ЗЕАР АЛЕНОН
Валиуллин Л.Р., Семёнов Э.И.
ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной
безопасности животных»,
казань
эксперты ФАО считают, что 25 % урожая зерновых
культур ежегодно загрязняются микотоксинами. Токси-генные грибы наносят существенный вред сельскому хозяйству, равно так и здоровью населения (Муно Ф. 2002). Продуцируемые ими микотоксины являются на-иболее опасными контаминантами кормов и пищевых продуктов в естественных условиях они отличаются высокой токсичностью, а многие из них обладают му-тагенными, тератогенными, канцерогенными и имму-носупрессивными свойствами. Часто корма и другие сельскохозяйственные продукты загрязняются мико-токсинами продуцентами, которых являются, грибы рода f
usarium из них опасность представляет зеара-
ленон обладающий эстрогенными свойствами, нару-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 246
шающий функции воспроизводства. Взаимодействие
микотоксина зеараленона связанно с эстрадиолсвязы-вающими рецепторами в клетках-мишенях, установле-но его эстрогенные и тератогенные свойства, а также антибиотическое действие (Крюков, В.С. 1992). В зер-новых как фактор явившейся причиной гиперэстроге-неза у свиней, выявили зеараленон в концентрации 0, 15–4мг/кг. Наряду с зеараленоном корма одновремен-но могут содержать и трихотеценовые микотоксины, такие как дезоксиниваленол и Т-2 токсин (Mirocha C.J.1978). Интерес представляет поиск сорбентов, об-ладающих наибольшей адсорбционной способностью к данному микотоксину.
В опыт
ах использовали сорбенты: «Зоокарб» – уг-
леродный энтеросорбент, разработанный в научно-техническом учреждении «Конструкторско-техноло-гический институт технического углерода» СО Р АН, бентонит Биклянского месторождения, прокалённый при 1000
°С, бентонит Тарн-Варского месторождения
Республики Татарстан, бентонит Биклянского мес-торождения Республики Татарстан, сырой, не обра-бот
анный, «Фитосорб» – сорбент производство ФГУ
«ФЦТРБ» и ООО Маркорм, Цеолит Майнского мес-
торождения Ульяновской области. Для эксперимен-та микотоксины были синтезированы в ФГУ ФЦТРБ (ВНИВИ) по физико-химическим параметрам и ток-сическим свойствам не отличающиеся от существую-щих стандартов, в качестве продуцента микотоксинов использ
овали f. sporotrichiella 2м15, предоставленный
Котиком А.Н.. В основу определения адсорбционной способности in vitro, положили методику, описанную Крюковым В.С., Котиком А.Н. и соавт (1992) с изме-нениями, учитывающими специфику индикации мико-ток
синов. В пробирки с содержанием 5 мл водно – со-
левого раствора вносили 50 мкл водно–ацетонового раствора токсина с концентрацией 1 мкг/мкл и ис-следуемый сорбент в количестве 50 мг (соотношение 1:1000), контролем служила пробирка без добавления сорбента. Опыт проводили трехкратно.
При ув
еличении температуры среды с 20–21 °С
до 38–39 °С рН 2 (условия приближенные к желудоч-но–кишечному тракту), значительно увеличили ад-сорбцию т
оксина от 40 до 70 % такие сорбенты, как
фитосорб, бентонит Биклянского месторождения Рес-публики Татарстан, не обработанный. В то же время адсорбционная способность бентонита прокаленного оставалось низкой, вероятно прокаливание снижает адсорбционные свойства к данному микотоксину. Сле-довательно, такие сорбенты, как фитосорб, бентонит Биклянского месторождения Республики Татарстан, не прокаленный наиболее перспективные для сорбции зеараленона.
ПРОДУЦЕНТЫ ЦИТРИНИНА: ОПЫТ ИЗУЧЕНИЯ
МОНОКОНИДИАЛЬНЫХ КУ ЛЬТУР
Васильев Д.А.
ГНУ вНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии РАСХН,
Москва
В связи с появившимися в последние годы сведе-
ниями о частой встречаемости цитринина в продо-во
льствии и в кормах (v rabcheva et al., 2000; Ahamad,
vairamuthu, 2000; Meister, 2003) во многих странах
мира активизировались попытки поиска продуцентов этого микотоксина. Среди способных к его биосин-тезу грибов рода Penicillium в литературе последних
лет наиболее часто упоминается вид P .citrinum, реже –
P
.viridicatum, P .verrucosum, P .expansum, а также P .scirpi
.В данной работе в качестве объекта исследования ис-пользованы продуцирующие цитринин изоляты Peni-
cillium spp., выделенные из семян гороха и отнесенные
к секции asymmetrica
подсекции Fasciculata (Василь-
ев, Пирязева, 2007).
Моноконидиальные культуры получали методом
высева на поверхность агара Чапека-Докса несколь-ких капель разбавленной взвеси, содержащих не более одной конидии в единице объема. Для изучения их токсинообразующей способности во флаконы вмести-мостью 10 см3, содержащие по 1 см3 суслового ага-ра, вно
сили инокулюм 7 – 12 сут культур и проводили
культивирование в течение 7 сут в темноте при 21 °С. Затем в каждый флакон добавляли по 1 мл смеси ацето-нитрила и воды в объемном соотношении 6:1, плотно закрывали и выдерживали в течение 16 ч с двукратным встряхиванием в начале и в конце экстракции. Полу-ченные раств
оры анализировали методом ТСХ – флу-
ориметрии (силуфол, хлороформ-метанол, 7:3; Camag TLC Scanner II, л возб. 320 нм) с диапазоном измере-ний цитринина от 0,03 до 0,3 мкг.
В экстрактах культур, выделенных из самого слабо
образующего изолята (№ 45/2), цитринин не был об-наружен при чувствительности определения 3 мкг/мл. Моноконидиальные культуры из остальных 6-ти изоля-тов сохраняли высокую продуцирующую способность с уровнями накопления токсина от 23 до 108 мкг/мл. Известные продуценты P .citrinum, выделенные из се-
мян горчицы, образовывали в сходных условиях коли-честв
а 1 – 3 мкг/мл (Ahmad, Sinha, 2002).
Изменчивость интенсивности токсинообразования
(∆, мкг/кг) у моноконидиальных культур из разных изо-ля
тов оказалась неодинаковой – от 9 до 76 мкг/кг. Наибо-
лее перспективные из них, продуцирующие наибольшие количества цитринина, размещены в исследовательской ко
ллекции культур ВНИИВСГ э и будут использованы
для уточнения видовой принадлежности.
Микотоксикология 247
Во ВНИИ ПБ и ВП работа по изучению микро-
скопических мицелиальных грибов на зерне ячменя и
солода проводится с 1990г. Качественный и количест-венный состав грибной микробиоты зерна (наружной и внутренней) определяют методами, рекомендован-ными Европейской Пивоваренной Конвенцией (ANA-LYTICA-MICROBIOLOGICA-EBC, 1981; 2001). Со-держание микотоксинов, предусмотренных СанПиН 2.3.2.1078–01 (дезоксиниваленола, Т-2 токсина, зеара-ленона, афлатоксина), а также охратоксина А опреде-ляют методом иммуноферментного анализа с приме-нением те
ст-систем RIDASCREEN fAST (R-Biopharm,
Germany).
Ячмень является главным сырьем пивоваренной
промышленности. Повреждение зерна ячменя микро-скопическими мицелиальными грибами, в зависимос-ти от степени поражения, может приводить к потемне-нию зерна, появлению у него так называемых «черных кончиков», приобретению затхлого, плесневелого запаха, снижению или даже полной потере прораста-емости, «перерастворению» эндосперма (осуществле-нию за счет ферментов гриба процессов, приводящих к переходу высокомолекулярных соединений крахма-листой и белковой природы в низкомолекулярные). Развитие на зерне плесневых грибов может приводить к образованию и накоплению в зерновой массе различ-ных микотоксинов, которые в большинстве своем тер-мостабильны, а потому не разрушаются в процессе ки-пячения сусла и переходят в готовое пиво, снижая его потребительские свойства. Присутствие микотоксинов в сусле выше критических значений может губительно воздействовать на пивоваренные дрожжи и тем самым затруднять или даже останавливать процесс брожения. Повреждение зерна ячменя, пшеницы и солода неко-торыми грибами, главным образом, определенными видами Fusarium, может быть причиной гашинга пива
(избыточного пенообразования в готовом пиве и фон-танирования его при откупоривании бутылки). Гашинг пива приносит максимальные материальные убытки производителю, т.к. приводит к массовому возврату пива из торговли.
Проблемы потерь при хранении и транспортиро-
вании зерна касаются пивоваров в такой же степени, как и специалистов-зерновиков в других отраслях хо-зяйства. Однако у пивоваров есть своя специфическая область, требующая особого контроля микробиологи-ческ
ого статуса зерна – это процесс соложения. Он со-
стоит из стадий замачивания зерна, его проращивания и последующей сушки солода. Первые две стадии про-ходят в температурно-влажностных условиях, чрезвы-чайно благоприятных для развития сначала бактерий и дрожжей, а затем и микроскопических мицелиальных грибов, вместе образующих специфическую микроби-оту, называемую микробиотой соложения. Стадия про-ращивания длится 5–7 суток. Зерно к этому моменту в результате предварительного замачивания достигает влажно
сти 42–48 %, температура поддерживается в
пределах до 17–18 °С при производстве светлого со-лода
и до 23–25 °С при производстве темного солода;
проводится постоянная аэрация.
Ежегодно проводили массовые анализы грибной
микробиоты образцов свежеубранного ячменя, ячменя с разными сроками хранения, образцов солода разного производства и с разными сроками хранения. Перио-дически в этих же образцах одновременно определяли содержание микотоксинов.
Установили состав грибной микробиоты здорово-
го свежеубранного зерна пивоваренного ячменя с вы-со
кими показателями прорастаемости (выше 95 %),
характерный для условий средней полосы европей-ской части России. Обычно он бывает близок к сле-ду
ющему (в % зёрен, контаминированных данным
видом гриба): полевые грибы Alternaria alternata –
80–100; Bipolaris sorokiniana – до 30; fusarium spec. –
до 50; Cladosporium herbarum – до 10; Epicoccum
purpurascens – до 20; Drechslera sp., Trichothecium
roseum, Acremoniella atra, Trichoderma sp., Nigrospora sp
haerica и др. – встречаются единично или отсутс-
тв
уют; грибы хранения виды родов penicillium,
Aspergillus, порядка Mucorales – отсутствуют или
встречаются единично.
Установили предельно допустимые уровни конта-
минации зерна ячменя и солода грибами хранения при оценке пригодности зернового сырья для переработки в пивоваренной промышленности, а также при опреде-лении возможных сроков дальнейшего хранения зер-нового сырья.
В условиях традиционного солодовенного про-
изводства с раздельными процессами замачивания ячменя, проращивания и сушки солода, осуществля-емыми в периодическом режиме, возможны случаи накопления микотоксинов в зерне солода. Так, в ходе скрининга образцов отечественного ячменя и солода на содержание микотоксинов, проводившегося в тече-ние 2001–2006гг., было обнаружено, что микотоксины вст
речаются в 17 % обследованных образцов пивова-
ренного
ячменя и в 56 % образцов солода. Таким обра-
зом, процесс соложения может значительно ухудшить санитарные показатели зернового сырья.
В современных статических солодовнях башенно-
го типа с осуществлением процессов проращивания и сушки солода в одном аппарате конструкция замочных и солодорастильных аппаратов обеспечивает удобство мойки, а также улучшение санитарно-гигиенических ГРИБНАЯ МИКРОБИОТА ЗЕРНА
ПИВОВАРЕННОГО ЯЧМЕНЯ И СОЛОДА
Волкова Т.Н.
ГУ вНИИ пивоваренной, безалкогольной
и винодельческой промышленности РАСХН,
Москва
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 248
условий солодоращения, что препятствует развитию
микроорганизмов, накоплению микробиоты соложе-ния. В работе приведен состав грибной микробиоты партий свежеотсушенного солода, выпускавшихся день за
днем (в % % зёрен, заражённых данным видом
гриба). Данные показывают, насколько сильно партии солода отличаются одна от другой по количественным показа
телям присутствующих видов. это касается
не только полевой микробиоты и грибов хранения, но также и микробиоты соложения, представленной различными видами дрожжей, Geotrichum candidum и бактериями (данные о последних не приведены). Полученный результат свидетельствует о решающей роли исходной микробиоты перерабатываемого ячме-ня в формировании микробиоты солода по сравнению с в
оздействием условий соложения. этим производс-
твенные условия башенной солодовни отличаются от условий традиционного солодовенного производства, для которого характерно количественное преоблада-ние микробиоты соложения, специфичной для каждой отдельно взятой солодовни. Теперь в проблеме санита-рии солодовенного производства на первый план вы-ходит задача контроля микробиологического статуса зерна ячменя, поступающего на солодовню.
ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА
ПРО
ДУКТОВ ЖИВОТНОВОДСТВА ПРИ СОЧЕТАННОМ
ВОЗДЕЙСТВИИ ПИРЕТРОИДА И МИКОТОКСИНА
Галяутдинова Г.Г., Егоров В.И., Папуниди Э.К., Иванов А.В.
ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной
безопасности животных»,
казань
В настоящее время проблема микотоксинов приоб-
рела глобальный характер в связи с нарушением эко-логического равновесия, на которое оказали влияние интенсивные технологии возделывания сельскохозяйс-твенных культур, а также загрязнение окружающей среды (А. Петросян, 2007). Она находится в центре внимания таких авторитетных международных орга-низаций, как Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ), Продовольственная и сельскохозяйственная ор-ганизация ООН (ФАО), Программа ООН по окружаю-щей среде (ЮНЕП), Международное агентство по ис-следованию рака (МАИР) и др. (Р.Р . Даминов, 2003).
Особую опасность в связи с широким распростра-
нением в природе и высокой токсичностью представля-ют трихотеценовые микотоксины, которые вызывают развитие у людей алиментарной токсической алейкии. этио
логическим фактором этих токсикозов наиболее
часто является Т-2 токсин (Н.И. Алимов и др., 2003).
Одним из факторов увеличивающих опасность за-
грязнённых кормов микотоксинами является возмож-ное сочетание их с пестицидами.
В последние годы все более широкое применение в
сельском хозяйстве находят инсектициды, относящие-ся к группе синтетических пиретроидов.
При сочетанном попадании данных токсикантов,
даже в дозах, не превышающих МДУ и ПДК, в корма они не только ухудшают их качество, но и представля-ют опасность для здоровья животных, а через продук-ты животноводства и для населения (М.Я. Тремасов и др., 2005). В связи, с чем назрела необходимость разра-ботки усовершенствованной системы токсикологичес-кого контроля безопасности кормов при сочетанном их загрязнении микотоксинами и пиретроидами.До настоящего времени не изучены вопросы рас-
пределения этих токсикантов в организме, сроки сохра-нения их в органах и тканях и ветеринарно-санитарная оценка мяса, полученного от отравленных животных.
При определении остаточных количеств микоток-
сина и пиретроида в органах и тканях овец, получав-ших перорально в течение месяца в пределах МДУ , Т-2 токсин был обнаружен в следовых количествах, вследствие того, что Т-2 токсин, так же как и другие микотоксины, сравнительно быстро метаболируется в организме животных.
При определении остаточного количества дециса в
органах и тканях животных установили, что концен-трация пиретроида была выше при совместном пос-туплении с Т-2 токсином. Т-2 токсин при совместном поступлении с децисом способствует более медленно-му выведению последнего из органов и тканей живот-ных.
Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса получен-
ного от животных, отравленных децисом и Т-2 ток-сином при раздельном и сочетанном их поступлении на уровне предельно-допустимой концентрации на 2 сут исследования, хотя и имели отличия от аналогич-ных показателей мяса контрольных животных, но не выходили за пределы значений допускаемых ГОСТом для свежего мяса. Однако на 10 сут хранения в мясе подопытных животных наблюдались первые признаки порчи, особенно в группе получавших совместно оба токсиканта.
Таким образом, можно отметить, что сочетанное
воздействие децисом и Т-2 токсином оказывает небла-гоприятное влияние на процессы хранения мяса, в ре-зультате которых оно теряет свою пищевую ценность.
Микотоксикология 249
Проблема незаконного оборота наркотиков и рас-
пространения, наркомании в России перестала быть
сегодня только медицинской и правоохранительной, достигнув
уровня серьезнейшей государственной про-
блемы.
Основную массу среди всех видов потребляемых
нарко
тиков составляют наркотические вещества рас-
тительного
происхождения. Причиной этого является
их доступность, обусловленная естественным произ-растанием в природной среде и возможностью куль-тивирования растений, содержащих наркотические вещ
ества.
Исследование наркотических веществ раститель-
ного происхождения является традиционной задачей судебной экспертизы.
В 1998 году был утвержден «Перечень наркотичес-
ких средств, психотропных веществ и их прекурсоров, подлежащих контролю в Российской Федерации», в котором в качестве наркотического средства указыва-ется «любая часть плодового тела гриба, содержащего псилоцин (псилоцибин)». В 2004г. издано Постановле-ние Правительства РФ № 454 «О запрещении культи-вирования на территории Российской Федерации рас-тений, содержащих наркотические вещества», в том числе «грибы (любая часть плодового тела), содержа-щие псилоцибин и (или) псилоцин».
эт
о предопределило появление в судебной экспер-
тизе задачи по отнесению неизвестного вещества к наркосодержащим с применением специальных мико-логических знаний. В настоящее время для ответа на вопрос, является
ли представленное на исследование вещество нарко-тическим средством, проводятся классификационные исследования с целью установления принадлежности объекта исследования классу, определенному законом: любая часть плодового тела гриба, содежащая псило-цибин и (или) псилоцин.
В Перечне псилоцибинсодержащие грибы опреде-
лены как наркотик независимо от вида. Установление грибной природы вещества проводится морфологи-ческими,
а содержание галлюциногенов – хроматогра-
фическими методами.
Как показало проведенное нами обобщение экс-
пертной практики, эксперты системы экспертных уч-реждений Минюста России как правило справляются с данными задачами. Однако, для более точного таксо-номического определения грибов необходимо привле-чение микологов-систематиков.
Наибольшие затруднения возникают при исследова-
нии малых количеств высушенных и сильно измельчен-ных объектов. В связи с этим актуальным представляет-ся развитие молекулярно-генетических методов с целью выяснения природы представленного вещества.
Другая важная проблема связана с легкостью вы-
деления из природы и последующего выращивания псилоцибинсодержащих грибов. Поскольку культи-вирование этих организмов запрещено на территории РФ, микологи-систематики могут привлекаться для ре-шения задач по установлению факта культивирования именно псилоцибинсодержащих грибов.ИССЛЕДОВАНИЕ ПСИЛОЦИБИНСОДЕРЖАЩИХ ГРИБОВ
ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ СУДЕБНЫХ эКСПЕРТИЗ
Градусова О.Б.
ГУ Российский федеральный центр судебной экспертизы при Минюсте России,
Москва
ШТАММЫ Penicillium roQueForTi THom ,
ВЫДЕЛЕННЫЕ ИЗ СЫРОВ РОКФОР
Григорян К.М., Саргсян М.П., Акопян Л.Л., Маргарян Н.Р.
ерев
анский государственный университет,
ереван, Армения
Виды рода пенициллиум широко используются в
сыродельной промышленности, с целью производства сыров «Рокфор», «Камамбер» и др.
Качество и безопасность сыра, в производстве ко-
торого используются плесневые грибы, во многом зависят от выбора штаммов, от их ферментативной активности, а также спектра вторичных метаболитов, которые продуцируются ими в процессе созревания сыра.
Гриб Рenicillium roqueforti Thom является проду-
центов целого ряда алколоидов и микотоксинов, об-ладающих разной степенью токсичности для живых организмов (Scott, 1980; Moreau, 1981). Согласно Фрисваду
(frisvad, Boysen, 1996) вид P . roqueforti, на
основании мофологических, физиологических и гене-тических характеристик, состоит из трех разновиднос-тей
– Р. roqueforti var. roqueforti, P . roqueforti var. car-
neum, P . roqueforti var. paneum . Основным отличием
указанных вариаций является спектр вторичных ме-таболитов, продуцируемых ими и степень их токсич-ности. При производстве сыра Рокфор рекомендуется использование разновидности Р.roqueforti var. roque-
forti. Не допускается ее загрязнение двумя другими ва-
риациями Р.roqueforti, в связи с тем, что они являются
потенциальными продуцентами патулина, пенитрема и ботриодиплоидина ( Boysen, 2000 ).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 250
Проведен микологический анализ 20 образцов
сыра Рокфор, импортируемого в Армению из Дании и
Гер
мании, а также – местного производства. Среди 40
выделенных штаммов Р . roqueforti, 12 штаммов (30 %) идентифицированы как p. roqueforti var. paneum и 3
(7.5 %) штамма – как p. roqueforti var.carneum. Изуче-
ние т
оксигенного потенциала p. roqueforti var. paneum
показало, что из 12 испытанных штаммов методом биотестирования, 5 проявили токсичные свойства. Ме-тодом хроматографического анализа в трех штаммах выявлен патулин . Использование указанных вариаций в сыроделии, в качестве заквасочных культур, может представлять риск для потребителя .
И так, правильная идентификация штаммов P .
roqueforti , используемых в процессе производства
сы
ра Рокфор – необходимое требование для предо-
твращения контаминации его токсическими метабо-литами.
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ А эРОТЕХНОГЕННОГО
ЗАГРЯЗНЕНИЯ МЕГАПОЛИСА НА НАКОПЛЕНИЕ В ВОЗДУХЕ
ПОТЕНЦИАЛЬНО-ПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
Дмитриченко О.П., Зачиняев Я.В., Зачиняева А.В.
Санкт-Петербургский государственный университет сервиса
и эконо
мики Российская военно-Медицинская академия,
Санкт-Петербург
Грибы широко распространены в природе и при оп-
ределенных условиях могут играть значительную роль в патологии человека. Преобладание в почве тех или иных видов грибов во многом зависит от зональных особенностей почв, а в условиях крупных мегаполи-сов
– от уровня её аэротехногенного загрязнения. От
него зависит состав формирующихся в почве микоби-оценозов, а, следовательно, концентрация и видовой состав микобиоты воздуха, определяющий этиологию микотических инфекций в данном регионе.
Целью нашего исследования являлось сравнитель-
ное изучения уровня загрязнения воздуха экотоксикан-тами различных районов Санкт-Петербурга и оценка его влияния на формирование микобиоты окружаю-щей среды.
Стационарные посты наблюдения за загрязнением
атмосферного воздуха Санкт-Петербурга расположены в 9 административных районах города и условно под-разделяются на городские фоновые» в жилых районах (№№ 1, 2, 6, 8, 12), «промышленные» – вблизи пред-приятий (№27) и «авто» – вблизи автомагистралей или в районах с интенсивным движением транспорта (№№ 4, 5, 7, 10). Кроме перечисленных постов, для харак-терис-тики состояния загрязнения атмосферного воз-
Район
(№ постов)СИ НП ИЗА Уровень
загрязненияОсновное
загрязняющее
веществоВидов
ой состав грибов ( %)*
Петроградский
(№1)4 7 21 9 6 6 высокий диоксид азота Aspergillus fumigatus 60 %,
A. versicolor 30 %, penicillium chrysogenum 20 %
Калининский (№4, 5, 73)6 7 44 4 14 4 -«- взвешенные вещест-
ва, диоксид азотаAspergillus fumigatus 60
%, A.flavus
40 %, A.sydowii 20 %, penicillium decumbens 10 %, Trichoderma viridae 40 %
Центральный (№ 6, 10)8 5 90 3 11 4 очень высокий диоксид азота A.flavus 80
%, Alternaria alternata
60 %, penicillium funiculosum 20 %
Василеостровский (№7)5 1 41 7 7 3 высокий -«- Aspergllus fumigatus 60
%,
penicillium aurantiogriseum 40 %, p.decumbens 20 %
Московский (№8)2 4 40 0 5 9 -«- взвешенные вещес-
тваAspergillus fumigatus 60
%,
penicillium decumbens 30 %
Фрунзенский (№2)8 9 55 6 10 6 очень высокий диоксид азота Trichoderma viridae 60
%,
Aspergllus fumigatus 60 %, penicillium funiculosum 20 %, p.brevicompactum 10 %
Красносельский (№12)2 9 40 3 8 8 высокий -«- Aspergillus restrictus 40
%, A. niger
60 %, penicillium aurantiogriseum 60 %, p decumbens 10 %
Красно-гвардейский (№27)3 2 35 4 4 7 -«- -«- Alternaria alternata
80 %, penicillium
funiculosum 10 %, p. brevicompactum 10 %
Кировский (№24)6 6 35 0 13 2 высокий взвешенные вещес-
тваAspergllus fumigatus 60
%,
Trichoderma viridae 40 %, Alternaria alternata 40 %, penicillium chrysogenum 20 %
* ( %) – частота встречаемости видов
Микотоксикология 251
духа, использовались данные постов промпедприятий
(№№ 24, 73). Оценка загрязненности атмосферного воздуха проводилась на основании индекса загряз-ненности атмосферного воздуха (ИЗА), стандартного индекс
а (СИ) и НП ( %) – наибольшая повторяемость
превышений ПДК и ИЗА.
Пробы воздуха отбирали аспирационным способом
при помощи прибора Кротова путем осаждения спор грибов на чашки Петри со средой Чапека-Докса. Объ-ём отобранного воз-духа составлял 250 л при скорости отбора 25 л/ мин.
Содержание спор грибов в воздухе административ-
ных районов СПб находилось в диапазоне от 178 до 522 КОЕ/ м
3. Характеристика уровня загрязненности атмос-
ферного воздуха административных районов СПб и ви-довой состав грибов представлены в таблице.Анализ видового состава выявленной микобиоты
показал, что в воздухе администра-тивных районов СПб присутствуют патогенные и условно-патогенные виды грибов, вызывающие различного рода микоти-ческие заболевания как эндогенного, так и экзоген-ного характера. К ним относятся в первую очередь возбудители оппортунисти-ческих микозов из родов asper
gillus (aspergillus fumigatus, a.flavus, a. niger, a.
versicolor), Penicillium (Penicillium chrysogenum , Peni-
cillium aurantiogriseum. Определенными патогенными
свойствами обладают также alternaria alternata, Trich-
oderma viridae.
Доминирование этих грибов в воздухе админист-
ративных районов СПб может создать опасную эпи-демиологическую обстановку в условиях мегаполи-са.
ОДНОВРЕМЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКОТОКСИНОВ ЗЕАР АЛЕНОНА
И ОХР АТОКСИНА А МЕТОДОМ ПОЛЯРИЗАЦИОННОГО
ФЛЮОРЕСЦЕНТНОГО ИММУНОАНАЛИЗА
Еремин С.А.1, Бондаренко А.П.1, Белоглазова Н.В.1, Колосова А.Ю.1,
marieke
lobeau2, Sarah de Saeger2
1 Химический факультет, Московский государственный университет
им. М.в
. ломоносова,
Москва
2 Фармацевтический факультет, Университет г. Гент,
Бельгия
Последние десятилетия прошедшего века были от-
мечены общим ухудшением микотоксикологической ситуации в мире. В группе токсикантов природного происхождения особое место принадлежит продуктам метабо
лизма микроскопических грибов – микотокси-
нам. Их основным продуцентом являются плесневые грибы ро
да fusarium. Грибные заболевания зерновых
культур все чаще стали принимать обширный характер. Микотоксины поражают своим разнообразием, одна-ко изучение географических популяций токсигенных видов fusarium
показало, что основное место в конта-
минации зерна колосовых культур принадлежит зеара-ленону. Метаболитом микроскопических плесневых грибов ро
дов penicillium (p . verrucosum) и Aspergillius
(A. ochraceus) является Охратоксин А. этот микоток-
син также как и зеараленон является загрязнителем зерновых продуктов, и представляет большую опас-ность для здоровья человека.
В настоящее время установлены предельно до-
пустимые нормы содержания микотоксинов различ-ных продуктах (на уровне 10–100 нг/мл или мкг/кг), а также разработаны методы их обнаружения и ко-личественной оценки. Следует особо отметить чувс-твительные и высокоспецифичные иммунные методы анализа. В настоящее время они вытесняют разрабо-танные ранее дорогостоящие, длительные и техни-че
ски сложные хроматографические методы. этих
недостатков лишен поляризационный метод анализа (ПФИА), основанный на конкуренции определяемого вещества и вещества, меченого флюоресцентной мет-кой (трейсера), за центры связывания специфических антител. В отсутствии определяемого антигена в об-разце поляризация флюоресценции имеет максималь-ное значение и снижается при повышении концент-рации антигена.
Поэтому целью нашей задачи было поставлено
разработать чувствительную, специфичную и экспрес-сную методику определения зеараленона и охратокси-на А. В ходе работы были синтезированы и очищены методом ТСХ флуоресцеин-меченные трейсеры как на зеараленон, так и на охратоксин А. Для изучения влияния структуры трейсера на чувствительность им-муноанализа было исследовано связывание трейсеров со специфическими моноклональными антителами микотоксины. Для опримальных пар антитело-трейсер были построены градуировочные графики для коли-чественного определения каждого из микотоксинов. Время определения методом ПФИА составляет не-сколько секунд, а с пробоподготовкой несколько ми-нут. Более того, методика ПФИА позволяет проводить одновременное, параллельное определение несколь-ких микотоксинов в пробе.
Работа выполнена при финансовой поддержке
гранта РФФИ и Фландрии 05–03–34828-МФ_а «Стра-тегия экспрессной детекции микотоксинов в пищевых продуктах».
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 252
Микотоксикозы, вызванные плесневыми грибами,
занимают одно из лидирующих положений среди мик-
робных интоксикаций. Из множества отравлений про-дуктами метаболизма грибов, доминируют заболева-ния, вызванные грибами рода asper
gillus. В прошлом
веке регистрировались случаи острой интоксикации людей афлатоксинами. Так в 1982 году в Кении (Афри-ка) было зафиксировано массовое отравление людей, употребляющих в пищу продукты питания, обсеме-ненные грибами asper
gillus fumigatus. Из 20 офици-
ально зафиксированных случаев острого афлотокси-коза 12 явились летальными. Исследование показало, что в продуктах питания, употребляемых больными, было обнаружено высокое содержание микотоксинов, в частности афлатоксин B
1 присутствовал в количест-
ве
3,2 – 12 мг/кг (для афлатоксина B1 ЛД50 перорально
для макак составляет 7,8 мг/кг). В последнее десяти-летие отравления афлатоксиноми носят хронический характер. Всё вышеперечисленное доказывает акту-альность разработки новых подходов своевременного обнаружения плесневых грибов в окружающей среде, с целью усиления эпидемического надзора и предуп-реждения возникновения пищевых отравлений.
Целью данной работы явилась разработка инно-
вационного подхода к определению афлатоксина па-тогенных грибов рода asper
gillus в окружающей сре-
де и продуктах питания. Задачей исследования стала оценка фотоколориметрического метода определения афлатоксина. Новизна работы заключается в том, что диагностика микотоксинов грибов рода asper
gillus в
настоящее время осуществляется методом жидкост-ной хроматографии, что является более трудоемким и менее коммерчески выгодным методом, по сравнению с фотоколориметрией.
В основу работы легла идея, заключающаяся в
том, что патогенные и условнопатогенные грибы рода asper
gillus в процессе жизнедеятельности выраба-
тывают токсические метаболиты (микотоксины), на которые можно поставить качественные химические реакции.В своем исследовании мы использовали ГСО 7936–
2001 раствор афлатоксина B
1 (раствор (6aR-cis)(2, 3,
6a, 9a)тетрагидро-4-метоксициклопента[с]фуро[2, 3-h][1]бензопиран-1, 11-диона) в смеси бензола и аце-тонитрила (B
1–10). Так как микотоксины относятся к
вредным веществам 2 и 3 класса опасности, нами были соблюдены общие требования безопасности согласно ГОСТ 12.1.007-76.
Изучение химической формулы афлатоксинов
позволило отнести их к производным кумаринового (2-хроменонового) ряда. Постановка качественной химической реакции на афлатоксин велась по схеме: 1. реакция афлатоксина со щелочью, в результате чего лактонный компонент кумаринового ядра афлаток-сина раскрывается с образованием карбоксильной и гидроксильной (фенольной) групп; 2. качественная реакция на образовавшийся фенольный компонент кумаринового ядра афлатоксина с солью железа (III), в результате чего образуется комплексное соединение афлатоксинолята железа (III). В результате реакции цвет раствора с бесцветного на первом этапе меняется на желтый, а на втором на оранжево-желтый, что диа-гностируется как визуально органолептически, так и фотоколориметрически.
Фотоколориметрическое исследование проводи-
лось при длине волны 540 нм, относительно контро-ля
– дистиллированной воды (оптическая плотность
D = 0,000). Данные показывают, что при внесении афлатоксина (2,5 мкг/мл) D равнялась 0,015. При до-бавлении к раствору афлатоксина щелочи D составило 0,027, а при дальнейшем добавлении хлорида железа (III) D равнялась 0,121.
Таким образом, разработанная методика опреде-
ления афлатоксина в окружающей среде и продуктах питания позволит усилить превентивный эпидемичес-кий надзор за заболеваниями и отравлениями, вызван-ными патогенными грибами рода asper
gillus , а также
поможет создать дифференциально-диагностическую среду для определения афлатоксинпродуцирующих видов грибов.ИННОВАЦИОННАЯ ДИАГНОСТИКА АФЛАТОКСИНА b1
ГРИБОВ РОДА aSPerGilluS В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ
Жернов Ю.В.
ГоУ вПо «Самарский государственный медицинский университет Росздрава»
ФГУз
«Центр гигиены и эпидемиологии в Самарской области»,
Самара
СР АВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА СИНТЕЗА ВЕРРУКАРИНОВ И РОРИДИНОВ
ШТАММАМИ dendrodocH ium , mY roTHecium И ST acHY boTr YS
Зайченко А.М.
Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАН Украины,
киев
Сведения относительно токсигенного потенциала
грибов, образующих макроциклические трихотецены (МЦТЦ), весьма ограничены и касаются преимущест-венно отдельных штаммов.
Микотоксикология 253
В сравнительном разрезе изучали способность к
синтезу МЦТЦ у 49 штаммов грибов, относящихся к
рр. dendr odochium, myr othecium и Stachybotrys, при
культивировании на зерновом субстрате (просо). Со-держание МЦТЦ определяли при помощи метода вы-сокоэффективной жидкостной хроматографии.
Показано, что все исследуемые представители
d.
toxicum (27 штаммов) образуют веррукарины А и J
и роридины А, Е и Н со значительными вариациями в их количественном содержании. В качестве основного метаболита чаще других образуются веррукарин А (11 штаммов)
и роридин Н (9 штаммов), реже – веррука-
рин J (6 штаммов). Большинство изученных штаммов d.
toxicum образует МЦТЦ в количествах 100 мг/кг и
более,
а отдельные штаммы – в 2–3 раза больше. Вы-
явлены активные продуценты отдельных МЦТЦ, об-разующие
145 – 255 мг/кг веррукарина А, 107 – 138
мг/кг – веррукарина J и 160 – 230 мг/кг роридина Н. В существенно меньших количествах синтезируются роридины А и Е. Исследуемые штаммы d.
toxicum, за
немногим исключением, образуют ряд неидентифици-рованных компонентов МЦТЦ с временем удержания на колонке 2, , 4, 9 и 8 минут.
Среди изученных представителей myr
othecium
(m. verrucaria – 8 штаммов, m. roridum – 4 штамма и
m.
cinctum – 4 штамма) процент высокоактивных про-
дуцентов МЦТЦ был существенно выше, и не было выявлено штаммов, у которых способность к синтезу любого из исследуемых микотоксинов отсутствовала. Так, 5 из 8 штаммов m.
verrucaria продуцировали от
102 до 238 мг/кг микотоксинов, хотя общая токсино-образующая активность этого вида, по сравнению с d.
toxicum, была ниже. В качестве основного метабо-
лита среди m. verrucaria чаще образуется веррукарин
А (4
штамма), реже – роридин Н и веррукарин J (по 2
штамма). Роридины А и Е синтезировались в незначи-тельных количествах.
Только один из штаммов m.
roridum обладал высо-
ким суммарным содержанием МЦТЦ и синтезировал свыше 180 мг/кг микотоксинов.
Среднее суммарное содержание МЦТЦ у штаммов
m.
cinctum составляло всего 56,4 мг/кг.
Исследуемые штаммы Stachybotrys, наряду с ро-
ридином Е и веррукарином J, обладали способнос-тью к синтезу роридина Н, которая установлена нами впервые, и очень слабо выраженной способностью к синтезу веррукарина А и роридина А. Однако, эта способность была характерной лишь для отдельных штаммов.
Результаты исследований дают основание ут-
верждать, что способность к синтезу веррукарино и роридинов является общим свойством исследуемых грибов, которое определяет их высокий токсигенный потенциал.
ИЗУЧЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ МИКОТОКСИНОВ (ДЕЗОКСИНИВАЛЕНОЛА,
ЗЕАР АЛЕНОНА, ФУМОНИЗИНОВ В1 И В2, ОХР АТОКСИНА А)
В ПРО
ДОВОЛЬСТВЕННОМ ЗЕРНЕ УРОЖАЕВ 2006–2007 Г ОДОВ
Захарова Л.П., Седова И.Б., Аксёнов И.В.
ГУ НИИ питания РАМН,
Москва
К приоритетным контаминантам продовольствен-
ного сырья и пищевых продуктов, представляющих реальную опасность для здоровья человека, относятся микотоксины. Среди них наибольшей распространен-ностью отличаются фузариотоксины (дезоксинивале-нол (ДОН, вомитоксин), зеараленон (ЗЛ), фумонизины В1 и В2 (ФВ1 и ФВ2), а также охратоксин А (ОА). Про-дуцентами фузариотоксинов являются различные виды грибов ро
да fusarium – f. graminearum, f. сulmorum,
f. moniliforme. Охратоксин А продуцируется широко
распространенными грибами Aspergillus ochracerus и penicillum
viridicatum. Данные микотоксины выяв-
ляются в качестве загрязнителей злаковых культур (в первую очередь пшеницы) и кукурузы. Международ-ное агентство по изучению рака классифицирует ДОН и ЗЛ, как соединения, потенциально опасные для здо-ровья человека (группа 3), а ФВ1, ФВ2 и охратоксин А, как соединения, возможно канцерогенные для челове-ка (группа 2В).
Целью исследования явилось изучение частоты и
уровней загрязнения микотоксинами продовольствен-ного зерна урожая 2006–2007 гг.В 239 пробах зерна пшеницы, кукурузы, ячменя и
овса полученного из Центрального, Дальневосточно-го и Южного Федерального округов РФ было изучено содержание дезоксиниваленола (ДОН) и зеараленона (ЗЛ)
с использованием метода Вэ ЖХ с УФ – (для ДОН)
и флуориметрическим (для ЗЛ) детектированием.
ДОН был
обнаружен в 15 % из всех исследован-
ных проб продовольственного зерна, исключительно в пшенице. Частота обнаружения ДОН в зерне пшени-цы по годам практически не отличалась и составила в уро
жае 2006 года 13 %, а в 2007 году 20 %, при этом
в количествах, не превышающем предельно-допусти-мую концент
рацию (ПДК) – 0,7 мг/кг.
В пшенице урожаев этих лет в 8 % случаев наряду
с ДОН выявляли второй фузариотоксин – зеараленон,
частота обнаружения которого составила 7 % в 2006
г и 9 % в 2007 г. в, количествах ниже ПДК – 1 мг/кг.
Частота обнаружения ЗЛ в продовольственном зерне ку
курузы составила 27 % от числа исследованных
партий.
Ни в одном из исследованных партий ячменя, ржи
и овса ДОН и ЗЛ обнаружены не были.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 254
Изучение содержания ФВ1 и ФВ2 в зерне кукурузы
проводили методом обращено-фазовой высокоэффек-
тивной жидкостной хроматографии с флуоресцентным детектированием и использованием твердофазной экс-тракции. При анализе 11 проб продовольственного зерна к
укурузы ФВ1 был обнаружен в 64 % случаев в
концентрации от 0,01 до 0,87 мг/кг. Содержание ФВ2 была зна
чительно ниже и составило 36 % проб иссле-
дованной кукурузы, при этом содержание его варьиро-вало от 0,16 до 0,24 мг/кг.
Исследования содержания ОА осуществляли с ис-
польз
ованием метода Вэ ЖХ с флуориметрическим детектированием. Всего исследовано 124 образца зер-на, в том числе пшеницы, ржи, ячменя, риса получен-ного из Центрального и Южных Федеральных округов РФ.
ОА был выявлен в 28 % всех исследованных проб,
при этом содержание токсина в контаминированных пробах находилось в диапазоне от 0,11 до 489,66 мкг/кг. Наиболее часто ОА обнаруживали в зерне ячменя (64
%) и риса (27 %), реже в зерне пшеницы (10 %).
Результаты проведенных исследований подтверж-
дают существование постоянной вероятности загряз-нения продовольственного зерна одним или более ми-котоксином.
К ВОПРОСУ О НАКОПЛЕНИИ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ, Р АДИОНУКЛИДОВ
И МЫШЬЯКА ПЛОДОВЫМИ ТЕЛАМИ БАЗИДИАЛЬНЫХ МАКРОМИЦЕТОВ
Иванов А.И., Костычев А.А., Скобанев А.В., Плотников М.А.
ФГоУ в
По «Пензенская ГСХА», РЦГЭкиМ по Пензенской области,
Пенза
Важнейшей особенностью биологии базидиальных
макромицетов является их способность накапливать некоторые химические элементы в концентрациях значительно более высоких, чем в окружающей среде. Поэтому в биогеохимических циклах широкого круга химических элементов, в частности металлов (железо, кобальт, марганец, никель, свинец, цинк, хром), радио-нуклидов и мышьяка они, несомненно, играют боль-шую роль.
В ходе исследований было установлено, что бази-
диальные макромицеты проявляют видовую специ-фичность в аккумуляции плодовыми телами изучен-ных элементов.
Представители ксилотрофных базидиомицетов
в сравнении с макромицетами других трофических групп интенсивнее аккумулируют железо марганец и хром. Так, среднее содержание хрома в плодовых те-лах грибов-ксилотрофов составила 1,15 мг/кг.
Наиболее выраженная тенденция к накоплению ко-
бальта отмечена для представителей гумусовых сап-ротрофов. Средняя концентрация данного элемента в плодовых телах этой группы составила 2,69 мг/кг. В меньшей степени склонность к накоплению кобальта проявили представители ксилотрофных макромицетов.
Содержание никеля в базидиомах представителей
различных трофических групп варьирует не столь зна-чительно. Однако, некоторые виды базидиальных мак-ромицетов проявляют выраженную способность к акку-муляции данного элемента. Так, концентрация никеля в плодовых телах микоризообразующего вида cor
tinarius
triumphans составила 7,24 мг/кг, на фоне среднего зна-
че
ния для данной трофической группы – 2,96 мг/кг.
Гумусовые сапротрофы сильно выделяются по
способности к накоплению цинка среди остальных трофических групп. Так, средняя концентрация этого элемента в базидиомах представителей данной трофи-ческой группы составила 120,39 мг/кг, тогда как для ксилотрофных базидиомицетов эта величина составила 63,74 мг/кг. Содержание свинца, в сравнении с други-ми элементами, в базидиомах изучаемых видов грибов значительно варьирует. Максимальная способность к накоплению данного элемента отмечена для предста-вителей гумусовых и подстилочных сапротрофов. Так содержание свинца в базидиомах calvatia
utriformis и
lycoperdon
perlatum составило 17,54 и 17,00 мг/кг со-
отв
етственно, при среднем – 2,91 мг/кг.
Содержание мышьяка в базидиомах изучаемых
видов грибов, как и свинца, сильно варьирует. Видом, накапливающим мышьяк в экстремальных концент-рациях является гриб-ксилотроф Thelephora terrestris,
среднее содержание этого элемента в его плодовых те-лах составило 592,62 мг/кг. Кроме того, среди предста-вителей других трофических групп также были най-дены виды-концентраторы мышьяка. Так, содержание этого элемента в базидиомах сапротрофов lepista
nuda
и leucopaxillus giganteus составило 36,17 и 42,85 мг/кг
соотв
етственно, при средней – 13,83 мг/кг. Тогда как
среди представителей микоризообразующих грибов видов-накопителей обнаружено не было.
Грибы-ксилотрофы (armellaria
mellea и Pleurotus
ostreatus) накапливают цезий-137 (Cs-137) и амери-ций-241 (Am-241) в значительно меньшей степени, чем микроризообразующие, среди которых наиболь-шим содержанием Cs-137 и Am-241 характеризовались образцы Paxillus involutus, xer
ocomus badius, russula
adusta
и Tricholoma flavovirens . Наименьшими пока-
зателями активности по обоим элементам характери-зовались boletus
erythropus, boletus impolitus, russula
delica
и russula xerampelina; по Cs-137 – leccinum
scabrum, по Am-241 boletus edulis .
Опре
деленное влияние на накопление токсических
элементов и радионуклидов оказывает местообитание. Наибольшие значения активности радионуклидов и содержаний мышьяка отмечались в грибах, собранных на с
фагновых болотах, наименьшие – в лесах, расту-
щих на карбонатных почвах.
Микотоксикология 255
Для здоровья человека наиболее опасным из мико-
токсинов считают афлатокcины. Афлатоксины продук-
ты жизнедеятельности плесневого гриба Aspergillus flavus, поражающего кукурузу, другие виды зерна и семена масличных культур. Сущность биологического действия афлатоксинов на организм заключается в по-давлении таких жизненно важных функций, как син-тез белка и нуклеиновых кислот, нарушения синтеза липидов. Афлатоксины действуют непосредственно на оболочки клеток и мембраны различных цитоплаз-матических включений, обладают выраженным му-тагенным, тератогенным эффектом, являются самым сильнодействующим из числа известных гепатоканце-рогенов.
При потреблении пораженной афлатоксином пищи
интоксикация ассоциируется с синдромом Рейа или ос-пой, которая поражает детей. Смертность при этом мо-же
т достигать 80 %. Некоторые исследователи связывают
гепатит В с влиянием афлатоксина, предположительно изменяющим генетическую структуру ДНК, в результате чего вирус гепатита поражает клетку. Основным источ-ником опасных для человека микотоксинов является ку-куруза, пшеница, рис, арахис и другие, преимуществен-но масленичные культуры. Микотоксины могут также переходить в продукты животного происхождения.
Изучение условий, способствующих или препятс-
твующих росту и токсинообразованию плесневых гри-бов, представляет исключительно важную проблему как для здравоохранения так и для народного хозяйс-тва.
Для снижения уровня микотоксинов, содержащихся
в кормах в опасных количествах, проводят их обезвре-живание. В настоящее время методы обезвреживания подразделяются на физические, химические, биологи-ческие и комбинированные. Большинство физических и химических методов детоксикации дорогостоящие, требуют определенных производственных затрат, вли-яют на показатели качества кормов и не значительно снижают количество микотоксинов.
Интерес представляют биологические методы (об-
работка кормов живыми бактериальными культурами) среди которых интерес представляют аэробные споро-образующие бактерии рода Bacillus.
Нами проведено изучение обезвреживающего дейс-
твия микроорганизмов рода Bacillus и актиномицет в отношение афлатоксина В
1 на искусственно контамини-
рованном субстрате. Исследуемые штаммы микроорга-низмов не патогенны для животных. Для контаминиро-вания кормов (концентраты) использовали токсигенный штамм Aspergillus flavus, из коллекции ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Увлажненный субстрат контаминировали двухнедельной культурой гриба-продуцента афлатокси-на В
1 и инкубировали в термостате при температуре 26–
27 °С в течение 10 суток. В период ферментации 2 раза
в день колбы с субстратом интенсивно встряхивали и автоклавировали при 1 атм. в течение 30 мин, помещали в бумажные пакеты, сушили при температуре 40–45
°С
и размалывали на лабораторной мельнице.
Определение токсина проводили методом двухмер-
но
й тонкослойной хроматографии и В эЖХ. Содержание
микотоксина в субстрате составляло – 0,5 ± 0,05 мг/кг .
Корма, загрязненные микотоксинами, обрабатыва-
ли суточной культурой Bacillus subtilis –2000 предна-значенной для обработки концентрированных кормов с целью повышения усвояемости питательных веществ и расщепления антипитательных веществ.
Для этого из суточной культуры делали смыв
физраствором в объеме 1 мл и заливали контамини-рованный корм, полученную смесь перемешивали и оставляли на 24 часа. Контролем служил корм не под-вергающийся обработкe.
В результате проведенных исследований установ-
лено, что используемые штаммы микроорганизмов об-ладали выраженной детоксицирующей активностью. В те
чение 24 ч происходило обезвреживание до 60 %
афлатоксина В1, концентрация микотоксина в конт-рольной пробе оставалась без изменений.
Таким образом, исследуемые штаммы микроор-
ганизмов обладают детоксицирующей активностью по отношению к афлатоксину В
1, что является перс-
пективным для разработки новых биопрепаратов для обезвреживания кормов от микотоксинов.ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МИКРООРГ АНИЗМОВ ДЛЯ ДЕТОКСИКАЦИИ АФЛАТОКСИНА В1
Иванов Е.Н., Матросова Л.Е., Иванов А.В.
ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных»,
казань
ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКОТОКСИНОВ В ЗЕРНЕ МЕТОДОМ Вэ ЖХ-МС/МС
Комаров А.А., Крапивкин Б.А., Вылегжанина А.В., Панин А.Н.
вс
ероссийский государственный центр качества
и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов,
Москва
Был разработан мульти-метод определения мико-
ток
синов в зерне с помощью Вэ ЖХ-МС/МС. Опреде-
ляемые микотоксины включали А- и В-трихотецены, зеараленон, фумонизины, охратоксины, афлатоксины. ВэЖХ-МС/МС
анализ выполнялся на хроматомасс-
спектрометре «Quattro Micro» с двухстадийным квад-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 256
рупольным анализатором. Масс-спектрометрические
измерения проводились в диапазоне 50–500 m/z. Усло-вия тандемной масс-спектрометрии для определения микотоксинов оптимизировались с использованием программного обеспечения MassLynx 4.1. Детектиро-вание аналитов выполнялось в режиме мониторинга нескольких реакций (МНР), с использованием ио-низации электрораспылением с регистрацией поло-жительных ионов. Разделение проводили на колонке pursuit
C18, 150 ммЧ2 мм, 3 мкм (v arian, США), тем-
перат
ура термостата колонки 40 °С. Оптимизировали
условия хроматографического разделения аналитов, использовали следующую программу градиентного элюиров
ания: 0.0–2.0 мин 70 % А + 30 % В; 2.0–11.0
мин 100 % В; 11.0–14.0 мин 100 % В; 14.0–14.1 мин 70 % А + 30 % В; 14.1–20.0 мин 70 % А + 30 % В. Фаза А – деионизованная вода + муравьиная кислота 0.1 % + 1 мМ формиата аммония; фаза В – метанол 100 % + муравьиная кислота 0.1 % + 1 мМ формиата аммония. Предел определения для группы А- и В-трихотеценов составил от 2 мкг/кг для Т2-токсина до 70 мкг/кг для ниваленола; предел определения зеараленона соста-вил 4 мкг/кг; предел определения фумонизинов В1 и В2 составил 16 мкг/кг; для охратоксина А предел оп-ределения
составил 0,2 мкг/кг, для охратоксина В – 1
мкг/кг; для группы афлатоксинов от 0,6 мкг/кг для аф-латоксина В2 до 2 мкг/кг для афлатоксина В1.
Разработку условий подготовки проб проводили на
следующих матрицах: пшеница, кукуруза, гречиха и яч-ме
нь. экстракцию осуществляли ацетонитрилом, было
показано, что предпочтительно проводить этап очист-ки образца гексаном. Дополнительная очистка методом твердофазной экстракции не давала значительных пре-им
уществ при определении аналитов методом В эЖХ-
МС/МС, таким образом, исключение этой стадии поз-волило существенно сократить время подготовки проб.
эРГОАЛКАЛОИДЫ: ПРОБЛЕМА КОНТРОЛЯ ЗЕРНОПРОДУКЦИИ
Кононенко Г.П., Буркин А.А.
ГНУ в
НИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии РАСХН,
Москва
Склероции (рожки) гриба claviceps purpurea Tull.,
который развивается на хлебных злаках, относят к категории вредной примеси в зерне из-за высокого содержания
токсичных эргоалкалоидов (эА). Как и
в других странах, обеспокоенных этой проблемой, в России в качестве основного показателя безопаснос-ти принят относительный вес склероций в средней пробе зерна, а для рассыпных комбикормов с 1958 г. используется прием, основанный на флотации частиц склероций. Ист
очниками попадания эА в зерно могут
быть также грибы родов asper gillus и Penicillium (Коз-
ловский, 1999). В данной работе впервые сообщается о результатах выборочного обследования продуктов переработки зерна (мука, хлеб) и зерновых кормов, выполненного с помощью непрямого конкурентного иммуноферментного анализа с диапазоном измерения содержания э
А от 5 до 500 мкг/кг в условиях экстра-
кции материала водным ацетонитрилом.
Для 15 образцов пшеничной муки, полученных с пе-
рерабатывающих предприятий Тверской, Вологодской, Ярославской, Липецкой, Ростовской областей и Ставро-польского края, степень загрязненности и уровни содер-жа
ния эА возрастали со снижением ее сортности. В 5
образцах муки высшего сорта эА не были обнаружены.
В трех из 7 проб муки 1 сорта количества эА состави-
ли
7 – 8 мкг/кг, из трех образцов муки 2 сорта в двух
содержалось 26 и 32 мкг/кг. Все 18 проб ржаной муки, полученных с мелькомбинатов Тверской, Вологодской, Ярославской, Курской областей и Республики Чувашия, оказались положительными в анализе и по уровням со-де
ржания эА распределялись следующим образом – 8
образцов (16 – 80 мкг/кг), 7 проб (104 – 500 мкг/кг) и 3
образца (более и гораздо более 500 мкг/кг). В хлебе, отобранном в торговой сети городов и
сел 4-х федеральных округов Европейской части Рос-сии в
2007 г., частота выявления эА составила 52,5 %
(93/177) с уровнями содержания от 5 до 456 мкг/кг су-хог
о веса. эти показатели были наибольшими в ржа-
ном
хлебе (72/91,5 – 456 мкг/кг), а в ржано-пшеничном
(17/32,12 – 281 мкг/кг) и пшеничном (4/54,5–20 мкг/кг) были менее выраженными.
В комбикормах, полученных для исследования с
животноводческих предприятий Центрального феде-ральног
о округа, степень контаминации эА состави-
ла 33,7
% (33/98), для большинства положительных
образцов уровни содержания находились в диапазоне измерений со средним значением 73,8 мкг/кг, однако в 3-х из них концентрация этих токсинов существенно превышала 500 мкг/кг.
При анализе отдельных экземпляров склероций
спорыньи, отобранных из разных партий фуражного зерна, у
большинства (в 26 из 46) эА обнаружить не
удалось. Десять склероций имели уровень содержания 264 мкг/г
(0.02 %) с крайними значениями 20 – 854
мкг/г и другие десять – 4360 мкг/г (0.44 %) с диапа-зоно
м количеств 1014 – 12440 мкг/г. Ранее канадски-
ми исследователями (Young, 1981; Young, Chen, 1982) сообщалось о различиях в суммарном содержании алк
алоидов в склероциях от 0,01 до 0,45 %. Простой
подсчет показывает, что в случае малых уровней со-держания эА
ограничительные весовые нормы по
примеси склероций 0,05–0,15 %, действующие в Рос-сии для пшеницы, ржи и ячменя продовольственного и кормового назначения, могут соответствовать за-грязненности на уровнях 150– 450 мкг/кг, а в условиях значительног
о накопления эА – уровням 2200 – 6600
Микотоксикология 257
мкг/кг. Таким образом, для обеспечения безопасности
зерна и зерновой продукции в нашей стране необхо-димо принять неотложные меры по внедрению новых аналитиче
ских методов определения эА, а также вне-
сти изменения в существующие подходы к регламен-тации этих токсинов.
ФАКТОРЫ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЕ СТЕПЕНЬ НАКОПЛЕНИЯ
НЕКОТОРЫХ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА ПЛОДОВЫМИ
ТЕЛАМИ БАЗИДИАЛЬНЫХ МАКРОМИЦЕТОВ
Костычев А.А.
ФГоУ вПо «Пензенская ГСХА»,
Пенза
РЦГЭкиМ по Пензенской области,
Пенза
Одним из важнейших вопросов экологии агарикоид-
ных и гастероидных макромицетов является изучение их отношения к различным элементам. Многие иссле-дователи отмечают, что базидиальные макромицеты ин-тенсивно накапливают тяжелые металлы, более того, к некоторым из них имеют специфическое сродство.
В результате исследований установлены факторы,
определяющие
степень накопления fe, Co, Mn, Ni, pb,
zn, Cr и As плодовыми телами базидиальных макро-мицетов. К таковым можно отнести видовую прина-длежность, трофическую принадлежность, содержа-ние изученных элементов в субстрате, синергические и антагонистические межэлементные взаимодействия, часть плодового тела, возраст плодового тела.
Исследования показали, что главным фактором,
определяющим величину биоабсорбции изученных элементов, является видовая принадлежность. Так, концентрации тяжелых металлов и мышьяка в плодо-вых телах разных видов базидиальных макромицетов, собранных в условиях одной почвенной разности, ха-рактеризующейся сходным содержанием элементов, значительно варьировали.
Исследование влияния трофической принадлеж-
ности показало, что сапротрофные макромицеты, в сравнении с микоризообразующими грибами, облада-ют большей способностью к биоабсорбции всех изуча-емых элементов, за исключением никеля, для которого различий между трофическими группами не выявлено. Так, в плодовых телах микоризообразующих грибов средние концентрации свинца и мышьяка составили 1,85 и 2,20 мг/кг, тогда как в базидиомах гумусовых сапротрофов − 11,05 и 15,03 мг/кг соответственно.
Влияние содержания элементов в субстрате на ве-
личину биоабсорбции некоторых тяжелых металлов и мышьяка достоверно было установлено в 11 случаях из 680 в паре элемент-вид (8 элементов, 85 видов). Для russula
xerampelina была установлена достоверная от-
рицательная зависимость между содержанием марган-ца в базидиомах и его концентрацией в субстрате.
В процессе исследования факторов, влияющих на
характер биоабсорбции, была установлена статисти-чески значимая корреляционная зависимость между содержанием в базидиомах некоторых элементов. По-ложительная корреляционная зависимость (синергизм) зафиксирована для 20 видов базидиальных макроми-цетов и 10 пар элементов. Отрицательная корреляци-онная зависимость (антагонизм) отмечена для 13 ви-дов базидиальных макромицетов и 13 пар элементов.
В результате исследований установлено, что для
большинств
а видов концентрация fe, Co, Mn, Ni, pb,
zn, Cr и As выше в шляпках, чем в ножках. Вероятно, это связано с тем, что в шляпках обменные процессы протекают с большей интенсивностью.
Изучение влияния возраста плодового тела на вели-
чину накопления тяжелых металлов и мышьяка пока-зало, что в молодых плодовых телах их концентрации неск
олько выше, чем в старых. это, вероятно, объясня-
ется явлением биологического разбавления изученных элементов.
Сочетание этих факторов определяет высокую ва-
риабельность элементного состава (в контексте изу-ченных элементов) плодовых дел базидиальных мак-ромицетов.
Таким образом, основными факторами, определя-
ющими величину накопления изученных тяжелых ме-таллов и мышьяка, являются видовая и трофическая принадлежность гриба, синергические и антагонисти-ческие межэлементные взаимодействия.
НОВЫЕ ДОСТИЖЕНИЯ В ИЗУЧЕНИИ МЕХАНИЗМОВ ДЕЙСТВИЯ ФУМОНИЗИНА В1
Мартынова Е.А.
ГУ НИИ питания РАМН,
Москва
Микотоксины фумонизины продуцируются мик-
роскопическими плесневыми грибами рода Fusarium
moniliforme, proliferatum, anthophilum, dlamini, na-piforme, nygamai и другими родственными видами). Среди фумонизинов группы В наиболее распростра-нен ф
умонизин В1 (fB1) (C34H59NO15, М 721), по хи-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 258
мической структуре относящийся к сфинголипидам.
Одной из внутриклеточных мишеней действия fB1
является Ко-А зависимая церамидсинтаза. Именно ингибированием этого фермента (и соответствующим повышением концентрации внутриклеточного пула предше
ственников синтеза церамида – сфинганина и
сфингозина) объясняли биологические эффекты fB1.
Однако специфическое действие fB1 на мозг живот-
ных (энцефаломаляция) и почки (нефротоксичность) не может быть объяснено только с позиций измене-ния активности Ко-А зависимой церамидсинтазы. В клетках имеется другие церамидсинтазы, не чувстви-тельные к
действию fB1. Кроме того, нашими рабо-
тами
впервые было показано, что fB1 также обладает
мембранотропным эффектом и регулирует активность сфингомиелиназы плазматической мембраны [Марты-нова и др., Биохимия, 1995]. э
тот эффект проявляется
быстрее и при меньшей концентрации fB1, чем ин-
гибирование церамидсинтазы. Также мы обнаружили влияние f
B1 на клетки иммунной системы, нарушение
синтеза ДНК в нормальных лимфоцитах и изменение экспрессии рецепторов Т-лимфоцитов, нарушение дифференцировки Т-лимфоцитов и преимущественное образование Th2 клеток, синтезирующих IL-6. Была выявлена поликлональная активация В-лимфоцитов при многократном контакте организма животных с fB1.
Исходя из имеющихся данных по иммуномоду-
лирующим
эффектам fB1 мы предположили наличие
аутоиммунной реакции в тканях в ответ на введение fB1. Це
лью данной работы было изучение реакции
тканей
мозга и почек после введения fB1. Работа про-
ве
дена на мышах линии C57Bl6, которым fB1 вводил-
ся внутрибрюшинно однократно или многократно в дозах 5 и 20 микрограмм на мышь, для которых в пре-дыдущих наших исследованиях была установлена эф-фективность в отношении клеток иммунной системы. Также использована доза 1 мкг/ мышь, которая являет-ся пограничной по некоторым эффектам фумонизина. Ткани мозга и почек мышей были фиксированы, окра-шены антителами и исследованы методом иммуногис-тохимии. Одновременно методом проточной цитомет-рии определялись изменения в субпопуляциях клеток этих органов. В результате были получены данные об эф
фектах fB1 в тканях мозга и почек, которые позво-
ляют говорить о новом взгляде на механизм действия токсина. Было установлено, что как однократное, так и мног
ократное введение fB1 мышам приводит к вы-
раженной реакции В-лимфоцитов, скоплению клеток, окрашенных антителами к Ig, в различных областях мозга, что сопровождается увеличением числа регуля-торных CD4
+CD25+ Т-лимфоцитов, локализующихся
рядом с В-клетками. Вокруг имеются зоны гибнущих клеток микроглии. При исследовании суспензии кле-ток, полученных из тканей мозга экспериментальных мышей, в гейте лимфоцитов выявлено повышение процента Th2 клеток и регуляторных Т-лимфоцитов, увеличение Ig+ клеток по сравнению с контролем, тог-да как в гейте клеток, позиционно определяемых как клетки микроглии, выявлено многократное повыше-ние уровня гибнущих в апоптозе клеток. В почках при иммуногистохимическом исследовании обнаружены регуляторные Т-лимфоциты, контактирующие с клас-терами В-лимфоцитов, инфильтрирующих канальцы и интерстиций. При окраске антителами к каспазе-3, а также антителами к другим протеазам, обнаружены скопления лимфоцитов вокруг гибнущих клеток ка-нальцев почек. Проточной цитометрией установлено нарушение соотношения субпопуляций лимфоцитов, касающееся увеличения процента цитотоксических лимфоцитов, повышения числа клеток, играющих ведущую роль в развитии аутоиммунной реакции в тканях, а также значительное повышение процента Ig-образующих клеток. Интенсивность выявленных изменений в тканях повышалась с увеличением дозы фумонизина и усиливалась при многократном введе-нии токсина. Следует отметить, что обнаружена четкая корреляция между изменениями в тканях мозга и по-чек экспериментальных животных.
выв
оды. Получены данные об аутоиммунной ре-
акции, развивающейся в тканях мозга и почек мышей после введения фумонизина В1. Повышение активнос-ти цитотоксических лимфоцитов, Th2 хелперов, син-тезирующих провоспалительные цитокины, усиление протеазной активности лимфоцитов, а также продук-ция антител В-лимфоцитами приводит к гибели клеток мозга и почек.
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МЕТАБОЛИТОВ
МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ С ПОМОЩЬЮ ПРОСТЕЙШИХ
Митина Г.В.1, Виноходов Д.О.2
1 всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений,
Санкт-Петербург
2 Санкт-Петербургский Г осударственный технологический институт
(технический университет),
Санкт-Петербург
Для разработки метода оценки безопасности новых
метаболитов, выделенных из мицелиальных грибов –
продуцентов биопрепаратов, выбраны два вида про-стейших. Определение общей токсичности проводили на культуре Paramecium caudatum по реакции хемотак-
сиса с использованием прибора «Биотестер», а также на инфузориях col
poda steinii , используемых при опреде-
лении уровня загрязненности кормов микотоксинами,
Микотоксикология 259
по реакции гибели. Изучена возможность применения
этих тестов для определения токсичности культураль-ной жидкости, экстрактов из биомассы и культуральной жидкости грибов и метаболитов, отвечающих за биоло-гическую активность. В качестве объектов исследова-ний были выбраны дейтеромицеты Stagonospora cirsii
Davis и Verticillium lecanii (zim
m.) Viegas. На основе
фитопатогенного гриба Stagonospora cirsii и его токси-
на разрабатывается биогербицид против многолетних ко
рнеотпрысковых сорняков – бодяка полевого и осота
полевого (Berestetskiy et al., 2005). На основе токсинов энтомопатогенного гриба Verticillium lecanii разрабо-
тан биопрепарат вертициллин М направленный против опасных вредителей тепличных культур: оранжерейной белокрылки и тлей (Митина, 1992; Митина и др. 2002).
Оба метода тестирования на простейших оказались
высокочувствительными, особенно к культуральной жидкости S.cirsii и токсину этого гриба, стагонолиду. Была установлена концентрация стагонолида, вызы-вающая допустимый уровень токсичности для P . cau-
datum: 8∙10
–6М. Исследуемый токсин в концентрации
4х10–4 М оказался слаботоксичным для инфузорий
c.steinii . Фосфолипидная фракция из биомассы V .
lecanii в концентрации (2–4)∙10–4М не была токсичной
для парамеций P . caudatum и слаботоксична в концент-
рации 1,25
∙10–3М для c.steinii. Использование готовой
сухой культуры c.steinii значительно сокращало время
подготовки инфузорий к тестированию по сравнению с применением P . caudatum.
На основании проведенного токсикологического
анализа сделан вывод о безопасности в отношении простейших токсинов и экстрактов мицелиальных гри-бов
– S.cirsii и V . lecanii . эти данные дополняют ранее
полученные результаты по фитотоксичности токсинов изучаемых грибов в отношении культурных растений и спектру их биологической активности.
К ПРОБЛЕМЕ ПРОФИЛАКТИКИ
СМЕШАННОГО Т-2 И АФЛАТОКСИКОЗА
Мишина Н.Н., Семенов Э.И., Тремасов М.Я.
ФГУ «Федеральный центр токсикологической
и радиационной безопасности животных»,
казань
Проблема охраны здоровья сельскохозяйственных
животных становится одной из главных в системе животноводства. По некоторым оценкам, примерно четверть зерновых, производимых во всем мире, по-ражена микотоксинами. При длительном поступлении которых в организм животных в дозах, меньших до-пустимых уровней могут вызвать сочетанный хрони-ческий микотоксикоз, характеризующийся отсутстви-ем ярких клинических признаков, но сопровождается резким снижением продуктивности и отходом молод-няка сельскохозяйственных животных.
В этой ситуации не всегда удается вовремя диа-
гностировать заболевание, и очевидно, что необходи-мы эффективные профилактические меры по предо-твращению развития острого микотоксикоза.
эф
фективной мерой борьбы с уже имеющими-
ся в кормах микотоксинами является использование специальных добавок (энтеросорбентов), которые ад-сорбируют токсины, препятствуют их всасыванию в желудочно-кишечном тракте животных, и выводятся с каловыми массами, мочой.
Однако большинство препаратов, представленных
на современном рынке не всегда экономически выгод-ны для массового применения, в частности, минераль-ные сорбенты не обладают избирательной сорбцией и вместе с микотоксинами могут выводить и питатель-ные вещества, и их целесообразней применять только в случаях острых микотоксикозов.
В качестве средства профилактики микотоксикозов
ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» совместно с «ООО Маркорм» был разработан новый ветеринарный препарат энтеро-сорбент «Фитосорб» (на основе клетчатки оболочки зерна злаков).
Целью данной работы явилось изучение влияния
нового сорбента на течение смешанного Т-2 и афла-токсикоза у животных.
Исследования проводили на 3 группах крыс с ис-
ходной массой около 150 г. Первая группа служила биологическим контролем; крысам 2 группы задавали рацион, контаминированный Т-2 токсином (1/50 ЛД50) и афлатоксином В1 (1/50 ЛД50); третья группа получа-ла Т-2 токсин (1/50 ЛД50), афлатоксин В1 (1/50 ЛД50) и энтеро
сорбент «Фитосорб» в количестве 0,5 % от ра-
циона. Продолжительность опыта составила 30 сут.
Исследования показали, что во второй группе отме-
тили статистически достоверное уменьшение эритро-цитов,
лейкоцитов и гемоглобина на 30 сутки- на 20 %;
21,4 %; 11,45 % соответственно, тогда как в первой и третьей группах зарегистрировали снижение на 3 и 8
%; 5,5 и 8,5 %; 1,77 и 1,71 % соответственно.
Происходило снижение уровня глюкозы у крыс вто-
рой гр
уппы на 21,4 %, и повышение активности ще-
лочной
фосфатазы на 24,9 %, аминотрансфераз-АЛТ и
АСТ – на 16,8 и 40,8 % соответственно, которые свиде-тельствует о выраженном дегенеративном поражении печени и миокарда, и нарушении углеводного обмена. В тоже время статистически достоверное повышение активно
сти щелочной фосфатазы на 1,6 и 18,2 %, АЛТ
на 5,9 и 23,4 %, АСТ – на 7,1 и 20,7 % в первой и треть-ей группах к 30 сут соответственно, позволяет судить о снижении проявления токсического действия задавае-мых микотоксинов на фоне рациона с сорбентом.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 260
Сочетанное воздействие микотоксинов, за весь пе-
риод исследования оказало негативное влияние на ми-
неральный обмен животных. Так, в группе крыс, по-лучавших совместно Т-2 и афлатоксин, наблюдалось снижение
общего кальция в крови к 30 сут на 20,2 %, и
повышение неорганического фосфора на 22,6 %; в то время как, в сыворотке крови крыс получавших сор-бент с первого дня исследования отметили повышение общего
кальция на 4 % и неорганического фосфора на
5,7 % по сравнению со второй группой.
При этом во второй группе сохранность животных
сост
авила 66,67 % в то время как в других группах
100 %, к тому же у всех крыс, получавших токсин без сорбента наблюдались выраженные клинические при-знаки токсикоза в виде угнетения, анорексии и диареи, в то время как, менее выраженная клиническая карти-на была
у 60 % животных 3 группы, которая восстано-
вилась к 21 дню опыта.
Результаты исследований свидетельствуют, что эн-
теросорбент способствует сохранению функциональ-ной активности ферментов, регуляции углеводного и минерального обменов, положительно влияет на гема-тологические и биохимические показатели животных, и является перспективным препаратом для его даль-нейшего исследования в качестве профилактического средства при микотоксикозах.
ОТР АВЛЕНИЯ ГРИБАМИ
Мусселиус С.Г.
Медицинский центр управления делами Мэра и Правительства
г. М
осквы – клиническая больница № 3,
Москва
Острые отравления ядовитыми грибами возникают
вследствие малой осведомленности населения об осо-бенностях строения и внешних признаков ядовитых грибов, а также при неправильной кулинарной обра-ботки условно съедобных грибов (строчков). Опас-ность для здоровья представляют съедобные грибы, но химически загрязненные или пораженные пато-генными микромицетами. В последние 2 года коли-чество больных с отравлениями грибами сократилось. Объяснением этому факту может служить следующее: 1). Активная просветительная работа средств массо-вой информации с населением (телевидение, радио, печать) по профилактике отравления ядовитыми гри-бами; 2). Широкая продажа культивируемых грибов: шампиньонов, вешенки обыкновенной; 3). Наличие в государственной продаже дикорастущих грибов, про-шедших санитарный контроль. Следует отметить, что в случае отравления ядовитыми грибами в последние годы достигнуты большие успехи в лечении этой тяже-лой группы пострадавших. Современное комплексное обследование больных позволяет в течение первых су-ток установить диагноз отравление бледной поганкой и её
разновидностями – зловонной и весенней поган-
ками. В отделениях токсикологической и общей реа-нимации лечение больных проводят соответственно протоколу, составленному научно-информационным центром Росздрава. По протоколу для выведения из организма грибного яда применяют консервативные методы (промывание желудка, кишечный лаваж, фор-сированный диурез) и активные методы (плазмаферез, гемосорбцию). Низко- и высокопоточные процеду-ры (гемодиализ, гемодиафильтрация и гемофильтра-ция) эффективно корригируют нарушенный гомеос-таз, восстанавливают водно-электролитных баланс и кислотно-основное состояние. Использование при печеночной недостаточности и энтеропатии отечес-твенных биопрепаратов гепатосана (изолированные гепа
тоциты свиньи – hepar suis) и энтеросана (биосуб-
страт слизистой оболочки мускульного отдела желудка цыплят-бройлеров) способствует более ускоренному восстановлению обменных процессов в печени, нор-мализации микрофлоры кишечника и снижению эндо-генной интоксикации. За период с 2002 по 2007 год в г. Москве и Московской области отмечено снижение количества больных с отравлением ядовитыми и ус-ловно съедобными грибами. В 2007 году по данным московского токсикологического центра не было ни одного случая смертельного исхода при отравлении грибами.
Решение проблемы отравления грибами включает
комплекс организационных мероприятий, в проведе-нии которых необходимо участие государственных учреждений по распространению специальной лите-ратуры, методических рекомендаций, буклетов, ин-формационных плакатов и др. В летне-осенний пери-од составление тематических телевизионных и радио программ. В настоящее время лишь в редких высших учебных заведениях должное внимание уделяется воп-росам клинической токсикологии. Подготовка врачей токсикологов должна проводиться во всех медицинс-ких институтах. Тематические лекции об отравлении грибами необходимо включать в программу курсов усовершенствования врачей. Областные и районные больницы должны быть оснащены лечебно-диагнос-тической аппаратурой и располагать лекарственными средствами первой и неотложной помощи при отравле-нии грибами. Комплекс представленных мероприятий будет способствовать уменьшению количества отрав-лений грибами и повышению эффективности лечения этой тяжелой категории больных.
Микотоксикология 261
Гриб aspergіllus nіger встречается на кормах рас-
тительного происхождения в Украине. Его токсичные
свойства для лабораторных животных впервые были установленные украинским ученым В.Т. Панасен-ко в 1941 году, который провел исследование чистых культур гриба и загрязненных им кормов. Со време-нем Л.И. Лозбин с соавторами подтвердили токсичное действие экстрактов из культуры этого гриба в ост-рых и хронических опытах. Кроме того, в литературе имеются сообщения о случаях заболевания свиней, которые возникали после скармливания пшеничных отрубей, контаминированых этим грибом. Наблюдал-ся микотоксикоз племенных баранов, который разви-вался вследствие поедания сена, пораженного a.
nіger.
Во всех этих случаях токсичное вещество не было ус-тановлено, и только в 1991 году Y . Ueno и соавторы сообщили о способности этого микромицета продуци-ровать охратоксин А (ОТА), что нашло подтверждение в дальнейших исследованиях M.L. Abarca и N. Bellі.
Сейчас известно, что ОТА владеет нефро-, гепато-,
ембриотоксичными и иммунодепрессивными свойс-твами. С его действием связывают хронические за-болевания почек и опухоли мочевыводящих путей в первую очередь у свиней и животных других видов. Заболевание наблюдается также у людей и известное под названием эндемическая балканская нефропатия. Частота выявления ОТА в разных кормах колеблется от
1 до 18 %, а в зерновых, выращенных в странах Ев-
ропы и Америки, его обнаруживали в количестве от 10 до 27500 мкг/кг корма.
В связи с тем, что a.
nіger контаминирует корма в
Украине, нами была поставлена задача выяснить воз-можность выработки ОТА штаммами этого гриба.
Объектом токсикологического исследования были
14 штаммов гриба a.
nіger , выделенных в 1975, 1976
и 2004 годах из зерна пшеницы, ячменя, комбикорма и травяной муки из Кировоградской, Херсонской, До-нецкой, Киевской, Черниговской области и АР Крыма. Для накопления микотоксина штаммы гриба выращи-вали на увлажненном, стерильном зерне риса на про-тяжении 14 дней при температуре 27° С, а экстракцию токсина проводили етилацетатом. После очистки экс-тракта наличие ОТА определяли методом ТШХ с ис-пользованием пластин «Sorbfіl». Пластины хроматог-рафировали в системе толуол-етилацетат-муравьиная кислота (6:3:1) и экспонировали в УФ лучах длиной волны 365 нм. Для подтверждения наличия токсина хроматограммы выдерживали в камере, насыщенной парами аммиака. В качестве стандарта использова-ли охратоксин А русского производства (ГСО 7941- 2001).
С целью подтверждения наличия ОТА в культурах
a.
nіger изучали также биологическое действие экс-
трактов грибов. Для этого два выявленных штамма-продуцента выращивали в колбах на стерильном, ув-лажненном зерне пшеницы при аналогичном режиме, и интраперитонеально вводили белым мышам обез-жиренный етилацетатний экстракт в дозе 0,3мл. Ха-рактер действия токсина устанавливали путем прове-дения гистологических исследований печени и почек погибших животных, сравнивая с описанными ранее изменениями у мышей при экспериментальном охра-токсикозе А.
Результаты исследований и их обсуждение. Выпол-
ненными исследованиями охратоксин А был выявлен в экстрактах четырех штаммов гриба a.
nіger, выде-
ленных нами в 2004 году из зерна пшеницы и ячменя, выращенных в Донецкой, Черниговской и Киевской областях. Хроматографическая подвижность (Rf) ток-сина в системе толуол-етилацетат-муравьиная кислота (6:3:1) составляла 0,55 и совпадала с Rf стандарта ОТА. В УФ лучах исследуемое вещество как и стандарт ОТА проявлялось пятнами голубой окраски, которая после обработки парами аммиака изменялась на синюю.
При гистологическом исследовании у павших мы-
шей установлено, что печень находилась в состоянии острой застойной гиперемии, большинство гепатоци-тов находились в состоянии мутного набухания, отме-чалась декомплексация печеночных балок, а ядра кле-ток были в состоянии пикноза и кариорексиса.
В почках, как органах- мишенях для ОТА, отме-
чались микрокровоизлияния, эпителий извилистых канальцев находился в состоянии мутного набухания, вследствие чего их просвет слабо просматривался. От-мечалась десквамация канальцевого эпителия и форми-рование белковых цилиндров. В клубочковом аппарате ексудат, скапливаясь в капсуле Боумена- Шумлянсько-го, оттеснял сосудистый клубочек на периферию.
Установленные нами гистологические изменения в
печени и почках погибших мышей были идентичными изменениям в этих органах, которые наблюдали при эксперимент
альном охратоксикозе мышей p. Galtіer и
соавторы.
Таким образом, в результате проведенных иссле-
дований нами впервые установленная способность штаммов a.
nіger, изолированных с зерновых Украины,
синтезировать охратоксин А. Указанные штаммы- про-дуценты гриба a.
nіger вырабатывают ОТА в количес-
тве, которое после введения лабораторным животным вызвало их гибель. В современной научной литерату-ре отсутствуют данные о способности штаммов этого гриба, выделенных на территории Украины и странах бывшего СССР , продуцировать охратоксин А, в новых отечественных обзорных публикациях a.
nіger до нас
не упоминался как продуцент охратоксина А.
Все выше упомянутое является основанием для
дальнейшего изучения распространения продуцентов охратоксину А как среди штаммов a.
nіger, так и среди aSPerGіlluS nіGer – ПРОДУЦЕНТ ОХР АТОКСИНА А НА КОРМАХ УР АИНЫ
Рухляда В.В., Андрийчук А.В.
Белоцерковский национальный аграрный университет,
Белая Церковь, Украина
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 262
других видов грибов родов aspergіllus и Penіcіllіum , ко-
торые часто выделяются из кормов при алиментарных
микотоксикозах животных, с целью окончательного установления их этиологической роли в заболевании и определении количества охратоксина А, которую мо-гут синтезировать эти грибы.
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ФУМОНИЗИНА В1 НА ЦЫПЛЯТ И
ПРОТЕКТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ МИКОСОРБА
Рухляда В.В., Билан А.В.
Белоцерковский государственный аграрный университет,
Белая Церковь, Украина
Одними из наиболее распространенных грибов
на зерновых кормах являются представители рода Fusarium, которые являются продуцентами различных фузариотоксинов. В последнее время исследователи ста
ли уделять внимание открытому в 1988 г. токсину –
фумонизину, с которым связывают развитие лейкоен-цефаломаляции лошадиных и отек легких у свиней, а также гепатотоксическое и канцерогенное действие на крыс и риск для человека. Первое сообщение о по-ражении птицы, в результате поедания контаминиро-ванног
о фумонизинами зерна сделали Вhat R.v . et al.,
(1996).
Цель рабо
ты – изучить влияние фумонизина В1 на
организм цыплят и протективное действие микосорба.
Материал и методы исследований. В опытах ис-
пользованы 30 цыплят мясо-яичной породы «Адлер серебристый» средней живой массой 208 г, из которых были сформированы 3 группы по 10 голов в каждой. Цыплятам первой группы один раз в сутки давали «per os» 8
мг фумонизина В1 в 2-ух мл 5 %-ного водного
этанола, цыплята второй группы получали такую же дозу токсина и комбикорм с микосорбом в количестве 2
% на килограмм корма. Третья группа служила конт-
ролем и не получала ни токсина ни микосорба. Птица содержалась на стартовом комбикорме для цыплят.
Фумонизин В1 для исследования получали культи-
вированием
штамма продуцента 1170/5 f. moniliforme
на стерильном увлажненном зерне пшеницы при тем-пературе 24 °С на протяжении трех недель. Токсин экст
рагировали смесью ацетонитрил – вода (1:1) и
проводили переекстракцию в 5 %-ный водный эта-нол, содержание токсина определяли методом ТШХ и ИФА.
За цыплятами вели постоянное клиническое на-
блюдение, учитывали их общее состояние и один раз в неделю определяли живую массу. В конце каждой недели по три цыпленка из каждой группы забивали методом декапитации и отбирали пробы крови для биохимического исследования и материал (кусочки печени) для гистологического исследования. В сыво-ротке крови определяли содержание общего, ультра-фильтрировоного, ионизированного, нейтрального и св
язанного с белками кальция – в реакции с глиок-
са
ль-бис-2 оксалином; неорганического фосфора – ре-
акцией с аскорбиновой кислотой; активность общей щелочной фосфатазы (ЛФ) и ее костного и кишечно-го
изоферментов – методом Вагнера, Путилина и Ха-рабуры;
кислой фосфатазы (КФ) – реакцией с 4-нит-
рофенилфосфатом. Уровень мочевины исследовали диацетилмонооксимным методом; активность общей лактатдегидрогеназы (ЛДГобщ) и ее кардиоспецифи-ческ
ого изофермента ЛДГ1 – методом Севела-Товаре-
ка,
АСТ и АЛТ – унифицированным методом Райтма-
на
– Френкеля.
Для гистологического исследования кусочки пече-
ни фик
сировали 10 %-ным раствором нейтрального
формалина, обезвоживание и заливку в парафин про-водили за общепринятыми методиками, гистологичес-кие срезы окрасили гематоксилин-эозином.
Результаты исследований и их обсуждение. В нача-
ле опыта цыплята всех групп хорошо потребляли корм и были достаточно подвижными. У птицы, которая получала фумонизин В
1, наблюдали незначительное
угнетение и некоторое разжижение каловых масс. На-чиная с второй недели у групп цыплят, которые полу-чали фумонизин и микосорб устанавливали большие среднесуточные приросты в сравнении с контрольной группой. В конце опыта средняя живая масса цыплят в группе, где применяли токсин и микосорб была на-ибольшей
– 474 г, в группе токсин, – 424 г и в конт-
рольной
– 366 г.
Активность общей щелочной фосфатазы у цыплят
под воздействием фумонизина В1 в первую неделю
опыта несколько снизилась, а в конце второй недели выросла за счет костного изофермента, а затем опять уменьшилась. У цыплят, которые получали токсин и микосорб, наблюдали аналогичные изменения, но ме-нее выраженые, в то время как в контрольной группе отмечали постепенное возросное повышение актив-ности фермента в течении всего опыта.
Активность кишечного изофермента у цыплят
опытных групп в конце первой недели была вдвое ниже, чем в контрольной группе. Активность кислой фосфатазы у цыплят, под действием токсина снача-ла немного повышалась, а в конце опыта снизилась. У цыплят, которые получали с токсином микосорб, наблюдались подобные изменения, а в контрольной группе на протяжении опыта отмечали постепенное повышение активности фермента.
Активность общей ЛДГ в сыворотке цыплят, под
действием токсина достоверно увеличивалась на про-тяжении всего опыта и микосорб не сдерживал это не-гативное влияние. Подобные изменения, под действи-ем токсина также наблюдались в активности ЛДГ
1.
Микотоксикология 263
Токсин вызывал достоверное повышение активнос-
ти АСТ у цыплят обеих групп, хотя микосорб несколь-
ко уменшал влияние токсина. Особенно значительно под действием токсина увеличивалась активность ала-ниновой трансферазы.
Содержание мочевины и креатинина под воздейс-
твием фумонизина В
1 достоверно (Р<0,01) увеличива-
лось на протяжении всего опыта, а применение мико-сорба сдерживало этот рост.
Содержание общего, нейтрального, связанного с
белками и ультрафильтрированого кальция под дейс-твием токсина несколько уменьшалось, в то время как в группах цыплят, которые получали токсин и мико-сорб и в группе контроля, после незначительного по-нижения на протяжении первых двух недель отмеча-лось повышение их содержания.
Концентрация неорганического фосфора в сыво-
ротке крови цыплят, под действием токсина была ниже при сравнении с контрольной группой, хотя наблюда-ли постепенное увеличение его концентрации.
Содержание общего магния у цыплят, под действием
фумонизина В
1 уменьшалось в обоих опытных группах,
в то время как в контрольной плавно увеличивалось.
При проведенные гистологических исследований
печени, отобранной в разных группах в конце опыта установлены отличия в структуре последней.
В гистопрепаратах печени цыплят, которые полу-
чали фумонизин В
1 обнаружены большие казеозные
некрозы, и их структура характеризовалась наличием белково-жирового детрита с присуцтвием одиночных эпителиоидных клеток, что указывало на замещение некротической массы ретикулярной тканью.
В печени цыплят, которые получали фумонизин В
1
и микосорб отмечено возобновление структуры за счет регенерации гепатоцитов, последние имели интенсив-но еозинофильную цитоплазму, а одиночные гепото-циты имели несколько ядер. Наличие таких гепатоци-тов с укрупненными ядрами, считается показателем функциональной активности органа.
Структура печени цыплят группы контроля имела
долевое строение, частицы печени состояли из четко размещенных печеночных пластин, в отдельных учас-тках обнаружено их радиальное размещение. Печеноч-ные пластины состояли из полигональных групп кле-ток
– гепатоцитов. Последние имели круглую форму,
цитоплазма равномерно окрашена в бледно-розовый цвет, ядра большие, круглые, с мелкими ядрышками. Межпластинчатые капилляры умеренно заполнены форменными элементами, что отвечало норме.
На основе полученных результатов установлено,
стимуляцию прироста живой массы цыплят опытных групп, которые получали фумонизин В1 в дозе 8 мг на го
лову и микосорб в количестве 2 % на кг корма. По
данным Merrill et al., (2001) фумонизин В1 вызывает на-рушение метаболизма сфинго-липидов и образование большого количества промежуточных биоактивных ве-ществ, которые стимулируют прирост живой массы.
Биохимическими исследованиями сыворотки крови
установлено уменьшение активности общей ЛФ в нача-ле опыта и последующее повышение за счет костного изофермента, что свидетельствует о хроническом по-ражении печени, холестаз, нарушение проницаемости мембран и разрушение гепатоцитов, а также на пато-ло
гию костной ткани – высокую степень ее резорбции.
Повышенная активность кишечного изоферменту свя-зана с высоким уровнем его катаболизма в печенке.
Полученные результаты указывают, что под дейс-
твием фумонизина В
1 у цыплят возникает гепатоз и
нарушается минеральный обмен. Использование ми-косорба улучшило биохимические показатели и умень-шило негативное влияние токсина на печень цыплят.
Перспективой последующих исследований будет
изучение протективного действия других сорбентов при фузариотоксикозах.
МОНИТРОИНГ АФЛАТОКСИНОВ В КОРМАХ РЕСПУБЛИКИ ТАТАРСТАН
Садыкова В.Н., Танасева С.А., Шангараев Н.Г.
ФГУ «Федеральный центр токсикологической
и радиационной безопасности животных,
казань
Наиболее обширную группу грибов, поражаю-
щих зерновые и другие корма представляют грибы Aspergillus flavus и Aspergillus parasiticus, являющихся основными продуцентами афлатоксинов. В силу особой биологической активности и широкой распространен-ности опасность представляет афлатоксин В
1. Микоток-
син уже в незначительных количествах при длительном поступлении в организм может вызвать необратимые процессы всех его систем: нервной, иммунной, вы-делительной, эндокринной, гуморальной; приводит к нарушению функций печени и оказывает отдаленные последствия на потомство (канцерогенное, эмбриоток-сическое, тератогенное, мутагенное действие).Здоровье сельскохозяйственных животных, их про-
дуктивность, воспроизводительная функция и био-логическая ценность получаемых от них продуктов в значительной степени зависят от санитарного качества кормов. Своевременное обнаружение микотоксинов в кормах является очень важной проблемой сельского хозяйства и ветеринарии. Соблюдение режимов убор-ки урожая, закладки и хранения, а также системати-ческий анализ кормов и сельхозпродукции на содержа-ние в них микотоксинов, является важным фактором в профилактике микотоксикозов.
В 2007
– 2008 гг нами проведены исследования
1537 проб кормов, отобранных из 18 районов Рес-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 264
публики Татарстан в различных техногенных зонах.
Исследовались комбикорма, зернофураж различного состава, пшеница, ячмень, овёс, рожь, горох, сено, се-наж, силос. Анализы проведены с помощью хроматог-рафических мет
одов – ТСХ и Вэ ЖХ.
Афлатоксин В1 обнаруживался в 12,6 % кормов,
концентрация микотоксина варьировала от 0,002 до 0,81 мг/кг. Наиболее часто микотоксин обнаруживался в комбикормах, сенаже и силосе. В комбикормах афла-токсин присутствовал в основном за счёт включения в рацион прив
озных добавок – шрота соевого и жмыха
подсолнечного, так большинство проб шрота соевого (84
%) содержали афлатоксин В1 в концентрациях до
0,24 мг/кг, в 42,7 % образцов жмыха подсолнечного микотоксин был обнаружен в концентрациях до 0,18 мг/кг. Однако, и в комбикормах собственного приго-товления из местных ингредиентов также обнаружи-вался микотоксин, но при этом его концентрация не превышала 0,035 мг/кг. Следует отметить, что наруше-ние технологии приготовления сенажа и силоса при-вело к тому, что в них часто выявлялся афлатоксин В1, последующие микологические исследования показали высокую загрязненность кормов микроскопическими грибами
– продуцентами афлатоксинов.
Хозяйствам, неблагополучным по санитарному
качеству кормов, были даны рекомендации по рацио-нальному их использованию, обезвреживанию и в от-дельных случаях их утилизации.
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ И НЕКОТОРЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ
ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ НОРОК ПРИ Т-2 ТОКСИКОЗЕ И
ПРИМЕНЕНИЕ СОРБЕНТОВ И ПРОБИОТИКОВ
Самсонов А.И., Тремасов М.Я., Нуртдинов М.Г., Папуниди К.Х.
ФГУ «Федеральный центр токсикологической
и радиационной безопасности животных»,
казань
Микотоксикозы являются актуальной проблемой и
для звероводства. Опасность возникновения микоток-сикозов в звероводстве, согласно сведениям многих авторов, не вызывает сомнений. Во многом это связано с тем, что кормление пушных зверей в звероводческих хозяйствах за последние годы сильно изменилось, в их рационе стали преобладать растительные продук-ты, существенно сократив количество мясомолочных продуктов. Норки обладают более высокой чувстви-тельностью к микотоксинам по сравнению с сельско-хозяйственными и лабораторными животными
В настоящее время существует множество подхо-
дов для профилактики микотоксикозов. Нами отобра-ны в качестве профилактических средств пробиоти-ческий
препарат «энтероспорин», произведенный в
ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» на основе культуры Bacillus subtilis и бентонит натрия Тарн-Варнского месторож-дения РТ, с содержанием минерала монтмориллонита не менее 82
%.
Исследования проведены на базе зверосовхоза
«Кощаковский» Республики Татарстан. В опыте ис-пользовались самки норок породы «Пастель», массой тела 1,2
– 1,4 кг. В качестве микотоксина использовали
кристаллический Т-2 токсин, полученный в ФГУ ФЦ-ТРБ. В качестве продуцентов микотоксина использова-ли гриб f
usarium sporotrichiella, штамм 2м ∗15, предо-
ставленный д.в.н. А.Н. Котиком.
Было сформировано 3 группы животных по 3 нор-
ки
в каждой. Первая группа – служила биологическим
контролем. Вторая – получала с рационом Т-2 токсин
в дозе 200 мкг/кг корма. Третья – получала с рационом
Т-2 токсин 200 мкг/кг корма, бентонит в дозе 2 % от
рациона и энтероспорин 2 мл/животное. Опыт длился в течение 30 суток, в конце опыта провели гематологи-ческие и биохимические исследования крови. Количес-тво эритроцитов, лейкоцитов, содержание гемоглобина в периферической крови определяли по общепринятым ме
тодикам, общий белок – рефрактометрически (Анто-
нов Б.И. и др., 1991; Кондрахин И.П., 2004).
Биохимические показатели сыворотки крови опре-
деляли на анализа
торе EXpRESS pLUS.
Во второй группе норок, содержание эритроцитов,
гемоглобина лейкоцитов в крови по сравнению с конт-ро
лем уменьшилось на 30 сут эксперимента на 32,15 %,
26,65 %, 39,34 % (p<0, 01) соответственно. В третьей
группе на 7,65 %, 6,37 %, 7,65 % соответственно.
Содержание общего белка, глюкозы у норок во
второй группе по сравнению с контролем к 30 сут экс-перимента
снизилось на 27,48 %, 28,85 % (p<0,01) со-
отв
етственно. В третьей группе животных на 9,63 %,
9,34 % соответственно.
Во второй группе активность аспартатаминотранс-
феразы, аспартаталанинтрансферазы, щелочной фосфа-тазы и содержание мочевой кислоты на 30 сут увеличи-ло
сь, относительно контроля, на 49,7 %, 47 %, 96,3 %,
25,4 % (p<0, 01) соответственно. В третьей группе на
13,8 %, 17,65 %, 37,4 %, 8,45 % соответственно.
Таким образом, поступление Т-2 токсина в дозе
200 мкг/кг корма ежедневно в течение 30 суток отри-цательно воздействует на гематологические и биохи-мические показатели крови норок. Введение в рацион пробиотика энтероспорина и агроминерального эн-теросорб
ента – бентонит натрия оказывает защитное
действие, способствует снижению негативного дейс-твия микотоксина на гематологические и биохими-ческие показатели крови норок, это свидетельствует о том, что данные препараты могут применяться для профилактики и лечения микотоксикозов норок.
Микотоксикология 265
В настоящей работе приведены результаты им-
муноферментного (ИФ) анализа уровня загрязнения
микотоксинами грибов рода Aspergillus продуктов детского питания. Всего проанализировано 12 видов продуктов детского питания (молочные смеси и фрук-товые пюре), импортируемых из России, Германии и Швейцарии. Полученные данные в целом свидетельс-твуют о том, что афлатоксины в различной степени вы-раженности присутствуют во всех изученных пробах.
Продукты детского питания, импортируемые из
России были более контаминированы афлатоксина-ми, чем из Швейцарии и Германии. Так содержание суммарных афлатоксинов в фруктовом пюре с ябло-ком фирмы «Агуша» (Москва, Россия) в некоторых пробах достигает уровня 2,15±0,24 мкг/кг, что зна-чительно превосходит допустимые нормы контами-нации в 1,0 мкг/кг афлатоксинов для продуктов де-тского питания. Из 5 наименований продукции этой фирмы только один (фруктовое пюре с грушей) от-вечает современным требованиям. По сравнению с этим, фруктовые пюре фирмы «Фруттоняня» (Моск-ва, Россия) выглядят предпочтительнее, хотя и в них уровень контаминации в некоторых случаях на 20–30 %
превышает допустимые нормы. С другой сторо-
ны, продукты детского питания на основе молочных смесей были контаминированы значительно сильнее, чем на основе фруктовых пюре. Наиболее демонстра-тивны в этом отношении продукты детского питания фирмы «Винни». Максимальное количество афлаток-синов (2,17±0,26 мкг/кг) было обнаружено в молоч-ной смеси «Рисовая плюс гречневая» и в молочной смеси «Овсяная» (2,76+0,18 мкг/кг). По сравнению с продуктами российского производства, продукты из Швейцарии и Германии значительно менее подверже-ны контаминации афлатоксинами, это относится как к фруктовым пюре, так и молочным смесям. Только од
ин вид швейцарской продукции – молочная смесь
«Гречневая», содержал афлатоксины в количестве 1,21+0,14 мкг/кг, что превышает предельно-допусти-мую норму. Дальнейший анализ накопленных данных показал, что частота встречаемости контаминирован-ных проб также различна для продукции различных фирм-производителей. Чаще всего афлатоксины были выявлены в продуктах фирмы «Агуш», где вероят-но
сть обнаружения микотоксинов достигает 22 %, в
то время как для продуктов из Швейцарии этот по-ка
затель составляет не более 9,9 % из общего числа
изученных проб. Результаты исследования застав-ляют придти к выводу о необходимости системати-ческого санитарно-гигиенического контроля уровня контаминации микотоксинами пищевых продуктов детского питания.САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА УРОВНЯ КОНТАМИНАЦИИ
ПРОДУКТОВ ДЕТСКОГО ПИТАНИЯ АФЛАТОКСИНАМИ
Сеидова Г.М.
кафедра медицинской микробиологии и иммунологии
Азербайджанского Медицинского Университета,
Баку
Penicillium ciTrinum THOM КАК МОДЕЛЬНЫЙ ОБЪЕКТ
ДЛЯ
ЛАБОР АТОРНО-ПР АКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЙ В КУРСАХ
МИКОЛОГИИ И МИКОТОКСИКОЛОГИИ
Скоробогатова Р.А., Жебрак И.С.
Гро
дненский государственный университет имени Янки к упалы,
Белоруссия
До настоящего времени продолжает наблюдаться
высказанное в 1968 г э. Мюллером и В. Леффлером
ощутимое противоречие между постоянно возрастаю-щим значением микологии и недостаточным распро-странением знаний о грибах. Отсутствие элементарных микологических знаний у населения ведет к микологи-ческому невежеству, провоцирующему развитие чрез-вычайно опасных ситуаций, стимулирующих рост и развитие токсинообразующих грибов в окружающей среде, в том числе и в пищевых субстратах. Загряз-нение окружающей среды микотоксинами (micotoxin contamination) относится к общемировой проблеме. Известно, что в пищевые цепи человека микотоксины входят не только с растительными субстратами, но и при употреблении животных продуктов питания, та-ких как яйца, молоко, сыры, содержащие микотоксины в результате кормления животных контаминированны-ми кормами. И, как следствие, микотоксины обнару-живаются в крови норвежских и шведских доноров, урине мальчиков и девочек Сьерры-Леоны, урине и плазме крови людей Соединенного Королевства Вели-кобрит
ания, Польши, в грудном молоке в Египте. этот
список можно было бы продолжить. Разумеется, что всё это отражается на долгосрочном здоровье челове-чества, так как большинство микотоксинов карцино-генны, мутагенны, тератогенны.
В связи с этим в недрах микологии стала разви-
ваться микотоксикология как наука. История микоток-сикологии началась с конца 1-го тысячелетия описа-нием заболевания под названием «Антониев огонь»,
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 266
вызываемого алкалоидами спорыньи. Гибель 100000
индюшат и утят в 1960 г в Соединенном Королевстве Великобритания, вызванная наличием в скармливае-мой им арахисовой муке токсического компонента, от-крыло новую эру в изучении микотоксинов и развитию микотоксикологии как науки. И если грибы хотя бы и слишком бегло, но всё-таки рассматривают в курсе ботаники средней и высшей школы, то в отношении микотоксикологии этого сказать нельзя. Курс микоток-сикологии в системе общебиологического образования наших стран отсутствует. В связи с этим возникает не-обходимость в подготовке у нас специалистов, владе-ющих теорией и методами выделения токсинов и усло-вий токсинообразования и действия их на различные живые организмы.
В этом отношении идеальным модельным объек-
то
м является почвенный сапрофитный гриб penicillium
citrinum Thom, который продуцирует микотоксин-анти-биотик цитринин. Для получения цитринина продуцент выращивается на среде Ролен-Тома с микроэлемента-ми
: сахароза – 40 г; глюкоза – 8 г; С4Н6О6 (NH4)2 –7
г; КН2 pO4 – 2,2 г; k2SO4 – 0,6 г; MgSO47H2O – 0,2 г; дистиллированная вода – 1 л, смесь микроэлементов
(1 мл. на 1 л. среды) MgSO4 – 8 мг., СuSO4 – 40 мг.,
znSO4 – 880 мг., Co(NO3)2 _ 10 мг., feSO4 – 100 мг.,
NH4MoO4 – 30 мг., H3BO3 – 6 мг., CaCl2 – 100 мг., дис-
ти
ллированная вода – 100 мл. После инокуляции спо-
ровой суспензией выращивание культуры проводится в покое при температуре 27о С в течении 10–14 дней. Для выделения кристаллического препарата цитринина культуральную жидкость отделяют от мицелиальной пл
енки и подкисляют 20 % HCl до pH 3,0. По мере под-
кисления происходит выпадение желтого аморфного осадка. Подкисление проводят до полного осаждения порошка. Полученный осадок центрифугируют при 3000 об./мин 5 минут, а затем высушивают в эксикаторе над CaCl2. Для получения кристаллического препара-та порошок-сырец растворяют в подогретом до 40–50о этиловом спирте. Нерастворимый осадок отбрасывают, а чистый раствор ставят в холодильник, где происходит кристаллизация вещества. Полученный кристалличес-кий препарат цитринина можно использовать для изу-чения гриборастительных отношений, действие на ор-ганизм животных и антибактериальный эффект.
О НАРУШЕНИИ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ
ЖИВОТНЫХ ПРИ МИКОТОКСИКОЗАХ
Тремасов Ю.М., Ахметов Ф.Г., Сергейчев А.И., Иванов А.В.
ФГУ «Федеральный центр токсикологической
и радиационной безопасности животных,
казань
Имеются многочисленные сведения об отрицатель-
ном влиянии микотоксинов на половую систему орга-низма животных. Избирательно действует на органы размножения зеараленон, вызывает эстрогенизм, у беременных животных рассасывание плодов, рожде-ние мертвых и мумифицированных плодов, аборты, уродств
а; у хряков – олигоспермию и олигосперматоз.
Бесплодие могут вызывать Т-2 токсин, афлатоксины, патулин и др.
На сельскохозяйственных предприятиях республик
Та
тарстан, Марий – эл, У дмуртия, Чувашия нами диа-
гностировались нарушения воспроизводительной фун-кции у крупного рогатого скота, основным причинным фактором которых явилось потребление животными кормов, содержащих микотоксины. В кормах, преиму-щественно в зерновых и комбикормах, выявляли афла-токсин В1, стеригматоцистин, Т-2 токсин, зеараленон; в к
орнаже, силосе и сенаже – патулин. Концентрация
микотоксинов составляла от 0,05 до 5 мг/кг, патули-на
– до 12 мг/кг. В рационе часто одновременно выде-
лялись два, реже три микотоксина, продолжительность скармливания кормов составляла от 10 сут до 3-х ме-сяцев. Всего под наблюдением находилось 3500 коров черно
– пестрой, холмогорской и голштинской пород,
46 быков производителей – голштинской породы. Ко-ровы получали с кормом спонтанно микотоксины и в период сухостоя и после родов. У животных резких изменений в клиническом статусе не отмечалось, в крови было пониженное содержание общего белка, гамма глобулинов, каротина и глюкозы. В хозяйствах выявлялись случаи мертворождения, аборты. У 816 коров после родов, часто сложных, наблюдались эндо-метриты,
до 93,4 % случаев осложненные кандидозом,
52,7 % эндометритов были гнойными. Лечение живот-ных различными препаратами и средствами эффекта не давало, коровы не осеменялись, большинство из них выбраковывались. В некоторых хозяйствах коли-чество полученного приплода не достигало 30 телят на 100 коров.
После
постановки диагноза – субхронический или
хронический микотоксикоз, исключение из рациона пораженного микотоксинами корма или добавления энтеросорбентов число эндометритов значительно снижалось и не превышало обычные для хозяйств данные. Для лечения эндометритов у коров были ис-польз
ованы разработанные в ФГУ ФЦТРБ – ВНИВИ
средства – эндометрин (ДС-1) и эндометрин – 2 (ДС-2) на основе активных серосодержащих компонентов, отличие в препаратах заключается в наличии в ДС-2 ма
точно – стимулирующего средства и мебетизола.
Применение препаратов способствовало выздо-
ровлению
большинство животных (до 88,4 %), коровы
оплодотворялись в основном после первого осемене-ния (до
61,5 %), остальные после второго и третьего
Микотоксикология 267
осеменения. эффективность препаратов связана с по-
тивокандидозной, антимикробной активностью и ан-
тивоспалительным действием.
В рационе у быков производителей был выделен
микотоксин афлатоксин В1 в количестве 0,05 – 0,5 мг/
кг, кормление таким кормом продолжалось 30 суток. Сперма, полученная от этих животных была низкого качества т.е. не соответствовала требованиям ни по од-ному показателю, и была утилизирована.После полной замены пораженного микотоксинами
кор
ма, на 10 – 12 сут, качество спермы соответствова-
ло существующим требованиям.
Таким образом, микотоксикозы сопровождаются
нарушением воспроизводительной способности жи-вотных, а предложенный комплекс мероприятий спо-собствует оздоровлению большинства животных и по-лучению от них потомства.
АНАЛИЗ РЕЗУ ЛЬТАТОВ МОНИТОРИНГА ЗАГРЯЗНЕНИЯ
КОРМОВ МИКОТОКСИНАМИ
Фетисов Л.Н., Солдатенко Н.А.1, Русанов В.А.1,2
1 ГНУ Северо-кавказский зональный научно-исследовательский
ветеринарный институт,
Новочеркасск
2 ГНо У вПо Южный федеральный университет,
Ростов-на-Дону
Микотоксины (МТ) все чаще и во все больших
масштабах становятся причиной не только снижения продуктивных качеств животных, но зачастую острых заболеваний и гибели их. Непрямым конкурентным ИФА исследовано 443 пробы кормов из зерна урожаев 2006–2007 гг., поступивших из 22 районов Ростовской области, Краснодарского и Ставропольского краев.
Анализ полученных результатов показал общее воз-
растание частоты загрязнений всех исследованных кор-мов. В 2007г. увеличение числа положительных проб по сравнению с 2006 г. составило в образцах пшеницы 2
%, кукурузы 22 %, ячменя 3 %, гороха 40 %, жмыха
подсолнечного 37 %, дерти ячменной 19 %, комбикор-мов для
поросят 19 %, комбикормов для доращивания
и откорма свиней 13 %. Возросла также доля кормов, контаминированных двумя и более токсинами, причем увеличение числа таких проб оказалось более значи-тельным. Рост сочетанных контаминаций составил в образцах пшеницы
20 %, кукурузы – 62 %, ячменя –
50 %, гороха – 35 %, жмыха подсолнечного – 26 %, дерти ячменной – 11 %, отрубей пшеничных – 32 %, комбикормов для поросят – 18 %, комбикормов для доращивания и откорма свиней – 10 %.
В 2007 году наибольшая встречаемость выявле-
на для аспергиллотоксинов. Увеличение числа проб, содержащих афлатоксин АВ1 составило в образцах ку
курузы 20,5 %, ячменя –0,5 %, гороха – 30 %, жмы-
ха
подсолнечного – 11 %, дерти ячменной – 22,7 %,
отрубей пшеничных – 27 %, комбикормов для поро-
ся
т – 1 %, комбикормов для доращивания и откорма
свиней – 8 %. Стеригматоцистин также обнаружи-
вали чаще в количествах выше МДУ в пробах пше-ни
цы(2 %), кукурузы(5 %), ячменя(14 %), жмыха
подсолнечного(9 %), дерти ячменной(23 %), ком-
би
кормов для поросят(14 %). Возросло число проб, загрязненных охратоксином в количествах выше МД
У: среди образцов пшеницы на 16,5 %, жмыха
подсолнечного – 4 %, дерти ячменной – 29,4 %, ком-
би
кормов для откорма и доращивания свиней – 38 %.
Среди фузариотксинов в кормах чаще был представ-лен Т-2 токсин. Рост его присутствия установили в пр
обах кукурузы на 16 %, ячменя на 16 %, дерти яч-
ме
нной на 37,4 %, комбикормов для поросят на 23 %.
Доля проб, загрязненных другими фузариотоксинами снизилась почти во всех видах кормов. Наибольший рост загрязнения отметили в пробах дерти ячменной и жмыха подсолнечника. Особенно высокую встре-чаемость в этих кормах имели также представители «плесеней хранения». В 2004–2006гг аспергиллоток-сины и фузариотоксины обнаруживали в пробах кор-мов в равных долях или близко к равным. В 2007 году ситация изменилась.
При общем увеличении числа положительных проб
за этот период произошел сдвиг в спектре определяе-мых микотоксинов: загрязнение аспергиллотоксинами устанавливали в пробах кормов в 2,2 раза чаще чем фу-зариотоксинами. Отмеченные отличия в соотношении микотоксинов обусловлены, главным образом, клима-тическими особенностями вегетационного периода 2007 года (длительная засуха). Накопление в кормах преимущественно токсинов «плесеней хранения» сви-детельствует также о необходимости создания удов-летворительных условий хранения кормов на складах кормопроизводителей и на фермах. Установленный факт существенной смены состава токсикантов кормов подтверждает необходимость постоянного контроля загрязнения, так как спектр установленных токсинов определяет меры по профилактике и по лечению жи-вотных, определяет подбор сорбентов, средств патоге-нетической и симптоматической терапии.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 9 268
Интенсивное производство синтетических мою-
щих средств (СМС), изготавливаемых на основе по-
верхностно активных веществ (ПАВ), создало новую, глоба
льного масштаба проблему – изучения влияния
ранее неизвестного антропогенного фактора на состав микобиоты отдельных экологических ниш, в том числе на рост и токсинобразование микромицетов, поражаю-щих корма.
Изучено антифунгальное действие более 50 наиме-
нований СМС и ПАВ (стиральные порошки, гели, пас-ты, шампуни, мыла и др.) по отношению к 30 видам (320 штаммам) 18 родов грибов, выделенных из кор-мов (сено, солома, зерно, комбикорма), отобранных в хозяйствах и птицефабриках Украины.
Статистическая обработка полученных данных вы-
явила тенденцию повышения резистентности к хими-катам у видов родов asper
gillus Mich., Penicillium Link,
и в меньшей степени у представителей myr othecium
link
, dendr odochium toxicum pid. et Bilai, Stachybotrys Bon., Fusarium Link. Индуцированная устойчивость
названных родов микромицетов к СМС и ПАВ транс-формировалась по наследству новым популяциям и сопроваждалась изменениями морфолого-культураль-ных признаков и токсигенных свойств. Полученные результаты объясняют высокий коэффициент встреча-емости представителей видов с измененным потенци-алом: asper
gillus flavus, a. fumigatus, a. niger, Penicil-
lium cyclopium , P . urticae, Fusarium sporotrichiella и др.
в почве, ризосфере растений, кормах.
Установлена избирательная чувствительность мик-
ромицетов к препаратам бытовой химии. Она дает воз-можность прогнозировать загрязненность кормовых субстратов микотоксинами, характеризовать способ-ность их усваивать в экстремальных условиях сущес-твования необычных для них источников питания, а такж
е возможности направленного поиска изолятов –
активных деструкторов пестицидов разного хозяйс-твенного назначения.ИЗМЕНЕНИЯ В СТРУКТУРНОМ КОМПЛЕКСЕ
МИКОБИОТЫ
КОРМОВ ПОД ВЛИЯНИЕМ СИНТЕТИЧЕСКИХ
МОЮЩИХ СРЕДСТВ И ИХ КОМПОНЕНТОВ
Харченко С.Н., Башта Е.В., Волощук Н.М.
Национальный аграрный университет,
киев
ОДНОВРЕМЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФУМОНИЗИНА,
ОХР АТОКСИНА И ЗЕАР АЛЕНОНА В ПШЕНИЦЕ МЕТОДОМ
МЕМБР АННОГО ПРОТОЧНОГО ИММУНОАНАЛИЗА
Яковлева М.Е.1, Колосова А.Ю.2, Сара де Саегер2, Еремин С.А.3
1 Московская Медицинская Академия им. И.М. Сеченова,
Москва
2 Гентский Университет,
Гент, Бельгия
3 Московский Государственный Университет им. М.в. ломоносова,
Москва
Микотоксины являются продуктами метаболизма
микроскопических плесневых грибов и составляют обширную группу токсикантов природного проис-хо
ждения. В настоящее время более 25 % мирового
урожая зерновых культур заражено одним из видов микотоксинов. Среди них наиболее распространены афлатоксины, трихотецены, охратоксины и зеарале-нон. Большинство из них являются высокотоксичными соединениями, образование которых нельзя предупре-дить, т.к. оно тесно связано с экологическими услови-ями. Из-за наличия устойчивой химической структуры микотоксины не разрушаются в процессе хранения и переработки сырья, а также в процессе приготовления пищи. В результате, они в неизменном виде и в значи-тельных концентрациях попадают в продукты питания и корма для животных. При употреблении контамини-рованной продукции возможны отравления вплоть до летальных исходов. Отсутствие эффективных методов борьбы с загрязнением агропродукции привело к тому, что в большинстве стран были установлены ПДК со-держания микотоксинов и началась разработка мето-дов их определения.
В настоящее время приоритетной задачей при раз-
работке любого метода анализа является возможность одновременного определения нескольких микотокси-нов, т.к. в большинстве случаев для них характерно совместное присутствие в том или ином виде заражен-ной агропродукции. При наличие достаточной чувстви-тельности и селективности дополнительными преиму-ществами являются дешевизна метода, его быстрота, а также отсутствие громоздкого оборудования, работать с которым может только высококвалифицированный персонал. Учитывая перечисленные факторы, нами была разработана методика мембранного проточно-го иммуноанализа одновременного определения трех микотоксинов: фумонизина В
1, охратоксина и зеарале-
Микотоксикология 269
нона в пшенице. Методика основана на конкуренции
определяемого вещества и коньюгата с ферментной меткой (щелочной фосфатазой) за места связывания специфических антител, адсорбированных на мембра-не с вторичными антителами. Первичные антитела к трем микотоксинам наносят на поверхность мембраны при помощи пипетки в виде точек диаметром не более 1–1.5 мм. Мембрана помещена в пластиковый планшет с впитывающей подложкой и отверстием, через кото-рое последовательно пропускают: 1) 600 мкл раствора стандарта или образца, 2) 60 мкл смеси коньюгатов и 3) 120 мкл субстрата. После 1-го и 2-го этапов через мем-брану пропускают соответственно 60 мкл и 120 мкл фосфатного буфера для удаления непрореагировавших компонентов. Данный объем, подобранный опытным путем, позволяет достичь наименьшей интенсивности фона мембраны. Через пять минут после добавления субстрата реакцию останавливают при помощи 100 мкл дистиллированной воды, затем визуально или при помощи портативного колориметра проводят оценку интенсивности образовавшихся коричневых пятен с учетом того, что интенсивность окраски обратно про-порциональна концентрации определяемого вещества. Методика позволяет визуально оценить наличие или отсутствии фумонизина В
1, охратоксина и зеараленона
в пшенице на уровне ПДК согласно требованиям Ев-росоюза (200 мкг/кг, 0.5 мкг/кг и 10 мкг/кг, соответс-твенно) в режиме «да»/«нет» (отсутствие или наличие пятна), а также определить концентрацию микотокси-нов при измерении интенсивности окраски пятен при помощи колориметра. В этом случае интенсивность окраски выражается единичной величиной ДЕ*аb.
Оптимальные концентрации первичных монокло-
нальных антител и коньюгатов были определены мето-дом «проб и ошибок» с использованием стандартного раствора смеси микотоксинов, концентрация каждого из которых соответствует ПДК, и раствора фосфатного буфера с метанолом в качестве «бланкового» раствора. Разведения иммунореагентов были подобраны таким образом, чтобы «отрицательному» результату соот-ветствовали пятна с высокой интенсивностью окрас-ки ((ДE*ab(
fB1) = 13,33 ± 2,59; ДE*ab(ОТА) = 12,92 ±
2,31; ДE*ab (zEA) = 14,26 ± 1,07 (n = 15)), а «положи-тельному
» результату – отсутствие окраски на мемб-
ране (ДE*ab = 5,55 ± 0,71; (n = 15).
Кроме разработки методики одновременного оп-
ределения нескольких микотоксинов не менее важной задачей данной работы являлся подбор оптимальных условий для экстракции и дальнейшего анализа ис-следуемых токсикантов в пшенице. Пробоподготовка заключалась в экстрагировании, центрифугировании и фильтровании супернатанта, разбавленного в шприце фосфатным буфером, на поверхность мембраны. Оп-тимальным для полного извлечения микотоксинов из матрикса оказалось использование смеси метанола, воды и ледяной уксусной кислоты (79:20:1) в качес-тве экстрагента, а также политетрафторэтиленового фильтра, в меньшей степени, по-сравнению с другими фильтрующими материалами, адсорбирующего иссле-дуемые токсины на своей поверхности.
Для апробации методики были проанализированы
образцы пшеницы, загрязненные смесью микотокси-нов в концентрациях выше и ниже уровня ПДК, уста-новленного для каждого из них. Анализ проводили три раза в день в течение трех дней с последующим расче-том коэффициента вариации и стандартного отклоне-ния. Максимальная величина коэффициента вариации не превысила
14,95 % для результатов, полученных в
течение одного дня и 16,12 % для результатов, полу-ченных за три дня, что свидетельствует о хорошей вос-производимости методики.
Разработана методика одновременного визуального
определения фумонизина В
1, охратоксина и зеарале-
нона на уровне ПДК. Данная методика мембранного проточного иммуноанализа не требует сложной пробо-подготовки, обладает хорошей воспроизводимостью и может быть использована для скрининга данных мико-токсинов в продуктах питания и кормах для животных.
Работа выполнена при финансовой поддержке
гранта РФФИ и Фландрии 05–03–34828-МФ_а «Стра-тегия экспрессной детекции микотоксинов в пищевых продуктах».
Культуры, выделенные из клинического материала
и предварительно идентифицированные с помощью
прибора «Микроб-Автомат» как candida spp., допол-
нительно изучали по морфологическим, тинктори-альным, культуральным и физиолого-биохимическим свойствам, а также на токсичность in vivo .
На широком наборе дифференциально-диагнос-
тических сред в сравнении с контрольным штаммом c.
albicans ATCC 885–663 определяли способность 11
штаммов дрожжевых грибов утилизировать углеводы и многоатомные спирты, аминокислоты, соли, синте-зировать пигменты, бактериоцины, гемолизины и ха-рактерные для вида продукты метаболизма.
Наличие некоторых «ключевых» диагностических
свойств культур повторно подтверждено с использова-нием те
ст-системы «HiCandida Identification kit» (Hi-
Media).
Важные фенотипические характеристики штаммов
получены на хромогенной среде, предназначенной для candida
spp., и на среде Никерсона (HiMedia); на хла-
мидоспорагаре, бульоне и агаре Сабуро (НПО «Пита-тельные среды»).
Особое внимание уделено образованию псевдоми-
целия, бластоконидий, хламидоспор.
Среди изученных штаммов, помимо candida
al-
bicans, идентифицированы c. tropicalis, c. globrata,
c.
krusei.
Всего изучено 80 признаков.С целью выявления оптимального состава пита-
тельных сред, которые могли быть наиболее пригодны для получения биомассы штаммов candida
в выбран-
ных условиях периодического культивирования, нами проведена серия экспериментов с применением жид-кой среды Сабуро и 10 созданных нами сред (солевых или различающихся белковым компонентом).
Выращивание осуществляли при разной темпера-
турной экспозиции и продолжительности процессов культивирования.
Оценку интенсивности роста штаммов candida
spp.
проводили по оптической плотности (ОП) вырос-
ших культур с измерением величины ОП на приборе Dynatech MR5000 при длине волны 450 нм с использо-ванием микролуночных планшет.
Рост клинических культур на среде Сабуро не от-
личался по показателям интенсивности от роста кон-трольного штамма. Однако наиболее высокие показа-тели размножения дрожжевых грибов отмечены при выращивании на оригина
льной среде СПАС-4.
На беспородных белых мышах при внутрибрю-
шинном введении разных концентраций клеток кон-трольной и клинических культур candida
albicans,
была испытана и оценена их токсичность, относяща-яся к основным критериям безопасности вакцинных штаммов.
В итоге этого этапа исследований эксперимен-
тально подобраны штаммы и оптимальные условия выращивания candida
albicans (питательные среды,
режимы процесса периодического культивирования) с целью получения биомассы, из которой будут выделе-ны протективные антигены.
Помимо этого, проведена подготовка штаммов
candida
albicans, наиболее перспективных для созда-
ния антикандидозной вакцины, к депонированию в Национальной коллекции культур. Раздел 10
бИОЛОГИЯ ДРОЖЖЕй
ИЗУЧЕНИЕ ШТАММОВ candida albicanS
ДЛЯ СОЗДАНИЯ АНТИКАНДИДОЗНОЙ ВАКЦИНЫ
Блинкова Л.П., Горбатко Е.С.
ГУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН,
Москва
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 10 272
эффекты, возникающие при центрифугировании
клеток микроорганизмов, связаны с изменениями гра-
витационного поля, а также механическим взаимодейс-твием клеток друг с другом и с компонентами среды. Различные варианты центрифугирования применяются для моделирования и исследования поведения микро-бов в условиях микро- и гипергравитационных воз-действий. При постановке лабораторных исследований центрифугирование чаще всего используется для осаж-дения клеток организмов, а также с целью отмывания их от предыдущей среды. В этих случаях клетки, чаще всего подвергаются воздействию, так называемой, ги-пергравитации, т.е. их центрифугируют при значениях g > 20
00. Отцентрифугированные клетки используются
для дальнейших экспериментальных манипуляций. При этом из виду упускаются возможные изменения, про-изошедшие в их физиолого-биохимическом состоянии. Однако известно, что гипергравитационное воздействие приводит к целому ряду изменений в структурно-функ-циональной и физиолого-биохимической организации клеток живых организмов.
В настоящей работе исследовалось влияние проце-
дуры центрифугирования на жизнеспособность кле-ток и их чувствительность к ингибиторам роста. Цент-рифугирование проводили при скоростях 1000, 2000 и 5000 об./мин., три раза по пять минут. После каждого центрифугирования часть клеток ресуспендировали в такой же, но свежей среде, а вторую часть клеток ос-тавляли в той среде, в которой они только что находи-лись. Контролем служили клетки дрожжей не подвер-гнутые центрифугированию и соответственно они не отмывались. Жизнеспособность оценивали по КОЕ и активности ферментов (дегирогеназ). Показано, что центрифугирование оказывает су-
щественное влияние на физиолого-биохимическое со
стояние клеток дрожжей. эффект действия зави-
сит от скорости центрифугирования. Было отмече-но
, что при минимальной скорости (1000 об./мин)
активность ферментов дегидрогеназного комплекса возрастает. При этом резистентность клеток к дейс-тв
ию нистатина падала на 60 %. Увеличение скоро-
сти центрифугирования приводило к изменениям в ха
рактере обоих этих показателей. При 2000 об./мин
активность ферментов дегидрогеназ варьировала от опыта к опыту не позволив выявить закономернос-ти. В то же время резистентность к антибиотику постоянно демонстрировала эффект возрастания в результате центрифугирования (в 1,5–2 раза) и сни-жения в результате процедуры отмывания (минимум на
40 %). При 5000 об./мин ферменты дегирогеназ
вели себя как и при 2000 об./мин, а жизнеспособ-
ность увеличивалась минимум в 2 раза после цент-рифугирования и в 1,5 раза после центрифугирова-ния с отмыванием.
Таким образом, полученные данные свидетель-
ствуют о важной биологической роли процедуры центрифугирования, которая обязательно должна учитываться при проведении исследований. Дейс-твующим фактором оказывается как само центрифу-гирование, так и процедура отмывания, т.е. удаление внеклеточных метаболитов. Отмеченные эффекты вероятно будут зависеть не только от параметров центрифугирования, но и от организма, а потому должны детально исследоваться для получения пол-ной картины взаимодействия живой природы с ее окружением.ВЛИЯНИЕ ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЯ НА ФИЗИОЛОГО-
БИОХИМИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ КЛЕТОК ДРОЖЖЕЙ
Войчук С.И., Громозова Е.Н.
Институт микробиологии и вирусологии
им.
Д.к. заболотного НАН Украины
киев
эПИФИТНЫЕ ДРОЖЖИ СПОРОВЫХ Р АСТЕНИЙ
Голубев В.И.
ИБФМ РАН, всероссийская коллекция микроорганизмов,
Пущино
Дрожжевая микобиота, ассоциированная со споро-
выми растениями, в отличие от микобиоты семенных, до настоящего времени практически не обследована, что инициировало изучение ее в филлосфере, в част-ности, папоротника (athyrium
filix-femina (L.) Roth) и
хвоща ( equisetum hiemale L.), произрастающих в лесах
южного Подмосковья.
Образцы растений собирали в июне-июле 2005 г. и
анализировали в день отбора проб. Высевы проводи-ли на агаризованные отвары из надземных же частей, соответственно, папортника и хвоща. Для подавления бактерий в среды вносили бензилпенициллин и стреп-томицин.
Количество клеток (КОЕ) дрожжевых грибов в
указанные месяцы на папоротнике находилось в диа-пазоне
48–85 тыс./г, что составляло 40–46 % от чис-
ленности всех микромицетов. На хвоще количество дрожжей колебалось значительнее, от 17 до 131 тыс. кл./г,
представляя 13–44 % от общей численности мик-
ромицетов. На обоих растениях плотность популяций
Биология дрожжей 273
как дрожжей, так и мицелиальных микромицетов в
июле была выше, чем в июне.
Изучение более 50 изолятов с папоротника и хво-
ща показало, что все они относятся к базидиомицетам и принадлежа
т к родам Cryptococcus kьtzing emend.
phaff et Spencer, Cystofilobasidium Oberwinkler et Bandoni, Rhodotorula Harrison, Sporobolomyces kluyver
et van Niel и Tilletiopsis Derx. Во всех высевах резко преоблада
ли криптококки, составляя свыше 90 % в по-
пуляциях дрожжевых грибов в филлоплане обоих рас-тений. Лишь в июне на хвоще доля их была несколько ниже (70
%).
Дрожжи филлосферы папоротника представлены
в основном нитрат-положительными криптококками ко
мплекса C. albidus (filobasidiales), среди которых
идентифицирован c. phenolicus fonseca et al. Другие
изоляты фенотипически близки видам c. silvicola Gol-
ubev et Sampaio, c. saitoi fonseca et al. и c. wieringae
fonceca et al., отличаясь от них по некоторым диагнос-
тическим признакам и чувствительности к микоцинам. Напротив, в популяциях дрожжей филлосферы хвоща присутствовали почти исключительно нитрат-отрица-тельные криптококки комплекса C. laurentii (Tremella-les). Ряд этих изолятов отнесен к виду c.
victoriae Mon-
tes et al., а остальные фенотипически сходны с видами c.
carnescens (verona et Luchetti) Takashima et al., c.
laurentii (k ufferath) Skinner, c. nemorosus Golubev et
al. и c. peneaus (phaff et al.) Takashima, но также отли-
чаются от них по некоторым свойствам и результатам микоцинотипирования. Поскольку микоциночувстви-тельность таксоноспецифична, многие полученные из филлоплана папортника и хвоща изоляты принадле-жат, по-видимому, к новым, еще неописанным, видам.
Минорные же компоненты дрожжевого сообщест-
ва филлоплана хвоща идентифицированы как cys.
cap-
itatum (f ell et al.) Oberwinkler et Bandoni , r. bacarum
(Buhagiar) Rodrigues de Miranda et Weijman , r. pal-
lida Lodder, r. glutinis (fresenius) Harrison и S. roseus
kluyver
et van Niel. Последние два вида обнаружены и
на папоротнике, где найдены кроме того r. auriculariae
(Nakase) Rodrigues de Miranda et Weijman и T. washing-
tonensis Nyland. В отличие от криптококков все выше
указанные виды присутствовали высевах однократно и были представлены единичными колониями.
ИЗУЧЕНИЕ ПУТЕЙ ПЕРЕДА ЧИ КЛЕТОЧНЫХ
СИГНАЛОВ НА МОДЕЛИ КАНДИДОЗА
Гроза Н.В., Иванов И.В., Мягкова Г.И.
Московская государственная академия
тонкой химиче
ской технологии им. М.в. ломоносова,
Москва
Окисленные производные ненасыщенных жирных
кислот (оксилипины) играют важную роль в процессах адгезии, роста и репродукции клеток грибов. Вместе с тем остаются невыясненными особенности взаимо-действия болезнетворных грибов с животными тка-нями, поэтому актуальной задачей является изучение метаболизма оксилипинов в грибах, а также оксили-пин-ассоциированной трансдукции сигналов на моде-лях «хозяин-патоген» с целью выявления механизмов возникновения и развития микозов.
Известно, что ферменты перекисного окисления
липидов
– циклооксигеназы (COX-1, COX-2) – ката-
лизируют ключевые реакции биосинтеза простано-идов
– низкомолекулярных биорегуляторов важных
патофизиологических реакций. Внешние клеточные стимулы, такие как факторы роста, цитокины, регули-руют уровень экспрессии генов cox-1 и cox-2. Повыше-
нием уровня экспрессии гена индуцибельной COX-2 сопровождается множество патологических и онколо-гических заболеваний человека: ревматоидный артрит, опухоли желудка, кишечника, молочной железы. С це-лью определения возможности модуляции активнос-ти гена cox-2 с помощью гидроксилипинов грибного
происхождения было исследовано изменение уровня его экспрессии как под воздействием дрожжей can-
dida
albicans, в питательную среду которых добавля-
ли арахидоновую кислоту (АК), так и в присутствии индивидуа
льных образцов оксилипинов – 3-гидрокси-
эйкоза
тетраеновой кислоты (3-НЕТЕ) – в среде инку-
бации клеток хозяина. В качестве экспериментального животного объекта была выбрана культура клеток эпи-телоидной к
арциномы матки человека – клеток Hela,
которая в комбинации с инфекцией c. albicans являет-
ся моделью вульвовагинального кандидоза.
Hel
a клетки подвергали временной трансфекции:
1) репортерным вектором, содержащим конструкцию функциональной области гена cox-2, лигированную с
геном люциферазы (prСОХ-2-pLUC), 2) либо анало-гичной плазмидой, содержащей функциональную об-ласть г
ена транскрипционного фактора Nf-кB (prNf-
к
B-pLUC). Дополнительно применяли d/ n плазмиды,
содержащие нарушенные функциональные области генов:
а) изоформы ядерного рецептора ppARг (pp ARг
d/n), б) IкB киназы Ikk-киназного белкового комп-лекса, ответственного за фосфорилирование процес-сингов
ого протеина Nf- кB-зависимого сигнального
пути (I
kk d/n). В качестве ингибиторов и эффекто-
ров указанных сигнальных процессов применяли SB 202190 (ингибитор р38
МАРк) и розиглитазон (селектив-
ный лиганд
для рецептора ppARг). Трансфицирован-
ные Hel a клетки были заражены c. albicans (мутанты
с ослабленной вирулентностью cav2 и cav3, питавши-еся АК) или обработаны жирнокислотными производ-ными 3(r/S
)-НЕТЕ, либо 3(R)-НЕТЕ; уровень экспрес-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 10 274
сии репортерных векторов измеряли по люциферазной
активности.
Результаты экспериментов показали, что мутанты
can
dida albicans, питавшиеся АК, селективно повыша-
ли уровень экспрессии гена cox-2 в Hela клетках. Пре-
инкубация трансфицированных Hela клеток с ингиби-
тором р38МАР к SB 202190 перед добавлением инфекции
c. albicans вызывала селективное снижение уровня экс-
прессии гена cox-2 , индуцированного мутантом cav2.
Было выявлено, что оксилипин 3( r,S) -HETE, добав-
ленный в инкубационную среду вместо инфекции, по-вышал уровень экспрессии гена cox-2 дозозависимым
образом, как было установлено ранее для арахидоновой кислоты. Аналогичный опыт с применением препара-та оптически активного изомера 3( R)-HETE не показал
изменений в уровне экспрессии гена cox-2 . Также было
найдено, что уровень экспрессии гена cox-2 , индуциро-
ванный ослабленной инфекцией c.
albicans , снижался
в
присутствии плазмиды ppARг d/n. Преинкубация
трансфицированных Hela клеток с лигандом рецептора
ppA
Rг розиглитазоном перед добавлением инфекции c.
albicans вызывала повышение уровня экспрессии гена
cox-2 по сравнению с уровнем, индуцированным мутан-тами cav2 или cav3. Данные следующей серии экспери-ментов показали, что уровень экспрессии гена nf-кb,
индуцированный добавлением 3( r/S)
-НЕТЕ, снижался
в
присутствии плазмиды I kk d/n. Анализируя резуль-
таты исследований с применением репортеров, можно выдвинуть гипотезу о том, что 3-НЕТЕ (аналогично арахидоновой кислоте) участвует как дополнительный агент в формировании воспалительного ответа клеток млекопитающих и воздействует на рецепторы, чувстви-тельные к производным жирных кислот.
Таким образом, было показано, что и мутанты can-
dida
albicans, питавшиеся арахидоновой кислотой, и
3-гидроксилипины, добавленные в среду инкубиро-вания, способны модулировать передачу сигналов в клетках млекопитающих на модели кандидоза in vitro
и, следовательно, могут участвовать в формировании воспалительного ответа по сценарию прооксидативно-го стресса, как и арахидоновая кислота. Также было выявлено, что механизмы, связанные с ядерным рецеп-торо
м ppARг и транскрипционным фактором Nf-кB,
влияют на передачу сигналов, вызываемых микозной инфекцией или окисленными производными полине-насыщенных жирных кислот в животных клетках.
ВЛИЯНИЕ эКЗОМЕТАБОЛИТОВ ДРОЖЖЕВЫХ ГРИБОВ
НА РОСТОВЫЕ СВОЙСТВА БИФИДОБАКТЕРИЙ.
Иванова Е.В., Перунова Н.Б.
Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза,
оренбург
В последнее десятилетие актуальность приобрел
кандидоз кишечника. Установлено, что наряду с уве-личением обсемененности биотопа желудочно-ки-шечного тракта дрожжеподобными грибами, часто выявляется дефицит бифидофлоры. В этой связи це-лесообразным представляется изучение особенностей возможных механизмов взаимодействия бифидобакте-рий и дрожжевых грибов в их ассоциациях.
Цель: изучить влияние экзометаболитов дрожже-
вых грибов рода Candida и Rhodotorula на ростовые свойства бифидобактерий.
Материалы и методы: в работе использовано по
10 штаммов грибов рода Candida и Rhodotorula и 6 штаммов Bifidobacterium longum, выделенных от па-циентов с дисбиозом кишечника 2–3 степени. Посев исследуемого материала осуществляли на элективные питательные среды с последующей идентификацией шт
аммов общепринятыми методами. экзометаболи-
ты дрожжевых грибов получали путем пропускания бульонной культуры исследуемых штаммов Candida spp. и Rhodotorula spp. через фильтры «Millipore» с диаметром пор 0,12 мкм. Фильтраты воздействующих штаммов (дрожжевых грибов) добавляли в питатель-ный бульон с исследуемой культурой бифидобакте-рий. Исследование ростовых свойств бифидобакте-рий проводили на фотометре ELx808 (BioTek, США). В качестве контроля использовали бульонные культу-ры B.longum без добавления экзометаболитов дрож-жевых грибов.
Результаты: установлено разнонаправленное, но
преимущественно подавляющее влияние экзометабо-литов дрожжевых грибов на ростовые характеристики бифидофлоры. Грибы рода Rhodotorula ингибировали рост
исследуемых микроорганизмов в 28 % случаев в
среднем на 30 % по сравнению с контролем. Был отме-чен бак
терицидный эффект в 33 % случаев (отсутствие
роста культур бифидобактерий). Стимуляция роста бифидобактерий
грибами наблюдалась в 8 % случаев в
среднем на 29 %. В ряде случаев ( 31 %) супернатанты дрожжевых грибов не оказывали влияния на ростовые свойства B.longum. Грибы рода Candida чаще оказы-вали ингибирующий эффект на рост бифидобактерий, по сравнению с грибами рода Rhodotorula. Снижение рост
а B.longum отмечалось в 57 % случаев в среднем
на 27 % по сравнению с контролем, в 27 % случаев – наблюдалось бактерицидное действие. Стимуляция рост
а анаэробов выявлена в 6 % случаев (в среднем
на 17 %), в 10 % случаев бифидобактерии оказались индифферентны к действию супернатанта грибов рода Candida.
Выводы: таким образом, грибы рода Candida и Rho-
dotorula способны влиять на рост бифидобактерий. Выявлен преимущественно ингибирующий эффект эк-зометаболитов грибов (особенно рода Candida) на рос-
Биология дрожжей 275
товые свойства B.longum. Полученные данные могут
иметь значение в регуляции численности бифидобакте-рий при наличии в биоценозе грибов рода Candida, что может усугублять микроэкологические нарушения при дисбиотических изменениях биотопа. В этой связи це-лесообразным представляется изучение особенностей возможных механизмов взаимодействия бифидобакте-рий и грибов рода Candida в их ассоциациях, с целью управления и осуществления эффективной профилак-тики и лечения грибковых дисбиозов кишечника.
ОСОБЕННОСТИ ДРОЖЖЕВЫХ ГРУППИРОВОК
В ФИЛЛОСФЕРЕ СФАГНОВЫХ МХОВ
Качалкин А.В., Глушакова А.М., Юрков А.М., Чернов И.Ю.
Моск
овский Государственный Университет им. М.в. ломоносова,
ф-т
почвоведения, каф. биологии почв,
Москва
Дрожжи относятся к числу наиболее характерных
эпифитных микроорганизмов, активно размножаю-щихся на поверхности растений. В последних работах нашей лаборатории показано, что на разных видах со-судистых растений, независимо от их таксономической принадлежности, в среднем доминируют одни и те же виды дрожжей. Однако дрожжевое население других групп растений изучено очень поверхностно. Сфагно-вые мхи широко распространены в разных природных зонах, сфагновая дернина является обязательным ком-понентом растительного покрова разных фитоценозов. эдифика
торная функция сфагновых мхов проявляется
через модификацию факторов среды – запасание вла-ги, понижение температуры, высокой буферности и связывание элементов питания. Большую роль в фор-мировании специфической среды играют также фи-зиологические и биохимические свойства сфагновых мхов. Поэтому можно предположить, что дрожжевые сообщества, формирующихся в моховой дернине, должны быть до
статочно специфичны.
В данной работе образцы сфагнума и сосудистых
растений для исследований были отобраны из болот-ных и лесных фитоценозов Московской, Тверской и Тюменской областей России. Сфагновая дернина ана-лизировалась послойно, так же в работе изучались отдельно верхняя часть и нижняя части болотных растений, произрастающих на дернине. Нами было показано, что дрожжевые сообщества сфагновой де-рнины значимо отличаются от эпифитных сообществ на лесных, луговых и болотных сосудистых растени-ях
. Основное отличие – незначительное присутствие
красных пигментированных дрожжей и сравнитель-но низкое обилие анаморфных тремелловых крипто-кокков, которые являются типичными эпифитами на листьях сосудистых растений в умеренных и север-ных широтах и достаточно высокая численность и разнообразие дрожжей из класса Microbotryomycetes sensu Bauer et al., близкие к родам Leucosporidium и Rh
odotorula (в среднем около 12 %). Установлено,
что особенности сфагновых мхов как местообитания дрожжей, не могут определяться только гидротерми-ческим режимом, т.к. существуют сильные различия в дрожжевых группировках в дернине сфагновых мхов и на частях болотных сосудистых растений, произрастающих в той же дернине. Роль сфагновых мхов в формировании дрожжевых сообществ глав-ным образом заключается в изменении питательного режима: недостатке азота и микроэлементов, а также значительном присутствии в экссудатах органичес-ких, уроновых и ароматических кислот. Среди доми-нирующих таксонов, обнаруженных нами в моховой дернине, преобладают дрожжи с широким ассимиля-ционным спектром и способностью к утилизации ор-ганических кислот и ароматических соединений. Мы предполагаем, что мхи, в особенности сфагновые, являются характерным природным местообитанием для дрожжей из класса Microbotryomycetes и, воз-можно, содержат значительно более высокое видовое разнообразие представителей из этого класса, чем то которое известно к настоящему времени.
ВИДОВОЙ СОСТАВ РОДА zYGOWILLIOpsIs
СОГ ЛАСНО ГЕНЕТИЧЕСКОМУ АНАЛИЗУ
Кондратьева В.И., Наумов Г.И.
Государственный научно-исследовательский институт
генетики и селекции промышленных микроорганизмов,
Москва
Дрожжи zygowilliopsis представляют большой
интерес как возможные продуценты противодрожже-вых медицинских и биологических препаратов. Об-разуемые ими токсины (микоцины/киллерные белки) обладают высокой активностью и широким спектром действия по отношению к представителям различ-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 10 276
ных родов дрожжей [Вустин и др., 1988; kimura et al.,
1995]. Молекулярное изучение большого количества
штаммов zygowilliopsis различног о географического
происхождения выявило значительный полиморфизм этих дрожжей. На основании анализа нуклеотидных последовательностей 5,8S-ITS фрагментов рДНК в рамках вида z.
californica были установлены три раз-
новидности: z. californica var. californica , z. californica
var. dimennae и z. californica var. fukushimae [Наумо-
ва и др., 2006]. Рестриктазный анализ амплифициро-ванных ITS-фрагментов, анализ последовательностей ITS1–5.8S-ITS2 и домена D1/D2 26S рДНК японских штаммов zygowilliopsis
позволил установить два но-
вых таксона, вероятно, в ранге видов: zygowilliopsis.
sp.1
и zygowilliopsis. sp.2 [Наумова и др. 2003; Газдиев,
2005].
Проведенный нами гибридизационный анализ
дрожж
ей рода zygowilliopsis, исследованных ранее
молекулярными методами, подтвердил существова-ние 3-х видов в этом роде. Более распространенный вид z.
сalifornica представлен различными изолята-
ми из Европы, Северной Америки, Азии, Австралии и Новой Зеландии, которые, несмотря на частичную генетическую изоляцию (жизнеспособность аскоспор межштаммовых
гибридов 8–38 %, внутриштаммо-
вых
– 62–97 %), являются представителями одного и
того же вида. Полученные гибриды имели нормаль-ное мейотическое расщепление контрольных ауксо-трофных маркеров. Менее дивергентными оказались почвенные штаммы NRRL Y-1709 из Миннесоты, США и NRRL Y-4269 из Новой Зеландии; жизнеспо-собность гибридных аскоспор во внутриштаммовых и межштаммовых скрещиваниях была практически оди-наковой. Генетический анализ не позволяет проводить дифференциацию z
. californica на разновидности z.
californica var. californica, z. californica var. dimennae,
так как нет достоверной разницы в жизнеспособнос-ти гибридных аскоспор при скрещивании дрожжей, принадлежащих к одной разновидности или к разным. Изучаемые штаммы, очевидно, относятся к разным географическим популяциям одного вида.
zygowilliopsis
sp.1 и zygowilliopsis sp.2 представ-
лены 5 штаммами, изолированными из почв Японии. Cкрещивания японских штаммов с эталонным штам-мом z
. сalifornica CBS 5760 показали их полную ге-
нетическую изоляцию: жизнеспособность гибридных аско
спор 0–12 %, отсутствие двойных ауксотрофных
рекомбинантов при анализе случайной выборки спор. Стерильные гибриды были получены также в скре-щиваниях
представителей видов zygowilliopsis sp.1 и
zygowilliopsis sp.2 между собой.
В подтверждение данным филогенетического ана-
лиза [
kurtzman, Robnett, 1998; Газдиев, 2005] нами
показано, что дрожжи, выделеные из сокотечений то-поля в Северной Америке и идентифицированые как Pichia (Hansenula) populi на основании ДНК-ДНК ре-
ассоциации [
phaff et al., 1983], хорошо скрещиваются
с представителями всех трех видов zygowilliopsis , сле-
довательно принадлежат к этому роду. В межвидовых скрещиваниях отмечена низкая жизнеспособность ас-коспор гибридов и отсутствие ауксотрофных рекомби-нантов в случайной выборке спор.
Молекулярные и генетические результаты указы-
вают на необходимость пересмотра видового состава дрожжей zygowilliopsis
и родовой принадлежности
дрожжей известных как P . populi.
АДГЕЗИЯ И РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ШТАММОВ
candida albicanS КАК ХАР АКТЕРИСТИКИ ПАТОГЕННОСТИ
Лисовская С.А., Глушко Н.И.
казанский НИИ эпид
емиологии и микробиологии,
казань
В последние годы распространение хронических
форм заболеваний, вызванных грибами candida al-
bicans, неуклонно увеличивается. Несомненно, это связано с усилением неблагоприятного воздействия внешней среды (химические загрязнения, радиация), а также нерациональным применением кортикостерои-дов и антибиотиков.
Для лечения заболеваний, вызванных грибами c.
albicans
разработаны и внедрены в лечебную практику
различные виды противогрибковых препаратов широ-кого спектра действия (кетоконазол, флуконазол, итра-коназол, тербинафин). Антимикотики обеспечивают избирательный фунгистатический или фунгицидный эффект воздействуя, в основном, на клеточную стенку гриба. В основной массе работ, посвященных изуче-нию влияния противогрибковых препаратов на грибы рода candida
, в том числе и на штаммы c. albicans, отмечается относительная устойчивость некоторых штаммов к действию стандартных доз противогрибко-вых препаратов, причем такие штаммы заведомо от-носят к патогенным. На основании этого существует мнение о разделении штаммов по уровню патогеннос-ти, в зависимости от резистентности штаммов.
С 2003 по 2007 год в микологической лаборатории
КНИИ э
М проводились работы по изучению уровня
чувствительности штаммов C. albicans диско-диф-фузионным методом, в сравнении с методом серий-ных разведений. МИК определяли в соответствии со стандартами NCCLS. Исследовали 2780 клинических штаммов, выделенных от больных с кандидозами различной локализации. Было показано, что ко всем изученным антимикотикам существуют штаммы с раз-личным уровнем чувствительности. С 2003 по 2005 го
д более 85 % штаммов грибов были чувствительны
Биология дрожжей 277
к действию тербинафина (МИК<16 мкг/мл). Значи-
тельное
количество штаммов (около 21 %) проявляло
относительную устойчивость к флуконазолу (МИК>64 мкг/мл). Интересно отметить, что количество устой-чивых штаммов дрожжеподобных грибов в 2006 году выросло по сравнению с 2003 годом: к флуконазолу на 20
%, итраконазолу – в 2–2,5 раза, кетоконазолу и тер-
бинафину
– в 3 и более раз. При этом отмечалась связь
устойчивости грибов к антимикотику с курсом ранее проведенной антифунгальной терапии данным препа-ратом. Все препараты широко применяются в клинике для лечения различных форм кандидоза, причем не-редко в слишком низких дозах, что и обуславливает, по-видимому, рост числа устойчивых штаммов.
Можно предположить, что применение противо-
грибковых препаратов влияет и на адгезины, которые локализованы на поверхности клеточной стенки. Ве-роятно, это влияние будет проявляться в изменении адге
зивной способности клеток – одного из основных
факторов патогенности. В связи с этим представляет интерес оценить взаимосвязь резистентности штамма и его адгезивных свойств, для оценки которых исполь-зовали ранее разработанную модель на основе нитро-целлюлозной матрицы с иммобилизованным гемогло-бином.
Проведенные исследования адгезивной способнос-
ти 80 штаммов с наиболее характерными отличиями в степени резистентности (чувствительны к основным против
огрибковым препаратам 100 – 80 %, и устой-
чивы к
противогрибковым препаратам менее 15 %)
показали связь между уровнем адгезии штамма и его устойчивости к различным видам антимикотиков. Так, у штаммов, обладающих устойчивостью к антимико-тикам,
средний уровень адгезии (37 %) почти в 4 раза
превышал уровень чувствительных штаммов (9,6 %). Следует отметить, что среди чувствительных ко
всем антимикотикам штаммов имелась группа штам-мов (ок
оло 26 %), обуславливающих проявление вы-
раженных признаков кандидоза, при этом в посеве ко-личество грибов значительно превышало допустимые нормы (более 104 КОЕ/мл), а средний уровень адгезии достига
л 16 % – 27 %, в зависимости от места лока-
лизации штамма. В то же время, большинство чувс-твительных штаммов было выделено в незначитель-ном (не более 102 КОЕ/мл) количестве от пациентов без клинических признаков кандидоза, а их адгезия не превышала 6
%.
Анализ группы пациентов, у которых выделялись
устойчивые к антимикотикам штаммы, показал отсутс-твие у некоторых больных клинических проявлений заболевания и незначительное количество грибов в по-севах, по-видимому, связанное с проведенным ранее ус-пешным противогрибковым лечением. Уровень адгезии таких штаммов был в 2–3 раза ниже уровня адгезии ос-новной группы штаммов. Основная группа устойчивых штаммов была выделена на фоне выраженных клини-ческих проявлений кандидоза, однако с различным ко-личеством грибов в посеве (от 103 до 106 КОЕ/мл), при эт
ом адгезия составляла 18–26 % для кожных штаммов,
а для штаммов из ротовой полости – 25–40 %.
Полученные результаты показывают, что ориенти-
роваться в патогенности штамма только в зависимости от резистентности штаммов нельзя. Необходимо более полное изучение свойств гриба с проведением сопос-тавления всех факторов (проявление тяжести заболе-вания, уровень обсемененности, чувствительность штамма). Изучение уровня адгезии штамма гриба поз-воляет более точно охарактеризовать его патогенность и выбрать правильный подход к лечению данного за-болевания.
ДЕЙСТВИЕ Б-ИНТЕРФЕРОНА ЧЕЛОВЕКА НА АДГЕЗИЮ В СИСТЕМЕ
«CANDIDA ALbICANs – БУККАЛЬНЫЕ эПИТЕЛИОЦИТЫ»
Лукова О.А., Заславская М.И., Махрова Т.В.
кафе
дра микробиологии и иммунологии,
Нижегородская государственная медицинская академия,
Нижний Новгород
Основным возбудителем оппортунистических
поверхностных микозов человека является Candida albicans. Развитие заболевания зависит от ряда пред-располагающих факторов, в том числе и от состоя-ния колонизируемой ткани и адгезивности эпителия слизистых оболочек. Таким образом, особый интерес представляет поиск средств, позволяющих регулиро-вать реактивность эпителиоцитов и влиять на их адге-зивность в системах с C.albicans.
В работе изучали действие б-интерферона человека
(коммерческий препарат «Гриппферон») на адгезию в системе «C.albicans
– буккальные эпителиоциты» in vi-
tro. В работе использовали типовой штамм C. albicans штамм 601. Культуру кандид (в дрожжевой фазе) полу-чали на агаре Сабуро (20–24ч, 37
°С). Посевы смыва-
ли забуференным физиологическим раствором (ЗФР). Клеточные агрегаты удаляли центрифугированием (30g, 2 мин). Клетки буккального эпителия получали от взрослых 20–23 лет. Клетки трижды отмывали (40g, 5 мин) и готовили взвесь с концентрацией 10
6 кл/мл.
В эксперименте эпителиоциты предварительно ин-
кубировали (37˚С 1 час) с разовой терапевтической до-зой (3000 МЕ) препарата «Гриппферон» (ЗАО «ФИРН М» г.Москва). В контроле вместо препарата использо-вали забуференный физиологический раствор (ЗФР). Затем суспензию C. albicans (10
7кл/мл) инкубировали
30 мин с буккальными эпителиоцитами в равных объ-емах (0,5 мл) в ЗФР . Готовили мазки из эпителиоцитов,
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 10 278
и подсчитывали среднее количество кандид в пересче-
те на один эпителиоцит (учитывали 100 клеток) и вы-ражали результаты в условных единицах (усл.ед).
Обработка буккальных клеток препаратом «Грип-
пферон» приводила к снижению адгезии кандид в системе и составляла 2,1±0,91 усл.ед, в то же время в контроле 4,19±1,01 усл.ед (p<0,05).Таким образом, б-интерферон человека (препа-
рат «Гриппферон») способен влиять на реактивность эпителиальных клеток в системе с C.albicans. Можно предположить, что использование б-интерферона че-ловека in vivo может приводить к нарушению процес-са колонизации слизистых оболочек кандидами и сни-жать риск развития кандидоза.
БИОХИМИЧЕСКИЕ МОДИФИКАЦИИ В ДРОЖЖЕВЫХ КЛЕТКАХ,
ИНДУЦИРОВАННЫЕ ВИДИМЫМ И НИЗКОИНТЕНСИВНЫМ КР АСНЫМ СВЕТОМ
Пиняскина Е.В.
УРАН Прикаспийский институт биологических ресурсов Дагестанского научного центра РАН,
Махачкала
В связи с происходящими в настоящее время изме-
нениями в экологической обстановке, затрагивающими облученность живых организмов, остро стоит вопрос об устойчивости биологических систем к повреждаю-щему действию солнечного ультрафиолетового (УФ) излучения (290–380 нм) и видимого света, достигаю-щего поверхности Земли.
В последнее время все большее внимание уделяет-
ся фотодинамическим деструктивным реакциям, про-текающим в биологических системах под действием света длинноволновой ультрафиолетовой (УФ) и види-мой об
ластей спектра. это вызвано, с одной стороны,
важной ролью фотодинамических процессов в реали-зации фототоксических и фотоканцерогенных эффек-тов в коже человека при действии солнечного излуче-ния, а
с другой – с разработкой и усовершенствование
способов направленного фотоповреждения клеток и биологических структур (при фототерапии опухолей видимым светом в присутствии сенсибилизаторов порфириновой природы).
Установлено, что большинство порфиринов обла-
дает существенной каталитической и ферментативной активностью, в силу которой они могут выступать как активаторы или сенсибилизаторы процессов. Исследо-вания последних лет показали, что порфирины обла-дают уникальным свойством модифицировать радиа-ционное поражение объектов.
Механизмы индуцируемых видимым светом фо-
тодинамических реакций наиболее детально исследу-ются в условиях облучения биологических объектов с экзогенными порфиринами, и в этом направлении до-стигнуты определенные успехи.
Что касается фотодинамических эффектов, сенси-
билизируемых эндогенными порфиринами (при облу-чении клеток низкоинтенсивным красным светом), то о молекулярных механизмах, лежащих в основе таких эф
фектов, известно пока очень мало. это в значитель-
ной мере связано с отсутствием данных о внутрикле-точной локализации порфиринов, выступающих в ка-честве сенсибилизаторов.
экспериментальные данные, подтверждают, что
именно плазматические мембраны являются одной из главных мишеней повреждающего действия видимого света: облучение дрожжевых клеток видимым светом в присутствии гематопорфирина или протопорфирина приводило к инактивации клеток и повреждению плаз-матических мембран, определяемому по изменению проницаемости их к α-нитрофенил- D-глюкопирано-
зиду. Поскольку действие света в присутствии сенси-билизаторов направлено на те компоненты клетки, в которых сенсибилизатор локализуется, можно пред-положить, что первичные хромофоры локализованы в плазматических мембранах.
Для выяснения связи порфиринов с плазматичес-
кими мембранами нами проведен спектрофлуоримет-рический анализ этих структур после их выделения из дрожжевых клеток.
Согласно спектральному анализу, проведенному
нами на целых клетках, выявлено наличие в клетках двух
флуоресцирующих типов порфиринов – копро-
порфиринов (главный максимум флуоресценции при 620 нм) и протопорфиринов (главный максимум при 640 нм).
Спектрофлуориметрический анализ изолированных
плазматических мембран дрожжей показал, что в плаз-матических мембранах локализовано вещество, облада-ющее флуоресценцией в красной области спектра Фп
683.
Спектр этой флуоресценции имеет один максимум при
683 нм; основной максимум в спектре ее возбуждения расположен в области 400 нм, что близко совпадает с полосой Соре для порфиринов. Возбуждение света в УФ
области спектра с максимумом при 280 нм, соответству-ющим максимуму поглощения белков, приводило к по-явлению той же флуоресценции с пиком при 683 нм.
Полученные результаты свидетельствуют о том,
что выявленная нами флуоресценция плазматических мембран обусловлена локализованным в них фотосен-сибилизатором порфириновой природы, отличным от копро- и протопорфиринов, содержащихся в других клеточных структурах.
Поскольку важную роль в фотосенсибилизирован-
ном повреждении мембран играют процессы пере-кисного фотоокисления липидов (ПФОЛ), были про-ведены исследования этих процессов при облучении клеток видимым светом. Показано, что с ростом дозы облучения видимым светом в мембранных структурах
Биология дрожжей 279
идут процессы перекисного окисления липидов, о чем
свидетельствует увеличение концентрации ТБК-актив-ных продуктов. Для выяснения механизма инициации ПОЛ исследовали влияние тяжелой воды (D
2O) и азида
натрия на этот процесс (NaN3). Показано, что при за-
мене Н2О на D2O количество ТБК-активных продуктов
в облученных мембранах значительно возрастает, При облучении плазматических мембран в присутствии азида натрия (10 мМ) кинетика накопления ТБК-ак-тивных продуктов значительно замедляется.
Поскольку азид натрия не полностью ингибирует
этот процесс, нельзя исключить участия в его инициа-ции и каких-то других активных форм кислорода.
Одну из них (
о•
2) мы попытались зарегистриро-
ва
ть методом эПР с помощью её специфической ло-
вушки
– тайрона. Но в изолированных плазматических
мембранах фотоиндуцированного сигнала эПР – тай-
рона зарегистрировать не удалось. Поэтому фотосен-сибилизированное образование (
о•
2) в плазматичес-
ких мембранах под действием видимого света и его участие в процессах ПОЛ представляется маловеро-ятным. Очевидно, в этом случае имеет место второй тип фо
тодинамических реакций – перенос энергии от
сенсибилизатора к молекуле кислорода с переводом ее в электронно-возбужденное синглетное состояние
1О2,
образовавшийся синглетный кислород затем окисляет биологический субстрат.Нами исследовано влияние каталазы, суперок-
сиддисмутазы на ПФОЛ. Оказалось, что ферменты, перехватывающие перекись водорода и супероксид-ный радикал, не влияют на кинетику фотоиндуциру-емого накопления ТБК-активных продуктов, однако облучение клеток низкоинтенсивным красным све-том приводит к реактивации дыхательных ферментов (цитохромы а и а
3, цитохромоксидаза) ферментов,
что восстанавливает поток электронов в дыхательной цепи и формирует трансмембранный потенциал мито-хондрий. э
то, в свою очередь, увеличивает продукцию
АТФ в клетках и активирует транспорт Са2+, что при-
водит к стимуляции внутриклеточных процессов. Ге-нерируемые фотосенсибилизатором активные формы кислорода, в частности
1О2, инициируют перекисную
модификацию клеточных мембран.
Рассмотренные сенсибилизированные фотопов-
реждения мембран приводят к изменениям их важ-нейших функциональных характеристик: снижению барьерных свойств, подавлению активностей мембра-носвязанных ферментов и транспортных систем, что, в конечном счете, приводит к их деструктуризации и гибели клеток.
Более подробное изучение биохимических моди-
фикаций, индуцированных видимым и низкоинтенсив-ным красным светом являются темой наших дальней-ших исследований.
ОСОБЕННОСТИ БИОЛОГИИ ГРИБОВ РОДА CANDIDA
Тимохина Т.Х.1, Николенко М.В.1, Перунова Н.Б.2 , Варницына В.В.1
1 ГоУ вПо Тюменская государственная медицинская академия,
Тюмень
2 Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уро РАН,
оренбург
Известно, что биологические процессы в природе
протекают с достаточно четкой периодичностью. это
свидетельствует о том, что биоритмы являются уни-версальным и важнейшим свойством жизни и спосо-бом существования живых организмов. Непрерывные циклические колебания, с одной стороны, зависят от ритмичных изменений внешних условий, таких как геомагнитизм, чередования дня и ночи, смены фаз Луны и. т. д. Однако, их нельзя считать прямой реак-цией на эти изменения. У живых организмов, имеются внутренние механизмы, позволяющие чувствовать те-чение времени и измерять его промежутки. Исследо-вание хронобиологических особенностей грибов рода Candida позволит, по-новому, взглянуть на биологию данного микроорганизма и процесс его адаптации к условиям среды.
Цель: изучить особенности суточной динамики
пролиферативной активности Candida albicans (С. al-bicans)
Материалы и методы. В экспериментах исполь-
зовали штаммы C. albicans 463, 203, выделенные из клинического материала в монокультуре. Видовую принадлежность определяли по ассимиляционным ко-лориметрическим тестам «Auxacolor 2» фирмы Bio-Rad. Контролем служил эталонный штамм C. аlbicans АТСС 24433. Все тест-штаммы выращивали и хранили на сре-де Сабуро с теллуритом. Культуры пересевали через две недели в течение шести месяцев. Для данной работы ис
пользовали 24 – часовую культуру. Посевы делали по
методу Дригальского и инкубировали при температуре 37
°С. Исследования проводились в течение 2-х суток с
4-х часовым интервалом. Результаты статистически об-работаны по методу наименьших квадратов.
Результаты исследований. Суточная динамика про-
лиферативной активности C. аlbicans АТСС 24433 ха-рактеризовалась достоверным ультрадианным вкла-дом
ритма – 34,8 %, стабильной акрофазой в дневное
время – 12.00 и батифазой в вечернее время. Штаммы, выделенные из клинического материала, имели сходс-тво в хроноинфраструктуре ритма. Пролиферация в течение суток характеризовалась выраженностью циркадианног
о ритма (вклад ритма грибов 463 и 203 –
50,8 %; 44,4 % соответственно, Р < 0,001). Вклад иных колебаний ритма незначителен. Изменения данного
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 10 280
показателя были синхронны в течение двух суток с ха-
рактерным
пиком в вечернее – ночное время – 20.00 –
24.00 часа. Через девять пассажей у грибов 463 и 203 варианта, выращенных in vitro, наблюдался дисинхро-ноз ритма. Временная организация пролиферативной активности характеризовалась выраженностью трех ритмических компонентов спектра 24 часового и двух его гармоник с периодами 12 и 8 часов. Изменился профиль ритма. Максимальная пролиферация наблю-далась в 8.00 и 16.00 часов. Через 18 поколений суточ-ный ритм изучаемого показателя у штаммов C. аlbicans 463 и 203 четко не отличался от ритма C. аlbicans 24433 АТСС.
Вклад ультрадианного ритма составлял 62,4 % и 41,0 % соответственно (Р < 0,001), акрофаза регист-рировалась в дневное время (12.00).
Таким образом, данный факт позволяет говорить
о преобладании ультрадианных колебаний пролифе-ративной активности C. аlbicans и является типовым признаком временных рядов. Периодичность этих изменений, по-видимому, наследственно закрепле-на естественным отбором и связана с циклическими изменениями геофизических факторов. Вероятно, ультрадианные эндогенные ритмы C. аlbicans под влиянием
ритмов – регуляторов макроорганизма и ас-
социативной микрофлоры теряют стабильность своего периода и превращаются в циркадианные.
ХАР АКТЕРИСТИКА ВРЕМЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ГРИБОВ РОДА
CANDIDA В АССОЦИАЦИИ С ЗОЛОТИСТЫМ СТАФИЛОКОККОМ
Тимохина Т.Х.2, Николенко М.В.2, Паромова Я.И.2, Перунова Н.Б.1
1 Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уро РАН,
оренбург
2 ГоУ вПо Тюменская государственная медицинская академия Росздрава,
Тюмень
Candida spp являются часто встречающимся ком-
понентом микробиоценозов тела человека (Хмельниц-кий О.К., 2000; Зеленова Е.Г. , 2002). Установлено, что дрожжевые грибы способны усиливать свои патоген-ные свойства в ассоциации с бактериями, приводя к утяжелению состояния пациентов (особенно в услови-ях иммунодефицитного состояния) вплоть до леталь-ного исхода (Бухарин О.В., 2002). Известно, что одним из информативных и чувствительных методов оценки адаптивных возможностей любого живого организма признан хронобиологический метод (Комаров Ф.И., 2002; Halber
g f., 1973). В связи с этим интерес пред-
ставляет изучение механизмов формирования бакте-риально-грибковых ассоциаций с позиции суточной динамики биологических свойств микроорганизмов-ассоциантов.
Целью исследования явилось изучение временной
организации биологических свойств Candida albicans под влиянием экзометаболитов Staphylococcus aureus.
Материалом для данной работы послужили штам-
мы C.
albicans: варианты 463, 147 выявлены в мо-
ноку
льтуре от ВИЧ – инфицированных пациентов.
Штаммы 77, 125 выделены в ассоциации со S. aureus. Видовую принадлежность определяли по ассимиля-ционным колориметрическим тестам «Auxacolor 2» фирмы Bio-Rad. Контролем служил эталонный штамм C. аlbicans АТСС 24433. Динамику пролиферативной активности изучали в течение 2 суток с 4х часовым ин-тервалом. Параллельно исследовали воздействие экза-метаболитов музейного штамма S. aureus АТСС 25923 на суточную биохимическую активность C. аlbicans АТСС 24433. Стерилизацию супернатанта проводили хлороформо
м (20 : 1) и добавляли в бульонную куль-
туру грибов. Активность каталазы C. albicans опреде-ляли фотометрическим методом (Бухарин О.В., 1999); активность протеиназы классическим биуретовым методом. В качестве контроля использовали чистую культуру грибов без воздействия метаболитов стафи-лококка. Результаты статистически обработаны по ме-тоду наименьших квадратов.
Результаты: при оценке временных параметров у
эталонного штамма установлены достоверные ультра-дианные биоритмы изучаемых показателей. В ранние утренние
часы – 4.00 и дневное время – 12.00 C. albicans
проявляла максимальную каталазную активность. Су-точная динамика пролиферативной активности харак-теризовалась достоверным ультрадианным вкладом ритма
– 34,8 %, стабильной акрофазой в дневные часы
и батифазой в вечернее время. Временная организация протеиназной активности выражалась двумя ритмич-ными к
омпонентами спектра – 12 и 8-часовой гармо-
никой, с максимумами в 16.00 и 24.00 часа У штаммов, выделенных из клинического материала, наблюдалась инверсия ритма. Суточная динамика пролиферативной активности всех изучаемых видов C. аlbicans характе-ризовались достоверным циркадианным вкладом рит-ма
– 51,2 %; акрофаза смещалась на ночное время (24
часа), а минимум показателя зафиксирован днем.
Заключение: Суточная динамика пролиферативной
и метаболической активности музейного варианта C. albicans закономерна и является типовым признаком временных рядов биологической активности. Изме-нение амплит
удно – фазовых взаимоотношений фер-
ментативной активности C. albicans под влиянием метаболитов S. aureus свидетельствует о дисинхроно-зе из
учаемых параметров. экзометаболиты S. aureus
достоверно изменили ритмометрические параметры изучаемых показателей: наблюдалась инверсия уль-традианного ритма на циркадианный, смещение акро-фазы на 12 часов дня, достоверное увеличение значе-
Биология дрожжей 281
ний амплитуды и мезора. Данный факт указывало на
мобилизацию биологического потенциала C. albicans, следовательно, взаимоотношения S. аureus и Candida spp. могут носить саттеллический характер.
ДРОЖЖИ В ПИВОВАРЕНИИ
Филимонова Т.И., Борисенко О.А.
ГУ в
НИИ пивоваренной, безалкогольной и винодельческой промышленности
Москва
Чистые культуры пивных дрожжей впервые в 1883
году выделил Ганзен из дрожжей низового брожения на Карлсбергском пивоваренном заводе в Копенгаге-не. Различные авторы, занимающиеся вопросами сис-тематики, относят эти дрожжи к видам: Saccharomy-ces carlsbergensis, S. uvarum, S. bayanus и S.cerevisia. В последние годы Г.И.Наумов на основе сравнительного молекулярно-генетичес-кого изучения пивных дрож-жей утверждает, что они имеют гибридное происхож-дение и представляют собой частичный аллотетрапло-ид S. cerevisia x S. bayanus. Пивовары традиционно придерживаются первоначального видового названия пивных дрожжей низового брожения Saccharomyces carlsbergensis Hansen.
Пивные дрожжи не имеют диких популяций в при-
роде, они существуют только в пивоваренном произ-во
дстве. Характерная особенность пивных дрожжей –
слабая способность к спорообразованию. В процессе культивирования на пивном сусле споры не образу-ются. Только на специальных средах для споруляции у некоторых штаммов находят небольшое количество асков со спорами. При этом часть спор не развивается и вместо четырех спор образуется одна-две, реже три споры. Споры имеют низкую жизнеспособность: про-растает
не более 5 %. эти особенности пивных дрож-
жей затрудняют работу по получению новых гибрид-ных штаммов
В процессе пивоварения выбор расы (штамма)
дрожжей для сбраживания пивного сусла имеет су-щественное значение: от расы зависят особенности технологического процесса и вкус пива.
Для низового брожения используют холодный или
теплый температурные режимы. Начальная темпера-тура
сусла при холодном брожении – +5–6о С, макси-
ма
льная в процессе брожения – +9–10о С. При теплом
брожении начальная температура – +7–9о С, макси-
ма
льная – +12–15о С. Для разных температурных ре-
жимов используют разные расы дрожжей. Каждая раса имеет свои особенности по глубине выбраживания и скорости сбраживания сусла, характеру осветления и вкусу получаемого пива.
На предприятиях нашей страны в течение многих
десятилетий было принято холодное брожение. Оно имеет ряд преимуществ: при низких температурах в пиве меньше побочных продуктов, ухудшающих вкус, и легче соблюсти чистоту производства, так как низ-кие температуры подавляют развитие бактериальной микрофлоры, что позволяет применять их в течение 12–14 генераций.Родоначальником многих рас дрожжей холодного
брожения была раса 776. Она селекционирована в Ин-ституте брожения в Берлине, в нашу коллекцию посту-пила в 1934 году. Раса 776 способна сбраживать сусло, получаемое из ячменя с невысокой степенью прорас-таемости, когда в сусле содержится много крахмала, который с трудом поддается осахариванию. Раса 776 особенно пригодна для пива, изготавливаемого с при-менением несо
ложеных злаков – риса и кукурузы.
В 1939 году в нашей лаборатории из производс-
твенных дрожжей расы 776 были выведены три новые расы: 11, 41 и 44.
Раса 11 относится к быстросбраживающим дрож-
жам, обладает конститутивным синтезом мальтазы и без периода адаптации сразу начинает сбраживать мальтозу сусла, неприхотлива к сырью и может быть использована для сбраживания сусла с добавлением несоложеных материалов
В технологическом процессе пивные дрожжи под-
вергаются воздействию неблагоприятных факторов, которые вызывают ослабление, снижение жизнеспо-собности и вырождение дрожжевых клеток. В процессе брожения образуется спирт, влияние его на дрожжи оп-ределяется как этанольный стресс. Спирт угнетает как скорость размножения дрожжей, так и процесс броже-ния. Неингибирующей является концентрация этанола ме
нее 1,2 %, полностью, как правило, рост дрожжей по-
да
вляют 8–9,5 % этанола. Раса 11 устойчива к воздейс-
тв
ию высокого содержания этанола: 9 % спирта не вы-
зывает гибели этих дрожжей. Дрожжи расы 11 хорошо выдерживают осмотический стресс, возникающий при сбраживании сусла с высоким содержанием сахара.
Дрожжи расы 8 аМ были селекционированы из про-
изводственных дрожжей в 1973 году. Раса 8 аМ обла-дает повышенной скоростью размножения и высокой бродильной способностью, что позволяет сократить длительность
главного брожения на 20 %, при этом
обеспечивает получение пива с хорошими вкусовыми качествами.
Сравнивая количественное соотношение приме-
нения разных рас дрожжей холодного брожения на российских пивзаводах за период 1988–2007 годы, пришли к заключению, что большинство пивоваров предпочитают расы 8аМ и 11. Двадцать лет назад расу 11
использовали в 44 % случаев от общего числа куль-
тур
холодного брожения, а расу 8 аМ в 31 %. С годами
популярность расы 8 аМ росла и теперь 59 % заводов применяют эту расу в технологии холодного броже-ния, расу 1
1 – 29 %.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 10 282
Находят применение в производстве пива еще ряд
рас пивных дрожжей холодного брожения, но их ис-
пользуют в настоящее время на небольшом количестве заво
дов (1–6 %).
Технология теплого брожения появилась на наших
заводах в 1997 году. Теплое брожение имеет то пре-имущество, что дает возможность ускорить процесс сбраживания. При этом необходимой предпосылкой является хороший состав сусла: содержание низкомо-лекулярного азота, цинка, степень сбраживания и ин-тенсивная аэрация сусла.
Для сбраживания по технологии теплого брожения
применяют следующие расы: Rh, 34, 34/70, 145, 129 и 308. Рекомендуют использовать не более 6 генераций дрожей.
Среди рас теплого брожения наиболее устойчивы к
отрицательному воздействию высоких концентраций спирта расы Rh, 145 и 34. Спирт подавляет размноже-ние и вызывает гибель дрожжевых клеток рас 129, 308 и 34/70.
При сбраживании плотного сусла с начальной экс-
трак
тивностью 17 и 23 % разными расами дрожжей
теплого брожения наиболее эффективное снижение экстракта имеет место в первую очередь в случае расы Rh: ск
орость сбраживания расой Rh на 20–30 % выше,
чем дрожжами расы 145.
Российские пивовары отмечают плохое осветление
пива при использовании многих рас дрожжей теплого брожения. Плохо осаждаются в конце брожения дрож-жи расы 308, 129 и 34, поэтому некоторые заводы от-казываются от применения этих рас.Раса 145 дает хорошо осветленное пиво, но с вин-
ным привкусом, поэтому ее можно рекомендовать ис-пользовать при начальной плотности сусла не ниже 14
%.
В последние годы стала востребованной раса 34/70.
С помощью дрожжей расы 34/70 получают пиво как в горизонтальных танках, так и ЦКТ. При использова-нии расы 34/70 происходит хорошее осветление пива и редукция диацетила.
В 1997 году наиболее часто применявшимися на
российских заводах были расы 34 и 308. В 1997 году при использовании технологии теплого брожения при-меняли рас
у 34 в 49 % случаев, в 2007 году в 22 %. В
1997 году расу 308 использовали 36 % заводов, при-менявших технологию теплого брожения, в 2004 году 9–18
% заводов, а в 2007 году уже только 5 %.
За эти годы увеличилась популярность двух других
рас дро
жжей: 34/70 и Rh. эти расы в 1997–2002 годах
использовали 5–10 % заводов, а в 2007 году уже около 29 % работало на расе 34/70 и 31 % на расе Rh.
Другие расы теплого брожения применяют реже:
9 %
заводов работает на расе 145 и 4 % – на расе
129.
Если сравнить процент использования всех рас
пивных дрожжей, как холодного, так и теплого бро-жения, то можно сделать вывод, что технология холодного брожения используется на российских пи
воваренных заводах более, чем в 50 % случаев.
Наиболее востребованы следующие расы дрожжей: 8
аМ (32 %), 11 (16 %), Rh (14 %), 34/70 (13 %) и 34
(10 %).
ВЛИЯНИЕ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ АУТОРЕГУ ЛЯТОРОВ МИКРОБНОГО
МЕТАБОЛИЗМА НА РОСТОВЫЕ СВОЙСТВА CANDIDA ALbICANs
Явнова С.В., Перунова Н.Б.
Институт к
леточного и внутриклеточного симбиоза Уро РАН,
оренбург
Одно из взаимодействий в микробных сообщест-
вах происходит за счет ауторегуляторных химических факторов, являющихся физиологически активными метабо
литами микрофлоры. это низкомолекулярные
соединения, легко перемещающиеся между клетка-ми и средой (без участия мембранных транспортных систем), не использующиеся в качестве источников конструктивного или энергетического метаболизма и действующие как индукторы специфического ответа, обуславливающие качественное изменение физиоло-гического состояния клеток (Stephens, 1986). В литера-туре имеются данные по влиянию внеклеточных низ-комолекулярных регуляторов, алкилоксибензолов, на бактериа
льные клетки (Хохлов А.С., 1988; fuqua W.C.,
1994). Однако до сих пор открытым остается вопрос о воздействии данных факторов на дрожжевые грибы.
Целью работы явилось изучение влияния ауторе-
гуляторов микробного метаболизма (алкилоксибензо-лов) на ростовые свойства Candida albicans.Материалом для данной работы послужил музей-
ный штамм C.albicans №171. В экспериментах исполь-зованы химические аналоги ауторегуляторных d
1 – фак-
торов из группы алкилоксибензолов: гексилрезорцин (С6-АОБ) и метилрезорцин (С7-АОБ) (ИНМИ Р АН г. Мо
сква эль-Регистан Г.И., Николаев Ю.А.). Изучение
ростовых свойств C.albicans проводили на 8-каналь-ном фотометре ELx808 (BioTek, США) в течении 24 часов. Алкилоксибензолы вносили в питательную сре-ду в концентрациях 0,1 мкг/мл; 1,0 мкг/мл и 10 мкг/мл. Опыты были проведены в двух вариантах. В первом варианте фактор присутствовал в среде на протяжении всего времени роста культуры. Во втором варианте действие фактора было ограничено по времени: соин-кубирование исследуемой культуры и АОБ в течение 30 минут, после чего фактор удалялся из среды путем отмыва клеток гриба физиологическим раствором. В качестве контроля использовалась бульонная культура C.albicans без внесения в среду алкилоксибензолов.
Биология дрожжей 283
Результаты: Установлено влияние химических ана-
логов С6 и С7 алкилоксибензолов на ростовые свойс-
тва C.albicans. Присутствие метилрезорцина в среде на протяжение всего времени роста штамма приводи-ло к угнетению ростовых свойств дрожжевого гриба. Отмечено снижение оптической плотности бульонной культуры C.albicans при концентрации фактора (С7-АОБ)
0,1 мкг/мл – в среднем на 6,7 %; 1,0 мкг/мл- на
7 %, 10 мкг/мл- на 52 % от исходных значений. При кратковременном воздействии метилрезорцина кри-вые роста культуры не изменялись. Оптическая плот-ность бульонной культуры C.albicans при различных концентрациях С7-АОБ колебались в пределах кон-трольных значений. Присутствие гексилрезорцина в среде на протяжение всего времени эксперимента при-водило к еще большему угнетению роста C.albicans по сравнению с метилрезорцином. Оптическая плотность C.albicans при внесении С6-АОБ в концентрации 0,1; 1,0 и 10 мкг/мл снижалась соответственно в среднем на 19
%; 44 % и 60 % от исходных значений. Кривые
роста культуры гриба при кратковременном действии С6-АОБ не изменялись.
Заключение: установлено, что алкилоксибензолы,
являющиеся ауторегуляторами микробного метаболиз-ма бактерий способны влиять на грибы рода Candida, угнетая их ростовые свойства. Степень угнетения роста C.albicans зависела от концентрации АОБ в среде и дли-тельности воздействия вносимых факторов. Наиболь-шее угнетение ростовых свойств C.albicans отмечалось при концентрации в среде алкилоксибензолов 10 мкг/мл и присутствии АОБ на протяжении всего времени роста гриба. Таким образом, нельзя исключить роль алкилок-сибензолов, как регулирующего фактора в «эффектах кворума» популяции грибов рода Candida.
The market of mycopesticides presents the formula-
tions based on different groups of hyphomycetous fungi
for control of noxious organisms for people. These groups include several ecological groups: antagonistic fungi for control of plant diseases; predatory and nematopathogenic fungi for control of noxious nematodes; acaripathogenic fungi for control of noxious mites; entomopathogenic fun-gi for control of noxious insects.
As a rule all hyphomycetous fungi form stable conidia
superficially on solid substratum providing optimal aera-tion. There are two principal mass-production technologies of fungi guaranteeing these conditions. The first variant is a two stage technology based on submerged cultivation of fungi, and subsequent transfer of fungal biomass to flat-bottom bathes to achieve sporulation (Сикура, Примак, 1970). The second variant is based on utilization of differ-ent solid nutrient substrata (Теленга и др. 1959; Король, 1968; Gouli
S. and Gouli v., 1997). Each of these methods
has several limitations. The most important limitations for the two stage method are the following: a large industrial area is needed for production; prevention of contamination is difficult; it is complicated to mechanize and automation of production process. The limitations for production on solid substrata include next: labor consuming character; utilization of food grain; difficulties with separation of air conidia; difficulties with mechanization and automation of technological processes.
The new technology of mass-production and appli-
cation of hyphomycetous fungi is based on the utiliza-tion of double-layer rolls. The new technology includes two steps. The first step is submerged cultivation of fungi on liquid nutrient medium, and than fungal biomass ob-tained after submerged fermentation is distributed on pa-per or fabric tape. Additional tape with irregular surface (f
or example the Bubble packing Material) provides aer-
ation. The paper or fabric is a solid substratum or carrier for fungi. Conidia can be separated from carrier or can be used directly as insect traps, for plant roots and seeds protection. The new technology gives significantly more air conidia in the comparison with tradition two step method, and all technological processes can be mecha-nized and automated.Раздел 11
ФуНГИцИДы И АНТИМИКОТИКИ
NEW pOssIbILITY fOR pRODUCTION AND
UTILIz
ATION Of fUNGI UsEfUL fOR pEsT CONTROL
Gouli V .V ., Gouli S.Y.
university of V
ermont,
burlington, Vermont, uSa
У ЛЬТР АСТРУКТУР А ДЕРМАТОФИТОВ И ЕЕ ИЗМЕНЕНИЕ
ПОД ДЕЙСТВИЕМ ТЕРБИНАФИНА (ЛАМИЗИЛА)
Акышбаева К.С.
казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова,
Алма-ата, казахстан
Число случаев дерматомикозов в Казахстане еже-
годно увеличивается, значительную часть которых (более
80 %) составляют грибковые заболевания,
обусловленные дерматофитами. Одним из наиболее распространенных и длительно протекающих, явля-ется микоз, обусловленный красным трихофитоном- рубромикоз, при котором показана возможность лим-фо-гематогенного пути распространения инфекции, что играет немаловажное значение для развития ге-нерализованных форм заболевания. Процент случаев неудач и рецидивов заболевания составляет: от 20–30 до 70–80
%. Такой высокий процент колебаний зави-
сит от адекватности выбора терапии. Наиболее эффек-тивным подходом к лечению грибковых заболеваний кожи является этиотропная терапия системными ан-тимикотическими препаратами, среди которых особо выделяется тербинафин (ламизил), что обосновано преимущественным его действием на дерматофиты.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 286
Самое главное действие ламизила – это фунгицидное,
в меньшей степени – фунгистатическое.
Все вышеизложенное позволило нам провести ис-
следование по изучению механизма действия лами-зила на дерматофиты. В качестве модельной системы был выбран Tr. rubrum- как один из распространенных этиологических агентов при дерматомикозе.
Вопрос о динамике ультраструктурных изменений
гифов и макроконидий T.rubrum под влиянием анти-микотических препаратов мало освещен. Имеются лишь единичные исследования по данному вопросу. Ранее нами были проведены электронномикроскопи-ческие исследования по изучению ультраструктуры Tr.rubrum, роли апикального сегмента в репродук-ции гриба, механизме действия гризеофульфина на Tr.rubrum, что позволило нами провести ультраструк-турные параллели.
При воздействии 1 терапевтической концентра-
ции ламизила наблюдаются выраженные изменения, которые соответствуют изменениям, наблюдаемым при концентрации гризеофульфина в 10–100 раз боль-шей. В цитоплазме отмечены значительные вакуоли, клеточная стенка на отдельных участках истончена и разделена расширенным периплазматическим про-странством. Значительная часть клеток теряет свое ха-рактерное строение, цитоплазма разрежена, клеточная стенка гифов истончена, на некоторых участках она фрагментирована. Плазматическая мембрана не выяв-ляется.На основе полученных данных можно констати-
ровать, что ламизил, проникая в клетку гриба, перво-начально вызывает изменения в цитоплазме, характе-ризующихся разрежением цитоплазы и образованием осмиофильных телец. Все это свидетельствует о выра-женном фунгицидном действии препарата ламизиле.
При действии 10 терапевтических доз препарат
вызывает глубокие нарушения белоксинтезирующей и гликолитической систем клетки, о чем свидетельству-ет исчезновение рибосом, глыбок гликогена и внутри-цитоплазматических мембранных структур.
Отмечена устойчивость микроконидий, что опреде-
ляется морфологической особенностью (мощная кле-точная стенка) и сниженной метаболистической актив-ностью. Выявлен факт сохранения жизнеспособных клеток гриба внутригифально, что можно оценить как приспособительный механизм. При действии больших концентраций препарата (100 терапевтических доз) отмечены структурные изменения в виде фрагменти-рованных компонентов гриба, клеточная стенка истон-чается, плазматическая мембрана большей частью не выявляется, в цитоплазме наблюдается почти полное исчезновение рибосом и гликогена, что свидетельству-ет о блокировании метаболической активности гриба..
Таким образом, проведенные электронномикроско-
пические исследования показали, что ламизил вызыва-ет значительные структурные изменения дерматофи-тов, свидетельствующие о выраженном фунгицидном действии препарата.
ОТР АБОТАННЫЕ ПИВНЫЕ ДРОЖЖИ – КОМПОНЕНТ СРЕД
ДЛЯ ПРОМЫШЛЕННОГ
О ПРОИЗВОДСТВА БИОПРЕПАР АТОВ – ФУНГИЦИДОВ
Асабина Е.А., Четвериков С.П., Логинов О.Н.
Институт биологии Уфимского научного центра РАН,
Уфа
Биологические средства защиты растений являют-
ся единственной альтернативой химическим фунгици-дам с точки зрения природоохранного земледелия.
Наиболее подробно изученными бактериями-анта-
гонистами фитопатогенных грибов являются предста-вители рода Pseudomonas. Они обладают различными
механизмами положительного влияния на растения.
При производстве биопрепаратов на основе бакте-
рий рода Pseudomonas для практического использова-
ния в агробиотехнологии основной проблемой являет-ся дорогая питательная среда. Известные питательные среды для культивирования псевдомонад, такие как среда Кинга, среда LB, содержат в своем составе такие дорогостоящие компоненты как пептон, дрожжевой экстракт.
Нами была разработана с применением метода ма-
тематического планирования эксперимента питатель-ная среда на основе автолизата отработанных пивных дрожжей для промышленного производства штамма Pseudomonas aureofaciens И
Б 51 – основы биопрепара-
та –
фунгицида «Елена» – с высоким титром клеток и
широким спектром антагонистической активности.Титр клеток на разработанной питательной среде
дох
одил до 2,2∙1010 КОЕ/мл культуральной жидкости,
что вполне удовлетворяет условиям промышленного культивирования микроорганизмов.
Таблица
Фунгицидная активность микроорганизмов био-
препарат
а – фунгицида «Елена»
Фитопатоген Диаметр зоны подавления роста
гриба, мм
Среда Кинг В Новая среда
bipolaris sor
okiniana 32,5±1,0 35,0±1,5
alternaria alternata 19,0±1,5
28,0±1,0
Fusarium gibbosum 22,0±0,5 20,0±1,0
Fusarium avenaceum 22,0±1,5 22,0±1,0
Fusarium oxysporum 20,0±1,0 12,0±0,5
Fusarium nivale 15,5±1,0 15,0±0,5
Антагонистическое действие биологического фун-
гицида в отношении грибов-фитопатогенов, оцененное зонами подавления их роста, представлено в таблице.
Таким образом, на основе отработанных пивных
дрожжей разработана недорогая питательная среда для
Фунгициды и антимикотики 287
промышленного производства биопрепарата – фунги-
цида «Елена» без потери фунгицидной активности от-носительно активности микроорганизмов препарата, выращенных на классическ
ой среде Кинг В.
АНТИМИКОТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НОВОГО
БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАР АТА «ФАРГАЛС»
Баженов Л.Г., Артемова Е.В., Шаниева З.А.
Ре
спубликанский специализированный центр хирургии им. ак. в. вахидова,
Ташкент, Узбекистан
В последние годы повсеместно наблюдается уве-
личение частоты грибковых поражений различных органов и систем. Однако имеющиеся антимикотики не всегда обеспечивают необходимый терапевтичес-кий эффект. Кроме того, многие из них достаточно токсичны и вызывают серьезные побочные эффекты. Поэтому весьма актуальным представляется поиск и разработка новых более эффективных и менее токсич-ных противогрибковых средств.
Целью данного исследования явилось изучение анти-
микотических свойств нового препарата «ФарГ АЛС» в сравнении с известными антимикотиками и определение перспектив его клинического применения. Препарат «Фар-Г А
ЛС» ( farGALS) (ООО «N pAf farGALS», г . Ташкент)
входит в фармакотерапевтическую группу: «антисепти-ческие и ранозаживляющие средства», зарегистрирован Фармкомитетом Минздрава Республики Узбекистан и разрешен к клиническому применению. Он представля-ет собой стерильную водную вытяжку из среды культи-вирования автотрофных железоокисляющих бактерий и имеет вид красноватой жидкости с кислой реакцией (рН 3,0) и вяжущим действием. Препарат не оказывает раздражающего действия на ткани и предназначен для наружного применения. Однако в настоящее время изу-чается возможность использования «ФарГ АЛСа» внутрь (per os). Наши предварительные исследования показали его высокую антибактериальную активность. В качестве тест-культур использовали 22 штамма
грибов рода Candida: C. albicans (3 шт.), С. tropicalis ( 5 шт), C. parapsilosis ( 5 шт), С. famata (3 шт.), C. globrata ( 3 шт.), и C. krusei (3 шт.). Противогрибковую актив-ность препарата «ФарГАЛС» и других антимикотиков (амфотерицин В, нистатин, клотримазол, итраконазол, кетоконазол, флуконазол, нитроксолин, цитеал и ани-линовые красители
– метиленовый синий и бриллиан-
товый зеленый) определяли на среде Сабуро методом диффузии в агар.
У становлено, что «ФарГАЛС» ингибировал рост
всех изученных штаммов Candida spp., зоны задержки их роста составляли от 25 до 37 мм. Также все штам-мов были чувствительны к нитроксолину, цитеалу и бриллиантовому зеленому. К амфотерицину В и кето-ко
назолу чувствительными оказались 90,9 % штаммов
(устойчивы: 1 шт. C. albicans и 1 шт. С. tropicalis), к флу-ко
назолу – 77,3 % (резистентны: 2 шт. C. globrata и 3 шт.
C. krusei), к нистатину и метиленовой сини – по 72,7 %,
клотримазолу и итраконазолу – по 50,0 % штаммов.
Таким образом, «ФарГАЛС» характеризуется выра-
женной активностью против грибов рода Candida. До-полнительными преимуществами препарата являются его антибактериальные свойства, экономичность и от-сутствие побочных эффектов. Сказанное обуславлива-ет целесообразность широкого внедрения препарата в клиническую практику.
ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИБИОТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ АНТИГИСТАМИННЫХ,
ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРЕПАР АТОВ И ПРИМЕНЕНИЕ
ИХ В ПЕДИАТРИИ ПРИ АТОПИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
Горюнов А.В., Лихачев А.Н.
Научный центр здоровья детей РАМН,
Москва
Московский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
В отдельные годы с благоприятными гидротермичес-
кими и другими сезонными факторами вегетационных периодов, а также и условия урбанизированных экосис-тем, включая помещения зданий различного назначе-ния, способствующих развитию микромицетов, могут служить причиной массового накопления пропагул гри-бов в аэрозоле воздуха. Входя в состав микобиоты аэ-розоля, оппортунистические виды способны вызывать микотические заболевания и микогенную аллергию, особенно у людей с нарушениями иммунореактивнос-ти
их организма. эпидемиологические и клинические
исследования проведенные в разных странах выявили высокую распространенность микогенной аллергии. По данным Н.Д., Н.Д. Титовой (2006) частота выявления сенсибилизации при бронхиальной астме варьирует от 30
до 60 %. В настоящее время в литературе имеются
обширные данные по исследованию и перспективности применения антимикотиков при лечении микотических заболеваний у детей и взрослых, наиболее часто прояв-ляющихся у пациентов с иммунодепрессией. При этом
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 288
установлена неоднозначная эффективность действия
многих антимикотиков на ряд возбудителей микозов, а также выявлена вероятность наличия у патогенов устой-чивых и появления резистентных форм после их приме-нения. (Климко, Колбин, 2005). При лечении классичес-ких аллергических заболеваний, включая проявление с микогенной этиологией, применяют антигистаминные препараты. Разработанные рекомендации их приме-нения указывают на необходимость индивидуальных программ лечения (O’Hollaren, 1998; Сергеев, Гусева, 2005). Однако, практически отсутствуют данные о не-посредственном воздействии препаратов ксизала, ру-зама, кленила, сингуляра, используемых в педиатрии при лечении атопических заболеваний у детей на по-те
нциальных возбудителей аллергии – представителей
оппортунистической микобиоты.
Целью настоящего исследования являлось опреде-
ление прямого воздействия медицинских препаратов применяющихся
в педиатрии – ксизала, рузама, кле-
нила, сингуляра на прорастание конидий и развитие культур оппортунистических нижеуказанных видов грибов, пропагулы которых наиболее часто встреча-ющиеся в аэрозоле воздуха и способных вызывать биокоррозию различных материалов: asper
gillus niger ,
asper
gillus flavus, asper gillus terreus, alternaria alternata,
cladosporium herbarum, Penicillium ochro-chloron,
Penicillium brevi-compactum, Penicillium chrysogenum, Penicillium purpurogenum, Penicillium cyclopium, Fusarium moniliforme, Тrichoderma harzianum . Опре-
деление фунгистатического или фунгицидного дейс-тивия ксизала, рузама, кленила, сингуляра проводили, пользуя метод диффузии данных препаратов в агар, помещая их водные растворы в лунки или пропитывая фильтровальные диски (Егоров Н.С., 1969). Водные растворы приготавливали путем растворения одной таблетки или одну инстилляцию препарата в 10 мл дистиллированной воды. Газон культур создавали пу-тем инокуляции агаризованной среды (сусло-агар) ко-нидиальной суспензией каждого вида грибов. В лунки или на фильтровальные диски вносили по 0,3 мл пре-парата. Конидиальная суспензия ряда грибов, рекомен-дованных ГОСТ-9.048-89 для определения грибостой-кости материалов, готовилась путем смыва культур с «косяков» инкубированных на сусло-агаре. На 2-е сут-ки оценивалось возможное проявление фунгицидного или фунгистатического действия препаратов на тест культуры. Одновременно были изготовлены кониди-альные суспензии во взятых растворах препаратов для оценки процента прорастания конидий на предметных стеклах с
лунками. Антигистаминные препараты –
ксизал, рузам не оказывали влияния на прорастание конидий и последующее развитие тест-культур гри-бов. Отмечено лишь слабое ингибирование развития ростковых трубок. Противовоспалительные препара-ты
– сингуляр, кленил – также не влияли на развитие
конидий. Проведенные опыты показали, что данные препараты при прямом воздействии на грибы не про-являли фунгицидного и фунгистатического действия, а также не обладают антибиотической активностью при тестировании их водных растворов методом диффузии в агар. э
то дает основание заключить, что их лечебное
действие проявляется опосредовано – через активиза-цию иммунной системы.
Данные препараты широко применяются в педиат-
рии для лечения атопических заболеваний. Как показа-ла практика наиболее эффективно применение ксизала при лечении круглогодичного и сезонного аллергичес-кого ринита, аллергического конъюнктивита, крапив-нице, отека Квинке, аллергических дерматозов детям старше 6 лет в дозе 5мг (1таблетка в сутки за 1 раз, неза-висимо от приема пищи). Рузам оказывает благоприят-ное влияние на течение таких аллергических (атопичес-ких) болезней как, бронхиальная астма, аллергический ринит, атопический дерматит. Хороший эффект имеют инъекции препарата, проводимых 1 раз в неделю разо-во
й дозой для детей от 2 до 4 лет – 0,05–0,075 мл, от 3 до
12 лет – 0,1 мл, старше 12 лет – 0,2 мл. Кленил – новый
ингаляционный препарат для базовой терапии бронхи-альной астмы любой степени тяжести назначают детям с 4 лет в дозе 50 мкг, от 6 до 12 лет по 250 мкг в случае если необходимая суточная доза составляет 500 мкг и более. Сингуляр(монтелукаст натрия) применяют как противовоспалительное средство при аллергическом во
спалении верхних дыхательных путей – бронхиаль-
ной астме, аллергическом рините в дозе для детей от 6 до 14 лет 5мг, c 15 лет по 10 мг 1 раз в сутки.
АНТАГОНИСТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СПОРОВЫХ ПРОБИОТИКОВ
В ОТНОШЕНИИ КЛИНИЧЕСКИХ ШТАММОВ ГРИБОВ РОДА candida ,
ВЫДЕЛЕННЫХ
ОТ ПАЦИЕНТОВ КАРДИОХИРУРГИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ.
Давыдов Д.С.1, Мефёд К.М.1, Габриэлян Н.И.2, Горская Е.М.2, Осипова И.Г.1
1 ФГУН ГИСк им. л. А. Тарасевича Роспотребнадзора,
Москва
2 ФГУ НИИТиИо Росмедтехнологий,
Москва
В настоящее время отмечается повышение роли
грибов рода candida в этиологии госпитальных ин-
фекций, что является следствием как неблагоприят-ного побочного действия антибиотиков, так и форми-рования лекарственной устойчивости под действием значительного числа новых антимикотических препа-ратов. Проблема послеоперационных инфекционных осложнений, вызванных условно-патогенными микро-организмами, имеет огромное значение в хирургичес-кой практике. В кардиохирургии и трансплантологии
Фунгициды и антимикотики 289
риск развития инфекций особенно велик. это связано
с иммуносупрессивным состоянием пациентов транс-
плантологического профиля, а также техническими особенностями оперативного вмешательства, напри-мер, использованием систем искусственного кровооб-ращения.
Таким образом, поиск альтернативных препаратов
для профилактики и лечения кандидозной инфекции, применение которых при высокой клинической эф-фективности способно минимизировать побочные эф-фекты антимикробной терапии, является чрезвычайно актуальной задачей.
Целью настоящего исследования явилось изучение
антагонистической активности российских пробиоти-ческих препаратов на основе спорообразующих бакте-
рий рода bacillus
в отношении клинических штаммов
грибов рода candida .
Материалы и методыВ исследовании использованы 4 пробиотических
препарата, среди которых коммерческие пробиоти-ки cпоробактерин ( b.
subtilis 534; ООО «Бакорен»,
Оренбург), биоспорин ( b. subtilis 3, b. licheniformis 31;
ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ, Екатеринбург), а также пре-параты,
находящиеся в разработке – витаспорин ( b.
subtilis 11B), ирилис (b. subtilis 07, b. licheniformis 09).
Использованы 28 штаммов грибов candida spp., выде-
ленных от пациентов кардиохирургического отделения стационара НИИ трансплантологии и искусственных органов (17
штаммов из мочи, 7 – из отделяемого ран,
4 – в смыве с трахеального катетера).
Антагонистическую активность определяли на ага-
ризованной среде Гаузе №2 методом отсроченного ан-тагонизма. В соответствии с принятой практикой анта-гонистическую активность считали эффективной при средних (10–15 мм) и высоких (>15 мм) показателях. Опыт воспроизводился не менее пяти раз.
РезультатыПроведенные исследования продемонстрировали
активность всех 4 препаратов в отношении 21 из 28 клинических штаммов Candida. Все штаммы, в от-ношении которых не обнаружена антагонистическая активность пробиотиков, выделены из мочи. Средняя величина зоны задержки роста составила для споро-ба
ктерина 13,7±3,6 мм, для биоспорина – 12,9±3,2
мм, для ирилиса – 11,9±2,8 мм, для витаспорина –
11,8±1,9 мм. Полученные данные свидетельствуют о том, что пробиотические препараты были эффектив-ны
в отношении 75 % штаммов Candida, возбудителей
госпитальных инфекций кардиохирургических паци-ентов. Наиболее интенсивно проявлялась антагонис-ти
ческая активность коммерческих препаратов – спо-
робактерина и биоспорина. Результаты проведенного исследования позволяют считать возможным приме-нение споровых бациллярных пробиотиков в качест-ве эффективного средства при терапии кандидозных инфекций, в т. ч. нозокомиальных.
ПРИМЕНЕНИЕ эКСПРЕСС-МЕТОДА ПРИ ОЦЕНКЕ ФУНГИЦИДНОЙ
АКТИВНОСТИ ПРЕПАР АТОВ, СОДЕРЖАЩИХ НАНОЧАСТИЦЫ МЕТАЛЛОВ
Дмитриева М.Б., Ребрикова Н.Л.
ФГНИУ Государственный научно-исследовательский институт реставрации,
Москва
В нашу лабораторию часто обращаются химики-
технологи с просьбой провести оценку биоцидных свойств того, или иного препарата с возможной перс-пективой применения их в реставрационной и музей-ной прак
тике. это могут быть как природные вещес-
тва, так и синтетические. После оценки биоцидного действия веществ в чистом виде следует проверить их действие непосредственно на материалах, которые предполагается защищать.
Представленный ниже экспресс-метод позволяет
в достаточно короткие сроки выполнить эту задачу.
Подготовленные образцы материалов, обработан-
ные биоцидами, помещают в чашки Петри на подлож-ку из голодного агара. Затем зааражают образцы путем нанесения заранее приготовленной питательной среды со спорами тест-культур на поверхность образцов с ис-пользованием стерильной москитной сетки и шпателя. В качестве тест-культур мы используем разные виды плесневых грибов, являющихся частыми биоагентами в составе биоповреждений на тех материалах, которые мы тестируем.
При таком заражении образца мы имитируем ус-
ловия естественного заражения, когда в присутствии органических загрязнений и повышенной влажности воздуха, происходит развитие микромицетов. Споры достаточно равномерно распределены в тонком слое питательной среды, некоторые споры находятся не-посредственно на материале, фунгистойкость которого мы тестируем. Таким образом, мы имеем возможность непосредственно наблюдать влияние подложки (образ-ца материала) на процесс прорастания и дальнейшего развития спор. Контролем служат образцы материа-лов, ничем не обработанные.
Сравнение характера роста на опытных образцах и
в контроле позволяет количественно оценить степень фунгистойкости материалов. В последние годы этот метод успешно применяется в нашей лаборатории при тестировании образцов различных материалов, обрабо-танных наноразмерными частицами металлов в разных вариантах. Совместно с ЗАО Концерн «Наноиндустрия» был проведен ряд испытаний фунгицидных свойств препаратов, содержащих наночастицы серебра, меди и железа. Применение препаратов на основе наночастиц металлов имеет ряд преимуществ, однако вопрос о мас-совом их применении в качестве биоцидов находится на стадии изучения и всестороннего анализа.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 290
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ MG2+ НА АНТИФУНГАЛЬНОЕ
ДЕЙСТВИЕ ПРОИЗВОДНОГО АДАМАНТАНА
Дудикова Д.М., Романова Е.А., Врынчану Н.А.
ГУ Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины,
киев
В настоящее время, несмотря на наличие большо-
го количества антигрибковых препаратов, наблюдает-
ся увеличение заболеваемости населения микозами. Такая ситуация в значительной степени обусловлена формированием устойчивости грибов к действию ан-тифунгальных препаратов. Одним из путей борьбы с резистентностью возбудителей является поиск новых высокоактивных антимикробных соединений и разра-ботка на их основе эффективных препаратов. Однако не исключается возможность изменения активности антимикробного препарата под воздействием ионов макро-
и микроэлементов. это может быть вызвано
как изменением пространственной структуры самого препарата, так и повышением или снижением устой-чивости собственно микробной клетки при участии ионов биометаллов.
Магний, принадлежащий к числу физиологически
активных металлов, играет важную роль в жизнеде-ятельности микроорганизмов. Основной его функцией является обеспечение нормального обмена веществ и роста микроорганизмов путем активации фермен-тов.
В организме человека около 60 % сывороточного
магния ионизированы, причем Mg2+ – эффективная форма, необходимая для восприятия клетками. Дефи-цит магния повышает чувствительность организма к бактериальной и вирусной инфекции. Ионы магния повышают антимикробную активность антибиотиков пенициллинового ряда за счет снижения активности продуцирования в-лактамаз бактериальной клеткой.
Содержание магния в сыворотке крови здоровых
детей со
ставляет 0,74–1,15 ммоль/л, у взрослых –
0,75–1,26 ммоль/л. Уровень магния в сыворотке крови 0,5–0,7 ммоль/л свидетельствует об умеренной недо-статочности этого металла в организме. Содержание магния ниже 0,5 ммоль/л указывает на выраженную недостаточность, угрожающую жизни человека.
Целью нашей работы было исследование действия
ионов Mg
2+ на степень выраженности антифунгальной
активности производного адамантана АМ-166.
Материалы и методы: в работе использовался эта-
лонный штамм грибов candida albicans NCTC 885/663.
Антифунгальные свойства изучали методом серийных микроразведений в питательной среде Сабуро. Посев-ная доза составляла 10
6 грибных элементов на 1 мл
питательной среды. Действие Mg2+ (MgCl2, водные
растворы) исследовали в трех концентрациях: – 0,005 (0,19 ммоль/л); – 0,025 (0,99 ммоль/л) и – 0,125 (4,8 ммоль /л) мг/мл (в пересчете на магний).
Планшеты инкубировали в термостате при 35–
37
°С на протяжении 24 ч. О степени выраженности
антифунгального действия соединения АМ-166 суди-ли по МПК, которую определяли визуально по нали-чию или отсутствию роста микроорганизмов. Опыты проводили в трех повторах.
Результаты: установлено, что МПК вещества АМ-166
по отношению к данному штамму гриба составляет 1,25 мкг/мл. При внесении ионов металла в физиологической концентрации этот показатель не изменяется. При кон-центрациях Mg
2+ в пять раз большей или меньшей МПК
соединения АМ-166 увеличивается в 1,5–2,5 раза.
Выводы: ионы металла в физиологической кон-
центрации (0,025 мг/мл) не изменяют антимикробной действие адамантансодержащего соединения, в то вре-мя, как в 5 раз большие или меньшие количества не-значительно уменьшают этот эффект. Причины такого действия Mg
2+ требуют дальнейшего изучения.
УСТОЙЧИВОСТЬ К МАНКОЦЕБУ ШТАММОВ PHYT oPHTHora
inF
eSTanS И al Ternaria SP . ИЗ РОССИИ И БЕЛАРУСИ
Еланский С.Н.1, Пляхневич М.П.2, Романова С.С.1, Шеин С.А.1
, Александрова А.В.1, Милютина Д.И.1
1 Московский государственный университет им. ломоносова,
Москва
2 РУП Научно-практический центр Национальной академии наук
Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству,
Самохваловичи, Минский район, Белоруссия
Фитофтороз, вызываемый оомицетом phytophthora
infestans (Mont) de Bary, продолжает оставаться одним из самых вредоносных заболеваний картофеля и тома-та в России и Беларуси. В годы эпифитотий потери уро-жая о
т болезни на картофеле могут превышать 50 %, а
на томате – достигать 100 %. Некоторые представите-ли рода Alternaria также являются опасными парази-тами картофеля и томата. В сложившейся сельскохо-зяйственной практике решающее значение в борьбе с этими фитопатогенами принимает использование хи-мических средств защиты с различными механизмами действия. Одним из широко распространённых являет-ся контактный фунгицид манкоцеб, входящий в состав ряда коммерческих препаратов, зарегистрированных
Фунгициды и антимикотики 291
в России и Беларуси (Справочник…, 2007). Манкоцеб
образует химические комплексы с металлосодержа-щими белками патогена и этим ингибирует их актив-ность. Прежде всего, это касается ферментов энер-гетического обмена клетки, участвующих в синтезе АТФ (Al-Mughrabi, 2004). Мультисайтовый механизм действия препарата предполагает низкую вероятность возникновения форм, резистентных к манкоцебу. Мо-ниторинг резистентности штаммов патогенов к этому фунгициду является необходимым условием для на-учного обоснования эффективного применения этого препарата в сельском хозяйстве.
Устойчивость к манкоцебу изучена у 24 штаммов
p.
infestans и у 22 изолятов Alternaria sp. Штаммы
p. infestans были выделены из поражённых фитофторо-
зом листьев и плодов томата и листьев картофеля, соб-ранных в Московской и Костромской областях, Крас-ноярск
ом и Приморском краях, республике Марий-э л,
Еврейском автономном округе и на острове Сахалин в России (13 изолятов), а также в Витебской, Брест-ской, Гомельской, Гродненской, Минской и Могилевс-кой областях Беларуси (11 изолятов). Среди штаммов Alternaria sp.
10 относились к виду A. solani, 11 – к
A. alternata, и один – не определённый до вида, с кони-диями среднего размера. Штаммы Alternaria sp. были выделены из листьев томата и картофеля, собранных в Московской, Астраханской и Новгородской областях, Ст
авропольском крае, а также в республике Марий-э л.
Тестирование проводилось на агаризованной овсяной среде
(для штаммов p. infestans) и на агаризованной
среде на основе пивного сусла (для штаммов Alternaria sp.). Изучался рост колоний исследуемых штаммов на среде с концентрацией манкоцеба 1, 10 и 50 ppm (для p.
infestans) и 100 и 500 ppm (для Alternaria sp.). Учиты-
валась скорость роста колонии на среде с добавлени-ем фунгицида относительно скорости роста на среде без фунгицида. На основании этого определяли пока-затель
EC50 – концентрацию манкоцеба, ингибирую-
щую рост ана
лизируемого изолята на 50 %.
Проведенные исследования показали, что устойчи-
вость штаммов P . infestans и alternaria sp. к манкоцебу
варьир
ует в широких пределах: 2,17 – 18,86 ppm для
P . infestans, 55,9 – 70,0 ppm для a. solani и 69,4 – 483,7
ppm для a. alternata .
Штаммы P . infestans оказались существенно более
чув
ствительными, чем alternaria sp.(в среднем в 14,5
раз). Вариабельность уровня резистентности россий-ских штаммов P . infestans (EC
50 от 2,17 до 18,86 ppm, дисперсия выборки 29,11) была более высокой, чем у белорусских штаммов (EC
50 от 4,02 до 14,94 ppm, дис-
персия
– 11,11). Интересно, что самым устойчивым
оказался штамм СХ 16 ВВ, выделенный в 2000 г. из по-раженного листа картофеля на острове Сахалин. Ранее проведенные исследования показали, что Сахалинские изоляты отличаются очень высоким уровнем устойчи-вости к фунгициду металаксил (Elansky et al., 2001). Вариабельность устойчивости штаммов P . infestans к
манкоцебу выявлена во всех исследованных популяци-ях России и Беларуси.
Штаммы a.
solani были существенно более чувс-
твительными к манкоцебу, чем a. alternata. Кроме того,
все изоляты a. solani обладали примерно одинаковым
уровнем устойчивости к фунгициду, в то время как сре-ди штаммов a.
alternata вариабельность устойчивости
была очень высокой. 3 из 12 штаммов a. alternata об-
ладали необычайно высокой резистентностью (EC50 от
182,5 до 483,7 ppm) и поэтому существенно отличались от
остальных штаммов этого вида. эти изоляты были
выделены из поражённых альтернариозом листьев то-ма
та из республики Марий-э л. Самой высокой устой-
чивостью (EC50 = 555,4) обладал штамм, не определён-
ный до вида, с конидиями среднего размера. В целом все штаммы рода alternaria
росли на среде со всеми
концентрациями фунгицида, варьировала только ско-рость роста. Напротив, штаммы P . infestans на среде
с максимальной концентрацией манкоцеба (50 ppm) росли
только в единичных случаях. это говорит о фун-
гицидном эффекте препарата по отношению к возбу-дителю фитофтороза и о фунгистатическом эффекте в отношении изолятов рода alternaria
. Работа выполне-
на при поддержке грантов РФФИ 07–04–96622 р_по-волжье_а, 07–04–90900 моб_снг_ст, 07–04–00274.
Литература.1. Справочник пестицидов и агрохимикатов, раз-
решенных к применению на территории Российской Федерации (2007)// М.: Агрорус.
2. k
.I. Al-Mughrabi (2004) Sensitivity of Jordanian
isolates of Alternaria solani to mancothane // phytopatho-
logical Meditterranean, №43, p.14–19.
3. S. Elansky, A. Smirnov, Y. Dyakov, A. Dolgova,
A.
filippov, B. kozlovsky, I. kozlovskaya, p. Russo,
C. Smart, W. fry (2001) Genotypic analysis of Russian
isolates of phytophthora infestans from the Moscow
region, Siberia and far East//J. phytopathology, 149 (10),
p. 605–611.
ВЛИЯНИЕ ГУМУСОВЫХ ВЕЩЕСТВ ПЕЛОИДОВ И ИХ ХЕЛАТНЫХ
КОМПЛЕКСОВ НА РОСТ И Р АЗВИТИЕ ГРИБОВ candida albicanS
Жернов Ю.В.
ГоУ вПо «Самарский государственный медицинский университет Росздрава»,
Самара
В современной клинической практике, за послед-
ние шесть лет, врачами инфекционного профиля была выявлена тенденция к росту антибиотикорезистент-ных штаммов грибов рода candida
.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 292
В связи с наблюдающейся в настоящее время тенден-
цией к росту числа грибковых заболеваний и появлению
штаммов, устойчивых к лекарственным средствам, серь-езное внимание уделяется поиску новых антифунгаль-ны
х препаратов. этидроновая кислота – основное дейс-
тв
ующее вещество препарата «Ксидифон» – обладает
антиоксидантным и противовоспалительным эффектом, а также является модулятором кислотно-щелочного ба-ланса полости рта и препятствует образованию минера-лизованных зубных отложений (Л.Н.Колобкова, 2006). Инсталляция дентальных имплантатов часто проводится на фоне воспалительно-деструктивных заболеваний па-родонта и изменений в составе микробиоценоза полости рта, который может быть причиной развития орального кандидоза. Поэтому, в стоматологической практике боль-шое внимание уделяется антисептикам, не оказывающих местного раздражающего действия и не нарушающих гомеостаз слизистых оболочек. В проведенных ранее исследованиях, мы обнаружили выраженный доза-за-висимый бактерицидный эффект раствора этидроновой кислоты в отношении грамположительной и грамотри-цательной флоры (№ заявки на патент 2007145631 от 11.12.2007 «Антисептическое средство и способ его при-менения для лечения и профилактики воспалительных заболеваний пародонта и периимплантатных тканей»). В связи с вышеизложенным, целью настоящего исследо-вания было изучение в эксперименте действия препа-рата «Ксидифон» на дрожжеподобные грибы can
dida
albicans – вида, наиболее часто вызывающего оппорту-
н
истические микозы человека.Разработка новых антимикотиков полностью не ре-
шила проблему резистентности грибов рода candida ,
а лишь отдалила её на неопределённый срок. Полу-синтетические антимикотики новых поколений анало-гичны по механизму действия природным, что делает их уязвимыми перед эволюционными изменениями микроорганизмов. Так же велики побочные эффекты химиотера
пии – токсические реакции, дисбактериозы,
аллергизирующее действие и иммунодепрессивные состояния. На сегодняшний день является актуальным разработка химиотерапевтических антимикотиков природного происхождения.
Целью нашего исследования стало изучение влия-
ния гумусовых веществ пелоидов и их хелатных комп-лексов с металлами на рост и развитие грибов candida
albicans
, выявление их микоцидной активности.
Для нашего эксперимента в качестве тест-культур
были выбраны грибы Candida albicans. Исследованию подверглись различные фракции гумусовых веществ пелоидов различной
концентрации (0,25 %; 0,1 %;
0,01 %): гуминовые кислоты (ГК), гиматомелановые кислоты (ГМК), фульвокислоты (ФК) и гумусовые кислоты
(ГсК) – как суммарный препарат, а также их
производные – хелатные комплексы с катионами ртути (II) и серебра. В качестве питательной среды, в соот-ветствии с общепринятым стандартом NCCLS, нами был выбран агар Мюллера-Хинтона.
Оценка результатов производилась относительно
зоны торможения роста тест-культуры микроорганиз-ма (мм).
Результаты исследования фракций гумусовых ве-
ществ показали, что они проявляют стимулирующую рост активность к Candida albicans в концентрациях меньше 0,1
%, и не оказывают эффекта на Candida
albicans в концентрациях больше 0,1 %.
По результатам можно предположить, что микос-
тимулирующей активностью по отношению candida
albicans
обладают вещества гумусовой природы мень-
шей концентрации, причём в одном из случаев вокруг колоний candida
albicans выделился пигмент желтого
цвета, что может являться продуктом метаболизма гу-миновых кислот.
Дальнейшему исследованию подверглись хелатные
комплексы гумусовых веществ с серебром и ртутью (II). Причём активным компонентом этого хелатком-плекса, проявляющим микоцидный эффект, является катион металла, а гумусовый компонент выполняет функцию: маскировки антигрибкового компонента; тропности препарата к микроорганизму; увеличива-ет проницаемость через биологические мембраны; уменьшает токсическое действия металла на организм человека.
Исследование микоцидной активности методом
«колодцев» дало положительный результат во всех слу-чаях, причем наиболее микоцидный эффект к candida
albicans да
л комплекс гуминовых кислот с серебром
(зона
подавления роста 25 мм), а наименьший – микос-
та
тический – дал комплекс фульвокислот и ртути (зона
подавления роста 9 мм).
Результаты исследования характеризуют препара-
ты гумусовых веществ пелоидов и их хелатных комп-лексов с металлами, как оптимальный компонент для дальнейшей разработки на их основе антимикотиков природного происхождения.
ФУНГИЦИДНЫЙ э ФФЕКТ ПРЕПАР АТА «КСИДИФОН»
В СИСТЕМАХ С candida albicanS IN vITRO
Заславская М.И.1, Лукоянова Т.В. 2, Булгаков В.С. 3, Шакеров И.И.2
1 кафедра микробиологии и иммунологии Г оУ вПо НижГМА Росздрава,
Нижний Новгород
2 МлПУ Стоматологическая поликлиника Нижегородского района,
Нижний Новгород
3 кафедра пропедевтики стоматологических заболеваний Г оУ вПо РУДН,
Москва
Фунгициды и антимикотики 293
В экспериментах использовали Candida albicans
штамм 601 (коллекция кафедры микробиологии и им-
мунологии ГОУ ВПО НижГМА Росздрава). C.albicans в дрожжевой фазе выращивали на агаре Сабуро (24 ч, 37
°С). Клетки отмывали и взвешивали в бульоне Са-
буро (104 кл/мл). В пробирки, содержащие суспензию C.albicans, добавляли препарат «Ксидифон» в конеч-ной к
онцентрации: 10 %, 5 % и 2 % (рекомендованная
терапевтическая концентрация), 1 % или 0,5 %. В кон-троле вместо препарата использовали забуференный физиологический раствор. Посевы инкубировали при 370 в течение 24 часов. После инкубации отбирали по 0,1 мл из пробирок и засевали на чашки Петри с ага-ром Сабуро. Подсчитывали количество колониеобра-зующих единиц на чашках после термостатирования (24 ч, 37
°С).
Установлено, что препарат «Ксидифон» в концент-
рациях 10
%, 5 % и 2 % (рекомендованная терапевти-
ческая концентрация) обладал выраженым фунгицид-ным э
ффектом (р<0,05). Концентрации раствора 1 % и
0,5 % не подавляли рост и размножение C.albicans.
Таким образом, на основании полученных данных,
можно рекомендовать использование терапевтических доз препарата «Ксидифон» в качестве орального анти-септика c выраженным антифунгальным эффектом в стоматологической практике.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ИЗОЛЯТОВ
Fu
Sarium spp . К НЕКОТ ОРЫМ ФУНГИЦИДАМ
Ильюк А.Г.
РУП Институт защиты растений,
д. Прилуки, Минский район, Белоруссия
Возникновение резистентности популяции патоге-
на на практике выражается в существенном снижении эффективности фунгицидов, а в некоторых случаях даже стимуляции развития болезни, и, как следствие, значительных потерях урожая зерна.
Была проанализирована структура изолятов При-
лукских популяций грибов F . culmorum, F . oxysporum,
F . poae, F . avenaceum по чувствительности к препара-там альто-супер (пропиконазол, 250 г/л + ципрокона-зо
л, 80 г/л), К э, фалькон (тебуконазол, 167 г/л + триа-
дименол,
43 г/л + спироксамин, 250 г/л), К э, харизма,
Кэ (флусилазол, 106,7 г/л + фамоксадон, 100 г/л).
Все изученные изоляты популяции F . poae характе-
ризовались высокой чувствительностью к препаратам фалькон (максимальный фактор резистентности (ФР) 19,2) и харизма (средний ФР 11,1) и сравнительно низ-кой к альто-супер.
В
популяции гриба f. culmorum отмечаелось сниже-
ние чувствительности изолятов ко всем вышеуказанным препаратам, более того, появление низкочувствитель-ны
х и резистентных форм. Так, 20 % изученных изоля-
тов оказались низкочувствительны к препарату хариз-ма
, а 5,5 и 5,6 % оказались резистентны к альто-супер и
фалькону, соответственно, т.к. имели ФР более 100. Та же
тенденция была присуща для изолятов f. avenaceum. Подавляющее большинство их (86,7–90,9 %) было
отнесено к группам высокочувствительных и чувс-твительных по отношению к изучаемым препаратам. Вместе с тем в популяции этого вида выявлено большее количество низкочувствительных к препарату харизма из
олятов – 9,1 % и резистентных – 13,3 и 9,8 % к альто-
супер и фалькону, соответственно.
Популяция F . oxysporum отличалась высокой чувс-
твительностью
к препаратам фалькон и альто-супер –
фактор резистентности всех изученных изолятов коле-бался в пределах от 1 до 10.
На основании полученных результатов установле-
но, что в популяциях грибов F . poae, F . culmorum, F .
avenaceum присутствуют низкочувствительные и ре-
зистентные формы к препаратам альто-супер и фаль-кон. Препарат харизма оказывал значительный ингиби-рующий эффект на рост колоний изолятов изучаемых грибов. В исследованиях не было выявлено изолятов с фактором резистентности более 100, т.е. резистентных к фунгициду харизма. Все изученные изоляты гриба F . oxysporum были высокочувствительны к препара-там альто-супер и фалькон. Следовательно, наличие низкочувствительных изолятов в популяциях грибов Fusarium spp. может быть одной из причин нестабиль-
ности действия фунгицидов.
СЪЕДОБНЫЕ УПАКОВОЧНЫЕ ПЛЕНКИ И ПОКРЫТИЯ,
ОБЛАДАЮЩИЕ ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Кузнецова Л.С., Нагула М.Н., Казакова Е.В., Кудрякова Г.Х.
ГоУ в
По Московский государственный университет прикладной биотехнологии,
Москва
Проблема получения экологически чистой упаков-
ки особенно остро стоит в последнее десятилетие в связи с резким ростом объемов применения полимер-ных материалов в ряде отраслей народного хозяйства и опасностью серьезного загрязнения окружающей сре-ды. В настоящее время в пищевой промышленности большое значение уделяется созданию принципиально новых упак
овочных материалов – нетоксичных, легко
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 294
утилизируемых, способных обеспечить эффективную
защиту продуктов от микробных поражений и воз-действия кислорода воздуха, предотвратить их усуш-ку в процессе производства и хранения. В этой связи ученые всего мира обращают внимание на создание и расширение ассортимента съедобных упаковочных материалов, употребляемых вместе с пищевыми про-дуктами, упрощающих дозирование и порционирова-ние продукции, не засоряющих внешней среды.
Анализ общемировых тенденций в материаловеде-
нии свидетельствует о приоритетном использовании в составе съедобных покрытий биополимеров, об-ладающих высокой сорбционной способностью, что предопределяет их положительное физиологическое воздействие на организм человека. Кроме того, боль-шинство природных полимеров являются прекрасной основой для иммобилизации консервирующих доба-вок, которая позволяет получать съедобные покрытия с выраженными антимикробными свойствами. В пос-ледние годы особое внимание направлено на создание съедобных пленок и покрытий на основе хитозана, яв-ляющегося перспективным биоматериалом будущего. Интерес к хитозану связан с такими его уникальными физиологическими и экологическими свойствами, как биосовместимость, биодеструкция, физиологическая активность при отсутствии токсичности, способность к связыванию тяжелых металлов, а также полным со-ответствием современным требованиям, предъявляе-мым к пищевым добавкам.
Целью представленной работы явилась разработка
съедобных покрытий на основе хитозана, предназна-ченных для пролонгированной защиты поверхности жиросодержащих мясных и молочных продуктов пи-тания от поражения мицелиальными грибами.
Разработан способ модификации хитозана, спо-
собствующий получению съедобной упаковки, обла-дающей выраженными фунгицидными свойствами. С целью прогнозирования изменения фунгицидной ак-тивности исследуемых образцов хитозана в присутс-твии модификатора проведена графо-аналитическая обработка полученных экспериментальных данных. Показано, что предложенное решение позволяет су-щественно минимизировать долю активных антимик-робных компонентов, вводимых в полимерную матри-цу, за счет иммобилизации их в поверхностном слое самого упаковочного материала, но не продукта.
Производственные испытания показали, что раз-
работанные съедобные покрытия положительно вли-яют на биотехнологические процессы производства мясных и молочных продуктов, характеризующиеся длительностью технологического цикла, в частности твердые сыры и сырокопченые колбасы. Установлено, что покрытия на основе хитозана надежно защищают продукты не только от микробных поражений, но и от окислительной порчи жиров посредством сохранения в поверхностном слое незаменимых полиненасыщен-ных жирных кислот.
Предложенное технологическое решение по фор-
мированию съедобных покрытий на поверхности мясных и молочных продуктов представляет интерес не только при получении экологически безопасных продуктов питания повседневного спроса, но и при выпуске пищевой продукции детского, лечебного и ле-чебно-профилактического назначения.
НОВЫЕ ПИЩЕВЫЕ ДОБАВКИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ
ПОВЕРХНОСТИ МЯСНЫХ ПРОДУКТОВ ОТ ПОР АЖЕНИЯ
МИЦЕЛИАЛЬНЫМИ ГРИБАМИ
Кузнецова Л.С., Михеева Н.В., Писменская В.Н.
ГоУ в
По Московский государственный университет прикладной биотехнологии,
Москва
Известно, что порчу продуктов питания иницииру-
ет поверхностная микрофлора, в составе которой пре-обладают мицелиальные грибы и дрожжи. Именно эти микроорганизмы первыми попадают на поверхность пищевой продукции, ухудшают ее вкус и товарный вид, создают благоприятные условия для развития болезнетворных бактерий. Ослизнению и плесневе-нию поверхности пищевых продуктов способствуют разнообразные нарушения санитарно-гигиенических условий и температурно-влажностных режимов про-изводства, хранения и транспортировки, что сущес-твенно ограничивает возможности их реализации в торговой сети.
Основной функцией колбасных оболочек являет-
ся защита продукта от воздействия микроорганизмов и неблагоприятных факторов внешней среды. Однако искусственные белковые и натуральные колбасные оболочки, довольно часто используемые в настоящее время в колбасном производстве, сами являются пре-красной средой для развития поверхностной микро-флоры. Поэтому для сохранения качества и товарного вида колбас используют различные противоплесневые препараты, модифицирующие оболочку таким обра-зом, что развитие микроорганизмов, попадающих на поверхность, становится невозможным.
Для противоплесневой защиты поверхности мяс-
ных продуктов в последние годы предлагают при-менять самые различные соединения, содержащие в своем составе химические консерванты или антибио-тики. При этом, в случае использования химических веществ, необходимо строго контролировать уровень их перехода в продукт, поскольку превышение кон-центрации многих консервирующих соединений недо-пустимо по токсикологическим и органолептическим
Фунгициды и антимикотики 295
показателям. Применение же антибиотиков в качестве
пищевых добавок не рекомендуется органами здраво-охранения практически всех стран.
В соответствии с современными международными
требованиями к сохранению качества и обеспечению микробиологической безопасности продуктов питания в проблемной научно-исследовательской лаборатории биологической защиты сырья и продуктов питания Московского государственного университета приклад-ной биотехнологии разработаны и внедрены в произ-водство комплексные пищевые добавки нового поко-ления «Деласепт» и «Микосепт». Особого внимания заслуживает тот факт, что основой пищевых добавок нового поколения является сбалансированный комп-лекс натуральных пищевых ингредиентов, выбранных в соответствии с СанПиН 2.3.2.1293–03, вследствие чего они не имеют количественных ограничений по применению. Добавки не содержат регламентируемых Минздравом РФ консервантов, антибиотиков, а так-же генетически модифицированных источников, что полностью исключает неблагоприятные последствия от их применения. Разработанные добавки рекомен-дованы Минздравом РФ для использования в пищевой промышленности для антимикробной и противоплес-невой обработки поверхности мясных продуктов. В настоящее время они уже используются мясоперера-батывающими предприятиями России.
Несмотря на все разнообразие предлагаемых для
антимикробной защиты препаратов, данные об их влиянии на микроструктуру колбасных оболочек ог-раничены. Целью представленной работы явилось исследование действия растворов комплексных пище-вых добавок «Деласепт» и «Микосепт» на изменения в микроструктуре искусственной белковой колбасной оболочки «Белкозин». В качестве контроля служили образцы колбасной оболочки «Белкозин», модифи-цированные дистиллированной водой и насыщенным раствором поваренной соли. Для изучения микрорель-ефа полимерных пленок использовали сканирующий электронный микроскоп фирмы Jeol-840 A. Образцы проб размером до 2 мм наклеивали электропроводным клеем на специальные металлические столики и напы-ляли золотом в установке ионного напыления тонких покрытий Jf
C-1100.
Визуальные изучения ультраструктуры и выбор ха-
рактерных участков для фотографирования осущест-влялся на демонстрационном дисплее скана. Широко-пленочный фотоаппарат «Никон» оптически связан со вторым экраном микроскопа. Изучение образцов про-изводили при двух номиналах ускоряющего напряже-ния 4 и 10 кВ, общем инструментальном увеличении (1ч10) x 10і.
В результате проведенных исследований выявле-
но, что при обработке колбасных оболочек раствора-ми поваренной соли их поверхность становится более ровной, сглаженной по сравнению с образцами, обра-ботанными дистиллированной водой. В структуре обо-лочек появляются микропустоты, в которых отчетливо видны кристаллы поваренной соли, особенно большие их скопления обнаруживаются внутри полостей бел-ковой оболочки.
При обработке колбасных оболочек раствором ан-
тимикробной добавки «Микосепт» коллагеновые во-локна обнаруживаются в набухшем виде, они хорошо пропитаны раствором, выявляется четко выраженная «гирляндовидная» структура волокон. На срезе кол-лагеновые волокна имеют упорядоченную структуру, микропустоты между волокнами заполнены кристал-лами солей органических кислот, входящих в состав добавки «Микосепт»
Обработка колбасных оболочек раствором другой
антимикробной добавки «Деласепт» делает оболочку более плотной, на срезе видна более упорядоченная структура коллагеновых волокон. Поверхность обо-лочки ровная, коллагеновые волокна плотно прилега-ют друг к другу, в результате чего микропустоты прак-тически не обнаруживаются.
Полученные результаты электронно-микроскопи-
ческих исследований коррелируют с прочностными характеристиками белковых оболочек, значения ко-торых у образцов, модифицированных дистиллиро-ванной водой, гораздо ниже, чем у оболочек, обрабо-танных растворами поваренной соли, а также добавок «Микосепт» и «Деласепт». Под действием раствора «Микосепт» происходит большее набухание колла-геновых волокон по сравнению с водой и раствором поваренной соли, что в конечном итоге способствует повышению «грибостойкости» модифицированных колбасных оболочек. Можно предположить, что высо-кая «грибостойкость» оболочек, модифицированных раствором «Микосепт», вызвана заполнением микро-пустот солями различных органических кислот, кото-рые препятствуют размножению микроорганизмов на поверхности оболочки.
Под действием раствора «Деласепт» также повы-
шается прочность оболочки на разрыв и прокол, что, согласно электронно-микроскопическим снимкам, до-стигается плотной и упорядоченной структурой воло-кон. По-видимому, основное действующее вещество исследуемой добавки закрепляется на поверхности оболочки и препятствует развитию нежелательной микрофлоры на поверхности колбас, обработанных за-щитным раствором.
Таким образом, полученные экспериментальные
данные позволяют выявить корреляцию между вли-янием исследованных растворов на микроструктуру оболочек с их грибостойкостью и эксплуатационными свойствами.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 296
Кровососущие комары являются переносчиками
свыше 150 возбудителей болезней человека и живот-
ных. Список болезней, переносимых кровососущими комарами постоянно увеличивается по мере появления новых данных о санитарно-эпидемиологическом бла-гополучии населения.
Одним из путей снижения риска заболевания че-
ловека и животных трансмиссивными болезнями яв-ляется борьба с переносчиками путем использования инсектицидных препаратов. Химические инсектици-ды для этой цели неприемлемы по санитарно-гигиени-ческим и экологическим требованиям, особенно в вод-ной среде обитания кровососущих комаров. Поэтому разработка эффективных и экологически безопасных биомоскитоцидов на основе штаммов микроорганиз-мов является актуальной задачей современной меди-цинской и санитарной биотехнологии.
Проведен скрининг штаммов энтомопатогенных
грибов из рабочей коллекции ГНЦ ПМБ на москито-цидную активность. Штаммы тестировали на личин-ках комаров Aedes aegypti. На первом этапе определяли активность мицелиальной культуры с концентрацией конидий 1×106 по показателю LT50 (средне-летальное время смертности), выращенной на плотной агаризо-ванной среде. На втором этапе оценивали активность фугата культуральной жидкости по величине средне-летальной концентрации (LC50) при выращивании грибов на жидкой питательной среде в качалочных колбах. Тестируемые штаммы классифицировали по активно
сти: LT50≤ 24 часа и LC50 ≤ 10 % разведен-
ного
фугата на первый день учета – высокоактивные;
LT50 ≤ 120 часов и LC50 1≤ 50 % от разведенного фу-гат
а – умеренно активные.
Всего было протестировано 180 штаммов из 48 родов
микромицетов. Штаммы с москитоцидной активностью присутствуют в родах met
arhizium, clonostachys, Pae-
ci
lomyces, Tolypocladium, Polycephalomyces, beauve-
ri
a, enthomophthora, cordyceps, botryotrichum, cal-ca
risporium, chrisosporium, dactilaria, engyodontium,
Sesquicillium, evlachovaea, Pestalotiopsis. Для большей
части грибов этого списка (в тексте они подчеркнуты) москитоцидные свойства не были известны.
Всего выявлен 41 штамм с москитоцидной актив-
ностью. Из них 11 штаммов являются высокоактив-ными: Chrysosporium keratinophilum, Calcarisporium arbuscula, Sesquicillium candelabrum, Clonostachys rosea (2
штамма), Metarhizium flavoviride, paecilomyces
farinosus, Tolypocladium cylindrosporum (3 штамма), pestalotiopsis
maculans. У перечисленных штаммов ак-
тивность фугата культуральной жидкости (LC50) со-став
ляет 5,5 –10,5 %; активность мицелиальной куль-
туры LT50 = 0,5 –1,2 суток.
30 штаммов отнесены нами к умеренно активным:
Beauveria bassiana (2 штамма), Botryotrichum pilu-liferum, Clonostachys rosea ( 2 штамма), Cordyceps mili-taris ( 2 штамма), Dactilaria sp., Engyodontium album, Enthomophthora sp., Conidiobolus obscurus, Evlachovaea kintrischica, Metarhizium anisopliae (4 штамма), Metarhi-zium album, Metarhizium sp., Metarhizium flavoviride, paecilomyces
farinosus, paecilomyces fumosoroseus
(3 штамма), paecilomyces sp., paecilomyces militaris,
polycephalomyces sp. (4 штамма), Simplicillium lamel-licola, Tolypocladium cylindrosporum. У перечисленных штаммов активность мицелиальной культуры LT50 = 1,3–5,6 суток; активность фугатов культуральной жидкости в большинстве случаев отсутствует. Только для неск
ольких штаммов LC50 составляет 25–50 %.
К настоящему времени скринингом на москито-
цидную ак
тивность охвачено только 15,0 % штаммов
энтомопатогенных грибов от общего их количества в рабочей коллекции ГНЦ ПМБ. По мере повышения объема скрининга следует ожидать существенного увеличения количества выявленных штаммов с моски-тоцидной активностью.
Работ
а поддержана грантом МНТЦ # 2338р «энто-
мопатогенные грибы и их метаболиты».ПОТЕНЦИАЛ эНТОМОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ КАК
ПРОДУЦЕНТОВ МОСКИТОЦИДНЫХ ПРЕПАР АТОВ
Лиховидов В.Е., Исангалин Ф.Ш., Наумов А.Н., Асланян Е.М., Быстрова Е.В.
ФГУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии»,
оболенск, Московская область
ИЗУЧЕНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ АНТИМИКОТИЧЕСКОГО
ШТАММА bacilluS SubTiliS
Лукманова К.А.1, Гиззатуллина С.В.1, Галимзянова Н.Ф.2,
Актуганов Г.Э.2, Мелентьев А.И.2, Трофимов В.А.1
1 Филиал «Иммунопрепарат» ФГУП НПо Микроген Мз РФ, лаборатория препаратов крови,
Уфа
2 Институт биологии Уфимского научного центра РАН, лаборатория прикладной микробиологии,
Уфа
В настоящее время дерматомикозы занимают одно
из ведущих мест среди инфекционных заболеваний (Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В., 2003). Несмотря на до-статочно широкий спектр антимикотиков, целесооб-разность поиска новых методов и подходов к лечению дерматомикозов очевидна. В практическом здравоохра-
Фунгициды и антимикотики 297
нении все более широко применяются биопрепараты,
полученные на основе микроорганизмов. Известно, что представители рода bacillus
проявляют антаго-
низм по отношению к candida , а также фитопатоген-
ным и сапротрофным микромицетам, обусловленный продукцией комплекса антигрибных соединений (ан-тибиотики, метаболиты неспецифического действия, гидролитические ферменты и др.). Наиболее активные штаммы бацилл-антагонистов могут быть перспектив-ными и для разработки на их основе антимикотиков.
Штамм b.
subtilis ИБ-54, выделенный в Институте
биологии УНЦ Р АН, проявляет антагонизм к широ-кому спектру фитопатогенных грибов, вызывающих корневые гнили зерновых культур. В экспериментах in
vitro нами была установлена высокая антагонистичес-кая активность этого штамма против дерматомицетов родов micr
osporum и Trichophyton. Жидкая культура
штамма сохраняла способность подавлять прораста-ние спор и развитие дерматомицетов даже при высо-кой степени разведения (10
7), что позволяет считать
его перспективной основой для разработки лекарс-твенного средства наружного применения при терапии дерматомикозов.
Внедрение в медицинскую практику биопрепарата
на основе микроорганизмов требует тщательного изу-чения исходного штамма. В связи с этим, проводили оценку вирулентности, токсичности и токсигенности B. subtilis ИБ-54 на белых мышах массой 15–17 г в со-ответствии с общепринятыми методиками. В течение срока наблюдения (5 суток) не выявили каких-либо при-знаков заболевания и гибели животных. Таким образом, полученные результаты показали, что штамм не обла-дает вирулентностью, токсичностью и токсигенностью. Исследование сенсибилизирующего действия культу-ральной жидкости B. subtilis ИБ-54 и биопрепарата в виде геля на его основе проводили на 30 белобоких мор-ских свинках массой 200–250 г путем 20 повторных на-кожных аппликаций на выстриженный участок кожи бо-ковой поверхности туловища размером 2×2 см по 5 раз в не
делю. В контрольной группе наносили 0,9 % раствор
хлорида натрия. Спустя 20 суток проводили тестирова-ние, вводя внутрикожно на интактном выстриженном участке кожи 0,05 мл соответствующего препарата и дл
я контроля реактивности – на другом выстриженном
участке внутрикожно 0,05 мл растворителя. Затем внут-ри
венно вводили по 0,5 мл 1 % раствора эванса и спус-
тя 30 мин оценивали реакцию. Полученные результаты исследований свидетельствует об отсутствии аллерги-зирующих свойств штамма и препарата на его основе при накожном применении.
Изучение плазмидного профиля штамма не выяви-
ло наличия плазмид, что исключает возможность го-ризонтального переноса представителям аборигенной микробиоты кожи человека нетипичных свойств.
Таким образом, комплекс проведенных исследова-
ний показывает возможность применения b.
subtilis
ИБ-54 для создания противогрибкового геля, что поз-волит снизить применение традиционных антимикоти-ков, повысить эффективность и безопасность лечения дерматомикозов.
ВЛИЯНИЕ э ФИРНЫХ МАСЕЛ НА РОСТ МИЦЕЛИЯ
ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
Поликсенова В.Д., Ахрамович Т.
Белорусский государственный университет,
Минск
Осознанное стремление снизить пестицидную на-
грузку при защите растений от патогенов активизиро-вало поиск веществ или комплексов природного про-исхождения, способных ограничить или ингибировать развитие возбудителей заболеваний. Как правило, это продукты вторичного метаболизма растений, бактерий, грибов, которые, по-видимому, и возникли в процессе длительного исторического развития как фактор защиты от «внешнего врага». Предметом наших исследований стало влияние эфирных масел, полученных из Cedrus virginiana, Monarda fistula, Coryandrum sativum, Salvia officinalis на вегетативный рост 4-х видов фитопатоген-ных грибов, борьба с которыми весьма затруднитель-на
: Botrytis cinerea, fusarium oxysporum f. lycopersici,
Alternaria panax, A. dauci. Грибы высевали на агаризо-ванную среду Чапека, в которую через 15 мин. после автоклавирования добавляли эфирные масла, создавая ко
нцентрацию 0,025 % или 0,05 %. Продолжительность
опыта составляла 12 дней, за это время в контроле гриб полностью покрывал всю чашку Петри. По отношению к B. сinerea наибольшей фунгицид-
ной активностью характеризовалось масло кориандра. При обеих концентрациях через 5 дней рост гриба от-сутствовал полностью, через 12 дней диаметр колоний не превыша
л 13 мм. эфирное масло монарды в кон-
центрации
0,05 % полностью подавляло рост мицелия
B. сinerea. этот же вариант оказался единственным,
в котором не отмечен рост мицелия f. оxysporum.
Alternaria panax относится к более специализирован-ным грибам. э
фирное масло кориандра тоже оказа-
лось здесь самым эффективным ингибитором мице-лиальног
о роста – он так и не начался. Значительный
фунгистатический эффект оказали также масла Cedrus virginiana и Salvia sclarea: под их влиянием колонии росли
медленно и к концу эксперимента достигли 17 –
35 мм против 90 мм в контроле. По отношению к A. dauci четкий фунгицидный эффект получен только от 0,05
% масла кориандра. Таким образом, эфирное мас-
ло кориандра и масло монарды могут рассматриваться как потенциальная основа для биопестицидов.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 298
эхинокандины – группа высокоэффективных про-
тивогрибковых средств, причем, наряду с сордарина-
ми, эхинокандины являются единственными антими-котическими препаратами грибного происхождения, вошедшими в клиническую практику за последние 15–20 лет. Такие представители эхинокандинов, как анидулафунгин, каспофунгин и микафунгин допуще-ны с 2002 года во многих странах, включая США, к клиническому применению, в том числе в терапии системных кандидамикозов. В различных стадиях исследования находятся также акулеацин А (проду-цент
– aspergillus aculeatus ), пневмокандин В (zalerion
arboricola
), энфумафунгин (Hormonema spp.) и папула-
кандины (Papularia sphaerosperma).
эхинок
андины представляют собой N-ацетилиро-
ванные гексапептиды, ковалентно связанные с али-фатиче
скими радикалами – производными жирных
кислот. Мишенью действия эхинокандинов является мембранный про
теин грибов – в-1, 3-D-глюкансинта-
за, основной фермент, участвующий в синтезе биопо-лимеров (прежде всего в-1, 3-D-глюкана) клеточной
стенки па
тогенных грибов [1]. эхинокандины связы-
ваются с в-1, 3-D-глюкансинтазой и ингибируют ее
по неконкурентному механизму. Определенный ами-нокислотный полиморфизм в доменах в-1, 3-D-глю-
кансинтазы может способствовать повышению устой-чивости патогенных штаммов asper
gillus fumigatus,
a.
flavus, candida albicans, c. glabrata, c. krusei, c.
tr
opicalis , Histoplasma capsulatum, cryptococcus neofor-
mans, Trichosporon beigelii и других микроорганизмов
к эхинокандинам. При этом, разумеется, повышается значение
МПК – минимальной подавляющей концент-
рации лекарственного препарата. Стоит отметить, что, наряду с повышением МПК в настоящее время при-нято также рассматривать несколько параметров для заключения о развитии лекарственной устойчивости у данного морбогенного штамма: применительно к теме нашего
исследования, это – специфические мутации в
fkS1-домене в-1, 3-D-глюкансинтазы.
Прежде всего, мы можем говорить о доказательс-
твах, полученных к настоящему моменту рядом иссле-дователей, что в клинически изолируемых штаммах c.
albicans с повышенной МПК в отношении каспо-
фунгина
обнаруживаются мутации в домене fkS1.
эти мутации хорошо изучены (например, аминокис-лотные
замены f639I, v641k, D646Y в Saccharomyces
cerevisiae или замены S645f , S645p , S645Y в c. albi-
cans). В молекуле в-1, 3-D-глюкансинтазы существует
особая
«горячая точка» – домен fkS1 phe641-pro649
(нумерация аминокислотных остатков для c. albicans),
мутации в которой позволяют грибам с наибольшей вероятностью преодолевать ингибирующее действие терапевтических эхинокандинов на ферменты син-теза
глюканов клеточной стенки. эта специфическая
последовательность названа «горячая точка 1» (HS1). Другим ярким примером являются мутанты S. cere-
visiae с устойчивостью к циклическому липопептиду арборкандину С, в которых была открыта аминокис-лотная замена L642S в том же самом домене HS1.
Мут
ации в fkS1 играют основную роль в форми-
ровании лекарственной устойчивости в грибах, но это домен не единственная «горячая точка» в в-1, 3-D-глю-
кансинтазе. Исследования последних лет показали, что, например, в мутанте S. cerevisiae с дерегулиро-
ванной аминокислотной заменой R1357S специфичес-кой последовательностью, участвующей в повышении устойчивости к эхинокандинам, является так называ-емая «горячая точка 2» (HS2) [2]. Поэтому очевидно, что изучение мутаций в этих последовательностях способно повысить эффективность клинического при-менения эхинокандинов, так как диагностическое оп-ределение манифестирующих штаммов у пациентов в будущем даст возможность подобрать оптимальную комбинацию эхинокандинов и других препаратов для минимизирования риска развития лекарственной ус-тойчивости возбудителя.
В последние годы охарактеризованы многие аспек-
ты лекарственной устойчивости к эхинокандинам. К сожалению, для этого класса препаратов описан ряд вариаций клинической эффективности, и очевидно, что раскрытие молекулярных механизмов, лежащих в основе повышения резистентности определенных патогенных штаммов к эхинокандинам, является ак-туальной задачей медицинской микологии. Резистен-тность,
обусловленная «fkS-механизмом», подтверж-
дена для таких клинически опасных штаммов, как c.
glabrata
, c. guilliermondii, c. krusei , c. parapsilosis , c.
tr
opicalis и c. dubliniensis. В этих микроорганизмах
развитие резистентности также связано с мутациями в высококонсервативных «горячих точках», подобно мутациям в c.
albicans. В клетках c. glabrata мутация
в с
айте HS1 домена fkS2 ответственна за развитие
фенотипа, устойчивого к антибиотикам. Приоритетная роль мутаций в этом домене для изменения чувстви-тельности в-1, 3-D-глюкансинтазы к эхинокандинам
подтверждается рядом исследований [1–3].
Унив
ерсальность модификаций fkS1 как меха-
низм устойчивости грибов к эхинокандинам была по-казана путем инжиниринга аналогичной мутации в c.
albicans
: экспериментальная замена вида fks1-S645Y
в плесени a. fumigatus ведёт к заметно сниженной
чувствительности. Но такая заниженная чувствитель-ность в asper
gillus наблюдается только в лабораторном
штамме. Для определенных клинически изолирован-МОЛЕКУ ЛЯРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МОЛЕКУ Л-МИШЕНЕЙ
В КЛЕТКАХ ПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ ДЛЯ ПРЕОДОЛЕНИЯ
ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТ
ОЙЧИВОСТИ К э ХИНОКАНДИНАМ
Прокопов И.А., Корчененкова Е.А., Дигтярь А.В.
Московская Медицинская Академия имени И.М. Сеченова,
Москва
Фунгициды и антимикотики 299
ных штаммов некоторых патогенных видов candida
(таких как c. parapsilosis и c. guilliermondii ), наблю-
даются высокие значения уровней МПК в отношении
эхинокандинов (0,5–8 мкг/мл) в сравнении с другими видами candida.
Механизм этой пониженной чувстви-
тельности, вероятнее всего, напрямую связан с поли-морфизмом аминокислотных последовательностей в HS1/HS2 регионах fk
S1. В c. parapsilosis наблюда-
ется естественно встречающийся полиморфизм, ве-дущий к замене аланина-649 на пролин (что эквива-лентно мутации в патогенных штаммах c.
albicans ).
Похожая мутация в c. albicans (fks1-p649C) приводит
к сопоставимому уровню понижения чувствительнос-ти. Грибы c.
orthopsilosis и c. metapsilosis (близкородс-
твенные штаммы c. parapsilosis ) имеют полиморфизм
p649A,
что также ведет к понижению чувствительнос-
ти [2].
Более того, полиморфизм вида I1359v в HS2 у
c. orthopsilosis также приводит к повышению уровней МПК. Такой же тип мутаций встречается и у штаммов S. cerevisiae , которые демонстрируют высокие уровни
МПК по сравнению с высокочувствительными can-
dida
spp; однако только замена лейцина на метионин в
положении Лей642 (также, как и у c. albicans ) важна
для понижения чувствительности.
У некоторых грибов наблюдаются вариации в ос-
татке Тре643, но замена этой аминокислоты не влияет на чувствительность к эхинокандинам. Таким обра-зом, представленные данные позволяют заключить, что
естественный полиморфизм в домене fkS1 неко-
торых отличных от candida spp. грибов может вносить
заметный вклад к изменениям чувствительности этих грибов к эхинокандинам. Некоторые клинически важ-ные грибы
– cryptococcus neoformans, Fusarium spp.,
Scedosporium spp. и представители семейства zygomy-
cetes
устойчивы к эхинокандинам (МПК>16 мкг/мл).
Механизм этой устойчивости непонятен, так как в-1,
3-D-глюкансинтаза из cryptococcus и ряда других
грибов in vitro ингибируется каспофунгином в очень
сильной степени. Однако, было отмечено, что подобно asper
gillus spp., некоторые плесени (curvularia , alter -naria, acr emonium, Trichoderma) показывали чувстви-
тельность к каспофунгину в тесте по определению минимальной эффективной концентрации. Тем не ме-нее, организмы, такие как cryptococcus ,
устойчивы к
эхинокандинам, несмотря на полное ингибирование в-1, 3-D-глюкансинтазы этими препаратами – что за-ст
авляет нас предположить существование альтерна-
тивного механизма развития лекарственной устойчи-во
сти, независимого от fkS1. Возможно, он связан с
транспортом молекул эхинокандинов в клетку, либо с метаболизмом этих молекул после попадания в клет-ку
– но на настоящий момент у нас нет прямых экспе-
риментальных данных в пользу той или иной версии.
Прямое изучение аминокислотного полиморфизма и
му
таций в fkS1-домене в-1, 3-D-глюкансинтазы будет
способствовать установлению нами общих принципов развития лекарственной устойчивости к эхзиноканди-нам. В настоящее время исследования этой проблемы позволяют заключить, что лекарственная устойчивость к эхинокандинам у наблюдаемых клинически важных штаммов развивается благодаря аминокислотным из-ме
нениям в двух определенных сайтах fkS1-последо-
вательности в-1, 3-D-глюкансинтазы. Таким образом,
на этом направлении (которое, по нашей оценке, в Рос-сийской Федерации, к сожалению, развивается недоста-точно быстрыми темпами) открывается возможность значительного повышения терапевтической эффектив-ности препаратов эхинокандинов.
1. Дигтярь А.В., Позднякова Е.А. Повышение кли-
нической эффективности эхинокандинов и расширение возможностей поиска новых антимикотических средств на основании исследований геномов грибов. // «У спехи медицинской микологии», том IX, стр. 283–286 (2007).
2.
Balashov S. v., park S., perlin D.S. Assessing resistance
to the echinocandin antifungal drug caspofungin in can di-
da albicans by profiling mutations in f kS1. Antimicrobial
agents and chemotherapy, vol. 50, pp. 2058–2063 (2006).
3. perlin
D.S. Resistance to echinocandin-class an-
tifungal drugs. // Drug resistance Updates, vol. 10, pp. 121–130 (2007).
ФУНГИЦИДНОЕ ДЕЙСТВИЕ ВОДНЫХ ВЫТЯЖЕК ВЫСШИХ
Р АСТЕНИЙ НА МОРФОЛОГИЮ ГРИБОВ РОДА Fu Sarium
Рукавицина И.В.1, Нечай Н.Л.2, Карамшук З.П.2
1 Научно-производственный центр зернового хозяйства им. А.И.Бараева,
п. Научный, казахстан
2 казахский агротехнический университет им. С.Сейфуллина,
г. Астана, казахстан
Альтернативой применения химических средств
защиты зерновых культур от болезней является ис-пользование биологических препаратов. Целью дан-ной работы было изучение фунгицидного действия водных вытяжек высших растений на морфологию микромицетов рода Fusarium.
Результаты исследований по влиянию водных вы-
тяж
ек валерианы лекарственной (v aleriana officinalis L.), хрена обыкновенного (Armoracia rusticana), со-сны обыкнов
енной (pinus silvestris L.), тополя обык-
новенног
о (populus) на морфологию штаммов грибов
fusarium graminearum 1/3, 1/5, 2/5 показали, что они ак-тивно подавляли рост мицелия и прорастание конидий, а также способствовали формированию хламидоспор в клетках гиф мицелия. Водная вытяжка календулы лекарственной (Calendula officinalis L.) ингибировала
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 300
прорастание конидий, однако мицелий развивался.
Подавлению роста мицелия и прорастанию конидий в средней степени способствовала водная вытяжка де-вясила высокого (Inula helenium L.). Стимулирование роста мицелия отмечалось при использовании вод-ной вытяжки чеснока посевного (Allium sativum L.). Независимо от концентрации растительных вытяжек valeriana officinalis
L., Calendula officinalis L. подавлял-
ся рост колоний и конидиеобразование у всех штаммов f. graminearum.
Увеличение концентрации водных вы-
тяж
ек Inula helenium L., Armoracia rusticana, populus,
pinus silvestris L. до 4 % способствовало подавлению роста колоний в сравнении с использованием 1 % и 2 % вытяжек. Активная вакуолизация мицелия и хла-мидоспорообразование наблюдалась в гифах грибов, культивируемых на питательной среде с добавлени-ем в
одных вытяжек valeriana officinalis L., Calendula
officinalis L., Armoracia rusticana L., pinus silvestris L,
при этом мицелий грибов утолщался, сливался, обра-зуя своеобразные тяжи, что, возможно, явилось следс-твием лизиса клеточной стенки мицелия. Подобное наблюдалось у всех исследованных штаммов.
Негативное влияние водных вытяжек растений
наблю
далось и по отношению к штаммам fusarium
oxysporum 5/2, 6/3, 3/3. Водные вытяжки valeriana
officinalis L. и Calendula officinalis L., незначительно подавляли рост мицелия гриба и прорастание кони-дий. Конидеобразования не наблюдалось при исполь-зовании водной вытяжки Armoracia rusticana и Inula helenium L., последняя способствовала образованию хламидоспор
в мицелии f.oxysporum. При исполь-
зов
ании водной вытяжки populus и pinus silvestris L. формировались хламидоспоры в клетках гиф мице-лия. При увеличении концентрации водных вытяжек valeriana officinalis
L. и Calendula officinalis L., рост ко-
лоний гриба и конидиеобразование подавлялись незна-чительно. Четырехпроцентная концентрация водных вытяж
ек populus, pinus silvestris L., Inula helenium L.,
Armoracia rusticana ингибировала рост колоний грибов и формирование конидий по сравнению с вариантами, где
использовались 1 % и 2 % вытяжки. Особенно это
было отмечено у штамма f. oxysporum 5/2, где диаметр
колоний на питательной среде составлял 17,66, 24,66, 13,0 мм соответственно. Независимо от концентрации во
дных вытяжек valeriana officinalis L., pinus silvestris
L., Calendula officinalis L., Inula helenium L., Armoracia rusticana происходило слияние гиф мицелия и ваку-олизация в клетках гиф. Водные вытяжки донника желтого (Melilotus officinalis L.), эспарцета посевно-го (Onobrychis viciaefolia Scop.), Allium sativum L., не оказывали существенного влияния на интенсивность рост
а колоний грибов и прорастание конидий, как у f.
graminearum, так и у f . oxysporum.
Таким образом, было выявлено, что водные вы-
тяжки p
opulus, pinus silvestris L., valeriana officinalis
L., Calendula officinalis L., Inula helenium L., обладают антифунгальным действием, которое проявляется в нарушении метаболических процессов в клетках фи-топатогенов: утолщение гиф мицелия исследуемых грибов на ранних сроках культивирования, образо-вание анастомозов, активная вакуолизация мицелия, следствие старения клеток, которая наблюдалась более чем в
50 % случаев на 7 сутки культивирования грибов
рода fusarium..
ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СИБИРСКИХ ШТАММОВ
TRICHODERMA ДЛЯ СОЗДАНИЯ БИОПРЕПАР АТОВ ЗАЩИТЫ Р АСТЕНИЙ
Садыкова В.С., Бондарь П.Н., Савицкая А.
Сибирский государственный технологический университет,
красноярск
В настоящее время грибы рода Trichoderma при-
влекают пристальное внимание исследователей в связи с их большим практическим значением для по-лучения биологически активных веществ и средств защиты растений. Наименее изученной областью яв-ляется возможность применения триходермина для ог-раничения развития и вредоносности фитопатогенных организмов
в лесных питомниках. это связано с тем,
что применение «европейских музейных» штаммов рода Trichoderma в Средней Сибири, характеризуют-
ся большим числом негативных или противоречивых данных.
Большую эффективность для контроля заболева-
ний сеянцев хвойных в Средней Сибири продемонс-трировали аборигенные штаммы рода Trichoderma. Поэтому использование в качестве продуцентов штам-мов грибов рода Trichoderma, выделенных из разных
биотопов регионов Сибири для ограничения развития доминирующих местных видов возбудителей болез-ней сеянцев хвойных пород и разработка на их осно-ве экологически чистых технологий является важным направлением в экологической биотехнологии. Успех биологического метода защиты растений зависит не только от подбора высокоэффективного штамма, но и возможности получения на его основе биопрепарата.
Целью работы была оценка биологической актив-
ности и стабильности моноспоровых сибирских штам-мов Trichoderma при росте на различных растительных отходах деревообрабатывающей промышленности для разработки технологии твердофазного культивирова-ния продуцентов биопрепаратов.
Была оценена способность роста, продуктивность
антагонистически активных штаммов Trichoderma на
растительных отходах гидролизной и деревообраба-тывающей промышленности и ферментативная ак-тивность их после культивирования. Продуктивность
Фунгициды и антимикотики 301
штаммов существенно варьировала в зависимости от
штамма и субстрата. Интенсивность спорообразования у штаммов была выше на более доступных для гриб-ного гидролиза субстратов: коры пихты после разрых-ление структуры субстрата и удаление танинов. При совместном культивировании с Fusarium плотность
популяции фитопатогена сокращается до минимума в течение 5 суток, а грибы рода alternaria
оказались не
способны рости ни на одном из субстратов.
Антибиотическая активность культуральной жид-
кости (КЖ) штаммов по отношению к комплексу тест-культур видов Fusarium и a
lternaria, выращенных пос-
ле пассажа на субстратах осталась на прежнем уровне, из чего следует, что культивирование на субстратах не влияет на данное свойство грибовОценка
жизнеспособности спор штаммов – проду-
центов после культивирования на субстратах показа-ла, что наиболее благоприятным является кора пихты, грибы свою жизнеспособность в течение 12 месяцев на уровне
50–70 %. Полученные данные дают осно-
вание рекомендовать субстрат из коры пихты, после соответствующей обработки для получения биопрепа-рат
ов – триходерминов.
Проведенные эксперименты по интродукции био-
логически активных культур видов рода Trichoderma в
питомники показывают необходимость исследования гетерогенности популяций антагониста и возбудите-лей болезни. Биология возбудителя и патогенез, а так-же агротехника возделываемой культуры определяют способы их применения.
ПРОДУКТЫ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ PSeudomonaS PuTida КМБУ 4308
ПРОТИВ
НЕСОВЕРШЕННОГО ГРИБА boTr YTiS cinerea pERs: fR.
Стадниченко М.А., Кулешова Ю.М.
Белорусский государственный университет,
Минск
Современные стратегии защиты растений от гриб-
ных болезней должны быть экологически безопасны и экономически выгодны. Поэтому разработка био-логических методов находится в рамках актуального направления. Биопрепараты характеризуются поли-функциональным типом действия: антагонистической активностью к широкому спектру возбудителей и рос-тостимулирующим эффектом в отношении растений. Высокой антагонистической активностью обладают штаммы почвенной бактерии рода Pseudomonas , кото-
рые способны продуцировать вторичные метаболиты, подавляющие рост и развитие фитопатогенных грибов.
Одной из наиболее распространенных грибных бо-
ле
зней является серая гниль (возбудитель – botrytis ci-
nerea pers:fr .). Заболевание очень вредоносно и служит
причиной снижения урожая многих сельскохозяйствен-ных культур. Гриб поражает большой круг растений, быстро адаптируется к факторам среды и обладает ме-ханизмами защиты от токсичных для него препаратов.
Целью наших исследований было изучение влияния
ку
льтуральных фильтратов pseudomonas putida КМБУ
4308 на прорастание спор возбудителя серой гнили. Антибиотиче
ская активность бактерий p. putida КМБУ
4308 определяется способностью синтезировать и вы-делять в
среду пигмент пиовердин pm, который связы-
вает ионы железа и превращает их в недоступную для других микроорганизмов (бактерий и грибов) форму (Максимова и др., 1994). Для изучения антимикоти-ческих свойств опытных фильтратов споры гриба B. cinerea помещали в капли водных растворов на пред-метные стекла во влажной камере и через сутки учи-тывали процент проросших спор. Установлено, что фильтраты всех штаммов (кроме №28) подавляли про-растание спор относительно контрольных вариантов на 63–99
%. Максимальный ингибирующий эффект
отмечен в вариантах М8 и f17, где процент проросших
спор составил только 0,8 и 0,73 соответственно.
Данные эксперимента показывают, что культураль-
ные фильтраты Р. рutida обладают значительным фун-
гицидным эффектом по отношению к прорастанию
спор возбудителя серой гнили. Полученные результа-ты могут быть использованы в дальнейшей разработке методов защиты растений от ботритиоза с помощью бактерий.
ВЛИЯНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ МЕТАБОЛИТОВ НА
ГРИБНЫЕ ФИТОПАТОГЕНЫ Р АСТЕНИЙ
Сулейманова Л.Р., Четвериков С.П., Логинов О.Н.
Институт биологии УНЦ РАН,
Уфа
Корневая система растений выделяет в ризосферу
эксудаты – вещества различной природы (углеводы, органические кислоты и аминокислоты). Продукция экзометаболитов бактериями связана с их биохими-ческ
ой активностью. эти метаболиты, вероятно, могут
принимать участие в реакциях комплексообразования,
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 302
связывая субстрат, и тем самым, обеспечивают борьбу
за источник питания между грибными фитопатогена-ми и бактериями.
Известно, что ингибирование роста грибных фи-
топатогенов, в частности, определяется продуциро-ванием веществ антибиотической природы. Поэтому комплексообразующая способность метаболитов бак-терий рода Pseudomonas по отношению к эксудатам,
обуславливает дополнительное ингибирующее дейс-твие на прорастание спор и формирование мицелия фитопатогенных грибов.
В лаборатории биологически активных веществ
Института биологии УНЦ Р АН были выделены новые метаболиты бактерий рода Pseudomonas –
триглице-
ридпептиды, обладающие фунгицидной активностью.
Пр
и помощи УФ – спектрофотометрии (методы Бен-
та-Френча и изомолярных серий) и поляриметрии по-казана способность метаболитов псевдомонад к обра-зованию межмолекулярных комплексов с различными представителями эксудатов растений и установлен сте-хиометрический состав в системах метаболит:эксудат.
При совместном культивировании фитопатогена
Fusarium oxysporum и штаммов псевдомонад на твер-
дой питательной среде был показан антагонистический эффект в зависимости от источника углерода, в качес-тве которого использовали различные углеводы. При использовании глюкозы, лактозы, раффинозы, галак-тозы и сахарозы, диаметр зон ингибирования составил 12–16 мм для штамма P . aureofaciens ИБ 51, и 10–14
мм
– P . aureofaciens ИБ 6, а с арабинозой – 20–22 и
24–26 мм, соответственно. Наименьшие зоны инги-бирования наблюдались при использовании маннозы (8–10мм).
Полученные результаты позволили предположить,
что метаболиты, продуцируемые P .aureofaciens об-
ладают антифунгальным действием. Исследование проводили на жидких средах Чапека с различными источниками углерода при возрастающем количестве метаболита. Было показано, что увеличение количест-ва триглицеропептида в растворе способствует замед-лению формирования мицелия (наблюдается задержка прорастания спор), а формирующийся мицелий Fusar –
ium oxysporum отличается ярко выраженными морфо-логическими изменениями.
Таким образом, показано, что метаболиты, проду-
цируемые P . aureofaciens обладают антифунгицидной
активностью по отношению к фитопатогену Fusarium
oxysporum.
БИОПРЕПАР АТ ДЛЯ КУ ЛЬТИВИРОВАНИЯ
БЕЗВИРУСНОГО КАРТОФЕЛЯ
Тазетдинова Д.И., Тухбатова Р.И., Рафаилова Э.А., Алимова Ф.К.
ГоУ вПо «казанский государственный университет
им. в
.И. Ульянова-ленина»,
казань
Картофель в Российской Федерации – это один из
важнейших продуктов питания, потребление которого в по
следние годы существенно возросло. Картофель –
культура, восприимчивая к возбудителям грибных, бактериальных и вирусных болезней. Возбудители подавляющего большинства болезней передаются с посадочным материалом. При высадке микрорастений в грунт для получения микроклубней важно, чтобы растение было хорошо развитым, с сильной корневой системой. Слабое растение не сможет противостоять боле
зням и погибнет. это приводит к увеличению се-
бестоимости семенного материала. Ранее нами и дру-гими исследователями был показан органотропный эффект метаболитов грибов рода Trichoderma на зла-ковых. Однако не было данных по влиянию на микро-растения безвирусного картофеля.
Целью работы явилось изучение влияния биопре-
парата на основе Trichoderma в зависимости от соста-ва среды культивирования на микрорастения растения безвирусного картофеля in vitro.
Исследование влияния разных источников углерода
(сахароза, маннит, глицерин, глюкоза, спирт) в составе питательной среды на синтез фитотоксинов штаммом Т. asperellum 4 выполнено на сортах картофеля Ред Скарлет и Розара. При использовании глицерина в ка-честве источника углерода в составе питательной сре-ды для выращивания штамма Т. asperellum 4 показана наибольшая стимуляция роста корней и наименьшая стимуляция стебля. При выращивании картофеля важ-на стимуляция роста корневой зоны в большей степе-ни, чем стебля. Поэтому в дальнейших экспериментах в составе питательной среды в качестве источника уг-лерода был использован глицерин.
В работе исследовалось действие КЖ штаммов
Т. spp. 1, Т. koningii 2, Т. koningii 3, Т. asperellum 4 на пробирочные растения безвирусного картофеля: Ред Скарлет, Розара, Невский и Фелокс. При оценке но-вых препара
тов важный показатель – определение их
фитокомпетентности (отсутствие фитотоксичности). В результате исследований показано, что изученные изоляты не обладали фитотоксичностью.
Наибольшим стимулирующим действием на корни
картофеля сорта Фелокс обладал штамм Т.3, наимень-шим
– Т.4. Наибольшее ингибирующее действие на
рост стеблей оказала КЖ штамм Т.3.
Наибольшее стимулирующее действие на рост
корней картофеля сорта Невский оказывал штамм Т.3, а наименьшее штамм Т.2. Наибольшую ингиби-рующую способность по отношению к стеблю про-явил штамм Т.4, а наименьшую Т.2. Также ингиби-
Фунгициды и антимикотики 303
рующее действие проявил штамм Т.1 по отношению
к корням.
Наибольшее стимулирующее действие на рост кор-
ней сорта Ред Скарлет оказывали штаммы Т.2 и Т.1, а на
рост проростков – Т.4. Наименьшее стимулирую-
щее действие на рост корней оказывал штамм Т.4, на проростки
– Т.2. Ингибирующее действие на корни
оказал штамм Т.3, а на проростки – Т.1.
Наибольшее стимулирующее действие на рост
корней картофеля сорта Розара оказывал штамм Т.4, а наименьшее штамм Т.2. Ингибирующее действие по отношению к корням проявил штамм Т.1. Наименьшее стимулирующее действие на рост стеблей проявил штамм Т.2.
Питательная среда для культивирования Tricho-
derma подобрана по источнику углерода для снижения уровня фитотоксинов. При изучении влияния культу-ральной жидкости исследованных штаммов Tricho-derma на рост микрорастений картофеля отмечены сортоспецифичность и органотропное действие. В ка-честве стимуляторов роста картофеля наиболее перс-пективны штаммы Т. spp. 1, Т. asperellum 4, Т. koningii 3, которые стимулируют рост корней и не влияют на рост стебля.
ИЗУЧЕНИЕ ИЗМЕНЕНИЙ ТОНКИХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ
СТРУКТУР ВОЗБУДИТЕЛЯ КОКЦИДИОИДОМИКОЗА
ПОД ВЛИЯНИЕМ ДЕЗИНФЕКТАНТОВ
Тарасова Т.Д., Курилов В.Я., Андрус В.Н.,
Лесовой В.С., Липницкий А.В.
ФГУз
волгоградский научно-исследовательский
противочумный институт,
волгоград
Ранее нами (Тарасова и др.,2007) было показано,
что четвертично-аммониевые соединения (ЧАС), со-держащие глютаровый альдегид (септодор-форте, но-водез-форте, лизоформин), обладают фунгицидным эффектом и могут быть использованы для дезинфек-ции объектов внешней среды, контаминированных па-тогенными грибами.
Цель настоящего исследования: изучить методами
электронной микроскопии изменения тонких морфо-логических структур наиболее устойчивого к дезин-фицирующим средствам тест-штамма возбудителя кокцидиоидо
микоза – Соссidioides роsadasii 36S (Sil-
veira) под влиянием септодора-форте.
Для электронно-микроскопических исследований
использовали биомассу штамма С. pоsadasii 36S, вы-ращенного на агаре Сабуро, рН 7.2 в течение 45 сут., фи
ксировали 2 % раствором четырехокиси осмия на
буфере Михаэлиса при рН-6.4. Затем фиксированную биомассу заключали в агар Дифко и нарезали на ку-сочки объемом около 1 мм3. После обезвоживания в серии восходящих спиртов и окиси пропилена кусоч-ки заливали в эпоксидную смолу ERL-4206. Ультра-то
нкие срезы толщиной 300 – 400 А изготавливали
на ультратоме ЛКВ-2128, контрастировали цитратом свинца и изучали в электронном микроскопе ДЖЕМ-10
0 SX при инструментальном увеличении 5000 –
50 000.
электронно-микроскопическое исследование кон-
трольных препаратов штамма С.pоsadasii 36S под-твердило данные современной цитологии о том, что грибы являются сложными в структурном отношении. Их органоиды мало чем отличаются от аналогичных структур животных и растительных клеток. Клетки гриба ограничены прочной эластичной стенкой, тол-щина которой равна 1500–2000 А (обычно достигает 1/7 диаметра). Последняя у исследуемого микроорга-низма является слоистой структурой; количество сло-ев в которой колеблется от 3 до 10, выполняя, прежде всего, защитную функцию.
Непосредственно под клеточной стенкой распола-
гается цитоплазматическая мембрана. Она у штамма С.pоsadasii 36S, как и у клеток высших организмов, является трехслойной и отвечает требованиям схемы Робертсона. У части клеток встречаются глубокие ин-вагинации цитоплазматической мембраны, имеющие структуру подобную мезосомам. По-видимому, через цитоплазматическую мембрану идет процесс пиноци-тоза и обратной экскреции. Цитоплазматический мат-рикс гриба С. роsadasii 36S представлен гомогенной
сетью тонких нитчатых структур.
эндоплаз
матический ретикулум состоит из каналь-
цев и пузырьков; в большинстве клеток гриба этот ре-тикулум гладкий, только небольшая часть его мембран связана с рибосомами. Аппарат Гольджи развит сла-бо.
Исследование ультратонких срезов штамма С.
pоsadasii 36S в электронном микроскопе показало, что его митохондрии по своей структуре не отличаются от митохондрий высших организмов. Ядра гриба С.
pоsadasii 36S и ядра клеток высших организмов от-граничены от цитоплазмы двумя мембранами, кото-рые связаны друг с другом. На поверхности наружной ядерной мембраны локализованы рибосомы.
Изучение изменений тонких структур возбудителя
ко
кцидиоидомикоза под воздействием 0,01 % (по дейс-
тв
ующему веществу – ДВ) концентрации септодор-
форте при 30 мин экспозиции позволило выявить опре-деленные закономерности.У большинства клеток гриба отмечены различные этапы редукции клеточной стенки. Те из них, у которых процесс деструкции находился на
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 304
начальном этапе, представляли собой овальные образо-
вания, периферия которых не резко очерчена. Некоторые из этих клеток были окружены плотной зоной, являю-щейся клеточной стенкой, разрыхленной под действием ЧАС. В целом строма клеток сохранялась. Внутрикле-точные органоиды, как правило, не имели морфологи-ческих отличий от аналогичных образований клеток С. pоsadasii 36S в контроле. При более продолжительных сроках воздействия (30–60 мин) и увеличении концен-тр
ации препарата до 0,025 % – 0,05 % (по ДВ) явления
деструкции нарастали и приводили к расслоению кле-точной стенки, ее разрыву и нарушению целостности цитоплазматической мембраны; происходил выброс клеточного детрита. Ядра клеток при этом сохраняли свою структуру, в то время, как митохондрии и другие органоиды и включения изменялись.
Таким образом, можно предположить, что в клет-
ках возбудителя кокцидиоидомикоза уже под действи-ем низких концентраций дезинфектанта происходят определенные биохимические процессы, опосредую-щие морфологические изменения, приводящие к поте-ре жизнеспособности гриба.
СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕРМАТОМИКОЗОВ
Титова В.Ю., Матросова Л.Е., Крючкова М.А., Степанов В.И.
ФГУ Федеральный центр токсикологической
и радиационной безопасности животных,
казань
Зооантропонозные дерматомикозы – микроспория
и трихофития заразные контагиозные заболевания, представляющие значительную опасность для чело-века и животных. Высокий процент заболеваемости домашних и бродячих животных дерматомикозами со-здают реальную угрозу заражения людей и особенно детей. Кроме того, несмотря на плановую вакцинацию сельскохозяйственных животных, трихофития и мик-роспория достаточно часто встречаются как у крупно-го рогатого скота, так и у пушных зверей, что приводит к большим экономическим потерям. Чаще всего забо-леванию более повержены животные с ослабленным иммунитетом. Болезнь быстро распространяется среди поголовья и может поражать практически все стадо.
Создание препаратов для лечения трихофитии и
микроспории животных является перспективным для нужд сельского хозяйства и медицины.
Для лечения этих заболеваний известно примене-
ние препаратов йода, хлора, антибиотиков (гризео-фульвин, нистатин), серы (Машковский А.Д.,2000, На-биев Ф.Г.и др., 2000), которые требуют длительного и многократного применения и не всегда обеспечивают высокий лечебный эффект, некоторые из них вызыва-ют побочные явления.
В ФГУ ФЦ ТРБ (ВНИВИ) создано средство для ле-
чения т
рихофитии и микроспории животных – дерма-
декс. э
то средство отличается эффективностью, удобс-
твом применения и быстротой действия. Высокую антагонистическую активность препарата по отноше-нию к вышеуказанным дерматомикозам обеспечивает высокоактивное соединение серы меркаптобензоти-азол и пролонгатор, входящие в его состав. Средство обладает высокой фунгистатической и фунгицидной активно
стью по отношению к грибам – возбудителям
трихофитии и микроспории.
Применяют препарат путем нанесения на поражен-
ные участки кожи заболевших животных от 1 до 3 раз в зависимости от степени поражения, при этом не тре-буется удаления корочек. Препарат обладает высокой проникающей способностью в глубокие слои кожи, что способствует быстрому купированию процесса и восстановлению ее нормальных функций, активации волосяных фолликул. Рост волос на пораженных учас-тках кожи начинался уже через 5–7 дней.
Проведен опыт на 30 телят (2 группы по 15 голов
в каждой) по оценке эффективности дермадекса в сравнительном плане с мебетизоловой мазью, также имеющей в своем составе меркаптобензотиазол. По-раженные участки кожи подопытных животных обра-батыв
али в первой группе – дермадексом, во второй
группе – мебетизоловой мазью 1 раз в день втирали оба препарата. Животные первой группы выздорове-ли на
5 – 8 сутки опыта, на 10 – 12 сутки волосяной
покров полностью восстановился. Во второй группе лечение проводили в течение 26–30 дней ежедневного применения мази.
Изучены токсикологические свойства препарата на
белых крысах. Максимально переносимая доза при на-несении на кожу составила более 5000 мг/кг, при вве-дении в желу
док – 18000мг/кг.
В опытах по определению кумулятивных свойств
препарата при накожном применении не удалось вы-звать гибели ни одной крысы при суммарной дозе 40000 мг/кг на каждое животное. Местное действие ха-рактеризовалось небольшой гиперемией и шелушени-ем к
ожи при дозах 20000 – 40000 мг/кг. Проведенные
исследования показали, что средство в терапевтичес-ких дозах не обладает аллергизирующим , кожно-ре-зорбтивным действием и раздражающим действием.
Таким образом, лечение данным препаратом име-
ет следующие преимущества: быстрое купирование ко
нтагиозного процесса, высокая эффективность –
быстрое выздоровление животных и восстановле-ние волосяного покрова, удобство применения (1–3 кратно), препарат не токсичен, относится к 4 классу опасности.
Фунгициды и антимикотики 305
Известны различные группы видов микрогель-
минтов (нематод), положительно влияющие на устой-
чивость и видовую стабильность агроценозов. К ним можно отнести антагонистические, иммуностимули-рующие, сапрофитные, хищные и энтомопатогенные виды. Среди антагонистических, иммуностимулирую-щих и энтомопатогенных нематод встречаются виды, обладающие фунгистатическими свойствами. Анти-биотические, в том числе фунгистатические, свойства нематод и их бактериальных сателлитов до сих пор ещё мало изучены.
Нами исследованы фунгистатические свойства
двух
видов микрогельминтов – антагонистической
энтомопатогенной нематоды pristionchus uniformis
fedorko, Stanuszek, 1968 и факультативно-патогенной нематоды pristionchus leritieri Maupas. (Nematoda: Dip-
logasteridae). Ранее нами было показано, что эти виды обладают высокой ростостимулирующей и иммунос-тимулир
ующей активностью. Нематода pristionchus
uniformis открыта польскими исследователями. Вид известен как патоген колорадского жука /А. Федорко, 1968/, .
Вид pristionchus leritieri также известен как па-
тоген колорадского жука /Я. Вейзер, 1966/1972/ .
Культуры нематод непрерывно поддерживали с
1989 года путём периодического пассирования в при-родных и экспериментальных насекомых-хозяевах, а также на искусственных питательных средах (ИПС) различного состава. Использовали почвенный агар (10 г агар-агара на 1 кг почвы). В состав многокомпо-нентных сред включали картофельный крахмал, раз-личные растительные остатки (в том числе пищевые отходы) и воду. Нематод содержали в многоячеистых кюветах. Маточные культуры выращивали в чашках Петри. На основе перечисленных видов приготовили два биологических препарата Диприн (различные пре-паративные формы) /АС СССР № 1822691 от 23.06.93; Патент РФ. № 2128911С1. от 20.04.1999/ и Активатор А. /Патент РФ. № 2249584 С2. от20.06.2003/, которые применяли в
разведении 1:1000 – 1мл препарата на 10
л воды.
Фунгистатическую активность испытывали на при-
мере возбудителя фитофтороза картофеля в лабора-торных и вегетационных опытах. Степень поражения грибом оценивали по десятибальной шкале. В лабора-торных опытах применяли методику искусственного заражения листьев культурой фитофторы. В опытах культуру фитофторы смешивали с препаратами в раз-ведении 1:1000.
Как показали исследования, при применении нема-
тодных препаратов, как в лабораторных, так и в вегета-ционных опытах проявление фитофтороза снижалась на 1.5
– 2.0 балла. Обработанные растения развивались
быстрее контрольных. Урожайность картофеля при это
м повышалась в 1.3 – 2.8 раза. В вегетационный пе-
риод 2007 года на посадках картофеля (сорт Невский) после обработки препаратом Активатор А фитофтороз не проявлялся, в то время как на контрольных участках симпто
мы фитофтороза были отмечены на 8–13 % об-
следованных кустов.
Мы объясняем это с одной стороны высокими им-
муностимулирующими свойствами изучаемых видов нематод и использованием этими нематодами зооспор и ранних стадий образования гриба как объектов пи-тания. Здесь возможна и положительная роль симби-отической c нематодами бактерии Xenorhabdus nema-tophilus, вещества, вырабатываемые которой ещё мало изучены.
Следу
ет отметить, что нематода pristionchus lerit-
ieri обладает высокой антибиотической активностью и создаёт вокруг себя стерильную питательную среду, вследствие чего при культивировании в среды нет не-обходимости добавлять стерилизующие компоненты. БОРЬБА С ФИТОФТОРОЗОМ С ПОМОЩЬЮ АНТАГОНИСТИЧЕСКИХ НЕМАТОД
Тихонова Л.В., Зейрук В.Н., Абашкин О.В., Кукушкина Л.Н.,
Масюк Ю.А., Марьяновская М.В., Черников В.И.
вНИИ к
артофельного хозяйства,
Московская область
ДЕЙСТВИЕ ФУНГИЦИДОВ И ИНДУКТОРОВ
БОЛЕЗНЕУСТОЙЧИВОСТИ НА ФИТОПАТОГЕНЫ
Тютерев С.Л.
всероссийский институт защиты растений,
Санкт-Петербург
Потери урожая от болезней варьируют в зависи-
мости от вида сельскохозяйственной культуры и ре-гиона ее возделывания и в целом оцениваются в 10–20
%. Однако при благоприятных для развития грибов
эпифитотийных условиях, потери урожая могут быть существенно выше. Еще с древних времен применя-лись различные препараты для борьбы с болезнями, например, сера, хлорокись меди, их находили эмпи-рическим путем. Такой эмпиризм сохранился и до настоящего времени и остается существенной частью технологий создания новых фунгицидов. Рациональ-ный поиск фунгицидов начали осуществлять только во второй половине XX столетия на основе соединений, блокирующих жизненно важные биохимические ре-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 306
акции в грибах, т.е. имеющих определенные «мишени
действия». Из химических групп фунгицидов широкое применение в настоящее время нашли бензимидазолы и тиофанаты, фениламиды. Широко используется боль-шая гр
уппа химически разнородных фунгицидов – ин-
гибиторов дыхания, среди которых стробилурины и карбоксамиды (карбоксин и др.) занимают ведущее поло
жение, фунгициды – ингибиторы синтеза амино-
кислот
и белков, фунгициды – ингибиторы сигналь-
ных мо
лекул, а также фунгициды – ингибиторы синте-
за липидов
и образования мембран – дикарбоксимиды
(ипродион, винклозолин) и карбаматы (протиокарб). Основной группой системных фунгицидов являются триаз
олы – ингибиторы биосинтеза стеролов в мем-
бранах грибов, такие как пропиконазол, тебуконазол, триадимефон и др. К ингибиторам синтеза глюканов в клеточной стенке грибов относится широко применя-емый фунгицид диметоморф, производное коричной кислоты. Как индукторы болезнеустойчивости извес-тны бион, фитохит, хитозары, пробеназол и другие, вызывающие подавление болезни через изменение об-мена веществ растения-хозяина.
У большинства грибов эргостерол является основ-
ным стерином, поэтому ингибиторы его синтеза оказа-лись наиболее эффективным классом фунгицидов, до-минирующим по объемам производства и продажам, начиная с 80-х годов прошлого века и по настоящее время.
Все более широкое применение по сравнению с
фунгицидами биоцидного действия находят соедине-ния, влияющие на восприимчивость (устойчивость) растения-хозяина и патогена. Такие вещества, как правило, не токсичны для грибов in vitro. Не являясь биоцидами, они действуют на патогенез в целом, ин-дуцируя реакции устойчивости у растений (например, лигнификацию тканей и образование фитоалексинов). Ранние быстрые защитные реакции, индуцируемые этими соединениями, такие, например, как образова-ние активных форм кислорода, разрушительно дейс-твуют на патоген, что приводит к выделению элиси-торов или к прекращению процесса колонизации и проникновения инфекции в растения (ингибирова-ние синтеза защитных соединений гриба, синтеза им внеклето
чных ферментов). эти препараты называют
биохимическими фунгицидами, индукторами болезне-устойчивости растений, иммуномодуляторами, прай-меринг-активаторами и т.д.
Биохимическое управление сигнальными система-
ми, регулирующими фитоиммунитет, может стать од-ним из перспективных направлений интегрированной защиты. В ВИЗР разработана методология создания препаратов-индукторов болезнеустойчивости и созда-ны препараты с таким механизмом действия на основе природного экологически безопасного биополимера хи-тозана («Хитозары»). Как показали испытания против нескольких групп фитопатогенов, в том числе, корне-вых гнилей, мучнистых рос, пятнистостей листьев, фи-тофтороза, они эффективны не только в вегетационных, но и в полевых опытах на зерновых, зернобобовых, кар-тофеле, овощных, клевере и других культурах.
ВЛИЯНИЕ КУ ЛЬТУР АЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ БАКТЕРИЙ
PSeudomona
S auranTiaca b-162 НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ
СПОР ВИДОВ РОДА al Ternaria
Федорович М.Н., Веремеенко Е.Г.
Белорусский государственный университет,
Минск
Многие представители р. alternaria – широко рас-
пространенные патогены культурных растений. Меня-ющиеся экологические условия и высокая адаптивная способность грибов-паразитов требуют постоянного совершенствования и/или дополнения методов за-щиты растений. В частности, весьма актуальным яв-ляется биологический метод защиты растений, осно-ванный на использовании антагонистических свойств ряда биологических объектов или их продуктов жиз-недеятельности, проявляемых по отношению к пато-генным микромицетам.
Цель исследования заключалась в изучении влия-
ния культуральной жидкости бактерий Ps. aurantiaca
B-162 на жизнеспособность спор видов р. alt
ernaria.
Объектами исследования были культуральная жид-кость бактерий Ps. aurantiaca B-162, являющихся
продуцентами феназиновых соединений, обладаю-щих антифунгальной активностью, а также споры грибов a. alternata (fr
.) keissler , a. tenuissima (fr.) Weltshire , a. infectoria Simm. , a. dauci Grov. et Scolco ,
a.
radicina Meier , a. brassicae Sacc ., a. brassicicola
(Schw.) Wiltshire , a. capsici Savul. , a. panax Whetzel .
Споры помещали в каплю культуральной жидкос-
ти бактерий (питательная среда ПСА для продукции антибиотиков, в течение 5 дней). Контролем служили вода и питательная среда. Через 24 часа отмечали про-цент проросших спор относительно контролей. Пов-торность эксперимента 3-кратная.
Согласно полученным данным культуральная жид-
ко
сть бактерий ps. aurantiaca B-162 проявляет высокую
степень антифунгальной активности по отношению к представителям р. Alternaria, подавляя прорастание спор различных
видов на 42–100 %. Таким образом,
дальнейшая работа с бактериями ps. aurantiaca B-162
является перспективной в отношении разработки и со-здания на их основе антифунгальных средств биологи-ческой защиты растений.
Фунгициды и антимикотики 307
Возбудителями дерматомикозов человека и живот-
ных являются антропофильные, зоофильные, зооант-
ропофильные грибы родов Trichophyton, Microsporum. Соответственно резервуаром инфекции является инфи-цированные человек и животные. В настоящие время микозами
страдает от 10 до 40 % населения планеты
(Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В.). Поэтому профилактика и ле
чение дерматомикозов – одна из актуальных про-
блем современной дерматологии.
Особое место среди поверхностных микозов за-
нимают трихофития и микроспория, которые могут быстро переходить в форму, сопровождающуюся ос-ложнениями обусловленными деятельностью в очаге поражения сопутствующей микрофлоры (Staphylococ-cus aureus, Candida albicans, микромицетов родов As-pergillus, p
inicillium, Alternaria и др.). В связи с этим
требования к фунгицидным препаратам должны быть высокими.
В эт
ом плане зарекомендовали себя пробиотики –
бактерийные препараты из живых микробных культур предназначенных для коррекции микрофлоры макро-организм
а – хозяина и лечения ряда заболеваний бак-
териальной и грибной этиологии.
Широкую практику приобретают в последнее вре-
мя пробиотики на основе бацилл, одним из важнейших свойств которых является их избирательная антагонис-тистичная активность ко многим видам патогенных и условно
– патогенных микроорганизмов, фермента-
тивное, антитоксическое, противоаллергическое дейс-твие, способность повышать биосинтез ендогенного интерферона и др. ( Харченко С. Н., 1998).
В связи с этим представляло интерес оценить ан-
тигрибную активность в отношении к дерматофитам штаммов
бацил – Bacillus subtilils 3 и B. Licheniformis
31, представляющих биологическую основу разрабо-танных нами препаратов Бактерин-SL, Биоспорин, Ботулин, выпускаемых Днепропетровским заводом медпрепаратов, а также штаммы Bacillus subtilis 1903, 1934, 1990
из коллекции бацил – антагонистов кафед-
ры микробиологии, вирусологии и биотехнологии На-ционального аграрного университета Украины.
В качестве объекта воздействия были использованы
чистые культуры грибов Trichophyton mentagraphites (8 штаммов), Microsporum canis (12 штаммов), выде-ленных от больных собак и котов, характеризующиеся выраженной вирулентностью и вызывающие острое по клиническим признакам заболевание.
В чашках Петри со средой Сабуро делали штрихо-
вой посев исследуемых штаммов бацил. Культивиро-вание
антагониста осуществлялась при 37 °С в тече-
нии 24 часов. Затем к выросшей культуре подсевали перпендику
лярным штрихом тест – грибы, после чего
посевы инкубировали при 28 °С. Наблюдение за рос-том и развитием тестов проводили ежедневно. Конт-ролем служили колонии микромицетов, выращенные не среде Сабуро без посева бацил.
В опытных вариантах наблюдалась четкая зона
подавления роста грибов вокруг штриха спорообра-зующих бактерий. Которая достигала размеров от 20 до 30 мм в зависимости от штамма бацилл и видовой принадлежности
гриба. Мицелий тест – грибов, сфор-
мированный на границе зоны действия метаболитов исследуемых бацилл, обладал выраженными морфоло-гическими изменениями. Апикальная часть субстрат-ного мицелия истончалась, нередко разрывалась, что приводило к потере содержимого гифы. На растущем мицелии формировались сферопласты. Спорообразо-вание отсутствовало. Наиболее выраженные деструк-тивные изменения мицелия отмечались с культурами Bacillus subtilils
3, 1903, 1990, B. Licheniformis 31. эти
культуры являються продуцентами биологически ак-тивных веществ с антифунгальными свойствами, ко-торые могут быть использованы для разработки новых форм антифунгальных препаратов.АНТИМИКОТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ
ПРОБИОТИКОВ В ОТНОШЕНИИ ДЕРМАТОФИТОВ IN vITRO
Харченко С.Н., Волков А.Н.
Национальный аграрный университет,
киев
ДЕЙСТВИЕ НАТУР АЛЬНЫХ ФУНГИЦИДНЫХ СРЕДСТВ НА
РОСТ ВИДОВ ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ candida
Шакалите Ю., Пашкявичюс А., Ложене К.
Институт б
отаники, вильнюс,
литва
В современной медицинской практике для лечения
микозов используются антимикотические препараты разного химического состава. Однако ни один из хи-мических
препаратов не обладает 100 % эффективнос-
тью подавления роста возбудителей микозов, к тому же зачастую их применение связано с различными побочными эффектами. Актуальной задачей является поиск природных фунгицидных антимикотических средств, поскольку растет спрос на медицинские пре-параты, изготовленные на основе натуральных соеди-нений, обладающих широким спректром действия, нетоксичных для человека и применение которых не
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 308
дает побочных эффектов. Основой для новых противо-
грибковых препаратов могут быть эфирные масла.
Цель данной работы оценить фунгицидные свойс-
тва различных эфирных масел по отношению к дрож-жам рода candida
.
Те
ст-микроорганизмы – штаммы видов рода
candida: c. albicans, c. parapsilosis, c. famata, c. krusei,
c. glabrata, c. guilliermondii, c. kefyr, c. tropicalis, c.
lusitaniae, получены из клинического материала боль-
ных микозами. Изучены эфирные масла: чайного де-рева, лимона, лаванды, эвкалипта, пихты сибирской, бергамота и 3-х химотипов эфирных масел тимьяна блошиног
о – тимола, линалола и гераниола. Дрожжи
candida культивировали на среде Сабуро (Liofilchem, Италия). Для определения фунгицидных свойств эфир-ных масел использовали диско-диффузионный метод. Водная суспензия клеток дрожжей была доведена до оптическ
ой плотности 1 по стандарту Mcfarland. Фун-
гицидная активность неразведенного концетрата эфир-ных масел установлена по диаметру (мм) зон подавле-ния роста тест-микроорганизма, образующихся вокруг обработанного эфирными маслами (10 µл) бумажного диска. Контролем в эксперименте служили противо-грибковые препараты: флуконазол (100 мкг) и ниста-тин (100 у.е./г), произведенные в Италии (Liofilchem).
Установлено, что все исследованные эфирные масла
в той или иной степени оказывают фунгицидное дейс-твие на рост candida
. Фунгицидное действие эфирных
масел: чайного дерева, лаванды, эвкалипта, пихты си-бирской, бергамота и тимьяна блошиного (линалола) на рост candida было
более слабым (диаметр зон по-
давления роста 8,3±6–16,5±6,1 мм) , чем противогриб-
ковых препаратов флуконазола (18,3±8,7 мм) и ниста-тина (17,8±4,8 мм). Слабее других воздействовали на рост candida
эфирные масла бергамота , лаванды и эв-
ка
липта. эфирные масла тимьяна блошиного – тимол
и гераниол, а также лимона оказывали фунгицидное действие, превосходящее по эффективности действие антимикоточеских препаратов флуконазола и нистати-на. Под действием эфирного масла тимьяна блошино-го
– гераниола, стерильные зоны роста c. albicans CA1,
c.
famata Cf1, c. tropicalis CT1 и c. tropicalis TCT3
достигали соответственно 42,3±4,7, 38,3±1,5, 22±1,7 и 38,4±2,7 мм. Тимол из тимьяна блошиного более других угнетал рост c.
albicans CA2 (27,3±1,5 мм), c.
albicans TCA3
(45,7±14 мм), c. guilliermondii (33,8±1,9
мм),c . glabrata CG1 (33,6±0,6 мм), TCG2 (25±4,8 мм) и c.
krusei TCkr (19,5±5 мм). Наиболее чустствительны-
ми к действию лимонного эфирного масла были тест-культуры c.
kefyr Ck1 (34,4±10,2 мм) , c. lusitaniae
CL1 (29±7,3 мм), c. parapsilosis Cp1 (23,3±3,1 мм), c.
parapsilosis Cp 1.1 (28,5±3,6 мм), c. parapsilosis TCp1.2
(43,7±6,2 мм) и c. tr opicalis CT2 (24±4,3 мм).
Установлено, что фунгицидное действие концен-
тратов эфирных масел лимона, тимьяна блошино-го –
гераниола и тимола, может превосходить эффек-
тивность медицинских препаратов, применяемых в установленных дозах. can
dida оказались устойчивы-
ми к действию эфирных масел эвкалипта, лаванды и бергамота.
МИКОЗИДИН – НОВЫЙ ОРИГИНАЛЬНЫЙ АНТИФУНГАЛЬНЫЙ
ПРЕПАР АТ ДЛЯ СИСТЕМНОГО ЛЕЧЕНИЯ МИКРОСПОРИИ
Шилова И.Б., Пушкина Т.В.
ФГУП Центр по химии лек
арственных средств (ЦХлС-вНИХФИ),
Москва
Цель: разработка лекарственной формы производ-
ного тиазолидин-2,4-диона для системного примене-ния при микроспории;
Методы: химиотерапевтическая эффективность
микозидина изучена на модели экспериментальной микроспории морских свинок, зараженных клини-ческим зоопатогенным штаммом micr
osporum canis.
в сравнении с гризеофульвином. Лечение животных субстанциями производного тиазолидин-2,4-диона и гризеофульвина проводили на фоне развившегося инфекционного процесса в течение 21 дня, в дозе 80 мг/кг/сутки. э
ффективность оценивали по следующим
параметрам: 1) специфическое свечение в лучах лю-минесцентной лампы Вуда (при наличии возбудителя); 2) микроскопическое исследование материала; 3) вре-мя восстановления шёрстного покрова;
Результаты: по окончании исследования установле-
но, что изучаемые вещества обладают сопоставимой химиотера
певтической эффективностью 70 и 65 %
соответственно при сравнении с контролем. Однако в группе животных получавших гризеофульвин специ-фическое свечение пораженных волосков по всей по-верхности очага наблюдалось в течение всего экспери-мента, а у животных получавших микозидин к 28 дню исследования отмечалось свечение только единичных волосков шерсти. При микроскопии патологического материала взятого из очагов заражения по окончании эксперимента патогенные грибы были обнаружены в волосках всех животных получавших гризеофульвин и только у 2-х животных из группы микозидина. Вы-падение пораженных волосков шерсти наблюдалось у животных получавших микозидин в течение приема препарата, восстановление шерстного покрова было отмечено по окончании лечения. У животных полу-чавших гризеофульвин выпадения шерсти не наблю-далось;
Выводы: субстанция нового антимикотика произ-
водного тиазолидин-2,4-диона при введении внутрь обладает выраженной химиотерапевтической эффек-тивностью на модели экспериментальной микроспо-
Фунгициды и антимикотики 309
Интенсивное использование сельскохозяйственных
угодий с помощью тяжелой техники, синтетических
удобрений, пестицидов привело к изменению сложив-шихся биоценозов, резкой деградации почв, накопле-нию нит
ратов и тяжелых металлов. это обусловило
необходимость поиска новых методов ведения совре-менного сельскохозяйственного производства.
Важным элементом современных технологий вы-
ращивания ценных культур является применение биологически активных и экологически безопасных средств защиты растений, которые не накапливаются в почве, легко деградируются в природной среде. Та-ким требованиям отвечают биологические препараты нового поколения. Отсюда, необходимость исследова-ния влияния биологических препаратов на микробный состав почвы, так как изменение микробного баланса может привести к серьезным нарушениям, связанным с вспышками фитоинфекций, а свою это отрицательно повлияет на урожайность и качество культур.
Изучалось действие биопрепаратов нового поко-
ления «
экстрасол» и «Фитохит» на микромицетное
население почвы в агроценозах пропашных культур (картофель сорта «У дача» московской селекции).
Биологиче
ский препарат «экстрасол» изготовлен
на основе чистых культур ряда почвенных бактерий, содержание микробных клеток в препарате не менее 100млн. на
1 г. «Фитохит» – препарат, выполненный на
основе биополимера природного происхождения – хи-тозана, который проявляет биологическую активность при действии на клетки растений. В препарат «Фи-тохит» введен низкомолекулярный хитозан, который обладает и антивирусными свойствами, что усиливает положительные качества препарата.
При проведении нашего исследования, перед по-
садкой клубни картофеля обрабатывались биопрепа-ратами. Опытные участки в течение вегетационного периода дважды обрабатывались препаратами путем распыления, что обеспечило попадание препаратов в пахотный (верхний) слой почвы.
Полученные результаты показывают, что биопре-
параты оказывают определенное действие на почвен-ные микро
мицеты. «экстрасол», содержащий живую,
бактериальную культуру, увеличивает численность микромицетов в пахотном слое по сравнению с кон-тролем до 51750 пропагул. на 1 г. почвы. «Фитохит» не оказывает такого стимулирующего действия на уве-личение к
оличества микромицетов как «экстрасол», а
лишь незначительно влияет на повышение их общей численности до 45250 пропагул на 1 г. почвы (в кон-тро
льном варианте – 32000 пропагул на 1г. почвы). В
значительной степени действие биопрепарата «экс-трасол» проявляется в ризосферной зоне культуры, где под его влиянием количество почвенных микромице-тов увеличивается в 1,5 раза по сравнению с контро-лем, а биопрепарат «Фитохит» практически не влияет на количество грибов в ризосфере. На поверхности клубней количество микромицетов, относительно ста-бильно к
ак в опыте, так и в контроле (22500 – 14500
пропагул на 1г. почвы)
Качественный состав микромицетов представ-
ле
н видами родов penicillium, Gliocladium, fusarium,
Alternaria, Helminthosporium, puccinia, phytophtora,
Cladosporium. При доминировании представителей рода pen
icillium, повсеместно встречаются виды родов Mucor
и Trichoderma. Среди видов микромицетов предста-ви
тели родов puccinia, phytophtora, Helminthosporium,
fusarium, Cladosporium и Alternaria встречались пре-
имущественно в контрольном варианте.
Следовательно, можно сделать выводы о том, что
применение биопрепаратов нового поколения не вы-зывает сильных стрессовых действий на почву и ее микромицетное население, стабилизирует инфекци-онный фон и защищает ценные сельскохозяйственные культуры от фитоинфекций грибного происхождения. рии морских свинок. Преимущество микозидина при сравнении с гризеофульвином заключается в более вы-сокой эффективности и в отсутствии необходимости эпиляции волос в процессе лечения заболевания.
ВЛИЯНИЕ БИОПРЕПАР АТОВ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ НА
МИКРОМИЦЕТЫ В АГРОЦЕНОЗАХ ПРОПАШНЫХ КУ ЛЬТУР
Штырлина О.В.
Нижегородский государственный педагогический университет,
Нижний Новгород
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 11 310
МОЛЕКУ ЛЯРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МОЛЕКУ Л-МИШЕНЕЙ
В КЛЕТКАХ ПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ ДЛЯ ПРЕОДОЛЕНИЯ
ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТ
ОЙЧИВОСТИ К э ХИНОКАНДИНАМ
Прокопов И.А., Корчененкова Е.А., Дигтярь А.В.
Московская Медицинская Академия им. И.М. Сеченова,
Москва
эхинокандины – группа высокоэффективных про-
тивогрибковых средств, причем, наряду с сордарина-
ми, эхинокандины являются единственными антими-котическими препаратами грибного происхождения, вошедшими в клиническую практику за последние 15-20 лет. Такие представители эхинокандинов, как анидулафунгин, каспофунгин и микафунгин допуще-ны с 2002 года во многих странах, включая США, к клиническому применению, в том числе в терапии системных кандидамикозов. В различных стадиях ис-следования находятся также акулеацин А (продуцент – asper
gillus aculeatus ), пневмокандин В ( zalerion ar-
boricola), энфумафунгин (Hormonema spp.) и папула-кандины (Papularia sphaerosperma).
эхинок
андины представляют собой N-ацетилиро-
ванные гексапептиды, ковалентно связанные с али-фатическими радикалами – производными жирных кислот. Мишенью действия эхинокандинов является мембранный протеин грибов – в-1,3-D-глюкансинта-
за, основной фермент, участвующий в синтезе био-полимеров (прежде всего в-1,3-D-глюкана) клеточной
стенки па
тогенных грибов [1]. эхинокандины связы-
ваются с в-1,3-D-глюкансинтазой и ингибируют ее по
неконкурентному механизму. Определенный амино-кислотный полиморфизм в доменах в-1,3-D-глюкан-
синтазы может способствовать повышению устой-чивости патогенных штаммов asper
gillus fumigatus,
a.
flavus, candida albicans, c. glabrata, c. krusei, c.
tr
opicalis , Histoplasma capsulatum, cryptococcus neofor-
mans, Trichosporon beigelii и других микроорганизмов
к эхинокандинам. При этом, разумеется, повышается значение МПК – минимальной подавляющей концент-рации лекарственного препарата. Стоит отметить, что, наряду с повышением МПК в настоящее время при-нято также рассматривать несколько параметров для заключения о развитии лекарственной устойчивости у данного морбогенного штамма: применительно к теме нашего исследования, это – специфические мутации в fkS1-до
мене в-1,3-D-глюкансинтазы.
Прежде всего, мы можем говорить о доказательс-
твах, полученных к настоящему моменту рядом иссле-дователей, что в клинически изолируемых штаммах c.
albicans с повышенной МПК в отношении каспо-
фунгина
обнаруживаются мутации в домене fkS1.
эти мутации хорошо изучены (например, аминокис-лотные
замены f639I, v641k, D646Y в Saccharomyces
cerevisiae или замены S645f , S645p , S645Y в c. albi-
cans). В молекуле в-1,3-D-глюкансинтазы существует
особая
«горячая точка» – домен fkS1 phe641-pro649
(нумерация аминокислотных остатков для c. albicans),
мутации в которой позволяют грибам с наибольшей вероятностью преодолевать ингибирующее действие терапевтических эхинокандинов на ферменты син-теза
глюканов клеточной стенки. эта специфическая
последовательность названа «горячая точка 1» (HS1). Другим ярким примером являются мутанты S. cere-
visiae с устойчивостью к циклическому липопептиду арборкандину С, в которых была открыта аминокис-лотная замена L642S в том же самом домене HS1.
Мут
ации в fkS1 играют основную роль в форми-
ровании лекарственной устойчивости в грибах, но это домен не единственная «горячая точка» в в-1,3-D-глю-
кансинтазе. Исследования последних лет показали, что, например, в мутанте S. cerevisiae с дерегулиро-
ванной аминокислотной заменой R1357S специфичес-кой последовательностью, участвующей в повышении устойчивости к эхинокандинам, является так называ-емая «горячая точка 2» (HS2) [2]. Поэтому очевидно, что изучение мутаций в этих последовательностях способно повысить эффективность клинического при-менения эхинокандинов, так как диагностическое оп-ределение манифестирующих штаммов у пациентов в будущем даст возможность подобрать оптимальную комбинацию эхинокандинов и других препаратов для минимизирования риска развития лекарственной ус-тойчивости возбудителя.
В последние годы охарактеризованы многие аспек-
ты лекарственной устойчивости к эхинокандинам. К сожалению, для этого класса препаратов описан ряд вариаций клинической эффективности, и очевидно, что раскрытие молекулярных механизмов, лежащих в основе повышения резистентности определенных па-тогенных штаммов к эхинокандинам, является актуаль-ной задачей медицинской микологии. Резистентность, обуслов
ленная «fkS-механизмом», подтверждена для
таких клинически опасных штаммов, как c. glabrata,
c.
guilliermondii , c. krusei, c. parapsilosis , c. tropica-
lis и c. dubliniensis. В этих микроорганизмах развитие
резистентности также связано с мутациями в высоко-консервативных «горячих точках», подобно мутациям в c.
albicans. В клетках c. glabrata мутация в сайте
HS1 до
мена fkS2 ответственна за развитие фенотипа,
устойчивого к антибиотикам. Приоритетная роль му-таций в этом домене для изменения чувствительности в-1,3-D-глюкансинтазы к эхинокандинам подтвержда-ется рядом исследований [1-3].
Унив
ерсальность модификаций fkS1 как механизм
устойчивости грибов к эхинокандинам была показана путем инжиниринга аналогичной мутации в c.
albi-
cans: экспериментальная замена вида fk S1-S645Y
в плесени a. fumigatus ведёт к заметно сниженной
чувствительности. Но такая заниженная чувствитель-ность в asper
gillus наблюдается только в лабораторном
штамме. Для определенных клинически изолирован-
Фунгициды и антимикотики 311
ных штаммов некоторых патогенных видов candida
(таких как c. parapsilosis и c. guilliermondii ), наблю-
даются высокие значения уровней МПК в отношении
эхинокандинов (0,5-8 мкг/мл) в сравнении с другими видами candida.
Механизм этой пониженной чувстви-
тельности, вероятнее всего, напрямую связан с поли-морфизмом аминокислотных последовательностей в HS1/HS2 регионах fk
S1. В c. parapsilosis наблюдается
естественно встречающийся полиморфизм, ведущий к замене аланина-649 на пролин (что эквивалентно му-тации в патогенных штаммах c.
albicans ). Похожая
мутация в c. albicans (fkS1-p649C) приводит к со-
поставимому уровню понижения чувствительности. Грибы c.
orthopsilosis и c. metapsilosis (близкородс-
твенные штаммы c. parapsilosis ) имеют полиморфизм
p649A,
что также ведет к понижению чувствительнос-
ти [2].
Более того, полиморфизм вида I1359v в HS2 у
c. orthopsilosis также приводит к повышению уровней МПК. Такой же тип мутаций встречается и у штаммов S. cerevisiae , которые демонстрируют высокие уровни
МПК по сравнению с высокочувствительными can-
dida
spp; однако только замена лейцина на метионин в
положении Лей642 (также, как и у c. albicans ) важна
для понижения чувствительности.
У некоторых грибов наблюдаются вариации в ос-
татке Тре643, но замена этой аминокислоты не влияет на чувствительность к эхинокандинам. Таким обра-зом, представленные данные позволяют заключить, что
естественный полиморфизм в домене fkS1 неко-
торых отличных от candida spp. грибов может вносить
заметный вклад к изменениям чувствительности этих грибов к эхинокандинам. Некоторые клинически важ-ные грибы – cryptococcus
neoformans, Fusarium spp.,
Scedosporium spp. и представители семейства zygomy-
cetes
устойчивы к эхинокандинам (МПК>16 мкг/мл).
Механизм этой устойчивости непонятен, так как в-
1,3-D-глюкансинтаза из cryptococcus и ряда других
грибов in vitro ингибируется каспофунгином в очень
сильной степени. Однако, было отмечено, что подобно asper
gillus spp., некоторые плесени (curvularia , alter –
naria, acr emonium, Trichoderma) показывали чувстви-тельность к каспофунгину в тесте по определению минимальной эффективной концентрации. Тем не ме-нее, организмы, такие как cryptococcus ,
устойчивы к
эхинокандинам, несмотря на полное ингибирование в-1,3-D-глюкансинтазы этими препаратами – что за-ставляет нас предположить существование альтерна-тивного механизма развития лекарственной устойчи-во
сти, независимого от fkS1. Возможно, он связан с
транспортом молекул эхинокандинов в клетку, либо с метаболизмом этих молекул после попадания в клетку – но на настоящий момент у нас нет прямых экспери-ментальных данных в пользу той или иной версии.
Прямое изучение аминокислотного полиморфиз-
ма
и мутаций в fkS1-домене в-1,3-D-глюкансинтазы
будет способствовать установлению нами общих при-нципов развития лекарственной устойчивости к эхзи-нокандинам. В настоящее время исследования этой проблемы позволяют заключить, что лекарственная устойчивость к эхинокандинам у наблюдаемых клини-чески важных штаммов развивается благодаря амино-кислотным изменениям в двух определенных сайтах fkS1-по
следовательности в-1,3-D-глюкансинтазы. Та-
ким образом, на этом направлении (которое, по нашей оценке, в Российской Федерации, к сожалению, разви-вается недостаточно быстрыми темпами) открывается возможность значительного повышения терапевтичес-кой эффективности препаратов эхинокандинов.
1. Дигтярь А.В., Позднякова Е.А. Повышение кли-
нической эффективности эхинокандинов и расширение возможностей поиска новых антимикотических средств на основании исследований геномов грибов. // «У спехи медицинской микологии», том IX, стр. 283-286 (2007).
2. Balashov
S.v., park S., perlin D.S. Assessing
resistance to the echinocandin antifungal drug caspofungin in candida
albicans by profiling mutations in fkS1.
Antimicrobial agents and chemotherapy, vol. 50, pp. 2058-2063 (2006).
3. perlin
D.S. Resistance to echinocandin-class anti-
fungal drugs. // Drug resistance Updates, vol. 10, pp. 121-130 (2007).
Armillaria root rot is a serious disease, chiefly of woody
plants, caused by many species of Armillaria that occur in
temperate, tropical and subtropical regions of the world. In Iran, the genus Armillaria was reported on different plants, su
ch as Juglans regia L., Amygdalus communis L., pyrus
communis L., fagus orientalis Lipsky, Quercus castaneifo-
lia C.A.Mey. and some others . In this study, 35 samples were collected from15 different host species in fruit or-chard and forest regions in Iran. The samples were placed on
2 % Malt extract agar (MEA), incubated and maintained
at 22±1°C. Identification was done on the basis of mor-phological characteristics and pairing tests. In field study, mycelial fan and rhizomorphs were appeared. Diploid and haploid isolates paired with two or three known haploid testers from Europe and Asia at least three times. Sexual compatibility was evaluated after 6 to 8 weeks based on dif-ferences in cultures morphology of haploid colonies from white, with aerial mycelium (fluffy) to brownish, without aerial mycelium (crustose). A. mellea was the most com-mo
nly found species, representing 80 % of the collections.
The isolates of A. mellea were collected from Armeniaca vulgaris Lam., Juglans regia L., Amygdalus communis L., pyr
us communis L, Malus domestica Borkh. and populus
nigra L. in Iranian province East Azerbaijan, Citrus auran-ti
um L., parrotia persica C.A.Mey., fagus orientalis Lipsky,
Abies alba Mill. in Mazandaran, and Amygdalus communis L.
, Juglans regia L., and platanus orientalis L. in Esfahan.
A.melea was common in East Azerbaijan, Mazandaran, and Esfahan provinces. It was the most widespread species of the genus Armillaria. Our investigation have shown that A. gallica was the second most commonly collected species, co
nstituting 9 % of the collections. A. gallica was only iso-
lated from the forest in Mazandaran. The remaining isolates were not compatible with any of tester strains.Раздел 12
СИСТЕМАТИКА И эВОЛюцИЯ ГРИбОВ
ARMILLARIA MELLEA Is THE pREv ALENT
spECIE
s Of THE GENUs ARMILLARIA IN IRAN
dalili S.a.r. №, nanagulyan S.G. і, alavi S.V . №
1 department of Plant Protection, agricultural and natural resource research center of mazandaran,
Sari, iran
2 ереванский государственный университет, кафедра ботаники,
ереван, Армения
РЕВИЗИЯ РЖАВЧИННЫХ ГРИБОВ (UREDINALEs) РОССИИ
Азбукина З.М., Каратыгин И.В.
Биол
ого-почвенный институт Дво РАН,
владивосток
Ботанический институт РАН,
С.-Петербург
Первый обстоятельный обзор ржавчинных грибов
б.СССР был сделан Траншелем (1939). Работа вызвала большой интерес к дальнейшему собиранию и изуче-нию этой экономически важной группы грибов. В те-чение последующих лет был накоплен значительный фактический материал, обобщенный Купревичем и Траншелем (1957), Купревичем и Ульянищевым (1975) и Ульянищевым (1987). В двух выпусках «Определи-теля ржавчинных грибов СССР» описано 1126 видов грибов, собранных на более чем 4000 видах питающих растений.
Однако многие группы и отдельные виды явно
нуждались в пересмотре их таксономии. Использо-ванная исследователями система Дителя (Dietel, 1928) также не соответствовала современному уровню зна-ний по урединологии. В связи с этим мы предприняли
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 12 314
ревизию ржавчинников и при распределении их внут-
ри крупных таксонов воспользовались новой класси-фикацией Uredinales, предложенной Кумминсом и Хи-ратсукой (Cummins, Hiratsuka, 1983, 1984).
К настоящему времени нами обработан материал
для 1-ого выпуска «Определителя ржавчинных грибов России» серии «Определитель грибов России». Для территории страны выявлено 122 вида из 20 родов и 7
семейств: pucciniastraceae (Arthur) Gaeum. ex Leppik,
Coleosporiaceae Dietel, Cronartiaceae Dietel, Melamp-so
raceae Dietel, phakopsoraceae (Arthur) Cummins et Y .
Hirats., Mikronegeriaceae Cummins et Y . Hirats., Chaco-niaceae Cummins et Y . Hirats. Последние два семейства приводятся впервые для России. Пересмотрена таксо-но
мия сем. phakopsoraceae. Выявлены новые для уреди-
ниобиоты России роды (Blastospora, Cerotelium) и ряд видов (Blastospora itoana Togashi et Onuma, Cerotelium ta
nakae S. Ito, Naohidemyces fusisanensis S. Sato, katsuya
et Y . Hirats., phakopsora euvitis Y . Ono, ph. pachyrhizi Syd.
et p. Syd. и др.). У становлено, что peridermium kurilense Dietel является эндоформой Cronartium – C. kurilense
(Dietel) Azbukina, 2000, а Cronartium kamtschaticum Jo-er
st. – синонимом C. ribicola J.C. fisch.
Многие виды признаны синонимами соответствую-
щих голоморфных таксонов, другие [Melampsora daph-nicola (Dietel)
Joerst.] – незаконными номенклатурны-
ми к
омбинациями, третьи – сомнительными (Uredo
hyperici-humifusi kleb.) или сборными (Melampsora
salicina Lйv.).
Что же касается таксономии сложных видов
[Melampsora epitea
(kunze et J.C. Schmidt) Thuem., M.
lini (Ehrenb.) Lйv., M. euphorbiae (C. Schub.) Castagne и др.], состоящих из биологических рас, различающихся только по специализации в эциостадии, то, вероятно, их не следует дробить; в крайнем случае, внутривидо-вым таксонам можно придать статус разновидностей, а при наличии и незначительных морфологических отклонений
– статус подвидов, что вполне согласуется
с концепцией Вавилова (1964) и Траншеля (1939), рас-сматривавших комплексные виды как систему.
О ПРОБЛЕМАХ ТАКСОНОМИЧЕСКОГО СТАТУСА
эНТОМОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ МАЛОИЗВЕСТНОГО
АНАМОРФНОГО РОДА eV lacHoV aea (DEUTEROMYCOTA)
Борисов Б.А.1,2, Тарасов К.Л.3, Александрова А.В.3
1 Центр паразитологии Института проблем экологии и эволюции РАН,
Москва
2 НП зА о Росагросервис,
Москва
3 Московский государственный университет им. М. в. ломоносова,
Москва
В 1991 г. в горах Аджарии (Грузия, Кинтришский запо-
ведник) на мёртвом жуке Agelastica alni (Chrysomelidae) был найден (Борисов) ранее неизвестный анаморфный гриб (Deuteromycota, Hyphomycetes) с необычным стро-ен
ием сухих конидиальных цепочек, – похожих на бусы
из мелких ракушек, беспорядочно направленных в раз-ные стороны. У представителей наиболее близкого по внешним признакам рода Paecilomyces формирующиеся
на таких же фиалидах цепочки конидий имеют упорядо-ченный «правильный» вид (как, например, и у грибов р. Penicillium или aspergillus )
, а у mariannaea к онидии на-
кл
адываются друг на друга внахлёст, как черепица. это
дало основания описать гриб как типовой вид нового анаморфного рода evl
achovaea – e. kintrischica (Borisov,
Tarasov, 1999 // Микол. и фитопатол., 33 (4): 248–256). Затем появилось ещё несколько сообщений о наход-ках на погибших насекомых других видов грибов со сходным обликом конидиальных цепочек: evl
achovaea
sp. на клопе Triatoma sordida в центральной Брази-лии (Luz et al., 2003 // J. Med. Entomol. 40: 451–454) и evl
achovaea sp. – анаморфы сумчатого гриба cordyceps
spegazzinii на кладке яиц неидентифицированных двук-
рылых (Diptera), Ц. Америка: Панама (Torres et al., 2005 // mycotaxon ,
94: 253–263). Ещё в нескольких работах
есть иллюстрации похожих энтомопатогенных микро-мицетов, однако авторы отнесли их к р. Paecilomyces (P .
loushanensis , телеоморфа cor dyceps loushanensis , на ли-
чи
нке жука, Китай: пров. Гуйджоу – Liang et al., 1997 //
act
a mycol. Sinica , 16: 61–67), либо к р. mar iannaea (m.
pruinosa , телеоморфа c. pruinosa , на коконах бабочек,
Ки
тай: Гуйджоу – Liang, 1991 // acta myc. Sin. , 10: 104–
107); а анаморфа гриба c. cardinalis (с гусениц бабочек;
США: южные Аппалачи; Япония: о. Сикоку) указыва-ется как представитель р. Mariannaea или clonostachys
(
Sung, Spatafora, 2004 // Mycologia, 96: 658–666). Все эти
трактовки представляются ошибочными.
Дело в том, что половая стадия типового вида ана-
морфного рода mariannaea – m. elegans (Corda) Samson
(Samson, 1974
// Stud. Mycol., 6: 1–119) – относится к
сумчатым грибам (Ascomycota) семейства Nectriaceae (nectria mariannaea Samuels
et Seifert), что подтверж-
дено молекулярно-генетическими исследованиями (Luangsa-ard et
al., 2004 // Mycologia, 96: 773–780). этот
гриб изредка встречается и на погибших насекомых, хотя его патогенность экспериментально не доказана. Но в литературе упоминается ещё один окончательно не идентифицированный гриб Mariannaea sp., пора-
жающий в лесных почвах на северо-западе США ли-чинок трипса Taeniothrips inconsequens (Thysanoptera) (p
arker et al., 1997 // Biological Control, 8: 203–206). В
Систематика и эволюция грибов 315
то же время представители р. cordyceps – другая фи-
логенетическая ветвь в порядке Hypocreales. Прежде
это был один из крупных цельных родов в семействе Clavicipitaceae, но недавно оно было раздроблено на три самостоятельных семейства, и часть видов рода отошла к сем. Clavicipitaceae (р. metacor
dyceps), дру-
гая
– к Ophiocordycipitaceae (роды elaphocor dyceps ,
ophiocor
dyceps), третья – к Cordycipitaceae (сюда вош-
ли р. cor dyceps и не претерпевший пока изменений
р. Torrubiella) (Sung et al., 2007 // Stud. Mycol., 57, 1:
5–59).
Предположение о возможной принадлежности
анаморфы c. cardinalis к роду clonostachys выглядит
весьма странным, т. к. микроморфология этих гри-бов довольно отличается, но, главное, телеоморфы относятся к р. bio
nectria (порядок Hypocreales, сем.
Bionectriaceae) (Schroers, 2001 // Stud. Mycol., 46: 21
4 p.).
Более сложной и запутанной остаётся ситуация с
таксономией грибов р. Paecilomyces. Типовой вид P .
variotii Bainier (он не является «закономерным» па-
тогеном насекомых, но иногда отмечается в качестве так
ового – см., например: Коваль, 1974. Опред. энто-
мофильных грибов СССР , с. 160–161) входит в груп-пу, для которой установлены телеоморфы в родах byssochlamys
, Talaromyces и Thermoascus, относящих-
ся к сумчатым грибам сем. Trichocomaceae в порядке Eurotiales (аскоспоры образуются в клейстотециях). Но за многие годы на членистоногих и нематодах было описано также немало видов Paecilomyces, у которых
были обнаружены в природе Torrubiella- и cor
dyceps-
подобные телеоморфы (в прежнем понимании послед-него рода). Для других видов, половые стадии которых не найдены и, возможно, совсем утрачены, доказатель-ства принадлежности к этой группе аскомицетов (об-разующих перитеции) были получены на основании сравнительных молекулярно-генетических анализов. Поэтому часть этих грибов недавно была перенесе-на в «реабилитированный» анаморфный род isaria
(Hodge et al., 2005 // Taxon., 54 (2): 485–489), чётко укладывающийся в кладу нового сем. Cordycipitaceae (sung et
al., 2007). Но некоторые Paecilomyces -по-
добные виды не могут быть переописаны как isaria ,
т. к. по молекулярно-генетическим характеристикам имеют явную общность с представителями нового сем. Ophiocordycipitaceae (например, P . lilacinus ) или
Clavicipitaceae (P . marquandii, P . cinnamomeus). Пока
для подобных «беспризорных» видов новые анаморф-ные роды не описаны, остаётся в силе использование устаревших, хотя и заведомо неверных названий.
Таким образом, мы сталкиваемся с: 1) наличием
конвергентного сходства анаморф, имеющих порой не только близкое родство (в пределах нескольких семейств, установленных в результате дробления од-ного прежнего), но и весьма дальнее (в разных поряд-ках), 2) наличием патогенных для беспозвоночных внешне похожих видов в разных семействах и даже порядках Ascomycota. То, что для c.
spegazzinii (сем.
Cordycipitaceae) в качестве анаморфы приводится evlachovaea sp.,
в силу сказанного не может служить
основанием считать типовой вид e. kintrischica (с не-
известной половой стадией) принадлежащим именно к этому же семейству. Он вполне может оказаться пред-ставителем как близких семейств, так и вообще за пре-делами порядка Hypocreales (но в таких случаях будет необходимо переописывать анаморфу e.
’ spegazzinii‘
под иным родовым названием). Всё сказанное указы-вает на необходимость проведения более основатель-ных сравнительных исследований с привлечением мо-лекулярно-генетических методов.
ТАКСОНОМИЯ И ФИЛОГЕНИЯ ГРИБОВ РОДА FuSarium
Гагкаева Т.Ю.
всероссийский институт защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
Вся история таксономии гетерогенного рода
Fusarium связана с попытками оценить существую-
щее разнообразие признаков, выявить амплитуды их изменчивости и выделить характеристики, имеющие таксономическую значимость. Отличительным при-знаком грибов р. Fusarium является способность об-разовывать веретеновидные, с различной степенью изогнутости конидии с перегородками на специали-зированных
фертильных гифах – конидиеносцах с
фиалидными конидиогенными клетками. Основными диагностическими признаками для определений сек-ций являются наличие микроконидий и хламидоспор, форма макроконидий. Секции делятся на виды и раз-новидности на основе типа и формы конидиогенных структур, характера образования и формы микрокони-дий; типа спорообразования (спородохии, пионноты); преобладающего числа перегородок, размера, характе-ра изогнутости, длины и формы апикальной и базаль-ной клеток макроконидий; пигментации.
С развитием молекулярных методов анализа ге-
нетической изменчивости таксономия грибов полу-чи
ла новый импульс. ДНК технологии (R fLp, AfLp,
секвенирование) в настоящее время широко исполь-зуются в изучении генома грибов, предпринимаются попытки соотнести полученную информацию с су-ществующими таксонами. Показано, что вид, опи-санный по морфологическим критериям, часто яв-ляется сложной системой, обладающей внутренней структурой. Говоря о виде sensu stricto и sensu lato ,
надо представлять общие биологические свойства организмов ограниченные рамками таксономичес-кого ранга.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 12 316
Показана перспективность использования про-
филей вторичных метаболитов в таксономических и
диагностических целях. Выявлены не только качес-твенные и количественные различия в продуциро-вании метаболитов у разных видов, но и в пределах вида (хемотипы) (Marasas et al., 1984; Logrieco et al., 1999; Thrane et al., 2001; Кононенко и др., 2004; Moss, Thrane, 2004).
В середине 80-х годов было предложено исполь-
зовать метод скрещивания гетероталличных штаммов грибов для
выявления «интерстерильных групп» –
групп организмов репродуктивно изолированных от других морфологически сходных групп, впоследствии получивших статус биологического вида (Hsieh et al., 1977; kuhlman,
1982; Leslie, 1991; klittich, Leslie, 1992).
Концепция биологического вида широко используется, например, в секции liseola
(Гагкаева, Левитин, 2005).
Существующие таксономические системы группи-
руют организмы на основании сходства их свойств, не учитывая историческую связь между таксонами и об-щность их происхождения. Интенсивно используемый в последние годы филогенетический анализ группи-рует организмы на основе их эволюционной истории. Филогенетический вид формирует филогенетическую субгруппу (кластер) имеющую меньшее сходство с ос-тальными анализируемыми организмами. Для выявле-ния дивергенции различных таксонов и линий внутри них особенно активно используется анализ последо-вательности нуклеотидов. Согласно Leslie et al. (2005, 2007), линии,
имеющие более 60 – 70 % сходства
AfLp профилей, следует относить к одному виду, ме-
нее 40
% – к разным видам; видовая принадлежность
штаммов филогенетических линий показывающих сх
одство в пределах 40 – 60 % должна быть подвер-
гнута тщательному анализу. Дробление видов имеет свою положительную сторону, выявляя дополнитель-ный спектр отличий, который может быть использован для понимания свойств организма.
ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА РОДА al Ternaria
Ганнибал Ф.Б.
всероссийский НИИ защиты растений (вИзР),
Санкт-Петербург
alternaria – род феодиктиоспоровых гифомицетов
(анаморфы семейства pleosporaceae), включающий
по некоторым оценкам не менее 150 видов. Изучение таксономии этой группы грибов имеет длинную и насыщенную историю. Подходы к систематики рода неоднократно пересматривались и обновлялись раз-ными исследователями и научными коллективами, однако ряд проблем остаётся по-прежнему нерешён-ным.
Сохраняются разные конкурирующие точки зрения
на таксономию рода alternaria .
Американским учёным
E.G.Simmons в течение последних трёх десятилетий опубликовано множество работ с результатами прово-димой им ревизии рода. В своих скрупулёзных иссле-дованиях он опирался исключительно на морфологи-ческие признаки. Адепты альтернативной концепции, изучая так называемые мелкоспоровые виды alter
–
naria, наоборот, уделяют основное внимание генети-ческим и биохимическим особенностям и игнорируют данные морфо
логии (напр., kusaba, Tsuge, 1997). Оба
подхода к распознаванию видов, по сути, являются ти-пологическими и содержат в себе множество субъек-тивных предпосылок. В результате чего идентифика-ция многих видов рода, проводимая микофлористами и фитопатологами, нередко оказывается сопряжена с непреодолимыми трудностями, что снижает ценность обоих подходов.
Морфологическая (типологическая) концепция вида
в случае многих грибов имеет ограничения из-за при-митивного строения микромицетов и малого количес-тва таксономически ценных морфологических призна-ко
в. Одна из альтернатив, – биологическая концепция,
не работоспособна в отношении грибов частично или полностью утративших половое размножение, к кото-рым относится и род alt
ernaria . Более привлекательной
для нас является филогенетическая концепция. Фило-генетические реконструкции, произведённые на осно-ве молекулярно-генетических данных (генофилетика), опираются на большое количество независимых при-знаков и являются формализованной объективной про-цедурой. В дополнение к филогенетической концепции вида была разработана методология «филогенетическо-го распознавания видов» у грибов (Taylor et al., 2000), наполняющая «филогенетический» вид не только «ис-торическим», но и «биологическим» смыслом.
Исследования филогении рода alternaria
немного-
численны, но их результаты достаточно существенны. С применением молекулярно-генетических методов установлено, что некоторые видовые группы (комп-лексы видов, species-groups) alternaria ,
выделенные
по морфологическим признакам, не являются моно-филетическими. Ещё интереснее то, что виды родов ulocladium
, nimbya и embellisia на филогенетичес-
ком древе оказались частично перемешаны с видами alternaria
(pryor, Bigelow, 2003). Таким образом, был
воскрешён вопрос о границах и экстенсии рода. Виды четырёх перечисленных выше близких родов могут быть разделены на 9 клад. Однако, принимая во внима-ние тот факт, что исследованиями были затронуты не все комплексы видов alternaria ,
есть основания пред-
полагать, что эта группа грибов состоит из большего числа филогенетических линий.
Систематика и эволюция грибов 317
Анализ молекулярной кладограммы и данных мор-
фологии, биохимии, физиологии и экологии в целом
показал их взаимосвязь. При небольшой коррекции таксономической значимости морфологических при-знаков, на наш взгляд, можно добиться полного сов-падения состава групп, выделенных на основании как морфологических, так и молекулярных маркеров. Причём такая система будет обладать большой про-гностической силой и окажется полезна при исследо-вании экологии грибов, биохимии и других аспектов жизнедеятельности видов alternaria .Иссле
дование внутривидового разнообразия пока-
зало, что некоторые виды alternaria , возможно, явля-
ются сборными, а ряд других видов, очень близких по морфологии и экологии, вероятно, следует укрупнить. Использование методов молекулярной генетики и фи-логенетических реконструкций позволит уточнить статус таких спорных видов. Выделенные внутри рода монофилетические группы видов могут получить ста-тус, например, секций.
Исследования поддержаны грантом РФФИ 07–04–
00096.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ПЦР ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ
ГРИБОВ РОДА fUsARIUM
Гришина М.А., Антонов В.А., Ткаченко Г.А., Липницкий А.В.
ФГУз
волгоградский научно-исследовательский противочумный институт,
волгоград
Многочисленное семейство трихотеценовых мико-
токсинов (ТМ) образуется сравнительно небольшим числом грибных родов. Так, большинство простых трихотеценов синтезируется представителями рода Fusarium. Идентификация грибов этого рода, основан-ная на морфологических характеристиках, чрезвычай-но сложна и требует высокой квалификации, посколь-ку культуры грибов нестабильны и таксономические признаки не всегда четко выражены. В настоящее вре-мя ведутся поиски альтернативных методов быстрой и точной идентификации этих патогенов, изучение раз-нообразия на видовом и внутривидовом уровне. Срав-нительно недавно начаты молекулярно-генетические исследов
ания по характеристике грибов – продуцен-
тов ТМ. Основным молекулярно-генетическим мето-
дом, используемым для оценки штаммов Fusarium по
продукции токсина, является ПЦР .
В данной работе были апробированы праймеры
HAT
ri/f и HATri/R, специфичные для Tri5 гена, ответс-
твенного за первую ключевую ступень в метаболизме ТМ F .culmorum, F . sambucinum, F . рoae, F .graminearum
и F .sporotrichioides [Edwards S. et al., 2001], олигонук-
леотидные затравки N1–2, N1–2R и 4056,3551 сконс-труированные на основе tri5-tri6 интергенного региона
для идентификации F .culmorum обладающих высокой
и низкой продукцией микотоксинов. [B.Bakan et al., 2002].
Объектом исследования служили штаммы
f.culmorum, f.sambucinum, f.poae, f.avenaceum,
f.oxysporum, f.solani, f.tricinctum, f.graminearum и
f.sporotrichioides,
полученным из ИБФМ им. Г.К. Скря-
бина Р
АН. Культивирование штаммов fusarium прово-
дили на картофельноглюкозном агаре. ДНК выделяли фенол-хлороформным методом с переосаждением ДНК изопрапонолом. Амплификацию выполняли на мультициклере «Терцик» (АО «ДНК-технология»). Реакцию проводили с использованием «горячего стар-та». Регистрацию результатов ПЦР осуществляли с по-мощью г
ель-электрофореза в 1,5 % агарозе с окраской
фрагментов ДНК этидиум бромидом и визуализацией в УФ-свете.
В результате исследований специфические фраг-
менты амплификации были выявлены у штаммов F .culmorum с использованием олигонуклеотидных за-травок N1–2 и N1–2R, позволяющих определять мик-ромицеты, продуцирующие высокие дозы ТМ. Однако при повышенной концентрации ДНК-матрицы с помо-щью этих праймеров также детектировались штаммы F .graminearum и F .sporotrichioides . При использова-
нии олигонуклеотидных затравок 4056 и 3551, детек-тирующих микромицеты с низкой продукцией ТМ, в реакции амплификации не выявлено ни одного из ана-лизируемых штаммов.
С по
мощью праймеров HATri/f и HATri/R в ПЦР
специфические ампликоны обнаружены только при анализе штаммов F .sporotrichioides, F .culmorum и
F. graminearum, а штаммы F .sambucinum и F .poae не
идентифицировались.
Полученные данные диктуют необходимость как
оптимизации условий проведения ПЦР, так и поиска уникальных последовательностей ДНК токсинпроду-цирующих грибов рода Fusarium с целью создания
высокоспецифичных амплификационных тест-сис-тем.
Дальнейшее развитие метод ПЦР получит в облас-
ти количественного определения ДНК, что позволит соотнести результаты реакции амплификации с коли-чеством ТМ в образцах зерновых культур.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 12 318
В настоящее время виды рода leccinum S.f. Gray яв-
ляются единственными среди базидиальных грибов, у
которых область внутренних транскрибируемых спей-серов ITS1–5,8S-ITS2 ядерной рибосомальной ДНК организована с участием коротких повторяющихся ми
кросателлитных последовательностей. это приводит
к существенному увеличению ее молекулярной массы. Род leccinum ,
включает дикорастущие съедобные грибы
подосиновики и подберезовики, популярные у населе-ния. Виды этого рода образуют эктотрофную микоризу с господствующими древесными породами Северного полушария. О морфологическом разнообразии пред-ставителей рода lec
cinum окончательного мнения не
сформировано, поэтому анализ особенностей строения указанного локуса с привлечением данных по другим участкам генома представляет интерес для изучения филогенетических связей между видами.
Объект исследования: вид leccinum
pseudosca-
brum (kallenb.) Љutara [Leccinum carpini (R. Schulz.)
D.
Reid] – Грабовик.
Распространение: Европа в пределах ареалов Car-
pinus betulus
L., C. caucasica А. Grossh. и С. orientalis
Miller; Северная Америка в пределах ареала C. caro-liniana Walt.
Предмет исследования: участки ITS1–5,8S-ITS2 и
IGS1 ядерной рДНК l
. pseudoscabrum.
Места сборов плодовых тел l. pseudoscabrum ,
послу
живших материалом для исследования, – Крас-
нодарский край, Анапский р-н, окрестности хутора Куматырь (02.09.2003) и р-н Большого Сочи, село Вол-конка, ущелье ручья Годлик (18.07.2005).
Методы исследования: выделение препаратов ДНК
с использованием протеиназы К, амплификация ITS1–5,8S-ITS2 с
праймерами ITS1f и ITS4B, амплифика-
ция IGS1 с праймерами CNL12 и 5SA, рестрикцион-ный анализ
– эндонуклеаза HinfI.
Установлено, что L. pseudoscabrum обладает ми-
нима
льным размером ITS1–5,8S-ITS2 – 1100 п.н., для сравнения L. scabrum (Bull. : fr.) S.f . Gray – 1350 п.н.,
L. versipelle (fr. et Hцk) Snell – 1850 п.н. Анализ сек-
вениров
анной последовательности Af454588 изучае-
мого
участка L. pseudoscabrum показывает, что в ней
отсутствуют повторы, характерные для последователь-ностей других видов этого рода. Например, последова-тельность
L. scabrum Af454585 содержит 7 повторов
GAAAAGTA и 9 – CTAATAGA, на долю которых при-хо
дится более 10 % от общего размера фрагмента.
Кроме того, l. pseudoscabrum обладает минималь-
ным раз
мером межгенного интервала IGS1 – 700 п.н.,
для сравнения l. scabrum – 1000 п.н., l. versipelle –
1070 п.н. После проведения рестрикционного анализа амплифицированного участка IGS1 был получен сле-дующий набор фрагментов (п.н.): l.
pseudoscabrum –
550, 150; l. scabrum – 730, 200; l. versipelle – 900,170.
К настоящему времени все виды, включаемые в
род leccinum согласно системе H.C. Den Bakker &
M.E. Noordeloos (2005) охарактеризованы с исполь-зованием указанных в работе методов. На основании приведенных экспериментальных данных l.
pseudo-
scabrum, как обладающий минимальным размером области внутренних транскрибируемых спейсеров ITS1–5,8S-ITS2, не содержащей микросателлитные повторы и характеризующийся наименьшей длинной последовательности межгенного интервала IGS1, сле-дует считать наиболее примитивным видом изучае-мого рода. Впервые в мире проведена амплификация области межгенного спейсера IGS1 рДНК для видов рода leccinum.
Размеры участков амплифицирован-
ных со специфичными к базидиомицетам праймерами и наборы фрагментов, полученные в результате рес-трикционного анализа, предлагается использовать в качестве молекулярных маркеров для идентификации видов рода l eccinum
.
Работа проведена в рамках программы Рособразо-
вания
и CRDf «Фундаментальные исследования и вы-
сшее образование» (РНП 2.2.2.3.16048, Y5-B-12-02).ОСОБЕННОСТИ ОБЛАСТИ ВНУТРЕННИХ ТР АНСКРИБИРУЕМЫХ
СПЕЙСЕРОВ ITs1–5,8s-ITs2 И МЕЖГЕННОГО ИНТЕРВАЛА IGs1
ЯДРЕНОЙ РИБОСОМАЛЬНОЙ ДНК leccinum PS eudoScabrum
Иванов Д.М.
Санкт-Петербургский государственный университет,
Санкт-Петербург
КОМПЛЕКСНАЯ ТЕР АПИЯ ОНИХОМИКОЗОВ
С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АППАР АТНОГО МЕТОДА
Коваленко А.А.
клиника «Ашарт Шифо-Нур»,
Ташкент, Узбекистан
Научные публикации, посвященные проблеме они-
хомикозов, имеют более чем столетнюю историю, од-нако, несмотря на большой объем накопленных дан-ных, проблема остается весьма актуальной.
Систематика и эволюция грибов 319
По данным проф. Сергеева А.Ю. онихомикозы в
подавляющем большинстве случаев (75 %) представ-
ле
ны тяжелыми формами поражения ногтей – КИ-
ОТОС от 12 до 30, с сопутствующей патологией
внутренних органов (чаще всего сахарный диабет, заболевания периферических сосудов, иммунодефи-цитные состояния).
В настоящее время в Узбекистане начато клиничес-
кое наблюдение больных с гипертрофическими фор-мами онихомикоза по методике комплексной терапии с применением аппаратной чистки ногтевого ложа.
Применялся комплексный подход к лечению боль-
ных онихомикозами, который включает:
• Системные антимикотики
• Местные антимикотики
• Аппаратная чистка ногтевых пластинок и подног-тевого гиперкератоза
• Препараты, улучшающие кровоснабжение и тро-фику матрикса и ногтевого ложа.
• Препараты, улучшающие рост ногтей
• Иммуномодуляторы у больных с отклонением в иммунном статусеЦели настоящего наблюдения: максимальное повы-
шение эффективности лечения онихомикозов с учетом коррекции сопутствующей патологии и улучшение ка-чества жизни пациентов.На базе частной клиники «Ашарт Шифо-нур» с
участием специалистов Научно- исследовательского института дерматологии и венерологии МЗ РУз было обследовано 32 пациента с гипертрофическими фор-мами онихомикозов.
В качестве системного антимикотика мы исполь-
зовали орунгал методом пульс-терапии в зависимос-ти от индекса КИОТОС. Для удаления пораженной ногтевой пластинки применяли аппаратный метод. Для медицинского аппаратного педикюра был ис-пользован аппарат «Герлах». Местно применялся лак «Батрафен». В качестве препарата, улучшающего рост ногтевой пластинки, использовался «Ревалид». Для коррекции сосудистой патологии применялся «Трентал».
Из 32 больных онихомикозами в статистический
анализ вошло 27 пациентов, остальные 5 находятся под наблюдением и еще не прошли контроль излечен-ности. Из 27 больных у 26 наступило полное клинико-мико
логическое излечение. эффективность комплекс-
ного мет
ода лечения составила 96 %.
Таким образом, можно прийти к выводу, что ком-
плексная терапия онихомикозов с применением аппа-ратного метода является оптимальным вариантом по-вышения эффективности стандартных схем терапии и улучшения качества жизни пациентов.
Липолитические ферменты, осуществляющие
гидролиз разнообразных жиров и масел, могут найти
применение в пищевой и легкой промышленности; в медицине; в косметической отрасли промышленности; при выделке мехов и кож; в сельском хозяйстве; для приготовления кормов в животноводстве; в бытовой химии; для очистки от жиров канализационных ком-муникаций и пр.
Микроск
опические грибы – перспективный источ-
ник получения ферментов промышленного значения. Поиск микромицетов-продуцентов термостабильных и щелочеустойчивых липаз для использования в соста-ве
моющих средств – актуальная биотехнологическая
задача.
В отделе физиологии и систематики микромицетов
ИМВ НАНУ проводится селекционная работа по со-зданию высокопродуктивных штаммов грибов-проду-центов
экзолипазы – триацилглицеролгидролазы (КФ
3.1.1.3). Отбор липолитически активных штаммов осуществлялся среди 53 культур мезо- и термофиль-ных микромицетов различного систематического по-ложения из разных местообитаний. Липолитическую активность определяли двумя методами: разработан-ным в отделе спектрофотометрическим методом по реакции с пара-нитрофенилпальмитатом (пНФП) и титро
метрическим – с использованием оливкового
масла.
В результате проведенных исследований получен
новый штамм гриба Rhіzopus sp. 2000ФМ – активный
продуцент экзолипазы. Для культивирования штамма подобран состав питательной среды; изучены некото-рые физик
о – химические свойства экзолипазы, проду-
цируемой Rhіzopus sp. 2000ФМ: оптимумы температу-
ры и рН действия, термо- и рН-стабильность. Штамм отличается высокой устойчивостью в широком диапа-зоне щелочных значений рН.
Обладая повышенной щелочеустойчивостью,
штамм гриба Rhіzopus sp. 2000ФМ сможет найти при-
менение в бытовой химии и соответствующих про-мышленных отраслях.Раздел 13
ГРИбНыЕ бИОТЕхНОЛОГИИ
ОТБОР ЛИПОЛИТИЧЕСКИ АКТИВНЫХ КУ ЛЬТУР
МИКРОМИЦЕТОВ С НОВЫМИ СВОЙСТВАМИ
Айзенберг В.Л.1, Борисенко А.В.1, Захарченко В.Л.1, Курченко И.Н.1,
Капичон А.П.1, Бурбан А.Ф.2, Коновалова В.В.2
1 Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного
Национальной акде
мии наук Украины (ИМв НАНУ),
киев
2 Национальный университет «киево-Могилянская Академия»,
киев
ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАР АТА ПРОТИВ
ПАР АЗИТИЧЕСКИХ НЕМАТОД Р АСТЕНИЙ И ЖИВОТНЫХ
Ананько Г.Г., Теплякова Т.В.
ФГУН Государственный научный центр вирусологии
и биотехно
логии вектор Роспотребнадзора,
п. кольцово Новосибирской области
На основе эффективного штамма нематофагового
гриба Duddingtonia flagrans f-882 разработаны техно-
логии получения препаративных форм, в основе кото-рых заложен принцип 2-х этапного развития гриба, а также используются методы погруженного и твердо-фазного культивирования.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 322
Препарат в зависимости от назначения может быть
жидким, сыпучим, гранулированным. Для получения
жидкой формы биопрепарата наиболее подходящими являются газовихревые безградиентные биореакторы типа «БИОК», позволяющие получить эффективный жидкий препарат на основе вышеуказанного штамма в течение 2-х суток. Разработаны микроморфологические и цитологические показатели жидкой препаративной формы. В составе жидкой формы отсутствуют конидии и хламидоспоры, характерные для данного штамма. Срок хранения данной формы биопрепарата в условиях по
ниженной температуры составляет 2 – 3 месяца.
Культивирование в биореакторе использовали
также для получения сухих препаративных форм в качестве посевного материала для засева зерновых сред. В этом случае используемый мицелий находится в более ранней стадии развития, продолжительность культивирования в биореакторе составляет не более 1,5 суток. Процесс зарастания зерновок происходит в полипропиленовых пакетах или стеклянных емкостях в течение 2-х недель. Действующим началом гриба, кроме мицелия, являются хламидоспоры и немного-численные конидии. Свежеприготовленный препарат в условиях холодильника не теряет эффективности 0,5 года и более; сухой препарат при комнатной темпера-туре
– 2 года.
Аналогичным образом, посредством 2-х этапного
процесса, получена сухая сыпучая форма на основе вспученного вермикулита. В этом случае производит-ся дополнительное введение питательной среды перед началом твердофазной ферментации. Такой двухэтап-ный процесс получения препарата занимает не более 7 суток. На выходе получается препарат, не нуждаю-щийся в сушке.
Проведенные испытания препаративных форм
против галловых нематод огурца и томата, цистооб-разующей нематоды картофеля, стеблевой нематоды земляники показали стимулирующий эффект на рост и развитие растений и снижение их поражённости фито-паразитическими нем
атодами на 80 % и более.
В испытаниях жидкого и гранулированного препа-
рата на паразитических гельминтах мышей, лошадей, маралов также установлено снижение численности паразитов. Нематоцидный эффект при скармливании мышам проявлялся в деструктивных нарушениях кле-ток всех тканей и органов гельминтов.
ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТР АЦИИ ФЕНОЛА НА РОСТ И СИНТЕЗ
ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ ГРИБОМ len TinuS
TiGrinuS И БАКТЕРИЕЙ rHodococcu S er YTHro PoliS ПРИ
Р АЗДЕЛЬНОМ И СОВМЕСТНОМ КУ ЛЬТИВИРОВАНИИ
Атыкян Н.А., Костина Е.Г., Ревин В.В.
Мор
довский государственный университет имени Н.П.огарева,
Саранск
Фенольные соединения, как известно, являются од-
ними из самых токсичных и широко распространенных загрязнителей окружающей среды. По встречаемости в биосфере и экологической опасности они занимают третье место после тяжелых металлов и нефтепродук-тов и являются основными токсичными компонентами и/или отходами ряда производств. В связи с этим коли-чество фенолов в окружающей среде должно быть све-дено до минимума. Наряду с модернизацией традици-онных химических методов утилизации этих веществ, разрабатываются новые методы. Наиболее перспек-тивными в этом плане являются биотехнологичес-кие методы по вовлечению специально подобранных ассоциаций микроорганизмов в биодеградацию фе-нольных соединений. Биодеградация этих соединений в приро
де – сложный многоступенчатый и черезвы-
чайно длительный, а поэтому и малоэффективный процесс, осуществляемый сообществом почвенных микроорганизмов. Поскольку лигнолитические грибы известны как эффективные деструкторы разнообраз-ных токсичных веществ и, как показали наши пред-варительные данные, способны снижать содержание свободного фенола в культуральной среде, на первом этапе наших исследований мы изучали, как изменяет-ся синтез окислительных ферментов гриба в присутс-твии 1
и 5 % фенола, при этом в качестве косубстрата
использовали лигносульфонат в концентрации 0,5 % по а.с.в. Отбор проб, определение общей оксидазной активности (по окислению пирокатехина) и белка осу-ществляли каждые двое суток. В качестве контроля ис-пользовали глюкозную среду без добавления фенола и лигносульфоната. Наши исследования показали, что в вариантах с фенолом, рост культуры гриба был очень слабым, ферментативная активность была ниже или сопоставима с контрольным (на глюкозе), максимум наблюдался на 6 сутки культивирования.
Различные представители рода rhodococcus
спо-
собны усваивать фенол и хлорфенолы в качестве единственного источника углерода и энергии, что под-тверждает их высокий биодеградивный потенциал и в связи с этим важную роль в биоремедиации загрязнен-ных почв и воды. Поэтому на втором этапе мы про-водили культивирование бактерий r.
erythropolis ВКМ
Ас-858Т при тех же условиях, что и гриб lentinus ti-
grinus. В результате проведенных нами исследований было обнаружено, что культура бактерий активно рас-тет и синтезирует довольно активные оксидазы. При этом наблюдается два пика синтеза ферментов, что
Грибные биотехнологии 323
связано, по-видимому, с синтезом нескольких изоформ
оксидаз.
На следующем этапе мы попробовали объединить
эти две культуры и прокультивировать их совмест-но при тех же условиях. Исследования по влиянию фенола на синтез оксидаз при совместном культиви-ровании rho
dococcus erythropolis и lentinus tigrinus
п
оказали, что переход к совместному культивиро-
ванию не вызывает ингибирования роста культур, а на
против – приводит к синтезу более активных форм
оксидаз. При этом наблюдается 2 пика проявления ак
тивности – первый пик совпадает по времени с
активным синтезом окислительных ферментов Rho-
dococcus erythropolis , а второй пик, по-видимому,
обусловлен синтезом дополнительно и грибных окис-лительных ферментов.
Таким образом, переход к совместному культиви-
рованию rhodococcus
erythropolis и lentinus tigrinus
приводит к синтезу более активных форм оксидаз, при этом ингибирующий эффект фенола на ростовые и синтетические процессы намного ниже, чем при мо-нокультивировании.
Г ЛИКОПОЛИМЕРЫ И УГ ЛЕВОДСВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ LENTINUs EDODEs
Бабицкая В.Г.1, Никитина В.Е.2, Смирнов Д.А.1, Щерба В.В.1,
Цивилева О.М.2, Филимонова Т.В.1, Осадчая О.В.1
1 Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
2 Институт биохимии и физиологии растений
и микроорганизмов РАН,
Саратов
Наличие уникального комплекса биологически ак-
тивных веществ у культивируемых ксилотрофных ба-зидиомицетов позволяет использовать их как ценное сырьё для создания лечебно-профилактических препа-ратов и биологически активных добавок. Целью наших исследований явилось исследование гликополимеров и лектинов глубинного мицелия гриба l.
edodes, пос-
кольку они во многом определяют его биологическое действие.
эк
зо- и эндогликополимеры гриба оказались гли-
копро
теинами с содержанием белка – 2,0–9,2 %. Мо-
леку
лярный вес высокомолекулярной фракции ≥ 1 000
кДа, низкомолекулярной – около 70 кДа. По мономер-ному
составу гликопротеины – гетерогликаны с преоб-
ладающим моно
мером глюкозой (54–96 %). Показано,
что способ культивирования оказывает определенное влияние на строение образуемых L. edodes экзо- и эндогликопротеинов. На основании исследования структуры с использованием ИК-спектроскопии и де-градации по Смиту установлено, что углеводная часть экзо- и эндогликопротеинов представлена разветвлен-ными гликанами, содержащими α- и β- гликозидные связи, основная цепь представлена гликанами с C1→C3, боковые цепи − гликанами с C1→C4 и C1→C6 гли-козидными связями. Наряду с гликополимерами грибы рода Lentinus образуют в мицелии высокомолекуляр-ные фено
льные соединения – меланины, наибольшее
количество которых синтезируется на свету.
Среди метаболитов культивируемых базидиоми-
цетов
особое место занимают лектины – белки, не
относящиеся к классу иммунных, способные к обра-тимому связыванию с углеводной частью гликоконъ-югатов без нарушения ковалентной структуры любых из узнаваемых гликозильных лигандов. Уникальные свойства лектинов позволяют их использовать для со-здания диагностических и лечебно-профилактических препаратов. Исследование 3-х лектинов, выделенных из гриба L. edodes показало, что углеводная часть в них со
ставляет 3,3 % (глубинный мицелий), 18,1 %
(пленка коричневая) и 19,8 % (плодовое тело). Белко-вая
часть соответственно − 96,7 %, 81,9 % и 80,2 %.
В больших количествах в белке присутствует серин (7,5
%), глицин (10 %), треонин (13 %), пролин и ва-
лин (7,3
и 7,5 %, соответственно). Установлено, что
углеводная часть лектинов глубинного мицелия пред-став
лена на 58 % инозитом, 25 % глюкозой и 17 %
галактозой. Углеводы лектинов плодовых тел состоят из 8
% инозита, 79 % глюкозы и 13 % галактозы, ко-
ричневой
мицелиальной пленки – из инозита (42 %),
глюкозы (46 %) и маннозы (12 %). Показано, что при твердофазном культивировании активность лектинов на несколько порядков выше по сравнению с лекти-новой активностью глубинной культуры. Все лектины наиболее высокое сродство проявляют по отношению к L-D-меллибиозе, D-лактозе и D-галактозе.
Изучено биологическое действие l.
edodes. Уста-
новлена высокая иммуностимулирующая активность глубинного мицелия гриба, который стимулирует преимущественно развитие гуморального иммунного ответа. Доказано, что l.
edodes обладает гепатопротек-
торным и антиоксидантным действием. Установлено, что эндогликопротеины, полученные из глубинного мицелия l.
edodes, в концентрации 100 мкг/мл и выше стимулируют фагоцитарную активность нейтрофи-лов крови человека по отношению к Staphylococcus
aureus.
Таким образом, проведенные исследования пока-
зали и показывают перспективность использования глубинного мицелия гриба для получения широкого спектра биологически активных соединений.
Работа выполнена при финансовой поддержке БР-
ФФИ-РФФИ (грант №Б06Р-059).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 324
Целью исследования являлось изучение роста и об-
разования биологически активных соединений cor dy-
ceps sinensis и c. militaris в условиях глубинного куль-
тивирования.
Как показали исследования, C. sinensis и C. militaris
предпочитали глюкозу, сахарозу и мелассу. Хорошо
росли они на лактозе и крахмале, накапливая до 12 г/л био
массы, содержащей до 10 % полисахаридов,
15 % липидов, 22–25 % фосфолипидов, 20–24 % бел-ка. В составе жирных кислот липидов преобладали ненасыщенные, со
ставившие 73–77 %. Из проверен-
ных источников азотного питания лучшими для роста обоих видов оказались пептон, дрожжевой экстракт и (NH4)2H
pO4. Стимулировало рост гриба внесение
в среду (0,5г/л) растительных масел. Полученные ре-зультаты позволили разработать промышленные пи-тательные среды, основу которых составили меласса, сухая молочная сыворотка, ржаная мука. Сравнивая полученные результаты с таковыми на стандартной глюкозо-пептонной среде, следует отметить, что на лучших промышленных средах значительно (с 33,8 до 43,0–60,0
% у C. sinensis и с 12,08 до 55,84 % у C.
militaris) увечилось содержание ненасыщенной лино-левой кислоты. Сумма ненасыщенных жирных кислот на этих средах до
стигла 86–89 %.
Оптимальные температуры для активного роста, син-
теза полисахаридов и липидов C. sinensis и C. militaris не совпадали: максимальное количество биомассы от-ме
чено при температуре 20–22 °С, полисахаридов и ли-
пи
дов – при 25–28 °С, фосфолипидной фракции в липи-
да
х – при 20–22 °С. Анализ жирнокислотного состава
липидов позволил выявить следующие особенности: с понижением температуры культивирования увеличива-ется общая насыщенность липидов за счет повышения удельного веса пальмитиновой и стеариновой кислот. Повышение температуры культивирования до 26 и 30–32 °
С приводило к повышению ненасыщенности за счет
усиленного синтеза линолевой кислоты. Наиболее
активное образование липидов (10–24 %)
C.sinensis и C. militaris и полисахаридов происходило при рН 5,0–6,0. Изменение рН среды в кислую или ще-лочную зону снижало общий выход липидов в 1,5–1,7 раза, эндопо
лисахаридов с 12,0 до 9,0 % и экзополиса-
харидов с 4,0 до 2,5 г/л. Изменение рН среды с 4,0 до 9,0 не оказало существенного влияния на жирнокис-лотный состав липидов: во всех вариантах преоблада-ла кисло
та С18:2 (67–71 %). Наиболее высокий выход
биомассы и эндополисахаридов отмечен при скорости растворения
кислорода 0,160 О2.л.ч, липидов – при
0,106 г О2.л.ч.
Проведенные исследования показали, что грибы
рода cor dyceps при глубинном культивировании на оптимизированных средах синтезируют полноценный комплекс биологически активных соединений. За счет изменения температуры, рН среды и интенсивности аэрации можно регулировать их соотношение в био-массе.
Оценка биохимического состава глубинного ми-
целия исследованного гриба позволяет судить о его высокой биологической ценности. Учитывая значи-мость ряда биологически активных соединений (по-лисахаридов, липидов, фосфолипидов, эссенциальных полиеновых кислот и др.) в жизнедеятельности чело-века возможно создание на основе этого ценного гри-ба препаратов антиоксидантного и иммуномодулиру-ющего действия для различных категорий населения, в т.ч. спортсменов, лиц, подвергающихся физическим нагрузкам, а также жителей, проживающих на эколо-гически загрязненных территориях. Препараты на ос-нове глубинной биомассы гриба рода Cordyceps, а так-же растительные и зерновые субстраты, обогащенные мицелием, могут найти применения в ветеринарии и животноводстве.
Работа выполнена при поддержке БРФФИ-ГФФИУ
(грант Б07К-001).ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ГРИБОВ РОДА CORDYCEps
Бабицкая В.Г.1, Бисько Н.А.2, Смирнов Д.А.1, Щерба В.В.1,
Пучкова Т.А.1, Осадчая О.В.1, Поединок Н.Л.2
1 Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
2 Институт ботаники им. Н.Г. Холодного НАН Украины,
киев
УТИЛИЗАЦИЯ ЛИГНОСУ ЛЬФОНАТА ДЕРЕВОР АЗРУШАЮЩИМИ ГРИБАМИ
Бойко М.И., Просянок М.В., Терещенко Г.С., Али М. Ибрагим
Донецкий национальный университет,
Донецк, Украина
Лигносульфонат – продукт, образующийся при пе-
реработке древесины на целлюлозно-бумажных пред-приятиях при изготовлении бумаги и, являющийся загрязнителем окружающий среды. Поэтому эта про-блема требует глубокого изучения и разработки техно-логии по его утилизации. На современном этапе для утилизации углеродсодержащих материалов ученые ведут поиск активных деструкторов этих соединений
Грибные биотехнологии 325
среди микроорганизмов и грибов. Следует отметить,
что в этом плане дереворазрушающие грибы как ути-лизаторы лигносульфоната изучены недостаточно. Тем более, что среди этих грибов выделяются те, которые предпочитают в первую очередь использовать целлю-лозный к
омплекс, другие – лигнин. Нами для иссле-
дования выбраны грибы, вызывающие белую гниль древесины.
Целью работы было изучить накопление биомассы
штаммами НК-35, Р-70 и 007 Pleurotus ostreatus (Jacg.:
fr
.) kumm и штаммами Д-1, Д-9 и Ч-03 irpex lacteus fr.
на питательных средах, содержащих различные кон-центрации лигносульфоната.
Установлено, что рост исследованных грибов на
среде Чапека-Докса без глюкозы, но в присутствии лигнос
ульфоната в концентрациях 3 и 5 %, отсутс-
твовал. Поэтому в последующих экспериментах кон-центрация лигносульфоната в средах составляла 0,1; 0,2; 0,3;
0,5 и 1 %. Полученные результаты показали,
что накопление биомассы штаммом НК-35 на средах с лигносульфонатом осуществлялось пропорциональ-но увеличению его концентрации. Наибольшее (2,56 ± 0,68 г/л) количество биомассы зарегистрировано на пита
тельной среде, содержащей 1 % лигносульфоната.
Штаммы Р-70 и 007 вешенки обыкновенной достовер-но большее количество сухого вещества образовывали на сре
дах Чапека-Докса, содержащих 0,5 % лигносуль-
фоната (3,58 ± 0, 18 и 2,36 ± 0,54 г/л соответственно). Следует отметить, что накопление биомассы штамма-ми pleurotus
ostreatus на среде Чапека-Докса с глюко-
зой (50 г/л) (контроль) было достоверно большим, чем на средах с лигносульфонатом.Полученные данные свидетельствуют о том, что
штаммы P . ostreatus способны утилизировать лигно-
сульфонат, но с различной физиологической активнос-тью.
Параллельно проведены эксперименты на полных
средах Чапека-Докса, то есть с глюкозой, и присутс-твием в
них 0,1; 0,2 и 0,3 % лигносульфоната. Полу-
ченные результаты показали, что наличие в питатель-ных средах глюкозы благоприятствовало увеличению биомассы у всех штаммов вешенки обыкновенной, по сравнению со средами Чапека-Докса без глюкозы, но с лигносульфонатом. Накопление сухого вещества (8,40 ± 0,24 г/л) штаммом НК-35 на полной среде и содер-жанием 0,3
% лигносульфоната было на уровне кон-
трольного варианта (8,70 ± 0, 40 г/л), штаммом Р-70 (8,16 ±
0,34 г/л) – достоверно ниже ( 12,56 ± 0,52 г/л)
и штаммом 007 (13,32 ± 0,36 г/л) – достоверно выше контроля (11,16 ± 0,34 г/л).
Ро
ст штаммов НК-35, К-99 p. ostreatus и штаммов
Д-1, Д-9 и Ч-03 I. lacteus на глкозо-пептонных средах, содержащих
0,6; 1 и 2 % лигносульфоната показал, что
накопление сухого вещества грибами осуществлялось неодинак
ово. Так, для штамма НК-35 p. ostreatus оп-
тимальной для накопления биомассы концентрацией лигнос
ульфоната являлась 0,6 %, для штамма К-99
p. ostreatus – 1 %, а для штаммов Д-1, Д- 9 и Ч-03 I.
lacteus – 2 %.
Таким образом, полученные результаты показыва-
ют, что штаммы Д-1, Д- 9 и Ч-03 irpex lacteus утили-
зируют лигносульфонат более активно, чем штаммы НК- 35 и К-99 Pleurotus ostreatus , о чем свидетельству-
ет количество накопленного ими сухого вещества.
ВОЗМОЖНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БАЗИДИАЛЬНЫХ
ГРИБОВ ДЛЯ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПОЛУЧЕНИЯ
ПРЕПАР АТОВ МАЦЕРИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ
Бойко С.М., Филиппова Ю.О., Древаль К.Г.
Донецкий национальный университет,
Донецк, Украина
Базидиальные грибы своими ферментными систе-
мами разрушают субстрат, на котором они обитают. Биодеструкция естественных субстратов это поли-энзимный процесс, в котором основную роль играют внеклеточные целлюлазы, протеиназы, пектиназы, большая часть которых находит практическое приме-нение в медицине, фармакологии и пищевой промыш-ленности. Так применение ферментных препаратов целлюлолитического и пектолитического действия увеличивает экстракцию сапогенинов из стероидного сырья на
25–40 %, значительно увеличивает экстра-
кцию из лекарственного сырья гликоалкалоидов (пас-лен), сердечных гликозидов (джу, кендырь), эфирного масла (мята, шалфей). В настоящее время большую часть подобных препаратов получают с помощью низ-ших грибов, однако, как показывают литературные источники, высшие базидиальные грибы являются достаточно перспективными объектами в данном на-правлении.
Целью наших исследований было изучить способ-
ность синтезировать ферменты целлюлозолитического и пектолитического действия некоторыми представи-телями базидиальных грибов для дальнейшего исполь-зования их как объектов биотехнологии. Объектами исследований были культуры К-1, I-6 irp
ex lacteus fr. и
CS-1 coriolus sinuosus fr . Предварительные исследова-
ния показали способность данных культур к значитель-ному синтезу ферментов требуемой направленности. Так максимальная активность целлюлозолитических ферментов в культуральных фильтратах наблюдалась при культивировании на питательной среде содержа-щей опилки древесины (род arm
eniaca ) и составила для
культуры I-6 irp ex lacteus на 15 сутки – 0,78 мг/мл, для
культуры К-1 irp ex lacteus – 0,57 мг/мл, для культуры
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 326
CS-1 coriolus sinuosus на 10 сутки – 0,18 мг/мл. Было
отмечено наличие у исследуемых грибов изофермент-
ных форм целлюлозолитического действия.
При исследовании пектолитических свойств куль-
туральных фильтратов грибы культивировали на раз-ных питательных средах. Наличие в питательной среде субстрата (пектина) оказывало положительное действие на активность пектолитических ферментов. При культивировании на стандартной глюкозо-пеп-тонной среде активность у представителей irpex
lac-
teus не превышала 0,020 г/мл, при внесении в среду
пектина в концентрации 1 г/л активность культураль-ного фильтрата возрастала до значения 0,032 г/мл. Представитель coriolus
sinuosus менее интенсивно
проявлял пектолитическую активность даже на среде содержащей субстрат (0,007–0,010 г/мл). Дальнейшее повышение концентрации субстрата в среде (9 г/л) ни коим образом не сказывалась на проявляемой гриба-ми активности. При добавлении к питательной среде, в качестве субстрата, картофельной ткани активность культур К-1, I-6 i.
lacteus оставалась на уровне пептон-
пектиновой среды, а для культуры CS-1 c. sinuosus
активность культурального фильтрата возрастала до 0,015–0,020 г/мл.
Таким образом, полученные данные показали
способность представителей высших грибов синте-зировать на хорошем уровне ферментные комплексы целлюлозолитического и пектолитического действия. Подбор состава питательной среды и его оптимизация положительно сказывается на проявляемой активнос-ти, а так же ее сроках. Необходимо отметить высокую полиферментную синтетическую способность пред-ставителей irpex
lacteus , которые можно рекомендо-
вать как перспективные объекты для биотехнологии.
ПОЛУЧЕНИЕ ЧИСТОЙ СУСПЕНЗИИ БАЗИДИОСПОР
Владимирова С.Ф., Нефелова М.В., Жарикова Г.Г.
Российск
ая экономическая академия им. Г.в. Плеханова,
Москва
Базидиомицеты и их культивирование привлекают
все большее внимание исследователей и практиков как продукты питания и как источники биологически ак-тивных и лечебных препаратов. В связи с этим встает задача получения в достаточном количестве чистого посевного материала в виде базидиоспор. Геминофо-ры зрелых грибов, содержащие огромные количества базидиоспор, обычно обсеменены другими микроор-ганизмами, бактериями, дрожжами, низшими гриба-ми, что сильно мешает при выращивании мицелия из базидиоспор.
Для получения чистых базидиоспор из высушенных
гименофоров разрабатывался комплексный метод пос-ледовательной многоступенчатой обработки материала без нарушения жизнеспособности нужных спор.
В методах используются такие свойства базиди-
оспор как достаточно прочная защитная оболочка, большая масса и размеры, интенсивная окраска. Из-влечение базидиоспор из хранящихся в высушенном виде гименофоров ведется параллельно с освобожде-нием от сопутствующих микроорганизмов.
Тщательно размешанный в нагретой до 40–50
о С
воде порошок гименофоров несколько раз фильтруется через вату. Полученная взвесь спор многократно про-мывается водой и центрифугируется в мягком режи-ме 5–10 минут при I т.об., что отсекает значительную часть более легких клеток других микроорганизмов. Возможна кратковременная обработка осадка базиди-оспор антисептиками с последующим промыванием и центрифугированием. Важной частью процесса очист-ки базидиоспор является использование метода филь-трации через мембранный фильтр с соответствующей величиной пор, например 10 мкм.
Проводимый на всех этапах очистки микроскопи-
ческий контроль и высев на вспомогательные пита-тельные среды показывают последовательное умень-шение количества и разнообразия сопутствующих микроорганизмов.
В конечном результате перенесенный в воду темно-
бурый или черный осадок представляет практически чистую суспензию базидиоспор, концентрация кото-рого может регулироваться соотношением количества осадка и воды.
Вся работа проводится в боксе с использованием
стерильной посуды, инструментов, воды, питательных сред и пр.
Количество, последовательность и параметры при-
меняемых методов могут варьироваться в зависимости от степени загрязненности исходного и биологическо-го вида базидиоспор.
Грибные биотехнологии 327
Грибы Trichoderma spp. используются в мировой
практике для создания и разработки биологических
препаратов исходя из высокого антагонистического потенциала, скорости роста и возможности культиви-рования в производственных условиях.
Большинство препаратов на основе грибов-анта-
гонистов Trichoderma spp. содержат живые клеточные
структуры, их эффективность во многом зависит от количества жизнеспособных клеток. В связи с этим, повышение интенсивности спорообразования для пре-паратов, изготавливаемых твердофазным способом, и стабилизация препаратов, изготавливаемых спосо-бом
глубинного культивирования, – перспективные
направления по совершенствованию эффективности биопрепаратов на основе грибов Trichoderma spp. В
этой связи исследование влияния неорганических со-лей на рост и развитие грибов Trichoderma spp. имеет
большое значение, так как известно как положитель-ное, так и отрицательное влияние ионов металлов на микроорганизмы. Кроме того, ионы металлов входят в состав соединений, используемых для внекорневой и корневой подкормок растений.
В Беларуси разработано два биопрепарата на ос-
нове грибов Trichoderma spp.: триходермин-БЛ, титр
спор не
менее 6 млрд/г – изготавливается способом
твердофазного культивирования на основе штамма-продуцента Trichoderma lignorum T 13–82 на сыпучем зерновом субстрате, и лигнорин, пс., титр спор не ме-нее 5 млрд/г, получаемый способом глубинного куль-тивирования на основе штамма-продуцента T. harzia-
num S-4.
Установлено, что добавление в зерновой субстрат
для твердофазной наработки препарата триходермин-БЛ
неорганических солей – (NH4)2MoO4, MgSO4,
NiCl2, znSO4, CoSO4, Li2SO4, MnSO4, kI, kBr – в
концентрации 0,01 и 0,1 % индуцирует спорообразо-вание штамма-продуцента. Титр спор в сравнении с конт
ролем повышается на 4,3–162,2 %. Наиболее ак-
тивными индукторами спорообразования являются MgSO4, NiCl2,
MnSO4 – добавление растворов указан-
ных солей в питательную среду способствует повыше-нию титра спор в г
отовом препарате на 54,0–162,6 %.
Для биопрепарата лигнорин, пс. подобран консер-
вант
– натрия бензоат, добавление которого способс-
твует повышению сохранности спор в препарате через 12 месяцев хранения в 2,5 раза по сравнению с препа-ратом без использования консерванта.
Таким образом, добавление в питательный субстрат
для твердофазного культивирования биологическо-го препарата триходермин-БЛ неорганических солей микроэлементов способствует повышению интенсив-ности спорообразования. Стабилизация биопрепарата лигнорин, пс., полученного глубинным способом, до-стигается добавлением натрия бензоата.ПОВЫШЕНИЕ АКТИВНОСТИ БИОПРЕПАР АТОВ НА ОСНОВЕ
ГРИБОВ-АНТАГОНИСТОВ TricHoderma SPP .
Войтка Д.В.
Институт защиты растений,
Прилуки, Минская область
РАЗР АБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА БИОЛОГИЧЕСКИ
АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ПТИЦЕВОДСТВЕ
Гвоздкова Т.С.1, Черноок Т.В.1, Валюженич Т.Е.1, Щерба В.В.1,
Бирман Б.Я.2, Гирис Д.А.2, Буйко Н.В.2, Зинина Н.В.2
1 Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
2 Институт экспериментальной ветеринарии
им. С.Н. в
ышелесского НАН Беларуси,
Минск
Существенное значение для всех видов и катего-
рий птицы имеют биологически активные вещества (БАВ) и особенно те, которые не синтезируются в их организме, являясь незаменимыми (в т.ч. каротинои-ды, эссенциальные фосфолипиды и жирные кисло-ты, провитаминные, стероидные соединения и др.). В макроорганизме они выполняют целый ряд жизненно важных функций, в частности, антиоксидантное, им-муностимулирующее и др. В этой связи поиск источ-ников биоактивных липидных соединений, особенно природного происхождения, и разработка способов получения лечебно-профилактических препаратов с широким спектром биологического действия для про-мышленного птицеводства, являются актуальными и практически значимыми.
Таким источником БАВ является базидиальный
гриб laetiporus
sulphureus, глубинный мицелий кото-
рого содержит уникальный комплекс биологически активных веществ липидной природы, включающий каротиноиды, фосфолипиды, полиеновые жирные кислоты, провитамины и др.
Настоящее исследование включало серию экспе-
риментальных работ по отбору активного продуцента комплекса биологически активных веществ липидной
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 328
природы среди 14 штаммов гриба L. sulphureus, опти-
мизации условий его культивирования, подбору про-мышленной питательной среды, которые в итоге обес-печили активное накопление биомассы (свыше 16,0 г/л), в
мицелии гриба – липидов (20–25 % в пересчете
на сухие вещества мицелия), фосфолипидов (3–5 %), линолевой кислоты (70–75 % от суммы жирных кис-лот), каротиноидов (более 13 мг/г) и эргостерина (до 1,5
%).
этиловый спирт оказался наиболее эффективным
экстрагентом липокаротиноидного комплекса, позво-ляющий практически полностью извлекать каротино-иды и все целевые биоактивные липидные компонен-ты из мицелия гриба. Исследование биохимического состава лабораторного образца сконцентрированного экстракта, как основы лечебно-профилактического препарата иммуностимулирующего и антиоксидан-тного действия, показало, что основная его часть (≈ 80
% от с.в. экстракта) представлена липокаротиноид-
ным к
омплексом. На долю липидов приходится 55,4 %,
фосфолипидов – 14,5 %. Суммарное содержание каро-тиноидных пиг
ментов в экстракте составило 5,5 %, эргостерина – 4,2 %. Доминирующими в составе жир-ных кисло
т липидов являются линолевая (42 – 55 % от
суммы жирных кислот) и олеиновая кислоты (15 % – 18 %). На белковую и углеводную часть приходится 1–2 % и 10–12 % соответственно. Установлена высо-кая антиокислительная активность экстракта гриба (≈ 80
% по отношению к ионолу).
При изучении острой токсичности экстрактивной
формы липокаротиноидной субстанции гибели лабора-торных животных (белые мыши и крысы) не наблюда-лось. По результатам испытаний LD50 установить не удалось. При определении хронической токсичности липокаротиноидного экстракта установлено, что ис-польз
ование его в дозах (по каротиноидам) – 0,34 – 3,1
мг/кг массы тела, в составе рациона белых крыс и цып-лят-бройлеров, не изменяло клинического состояния живо
тных в течение всего срока наблюдения. экстракт
оказывал ростостимулирующее действие (прирост у крыс со
ставил 8 – 9 %, у цыплят – 12,5 – 40 %). По ре-
зультатам гематологических и биохимических иссле-дований крови лабораторных животных установлено его гепатопротекторное и антиоксидантное действие.
ГРИБЫ РОДА TRAMETEs fR. КАК ОБЪЕКТЫ БИОТЕХНОЛОГИИ
Горшина Е.С.
Московский государственный университет инженерной экологии,
Москва
Интерес к базидиальным грибам как к объектам
биотехнологии неуклонно растет год от года. Одним из наиболее интересных родов в этом отношении яв-ляется род Trametes fr
. (coriolus ), относящийся к се-
мейству Polyporaceae (Poriaceae ) и принадлежащий
к экологической группе дереворазрушающих грибов. Грибы этого рода известны как продуценты различных биологически активных веществ, таких как иммуномо-дулирующие полисахариды ( T.versicolor (каваратаке)
известен как лекарственный гриб японской народной медицины и продуцент противоопухолевого препарата крестина), ферменты (T.hirsuta, T.versicolor известны
как одни из лучших продуцентов лакказы), стеролы, вещества с антимикробной активностью и при этом не требовательны к составу питательных сред и облада-ют высокой скоростью роста, в том числе в глубинной культуре, что делает их перспективными в качестве штаммов-продуцентов в промышленной биотехноло-гии.
В своей работе мы изучили особенности роста на
различных средах и при различных условиях культи-вирования 20 штаммов грибов это города, принадле-жащих к 4 видам: T.hirsuta (Wulfen) p
ilбt, T.pubescens
(Schumach.) pilбt, T
.ochracea (pers.)Gilb. et Ryvarden,
T
.versicolor (L.) Lloyd. Отбор штаммов проводили на
основании анализа оксидазной активности (для штам-ма-продуцента лакказы) и концентрации биомассы (для продуцента биомассы). При выборе штамма учи-тывали также морфологические характеристики, в частности, наличие пряжек в глубинной культуре, не-обходимое для микробиологического контроля в про-цессе производства, а также стабильность в глубинной культуре.
Совместно с Институтом биохимии им. А.Н. Баха
Р АН разработана промышленная технология получения ферментного препарата лакказы (п-дифенол:кислород оксидоредуктазы, КФ 1.10.3.2) с использованием при-родного генетически интактного штамма-продуцента T.hirsuta 56. В качестве основного источника углерода
предложено использовать пшеничную муку. Состав среды и условия культивирования (температура, рН среды, скорость перемешивания, аэрация) оптимизи-рованы. Разработанная технология отличается тем, что оксидазы, синтезируемые в соответствии с ней штам-мом, представлены преимущественно лакказой. Лак-каза T.hirsuta обладает высоким окислительно-восста-
новительным потенциалом (780±20 мВ), что позволяет использовать препарат практически во всех областях возможного применения лакказ. Молекулярная масса лакказы
составляет 70 кДа, изоэлектрическая точка –
4,5. На оптимизированной среде с пшеничной мукой в оптимальных условиях культивирования оксидазная активность препарата составляет 20–60 МЕ за 65–68 часов роста. Подтверждена возможность применения препарата для синтеза электропроводящего полиани-лина в процессе получения нанопокрытий для защиты от электромагнитного излучения и статического элек-тричества и коррозии, а также в качестве биосвязую-
Грибные биотехнологии 329
щего в производстве биопластиков на основе древес-
новолокнистых материалов. Показана рентабельность технологии.
Совместно с ЗАО «Микротэп» разработана про-
мышленная технология получения биологически ак-тивной добавки на основе сухой биомассы T.pubescens
923–2, содержащей 1,3–в глюканы. Технология осу-ществима в промышленных ферментационных аппа-ратах объемом 63 м
3, что удешевляет производство.
Медико-биологические и клинические исследования показали безопасность препарата и его высокую био-логическую активность, в частности гепатопротек-торную, онкостатическую и иммуномодулирующую активность. Препарат выпускается в таблетированной форме и имеет торговое название «Трамелан».
Разработанные технологии легко включаются в об-
щую схему переработки зерна, что позволяет получить дополнительные продукты (биологически активные белковые кормовые добавки) и снизить себестоимость каждого из целевых продуктов.
Таким образом, грибы рода Trametes уже нашли
применение в качестве штаммов-продуцентов в сов-ременной рентабельной промышленной биотехноло-гии.
ПАР АЗИТАРНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ В НОВОСИБИРСКОЙ ОБЛАСТИ
И ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ХИЩНЫХ ГРИБОВ В
БОРЬБЕ С ГЕЛЬМИНТОЗАМИ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА
Ефремова Е.А.1, Бонина О.М.1, Коптенкова Н.Б.2, Теплякова Т.В.3, Урютова Л.А.4
1 ГНУИнститут экспериментальной ветеринарии Сибири
и Дальнего в
остока Со Россельхозакадемии,
2 Управление Роспотребнадзора по Новосибирской области,
3 ФГУН Государственный научный центр вирусологии
и биотехно
логии вектор Роспотребнадзора,
п.кольцово Новосибирской области
4 Региональное управление № 25 Федерального
медико-биологического агентства
Ежегодно на протяжении многих лет в городе Но-
восибирске и Новосибирской области регистрируются 13–17 нозоформ паразитарной этиологии. Наиболее актуальными заболеваниями являются лямблиоз, энте-робиоз, описторхоз и токсокароз. Среди этих болезней по общей заболеваемости населения в Новосибирске и Новосибирской области описторхоз занимает третье место. При этом он лидирует с огромным отрывом от др
угих природно-очаговых болезней. это неудивитель-
но, так как Новосибирская область составляет часть са-мого крупного в мире Западно-Сибирского очага опис-торхоза, занимающего бассейн рек Обь и Иртыш.
Заболеваемость описторхозом населения города
Новосибирска и области в целом отличается слабо (127,6 и 120,0 на 100000 населения, соответственно). В пищу жителей Новосибирска в наибольших коли-чествах попадает карповая рыба (язь, лещ, плотва, елец), отловленная в Новосибирском водохранилище, в акватории которого имеются локальные очаги опис-торхоза.
Что касается показателей заболеваемости детей па-
разитарными болезнями, то в отличие от лямблиоза, энтеробиоза и аскаридоза, в большей степени поража-ющих детей, описторхозом чаще болеет взрослое на-селение. Так, например, в Новосибирске относитель-ный показатель заболеваемости (на 100000 населения) в целом составляет 127,6, то он же для детей до 14 лет
– 45,74, детей до 17 лет – 53,3.
Заболеваемость людей описторхозом по районам
области распределена очень неравномерно и варьи-рует от 6,36 в Болотнинском до 972,4 в Венгеровском районах. Такая неравномерность характерна для при-родно-очаговых заболеваний и свидетельствует о том, что в разных районах складываются неравные условия для функционирования и поддержания очагов опис-торхоза.
Не последнюю роль в процессе заражения живот-
ных и человека паразитами даже после дегельмин-тизации высокоэффективными, и, как правило, до-рогостоящими препаратами, играет факт отсутствия каких–либо мероприятий по ограничению численнос-ти яиц и личинок во внешней среде. Без ограничения контаминации внешней среды инвазионными агента-ми немыслима идея оптимизации противопаразитар-ных мероприятий.
Особую актуальность в этой связи представляют
гельминтозы домашних животных, которые нередко служат источниками заражения человека. Известно, что из 82 видов гельминтов, зарегистрированных у со-бак, 26 из них паразитирует у человека. Важное эпи-демиологиче
ское значение имеет токсокароз – опас-
ное заболевание человека, источником возбудителя которого являются собаки. Число учтённых больных в России за последнее десятилетие увеличилось почти в 100 раз, что связано не только с внедрением современ-ных методов диагностики, но и высокой численнос-тью собак в городах. Только в Москве заражённость бродячих
собак токсокарозом достигает 55 %, а в 1г
их фекалий содержится до 40тыс. яиц паразита. это
создаёт условие для высокого риска заражения токсо-карозом населения, в первую очередь, детей (Сергиев В.П., 2005).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 330
Для контроля численности паразитических нематод
домашних животных во внешней среде можно исполь-
зовать хищные грибы, обитающие в почве и являющи-еся их естественными врагами. Исследования, прове-денные нами с эффективным штаммом. Duddingtonia flagrans f-882
на ряде возбудителей гельминтозов жи-
вотных (мыши, лошади, маралы )показали не только высокую
лярвицидную активность гриба (93–100 %),
НО И НАЛИЧИЕ ОВОЦИДНЫХ СВОЙСТВ,
Полученные результаты подтверждают актуаль-
ность исследований, направленных на поиск биоло-гических способов борьбы с возбудителями парази-тарных болезней во внешней среде с использованием препарат
ов на основе хищных грибов – гифомицетов.
Г ЛУБИННОЕ КУ ЛЬТИВИРОВАНИЕ НЕКОТОРЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ
Кожемякина Н.В., Гурина С.В., Ананьева Е.П.
ГоУ в
По Санкт-Петербургская химико-фармацевтическая академия,
Санкт- Петербург
Высшие базидиальные грибы являются проду-
центами целого ряда биологически активных ве-ществ. Многие лекарственные и профилактические препараты производятся на основе плодовых тел базидиомицетов, однако, перспективным методом современной биотехнологии является глубинное культивирование грибов, так как оно позволяет син-тезировать стандартную продукцию с заданными свойствами.
Были отработаны условия глубинного культивиро-
вания
некоторых базидиомицетов:: flammulina velu-
tipes, f
omes fomentarius и Ganoderma applanatum.
Для изучения влияния источников углерода на рост
грибов в базовой питательной среде (синтетическая глюк
озо – пептонная среда) глюкозу заменяли на дру-
гие источники углерода, такие как сахароза, раствори-мый и нерастворимый крахмал, а также варьировали концентрацию глюкозы от 5 до 10 г/л. Наибольший выход биомассы наблюдали на среде с концентрацией глюкозы 10 г/л, замена глюкозы на другие источники углерода приводила к снижению выхода. При исполь-зовании пептона в качестве основного и единствен-ного источника азота в базовой среде выход мицелия был наименьшим (не более 3г/л). Существенное повы-шение выхода отмечали при добавлении дрожжевого автолизата, что, вероятно, связано с наличием в нем необходимых для роста грибов витаминов, макро- и микроэлементов. Введение в базовую среду дополни-тельных источников неорганического азота (нитрата натрия или сульфата аммония) не приводило к уве-личению выхода. Нужно отметить, что активное на-копление биомассы начиналось только с 5- 6-х суток культивирования и сопровождалось резким уменьше-нием содержания глюкозы и аминного азота в среде. Максимальный выход биомассы наблюдали на 9–10 сутки культивирования, причем утилизация источника углерода происходила практически полностью, а уро-вень содержания источников азота сохранялся значи-тельным до конца ферментации.
Все штаммы грибов были способны к росту в широ-
ком диапазоне рН от 3.0 до 7.5, наибольший выход был отмечен при исходном рН среды 6.0–7.0. В процессе культивирования значение рН уменьшалось в течение 8 суток до 3.5, а затем возрастало до 6.5, что вероятно связано с интенсивным ростом культуры за счет пот-ребления продуктов ЦТК в качестве субстрата.
При изучении способа культивирования было ус-
тановлено, что в динамических условиях выход био-массы на оптимальной питательной среде был в 2 раза выше, чем при выращивании в статических условиях. В качестве посевного материала, обеспечивающего максимальное накопление грибного мицелия, исполь-зовали пеллеты 4-х суточной культуры грибов.
На основании полученных результатов для дальней-
ших иссле
дований была выбрана глюкозо – пептонная
среда, так как она обеспечивала достаточно высокий выход биомассы и имела постоянный компонентный состав, что необходимо для стандартизации условий культивирования и получения конечного продукта с постоянными характеристиками.
В дальнейших исследованиях было показано, что
углеводные фракции, выделенные из биомассы грибов обладали иммунобиологической и противоопухолевой активностью.
ГРИБЫ РОДА Penicillium КАК ПРОДУЦЕНТЫ НИЗКОМОЛЕКУ ЛЯРНЫХ
АЗОТСОДЕРЖАЩИХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ.
Козловский А.Г., Желифонова В.П., Антипова Т.В.
Институт био
химии и физиологии микроорганизмов им. Г.к.Скрябина РАН,
Пущино
Микробное биоразнообразие в различных геогра-
фических и экологических нишах является малоизу-ченным, но практически неисчерпаемым источником новых биологических структур, новых биорегуляторов.
Грибные биотехнологии 331
Микроскопические грибы рода Penicillium , явля-
ются одними из наиболее креативных и перспектив-
ных источников биологически активных соединений. В настоящее время активный поиск продуцентов но-вых биологически активных соединений ведется сре-ди штаммов грибов, выделенных из экстремальных местообитаний, так как новые вторичные метаболиты (или новые потенциально биологически активные ве-щества), по-видимому, помогают продуценту выжи-вать в специфических условиях и адаптироваться к ним. В то же время, весьма вероятно, что штаммы гри-бов, выделенные из древних мерзлотных отложений и подвергавшиеся длительной природной консервации, будут отличаться по физиологическим и биохими-ческим характеристикам (включая спектр вторичных метаболитов) от представителей тех же видов, но про-шедших другой путь эволюции.
Интерес также представляли штаммы, местообита-
нием к
оторых служила такая искусственная экобиосис-
тема, как орбитальный комплекс «Мир», в котором в специфических экстремальных условиях космическо-го полета эволюционные процессы протекали очень быстро. В качестве перспективных штаммов были исследованы также грибы выделенные из почв, под-вергнутых
антропогенным загрязнениям и находя-
щихся в регионах с неблагоприятными условиями для суще
ствования. При поиске креативных штаммов учи-
тыва
лись также таксономические характеристики и
географическое положение местообитаний. Наиболее вероятно найти активные штаммы среди представите-лей видов, которые уже известны как продуценты вто-ричных метаболитов. Были проведены исследования по оптимизации
сред культивирования и определению
оптимальных условий биосинтеза вторичных метабо-литов.
Новые продуценты новых биологически активных
соединений и уже известных практически ценных ве-ществ были отобраны среди штаммов грибов, относя-щиеся к роду Penicillium и выделенных из обычных
и малоизученных местообитаний. Для выделения, установления строения и идентификации вторичных метабо
литов были использованы современные хими-
ческие и физико-химические методы. В результате ра-боты были открыты новые, ранее неизвестные вторич-ные метаболиты различных структурных групп такие, как дикетопиперазины (гландиколины, пискаринины, феллутанины и др.), хинолиновые алкалоиды (хино-цитринины), эргоалкалоиды ( аурантиоклавины, эпок-сиагроклавин-1 и агроклавин-1), а также семейство N-N-димеров эрг
оалкалоидов. эти соединения являются
биологически активными веществами широкого спек-тра действия. Среди них есть биомолекулы, обладаю-щие антимикробным
действием, цитотоксично стью
(хиноцитринины, пискаринины), воздействующие на ЦНС, а
также ингибиторы различных гормонов (эрго-
алк
алоиды и их полусинтетические производные). эти
вещества крайне перспективны в качестве основы для создания лекарственных препаратов.
Изучены некоторые аспекты физиологии и биохи-
мии про
дуцентов. Созданы на учные основы для разра-
ботки биотехнологических методов получения биоло-гически а
ктивных метаболитов.
БИОДЕГР АДАЦИЯ НЕФТЯНЫХ УГ ЛЕВОДОРОДОВ ПРИ СОВМЕСТНОМ
КУ ЛЬТИВИРОВАНИИ lenT inuS TiGrinuS И rH odococcuS er YTHroPoliS
Костина Е.Г., Надежина О.С., Атыкян Н.А., Ревин В.В.
Мор
довский государственный университет им. Н.П. огарева,
Саранск
Нефть и нефтепродукты в настоящее время явля-
ются самыми распространенными стойкими высо-котоксичными техногенными загрязнителями. В ус-ловиях нефтяного загрязнения в водных экосистемах разрушение углеводородов в основном идет за счет деятельности микроорганизмов, поскольку они имеют сравнительно высокий потенциал разрушения ксено-биотиков и проявляют способность к быстрой метабо-лической перестройке и обмену генетическим матери-алом. В связи с этим им придается большое значение при разработке путей биоремедиации загрязненных объектов. Долгое время считалось, что основная роль в биодеградации углеводородов принадлежит бактери-ям, однако позднее стало ясно, что следует учитывать и деструкционную деятельность грибов, а также воз-можность их совместной деятельности. В связи с этим целью работы было изучение убыли дизельного топ-лива при совместном культивировании культур гриба lentinus tigrinus
и бактерии r hodococcus erythropolis.Объектом исследования служили гриб Lentinus
(p
anus) tigrinus штамм ВКМ f-3616D, выделенный
сотрудниками кафедры биотехнологии МГУ им. Н.П. Огарева, и культура бактерий Rhodococcus erythopolis штамм ВКМ Ас-858Т, полученная из Всероссийской коллекции микроорганизмов. Выращивание культур микроорганизмов
проводили на среде эггерта с добав-
лением 1
и 5 % дизельного топлива в перемешиваемых
условиях на качалке (200 об/мин) при 26 °С в течение 10 суток. Убыль дизельного топлива определяли с по-мощью концентратомера «КН-2м» (Россия).
В результате проведённых нами исследований было
обнаружено, что концентрация дизельного топлива по-разному влияет на его убыль.
При вне
сении 1 % дизельного топлива при культи-
вировании бактерии R. erythopolis к 10 суткам роста наблюдалась его максимальная убыль, которая соста-вила 64,3
%. При увеличении концентрации дизельно-
го
топлива до 5 % убыль его также возрастала, однако
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 332
она была несколько ниже и к 10 суткам роста культуры
составила 58,2 %. Сравнивая убыль 1 и 5 % дизельно-го топлива культурой R. erythropolis можно отметить одинаковую закономерность влияния концентрации углев
одорода. Не смотря на то, что в варианте с 5 %
дизельного топлива суммарная убыль ниже, чем в ва-рианте с
1 % дизельного топлива, по абсолютным еди-
ницам за один и тот же промежуток времени культу-ра R. erythropolis «съела» дизельное топливо в 4 раза больше, чем в случае с 1
% содержанием.
При культивировании L. tigrinus на среде с 1 % ди-
зельного топлива убыль данного гидрофобного суб-стра
та к10 суткам роста составила 39,7 %, а в варианте
с 5 % – 24,2 %. При этом, как и в случае с R. erythropolis убыль дизельного топлива по абсолютным величинам была выше
в 5 % варианте, хотя по относительным – в
1 %. Кроме того, суммарная убыль была в 2–3 раза ниже, чем при культивировании R. erythropolis.При добавлении дизельного топлива в среду при
совместном культивировании L. tigrinus и R. erythropolis максимальная убыль нефтепродукта также наблюдалась на 10 сутки роста и составила в варианте с концентра-ци
ей дизельного топлива 1 % – 68,5 %, а в варианте с
концентрацией дизельного топлива 5 % – 65,2 %.
Таким образом, совместное культивирование l.
tigrinus
и r. erythropolis на средах с добавлением ди-
зельного топлива приводит к увеличению его убыли и превышает таковое в случае монокультивирования такого активного нефтедеструктора, как r.
erythropo-
lis, что в свою очередь позволяет активно деструкти-ровать углеводороды нефтепродуктов и может найти широкое применение в технологиях биоремедиации водных экосистем.
Работа выполнена при поддержке программы «Раз-
витие научного потенциала высшей школы 2006–2008» РНП.2.1.17708.
ПОГРУЖЕННАЯ БИОМАССА БАЗИДИАЛЬНЫХ КСИЛОТРОФНЫХ
ГРИБОВ: ПОЛУЧЕНИЕ В УСЛОВИЯХ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ
КР АТКИХ ПРОЦЕССОВ КУ ЛЬТИВИРОВАНИЯ И СР АВНИТЕЛЬНАЯ
ОЦЕНКА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ СВОЙСТВ
Краснопольская Л.М.1, Автономова А.В.1, Белицкий И.В.1,
Леонтьева М.И.1, Соболева Н.Ю.1, Баканов А.В.1, Евсенко М.С.1, Усов А.И.2,
Трещалина Е.М.3, Седакова Л.А.3, Исакова Е.Б.1, Бухман В.М.1
1 ГУ НИИНА им. Г.Ф.Гаузе РАМН,
Москва
2 Ио Х им. Н.Д.зелинского РАН,
Москва
3 НИИ ЭДиТо ГУ Р оНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН,
Москва
Создание новых субстанций для лекарственных
средств, биологически активных добавок к пище или иных продуктов на основе лекарственных базидио-мицетов, включает три основных взаимозависимых направления исследований. Первое связано с выбором вида и штамма гриба, выделением и идентификацией его
биологически активных соединений. Второе – с
разработкой биотехнологий или нанобиотехнологий культивирования отобранных продуцентов. Способы культивирования продуцентов должны обеспечивать при любом объеме производства стабильность их химического состава и воспроизводимость биологи-ческих эффектов, быть легко масштабируемыми для создания необходимой сырьевой базы, максимально снижать экономические риски производства. Третье направление включает медико-биологические и токси-кологические исследования.
В настоящей работе обобщены результаты иссле-
дования противоопухолевых свойств погруженной биомассы ксилотрофных базидиальных грибов. Задачи работы заключались в выявлении перспективных про-дуцентов, сочетающих высокую противоопухолевую активность со значительным выходом погруженной биомассы, в создании высокопродуктивных кратких процессов погруженного культивирования отобран-ных продуцентов, в сравнительной оценке противо-опухолевого действия ряда препаратов, полученных из погруженной культуры исследуемых базидиомицетов.
В работе использовали культуры базидиальных
ксилотрофных грибов коллекции лаборатории биосин-теза биологически активных соединений ГУ НИИНА им. Г.Ф.Гаузе Р АМН. Отбору штаммов-продуцентов предшествовало изучение штаммового разнообразия, включая исследование макро- и микроморфологиче-ких признаков на вегетативной и генеративной стади-ях онтогенеза, показателей роста на плотных средах и в погруженной культуре, пищевых потребностей. В качестве критериев эффективности способов пог-руженного культивирования были предложены выход воздушно-сухой биомассы не менее 20 г /л культураль-ной среды и длительность процесса культивирования не более 5–6 суток. Предложенные высокопродуктив-ные краткие способы погруженного культивирования штаммов-продуцентов включали рецептуры оптими-зированных жидких питательных сред, условия аэра-ции и перемешивания, температурные режимы. Мак-
Грибные биотехнологии 333
симальный выход воздушно-сухой биомассы – 35–38
г/л обеспечили разработанные способы погруженного культивирования Hypsizygus ulmarius и Flammulina ve-
lutipes. Созданные биотехнологии погруженного куль-тивирования базидиомицетов были успешно апроби-рованы в промышленных биореакторах объемом 1 м
3.
Изучение противоопухолевого действия проводили
in vivo на моделях перевиваемых мышиных опухолей. Существенное внимание было уделено выбору опу-холевого штамма, способа и длительности введения испытуемых препаратов, используемых доз. Были по-казаны различия использованных моделей опухолей к испытуемым препаратам. Для выявления четких разли-чий в противоопухолевой активности были отобраны опухоли, отличающиеся невысокой чувствительностью. Основная часть работы была проведена с использова-нием подкожно трансплантированного лимфолейкоза Р388 при пероральном введении препаратов. В качестве испытуемых препаратов использовали сублимирован-ную погруженную культуру базидиальных грибов, раз-мельченную погруженную биомассу, водные экстракты погруженной биомассы, в том числе предварительно высушенные, препараты водо- и щелочерастворимых полисахаридов мицелия различной степени очистки, композиции вышеперечисленных препаратов.
На основании изучения противоопухолевых
свойств погруженной биомассы 13 видов базиди-омицетов были отобраны перспективные штаммы Hericium erinaceus,
H. ulmarius, f. velutipes, Ganoderma
lucidum, Lentinus edodes, Lyophyllum shimeji, pleurotus
ostreatus, p.djamor, Trametes versicolor. Впервые было
описано противоопухолевое действие водораствори-мых полисахаридов мицелия H. ulmarius. Показатели торможения роста опухоли под воздействием препара-тов H. ulmarius были значительно выше таковых препа-ратов мицелия исследованных штаммов H. marmareus. Из изученных видов базидиомицетов противоопухо-левым действием не обладал только использованный в рабо
те штамм p. eryngii. Торможение роста опухоли
при применении водного экстракта мицелия культуры этог
о вида составило 16 %. Изучение моносахарид-
ного состава водорастворимых полисахаридов мице-лия изученных культур показало наличие глюкозы, галактозы, арабинозы, маннозы, ксилозы и рамнозы. Основными моносахаридами были глюкоза и галак-тоза. Наибольшее содержание глюкозы в суммарной фракции водорастворимых полисахаридов мицелия было отмечено у L. edodes. Содержание водораство-римых полисахаридов зависело от видовой и штам-мовой принадлежности культуры и от состава среды для погруженного культивирования. В погруженном мицелии изученных культур оно варьировало в преде-лах 9–35
%. Противоопухолевым действием обладали
не только водорастворимые, но и щелочерастворимые полисахариды G. lucidum, в том числе ранее не опи-санный у этого вида разветвленный ксиломаннан, по-казавший высокую биологическую активность. Изуче-ние зависимости противоопухолевого эффекта от дозы полисахаридов выявило перспективность применения низких доз. Полученные на основе погруженной био-массы базидиальных грибов оригинальные препараты обладали более высокой противоопухолевой активнос-тью по сравнению с рядом препаратов отечественного и зарубежного происхождения, в том числе китайского и французского. С целью повышения противоопухо-левой активности были испытаны композиционные препараты и выявлены виды базидиальных грибов, совместное применение которых приводит к усиле-нию эффекта. Далее были проведены токсикологичес-кие исследования наиболее перспективных компози-ционных препаратов, а также изучение возможности их использования в сочетании с рядом цитостатиков. Полученные результаты свидетельствовали о перспек-тивах практического использования разработанных композиционных препаратов на основе погруженного мицелия отобранных штаммов базидиальных грибов.
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ МИКРОМИЦЕТОВ С ТЯЖЕЛЫМИ
МЕТАЛЛАМИ: АККУМУ ЛЯЦИЯ И ТОКСИЧНОСТЬ
Куимова Н.Г., Жилин О.В.
Амурский филиал Бот
анического сада-института Дво РАН,
Благовещенск
Само понятие «тяжелые металлы» (ТМ) часто
воспринимаются как синоним понятия токсичные металлы, однако многие из них являются жизненно необходимыми элементами. Индивидуальная потреб-ность в эссенциальных ТМ невелика, однако. многие организмы склонны к их бионакоплению, что может привести к тяжелым нарушениям метаболизма. Изу-чение закономерностей взаимодействия ТМ с клетка-ми микроорганизмов имеет важное значение для по-нимания механизмов адаптации микроорганизмов к экстремальным условиям существования, для разра-ботки биотехнологических методов очитки сточных вод и извлечения ценных компонентов из промыш-ленных растворов, для биоремедиации экосистем, загрязненных токсикантами. Целью исследований явилось изучение аккумуляции тяжелых металлов (fe,
Co, Mn, Cu, zn, Ni. pb. Hg, Ag) биомассой микро-
мицов, а также токсическое воздействие металлов на клетки грибов. Для экспериментальных исследова-ний использовали штаммы Penicillium chrysogenum,
P. luteum , выделенные из пород россыпных место-
рождений золота Амурской области и хранящиеся в коллекции штаммов в лаборатории микробиологии и биохимии ИГиП ДВО РАН.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 334
Изучение динамики биосорбции показало: на-
ибольшая скорость сорбции металлов биомассой
наблюдалась в течение 60 мин. Установлена разная степень извлечения ТМ за первые 60 мин взаимодейс-твия: Hg
(87 %)> pb, zn (73 %)> Cu, Co (58–65 %)>
fe, Mn, Ni (40–48 %). Однако через 24 ч извлечение всех металлов составило более 90 %, за исключением zn и Ni (78 %). Результаты исследований показали, что живая биомасса микромицетов активно аккуму-лирует такие токсичные металлы, как Hg+2 (до 120 мкг /г
сухого вещества). pb (от 100 до 300 мг/г), Cd
(60 мг/г). Основным механизмом аккумуляции ТМ микромицетами является биосорбция на клеточной стенке, за исключением ртути и кобальта, которые на-иболее активно накапливались во внутриклеточном пространстве. При продолжительном взаимодействии ТМ с биомассой микромицетов отмечено формирова-ние минеральных агрегатов на клеточной стенке и в межгифальном пространстве, инкрустация мицелия металлом. Все изученные металлы условно можно разделить на две группы. Первую группу составляют металлы, аккумуляция и трансформация которых про-исх
одит на клеточной стенке – это fe, Mn, Cu, pb. Для
таких элементов, как zn, Ni, Ag показаны не только
активная биосорбция, но и биогенная минерализация металлов (формирование агрегатов, литификация кле-точной стенки). В другую группу входят те металлы, аккумуляция которых происходит главным образом во внутриклет
очном пространстве – это Hg и Co.
Токсическое воздействие металла на клетки прояв-
лялось в дефомации мицелия (неравномерное набуха-ние гиф), отслаивание клеточной стенки, нарушение ЦМ, пигментообразование. В качестве одного из ос-новных протекторных механизмов клеток мицелия к воздействию токсичных металлов явилось выделение большого количества внеклеточных полимеров, чаще всего имеющих полисахаридную основу. Подобные выделения способны к значительному связыванию ме-таллов и устранению их токсического воздействия на клетки. Наиболее активное выделение слизи наблюда-лось
при воздействии Hg, pb, fe, zn на биомассу. Ус-
тановлено влияние ТМ на рост и спорообразование микромицетов, степень такого воздействия зависит от концентрации металлов. Ингибирование роста и споро-образов
ания вызывают такие металлы как fe, Co, Mn,
pb, тогда как Hg, Ag, – стимулируют данные процессы при концентрациях ниже 0,03 мг/л. Концентрирование ТМ происходило главным образом на широких гифах, молодой растущий мицелий оставался чистым. Отсю-да можно сделать вывод, данный процесс является од-ним из способов устранения токсического воздействия ТМ на клетки.
ПОИСК МИКРООРГАНИЗМОВ –
АКТИВНЫХ ПРОДУЦЕНТОВ ЛАКТАТОКСИДАЗЫ
Куплетская М.Б., Кураков А.В., Нетрусов А.И.
Моск
овский государственный университет имени М.в. ломоносова,
Москва
Лактатоксидаза (КФ 1.1.3.X) – фермент, катализи-
рующий окисление лактата до пирувата и перекиси во-дорода. Фермент необходим для определения молоч-ной кислоты у больных в постинсультном состоянии. Лакт
атоксидаза – внутриклеточный фермент, который
встречается у немногих микроорганизмов.
При поиске продуцентов лактатоксидазы было про-
верено 50 музейных штаммов мицелиальных грибов и бактерий, близких к тем видам, у которых описано в литературе наличие этого фермента. Однако лишь два штамма грибов рода Gliocladium имели слабую лакта-
токсидазную активность. Одновременно были постав-лены накопительные культуры с использованием 60-ти различных природных источников. Большинство штаммов, выделенных из накопительных культур, не дали положительного результата. И только из рассола квашеных огурцов удалось получить штаммы Geot-
richum candidum, об
ладающие лактатоксидазой. этот
вид грибов выделялся почти из всех образцов рассола огурцов. К настоящему времени выделено 18 штаммов G. candidum , с активностью при первоначальной про-
верке от 3 до 50 ед./л.
Для образования лактатоксидазы клеткам необхо-
дима сильная аэрация. Очень важен также состав сре-ды, особенно соотношение в ней глюкозы и лактата. Благоприятно сказывается периодическое внесение лактата. Стабилизацию лактатоксидазы в гомогенате гриба об
еспечивают замораживание при –18 °С, до-
бавление инозита, глицерина. В результате подбора среды и условий культивирования выход лактатокси-дазы у выделенного штамма G. candidum достиг 130–140 ед./л, что значительно выше величины (19 ед./л), для описанного в литературе для такого же вида гриба (Sztajer et al., 1996).
Куплетская М.Б., Сухачева М.В., Кураков А.В., Не-
тр
усов А.И. Поиск микроорганизмов – продуцентов
лактатоксидазы // Прикладная биохимия и микробио-логия, 2007, т.43, №2, с.199–202.
Грибные биотехнологии 335
Одним из актуальных направлений исследований
в микологии и биотехнологии является поиск и разра-
ботка новых экологически чистых пищевых продуктов и лечебно-профилактических медицинских препаратов на основе высших дереворазрушающих базидиальных грибов. К известным продуцентам с лекарственными свойствами относятся такие ксилотрофные базиди-омицеты как Grifola frondosa (Dicks: f
r.)S.f .Gray и
Schizophyllum commune fr . На их основе получают
ряд противоопухолевых препаратов: Sonifilan, SpG и Schizofyllan из культуральной жидкости S.commune;
грифолан, грифрон и др. из биомассы G.frondosa , об-
ладающие иммуномодулирующим, онкостатическим, антибактериальным, антивирусным, противовоспали-тельным и гепатопротекторным действием [Stametes, 2000; Wasser, 2002]. К менее изученным дереворазру-шающим базидиомицетам с лекарственными свойства-ми можно отнести трутовик серно-желтый laetiporus
sulphureus (Bull.: f
r.) Murrill., у которого установлены
антиоксидантная, антибиотическая и противовирус-ная активность и Polyporus squamosus (Huds.) f
r. с
антифунгальными и антибактериальными свойствами [Бабахин, 1999; Бадалян, 2000; Suay, 2000; Тихонова, 2001; Гвоздкова 2002, 2004; Ершова, 2003].
Так как одним из важных этапов создания биотех-
нологии является подбор оптимальных источников азота и углерода для глубинного культивирования штаммов-продуцентов, то целью представленной ра-боты было исследование влияния различных азот- и углеродсодержащих веществ на накопление биомассы лекарственными базидиальными грибами.
Объектами исследований были 5 штаммов бази-
диомицетов, относящихся к родам Grifola, laetiporus
,
Polyporus и Schizophyllum, из коллекции шляпочных
грибов Института ботаники им.Н.Г.Холодного НАН Украины.Глубинное культивирование проводилось в колбах
эр
ленмейера разного объема на качалке (160–170 об/
мин) при температуре +28 °С. Определение влияния различных источников азота и углерода на интенсив-ность роста исследуемых штаммов проводили по ме-тодике, предложенной Бухало (1988). При этом, для каждого варианта питательной среды в качестве единс-твенного добавляемого источника углерода исполь-зовали одно из следующих веществ в концентрации эквивалентной 20 г глюкозы: инулин, ксилозу, лактозу, мальтозу, маннит, глицерин, крахмал, сахарозу, фрук-тозу или глюкозу. Азотсодержащие соединения (гис-тидин, лейцин, лизин, триптофан, NH4NO3, NaNO3, NaNO2, NH4Cl, пептон) вносились в концентрации эк-вивалентной 0,33 г/л азота. Влияние выбранных источ-ников азота и углерода на рост исследуемых штаммов определяли по уровню накопления биомассы (весовым методом) на десятые сутки культивирования.
В результате проведенных исследований роста бази-
диомицетов на разных источниках азота было установ-лено, что у S.commune и P.squamosus наибольшее коли-
чество биомассы наблюдалось на средах с добавлением пептона, для G.frondosa лучшим источником был нитрат
аммония, а для штаммов l.s
ulphureus высокий уровень
накопления биомассы был отмечен как в случае исполь-зования пептона, так и нитратов аммония или натрия. Таким образом, базидиомицет l.s
ulphureus способен
утилизировать более широкий спектр источников азота, чем S.commune , P.squamosus и G.frondosa –
как амин-
ный, так и в виде нитратов, нитритов и солей аммония.
Изучение влияния источников углерода на рост гри-
бов показало, что для изученных видов лучшими для получения биомассы также были различные вещест-ва: крахмал и глюкоза для l.sulphur
eus и G.frondosa,
глюкоза и глицерин для S.commune и фруктоза для
P.squamosus.ВЛИЯНИЕ Р АЗЛИЧНЫХ ИСТОЧНИКОВ АЗОТА И УГ ЛЕРОДА НА Р ОСТ
ВЫСШИХ ДЕРЕВОР АЗРУШАЮЩИХ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ
Линовицкая В.М.1, Дзыгун Л.П.1, Клечак И.Р.1, Бухало А.С.2
1 Национальный технический университет Украины «киевский политехнический институт»,
факультет биотехнологии и биотехники,
киев
2 Институт ботаники им.Н.Г.Холодного НАН Украины, 01601,
киев
эНТОМОПАТОГЕННЫЕ ГРИБЫ КАК ИСТОЧНИК НОВЫХ РЕСУРСОВ
ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
Лиховидов В.Е., Исангалин Ф.Ш., Наумов А.Н., Артюхин В.И.,
Асланян Е.М., Быстрова Е.В., Коробова Н.А., Уткина Н.Н.
ФГУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии»,
оболенск, Московская область
Для изучения ресурса энтомопатогенных грибов
на территории России ГНЦ ПМБ провел в 2002–2005 годах 9 научных экспедиций в различные регионы и природно-климатические зоны. В результате поиска, выделения и идентификации микромицетов создана самая крупная в России и странах СНГ коллекция эн-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 336
томопатогенных грибов. Коллекция претендует также
на одно из первых мест в Европе. Рабочая коллекция насчитывает около 1200 штаммов 170 видов 70 родов микромицетов. Микологический гербарий состоит из 2500 эксикатов 44 видов грибов.
Проведен скрининг штаммов энтомопатогенных
грибов anamorphic as
comycota на активность в отно-
шении тест-объектов эпизоотологического и фармако-ло
гического скрининга: кровососущие комары – aedes
aegypti ; возбудитель бактериоза – Staphylococcus aureus
(штамм ATCC 6538, и метицилин-устойчивый штамм MRSA 353); возбудитель микоза – ca
ndida albicans .
Протестировано на москитоцидную активность
180 штаммов, из которых 11 штаммов являются высо-коак
тивным, а 30 – умеренно-активными штаммами.
Для ряда штаммов москитоцидные свойства выявле-ны впервые: Polycephalomyces, cor
dyceps, botryotri-
chum, calcarisporium, c
hrisosporium, dactilaria, engy-
odontium, Sesquicillium, e
vlachovaea, Pestalotiopsis .
Наивысшей активностью из этого списка обладают грибы calcarisporium
arbuscula f-80 и Sesquicillium
candelabrum f-1 14). эти грибы следует рассматривать
как наиболее перспективные для разработки москито-цидных препаратов метаболитного действия.
Выделен и изучен ряд метаболитов штамма гриба
calcarisporium
arbuscula f-80. Выявлено, что одним
из них является нанокетид – ауровертин «В». Впер-вые установлено, что этот метаболит обладает высо-кой москитоцидной активностью: LC
50 для личинок
комаров составляет 8,7 м.д. (одна миллионная доля соответствует концентрации 1 мкг/мл). Высокая мос-китоцидная активность ауровертина «В» позволяет рассматривать его в качестве перспективного вещества для создания нового москитоцидного препарата.
Выделен и изучен ряд метаболитов гриба Sesquicil-
lium candelabrum f-1
14. Одним из них является тетра-
кетид 2,3-диметокси 5, 6-диметил бензохинон. Впер-вые установлено, что это вещество продуцируется грибом Sesquicillium candelabrum. Впервые выявлена
высокая москитоцидная активность этого вещества: LC
50 для личинок комаров составляет 23,0 м.д. эти
данные позволяет считать 2,3-диметокси 5,6-диметил бензохинон в качестве перспективного вещества для создания нового москитоцидного препарата.
Выделен и изучен ряд метаболитов гриба Paecilo-
myces farinosus, шт
амм vL-51. Выявлено, что среди них содержатся значительные количества свободных жирных кислот. Впервые показано, что только не-насыщенные жирные кислоты (пальмитолеиновая, олеиновая, линолевая и линоленовая) обладают мос-китоцидной активностью: LC
50 для личинок комаров
составляет 145–680 м.д. это позволяет рассматривать
их в качестве потенциальных агентов для создания но-вых москитоцидных препаратов
Протестировано на антимикробную активность
185 штаммов, из них 38 штаммов обладают бактери-цидними и фунгициднымии свойствами. Антимик-робная активность ряда штаммов носит селективный характер, что является важным признаком для оцен-ки перспектив их использования. Например, штаммы Simplicillium lamellicola , Sesquicillium candelabrum,
metar
hizium anisopliae обладают исключительно бак-
терицидной активностью. Штаммы calcarisporium ar-
buscula, cor dyceps militaris, Polycephalomyces sp. про-
являют только фунгицидную активность.
Высокой бактерицидной активностью облада-
ют также штаммы грибов acr ostalagmus luteoalbus,
clonostachus
rosea, conidiobolus coronatus, Harziella
capitata, Tolypocladium nubicola. Зона подавления ими
метицилин-устойчивоого штамма Staphilococcus aurea
превышает 20 мм. Высокой фунгицидной и бактери-цидной активностью (диаметр зоны подавления тест-культур не менее 20 мм) обладает штамм chaetomium
cohliodes. По
литературным данным, у всех перечис-
ленных штаммов грибов, к настоящему времени, не выявлены метаболиты с антимикробной активностью.
Наиболее активные штаммы грибов с бактери-
цидными свойствами Simplicillium lamellicola (f
-496,
f-852, f-856, f-738) были использованы для получе-
ния экстрактов и их фракционирования. Из экстракта гриба S. lamellicola f-852
выделен и изучен метаболит
с удельной бактерицидной активностью 0,05 м.д. в от-ношении метицилин-устойчивоого штамма Staphylo-
coccus aureus. Показано, что это соединение является производным фузидиевой кислоты.
Полученные данные позволяют рассматривать
штамм Simplicillium lamellicola f-852
и синтезируе-
мый им метаболит в качестве перспективных агентов для создания эффективного лекарственн6ого препара-та для борьбы со стафилококковыми инфекциями.
Работ
а поддержана грантом МНТЦ # 2338р «энто-
мопатогенные грибы и их метаболиты».
ПОЛУЧЕНИЕ ПОСЕВНОГО МАТЕРИАЛА ПРОДУЦЕНТА Г ЛЮКОЗООКСИДАЗЫ
pENICILLIUM fUNICULOsUM 46.1 НА Р АЗЛИЧНЫХ СУБСТР АТАХ
Павловская Ж.И., Семашко Т.В., Михайлова Р.В., Виноградова Н.В., Лобанок А.Г.
ГНУ «Институт микробиологии НАН Беларуси»,
Минск.
Глюкозооксидаза (КФ 1.1.3.4) – представитель
класса оксидоредуктаз – широко используется в хи-мической, пищевой промышленности и в медицине. Фермент является незаменимым реагентом в методах определения глюкозы в крови и других биологических жидкостях.
Ранее нами методом индуцированного мутагенеза
получен высокоактивный продуцент глюкозооксидазы
Грибные биотехнологии 337
Penicillium funiculosum 46.1, в настоящее время раз-
рабатывается технология производства ферментного препарата Глюкозооксидаза. Одним из этапов техно-логии является разработка промышленного посевного материала.
Цель иссле
дований – анализ использования различ-
ных субстратов (пшена, пшеничных отрубей, ячневой крупы и геркулеса) для получения посевного материа-ла P . funiculosum 46.1.
Иссле
дуемые субстраты увлажняли стерильной
водой, степень увлажнения составила для ячневой крупы
– 30 %, пшена – 40 %, геркулеса – 50 %, пше-
ничных о
трубей – 60 %. После стерилизации субстра-
ты инок
улировали водной суспензией спор (5–6∙105)
10-суточной культуры p. funiculosum 46.1 в количестве
2 мл на 10 г субстрата и выращивали в термостате при 260. Образ
ование глюкозооксидазы p. funiculosum 46.1
исследовали в условиях глубинного культивирования гриба, используя в качестве посевного материала сы-пучий посевной или водную суспензию спор гриба, выросшего на вышеуказанных субстратах.
При использовании сыпучего посевного материала
для глубинного культивирования P . funiculosum 46.1
отмечен хороший рост гриба и высокий уровень обра-зования глюкозооксидазы (до 20,3 ед/мл). Однако при этом гриб синтезирует до 48,4 ед/мл каталазы.
Уст
ановлено, что p. funiculosum 46.1 образует
1,1∙106–4,8∙107 спор на грамм применяемых в опытах субстратов. Максимальное количество спор выявлено при выращивании Р . funiculosum 46.1 на пшене. Ана-лиз применения в качестве посевного материала спо-ровой
суспензии p. funiculosum 46.1 показал, что на
процесс образования глюкозооксидазы существенное влияние оказывает субстрат и срок выращивания гри-ба. При инокуляции среды споровыми суспензиями 2-х недельной культуры уровень синтеза глюкозооксидазы составил 10,1–15,4 ед/мл. Максимальное образование данного фермента в условиях глубинного культивиро-вания отмечено в вариантах опытов с использованием спорового посевного материала, полученного на пше-не и пшеничных отрубях. Исследование применения споровой суспензии месячного посевного материала показало, что уровень синтеза глюкозооксидазы гри-бом
не изменялся или снижался на 5–14 %. По проду-
цирующей способности мицелия наилучший результат получен в вариантах опыта с использованием в качес-тве субстрата пшена, пшеничных отрубей и ячневой крупы.
Каталаза синтезировалась p. funiculosum 46.1
только при инокуляции питательной среды посевным материалом, полученным на геркулесе. Следует отме-тить, что после 1 мес выращивания гриба на всех суб-стратах количество выживших спор резко уменьшался и со
ставлял 3,1–14 %, а после 2 мес – 1–1,2 %. В усло-
виях глубинного культивирования с использованием 2 мес посевного материала гриб синтезировал глюкозо-оксидазу в следовых количествах.
Таким образом, для культивирования P .°funiculosum
46.1 с целью получения ферментного препарата Глю-козооксидаза в качестве посевного материала можно использовать водную суспензию спор гриба, выращен-ного на пшене, пшеничных отрубях и ячневой крупе в течение 0,5–1,0 месяцев.
ДЕСТРУКЦИЯ ФЕНОЛА ГРИБОМ «БЕЛОЙ ГНИЛИ» LENTINUs TIGRINUs
Паршин А.А., Надежина О.С., Кадималиев Д.А., Атыкян Н.А.
Мор
довский государственный университет им. Н.П. огарева,
Саранск
Одной из актуальных проблем экологии в насто-
ящее время становится антропогенное загрязнение окружающей среды устойчивыми токсичными вещес-твами фенольной природы. В создании новых биотех-нологических методов очистки окружающей среды наиболее перспективным является применение микро-организмов, способных к деструкции данных соедине-ний в природных условиях. Гриб белой гнили lentinus
tigrinus
, продуцирующий внеклеточный лигнолитичес-
кий к
омплекс ферментов – пероксидазу растительного
типа, Мn-пероксидазу, лакказу, и глюкозооксидазу, способен разрушать ароматические соединения, в ос-нове чего лежит его способность разлагать сложномо-лекулярные компоненты лигноцеллюлозного сырья.
Поэтому целью работы было исследование де-
струкции фенола лигнолитическим грибом белой гни-ли l. tigrinus.
Г
риб выращивали на модифицированной среде эг-
герта в течение 6 и 9 суток с добавление фенола на 3 (трофофаза) и 6 (идиофаза) сутки роста грибной куль-туры
в различной концентрации (1 и 5 %). В результа-
те проведенных нами исследований было обнаружено, что фенол не вызывает угнетения роста и развития культуры гриба и по-разному влияет на биосинтез и секрецию ферментов на различных этапах развития культуры. Наибольшее стимулирующее воздействие на биосинтез Мn-пероксидазы оказывало добавление фенола
в концентрации 1 %, а лакказы в концентрации
5 % в трофофазу. Максимальная активность перокси-дазы растительного типа наблюдалась при добавлении фенола
в концентрации 5 % в идиофазу. Степень де-
струкции фенола культурой гриба зависела от его кон-центрации, времени внесения, а также наличия фер-мента
тивной активности и в среднем составила 70 %
от исходной концентрации.
Таким образом, лигнолитический гриб l. tigrinus
способный к биодеструкции фенола в условиях пог-руженного культивирования и его можно использовать для очистки стоков и почв от фенолов и его производ-ных.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 338
Проблема загрязнения окружающей среды тяжелы-
ми металлами, попадающими в организм человека с пи-
тьевой водой и пищей и губительно влияющими на его здоровье, является весьма актуальной для нашей рес-публики. Клеточные стенки и хитин-глюкановый комп-лекс (ХГК) грибов, содержащие в своем составе хитин, обладающий способностью активно взаимодействовать с ионами тяжелых металлов, могут стать основой для получения эффективных энтеросорбентов.
В естественных условиях сорбция того или иного ве-
щества протекает в присутствии соединений различной природы, которые способны конкурировать за центры связывания или вступать в активное взаимодействие с сорбатом Связывание ионов меди глубинным мицелием базидиальных грибов и их структурных компонентов (клеточные стенки, ХГК) было исследовано в присутс-твии катионов биогенных и токсичных металлов, а так-же некоторых соединений, входящих в состав химуса: белков, аминокислот, поли- и моносахаридов. Хорошо известна индифферентность хитина по отношению к биогенным элементам. Результаты исследования пока-зали, что ионы калия, кальция, магния не принимают участия в конкурентном взаимодействии с сайтами свя-зывания ионов меди и не влияют на сорбционную ем-кость мицелия, клеточных стенок и ХГК.
Как известно, для биосорбентов характерно конку-
рирование между ионами тяжелых металлов. При ис-пользовании в качестве сорбента биомассы изученных грибов также выявлено торможение связывания ионов меди ионами кадмия и свинца, в присутствии которых сорбционная емкость мицелия уменьшилась в 2,0–2,2 раза. Наличие в сорбционной системе ионов цинка практически не повлияло на сорбционную активность грибной биомассы по отношению к ионам меди.Известно, что анионы аминокислот образуют с
ионами переходных металлов комплексные (хелат-ные) соединения, стойкие к разложению в кислой среде, характерной для желудка. При этом в коорди-национном взаимодействии могут быть задействова-ны как карбоксильные группы, так и аминогруппы. В наших исследованиях глутаминовая кислота и ас-парагин, способные образовывать с ионами металлов хелатные комплексы, снижали сорбционную емкость кл
еточных стенок в 2 раза, ХГК – почти в 3 раза. При-
сутствие белков также ослабляло активность связы-вания тяжелых металлов, хотя и не столь значитель-но, как аминокислот (уровень связывания меди ХГК понизился в 2,5 раза). Добавление к сульфату меди мочевины привело к снижению сорбционной емкости ХГ
К всего на 10–13 %.
Органические кислоты (особенно лимонная кис-
лота и ее соли), синтезируемые многими грибами в больших количествах, также является эффективными комплексообразователями, обеспечивающими деток-сикацию среды, загрязненной токсичными металлами. Лимоннокислый натрий снижал сорбционную актив-ность грибной биомассы и ее структурных компонен-тов по отношению к ионам меди столь же значительно, как аминокислоты и их производные. Внесение в рас-твор сульфата меди углеводов моносахаров (глюкоза) и (крахмал) практически не влияло на сорбционные свойства биомассы исследованных грибов.
Таким образом, биогенные элементы, микроэле-
менты, сахара практически не участвуют в конкурен-тном взаимодействии за сайты связывания тяжелых металлов биомассой. Наибольшее влияние на эффек-тивность связывания тяжелых металлов оказывает присутствие органических кислот и аминокислот.Работа выполнена при поддержке программы
«Развитие научного потенциала высшей школы 2006–2008» РНП.2.1.17708 и гранта Роснауки шифр 2006-РИ-19.0/001/079.
ВЛИЯНИЕ МИНЕР АЛЬНЫХ И ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ
НА СОРБЦИОННУЮ АКТИВНОСТЬ ГРИБНЫХ СОРБЕНТОВ
Ровбель Н.М.
Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
ВЛИЯНИЕ ИОНОВ МЕДИ НА СИНТЕЗ ЛАККАЗЫ ПРИРОДНЫМ
ШТАММОМ БАЗИДИАЛЬНОГО КСИЛОТРОФА TrameT eS HirSuT a 56
(WUL
fEN) pILБT В УСЛОВИЯХ Г ЛУБИННОГО КУ ЛЬТИВИРОВАНИЯ
Сальцова И.Ю., Горшина Е.С.
Московский государственный университет инженерной экологии,
Москва
Лакказа – медьсодержащий фермент класса окси-
доредуктаз (КФ 1.10.3.2 п-дифенол: кислород окси-доредуктаза), катализирующий окисление широкого круга органических и неорганических субстратов мо-лекулярным кислородом с сопутствующим восстанов-лением последнего непосредственно до воды, минуя
Грибные биотехнологии 339
стадию образования пероксида водорода. В природе
функцию этого фермента связывают с деградацией лигнина. Лучшими продуцентами лакказы считаются лигнолитические ксилотрофы, вызывающие белую гниль древесины, в частности, базидиальные грибы рода Trametes.
Молекула лакказы содержит в активном центре 4
иона меди, и, следовательно, для синтеза лакказы необ-ходимо наличие ионов меди в питательной среде. Также есть данные о том, что медь участвует в синтезе мелани-на в клеточных стенках, что подтверждается потемнени-ем биомассы при высоких концентрациях меди в среде и увеличивающимся содержанием меланина в биомас-се [2]. Кроме того, известно, что образование лакказы регулируется на уровне генной транскрипции атомами меди. С другой стороны соли меди являются фунгици-дами и ингибируют рост. Очевидно, что для максималь-ного синтеза лакказы необходимо найти оптимальное количество меди в питательной среде, а также опреде-лить время внесения меди в питательную среду.
В качестве продуцента лакказы использовали отоб-
ранный в предыдущих исследованиях [1] отечествен-ный штамм-продуцент лакказы Trametes hirsuta 56
(Wulfen) p
ilбt (сем. Polyporaceae, кл. basidiomycetes).
Штамм-продуцент выращивали методом глубинного ку
льтивирования в колбах эрленмейера на круговой
качалке в жидкой питательной среде с мукой. Медь вносили в виде сернокислой соли.
эк
страцеллюлярную оксидазную активность (ОА)
в глубинной культуре определяли в фильтрате культу-ральной жидкости спектрофотометрически (Shimadzu Uvmini1240) при 410 нм с использованием пирокате-хина (10
–2 М) в качестве субстрата в 0,1 М цитратно-
фосфатном буфере (рН 4,5).
В среде без внесения дополнительного сульфата
меди содержание меди было менее 1 мкМ, при этом максимальная оксидазная активность составляла ме-нее 4 МЕ. Предварительными опытами было пока-зано, что оптимальным временем внесения меди яв-ляется экспоненциальная фаза роста гриба (1 сутки роста), что соответствовало имеющимся литератур-ным данным. Исследования, проведенные в широком диапазоне концентраций (от 5 мкМ до 2 мМ CuSO
4),
показали, что для получения максимальной оксидаз-ной активности (42 МЕ) в данных условиях проведе-ния эксперимента достаточной является концентрация 20
– 30 мкМ. Дальнейшее увеличение концентрации
меди практически не приводило к повышению окси-дазной активности, но позволяло увеличить продол-жительность сохранения максимальной активности до суток. В исследованном диапазоне концентраций ингибирование роста штамма (по данным накопления биомассы) не наблюдалось.
1. Г
оршина Е. С., Т. В. Русинова, В. В. Бирюков,
О. В. Морозова, С. В. Шлеев. А. И. Ярополов. Динами-ка оксидазной активности в процессе культивирования базидиальног
о гриба рода Trametes fr.// Прикладная
биохимия и микробиология.–2006.-№6.-С. 638–644.
2. Galhaup
C, Haltrich D. Enhanced formation of
laccase activity by the white-rot fungus Trametes pubes-cens in the presence of copper// Appl Microbiol Biotech-nol.
– 2001. – Jul. –56(1–2). – р. 225–32.
ФЕРМЕНТНЫЙ ПРЕПАР АТ ЛАККАЗЫ БАЗИДИОМИЦЕТА
TrameT
eS Hir SuTa (WULfEN) pILAT И ОСОБЕННОСТИ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ
Самохвалова Н.С., Горшина Е.С., Бирюков В.В.
Московского государственного университета инженерной экологии (МГУИЭ),
Москва
Лакказа представляет собой медьсодержащий фер-
мент, катализирующий окисление фенолов в хиноны, может окислять орто- и пара-дифенолы. Лакказы из базидиальных грибов обладают широкой субстратной специфичностью по отношению к различным орга-ническим и неорганическим соединениям, что делает возможным их использование совместно с медиатора-ми во многих областях промышленности.
Одной из важнейших стадий производства фермен-
тных препаратов является стадия концентрирования (выделения). Известно, что в связи существенными различиями в физико-химических свойствах фермен-тных растворов необходимо разрабатывать процесс мембранного выделения индивидуально для каждого препарата.
В качестве продуцента использовали базидиаль-
ный гриб, известный как продуцент лакказы [Горшина и др., 2006]. Культуру выращивали методом глубин-ного культивирования на специально разработанной питательной среде с мукой. Для получения фермент-ного препарата использовали баромембранный метод, являющийся наиболее современными и перспектив-ными способом очистки ферментных растворов. Про-цесс разделения проводили с использованием трубча-тых керамических мембран фирмы ТАМИ Industries (Франция).
эк
страцеллюлярную оксидазную активность опре-
деляли спектрофотометрически при 410 нм с исполь-зованием пирокатехина (10–2 М) в качестве субстрата на спек
трофотометре Shimadzu Uvmini1240 (Япония).
Показано, что молекулярная масса лакказы штам-
ма-про
дуцента Trametes hirsutа 56 (Wulfen) pilat со-
ставляет 70±2 кДа [Shleev, 2004], что дает возмож-ность предположить необходимость использования для концентрирования фермента мембран в диапазоне ультрафильтрации (15–50 кДа).
Проведенные исследования показали, что на мем-
бранах 15, 30 и 50 кДа производительность мембран
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 340
различается между собой, причем наибольшая наблю-
дается на мембране 50 кДа. При этом выход фермента в к
онцентрате составляет 79 %. Отмечено, что макси-
ма
льная селективность (99 %) по отношению к лакказе
обеспечивает мембрана 15 кДа. Однако потери за счет инактивации при концентрировании примерно одина-ковы и со
ставляют около 14 %.
С целью отделения экзобиополимеров из культу-
рального фильтрата (КФ) с молекулярной массой выше, чем молекулярная масса фермента использовали мем-браны с порогом задерживания 150 кДа, а также 0,14 и 0,45 мкм. Обнаружено, что на этих мембранах также осуществляется концентрирование фермента с опти-мальным соотношение производительности и потерь на мембране 0,14 мкм. Активность фермента в пермеате со
ставляла всего около 0,72 %, в то время как в концент-
ра
те – около 89,6 %. Можно предположить, что удержа-
ние лакказы мембранами в диапазоне микрофильтрации происходит за счет связывания ее комплексами экзобио-полимеров и образования лакказных олигомеров.
Таким образом, проведенные нами исследования
показали, что при производстве ферментного препара-та лакказы из КФ гриба Trametes hirsute 56 целесооб-
разно использовать мембраны в диапазоне микрофиль-трации, что позволяет повысить производительность и уменьшить энергетические расходы производства.
ЗАЩИТА ГЕНОМА И ВОЗМОЖНОСТИ ГРИБНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ
Сенюк О.Ф.1, Горовой Л.Ф.2, Курченко В.П.3
1 Институт проблем безопасности АЭС НАН Украины,
Чернобыль
2 Институт клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины,
киев
3 Белорусский государственный университет,
Минск
Современное развитие цивилизации ставит задачу
сохранения и восстановления здоровья на первое мес-то в шкале человеческих ценностей. На эти цели тра-тятся огромные материальные и людские ресурсы. В последние десятилетия заметно возрастающий вклад в этом направлении делают грибные биотехнологии. Наряду с традиционным использованием микромице-тов для получения антибиотиков резко возросли объ-емы производства и использования макромицетов для питания и медицины. В этом плане широким фронтом проводятся научные исследования по скринингу и ис-пытаниям новых биологически активных веществ и технологические работы по культивированию новых видов грибов.
В Украине разработана комплексная, безотходная,
экологически чистая биотехнология получения ряда продуктов из трутовых грибов. По этой технологии из плодовых тел грибов получают нерастворимую хитин-содержащую волокнистую массу клеточных стенок гриба и комплекс растворимых биологически активных веществ. Из твердой фракции можно изготавливать бу-магоподобные или формованные изделия как в чистом виде, так и в композициях с другими волокнистыми ма-териалами. Разработанные перевязочные хитин-содер-жащие волокнистые материалы практически в два раза сокращают сроки лечения гнойных ран и трофических язв. На основе таких хитин-содержащих материалов разработана и прошла широкие промышленные испы-тания серия биосорбентов для тажелых маталлов и ра-дионуклидов. Разработана и имеется на рынке пищевая биодобавка «Микотон», которая показала широкий ком-плекс целебных свойств. На основе жидкой фракции разработан и выведен на рынок Украины экологичес-ки безопасный биофунгицид «Микосан», который по своей эффективности не уступает лучшим химическим препаратам для защиты растений.
Кроме того, получен растворимый меланин-глюка-
новый комплекс с высокой биологической активнос-тью. Препарат показал сильные антибиотические, ан-тивирусные
и антигрибковые свойства. этот комплекс
проходит широкие медико-биологические исследова-ния и испытания. В частности, полученный препарат показал мощные генопротекторные свойства, которые позволяют защитить ДНК от повреждающего действия проникающей радиации, химических мутагенов и др. неблагоприятных факторов внешней среды. В экспери-ментах in vitro и в опытах на лабораторных животных
было показано, что меланин-глюкановый препарат способен практически полностью устранить действие хронического облучения в малых дозах и существенно уменьшить последствия острого радиоактивного излу-чения на однонитевые разрывы ДНК. Как следствие, этот препарат уменьшает смертность лабораторных мышей, увеличивает рождаемость и является мощным профилактическим средством от онкологических за-болеваний.
Разрабатываемое направление показывает большие
перспективы биотехнологии и практического исполь-зования трутовых грибов в разных отраслях медици-ны, сельского хозяйства и промышленности.
Грибные биотехнологии 341
В настоящее время в отечественной и мировой
науке наблюдается повышенный интерес к изучению
грибов. эт
о связано, прежде всего, с кардинальным
пересмотром значимости и уникальности экологичес-ких функций, контролируемых грибами в природных экосистемах. Во-вторых, грибы были и остаются од-ним из основных и перспективных объектов биотех-нологии. Многие грибы обладают не только ценными пищевыми, но и лечебными свойствами. В последние десятилетия грибами стали интересоваться как источ-ником антибиотических и лекарственных средств. Но-вые пути в области эффективных антибактериальных лекарственных препаратов дали высшие базидиальные грибы. В связи с этим возрастает необходимость в их искусственном культивировании. Глубинное культи-вирование является одним из наиболее перспективных направлений, способствующих быстрому получению мицелия с определенными характеристиками.
Целью данного исследования является изучение
питательной ценности гуминовых кислот, полученных из разных источников и, и их способности стимулиро-вать рост грибов в культуре.
В работе использовали штаммы грибов Fomitopsis
officinalis, Ganoderma
lucidum, lentinus edodes из кол-
лекции культур грибов Биолого-почвенного института ДВО Р АН. Культуры хранили при 4
°С на сусло-агаре,
пересевали 1 раз в месяц. Для получения глубинного мицелия к
ультуры выращивали в колбах эрленмейе-
ра на 250 мл со 100 мл питательной среды на качалке со скоростью вращения 200 об/мин, при температуре 25–27
°С. За основу была принята известная питатель-
ная сре
да следующего состава: k2HpO4 * 3Н2О – 1 г/л,
MgSO4 * 7Н2О – 0.5 г/л, kCl – 0.5 г/л, глюкоза – 20 г/л,
солодовое сусло 150Б – 115 мл, вода – до 1 л, в кото-
рую в качестве стимулирующего питательного агента добавляли гуммат аммония в количествах от 0,0001 до 1 г/л. Препараты гуминовых кислот, выделенные по стандартной методике любезно предоставлены к.б.н. Нестеровой О.В. В работе также использовали ком-мерческий препарат ГК-3 (Aldrich, Германия).
Математическую обработку результатов исследо-
вания проводили с использованием статистических функций Microsoft Excel 2000.
В результате исследований установлено, что добав-
ление гуминовых кислот оказывает стимулирующее действие на рост грибов в культуре. Принципиальное повышение выхода биомассы было получено при введе-нии в среду гуммата аммония в количестве 0,01 г/л, не зависимо от вида препарата. При этом обеспечивалось двукратное увеличение выхода биомассы по равнению с исходной средой. Последующее ведение процессов пог-руженного культивирования на средах с добавлением гуминовых кислот показало, что максимум содержания биомассы отмечается к 4–7-мым суткам (в зависимости от вида гриба) и варьирует в пределах 10–20 г/л (также в зависимости от вида гриба). Полученные данные могут быть объяснены тем, что в начальный период роста ми-целия происходит использование периферических час-тей молекул гуминовых кислот, которые могут служить источником азота для грибов.ГУМИНОВЫЕ КИСЛОТЫ КАК СТИМУ ЛЯТОРЫ РОСТА ГРИБОВ
Сидоренко М.Л., Ефремова Н.Ю.
Биол
ого-почвенный институт Дво РАН,
владивосток
БЕЛКОВО-ВИТАМИННЫЙ ПРЕПАР АТ
НА ОСНОВЕ МИКРОМИЦЕТОВ: ПОЛУЧЕНИЕ,
ХАР АКТЕРИСТИКА И АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ
Супрун С.М.1, Харкевич Е.С.2, Донченко Г.В.1,
Пархоменко Ю.М.1, Кучмеровская Т.М.1
1 Институт биохимии им. А.в. Палладина НАНУ,
2 Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАНУ,
киев
Микромицеты являются перспективными для ис-
пользования в различных отраслях народного хозяйс-тва
– экологии, сельском хозяйстве, медицине. Они со-
держат природный комплекс биологически активных веществ: незаменимые аминокислоты, ненасыщенные жирные кислоты, витамины, коферменты, многие из которых обладают свойствами антимутагенов и ан-тиоксидантов. Наличие хитина в грибной клетке, его производные, комплексы хитина с глюканами, явля-ются природными сорбентами и обладают рядом дру-гих полезных свойств. Грибы технологичны, нетре-бовательны к субстрату, устойчивы к экологическому стрессу.
Целью наших исследований была разработка без-
отходной биотехнологии для получения полноценной кормовой и пищевой добавки на основе совместного культивирования штаммов-продуцентов.
Ранее нами были отобраны штаммы-продуценты:
fusarium
sambucinum ИMB f-10011 – продуцент ком-
плекса биологически активных веществ, с преоблада-нием никотиновой и пантотеновой кислот, кофермента А; fusarium
sambucinum BkПM f-850 – продуцент
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 342
никотиновой кислоты и ее коферментных форм, цел-
люлозолитических ферментов; Рenicillium sclerotiorum ИМВ f-10015
– продуцент каротиноидов (5,0–12,0
мг/г асв), биотина и пектотолитических ферментов; Mycelia sterilia
ИМВ f-100014 – продуцент белка
(45–50 % асв), водорастворимых витаминов; Thielavia terrestris ВКПМ f-308 –продуцент белка, пектолити-
ческих ферментов. Основываясь на изучении их фи-зиолого-биохимических особенностей, биосинтезе отдельных компонентов, скорости роста, отсутствии антогонизма, были подобраны культуры для совмест-ного культивирования с целью получения кормовых и пищевых добавок. Для процессов биотрансформации растительных отходов в белково-витаминный продукт интерес представляет полученная нами комплекс-ная к
ультура fusarium sambucinum f-850 и Thielavia
terrestis f-308. Для получения пищевой и кормовой
добавки предложена комплексная культура fusarium
sambucinum f-10011 – продуцент витаминов, обла-
дающий высок
ой скоростью роста (µ 0,19 час–1), и
Рenicillium sclerotiorum f-10015 – продуцент кароти-
ноидов, ме
дленно растущий (µ 0,11 час–1). Нами отра-
ботаны условия их совместного культивирования и со-гласно регламенту в полупроизводственных условиях на стендовой установке Научно-технического центра производственной биотехнологии ОАО «Стиролбио-тех» (Киев) на среде Чапека со свекловичной мелассой (1
% по р.в.) в качестве источника углерода была нара-
ботана партия белково-витаминного препарата. В ре-зультате совместного культивирования в 2–3 раза по-вышен выход ряда витаминов, увеличено количество белк
а до 48–50 % асв, сокращены сроки ферментации
до 42 часов. Полученный биопрепарат содержал ком-плекс витаминов: биотин, пантотеновую кислоту, уби-хинон Q10, а также ненасыщенные жирные кислоты, в частности олеиновую, арахидоновую, незаменимые аминокислоты (лизин, триптофан), микроэлементы. Белково-витаминный препарат был включен в рацион мышей, рыб, перепелов и шелкопряда. Биопрепарат оказывал благоприятное влияние на показатели крови, активность холинэстеразы, количество аммиака в тка-нях мозга мышей снижалось в 2,85 раза. Применение препарата не только повышало выживаемость живот-ных и их производственные показатели, но также спо-собствовало их защите от инфекционных заболеваний (полиэдроза шелкопряда и сапролегниоза карпа).
ФЕРМЕНТНЫЕ ПРЕПАР АТЫ ИЗ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ГРИБОВ
Телишевская Л.Я., Овчинников Р.С.
ФГУ «в
ГНкИ»,
Москва
В последние годы в связи с бурным развитием био-
технологии возрастает интерес к микроскопическим грибам, как потенциальным продуцентам различных хозяйственно-значимых ферментных препаратов. Син-тезируемые грибами ферменты находят применение в пищевой и легкой промышленности, сельском хо-зяйстве, медицине и медицинской промышленности, косметологии. Перспективно использование грибных ферментов при создании современных наукоемких технологий. Широкий спектр продуцируемых микро-мицетами ферментов, неприхотливость грибов-про-дуцентов, относительно низкая себестоимость тех-нологии получения ферментных препаратов делают микроскопические грибы эффективным объектом сов-ременной биотехнологии.
Грибы способны продуцировать ферменты различ-
ных классов. Так, гликозидазы микологической при-роды эффективно гидролизуют высокомолекулярные тр
удно расщепляемые растительные полисахариды –
целлюлозу, гемицеллюлозы, лигнин, пектин, которые не усваиваются в пищеварительном тракте животных и человека. Гликозидазы, синтезируемые микромице-тами
родов Trichoderma, Aspergillus, Mucor, penicillium
находят применение в пищевой и легкой промышлен-ности, в кормопроизводстве.
Существенную практическую ценность представля-
ют синтезируемые микромицетами протеолитические ферменты. Сериновые протеазы, продуцируемые гри-бами родов Acremonium, Alternaria, Aspergillus, Cephalo-sp
orium, fusarium, penicillium, Trichoderma, verticillium
и др., расщепляют эфирные связи, а также связи, обра-зованные остатками ароматических аминокислот, лей-цина, метионина. Карбоксильные, или кислые протеазы грибов расщепляют пептидные связи, образованные ароматическими и другими гидрофобными аминокис-лотами, и способны гидролизовать казеин, гемоглобин, бычий сывороточный альбумин, белки сои (ферменты ро
дов Aspergillus, Mucor, penicillium, Trichoderma, Rhi-
zopus). Металлопротеазы грибов также имеют широкую субстратную специфичность. Так, протеаза, образуемая pen
icillium roqueforty расщепляет казеин, гемоглобин,
протамин, гистоны, желатин, фибрин, слабо расщепля-ет эластин (О. Кислухина, 2002). Как правило, проте-олитические препараты, получаемые из грибов, содер-жат не один фермент, а комплекс протеаз.
Особый практический интерес представляют фер-
менты грибов, гидролизующие структурные животные белки:
коллаген, кератин и эластин. эти склеропротеи-
ны отличаются механической прочностью и химичес-кой инертностью, обусловленной их аминокислотным сост
авом и конформацией молекул. Склеропротеины –
основные белки покровных тканей, составляющие 25
– 30 % от веса тела млекопитающих.
Склеропротеины практически не усваиваются же-
лудочно-кишечным трактом человека и высших живот-ных. Исключение составляют некоторые представители
Грибные биотехнологии 343
плотоядных. При этом те же белки могут расщепляться
рядом микроорганизмов, в частности грибами и актино-мицетами. По специфичности действия на структурные белки различают «истинные» и «неспецифические» склеропротеазы. «Истинные» склеропротеазы действу-ют только на специфические для них субстраты и не расщепляют других белков. Так, «истинные» коллаге-назы гидролизуют коллаген, воздействуя на первичную структуру белка, и расщепляют аминокислотную цепь в неполярных участках молекулы по связям (-х-гли-). «Н
еспецифические» протеазы – коллагенолитические
ферменты – гидролизуют как коллаген (в большей сте-
пени денатурированный), так и другие белковые суб-страты. При этом они действуют преимущественно на полярные участки коллагена (телепетиды), с нетипич-ным для него аминокислотным составом, в т.ч. по внут-ри- и межмолекулярным связям. (Н. Дёмина, С. Лысен-ко, 1996).
«Неспецифические» склероптореазы довольно ши-
роко распространены как среди грибов, так и среди актиномицетов, однако «истинные» склеропротеазы синтезируются лишь немногими микроорганизмами. Уникальными в этом смысле являются патогенные гри-бы-дерматофиты родов Trichophyton и Microsporum, способные к специфическому расщеплению структур-ных белков. Очевидно, такая способность связана со способом паразитирования грибов-дерматофитов, у которых склеропротеазы выступают в качестве фак-торов вирулентности и обеспечивают инвазию гриба в ткани хозяина (I. Weitzman et al., 1995). Образование коллагеназ, кератиназ, эластаз, а также их комплексов, установлено у различных видов грибов-дерматофи-тов
(v. Meevotisom et al., 1979; M. Asahi et al., 1985; A.
Sanyal et al., 1985; B. Mignon et al., 1998; f. Brouta et al.,
2002 и др.)Использование грибов-дерматофитов в качестве
продуцентов ферментных препаратов для гидролиза структурных белков открывает широкие перспективы промышленного использования склеропротеаз. Нами была установлена возможность получения и прак-тического использования комплекса протеаз струк-турных грибов при культивировании дерматофитов видов Trichophyton verrucosum, T. mentagrophytes, T. equinum, Microsporum canis, M. gypseum (Патент RU 2244741 С1, приоритет от 27.06.2003). Было показано, что эффективные ферментные препараты могут быть получены из отходов производства вакцин против де-рматофитозов животных, выпускаемых рядом пред-приятий биологической промышленности.
Было установлено, что различные штаммы-проду-
центы дерматофитов проявляют разные профили фер-ментативной активности в отношении различных суб-стратов (коллагена, кератина и эластина), что позволяет получать препараты с заданными свойствами в зависи-мости от цели использования. Например, применение препаратов склеропротеаз для обработки кожевенного и пушного сырья позволяет получать продукцию с требуемыми характеристиками, в зависимости от ис-пользуемого ферментного препарата (Р . Овчинников, О. Талянский, Л.Я. Телишевская и др., 2004). Очевид-но, что препараты склеропротеаз, которые могут быть адаптированы под конкретные цели, имеют перспекти-вы широкого практического использования.
Таким образом, микроскопические грибы являются
уникальными продуцентами ферментных систем раз-ной специфичности и активности, в т.ч. склеропроте-аз, крайне редко встречающихся у других организмов. Ферментные препараты грибного происхождения мо-гут быть использованы для решения самого широкого круга прикладных задач.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ TRICHODERMA В ПРОЦЕССЕ ПЕРЕР АБОТКИ
ОТХОДОВ СПИРТОВОГО ПРОИЗВОДСТВА
Тухбатова Р.И., Рафаилова Э.А., Тазетдинова Д.И., Алимова Ф.К.,
Скворцов
Е.В., Мельникова Т.А.
ГоУ вПо «казанский государственный университет им.в.И.Ульянова-ленина»,
казань
При производстве спирта из зерна (например, пше-
ницы, кукурузы или ржи) получается довольно боль-шое количество отработанной массы прошедшего фер-ментацию сырья, из которого путем дистилляции был извле
чен алкоголь. эту жидкую массу – послеспирто-
вую
барду – необходимо утилизировать, и проблема
с этим актуальна во всем мире. На сегодняшний день послеспиртовая барда высушивается или перераба-тывается в дрожжевой кормоконцентрат –
основу
комбикорма, предназначенного для кормления сель-ско
хозяйственных животных и птицы. Применяемая
в настоящее время технология предусматривает куль-тивирование кормовых дрожжей на барде с добавкой источника азота (мочевины и др.). Дрожжи обогащают барду белком. Однако дрожжевой кормоконцентрат обладает невысокими кормовыми свойствами и, соот-ветственно, ценой реализации, что заставляет техно-логов спиртового производства и научных работников продолжать поиски более эффективных методов пере-работки послеспиртовой барды.
Целью работы являлось исследование эффектив-
ности предварительного культивирования грибов Trichoderma для увеличения содержания белка в дрож-жевом кормовом концентрате, получаемом в процессе переработки послеспиртовой барды.
В работе использовался штамм T. asperellum 302,
который был отобран нами в ходе проведенного ранее широкого скрининга штаммов грибов Trichoderma.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 344
Штамм характеризуется сочетанием высоких пока-
зателей протеазной, целлюлазной и ксиланазной ак-тивностей. После того, как были определены пики ак-тивности гидролитических ферментов исследуемого штамма T. asperellum 302, мы провели эксперименты по последовательному культивированию Trichoderma с кормовыми дрожжами с целью увеличения выхода кормового белка. Было установлено, что при засеве кормовых дрожжей в барду, где предварительно куль-тивировали T. asperellum 302, наблюдается увеличение накопления дрожжевого белка. Нами была определена зависимость увеличения накопления дрожжевого бел-ка от продолжительности предварительного культи-вирования T. asperellum 302 на барде. Небольшое уве-личение нак
опления дрожжевого белка (от 5 до 7 %)
наблюдали при предварительном культивировании Triсhoderma на барде в течение 1–2 суток. Наибольшее увеличение накопления белка наблюдалось после пред-варительного гидролиза барды Triсhoderma в течение 3 и 4 дней. Прирост абсолютного содержания белка со-ставил
около 10 %, что составляет прибавку порядка
35 % в сравнении с содержанием белка в дрожжевом кормовом концентрате, полученном без применения предварительного культивирования Triсhoderma. Та-ким образом, нами получены данные, показывающие что в процессе культивирования Trichoderma на пос-леспиртовой барде в среде происходит накопление гидролитических ферментов. Максимум ферментатив-ной активности приходится на 3–4 сутки культивиро-вания гриба. Как показали проведенные исследования, максимум ферментативной активности в среде явля-ется оптимальным временем для инокуляции перера-батываемой послеспиртовой барды кормовыми дрож-жами. Максимальное содержание белка в дрожжевом концентрате получено при инокулировании дрожжей Candida tropicalis на 3 сутки предварительного культи-вирования Trichoderma.
Полученные результаты показывают, что процесс
происх
одит в два этапа: первый – ферментативный
гидролиз части сырья, в процессе предварительного культивирования гриба Trichoderma, с получением до-ступных
для дрожжей сахаров, второй – ферментация
образующихся сахаров дрожжами, что позволяет по-лучить высокий выход кормового белка.
ИЗУЧЕНИЕ НЕНАСЛЕДСТВЕННОЙ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ МИТОСПОРОВОГО
ГРИБА ARTHRObOTRYs LONGA – ПРОДУЦЕНТА ЛОНГОЛИТИНА,
ТРОМБОЛИТИКА С АКТИВАТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Шаркова Т.С., Подорольская Л.В., Серебрякова Т.Н., Неумывакин Л.В.
Моск
овский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
Институт Молекулярной Генетики РАН,
Москва
Лонголитин (ЛГ) перспективный для клиники препа-
ра
т – тромболитик, область применения которого в виде
мази – лечение тромбофлебитов и флеботромбозов.
Рентабельность биотехнологических предприятий
в равной степени зависит как от внедрения прогрес-сивных технологий, так и от использования высоко-эффективных продуцентов биологически активных веществ.
Микромицет Arthrobotrys longa принадлежит к ми-
тоспоровым грибам, которые размножаются исключи-тельно бесполым путем, что делает невозможным со-здание путем традиционной селекции продуктивных и стабильных гомотипов.
Микроконидии и мицелий A. longa многоядерны.
Такая внутриклеточная ассоциация генетически раз-личных ядер
называется гетерокариозом. это способс-
твует постоянной диссоциации культуры- продуцента на многочисленные варианты, которые, отличаясь меж-ду собой рядом морфологических и физиологических признаков, не выходят, однако, за пределы вида.
Для таких продуцентов полезно иметь данные об
их естественной изменчивости (вариабельности при-знаков) с целью постоянного проведения поддержива-ющей селекции и отбора потенциально продуктивных вариантов.Изучение вариабельности гриба A.longa проводи-
лось с использованием моноспоровых рассевов мик-ромицета на плотной среде Чапека обычного состава пр
и температуре 26–28 °С ( агар пластинчатый ГОСТ-
17206).
В таких условиях выявляется два основных типа
колоний и целый ряд промежуточных форм.
!
тип – представляют широкорастущие колонии, на
12 сутки имеющие размер.
4.0х4.0 см. Воздушный мицелий хорошо развит,
тяжистый или тяжисто- . –пушистый. В центре ко-лонии может быть «хохолок» более длинных слегка извитых тяжей. Пигментация от кремовой до светло оранжевой.
Обратная сторона колонии имеет оранжевую ок-
раску; бывает лучисто-складчатой.
11
тип – отличается плотным «войлочным» ростом
воздушного мицелия;
скорость роста слегка замедлена ( размер колоний
на 12 сутки
– 3,2х3,2 см)
Пигментация воздушного мицелия от кремовой до
различных оттенков оранжевой. Обратная сторона ко-лонии оранжевая.
Многочисленные промежуточные варианты могут
отличаться более горизонтально тяжистым рисунком
Грибные биотехнологии 345
воздушного мицелия, зональностью, клочковатым ха-
рактером роста, яркой оранжевой пигментацией.
При визуальном отборе потенциально продуктив-
ных штаммов ЛГ мы учитывали общие положения биотехнологии, требующие от продуцентов биологи-чески активных веществ способности обильно обра-зовывать в глубинной культуре вегетативные клетки и споры, быстро накапливая инокулюм для засева про-мышленных ферментеров.
Селекция потенциально продуктивных штаммов
гриба A.longa проводилась путем отбора среди полу-ченных вариантов колоний с хорошо развитым воз-душным мицелием, на коротких гифах которого в оби-лии находились микроконидии..
При росте такого мицелия продуцента ЛГ в глу-
бинной культуре на синтетической среде, специально подобранной методом математического планирования экспериментов, микромицет образует густую мелко-дисперсную массу, состоящую из двух фаз: мицелиаль-ной и конидиальной. Максимальная продуктивность в отношении ЛГ совпадает с периодом интенсивной удельной скорости роста гриба в момент прорастания микроконидий и развития новых генераций мицелия.
Безусловно, перспективными в отношении биосин-
теза
ЛГ – комплекса ферментов с фибринолитической,
активаторной и тромболитической активностью – ока-зываются колонии близкие к 1 типу. Наиболее ценная активаторная активность в препаратах ЛГ при культи-вировании
таких штаммов составляет не менее 50 %
от общей фибринолитической активности.
Регулярно проводя моноспоровые рассевы проду-
цента ЛГ гриба A.longa и отбирая по морфологичес-ким признакам потенциально продуктивные штаммы, мы убедились в возможности поддерживать стабиль-но высокую биосинтетическую активность культуры, независимо от времени года, наблюдая лишь незначи-тельное снижение показателей в зимний период, что характерно и для многих стабильных гомотипов.
БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ МИКОСИМБИОНТНЫХ БАКТЕРИЙ
Широких А.А., Широких И.Г.
ГУ з
ональный НИИ сельского хозяйства Северо-востока
им. Н.в
. Рудницкого РАСХН,
киров
Глубинный способ культивирования базидиоми-
цетов является одним из перспективных направлений грибной биотехнологии, поскольку позволяет созда-вать полностью контролируемые условия для роста грибных культур. Используя эту технологию можно получать биологически активные соединения для фармакологии, парфюмерии, а также мицелиальную биомассу для пищевой индустрии непосредственно из культуральной жидкости, минуя стадию образования плодовых тел (Феофилова, 2002). Одной из проблем глубинного культивирования базидиальных грибов является относительно низкая, по сравнению с микро-мицетами, скорость роста мицелия, что предполагает повышенные требования к соблюдению стерильности, а также ведёт к неоправданно высоким энергетичес-ким затратам (Никитина и др., 2007).
В природе базидиальные макромицеты сущест-
вуют как компонент сложных ассоциаций, в состав ко
торых входят бактерии (fitter, Garbaye, 1994), спо-
собные оказывать на грибы, на их рост, развитие и плодоношение как стимулирующее, так и угнетаю-щее в
лияние (Garbaye, 1994; frey-klett et all., 1997).
В процессе эволюции сложилось приспособление для привле
чения грибами нужных им бактерий – вещества
(моносахариды, спирты, аминосахара и аминокисло-ты), выделяемые спорами грибов, действуют на под-вижные бактерии как аттрактанты (Gupta, Arora, 1987). Из плодовых тел эктомикоризного гриба Tuber borchii
vitta были
выделены флюоресцирующие псевдомона-
ды и спорообразующие бактерии (Barbieri et al., 2000). У ряда штаммов ( Pseudomonas fluorescens, P . syringae, bacillus
subtilis и b. cereus) выявлена целлюлолитичес-
кая и хитинолитическая активность, способствующая открытию споровых сумок и прорастанию аскоспор (Gazzanelli et al., 1999). В связи с этими данными фак-тором ускорения роста базидиомицетов в глубинной культуре могут быть метаболиты бактерий, обладаю-щих полезными для роста мицелия свойствами (Степа-нова и др., 2007). Как правило, используемые для этих целей шт
аммы бактерий, относятся к группе pGpB
(Plant Grouth Promoting b acteria ), известные способ-
ностью оказывать положительное влияние на рост и развитие растений, благодаря способности к фиксации атмосферного азота, продукции фитогормонов, а так-же контролю развития фитопатогенов. Очевидно, бла-гоприятное взаимодействие этих бактерий с высшими грибами основывается на схожих аспектах.
Целью нашей работы являлось выделение и изу-
чение культурально-морфологических и физиолого-биохимических свойств микосимбионтных бактерий, изолированных из плодовых тел базидиомицетов, соб-ранных в лесных биогеоценозах Кировской области.
В результате изоляции бактерий из поверхностно
стерилизованных базидиом макромицетов на среду RHM была собрана рабочая коллекция, включающая 32 штамма. Изучение морфологических и физиоло-го-биохимических свойств выделенных культур по-казало, что комплекс микосимбионтных бактерий представлен в равной мере как грамотрицательными (47
%), так и грамположительными (53 %), в основном
неподвижными (72 %) и неспороносными (69 %) па-лочками, различающимися по форме и размерам. По
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 13 346
результатам теста Хью-Лейфсона среди 32-х изоля-
тов
обладали аэробным типом метаболизма 28 %, фа-
ку
льтативно-анаэробным – 72 % культур. Абсолютное
большинство штаммов были каталазоположительны-ми (91
%). В тестах с желатиной и крахмалом полови-
на к
ультур проявила протеолитическую и 12 % куль-
тур
– амилолитическую активность.
Мицелий грибов, из которых были выделены изуча-
емые штаммы бактерий, культивировали в конических колбах объёмом 250 мл с глюкозо-пептонной средой (50 мл) на качалке при 180 об/мин и температуре 26
°С.
В колбы с мицелиальными культурами после трёх дней культивирования добавляли по 1 мл культуральной жидкости (КЖ) бактерий, которые были изолированы из плодовых тел этих же грибов. Контролем служили колбы с добавлением синтетической ИУК (20 мкг/мл) и без неё. После 7 дней инкубации определяли грави-метрически сухую биомассу мицелия, и по её приросту относительно контроля судили о ростстимулирующем влиянии культуральной жидкости бактерий.
Не оказали ингибирующего действия на рост бази-
диомицетов в мицелиальной культуре метаболиты 8 из 10 изученных бактериальных штаммов, 6 бактериаль-ных культур обладали способностью стимулировать рост грибов-базидиомицетов. Стимулирующий эффект бактериальных метаболитов по величине был сопоста-вим с таковым при добавлении синтетического регуля-тора роста ИУК в концентрации 20 мкг/мл, и в ряде слу-чаев достоверно превосходил синтетический регулятор роста. Добавление в питательную среду раствора син-тетической ИУК увеличивало скорость роста биомас-сы грибов (мг/сут) в среднем в 1,5–2 раза. Накопление сухой биомассы мицелия при добавлении к культуре базидиомицета №10 КЖ бактерий Bacillus sp. 323–10 и Bacillus sp.319–10 увеличивалось втрое по сравнению с контролем. Вдвое увеличивалось накопление мице-лиальной массы базидиомицета №3 под воздействием метаболитов культуры Bacillus sp. 311–3–1. Стимуляция мицелиального роста наблюдалась при выращивании базидиомицета №3 в присутствии культуральных жид-костей бактерий Bacillus sp. 318–8 и Bacillus sp.313–8, а также базидиомицета №11 при добавлении КЖ бакте-ри
и Rhodococcus sp. 305–11 (на 84–85 % к контролю).
В меньшей степени, чем КЖ грамположительных бак-те
рий, содействовала приросту (на 27 % к контролю)
грибной биомассы культивирование базидиомицета №12 с добавлением КЖ грамотрицательной бактерии Ervinia 300–12. Не оказали положительного влияния на скорость роста и накопление сухой биомассы грибом №12 метаболиты коринеформной бактерии 307–12–6.
Вместе с тем, добавление к культурам базидиоми-
цетов №11 и №3 соответственно метаболитов бактерий Rhodococcus sp. 324–11 и Bacillus sp. 330–3 привело к снижению
на 15–28 % интенсивности мицелиально-
го роста базидиомицетов по сравнению с контролем. Проверка антагонистических свойств бактерий-ин-гибиторов методом диффузии в агар в отношении микромицет
ов fusarium sporotrichiella, f.oxysporum,
Trichoderma sp., Bipolaris sorokiniana подтвердила ан-тифунгальную активность бактерии Bacillus sp. 330-3. Штамм Rhodococcus sp. 324-11 при тестировании в чистой культуре не проявил антифунгальных свойств, но характеризовался высокой (более 50 мкг/мл) ин-тенсивностью синтеза индолил-3-уксусной кислоты (ИУК), избыток которой в среде мог отразиться нега-тивно на развитии базидиального гриба.
Скрининг микосимбионтных бактерий по способ-
ности к синтезу ауксинов выявил не только частую вст
речаемость в комплексе продуцентов ИУК (91 %),
но и высокую активность отдельных штаммов в обра-зовании ауксинов. Только 3 микосимбионтных куль-туры обеспечили накопление ауксинов в количествах, меньших 8
мкг/мл, культуральная жидкость 22 % изо-
лятов содержала ИУК в количествах от 35 до 62 мкг/мл. Содержание ауксинов в культуральных жидкостях остальных изолятов изменялось в пределах от 12,5 до 32,5 мкг/мл.
Способность природных изолятов продуцировать
фитогормоны представляет интерес с точки зрения возможности их использования в фитобиотехнологии. Среди ассоциированных с базидиомицетами бактерий выявлены штаммы, обладающие фиторегуляторным действием. Так, проверка фиторегуляторной способ-ности метаболитов микосимбионтных бактерий на проростках пшеницы показала, что увеличению сухой массы
(на 11–36 % к контролю) способствует замачи-
вание
семян в культуральных жидкостях 47,2 % изо-
лятов;
стимулировали апикальный рост (на 11–52 %
к контролю) 52,8 % изолятов; возрастанию линейных размеров корней (на 8–33 % к контролю) способство-ва
ли 44,4 % изолятов. Комплексное стимулирующее
действие на проростки оказали 30,5 % культур мико-симбионтных бактерий. К числу штаммов, наиболее активных в фиторегуляторном отношении, отнесе-ны Agrobacterium
sp. 321–6, pseudomonas sp. 314–9;
Bacillus sp. 312–6; Bacillus sp. 311–3–1; Enterobacter sp. 315–9, продуцирующие ауксины в количествах 20,0; 23,5; 24; 35 и 42 мкг/мл среды соответственно.
Вместе с тем, среди бактерий, изолированных из
плодовых тел грибов, относительно редко встречались культуры с антагонистической активностью. Так, сла-бая антифунгальная активность обнаружена только у 4, а
бактерицидная активность – у 7 культур из 23 тес-
тированных бактериальных изолятов.
Полученные данные показывают, что плодовые
тела базидиальных грибов являются перспективным источником ценных в биотехнологическом отношении штаммов бактерий, которые могут быть использованы как для стимуляции роста мицелия базидиомицетов при глубинном способе культивирования, так и для производства ростостимулирующих препаратов в фи-тобиотехнологии.
Своевременное и правильное лечение больных жи-
во
тных – одно из мероприятий в комплексе мер борь-
бы с дерматофитозами.
Для лечения дерматофитозов животных настоящее
время применяют различные медикаментозные пре-
параты как отечественного, так и зарубежного произ-водства. В механизм действия большинства лечебных средств, используемых для традиционных местных обработок при дерматофитозах, положен принцип обеззараживания кожного покрова, что сопровожда-ется обычно воспалительной реакцией или даже ожо-гами на месте их аппликации. У разных животных степень выраж
енности кожной реакции различна. это
необходимо учитывать при выборе медикаментозного средства и его рабочей концентрации (С.В.Петрович, 1989; А.А.Конопаткин и др., 1993).
Известно, что препараты йода обладают общим
фунгицидным свойством. Они выделяются кожными железами и накапливаются в воспалительных участках кожи и этим способствуют ликвидации очагов пораже-ния. Практические работники с этой целью использу-ют
5–10 % спиртовую настойку йода, 5–10 % раствор
однохлористого йода. Одновременно рекомендуется дача с кормом или водой йодистого калия или йодисто-го натрия в дозе 2 г. на 100 кг. веса животного в течение 10–15 дней (П.Н.Кашкин, 1967; И.А.Голубев, 1970).
Вместе с тем, большинство отечественных и зару-
бежных исследователей сходятся в едином мнении, что наиболее эффективной в терапии и профилактике стригущего лишая должна быть комплексная обработка животных, включающая лечение у больных животных очагов поражений эффективным средством и общая обработка всего кожного покрова. Однако, обработка животных рекомендуемыми дезинфицирующими рас-творами (натрия гидроокись, формалин и др.), не всегда дает хорошие результаты, трудоемка в применении, осо-бенно в зимнее время, а иногда и вредна для животных и обслуживающего персонала (И.А.Голубев, 1970).Длительность лечения, развитие побочных явле-
ний и известный процент неудач диктуют необходи-мость дальнейшего совершенствования схем лечения трихофитии и микроспории в направлении сокраще-ния сроков терапии, уменьшения количества использу-емых препаратов, а также изыскания вспомогательных терапевтических средств.
Целью наших исследований явилась изучение тера-
певтической эффективности фармайода, выпускаемо-го УП «Могилевский завод ветеринарных препаратов, российский
аналог йодез. Фармайод – дезинфициру-
ющий и антисептический препарат широкого спектра действия, в состав которого входит йодополимерный комплекс.
Для изучения лечебной эффективности препарата
«Фармайод» в начале в условиях кафедры микробио-логии и вирусологии УО ВГАВМ было подобрано две группы морских свинок, массой 250–300 г, по 5 жи-вотных в каждой и произведено экспериментальное заражение. Для заражения животных использовали штамм Tr.verrucosum № 153. Дерматофиты выращи-ва
ли на сусло-агаре (рН 6,4) при 26 °С в течение 15
дней и после снятия с поверхности питательной среды гомогенизировали в миксере в течение 15 мин с добав-лением стерильного изотонического раствора NaCl. Концентрацию грибных элементов подсчитывали в камере Горяева. Суспензии клеток дерматофитов вво-дили всем животным с помощью инъекционной иглы внутрикожно в объёме 0,1 мл при концентрации 106 клеток\мл. Ежедневно животных осматривали и при появлении клинических признаков дерматофитоза па-тологический материал (корочки, чешуйки) с целью подтверждения диагноза исследовали микроскопи-чески с последующим выделением ретрокультуры на сусло-агаре.
В дальнейшем животных 1-ой группы подвергали
ле
чению 5 %, а 2-ой – 10 %-ными растворами фармайо-
да по схеме используемой при употреблении йодистых Раздел 14
ВЕТЕРИНАРНАЯ МИКОЛОГИЯ
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФАРМАЙОДА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ
БОЛЬНЫХ ТРИХОФИТИЕЙ ЖИВОТНЫХ
Алешкевич В.Н.
кафедра микробиологии и вирусологии У о «вГАвМ»,
витебск
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 14 348
препаратов (5–10 % растворы однохлористого йода,
10 % спиртовой раствор йода). э ффективность лечения
морских свинок контролировалось по клиническому
выздоровлению животных и выделением ретрокульту-ры дерматофитов из пораженных участков кожи.
Затем изучение лечебной эффективности фармайо-
да проведено в условиях животноводческих хозяйств неблагополучных по трихофитии. С этой целью в КУСХП «Адаменки» Лиозненского района на ферме Черноручье были сформированы три группы телят в возрасте 5–7 месяцев больных трихофитией: живот-ным 1-й
группы (18 гол) фармайод в виде 10 %-ного
раствора наносили ватно-марлевым тампоном и вти-рали в пораженные участки кожного покрова. Обра-ботку проводили 3–4 дня ежедневно, а затем через 6 дней курс лечения повторяли; животным 2-ой группы (11 голов) одновременно с обработками фармайодом с лечебной целью вводили живую вакцину против три-хофитии крупного рогатого скота производства Витеб-ской биофабрики, серия 164, контроль 164, согласно наставления по применению биопрепарата; 3-я группа (11
голов) – животных подергали обработке с лечеб-
ной целью только вакциной.
Диагноз на трихофитию у крупного рогатого скота
был предварительно поставлен по клиническим при-знакам с последующим подтверждением на основе проведения микологического исследования проб ма-териала (пораженные волосы, чешуйки, корочки). В 1-ый и последний дни исследований, с целью санации помещения и всего кожно-волосяного покрова живот-ных, пров
ели аэрозольную дезинфекцию 4,5 %-ным
раствором фармайода из расчета 10 мл\м3 с помощью аэрозольного генератора в присутствии животных
Оценку качества дезинфекции проводили соглас-
но «Методических указаний по контролю качества дезинфекции объектов подлежащих ветеринарному надзору», утвержденных ГУВ МСХ СССР 1988 г., по выявлению стафилококков и возбудителей данного де-рматофитоза (пункт 1.3.3.4. инструкции).
эф
фективность обработок определяли по срокам
излечиваемости животных, проявляющейся по оттор-жению трихофитийных корочек и росту новых волос, привесам и проведению микологических исследова-ний из соскобов участков поражения.
Для опытов в СПК «Подгорный» Берестовицко-
го района Гродненской области использовали телят черно-пёстрой породы в возрасте 4–6 месяцев. После постановки диагноза было отобрано 66 телят с различ-ной степенью поражения трихофитией. Схема лечения животных фармайодом была аналогична таковой как, указано выше.
В ходе опытов телята находились под наблюдением
в течение 52 дней.
Исследованиями по экспериментальному воспро-
изведению трихофитии у морских свинок установлено, что клинические признаки дерматофитоза появлялись на 7–8-е сутки в виде гиперемированных, уплотнен-ных, округлой формы участков кожи, диаметром 1,0–1,2 см, покрытых асбестовидными корочками серого цвета. Период возникновения новых очагов колебался от 10 до 18 дней. У некоторых животных пораженные участки появлялись даже на мордочке.
Пр
и лечении морских свинок 10 %-ным раствором
фармайода выздоровление наступало на 8–15-е сутки. Лечебный эффект клинически проявлялся в следую-щем: трихофитийные корочки начинали постепенно размягчаться и крошиться, воспалительные и экссу-дативные явления уменьшались. В дальнейшем мес-та поражения полностью освобождались от корочек и чешуек и на этих местах образовывались гладкие, мяг-кие, облысевшие участки кожи темной пигментации. В последующем отмечали полное восстановление во-лосяного покрова. Все животные хорошо переносили обработку фармайодом. Каких-либо отклонений в об-щем состоянии животных не наблюдали. Температура, пульс, дыхание оставались в пределах физиологической нормы. Дерматиты и ожоговые явления на месте нане-сения препарата отсутствовали. У 4-х морских свинок по
двергавшихся лечению 5 %-ным раствором фармайо-
да отторжение корочек и дальнейшее выздоровление пр
оисходило на 22–30 сутки, одной – на 38 сутки.
В дальнейшем при проведении производственных
испытаний лечебной эффективности фармайода в ус-ловиях КУСХП « Адаменки» Лиозненского района на МТФ
«Черноручье» нами использовалась 10 %-ная
концентрация препарата. Нами установлено, что сре-ди телят, подвергавшихся лечению только вышеука-занным препаратом, выздоровели все животные. Срок излечиваемости составил 27 дней. Животные под-вергавшиеся лечению фармайодом с одновременным введением противотрихофитийной вакцины выздо-равливали в течение 25 дней. В третьей группе телят, которым с лечебной целью вводилась вакцина, клини-ческие признаки выздоровления наступали в течение 40 дней. Отрицательного влияния препарата на орга-низм животных не установлено. Температура, пульс, дыхание были в пределах физиологических норм.
После проведения санации животноводческого
помещения фармайодом в присутствии животных не отмечено также появления на кожном покрове новых трихофитийный очагов. В опыте, проведенном в усло-виях СПК «Подгорный» (МТФ Козлы) Берестовицкого района Гродненской области, были получены анало-гичные результаты.
В результате исследований установлено, что пре-
парат «Фармайод» обладает высокой лечебной эффек-тивностью, уменьшая срок выздоровления животных на 13–15 дней по сравнению с использованием одной лишь противотрихофитийной вакцины.
Заключение1. Использование фармайода для лечения больных
животных позволяет сократить сроки выздоровления телят от трихофитии в 1,48 раза по сравнению с исполь-зованием противотрихофитийной вакцины, увеличить прирост
живой массы на 31 % и получить экономичес-
кую эффективность 4,93 рубля на рубль затрат.
2. Санация животноводческих помещений фар-
майодом в присутствии животных в целях обеззаражи-вания их шерстного покрова одновременно с лечением данным препаратом трихофитозных очагов предуп-
ветеринарная микология 349
реждает возникновение новых случаев заболевания
телят трихофитией.
ЛИТЕР АТУР АГолубев, И.А. Дерматофитозы животных / И.А. Го-
луб
ев. – М.: Колос, 1970. – 192 с.
Петрович, С.В. Микозы животных / С.В. Петро-
вич.
– М.: Росагропромиздат, 1989. – 173 с.Кашкин П.Н. Дерматомикозы. – Л.: Медгиз, 1967. –
333 с.
эпиз
оотология и инфекционные болезни сель-
скохозяйственных животных \\ А.А.Конопаткин, В.Т.Ар
тюмов, И.А.Бакулов и др.: Под ред. А.А. Коно-
паткина.- М.: колос,1993.- 688 с.
Несмотря на достигнутое благополучие по дерма-
тофитозам крупного рогатого скота трихофития до сих пор регистрируется среди поголовья этого вида животных в хозяйствах РБ. Животные миконосители выделяют в окружающую среду обитания возбудителя инфекции и при этом создаются условия, при которых возможно заражение нарождающегося невакциниро-ванного молодняка. Согласно литературных данных возбудители трихофитии животных находящиеся на объектах внешней среды в споровой форме и к тому же под защитой рогового слоя волоса, и ороговевших чешуек эпидермиса сохраняют жизнеспособность до 3–7 лет, оставаясь вирулентными до 1,5 лет, в наво-зе
– 8 месяцев, в почве – до 142 суток. Дерматофиты
представляют угрозу не только для животных, но и для обслуживающего персонала и членов их семей, о чем свидетельствуют нередкие случаи заражения трихофи-тией животноводов, зарегистрированные в ходе прове-дения собственных исследований.
Как и при других инфекционных болезнях, разрыв
эпизоо
тической цепи – уничтожение возбудителя во
внешней среде является неотъемлемой частью комп-лекса оздоровительных мер при трихофитии крупно-го рогатого скота. С этой целью в животноводческих помещениях необходимо регулярно проводить ме-ханическую очистку и дезинфекцию. Практика вете-ринарно-санитарных мероприятий показывает, что обеззараживание животноводческих помещений, тер-ритории вокруг них, проведенное в летний период, когда животные временно находятся в лагерях, заго-нах, устраняет опасность возникновения трихофитии в зимнее время, даже в тех помещениях, которые были заняты заведомо неблагополучными по данному забо-леванию животными.
В основном для дезинфекции животноводческих
помещений для профилактики различных инфекци-онных заболеваний до настоящего времени использо-вались гидроокись натрия, растворы формальдегида, глутарового альдегида, препараты хлора. Вместе с тем эффективность их применения невысока, они обладают в рекомендуемых концентрациях коррозийным дейс-твием, после применения необходима нейтрализация воздуха, и их невозможно применять в присутствии животных. С другой стороны, в результате многолет-него применения формальдегид- и хлорсодержащих препаратов создались условия для формирования ус-тойчивой к этим дезинфектантам микрофлоры. Кро-ме того, установлено, что большинство применяемых препаратов может длительно находиться во внешней среде без изменения или трансформироваться до кан-церогенов и экотоксинов (Кузьмин В.А. и др., 2002).
В качестве дезинфицирующих препаратов при
трихофитии рекомендуется использовать в случае влажног
о метода дезинфекции 3 %-ный раствор фор-
ма
льдегида с добавлением 1 %-ного едкого натра, 2 %-
ного раствора формальдегида с добавлением 1 %-ного едкого натра и 3 %-ного креолина, 12 %-ный фенолят натрия с добавлением 1 %-ного едкого натра. Темпера-тура
растворов +30-+50 °С. Норма расхода на кирпич-
ные, бет
онные и деревянные поверхности – 1л/м2.
Надежное обеззараживание деревянных, бетонных
и металлических поверхностей обсемененных возбу-дителями трихофитии также достигается при приме-нении 4
%-ных растворов глутарового альдегида, 2 %-
ного раствора метафора при экспозиции 3 ч и расходе 1л/м2 поверхности (Поляков А.А., Тарабукина Н.П., Павлова И.Б. (1987).
Наибольший процент больных трихофитией живот-
ных регистрируется в период стойлового содержания, всле
дствие этого использование 3 %-ного раствора
формальдегида и других дезинфицирующих средств, проблематично. С целью обеззараживания помещений в присутствии животных в зимне-стойловый период в ветеринарии широко используется метод аэрозоль-ной дезинфекции. При данном способе дезинфекции в несколько раз сокращаются нормы расхода препарата и затраты рабочего времени операторов, достигается надежное обеззараживание труднодоступных мест: потолочные перекрытия, вентиляционные трубопро-воды, электроосветительная арматура и др. (Карпович Т.И. и др., 2002).
Встречаются лишь единичные работы, в которых
освящаются аспекты аэрозольной дезинфекции при дерматофитозах. Аэрозольную дезинфекцию, соглас-но данных П.И.Левченко (1987), можно проводить формалин-креолиновой эмульсией. СОВРЕМЕННЫЕ ДЕЗИНФЕКТАНТЫ ПРИ ТРИХОФИТИИ
КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Алешкевич В.Н.
кафедра микробиологии и вирусологии У о «вГАвМ»,
витебск
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 14 350
В последние годы разработаны и рекомендованы
для применения в медицине и ветеринарии новые не-
токсичные, экономичные, безвредные дезинфектанты: Сандим-Д, КДП, Фармайод, Моноклавит-1, Глютар, Глютекс, Белстерил, Витан, Бромсепт-50, Аламинол, Пенохлор, Ветоксид и др. Вместе с тем при дермато-фитозах животных в результате высокой устойчивости возбудителя к воздействию физических и химических факторов выбор дезинфицирующих средств ограни-чен.
Материалы и методы. Учитывая вышеизложенное,
целью наших исследований было изучение эффектив-ности некоторых дезинфектантов для проведения де-зинфекции в неблагополучных по трихофитии крупного рогатого скота хозяйствах. Действие дезинфицирующих средств вначале изучали in vitro на культурах возбудите-ле
й трихофитии – Tr. verrucosum и Tr. mentagrophytes, а
также на патологическом материале (волосы, чешуйки, корочки) от больных трихофитией телят в трехкратной повторности. Дезинфектанты испытывали, начиная с низкой концентрации, постепенно переходя к высокой, эк
спозиции – от 1, 2, 3, 4, 6, 12 и 24 часов. После обра-
ботки дезинфектантами грибную массу и другой пато-логический материал отмывали дважды центрифугиро-ванием в изотоническом растворе хлорида натрия при 3000 об/мин в течение 20 минут, а затем высевали на сусло-агар. Контрольные тест-объекты обрабатывали стерильной дистиллированной водой при тех же режи-мах.
Во второй серии опытов дезинфицирующие свойс-
тва наиболее эффективных препаратов, которые, со-гласно наставлений по применению препаратов мож-но использовать в качестве аэрозолей в присутствии животных, «Фармайод», «Сандима-НУК», «КДП», изучали в условиях неблагополучных по трихофитии крупного рогатого скота животноводческих хозяйств. С целью изучения инфицированности объектов вне-шней среды животноводческих помещений, где нахо-дился больной трихофитией крупный рогатый скот в 5-и стационарно неблагополучных по данному заболе-ванию хозяйствах, в животноводческих помещениях были взяты пробы кормов, подстилки, почвы, а также соскобы со стен, металлоконструкций, деревянных ог-раждений и оборудования (всего 284 пробы).
В дальнейшем для изучения дезинфицирующих
свойств вышеуказанных препаратов в хозяйствах Ви-тебского и Лиозненского районов Витебской области в животноводческих помещениях после предваритель-ной механической очистки провели вынужденную аэрозо
льную дезинфекцию 4,5 %-ным раствором фар-
майо
да, 1 %-ными растворами КДП и сандима-НУК
при норме расхода препаратов 10 мл/м3 – 20 мл/м3 с
помощью аэрозольного генератора в присутствии жи-вотных (возраст от 3 до 6 месяцев). Нормы расхода дезинфектантов для проведения аэрозольной дезин-фекции животноводческих помещений взяты в соот-ветствии с действующими наставлениями по примене-нию их в ветеринарии.
Оценку качества дезинфекции проводили согласно
«Методических указаний по контролю качества дезин-фекции объектов подлежащих ветеринарному надзо-ру», утвержденных ГУВ МСХ СССР 1988 г
Результаты исследований и их обсуждение. Иссле-
дованиями установлено, что 15–25-дневные агаровые культуры возбудителей трихофитии погибают после воздействия дезин- фектантов с учетом зависимости и вида препарата, времени контакта и концентрации, что не противоречит общепринятым правилам. Так, 4
%-ный раствор глютара обеспечивал 100 % гибель
трихофитонов при экспозиции 1 час, а 4 %-ные рас-творы натрия гидроксида, TH4+ и Сандима Д только в течении 3 часов.
КДП, Сандим
НУК в 1 %-ной и фармайод в 4,5 %-
ной концетрации в течении 1часа обеспечивали 100 %-ную гибель Tr. verrucosum и Tr. mentagrophytes.
Вместе с тем, возбудители трихофитии находящиеся
в пораженных волосах и чешуйках теряли свою жизне-способность при воздействии таких же концентраций растворов дезинфектантов при удвоенной экспозиции контакта с ними или повышенных концентрациях рас-творов препаратов. Следовательно, трихофитоны на-ходящиеся в патологическом материале, значительнее устойчивы к воздействию дезинфицирующих средств, чем в культуре, что необходимо учитывать при прове-дении дезинфекции.
При микологическом исследовании проб материала,
отобранных с различных объектов внешней среды живот-новодческих помещений, стационарно неблагополучных по трихофитии крупного рогатого скота, в 58 случаях вы-де
лили Тr. verrucosum – 20,4 % из всех исследуемых проб.
Наиболее обсемененными этим грибом оказались соско-бы с кормушек, пола, металлоконструкции и деревянных ограждений, где непосредственно находились больные тр
ихофитией животные. Из этих объектов в 25–40 %
случаев удалось изолировать возбудителя инфекции. При этом следует отметить, что из проб патологическо-го материала отобранных с увлажненных поверхностей различных объектов внешней среды животноводческих помещений рост Тr.verrucosum полностью заглушали пл
есневые грибы (подстилки, почвы и др.). это совпа-
дает с данными В.П. Королевой (1976), Левченко (1987), подтверждающими, что степень устойчивости дермато-фитов обусловливается многими факторами, и, прежде всего влажностью субстратов.
Таким образом, в стационарно неблагополучных
по трихофитии животноводческих хозяйствах (поме-щениях) во внешней среде происходит значительное накопление возбудителя болезни и тем самым созда-ется угроза заражения трихофитией восприимчивого молодняка крупного рогатого скота.
После проведения аэрозольной дезинфекции фар-
майодом, КДП, Сандимом-НУК в присутствии живот-ных в хозяйствах, неблагополучных по трихофитии крупного рогатого скота, её качество было оценено как «хорошее»
– в отобранных пробах стафилококков и
возбудителей трихофитии крупного рогатого скота не выделено, отрицательного влияния препаратов на жи-вотных не выявлено.
Заключение. Объекты внешней среды животно-
водческих хозяйств, неблагополучных по трихофитии
ветеринарная микология 351
крупного рогатого скота, инфицированы патогенными
возбудителями данного заболевания и могут служить факт
орами передачи инфекции. 4,5 %-ный раствор
фармайода, 1 %-ные растворы КДП или сандима-НУК при норме расхода препарата 10 мл/м3 – 20 мл/м3 яв-ляются эффективными препаратами для дезинфекции животноводческих помещений при трихофитии круп-ного рогатого скота и позволяют проводить обработку в присутствии животных, что дает возможность вести борьбу с возбудителями в зимний период, при этом са-нировать волосяной покров животных, предотвращая их миконосительство.
ВЛИЯНИЕ МОНАКОЛИНА К (ЛОВАСТАТИНА) НА СОБСТВЕННЫЙ
ПРОДУЦЕНТ – МИКРОМИЦЕТ aSPerGilluS TerreuS
Баранова Н.А., Крейер В.Г., Егоров Н.С.
Биол
огический факультет МГУ им. М.в. ломоносова,
Москва
Мицелиальные грибы в процессе роста и развития
синтезируют различные циклические соединения из ацетил-КоА на пути поликетидного синтеза.
Микромицет asper
gillus terreus образует ряд цик-
лических соединений с различной биологической ак-тивностью. Среди них антибиотики цитринин, эмодин, гео
дин; ингибитор прорастания пыльцы – сулохрин;
аутоиндуктор – бутиролактон I; конкурентный инги-битор фермента гидрокси-метилглутарил-КоА-редук-тазы
(ГМГ-КоА-редуктазы) – статин монаколин К (ло-
вастатин) и ряд других веществ.
Монаколин К ингибирует превращение гидрокси-
метилглут
арил-КоА в мевалоновую кислоту – пред-
шественник убихинонов, долихола и стеролов.
Действие монаколина К на животных и человека
хорошо изучено и показано, что это соединение су-щественно снижает содержание общего холестерина в сыворотке крови, а также холестерина липопротеидов низкой плотности (ЛНП) и повышает содержание хо-лестерина липопротеидов высокой плотности (ЛВП). На основе монаколина К создан препарат «Мевакор», применяемый для лечения и профилактики атероскле-роза.
Данных о влиянии монаколина К на мицелиальные
грибы и, в частности, на сам продуцент крайне мало (Timothy G. Sch. et al., 1998).Нами было изучено действие монаколина К на рост,
образование эргостерина и вторичных метаболитов микромицетом a.
terreus шт.35, МГУ – продуцентом
монаколина К.
Монаколин К добавляли в среду культивирования
вместе с посевным материалом в количестве от 0,5 до 5,0 мкг/мл. Из полученных результатов следует, что A. terreus шт.35, МГУ в данных условиях культиви-рования устойчив к ингибитору. Монаколин К в ис-пытанных концентрациях не подавлял рост гриба, а биосинте
з эргостерина ингибировал всего на 30 % в
концентрации 5,0 мкг/мл.
Показано, что устойчивость микромицета a. ter-
reus шт.35, МГУ к монаколину К в 20 раз выше, чем у дрожжей rhodotorula
rubra ВКПМ Y 1337 (Баранова и
др., 1996).
Однако, монаколин К существенно влияет на ка-
чественный и количественный состав синтезируемых A.terreus вторичных метаболитов при добавлении ин-гибитора в среду в начале логарифмической фазы рос-та гриба.
Доза ингибитора, вызывающая изменения качес-
твенного и количественного состава синтезируемых вторичных метаболитов определяется условиями куль-тивирования продуцента и, в конечном итоге, зависит от скорости роста микромицета.
ГРИБЫ С (ИЗ) ОПУХОЛЕЙ У ГОЛЬЯНА pHOXINUs pHOXINUs (L.)
Доровских Г.Н., Шергина Н.Н., Поминова А.В.
ГоУ в
По «Сыктывкарский государственный университет»,
Сыктывкар
Сапротрофные грибы, развивающиеся в слизи рыб,
могут поражать ослабленных особей (Воронин, 1989), часто проникая в их организм через повреждения пок-ровов (Чернышева, Воронин, 2002). Так гифомицеты неоднократно обнаруживали в опухолях и гранулемах рыб (Нейш, Хьюз, 1984).
При изучении ихтиопаразитофауны бассейнов рек
Вычегда, Печора и Илыч встречены экземпляры голь-яна с опухолями на разных частях тела. Они представ-ляли собой эпителиоподобный вариант пигментной меланомы, с поверхности и содержимого которых вы-делены изоляты Mycelia sterilia (Доровских и др., 2007 а, б).
Цель рабо
ты – изучение состава микромицетов,
выделенных с (из) опухолей у гольяна, обитающего в водотоках бассейнов рек Вычегда, Печора, Илыч.
Рыбу с опухолями отлавливали из бассейнов верх-
него течения р. Печоры (рр. Гаревка, Кедровка, Шай-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 14 352
тановка, Б. Порожняя и старицы Кременная) в июне-
июле 2006–2007 гг.; р. Илыч (рр. Кожимью, Укью) в июле-августе 2006–2007 гг.; р. Вычегды (р. Човью у г. Сыктывкара в микрорайоне В. Чов) в июне-октябре 2005 г. и в апреле-сентябре 2006 –2007 гг. Микроми-цеты выделены с (из) опухолей половозрелых особей гольяна. Пробы грибов, полученные методами соско-бов и отпечатков с поверхности опухолей и взятые асептически из их внутреннего содержимого, высева-ли на поверхность агаризованных питательных сред Чапека, Сабуро с дрожжевым экстрактом, сусла (2–3° по Баллингу). Для подавления развития бактерий в пи-тательную среду добавляли стрептомицина сульфат и бензилпенициллина калиевую соль (1 г/л среды).
Выделено более 70 штаммов микромицетов, кото-
рые представлены 9 видами, локализующимися на по-верхности опухолей и в их содержимом. При этом с (из) каждой опухоли всегда выделяли только один вид гри-ба. В большинстве случаев встречались виды митоспо-ровых грибов из классов Hyphomycetes (
fusarium solani
(Martius) Saccardo, fusarium oxysporum Schlechtendal:
fries, penicillium sp., penicillium verrucosum Dierckx
var. cyclopium, Trichoderma viride persoon: fries) и
agnomycetes (Mycelia sterilia), а также представители
от
дела zygomycota (сем. Mucoraceae; Mucor hiemalis
Wehmer var. Hiemalis) и дрожжей (Rhodotorula aurantiaca (Saito) Lodder
. – представитель базидиомицетного аф-
финитета и Aureobasidium pullulans (de Bary) Arnaud var.
melanigenum Hermanides-Nijhof – представитель
класса euascomycetes ).
Штаммы Mycelia sterilia выделены из опухолей
у рыб всех исследованных водотоков. Они имеют хорошо развитый мицелий без органов спороноше-ния, но морфологические и культуральные признаки штаммов сильно варьировали, что позволило сделать предположение об их принадлежности к разным ви-дам. Наибольшее количество видов микромицетов выделено из
опухолей рыб из р. Човью. это fusarium
oxysporum, Mucor hiemalis var. hiemalis, penicillium sp.,
Rhodotorula aurantiaca, Trichoderma viride. Только в со-держимом опухолей у рыб из из р. Кедровка отмечен Aureobasidium pullulans var. melanigenum, из р. Гарев-ка
– penicillium verrucosum var. cyclopium, в содержи-
мом опухолей рыб из обоих этих водотоков зарегист-рирован
fusarium solani.
При окраске гистологических срезов опухолей на
присутствие гифов грибов, последние не обнаружены. Поэтому выделение микромицетов из опухолей не мо-жет быть доказательством того, что грибы являются причиной развития опухолей. Они могут развиваться и на сформировавшихся новообразованиях.
Среди обнаруженных видов грибов облигат-
ные паразиты рыб отсутствуют, но встречены виды (Rhodotorula aurantiaca, f
usarium solani, fusarium
oxysporum), являющиеся условно патогенными и по-тенциально опасными для рыб.
ПРОБЛЕМЫ ИЗУЧЕНИЯ СИСТЕМНЫХ МИКОЗОВ У РЫБ
Карасева Т.А.
Полярный научно-исследовательский институт
морского рыбного х
озяйства и океанографии им. Н.М. книповича,
Мурманск
Известно, что патогенные и условно-патогенные
грибы оказывают негативное влияние на диких и куль-тивируемых рыб, зачастую вызывают гибель поражен-ных особей и изменяют структуру естественных попу-ляций. Системные микозы, при которых возбудитель циркулирует в кровеносной системе, поражая все ор-ганы и ткани, занимают особое место среди инфекци-онных болезней рыб. Они характеризуются широким распространением, периодическими вспышками с вы-сокой смертностью рыб, специфическим воспалением, токсикозом и слабо изученной этиологией.
В настоящем докладе представлены эпизоотологи-
ческие и диагностические данные, полученные нами при изучении микозов у атлантическо-скандинавской сельди (clupea
harengus), трески (Gadus morhua), пик-
ши (melanogrammus aegflefinus ) атлантического лосо-
ся (Salmo salar), радужной форели (Pаrasalmo mykiss), сига (cor
egonus lavaretus) и других рыб.
Ярким примером системного микоза является их-
тиофоноз, который вызывается патогенным грибом ichthyophonus
hoferi Plehn & mulsow 1911. этой бо-
лезни подвержены более 80 видов рыб. Впервые их-тиофоноз был описан в конце 19 века, но до сих пор таксономическое положение возбудителя не установ-лено. Считается, что i.
hoferi относится к энтомофто-
ровым грибам, но убедительные доказательства этому отсутствуют. В тканях сельди гриб находится в виде спор диаметром до 200 мкм и гифальных тел, окру-женных фиброзной капсулой. При культивировании отличается высоким плеоморфизмом в зависимости от условий и не образует репродуктивных структур. Поэтому наиболее надежными методами диагностики ихтиофоноза остаются микроскопия влажных мазков из тканей и анализ гистологических срезов внутрен-них органов рыб.
В последние годы нами изучается другой микоз не-
известной этиологии, который впервые был обнаружен в 2000 г. у половозрелой трески и пикши в Баренцевом море. На сегодняшний день установлено, что болеют 11 видов морских промысловых и 6 видов пресновод-ных и проходных рыб Кольского полуострова. Специ-фическими симптомами болезни являются патологии глаз, опухоли головы и деформация черепа. Заболева-емость трески, пикши и путассу на стадии катаракты
ветеринарная микология 353
(по визуальной оценке) в среднем составляет 22 %.
это является высоким уровнем заболеваемости для естественных популяций, который свидетельствует об эпизоотии в Баренцевом море. В гистологических сре-зах глаз, гриб представлен преимущественно гифами шириной около 1 мкм, образующих тонкую сетчатую структуру между клетками, и мелкими спорами с плот-ным красноватым ядром. Во влажных мазках из голо-вного мозга и жировой ткани глаза у лососевых рыб он определяется также в виде крупных толстостенных спор, по морфологии практически не отличимых от спор I. hoferi, что позволяет предполагать близкое сис-тематическое положение возбудителей ихтиофоноза и нового микоза. Попытки выделить и идентифициро-вать возбудителя болезни были не удачными, посколь-ку на богатых средах гриб растет в дрожжевой форме, а на
бедных средах – образует дегенеративный мице-
лий и хламидоспоры.
Таким образом, главной проблемой, которая возни-
кает при изучении системных микозов у рыб, являет-ся выделение возбудителя в морфологической форме, приемлемой для классификации. Без убедительной идентификации патогенных организмов вне поля зрения остаются такие важные аспекты, как экологи-ческие особенности и взаимосвязи грибов, причины и условия возникновения эпизоотий, пути передачи инфекции, что, в свою очередь, осложняет оценку чис-ленности пораженных популяций рыб и безопасности рыбного сырья для человека и теплокровных живот-ных.
ПРОБЛЕМА БЕССИМПТОМНОГО МИКОНОСИТЕЛЬСТВА У ДОМАШНИХ
ЖИВОТНЫХ, Её СОЦИАЛЬНАЯ ЗНА ЧИМОСТЬ И ПУТИ РЕШЕНИЯ
Маноян М.Г., Овчинников Р.С., Панин А.Н.
ФГУ в
ГНкИ,
Москва
Домашние животные являются основным резерву-
аром грибов-дерматофитов и источником заражения для человека, что обуславливает тесную взаимосвязь заболеваемости дерматофитозами среди людей и жи-вотных. Зоофильные виды дерматофитов во многих странах в настоящее время доминируют в этиологи-ческой структуре дерматофитозов человека (I. Taka-hashi, 2003, В. Яцуха, 2003, M. Lange et al., 2004, Ш. Хамидов, 2006). Выявление и нейтрализация путей распространения дерматофитозов, общих для челове-ка и животных, является важной социально-значимой задачей медицинских и ветеринарных служб.
Заражение человека дерматофитозами может осу-
ществляться при непосредственных контактах с боль-ными людьми, через инфицированные возбудителем объекты внешней среды, предметы быта и обихода, однако основным вектором распространения заболе-вания являются домашние (синантропные) животные (I. Weitzman et al., 1995). При этом угрозу могут пред-ставлять не только больные животные с клинически выраженным дерматофитозом. Резервуаром возбуди-теля являются также животные-миконосители, чей кожный покров контаминирован покоящимися пропа-гулами грибов-дерматофитов. Различные виды живот-ных могут являться носителями зооантропофильных дерматофитов (micr
osporum canis, Trichophyton menta-
grophytes, T. verrucosum), геофильных ( m. gypseum), а
в ряде
случаев – антропофильного возбудителя T. ru-
brum ( k . Moriello et al., 1991).
Бессимптомное миконосительство регистрирует-
ся у многих видов домашних животных, а масштабы его распространенности носят массовый характер. По данным зарубежных авторов, количество животных-ми
коносителей среди кошек достигает 75–88 %, среди
собак – 36–66 %, среди кроликов, грызунов – 26–61 %, среди крупного рогатого скота – 59 % (G. Caretta et al.,
1989, M. Ali-Stayeh et al., 1988, M. Sympania et al., 1996, M. Gallo et al., 2005, M. Otcenasek et al., 1980). Распро-странению миконосительства способствуют контакты с бродячими животными, неудовлетворительные сани-тарные условия содержания, скученное содержание жи-вотных (в питомниках, у заводчиков и т.п.) Большинство домашних животных потенциально подвержено риску вовлечения в бессимптомное миконосительство.
Животное может оставаться бессимптомным мико-
носителем неопределенно долгое время, не проявляя клинических признаков заболевания, однако представ-ляя опасность для заражения других животных и чело-века. Кроме того, животные-миконосители являются источником контаминации внешней среды, помещений и предметов обихода, а также воздуха, создавая тем са-мым очаг забо
левания. Люди, контактирующие с
животными-миконосителями (владельцы домашних животных, обслуживающий персонал конюшен, зве-роводческих и сельскохозяйственных предприятий) подвергаются постоянному риску заражения дерма-тофитозом. Наибольшую эпидемическую опасность представляют животные-миконосители, с которыми конт
актирует широкий круг лиц – например, лошади
в конно-спортивных клубах, животные в «живых угол-ках» детских дошкольных учреждений и т.п. Именно дети наиболее подвержены риску заражения дермато-фитозами при контактах с домашними животными (W. Beck, 1998).
В отличии от клинически выраженного дермато-
фитоза, бессимптомное миконосительство может быть диагностировано только путем лабораторного миколо-гического анализа образцов шерстного покрова живот-ного (по мет
оду Mckenzie или аналогичному). Однако
такие анализы в повседневной практике проводятся
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 14 354
крайне редко, и как правило лишь в тех случаях, ког-
да в семье, где содержится животное, уже диагности-рован дерматофитоз у одного из членов (П.Г. Богуш, В.М. Лещенко, 2004). С профилактической целью ана-лизы на выявление бессимптомного миконосительства у животных практически не проводятся.
Проблематичной является также и терапия бессим-
птомного миконосительства. Существующие вакцины против дерматофитозов создают у животных устойчи-вость к заболеванию, однако они не способны предо-твратить
возникновение миконосительства. элими-
нация спор грибов-дерматофитов с кожного покрова может быть достигнута путем обработки всей поверх-ности тела животного антифунгальными препаратами в форме шампуней, гелей, однако в ветеринарии ощу-щается острый дефицит подобных средств. Терапия должна сопровождаться мероприятиями по дезинфек-ции помещения, где содержится животное, предметов домашнего обихода, зооинвентаря.
Обеспечение эпидемиологического благополучия
населения по дерматофитозам невозможно без при-нятия комплексных мер по борьбе с бессимптомным миконосительством у животных. Первостепенное значение в этом аспекте имеют профилактические ме-роприятия, направленные на пресечение возможных путей распространения миконосительства. Целесооб-разно введение обязательного микологического конт-роля животных на миконосительство при проведении кинологических и фелинологических выставок (где чаще всего происходит инфицирование животных), при межрегиональных перевозках, при продаже жи-вотных через зоомагазины, клубы и питомники. Так-же аналогичный контроль необходим для животных, содержащихся на базе спортивных, образовательных, развлекательных и иных учреждений, где предполага-ется регулярный контакт животных и людей.
Существующая в настоящее время система «вете-
ринарных паспортов» не предусматривает контроль микологического статуса животного, что на наш взгляд является серьезным упущением. В результате даже животные, приобретаемые через специализирован-ные клубы и имеющие все необходимые ветеринарные свидетельства, могут являться источником заражения дерматофитозами для своих владельцев и членов их семей (В. Рукавишникова, 2006).
Внедрение «микологических сертификатов» (в до-
полнение к существующим ветеринарным паспортам), предусматривающих периодические освидетельство-вания животных на наличие миконосительства, могло бы стать эффективным методом пресечения распро-странения дерматофитозов среди людей и животных.
Важную роль играет информационно-разъясни-
тельная работа с владельцами животных в области микологических факторов риска. Такая работа может проводиться как через СМИ, так и через органы меди-цинских и ветеринарных служб. Как показывает опыт медицинских микологов в данной области (проекты «Горячая линия», Gribok.ru), информационные тех-нологии способны принести существенную пользу в борьбе с социально-значимыми микотическими забо-леваниями.
Проблема бессимптомного миконосительства жи-
вотных заслуживает самого пристального внимания, как один из важнейших векторов распространения де-рматофитозов. Для решения этой социально-значимой проблемы большое значение имеет взаимодействие научных организаций, медицинских и ветеринарных служб, представителей административных структур.
СОВРЕМЕННЫЕ СРЕДСТВА СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ
И ТЕР АПИИ ДЕРМАТОФИТОЗОВ ЖИВОТНЫХ
Маноян М.Г., Панин А.Н., Овчинников Р.С.
ФГУ в
ГНкИ,
Москва
Борьба с дерматофитозами животных является од-
ной из приоритетных задач ветеринарной микологии. Она актуальна как с точки зрения обеспечения здоро-вья животных, так и с медицинской точки зрения, учи-тывая роль животных в эпидемиологии дерматофито-зов человека.
К дерматофитозам восприимчивы практически все
виды домашних животных, и распространенность этих заболеваний по-прежнему остается на высоком уров-не. эт
ому способствуют высокая контагиозность забо-
левания, способность возбудителя длительное время сохраняться во внешней среде, нестабильная, измен-чивая этиологическая структура дерматофитозов.
Как и при других инфекционных заболеваниях,
при дерматофитозах наиболее эффективным способом борьбы является специфическая профилактика. Ее осу-ществление стало возможно лишь после изобретения отечественными учеными под руководством академика А.Х. Саркисова первой эффективной живой вакцины пр
отив трихофитии – ЛТФ-130, открывшей новую эру в
борьбе с дерматофитозами. Результаты внедрения дан-ной вакцины неоспоримо продемонстрировали ее эф-фективность как при профилактике, так и при терапии заболевания. Вакцина ЛТФ-130, начиная с 70-х гг. про-шлого века и по настоящее время с успехом использует-ся для профилактики и терапии трихофитии крупного рогатого скота не только в России, но и за рубежом.
Создание вакцины ЛТФ-130 заложило принципы,
в соответствии с которыми в дальнейшем были созда-ны живые моно-вакцины против дерматофитозов раз-личных видов
животных – лошадей, пушных зверей,
верблюдов, овец. Длительное время они находились в
ветеринарная микология 355
арсенале ветеринарной службы. Однако в настоящее
время их место заняли ассоциированные вакцины, включающие антигены нескольких видов дермато-фитов, и обеспечивающие иммунитет к нескольким возбудителям. Таким образом, одна ассоциированная вакцина может использоваться для профилактики и те-рапии дерматофитозов нескольких видов животных.
На сегодняшний день в ветеринарной практике с
успехом применяются живые ассоциированные вакци-ны Вермет против дерматофитозов сельскохозяйствен-ных животных, Микродерм против дерматофитозов кошек, собак, пушных зверей, кроликов, нутрий. На стадии
внедрения находится вакцина эквивак против
дерматофитозов лошадей, сконструированная с учетом разнородной этиологической структуры заболевания. Для профилактики и терапии трихофитии крупного рогатого скота в настоящее время, наряду с ЛТФ-130, применяется вакцина Трихостав.
В последние годы в производство живых вакцин
против дерматофитозов стали внедряться новые тех-нологии, призванные повысить стабильность и качес-тво биопрепаратов. Так, технология поддержания и использования вакцинных штаммов грибов «Master & working seed lot system» уже используется при про-изводстве вакцин ЛТФ-130, Микродерм. Внедрение новых технологий, соблюдение высоких производс-твенных стандартов позволило этим отечественным вакцинам официально выйти на международный ры-нок.
Параллельно с созданием живых вакцин, как в Рос-
сии, так и за рубежом разрабатывались инактивиро-ванные препараты против дерматофитозов животных различных видов. В настоящее время в нашей стране аттестованы для применения в ветеринарной практике вакцины Вакдерм, Поливак-ТМ, а также Мультикан-7. Вопрос о сравнительной эффективности живых и ина-ктивированных вакцин остается спорным, имеющие-ся литературные данные довольно противоречивы. С одной стороны, инактивированные препараты полно-стью исключают перенос клеток дерматофита во вне-шнюю среду. Вместе с тем методы, используемые для инактивации клеток грибов (физические, химические) приводят к существенному снижению иммуногенной активности. Живые клетки грибов в свою очередь яв-ляются полноценными антигенами, и обуславливают формирование напряженного и длительного иммуни-тета, и обладают выраженным терапевтическим эф-фектом. Аттенуированные штаммы, используемые для изготовления вакцин, являются авирулентными и не способны вызвать патологический процесс даже при попадании на ко
жу животного.
Следует заметить, что наряду с сертифицирован-
ными препаратами, в отдельных случаях в торговой сети встречаются вакцины, не имеющие необходимых государственных сертификатов соответствия. Такие препараты не являются официально зарегистрирован-ными, они не проходят обязательный государственный контроль качества, и их применение может быть связа-но с риском для здоровья животного.
Иммунобиологические препараты (живые и инак-
тивированные вакцины) являются на сегодня основ-ным средством профилактики и терапии дерматофи-тозов животных. Однако для достижения наибольшего эффекта от их применения необходимо восстановление системы массовой вакцинации домашних животных, повышение санитарно-гигиенической грамотности населения, расширение арсенала фармацевтических антимикотиков и дезинфицирующих средств.
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАР АТА НУКЛЕВИТ НА ОРГАНИЗМ РЫБ
Мясоедов А.В., Ханис А.Ю.
ве
тзвероцентр,
Москва
В настоящее время, на фоне осложнения общей
экологической обстановки, а также частого отсутствия достаточного количества сбалансированных доброка-чественных кормов ухудшается общее физиологичес-кое состояние организма выращиваемых рыб, что не-гативно влияет на иммунную систему и способствует возникновению заболеваний инфекционной, инвази-онной, алиментарной и полиэтиологической природы. Поэтому в современном рыбоводстве проблема охра-ны здоровья рыб остается актуальной.
В первую очередь профилактические мероприятия
должны быть направлены на оптимизацию экосистем водоемов, применение качественных кормов и соб-людение элементарных ветеринарно-санитарных тре-бований. Однако для создания полноценных условий содержания рыб этого бывает недостаточно, так как, при постоянно возрастающей антигенной нагрузке на организм рыб и ухудшающейся экологической ситуа-ции, особое место занимают вопросы регуляции меха-низмов иммунологической защиты.
Целью наших исследований было изучение дейс-
твия иммуномодулятора нуклевит, изготавливаемо-го на основе натриевой соли низкомоллекулярной дрожжевой РНК гриба Sacсharomyces cerevisiae, на организм рыб при энтеральном способе применения препарата совместно с кормом. Исследования были проведены на базе аквариальной кафедры болезней мелких животных и птиц Витебской ГАВМ.
В качестве экспериментальной модели использова-
ли карп-сеголеток (0+), живой массой 45–50 г, которых содержали в стеклянных аквариумах емкостью 180 лит-ров, в количестве по 50 экземпляров в каждой группе. Температуру воды в течение всего эксперимента подде-рж
ивали в пределах 18–20 °С, аэрацию осуществляли с
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 14 356
помощью типовых аквариумных компрессоров марки
«Скалярия». Очистку аквариумов и доливку свежей воды, проводили ежедневно. Кормление рыб контроль-ной группы проводили базовым кормом ОСТ-5, пред-варительно увлажненным дистиллированной водой с по
следующим подсушиванием при температуре 60 °С
в течение суток. Кормление рыбы опытной группы осуществляли изучаемым лечебно-профилактическим кормом, приготовленным путем увлажнения базового корма ОСТ-5 иммуномодулятором нуклевит, с последу-ющим подсушиванием. После подсушивания, корм для опытной и контрольной групп измельчали на ручной мельнице с последующим просеиванием до получения крупки размером около 2 мм в диаметре.
Рыбу контрольной и опытной групп кормили еже-
дневно, двукратно, в течении 24 дней.
На завершающей стадии эксперимента, было про-
ведено взвешивание всех особей контрольной и опыт-ной групп, а также от них была взята кровь для прове-дения биохимических исследований.
Результаты опыта показали, что за 24 дня экспери-
мента вес рыбы опытной группы повысился на 35–40 г., тогда как вес рыбы контрольной группы всего на 20–25 г. Показатели взвешивания рыбы в опытной группе сост
авляли 85–90 г., а в контрольной – 65–70 г.
Результаты биохимических исследований сыворот-
ки крови показали, что средняя величина общего белка у
карпа опытной группы была выше на 25 %, чем в сы-
воротке крови карпа контрольной группы, и составляла 35,8 г/л и 26,6 г/л, соответственно. В опытной группе также значительно были выше средние показатели со-держания гамма-глобулина, которые при пересчете на натуральные величины составляли 12,9 г/л. В сыворот-ке крови карпа контрольной группы среднее содержа-ние гамма-глобулинов составляло 7,2 г/л т.е. в 1,8 раз ниже.
Таким образом, экспериментально установлено,
что иммуномодулятор нуклевит при пероральном при-менении способствовал значительному увеличению привесов подопытной рыбы, а также повышению в сыворотке крови карпа уровня белка и гамма-глобули-на, свидетельствующего об активном стимулирующем воздействии препарата на организм рыбы и повыше-нию его защитных функций.
ВОЗР АСТАЮЩАЯ ЗНА ЧИМОСТЬ ГРИБОВ-ОППОРТУНИСТОВ
В эТИОЛОГИИ МИКОЗОВ ЖИВОТНЫХ
Овчинников Р.С.2, Маноян М.Г.2, Ершов П.П.1, Гайнуллина А.Г.2
1 ФГ оУ вПо МГАвМиБ им. к.И. Скрябина,
2 ФГУ вГНкИ,
Москва
Оппортунистические микозы (ОМ), вызываемые
потенциально-патогенными грибами на фоне сниже-ния резистентности организма, активно заявили о себе в ветеринарной практике в течение последних 10 лет. Вероятно, этому способствовали ухудшающиеся эко-логические условия, климатические изменения, мас-совый переход на кормление животных готовыми кор-мами, распространение пород животных с врожденной иммуносупрессией, широкое и не всегда оправданное применение антибиотиков в ветеринарии. Клинические проявления, этиологическая структура оппортунисти-ческих микозов, особенности диагностики и терапии существенно отличаются от таковых при «классичес-ких» микозах, что требует соответствующего подхода со стороны ветеринарных специалистов.
Клинические формы ОМ животных варьируют в
широких пределах, и могут проявляться как локализо-ванные или генерализованные кожные поражения, по-ражения органов слуха, слизистых оболочек, внутрен-них органов,
а в отдельных случаях – как системные
поражения (R. Welsh et al., 1999).
этио
логическая структура оппортунистических
микозов, по сравнению с «классическими» микозами гораз
до более разнообразна – в качестве возбудителей
могут выступать различные виды почвенных, фитопа-тогенных, сапротрофных грибов и грибов-комменса-лов из различных систематических групп. Не являясь специализированными патогенами, они способны вы-зывать патологический процесс на фоне определенных предрасполагающих факторов.
Возбудители ОМ представлены как мицелиальными
(«плесневыми»), так и дрожжевыми грибами. Мицели-альные грибы, в зависимости от наличия у них пигмен-та, подразделяют на гиалогифомицеты (неокрашенные и светлоокрашенные виды) и феогифомицеты (темно-окрашенные виды). В наших исследованиях в качестве возбудителей ОМ животных диагностированы гиало-гифомицеты родов asp
ergillus, acremonium, Fusarium,
Scopulariopsis, Scedosporium, Paecilomyces, Trichotecium, bea
uveria, wardomyces ; феогифомицеты родов alt ernaria,
cladosporium, ulocladium, doratomyces, chaetomiun,
Scytalidium, Phoma, aureobasidium. Среди дрожжевых
грибов, выделенных нами от животных, фигурировали представители родов can
dida, cryptococcus, malassezia,
rhodotorula, Geotrichum, Trichosporon .
При диагностике ОМ необходимо учитывать, что
грибы-оппортунисты широко распространены во вне-шней среде, на кожном покрове животных в качестве контаминантов. Исходя из этого, во избежание ложно-положительного диагноза, оценка клинической роли обнаруженного гриба должна проводиться с осторож-ностью, на основании соответствующих диагности-
ветеринарная микология 357
ческих критериев. Одним из таких критериев является
обнаружение в патматериале вегетирующих гиф гри-ба-оппортуниста (A. Gupta et al. , 2001). Однако если с обнаружением грибов-дерматофитов как правило не возникает трудностей, то «атипичные» элементы оп-портунистических патогенов в препарате часто оста-ются необнаруженными, или неправильно интерпре-тированными.
Как правило, в лабораторной диагностике мико-
зов используются питательные среды с селективными добавками для выделения дерматофитов. Рост боль-шинства других грибов, в т.ч. оппортунистических патогенов, на таких средах ингибируется. Исходя из этого, при диагностике ОМ для культурального ми-кологического анализа целесообразно использовать несколько сред, позволяющих выделять как дерма-тофиты, так и недерматофитные грибы и дрожжи. Важным этапом лабораторной диагностики является определение чувствительности выделенной культуры возбудителя к набору антифунгальных препаратов, что позволит выбрать оптимальное средство терапии ОМ. Успех терапии зависит также от выявления и устране-ния сопутствующих заболеваний и(или) других пред-располагающих факторов.
Доля грибов-оппортунистов в этиологии поверхнос-
тных заболеваний животных, их соотношение с дерма-тофитами, варьирует у различных видов животных. По результатам микологических исследований, проведен-ных в Отделе ветеринарной микологии ФГУ ВГНКИ, у
кошек встречаемость ОМ составила 4 % (дерматофи-
то
зы – 49 %), у пушных зверей (песцы, норки) – 1 %
(дерматофитозы – 72 %), у собак – 35 % (дерматофито-
зы –
11 %), у лошадей – 44 % (дерматофитозы – 23 %), у
рептилий – 85 % (дерматофитозы не диагностированы).
Таким образом, у определенных видов животных (соба-ки, лошади, и особенно рептилии), грибы-оппортунис-ты играют гораздо более существенную роль в этиоло-гии микозов, нежели дерматофиты.
Отдельную группу ОМ представляют заболевания,
вызываемые липофильными дрожжевыми грибами рода malassezia
. этиологическая роль этих грибов в
заболеваниях животных установлена относительно недавно
(v. Sanguenti et al., 1984, E. Cuttin et al., 1985),
однако на сегодня malassezia -инфекции представляют
весьма существенную проблему в ветеринарной мико-логии. Как и другие грибы-оппортунисты, представи-тели рода malassezia
не являются «истинными» пато-
генами, и обитают на кожном покрове многих видов млекопитающих в качестве комменсалов. При возник-новении патологического процесса наблюдается мно-гократное увеличение плотности популяции грибов в очаге поражения, однако точные механизмы патогене-за этих заболеваний окончательно не установлены (J. Guillot et al., 1999).
Для malassezia
-инфекций наиболее характерной
является локализация в слуховом канале ( malassezia –
отиты). malassezia -дерматиты чаще локализуются в
области губ, в межпальцевых пространствах, в пахо-вой области. Во многих случаях malassezia
-дерматиты
распространяются на значительную площадь поверх-ности тела. malassezia
-инфекции носят хронический
характер, как правило сопровождаются интенсивным зудом, причиняя животным болезненность и диском-форт. Лабораторная диагностика malassezia-
инфекций
имеет ряд существенных особенностей, обусловлен-ных липофильными свойствами возбудителей, их низ-кой жизнеспособностью во внешней среде, прихотли-востью при культивировании in vitro.
Malassezia-инфекции диагностированы у многих
видов домашних животных, однако в наибольшей сте-пени им подвержены собаки. По нашим данным, эти-ологическая роль грибов рода Malassezia при отитах у собак со
ставляет 80 %, при дерматитах у собак – 14 %,
при отитах у кошек – 11 %. В качестве основного воз-будителя в наших исследованиях был диагностирован вид M. pachydermatis, причем во многих случаях он обнару
живался в ассоциации с бактериями, реже – с
мицелиальными грибами.
Очевидно, что микозы животных, вызываемые гри-
бами-оппортунистами, приобретают существенную значимость в ветеринарной микологической практике. Однако ввиду недостаточной информированности ве-теринарных специалистов в этой области, слабой ос-вещенности вопроса в научной и учебной литературе, диагностика и терапия оппортунистических микозов не всегда осуществляется должным образом. В этой связи практическую пользу могут принести выпуск соответствующих методических рекомендаций и посо-бий, организация практических тренингов для специа-листов ветеринарных диагностических лабораторий.
МИКОТИЧЕСКИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ эКЗОТИЧЕСКИХ ПРЕСМЫКАЮЩИХСЯ,
СОДЕРЖАЩИХСЯ В ДОМАШНИХ УСЛОВИЯХ
Овчинников Р.С., Маноян М.Г., Гайнуллина А.Г.
ФГУ в
ГНкИ,
Москва
экзотические пресмыкающиеся (ящерицы, змеи,
черепахи) в последние годы становятся все более по-пулярными в качестве домашних животных. Многие владельцы, не имея достаточного опыта, не могут обеспечить адекватные условия содержания и корм-ления для своих экзотических питомцев. Часто это приводит к снижению естественной резистентности организма животных, и, как следствие, к развитию инфекционных и паразитарных заболеваний.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 14 358
Холоднокровные животные, в отличие от млекопи-
тающих и птиц, в силу своих физиологических осо-
бенностей имеют естественную предрасположенность к микотическим заболеваниям (A. Casadevall, 2005). При этом в качестве возбудителей выступают в ос-новном убиквитарные виды грибов, не обладающие специализированными факторами вирулентности (та-кими как термотолерантность). Микозы у пресмыкаю-щихся, начинающиеся как правило с инфицирования кожного покрова, впоследствии могут распростра-няться на внутренние ткани и органы, трансформиру-ясь в
фатальные системные поражения (J. pare et al.,
1997, A. Thomas et al., 2002 и др.) Диагностика данных заболеваний осложняется отсутствием характерных клинических предикторов, необходимостью детально-го микологического исследования, широким видовым разнообразием грибов-возбудителей. Важным этапом лабораторного исследования является определение чувствительности выделенной культуры возбудителя к набору антимикотиков, что позволяет выбрать опти-мальное средство терапии.
Нами был проведен микологический анализ патма-
териала, отобранного от 28 пресмыкающихся с пора-жениями как поверхностной, так и глубокой локали-зации. Животные были представлены видами: зеленая игуана (iguana
iguana) – 10 особей; черепаха красно-
ухая ( Trachemys scripta elegans ) – 3, хамелеон ковро-
вый (chameleon lateralis) – 1; хамелеон европейский
(chameleon chamaleo) – 1; хамелеон леопардовый
(chameleon pardalis) – 1; черепаха среднеазиатская
(agr onemis horsfeeldii ) – 2; черепаха трионикс ( Trionyx
chinesis) – 1; черепаха каспийская ( clemmys caspiсa) –
1; ящерица плащеносная (chlamidosaurus kingi ) – 1;
змея молочная ( lampr opeltis triangulum annulata) – 1;
варан среднеазиатский ( Varanus griseus) – 1; геккон
толстохвостый (Hemitheconyx caudiscinctus ) – 1; сцинк
синеязыкий (Tiliqua scincoides) – 1; бородатая агама (pogona vitticeps) – 1; шипохвост – (Uromastyx) – 1; змея листоносая (phyllorhynchus browni) – 1. Мико-логический анализ включал микроскопию препаратов патматериала в КОН, посев образцов на селектив-ные питательные среды, идентификацию выделен-ных культур в соответствии с атласом G. De Hoog et al. (2000), и определение чувствительности изолятов к набору антифунгальных препаратов (амфотерицин В, нистатин, клотримазол, флуконазол, кетоконазол) диско-диф
фузионным методом. этиологическую роль
гриба подтверждали при обнаружении в патматериале вегетирующих грибных гиф, и выделении нескольких однотипных культур, морфологически соответствую-щих грибным элементам в патматериале.
В результате исследования микозы были диагнос-
тированы
в 24 из 28 случаев (85,7 %). Выделены грибы
17 различных видов. В 3-х случаях заболевания были вызваны кератинофильным видом Chrysosporium-ана-морфа Nannizziopsis vriesii (сквамозные дерматиты у 2-х зеленых игуан и боро
датой агамы). В осталь-
ных случаях от животных были выделены потенциаль-но-пат
огенные грибы следующих видов: penicillium
chrysogenum (4 случая) – диагностирован при систем-ном летальном микозе у 2-х зеленых игуан, при сухом некрозе пальцев у синеязыкого сцинка, при рассло-ении панциря у красноухой черепахи. Chaetomium globosum выделен в 2-х случаях из кожных поражений у мо
лочной змеи и красноухой черепахи. fusarium
moniliforme выделен в 2-х случаях: из некротического поражения у красноухой черепахи и некротического поражения у плащеносной ящерицы, впоследствии трансформировавшегося в фатальный системный ми-коз. Cryptococcus ater (1) выделен при сквамозном де-рматите у красноухой черепахи; Aspergillus fumigatus (1)
– при сухом некрозе пальца у толстохвостого гек-
кона;
Mucor circinneloides (1) – при сухом дерматите у
среднеазиатского варана; Trichoderma viridae (1) – при сухом дерматите у зеленой игуаны; Alternaria alternata (1)
– при некрозе панциря у каспийской черепахи;
Trichosporon ovoides (1) – при дерматите, сопровож-давшимся депигментацией кожи у зеленой игуаны; Trichotecium
roseum (1) – при дерматите, сопровождав-
шимся депигментацией кожи у шипохвоста.
Кроме того, в 6-ти случаях были выделены ассо-
циации нескольких видов грибов: ассоциация Fusar –
ium moniliforme , Trichosporon ovoides и Scopulariopsis
brevicaulis при сухом дерматите у зеленой игуаны;
ассоциация F . moniliforme и Paecilomyces spp. при су-
хом дерматите у зеленой игуаны; ассоциация Tricho-
sporon ovoides и acr emonium spp. при сухом дермати-
те у зеленой игуаны; ассоциация acr emonium spp. и
Phoma spp. при сухом дерматите, сопровождавшимся депигментацией кожи у коврового хамелеона; ассоци-ация Geotrichum candidum и Fusarium moniliforme при
расстройстве ЖКТ у европейского хамелеона; chae-
tomium
globosum и Humicola spp. – при хроническом
дер
матите у листоносой змеи.
В общей сложности, встречаемость различных ви-
дов грибов
составила: fusarium moniliforme – 16,1 %;
penicillium chrysogenum – 12,9 %; Chrysosporium-анаморфа Nannizziopsis vriesii – 9,6 %; Chaetomium globosum – 9,6 %; Trichosporon ovoides – 9,6 %; Acremonium spp. – 6,4 %; остальные виды были выде-лены в единичных случаях.
Заслуживают внимания случаи выделения от пре-
смыкающихся кератинофильного вида chrysospo-
rium
-анаморфа nannizziopsis vriesii. В то время как
остальные этиологические агенты были представлены грибами-оппортунистами, данный вид является истин-ным патогеном, способным вызывать как поверхност-ные, т
ак и глубокие микозы пресмыкающихся (J. pare
et al., 1997, D. Nichols et al., 1999). Вызываемые им за-болевания контагиозны, и могут передаваться другим животным как при непосредственном контакте, так и через
объекты окружающей среды (A. pare et al., 2006).
Кроме того, грибы рода chrysosporium в ряде стран
являются распространенными возбудителями дерма-то
микозов людей (J. kane et al., 1997). Насколько нам
известно, микозы, вызываемые грибами этого рода, до настоящего времени на территории РФ не регистриро-вались.
Изучение чувствительности возбудителей к анти-
фунгальным препаратам показало, что нистатин ингиби-
ветеринарная микология 359
ровал рост 78 % выделенных культур грибов, кетокона-
зо
л – 67 %, клотримазол – 33 %, амфотерицин В – 11 %.
Активность препаратов в отношении различных видов
грибов существенно варьировала, что свидетельству-ет о целесообразности определения чувствительности возбудителя к антимикотикам в каждом конкретном случае. Следует отметить, что на практике терапия ми-козов пресмыкающихся затрудняется ограниченностью научных данных по данному вопросу, а также недостат-ком фармацевтических антифунгальных препаратов, за-регистрированных для применения в ветеринарии.
В большинстве случаев микозы у пресмыкающих-
ся носили поверхностный характер и проявлялись как сквамозные сухие дерматиты, очаги депигментации кожи, некротические поражения. Вместе с тем в 3-х случаях были диагностированы системные микозы, в 2-х из
них – посмертно (возбудитель Penicillium chrys-ogenum). В одном случае системный микоз внешне был выражен как некротическое кожное поражение (возбудитель Fusarium moniliforme), однако вскоре жи-
вотное пало, и из внутренних органов были выделены ку
льтуры того же вида гриба. этот случай подчерки-
вает необходимость своевременного диагностического исследования при подозрении на микотическое забо-левание.
Полученные данные демонстрируют, что среди
пресмыкающихся, содержащихся в домашних услови-ях, микотические заболевания представляют сущест-венную проблему, требующую пристального внимания ветеринарных микологов и специалистов-герпетоло-гов. Необходимо учитывать, что экзотические живот-ные, ввозимые из-за рубежа, могут являться вектором распространения эндемичных видов грибов, патоген-ных как для животных, так и для человека.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ эКСТР АКТА БИОМАССЫ ГРИБА
fUsARIUM sAMbUCINUM В КОРМЛЕНИИ СОБОЛЕЙ
Пучков А.В.
ГНУ НИИ пушного звероводства и кролиководства им. в.А. Афанасьева,
Московская область
В составе современных рационов целесообразно
использовать ранее не применяемые или редко приме-няемые в
питании зверей корма и кормовые добавки,
позволяющие на фоне экономии традиционных доро-гостоящих ингредиентов рациона обеспечить живот-ных необ
ходимым набором нутриентов для поддержа-
ния жизни и проявления высокой продуктивности.
За последние годы испытано и рекомендовано про-
изво
дству целый ряд новых кормов и кормовых доба-
вок,
позволяющих на 10–30 % снизить использование
белка животного происхождения (Балакирев, 2001).
В настоящее время разработана технология и орга-
низовано производство биологически активных доба-вок
на основе гриба fusarium sambucinum на базе ООО
«Гелла-Фарм».
Целью исследований данной работы было изучить
влияние
экстракта биомассы гриба fusarium sambuci-
num на рост и качество шкурки отсаженного молодня-ка соболей.
Материалы и методы исследований. Научно хо-
зяйственные опыты проводили в ОАО « Племзавод Пушкинский» Московской области.
Первый опыт в научно хозяйственном опыте было
66 голов самцов соболей, разделенных на 2 группы по 33 в каждой, выравненных по рождению.
С 12 августа по 14 сентября в корм 1 опытной груп-
пы добав
ляли экстракт биомассы гриба fusarium sam-
bucinum по 1,0 мл на голову в сутки, соответственно, а 2 группа служила контролем.
Второй опыт проводился на 81 голове молодняка
соболей, разделенных на 3 группы по 27 самцов в каж-дой. Группы были сформированы и уравнены с учетом живой массы и по возможности, по происхождению.В корм зверей 1 и 2 опытной группы добавляли экс-
трак
т биомассы гриба fusarium sambucinum в течении
недели по 0,5 мл и по 1,0 мл на голову в сутки, соот-ветственно, а 3 группа служила контролем.
Молодняк взвешивали на начало опыта в 4 мес. и
на конец опыта в 6 мес.
После первичной обработки шкурки измерены и
комиссионно оценено качество. Полученные данные были статистически обработаны.
Результаты исследований. Первый опыт показал что живая масса молодняка
в опытной группе на конец опыта была больше, зачет по качеству шкурок в опытной группе был выше (84,3 против
78,9 % в контроле) зачет увеличения бездефек-
тных шк
урок на 25,4 % и отсутствие шкурок со сред-
ним и большим дефектом, В опытной группе больше особо кр
упных XXХ на 8,9 %. ( Р>0,95).
Второй опыт. В опытных группах молодняк
рос лучше. Живая масса на конец опыта состави-ла, 1
гр.(0,5мл)–1504±0,23,2 гр. (1,0 мл) – 1560,0 ±
0,25,3 гр. (контроль) – 1460,7 ± 0,25. Различие по жи-вой массе при окончании опыта во второй группе до-стоверно (Р>0,99). Увеличение зачета по качеству шку-рок в опытах выше по сравнению с контролем 12,1 и 12,6
% .
Выводы. Добавление к рациону молодняка соболей
в августе-с
ентябре экстракта биомассы гриба fusarium
sambucinum положительно влияет на прирост живой массы у молодняка к забою. Установлено что добав-ление кормовой добавки экстракта биомассы гриба fusarium
улучшает качество шкурок и обеспечивает
зачет в опытных группах выше, различие с контролем во второй группе достоверно (Р>0,99).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 14 360
Высокий иммуногенный потенциал и аректоген-
ность живых грибных вакцин против дерматоми-
козов животных обусловлены достаточно широкой изученностью биологических свойств возбудителя, его физиологии, эпизоотологии, иммуногенности и вирулентности, а также этиологической структуры и пат
огенеза заболевания. эффективность разработан-
ных вакцин во многом зависит от быстрого и точного метода индикации перспективных культур, которые после дальнейшего лабораторного изучения использу-ются как производственные штаммы для изготовления биопрепаратов.
ноголетние исследования, проведённые коллекти-
вами
лабораторией микозов и антибиотиков ВИэВа и
отделом контроля и стандартизации препаратов против микозов животных ВГНКИ, были весьма результатив-ными. Вна
чале сотрудниками ВИэВа была опроверг-
нута теория , что грибы слабые антигены, а затем ими же была подтверждена научная гипотеза П.Н.Кашкина (1967), что вирулентность выделенных культур грибов обусловлена молодыми клетками грибов, особенно алейриями
(микроконидии). это высказывание было
в дальнейшем подтверждено результатами, получен-ными в последующие годы. В дальнейших опытах Жарковым И.И. (1977) было установлено, что именно микроконидии по сравнению с другими элементами дерматофитов обладают иммуногенными свойствами. Проведённые длительные опыты показали, что взрос-лые животные переболевают дерматомикозами реже, чем в раннем возрасте. С учётом этих исследований конструирование вакцин против дерматомикозов ос-новывалось на уже разработанных ранее методов по профилактике и терапии бактерийных заболеваний человек
а и животных. В ВИэВе впервые в мире к
1969 году была предложена и оформлены все норма-тивные документы на жидкий живой биопрепарат для профилактики и терапии трихофитии у крупного ро-гатого скота, а затем её лиофилизированный вариант (ЛТФ-130). Затем последовали моновакцины против трихофитии лошадей, пушных зверей, кроликов, овец и верблюдов, которые были внедрены в ветеринарную практику с целью профилактики и терапии этой ин-фекции у этих видов животных.
На фоне успешной иммунизации животных против
трихофитии стала чаще проявляться у животных мик-роспория. Создание вакцины против микроспории вос-приимчивых животных не сразу удавалось. Культуры вида Microsporum canis являются очень полиморфны-ми и в процессе пересевов быстро теряли полученную высокую спорогенность. В результате наблюдались частые рецидивы после вакцинации, переболевание и аллергические реакции у вакцинированных этими биопрепаратами животных.
Необходимо было разработать методы отбора
штаммов культур грибов по скорости роста, спорооб-разованию и стабильности сохранения иммуногенных свойств этих культур. Отбор перспективных штаммов по внешнему виду (порошистость, видимому росту и другие показатели) не всегда обеспечивали перспек-тивность отобранной для дальнейшей работы культу-ры как перспективного вакцинного штамма гриба.
С целью увеличения спорогенности и жизнеспо-
собности производственных штаммов дерматофитов коллективом ВГНКИ, а несколько позднее и сотруд-никами
ВИэВа а был предложен и внедрён метод се-
лекции, поддержанию, хранению и контролю вначале как самого необходимого производственного штамма Trichophyton verrucosum 130. С помощью этого метода на биопредприятиях страны возникло благополучие по выпуску производственных серий вакцины ЛТФ-130, удовлетворяющих требованиях НД. В дальнейшем, используя этот метод, были повышены спорогенность и жизнеспособность производственных штаммов дру-гих видов рода Trichophyton и M.canis. Из отселекци-онированных полученных и выращенных 18–21 днев-ных культур этих видов и родов изготавливали моно- и поливалентные вакцины против трихофитии и микро-спории у различных видов животных.
Согласно полученных данных лабораторией мико-
зов
и антибиотиков ВИэВа при изучении различных
штаммов культур гриба Tr.equinum, выделенных от лошадей показали возможность использовать толь-ко этот вид гриба, так каку, выделенные от лошадей с клиническими признаками трихофитии культуры Tr.mentagrophytes имели одинаковую иммуногенную активно
сть с культурами fr.equinum в опытах на жи-
вотных, иммунизированных моновакцинами двух ви-дов грибов, при их перекрестном заражении штаммами грибов как вида
fr. Mentagrophytes так и fr.equinum.
Использование для изготовления вакцины экви-
дерм культур Tr.mentagropphytes не усиливало протек-тивных свойств этой вакцины.
На основании проведённых исследований сотруд-
ников
ВИэВа и ВГНКИ было установлено, что про-
изводственные штаммы, хранящиеся в засеянном виде на пробирках с суслоагаром необходимо ввиду их по-лиморфности необходимо систематически проводить работы по повышению их продуктивности не реже одного раза в шесть месяцев путём сравнения моно-споровых к
ультур. эти же производственные штаммы
культур, хранящиеся в сублимационном виде сохраня-ют свои свойства свыше пяти лет.К ВОПРОСУ Р АЗР АБОТКИ СРЕДСТВ И МЕТОДОВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ
ПРОФИЛАКТИКИ ДЕРМАТОМИКОЗОВ ЖИВОТНЫХ
Саркисов К.А.
ФГУ вГНкИ,
Москва
ветеринарная микология 361
Микотоксины – это естественные загрязнители
растительных кормов, вредящие здоровью сельско-
хозяйств
енных животных. НТ-2 токсин относится к
трихотеценовым микотоксинам типа А. О полевых случаях отравления животных НТ-2 токсином и об эффектах хронического действия НТ-2 токсина на жи-вотных в условиях эксперимента в настоящее время известно мало.
Целью данной работы было изучить хроническое
действие разных доз НТ-2 токсина на цыплят. Опыт был проведен на четырех группах цыплят породы Род Айланд с
уточного возраста: первая группа – контроль-
ная, вторая, третья и четвертая группы получали корм, содержащий
НТ-2 токсин в концентрациях 4,8 и 16 мг/
кг соответственно.
Степень проявления некротического стоматита за-
висела
от концентрации НТ-2 токсина в корме. При
концентрации 4 мг/кг отмечали потемнение языка и налипание корма на верхнем небе. При концентрации 8
мг/кг – потемнение, пересыхание и заострение кон-
чика языка, налипание корма и начальные признаки развития некротических очагов на верхнем небе. При концент
рации НТ-2 токсина 16 мг/кг наблюдали ясно
выраженные некрозы на языке, верхнем и нижнем небе. Учитывая полученные нами данные и данные изучения действия Т-2 токсина, можно считать нали-чие некротического стоматита у птиц специфическим признаком действия трихотеценовых микотоксинов типа
А.
Значимое снижение живой массы цыплят наблю-
далось на 15, 22 и 29 сутки после включения НТ-2
токсина в корм в концентрации 16 мг/кг. В целом
наблюдалась статистически значимая отрицательная корреляция
между концентрацией НТ-2 токсина в кор-
ме и живой массой цыплят.
Относительная масса печени, почек, сердца и
поджелудочной железы повышалась прямопропор-ционально
концентрации НТ-2 токсина в корме. Ме-
ханизмом, лежащим в основе этого явления, была ком-пенса
торная гипертрофия. Известно, что НТ-2 токсин,
как и другие трихотеценовые микотоксины, ингибиру-ет биосинтез белка, что приводит к снижению актив-ности многих ферментов. Например, в печенке крыс в результате скармливания в течение 28 дней культуры F . sporotrichiella , содержащей НТ-2 токсин в концен-
трации
150 мг/кг и другие трихотецены, снижалась
активность β-галактозидазы β-N-ацетилглюкозами-
нидазы, глюкозо-6-фосфатазы и митохондриальной сукцинатдегидрогеназы (Авреньева, 1985). Таким об-разом, компенсация недостаточной функциональной активности этих органов происходит за счет увеличе-ния их массы.
Относительная масса селезенки и бурсы снижа-
лась с
увеличением концентрации НТ-2 токсина, о чем
свидетельствовало отрицательное значение коэффи-циентов корреляции. Относительная масса селезенки цыплят,
получавших комбикорм с НТ-2 токсином в
концентрации 16 мг/кг, была ниже, чем в группах 1, 2 и 3 на 52,37 и 51 % соответственно. Снижение относи-тельной массы бурсы является следствием дистрофии фоллик
улов. При концентрации НТ-2 токсина в корме
4 мг/кг происходило утончение коркового слоя фолли-кулов. При концентрации 8 мг/кг кроме этого наблюда-лось уменьшение количества клеток и, соответственно, увеличение межклеточного пространства в мозговом слое фолликулов бурсы. Внесение НТ-2 токсина в концентрации 16 мг/кг приводило к уменьшению ко-личества клеток также и в корковом слое. Кроме того, при концент
рациях НТ-2 токсина 8 и 16 мг/кг слой со-
единительной ткани между фолликулами был шире, что может быть свидетельством уменьшения диаметра фолликулов.
У цыплят
, получавших с кормом 4, 8 и 16 мг/кг
НТ-2 токсина, наблюдалось снижение концентрации общего белка в плазме крови по сравнению с конт-рольной
группой на 32, 35 и 25 % соответственно. Ста-
тистически значимых отличий в концентрации общего холестерина между группами не было.эКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ НТ-2 ТОКСИКОЗ ЦЫПЛЯТ
Труфанов О.В.
Институт птицеводства Украинской академии аграрных наук,
Борки, Украина
A comparative aeromycological study of the internal
air of exhibition halls and depositories of some museums
in North-West Russia and in Athens, Greece have been done in order to evaluate the presence of fungi as potential biodeteriogens. The following museums have been stud-ied: Military-Historical Museum of Artillery, Engineer and Signal
Corps (St.petersburg), pskov State Historical,
Architectural and Arts Museum-Reserve (depositories of oil painting
and of icons, van-der-flit Building, museum
complex «prikaznaya palata»), Tikhvin Museum-Reserve,
during the period 2006–2007 and the National Gallery in Athens, Greece during the period 2003–2004.
The aim of the study was to evaluate levels of air con-
tamination by micromycetes, and reveal number of viable propagules of micromycetes on the surfaces of exhibits, walls, shelves depending on different storage conditions (diverse geographical
regions, buildings of XvIII-XX
centuries, various heating and climate conditioning, etc).
Aeromycological study of North-West Russian (NWR)
museums have
shown that the colony forming units (CfU)
of micromycetes in the air of studied premises vary signifi-cantly between
40 – 250 CfU/m3, being at the same time
below the recommended level of 500 CfU/m3. A variation
in the concentration of the total fungi was also found in the National Gallery in Athens, and a rate between 0–78 Cf
U/m3 was recorded, depending on the date and the sam-
pling site.
More than 60 species from 23 genera have been isolat-
ed from NWR museum air and surfaces. Average number of fungal species in the air of a museum hall was 13. The following fungal genera dominated in the studied NWR museum halls by occurrence and by abundance: asper
gil-
lus, Penicillium , cladosporium, Oidiodendron.
In the National Gallery in Athens, a total of 27 genera
of filamentous fungi were identified and in addition Non Sporulating fungi,
Sphaeropsidales and the yeasts were
recorded as groups. The predominant genera were Peni-
cillium, cladosporium, a
ureobasidium, alternaria, and
asper
gillus.
In general, micromycetes communities identified in
museum air have quite high coefficients of dominating species composition
likeness, but in the premises of pskov
State Historical, Architectural and Arts Museum-Reserve (museum complex
«prikaznaya palata») there have been
found fungi from the genera Fusarium, T orula, exophiala,
rhizopus, which have not been found in any other NWR museums. This
fact may be explained by museum
location and by natural ventilation through the open win-dows.
One more indicator of premise’s mycological status
is the number of fungal spores per unit of surface square, which was studied by agar prints method followed by ster-ile water dilution. The number of fungal spores per square decimetre of surface varied in the NWR museums from 5 to 50
CfU/dm2 . The highest concentration of spores (up
to 80 CfU/dm2) was found on the damaged wall surface
in depository of icons (pskov), while recommended safe levels for this indicator is 50 CfU/dm
2 . Раздел 15
ГРИбы – АГЕНТы бИОПОВРЕЖДЕНИй
fUNGI As bIODETERIORATION AGENTs
IN
MUsEUMs Of RUssIA AND GREECE
bogomolova e.V .1, Kapsanaki-Gotsi e.2, Saketopoulou d.2,
KobyakovaV .
i. 3, Panina l.K.4
1 Komarov V .l. botanical institute raS,
St.Petersburg
2 university of athens,
athens, Greece
3 military-Historical museum of artillery, engineer and Signal corps,
St.Petersburg
4 Saint-Petersburg State university,
St. Petersburg
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 364
В настоящее время при проведении микологи-
ческой экспертизы критерием состояния помещений
служит
показатель – число колониеобразующих еди-
ниц (КОЕ) грибов в воздухе, для которого установлен предел [≤ 500ед/м
3]. Выход показателя за этот предел
сигнализирует о возможных отклонениях состояния внутренней среды помещения от нормы, требующих немедленного вмешательства. Такая оценка микологи-ческого статуса помещений общепринята, объектив-но отражает текущую ситуацию, но не дает никаких прогнозов относительно рисков возникновения небла-гоприятных сценариев в будущем. Поэтому при при-нятии решений относительно «микробиологической аварийности» помещений необходимо использовать системный подход и принимать во внимание целый комплекс признаков (предикторов), которые предлага-ется анализировать методами многомерной статисти-ки (например, методом главных компонент). Данный подход использует математические, статистические и
другие методы, основанные на формальной логике,
в первую очередь для извлечения наиболее важной, но, зачастую, скрытой (латентной) информации при ана-лизе многомерных экспериментальных данных.
Первым шагом к применению такого подхода слу-
жит формализация категорий факторов, определяю-щих микологическую безопасность помещений. Нами предложено выделить несколько групп факторов, та-ких как внутримузейный климат, общая характерис-тика здания (год постройки или капремонта, наличие систем вентиляции и кондиционирования, состояние инженерных коммуникаций, гидроизоляции и т. п.), посещаемость, сезон, характеристика экспонатов (ма-териал, плотность размещения и др.), микологические показатели (КОЕ в воздухе, концентрация жизнеспо-собных грибных спор на поверхностях стеллажей) и некоторые другие. Каждому внутригрупповому при-знаку присваивается свой ранг и пределы допустимых значений, согласно которым проводится экспертная оценка. При составлении шкалы рейтинга помещений по микологической безопасности учитывается не прос-то сумма баллов по каждому показателю независимо от других, а принимаются во внимание их взаимные корреляции (иначе это может приводить к ошибочным решениям
– ложным тревогам, и т.п.). этот подход
позволяет выделить главную компоненту – ось, дис-персия оценок вдоль которой максимальна. Обработка данных и их графическое представление может реали-зовываться с помощью стандартных статистических пакетов или программы Unscrambler®.
Получены предварительные результаты обработки
данных с применением предлагаемого метода. Класси-фицирован ряд помещений, обследованных на предмет микологической безопасности: Военно-исторического музея артиллерии, инженерных войск и войск связи (3 зала); Псковского государственного историко-архитек-турного и художественного музея-заповедника (фонд масляной живописи, хранилище икон, здание Фан-дер-Флита, музейный комплекс «Приказная палата»); фондохранилищ Научной библиотеки им. М. Горько-го СПбГУ и некоторых аудиторий, располагающихся в здании Двенадцати коллегий в Санкт-Петербурге. Фактически, по имеющимся данным, помещения со-ставили два кластера, один из которых соответствовал благополучному состоянию с низким прогнозируемым риском, а другой включал помещения с высоким по-тенциальным риском микологических повреждений.ПОДХОДЫ К ОЦЕНКЕ МИКОЛОГИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ
ПОМЕЩЕНИЙ МУЗЕЕВ, АРХИВОВ, БИБЛИОТЕК НА ОСНОВЕ
МЕТОДОВ АНАЛИЗА МНОГОМЕРНЫХ ДАННЫХ
Абрамов Е.Г.1, Богомолова Е.В.2, Панина Л.К.1
1 Санкт-Петербургский государственный университет,
Санкт-Петербург
2 Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
ГРИБЫ ПОВЕРХНОСТНОЙ ПЛЕСЕНИ ДРЕВЕСИНЫ ДУБА
Абрамян Дж.Г., Нанагюлян С.Г., Элоян И.М.
ерев
анский государственный университет, кафедра ботаники,
ереван, Армения
Основными агентами биоповреждений промыш-
ленных материалов, в частности древесины, представ-ляющей собой органический материал природного происхождения, являются грибы, которые используя древесину в качестве источника углеродного питания тем с
амым вызывают разрушительные процессы. Ми-
кологическое обследование срубленных стволов мно-голетних деревьев дуба, компактно сложенных на территории частного винодельческого предприятия показало, что они сплошь заселены обильно спорули-рующими колониями микроскопических почвенных грибов, вызывающими появление на древесине раз-личного цвета окраски (черноватые, зеленоватые, жел-товатые, розоватые и др.).
Развитию плесневых и деревоокрашивающих гри-
бов, которых не следует резко разграничивать, спо-
Грибы – агенты биоповреждений 365
собствовала высокая влажность, поскольку штабелями
лежащие стволы деревьев систематически поливались водой неконтролируемыми действиями работников предприятия с целью дальнейшего их использования для заготовки тары, а также оптимальная температура, которая даже при значительных колебаниях не могла стать ограничивающим фактором для роста и развития да
нных видов грибов. Стволы дуба были инфицированы
следующими видами микромицетов: Aspergillus niger, A.
flavus, penicillium verrucosum var. cyclopium, p. veluti-
nu
m, p. crustosum, p. corymbiferum, Alternaria alternata,
Cephalosporium coremioides, Cladosporium elegantulum, C.
brevi – compactum, Stemphylium botryosum, Stachy-
bo
trys chartarum, Trichoderma viride, T. polysporum, fu-
sarium sambucinum, Rhizopus stolonifer var. stolonifer, а также представителями порядка Agonomycetales (M
ycelia sterilia). С зараженных лесоматериалов споры
грибов проникли в складские помещения, где заспоряя воздух, они легко адаптировались на стенах и бочках. С пораженной тары были выделены следующие виды гри-бо
в: Aspergillus flavus, A. niger, penicillium verrucosum
var. cyclopium, penicillium verrucosum var. verrucosum, p.
atramentosum, p. verruculosum, Alternaria alternata, Trich-
oderma polysporum, Stemphylium botryosum, Cladospo-ri
um brevi-compactum. Микологический анализ воздуха
выявил диаспоры видов грибов, доминирующие на древесине тары, в их числе Aspergillus niger, A. flavus, Al
ternaria alternata, Stemphylium botryosum, penicillium
verrucosum var. cyclopium, Cladosporium brevi-compac-tum. На стенах адаптировались Stachybotrys chartarum, Stysanus stemonites, Chaetomium bostrychoides, а также ви
ды родов Aspergillus, penicillium, fusarium. Ряд выяв-
ленных видов известны своими токсигенными свойства-ми. Заспоренность воздуха, а также контактирование с инфицированным материалом создало потенциальную опасность вспышки аллергических заболеваний, мико-зо
в и микотоксикозов у работников предприятия. Реко-
мендованные и предпринятые соответствующие меры по обезвреживанию материала дали соответствующие результаты.
ГРИБОСТОЙКОСТЬ НЕКОТОРЫХ МОДИФИЦИРОВАННЫХ
ПОЛИВИНИЛОВЫХ СПИРТОВ (ПВС)
И ПОЛИВИНИЛАЦЕТАТОВ (ПВА)
Абрамян Дж.Г. 1, Нанагюлян С.Г. 1, Фармазян З.М. 2, Шахазизян И.В.1
1 ереванский гос.университет,
2 НИИ «Пластполимер»,
ереван, Армения
В настоящее время одной из новых областей при-
менения сополимеров на основе виниловых мономе-ров поливинилацетата (ПВА) и поливинилового спирта (ПВС) является их использование в качестве снимаемых полимерных покрытий, которые предназначены как для временной защиты от внешних воздействий, так и для удаления различных загрязнений с поверхности зда-ний, сооружений, оборудований и т.д. Использованные покрытия обычно компактируют и захороняют в виде твердых отходов. Со временем эти отходы разлагаются и попадают в почву. Вследствие чего, исследование ус-тойчивости к почвенным грибам любых новых марок ПВА и ПВС, предназначенных для производста защит-ных пленок, представляет практический интерес.
Разнообразие промышленных марок ПВС и ПВА
обусловлено модификацией полимеров различными (со)мономерами, приводящей к оптимизации тех или иных потребительских свойств. Однако изменение любой характеристики полимеров приводит к измене-нию свойств, влияющих на их биостойкость.
Предметом наших исследований явились новые
марки поливиниловых спиртов, модифицированные карбоксилсодержащими (со)мономерами; новые мар-ки поливинилацетата, полученные радикальной поли-меризацией с использованием новой инициирующей системы. В качестве сомономеров ПВС использованы монокарбоновая метакриловая кислота (МАК) в коли-честв
е 5 % и 10 % (ПВС-МАК5 и ПВС МАК10); смесь производных дикарбоновой малеиновой кислоты – ма-леиновый ангидрид и моноэфир малеиновой кислоты (ПВС-МА-Мэ
5 и ПВС-МА-Мэ10); моноэфир малеи-
новой кисло
ты (ПВС-Мэ5).
Испытанию подверглись порошки МПВС и ПВА.
Испытуемые соединения помещались непосредствен-но в
стерильные чашки Петри. экспозиция опыта
длилась 8 месяцев. эксперименты на выявление гри-
бостойкости испытуемых материалов и деструктив-ной активности микромицетов проводились наборами грибов, которые включали различные сочетания сле-дуюших видов: Aspergillus flavus, A.niger, A. ochraceus, penicillium
duclauxii, p. verrucosum var. cyclopium, p.
verrucosum var. verrucosum, Alternaria alternata, Stem-phyllium botryosum, Cladosporium herbarum, C. brevi-compactum, Trichoderma viride.
Наибольший рост грибов обнаружен на следующих
полимерных материалах:
ПВС-МАК5
– Aspergillus niger, penicillium verru-
cosum var
. cyclopium, penicillium hordei, Trichoderma
viride, verticillium tenerum;
ПВС МАК10 – Aspergillus niger, penicillium verru-
cosum var. cyclopium;
ПВС-Мэ
5 – Cephalosporium sp., Aspergillus niger,
penicillium verrucosum var. verrucosum, Hyphoderma roseum.
В чашк
ах с ПВС-МА-Мэ5 и ПВС-МА-Мэ10 наблю-
далась полная деградация данных соединений. Резуль-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 366
таты, полученные по испытанию ПВС, являются осно-
вой для подбора типа и соотношения (со)мономеров ПВС, позволяющих регулировать их биодеструкцию в зависимости от области применения.
Фунгицидную активность проявили все испытуе-
мые образцы новых марок ПВА. Данные ПВА отлича-ются от известных марок более высокими значениями молекулярных масс, низкой ветвленностью (практи-чески линейные макромолекулы), узким молекулярно-массовым распределением. Полученные результаты свидетельствуют о целесообразности использования новых марок ПВА в качестве снимаемых покрытий поверхностей, загрязненных особо вредными и ток-сичными веществами.
Р АЗНООБР АЗИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ, ВЫЯВЛЯЕМОЕ В ПЫЛИ
ГЕРМОЗАМКНУТОГО ОБЪЕМА НА БОРТУ
СЛУЖЕБНОГО МОДУ ЛЯ РС МКС.
Алехова Т.А.1, Александрова А.В.1, Лысак Л.В.1, Загустина Н.А.2,
Новожилова Т.Ю.1, Романов С.Ю.3
1 Московский Государственный Университет имени М. в. ломоносова,
Москва
2 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН,
Москва
3 Ракетно к осмическая к орпорация «Энергия» имени С.П. к оролева,
Москва
На Российском Сегменте Международной Кос-
мической Станции проводится мониторинг состава микроорганизмов на различных поверхностях и конс-трукционных материалах, для этой цели разработан эксперимент «Начальные этапы биодеградации и био-повреждений в условиях космоса» с использованием укладки «Биопробы». Однако материал, получаемый таким образом, отражает состав микроорганизмов-биодеструкторов в конкретных исследуемых точках и не дает представления о полной микробиологической обстановке на станции, поэтому дополнительно про-водится анализ микроорганизмов в пыли, собираемой пылесосом и на воздушных фильтрах.
Пробы пыли были отобраны пять раз в период с мая
2003 по октябрь 2005. Для выделения были примене-ны стандартные микробиологические методы посева на твердые питательные среды. В результате анализа пыли, собранной как пылесосом, так и пылефильтром было обнаружено 27 видов мицелиальных грибов, принадлежащим к десяти родам, 1 вид дрожжевого гриба и представители 12 родов бактерий.
Наиболее обильными и отмеченными во все
сроки исследования были виды грибов: asp
ergillus
flavus ; a. niger ; chaetomium globosum ; P. c hrysogenum ;
rho
dotorula sp. и ulocladium botrytis . К часто встре-
чаемым относятся: a. sydowii ; a. versicolor ; a. ustus ;
P
aecilomyces variotii ; Penicillium crustosum . Реже
отмечались: a. chevalieri ; a. foetidus ; a. nidulans ; a.
ochraceus ; cladosporium herbarum ; Fusarium oxyspo-
rum; mucor circinelloides ; Penicillium aurantiogriseum ;
P. brevicompactum ; P. d ecumbens ; P. lanosum ; P. pur-
purogenum ; P. rubrum ; P. spinulosum ; Scopulariopsis
brevicaulis ; Stachybotrys chartarum ; ulocladium char-
t
arum .
Среди бактерий постоянно выделяли представи-
телей четырех родов: bacillus , micr ococcus , myxococ –
cus и rhodococcus . Реже выделялись представители других родов: arthr obacter, cellulomonas , cytophaga ,
Flexibacter , Flavobacterium, Spirillum
, Streptococcus,
Xanthomonas, грамм отрицательные бактерии семейс-тва Enterobacteriaceae.
Одним из самых богатых видами оказался род
asper
gillus , представители этого рода весьма устойчи-
вы к различным неблагоприятным факторам (сухость, соленость, повышенная температура, различные из-лучения и др.) и способны усваивать широкий спектр питательных субстратов. Род Penicillium оказался
представленным также большим количеством видов, преобладал P .
chrysogenum. этот технофильный вид
доминировал в пыли из пылесборника, и менее оби-лен на фильтре. Он постоянно выделяется с некото-рых поверхностей на РС МКС, а на станции «МИР» это был один из доминирующих видов. Впервые на РС МКС
обнаружен опасный токсинообразующий гриб –
Stachybotrys chartarum, однако обилие его очень низ-кое.
В целом, анализ пыли дает более полные данные
по сравнению с пробами, отобранными с конкретных поверхностей. Ряд видов был выявлен этим методом на 1
– 1,5 года раньше, а 10 видов пока еще не отме-
чено с использованием укладки «Биопробы». Анализ пыли, собираемой пылесосом и воздушными фильтра-ми и являющейся местом концентрации спор грибов и клеток микроорганизмов, дает интегральную оценку микробиологического населения РС МКС и оптималь-но подходит для выявления максимального разнообра-зия видов. Однако этот метод не позволяет определить место развития микроорганизмов, и поэтому должен обязательно сочетаться с анализом в конкретных точ-ках и на определенных материалах.
Таким образом, анализ пыли на РС МКС оптималь-
но дополняет эксперимент «Начальные этапы биоде-градации и биоповреждений в условиях космоса» с использованием укладки «Биопробы».
Грибы – агенты биоповреждений 367
Нарушение условий хранения музейных ценностей
часто приводит к их повреждению микроскопически-
ми грибами. В связи с этим поиск наиболее эффектив-ных дезинфицирующих средств занимает особое мес-то в проблеме защиты памятников истории и культуры от биодеструкторов. Актуальность этой проблемы обусловлена высокими адаптационными возможнос-тями плесневых грибов, позволяющими образовывать устойчивые формы в отношении часто используемых фунгицидов.
В последние годы в практику реставрации, особен-
но для защиты памятников на бумажной основе, введе-ны препараты полигексаметиленгуанидина, представ-ляющие собой полимерные поверхностно-активные вещества катионного типа хорошо растворимые в воде и обладающие малой токсичностью.
Нами проведено исследование фунгицидных
свойств препарата полидез, выпускаемого ЗАО «Ук-раинские экологические технологии» (г.Киев). Оценку фунгицидного действия проводили стандартним мето-дом диффузии в агар по величине зон задержки роста микромицетов под влиянием препарата. Тест-культу-рами служили штаммы грибов, выделенные с повреж-денных эк
спонатов темперной живописи – Aspergillus
niger, Aspergillus versicolor, Aspergillus tereus, Alternaria alternata, penicillium
expansum. Инфицирование осу-
ществляли суспензией смеси конидий указанных тест-культур. Проведенное исследование показало, что по образованию зон задержки роста полидез в концент
рациях 0,5; 1 и 2 % (по активному веществу
препарата) несколько более активен, чем традиционно применяющийся в реставрации катамин АБ в тех же концентрациях. Среди испытанных тест-культур са-мыми стойкими к действию полидеза были культуры рода Aspergillus, особенно Aspergillus niger, а наименее стойк
ой – Alternaria alternata.Фунгицидное действие полидеза было испытано
нами на образцах археологической керамики из экс-периментального фонда Института археологии АН Украины (фрагменты амфоры, датированной рубежом старой и новой эры). На фрагментах выявлены грибы: pen
icillium cyclopium, p. funiculosum, Aspergillus foetidus
и бактерии. Образцы керамики были обработаны 1 % и
2 % водно-спиртовыми растворами полидеза. Испы-
та
ны два способа обработки – кистью с поверхности
и погружением в раствор фунгицида на 5 минут. При хранении на воздухе рост грибов не наблюдали ни на одном из образцов. Однако в условиях влажной камеры (в
лажность 95 %, температура 260 С) признаки роста
грибов были обнаружены: в контроле на 4-й день, на об-работанных полидезом образцах через 7 дней. Наиболее интенсивный рост наблюдали на контрольном образце. На обработанных полидезом образцах рост был сред-ней интенсивности на образцах, обработанных с повер-хности, и слабым на образцах, обработанных методом погружения в раствор фунгицида.
Проведено исследование фунгицидного воздейс-
твия полидеза и нипагина на биостойкость пленок мучного и осетрового клеев на подложках из разных материалов. Установлено, что полидез в концентра-ции 1–3
% к весу сухого клея придает большую био-
стойкость пленкам мучного клея, чем традиционно используемый для этих целей нипагин. На подложках из бумаги и дерева пленки мучного клея с полидезом даже при принудительном инфицировании не зараста-ли в условиях влажной камеры более месяца, тогда как на пленках с нипагином в тех же условиях рост гри-бов обнаруживался уже на 6-ые сутки. Роста грибов на пленках осетрового клея с полидезом (в опытах без принудительного инфицирования) в условиях влаж-ной камеры не было более месяца наблюдений, тогда как контроль заростал уже на 5–6 сутки.ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРЕПАР АТА ПОЛИДЕЗ ДЛЯ ЗАЩИТЫ
МУЗЕЙНЫХ ОБЪЕКТОВ ОТ БИОПОВРЕЖДЕНИЙ
Бидзиля В.А., Митковская Т.И., Коваль Э.З.
Национальный научно-исследовательский реставрационный центр Украины,
киев
РОСТ МИКРОМИЦЕТОВ НА АВИАЦИОННОМ
ТОПЛИВЕ И Р АЗЛИЧНЫХ УГ ЛЕВОДОРОДАХ
Васильева А.А., Чекунова Л.Н.
Биол
огический факультет имени М. в. ломоносова, кафедра микологии и альгологии,
Москва
О проблеме биоповреждения авиационных топ-
лив и материалов топливных баков известно уже давно. Бактерии и мицелиальные грибы, обитающие в баках самолетов, используют углеводороды про-изводных нефти для роста и развития. В результате жизнедеятельности микроорганизмов происходит ухудшение качества топлива, повышается вероят-ность засорения топливных систем, что может при-вести к авиакатастрофам. В ходе адаптационных процессов в топливе могут появляться новые виды, ранее в нем не встречаемые. Есть вероятность того, что некоторые применяемые средства борьбы с био-повреждениями могут оказаться неэффективными. Поэтому очень важно постоянное и всестороннее
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 368
изучение микроорганизмов, повреждающих различ-
ные виды топлива.
В результате нашей работы из образцов поражен-
ного топлива было выделено 14 видов грибов. Искус-ственное заражение топлива выделенными грибами показало, что все виды можно разделить на 3 группы: (1) активно растущие в топливе, (2) виды в различной степени адаптированные к этой среде и (3) случайные, не способные к росту в топливе.
Наиболее опасный вид cladosporium
resinae, ши-
роко известный в литературе, выделен изо всех трех образцов. эт
от вид преобладал в количественном от-
ношении среди микромицетов, выделенных из топлив-ных хранилищ. Среди грибов, выделенных из бака са-молета, доминирующим оказался вид Phialophora sp.
cladosporium
resinae и Phialophora sp. проявили и
наибольшую активность при искусственном зараже-нии топлива. Если о способности С. resinae усваивать
углеводороды нефти известно очень давно, то случаи выделения Phialophora sp. из нефтепродуктов носят
единичный характер. Наши исследования подтверди-ли, что выделенный штамм Phialophora sp. способен
использовать углеводороды нефти.
Исследуемое авиационное топливо ТС-1 в значи-
тельной степени состоит из предельных н-алканов. Изучена способность роста cladosporium
resinae и
Phialophora sp. на различных жидких н-алканах, среди которых гексан, гептан, октан, декан, додекан, гекса-декан, а также на твердом парафине и воске, в состав которых входят углеводороды.
Рост обоих грибов наблюдали на всех жидких угле-
водородах, кроме гексана. На гептане и октане наблю-дали слабый рост c.
resinae и Phialophora sp . Наилуч-
шие показатели роста отмечены для углеводородов с более длинными углеродными цепочками: на дека-не, додекане и гексадекане. Самый активный рост c.
r
esinae и Phialophora sp. был отмечен на додекане и
визуально, и по значениям прироста биомассы. На па-рафине у обоих грибов признаков роста не наблюдали .
На воске был отмечен крайне слабый рост С. resinae и
Phialophora sp.
c.
resinae по сравнению с Phialophora sp. растет
более активно на гептане, октане и декане. Напротив, последний показал более активный рост на гексадека-не. Таким образом, тенденция к росту на углеводоро-дах с более длинными углеродными цепочками более выражена у Phialophora sp. по сравнению с c.
resinae.
Кроме того, если у С. resinae часто наблюдается не-
большая лаг-фаза при развитии на углеводородах топ-лива, то в случае Phialophora sp. отмечен активный
рост мицелия уже с первых дней эксперимента. Все это может говорить о том, что штамм Phialophora sp. ,
выделенный нами из образцов пораженного топлива, представляет опасность для возникновения биопов-реждений авиационных топлив, содержащих в составе углеводороды с длинными углеродными цепочками.
ПОВРЕЖДЕНИЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ
ПОЛИ
эФИРНЫХ МАТЕРИАЛОВ ГРИБАМИ
Виноградова А.В.1, Ермилова И.А.1, Лебедева Е.В.2
1 Санкт-Петербургский торгово-экономический институт,
Санкт-Петербург
2 Ботанический институт имени в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
Ведущее место по объёмам производства и исполь-
зования среди текстильных материалов занимают ма-териалы из синтетических волокон и нитей. Они на-ходят применение в различных областях деятельности человека и при определенных условиях эксплуатации способны подвергаться воздействию микроскопичес-ких грибов.
Целью настоящей работы явилась оценка степени
воздействия стандартного набора грибов на полиэфир-ные текстильные нити.
В качестве объектов исследования использовались
нити из полиэтилентерефталата (лавсан, полиэстер) (Пэ
ТФ), окрашенные дисперсными красителями.
В качестве тест-культур использовали стандарт-
ный набор грибов по ГОСТ 9.802-84 [1] из коллекции музея культур Ботанического института имени В.Л. Комарова Р АН: Aspergillus niger van Tieghem Х-486, Aspergillus terreus Thom ШБИН-1133, Раесilomyces variotii Bainier
Б-470, penicillium chrysogenum Thom
ПН-600, penicillium funiculosum Thom ПН-601. Испы-тания проводили по стандартной методике [1]. Контро-лем служили полиэфирные нити, не инокулированные спорами микроскопических грибов, выдерживаемые в аналогичных условиях: относительной влажности воз
духа – 90 %, температуре – 30 °С, время инкуба-
ции
– 28 суток.
Количественную оценку поврежденности образцов
в результате воздействия микроорганизмов проводили по методу профессора Ермиловой ИА.[2| с рассчётом безразмерного показателя биодеструкции. Структур-ные характеристики волокон определяли методами световой и электронной микроскопии, рентгенострук-гурного анализа, инфракрасной (ИК) спектроскопии, дифференциального термического анализа. Опреде-ляли изменение основных свойств нитей в результате воздействия микроскопических грибов.
Органолептическая оценка грибостойкости полиэ-
фирных нитей по ГОСТ 9.802-84 [1] не выявила ви-димого невооружённым глазом мицелиального роста на поверхности ниточных проб, что позволяет отнести
Грибы – агенты биоповреждений 369
исследуемые образцы к грибостойким. Однако изуче-
ние структуры и механических свойств волокон позво-лило выявить начальную стадию биодеструкции.
Исследование нитей микроскопическим методом
показало, что наибольшее число повреждений полиэ-фирных волокон относится к начальным повреждениям поверхности: обрастание микроорганизмами и продук-тами их обмена, пятнистость и слабая испещрённость. Вместе с начальными изменениями поверхности, обна-ружены, хотя и в небольших количествах, более значи-те
льные повреждения – глубокая испещрённость, из-
ме
нение формы волокон (вздутия), разрыв стенок. это
свидетельствует о начале более глубоких структурных изменений, затрагивающих внутренние слои волокон.
Значения показателя деструкции варьируются в
пределах 0,01 –0,06, что подтверждает начало процес-са биодеструкции, сосредоточенном главным образом на поверхности волокон.
Результаты рентгеноструктурного анализа позволи-
ли установить, что образцы исследуемых полиэфирных волокон имеют невысокую степень кристалличности полимера. Микробные воздействия сосредоточены в их аморфных областях и почти не затрагивают крис-таллических зон. Данные ИК-спектроскопии свиде-тельствуют о снижении степени упорядоченности полимера
на 5–7 % и процессе гидролитической де-
струкции молекул полиэтилентерефталата в результа-те воздействия грибов.
Дифференциальный термический анализ показал
повышение суммарного изменения массы образцов, поврежденных микромицетами, в процессе терми-ческ
ого разложения ПэТФ на 2–5 %, что является
следствием деструкции надмолекулярной структуры. Наблюдается снижение температур плавления и тер-мического разложения образцов, поврежденных мик-роск
опическими грибами на 3–6 °С, что также свиде-
тельствует о деструкции полимера.
Структурные изменения нитей под воздействием
грибов явились причиной снижения их физико-меха-нических
свойств: разрывной нагрузки на 1,57 – 6,65 %
и устойчивости к истиранию на 14,15 – 30,48 % от ис-ходных значений, разрывное удлинение увеличилось на 0,5
– 9,1 %.
У контрольных образцов также наблюдалось сни-
жение физико-механических свойств, но в значитель-но меньшей степени.
Причиной некоторого снижения свойств нитей в
контроле явилось развитие спонтанной микрофлоры. С контрольных образцов были выделены Trichoderma koningii Oudem,
Aspergillus niger Tiegh, penicillium fu-
niculosum Thom, Aspergillus ustus (Bainier) Thom..
Установлена зависимость степени биоповреждения
нитей от вида дисперсного красителя,
используемого при крашении. Наибольшими зна-
чениями показателя деструкции и степени снижения физико-механических свойств характеризуются нити, окрашенные дисперсным
синим 2 Пэ, наименьшими –
нити, окрашенные красителями: дисперсный красно-коричневый и дисперсный а
лый Пэ.
Полиэтилентерефталат является гидрофобным
синтетическим полимером с малым числом активных функциональных групп в молекуле и считается одним из наиболее устойчивых к действию микроорганизмов. Хо
тя грибостойкость ПэТФ достаточно высокая, все
же он не является абсолютно биостойким. Микроми-цеты-деструкторы, воздействуя на структуру волокон, снижают их свойства. На процесс биоповреждения определенное влияние оказывают красители, присутс-твующие в текстильном материале, снижая или по-вышая скорость биодеструкции волокнообразующего полимера.
Литература:1. ГОСТ 9.802-84. Ткани и изделия из натураль-
ных, искусственных и синтетических волокон и их сме
сей. Метод испытаний ка грибостойкость. – М.:
Издательство стандартов, 1984. – 22 с.
2. Ермилова И. А. Теоретические и практи-
ческие основы микробиологической деструкции химических в
олокон. – М.: Наука, 1991. – 248 с.
3 Дехант И., Данц Р ., Киммер В., Шмольке Р . Ин-
фракрасная спек
троскопия полимеров. – М.: Химия,
1976–471 с.
МИКОБИОТА ВОЗДУХА СЕКТОР А РЕДКОЙ КНИГИ ЧЕЛЯБИНСКОЙ
ОБЛАСТНОЙ УНИВЕРСАЛЬНОЙ НАУЧНОЙ БИБЛИОТЕКИ
Головина Т.А.
Челябинский государственный университет,
Челябинск
Отклонение от режима хранения, особенно в ава-
рийных ситуациях, чаще всего сопровождается био-логическими повреждениями культурных ценностей. Большая часть грибов, поселяющихся на книгах, пред-ставляет собой условно патогенную группу, опасную для человека. В связи с этим актуальной является за-дача контроля микробиологического (в том числе ми-кологического) состояния фондов и воздуха книгохра-нилищ. В октябре 2007 г . были проведены исследования ми-
кологического состояния воздуха сектора редкой книги Челябинской областной универсальной научной библи-отеки (объем помещения 288 м3) после аварии системы центрального отопления и последующего ремонта. Про-изведен отбор проб воздуха методом седиментации на поверхность стерильной агаризованной среды Чапека без глюкозы в чашках Петри в течение 60 минут. Посевы ин-ку
бировались в течение 6 дней при температуре 25 °С.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 370
В результате исследований максимальная заспо-
ренность зафиксирована в воздухе над открытыми
прост
ранствами, особенно – рядом с рабочими места-
ми со
трудников отдела, минимальная – внутри шкафов
с книгами, что, по-видимому, связано с различием в циркуляции воздуха. Было идентифицировано 5 родов микроскопических грибов, среди которых во всех про-бах в
стречались представители р.р. Aspergillus (37,5 %)
и penicillium (37,5 %), а также были обнаружены р.р. Cladosporium (12,5 %), Alternaria (8,3 %), Aсremonium (4,2 %). Из них грибы р.р. Alternaria, Cladosporium пос-тоянно встречаются на бумаге, проникают в волокно и разрушают субстрат, грибы р. Aсremonium также раз-рушают бумагу, но в меньших масштабах. Грибы груп-пы плесеней хранения р. Aspergillus являются деструк-торами
бумаги и продуцируют наряду с р. penicillium
вредоносные токсины, способные вызвать аллергичес-кие реакции.
ПЛЕСНЕВОЕ ПОР АЖЕНИЕ МАТЕРИАЛОВ ПЛЕСНЕВЫМИ
ГРИБАМИ РОДА AspERGILLUs
Гончарова И.А., Ровбель Н.М., Грек Д.С.
Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
Микроскопические грибы рода aspergillus, способ-
ные колонизировать самые разнообразные субстраты,
входят в число наиболее распространенных агентов биоповреждения материалов. Нанося значительный материальный ущерб, многие представители данного рода ( a.
fumigatus, a. flavus, a. niger и другие) могут
представлять угрозу для здоровья людей, провоцируя аллергические заболевания, интоксикации, инвазив-ные процессы.
В отапливаемых помещениях зданий различного
назначения (жилых, производственных, культовых) с характерными признаками плесневого поражения грибы рода Aspergillus встречались наиболее часто. При микологическом анализе 500 проб, взятых из пораженных участков стен, потолков, предметов ин-терьера, виды
рода Aspergillus доминировали в 40,2 %,
penicillium – в 32,3 %, других родов – менее чем в 10 %. Наиболее широко присутствовал в пробах A. niger, но его абсолютное доминирование встречалось относительно редко. После аварийных залитий стен горячей водой в пробах штукатурки часто встреча-лись A. fumigatus и A. flavus. Из лаковых покрытий с пигментными пятнами были выделены A. proliferans, A. sydowii, A.versicolor, A. unguis, характеризующие-ся обильным выделением пигментов в агаризованные среды с минимальным содержанием ростовых факто-ров. Разрушительным агентом биоповреждения музей-ной керамики оказался гриб A. ustus, идентификация которого вызвала сложности из-за трудности получе-ния органов спороношения.
Подавление плесневого поражения, вызванного
грибами рода asper
gillus, является, в некоторых случа-
ях непростой задачей, особенно при повторной коло-низации ими объектов, ранее прошедших биоцидную обработку. При этом обычно наблюдается обильное спороношение, повышенная пигментация мицелия и субстрата, усиление повреждения материалов из-за выделения в окружающую среду «агрессивных ме-таболитов». Для успешного решения данной задачи перед повторной обработкой пораженных материалов необходимо провести проверку действия различных биоцидных препаратов и антисептических составов на культуры, выделенные из колонизированных грибами участков.
Промоделировать ситуацию и провести исследова-
ние в кратчайшие сроки позволяет нанесение на образ-цы с различными вариантами биоцидной обработки «агаровой сетки», представляющей собой тонкий слой агаризованной среды, разделенной на мини-блоки се-тью борозд. Высев тест культур на «агаровую сетку» можно производить разными способами. Для более быстрого получения результатов грибные споры пере-мешивают с агаризованной средой, которую перед за-стыванием тщательной перемешивают до образования мелких гранул. Инокулированную среду переносят на образцы, помещенные в чашки Петри с увлажненными бумажными фильтрами, и формируют с помощью сет-чатого шаблона агаровую сетку. Через определенные промежутки времени блоки агаровой сетки переносят с образцов на предметные стекла и микроскопируют в проходящем свете для определения лаг-фазы по сте-пени прорастания спор. Посев тест-культур спорами или мицелием в центре «агаровой сетки» дает возмож-ность изучить колониальные признаки и определить характер воздействия биоцидов на скорость роста и развитие грибов в зависимости от инокулята. Изме-рение оптической плотности щелочных гидролизатов «агаровой сетки» позволяет проверить воздействие биоцидов на пигментообразование. Оценить повреж-дающую способность плесневых грибов можно по изменению свойств материалов после их длительной инкубации с «агаровой сеткой».
Грибы – агенты биоповреждений 371
В процессе эксплуатации станций МИР и МКС ус-
тановлено, что декоративно-отделочные и конструк-
ционные материалы интерьера и оборудования косми-ческих объектов являются основным местообитанием микромицетов, способных в результате своей жизне-деятельности вызывать биодеструкцию материалов. В результате этих процессов отмечались зоны видимого роста плесневых грибов на различных элементах ин-терьера и оборудования, случаи разрушения фактуры материалов.
Условия и параметры среды обитания, имеющие
место в локальных зонах пилотируемых космических объектов (запанельное пространство, места скопления конденсата атмосферной влаги), могут способствовать развитию грибов на поверхности конструкционных материалов.
Применение дезинфицирующих растворов тру-
доемко и ограничено по времени действия. Поэтому для профилактики и защиты декоративно–отделочных и конструкционных материалов от контаминации и развития микромицетов в период эксплуатации косми-ческого объекта необходимо использовать материалы и изделия, на поверхности которых эффективно купи-руются процессы развития биоповреждений.
Анализ современных методов защиты материалов
от воздействия микроорганизмов показал, что наибо-лее перспективной технологией противомикробной защиты является применение материалов с заданными антифунгальными свойствами.
В результате многолетней работы был разработан
многостадийный метод модификации поверхности син-тетических (на примере аримидной ткани) и натураль-ных (на примере хлопчатобумажной ткани) волокнис-тых материалов, используемых в космических объектах. это
т метод включает радиационную прививочную по-
лимеризацию винилкарбоновых кислот на поверхности материала с последующей химической модификацией, приводящей к иммобилизации органического катиона по
верхностно-активного вещества – катамина АБ.
Разработанный метод защиты волокнистых матери-
алов, используемых в космических объектах, позволя-ет подавлять жизнеспособность микромицетов на по-верхностях материалов в условиях, оптимальных для их развития
– температура 28 ±10 С и относительная
влажность воздуха ≥90 %, а также при среднем значе-нии ионизирующей радиации, соответствующей пара-метрам к
абины космического объекта – 40 мрад/сут.
В результате проведенных исследований по обес-
печению безопасности и надежности эксплуатации ма-териалов разработаны технологии антифунгальной за-щиты волокнистых материалов, обладающие высоким эффектом и пролонгированным действием, которые рекомендуются к применению в космических объек-тах для предотвращения процессов биоповреждений.ЗАЩИТА ВОЛОКНИСТЫХ МАТЕРИАЛОВ КОСМИЧЕСКИХ
ОБЪЕКТОВ ОТ БИОПОВРЕЖДЕНИЙ
Дешевая Е.А.1, Новикова Н.Д.1, Поликарпов Н.А.1,
Дьякова М.Г.2, Шевлякова Н.В.2, Тверской В.А.2
1 Государственный научный центр РФ – Институт медико-биологических проблем РАН,
Москва
2 Московская государственная академия тонкой химической технологии
им. М.в
. ломоносова,
Москва
МИКРОМИЦЕТЫ – ДЕСТРУКТОРЫ КОТОНИЗИРОВАННОГО
КОНОПЛЯНОГО ВОЛОКНА
Ермилова И.А.1, Лебедева Е.В.2, Бойченко А.М.1
1 Торгово-экономический институт,
Санкт-Петербург
2 Ботанический институт им. в.л. к омарова РАН,
Санкт-Петербург
Конопляное волокно – натуральное волокно рас-
тительного
происхождения, содержащее около 70 %
целлюлозы и 10 % лигнина. На биостойкость целлю-лозных волокон большое влияние оказывает последу-ющая обработка.
Влияние процесса котонизации и отделки конопля-
ного волокна на состав микробиоты и степень ее воз-действия на деструкцию волокна не изучены.
В работе исследованы котонизированные конопля-
ные в
олокна: К1 – окрашенное; К2 – отбеленное опти-ческим
отбеливателем; К3 – суровое; К4 – отбеленное
классическим способом.
Для стимуляции микрофлоры, содержащейся на
волокнах, их выдерживали в стерильных эксикато-рах при
30 °С и относительной влажности воздуха
90–100 % в течение 30 суток. По окончании экспози-ции для выделения и идентификации микромицетов, развивающихся на волокнах, их помещали в чашки Петри на агаризованную среду Чапека (повторность пятикратная). Одновременно изучали повреждения
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 372
волокон с помощью световой и электронной микро-
скопии и рассчитывали показатель деструкции по ме-тоду проф. Ермиловой И.А. (1991).
С исследованных волокон выделены и идентифи-
цированы 6 видов микромицетов, являющихся типич-ными целлюлозодеструкторами (Denizel et al.,1974; Лугаускас и др.,1997), а именно:
• Asper
gillus fumigatus fres. на среде с волокном К4
(30 %);
• Aspergillus niger v. Tiegh. на среде с волокнами: К1 (10 %); К2 (0.5 %); К4 (15 %);
• Chaetomium globosum kunze активный рост на са-
мих во
локнах: К1 (70 %); К2 (30 %); К4 (70 %);
• Mucor plumbeus Bonord. на среде с волокнами: К1 (50 %), К2 (10 %), К3 (50 %), К4 (50 %);
• penicillium aurantiogriseum Dierckx на среде с волок-
нами: К1 (20
%); К2 (10 %); К3 15 %); К4 (20 %);
• Trichoderma viride pers. на среде с волокном К4
(30 %).Анализ частоты встречаемости видов микромице-
тов на волокнах позволил установить доминирующие виды: Ch. globosum, M. plumbeus, A. fumigatus, T. viri-de; p. aurantiogriseum
был выделен из всех типов воло-
кон, но с наименьшей частотой встречаемости.Наименьшее количество видов выделено с сурово-
го волокна (К3), а наибольшее с волокна, отбеленного классическим способом (К4).
По показателю деструкции волокна можно
расположить в следующий нисходящий ряд: 11,3 (К
4)>8,41( k3) > 4,79( k1)>2,59( k2). этот ряд корре-
лирует с показателями частоты встречаемости видов микромицетов.
Показатель деструкции котонизированных волокон
свидетельствует о сохранении ими основной струк-туры. В то же время наиболее сильное повреждение наблюдалось у отбеленного классическим способом волокна (К4), только с этого волокна выделены доста-то
чно активные деструкторы целлюлозы – A. fumigatus
и T. viride. Наименьшее повреждение у волокна (К2), вероятно, связано с биоцидными свойствами оптичес-кого отбеливателя.
Таким образом, установлено, что повреждение
котонизированного конопляного волокна зависит не только от процесса котонизации, но и от вида отделки (суровое, отбеленное, определенным способом, окра-шенное), влияющей на состав грибов, развивающихся на волокнах и вызывающих их деструкцию.
ЛАБОР АТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОДЕГР АДАЦИИ
ПОЛИУРЕТАНА В ПОЧВАХ ЛЕНИНГР АДСКОЙ ОБЛАСТИ
Зачиняев Я.В., Мирошниченко И.И., Зачиняева А.В.
Санкт-Петербургский государственный университет сервиса и экономики,
Санкт-Петербург
Российская военно-Медицинская академия,
Санкт-Петербург
Современный подход к разработке экологически
безопасных полимерных материалов заключается в со-здании биодеградирующих полимеров. Такие материа-лы сохраняют свои эксплуатационные характеристики только в пе-риод использования, а затем трансформи-руются под действием факторов окружающей среды.
Полиурет
аны – это большая группа термопластич-
ных и термореактивных синтетических полимеров, со-держащих в основной цепи макромолекулы уретано-вую
группу – NH-COO-. Биодеградацию полиуретана
инициируют такие процессы, как термическое и ме-ханическая деградация, гидролиз, ко-торые приводят к снижению молекулярной массы полимера. Образу-ющиеся в результате этих процессов низкомолекуляр-ные продукты становятся объек-тами микробиологи-ческой деструкции.
Исследование процесса разложения полиуретана в
торфянисто-дерново-подзолистых почвах Ленинград-ской области в течение 20 месяцев с по-мощью ИК-спектроскопии показали, что полной биодеградации полимера не происходит. Об этом свидетельствует наличие
в ИК – спектрах полос погло-щения, отвеча-
ющих валентным колебаниям ассоциированной ими-но-группы в области 3335 см
–1 (с., шир.) и карбониль-ной группы (амидной) в области 1732 см–1 (с., резк.), γ
(С- Н в арилах) в области 3010 см–1 (с., резк.), γ (С- Н)
в области 2922 см–1 (с., резк.), γ (С- Н) в области 2851
см–1 (с., резк.), γ (С=С в аренах) в области 1597 см–1 (с.,
резк.), деформационным колебаниям δ (NH) в области
1526 см–1 (с., резк.) и др.
О частичной биодеградации полиуретановых об-
разцов свидетельств
ует исчезновение плеча – NH-
своб. в области 3450 см–1, а также полос погло-щения в
ИК-спектрах в области 1665 см–1 (γС=О сопряж.), 1122 см–1
(γС-О-С в простых эфирах), 885 см–1 (γС-С) и одной из по-
лос вал. колеб. С=С ароматич. в области 1600 см–1 .
Среди почвенных микроорганизмов следующие
виды микромицетов были обнаружены вовлеченны-ми в процесс биоразрушения полиуретана: Penicillium
aurantiogriseum, P . nigricans, P . decumbens, P . lutteum, P . variabille сер. funiculosum, Fusarium solani.
эф
фективность ферментативного гидролиза поли-
уретанов микромицетами зависит от их протеолити-ческой активности, т.к. протеазы катализируют рас-щепление уретановой и мочевинной групп полимера. Участвующие в процессе биодеструкции полиуретана микромицеты показали высокую гемо-литическую ак-тивность.
Грибы – агенты биоповреждений 373
Полимерные материалы вошли прочно в нашу
жизнь и получают все большее распространение в раз-
личных областях. Ежегодно их производство увеличи-вает
ся в среднем на 5 %, составляя тысячи и тысячи
тонн. В результате огромное количество пластиковых бутылок, полиэтиленовых пакетов и другого плас-тмассового мусора оказывается на свалках, причем доля его неуклонно возрастает. Проблемой является не только увеличение количества мусора на свалках, но и то, что полимерные материалы отличаются доста-точно высокой стабильностью, поэтому многие иссле-дователи считают, что загрязнение окружающей среды полимерными отходами может явиться предпосылкой глобального экологического кризиса.
Целью данной работы явилась оценка интенсив-
ности биодеструкции полимерных композиционных материалов и обоснование возможности утилизации полимерных отходов путем инкубирования в почве.
В ходе работы были изучены динамика числен-
ности микроорганизмов в процессе инкубации поли-мерных композитов в различных почвах и выявлены доминирующие виды почвенных микромицетов, раз-вивающиеся на поверхности полимеров.
Объектами исследования служили композицион-
ные материалы на основе полимеров разных классов (изучены как термопластичные, так и термореактив-ные полимеры).
Наблюдения за разнообразием микромицетов,
выделяемых в разные сроки с поверхности образцов полимеров показал, что происходит смена доминиру-ющих видов. Установлено, что на поверхности компо-зиционных материалов доминировали микромицеты р.р.Trichoderma, Penicillium, c
lonostahys, aspergillus,
mucor, Fusarium, acremonium, ulocladium. Причем на
композиционных материалах с одинаковой полимер-ной матрицей были обнаружены представители одних и тех же видов микроскопических грибов, вне зависи-мости от типа почв, в которых инкубировались образ-цы. Так, например. с образцов на основе полиуретана были излированы Trichoderma harsianum, Penicillium
cyclopium, clonostahus
solani; на поверхности образ-
цов на основе севилена доминировали Fusarium solani ,
clonostahus
rosea ,Trichoderma harsianum; ulocladium
botrytis, Penicillium cyclopium и Fusarium solani – в ва-
риантах с полиамидом; Trichoderma harsianum, Peni-
cilliu chrysogenum, a
spergillus ochraceus и acr emonium
strictum – были выделены с композитов на основе
полиакрилатов, mucor circinelloides , Trichoderma har-
sianum, Penicillium cyclopium с образцов на основе по-
ливинилового спирта. Выделено 20 видов почвенных микроорганизмов, как биодеструкторов полимерных композиционных материалов.
Таким образом, в модельных экспериментах пока-
зано, что полимерные композиты подвергаются мик-робной деструкции. На деструкцию указывает возрас-тание численности различных таксономических групп почвенных микроорганизмов, изменение структуры материалов и их физико-механических свойств.
Автор приносит благодарность сотруднику ка-
федры мик
ологии и альгологии МГУ имени М.в. ломо-
носов
а А.в.Александровой за помощь в идентификации
микромицетов.ПОЧВЕННЫЕ МИКРООРГАНТЗМЫ КАК БИОДЕСТРУКТОРЫ
ПОЛИМЕРНЫХ КОМПОЗИЦИОННЫХ МАТЕРИАЛОВ
Легонькова О.А.1, Селицкая О.В.2
1 Московский государственный университет прикладной биотехнологии,
Москва
2 РГАУ-МСХА им. к.А.Тимирязева,
Москва
МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ ДЛЯ ПЕРЕР АБОТКИ ОРГАНИЧЕСКОГО СЫРЬЯ
Матросова Л.Е., Сергейчев А.И., Иванов А.А., Иванов А.В.
ФГУ Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных,
казань
Существенную проблему в плане биологической
и химической безопасности представляют много-миллионные органические отходы, промышленного, сельскохозяйственного производства, бытовые и ком-мунальные отходы, которые часто загрязняются воз-будителями инфекционных, инвазионных болезней, химическими токсическими веществами, являются опасными для населения и всего живого мира. Сло-жившаяся в нашей стране ситуация в сфере обраще-ния отходов способствует дальнейшему наращиванию уровня загрязнения окружающей среды, что представ-ляет реальную угрозу здоровья населения. Вопросы утилизации, обезвреживания и обеззараживания от-ходов во многом являются нерешёнными. Несмотря на разнообразие методов, и способов переработки ор-ганического сырья, многие из них имеют недостатки. Так, например физические (ультрафиолетовое облуче-ние, действие ультразвука, ионизирующие излучение, высокотемпературная сушка и др.) и химические (об-работка формальдегидом, аммиаком, карбамидофор-мальдегидной смолой и др.) в основном являются неэ-ффективными, вследствие дефицита соответствующей
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 374
аппаратуры и большого расхода дорогостоящих реа-
гентов. Использование указанных методов не всегда обеспечивает полное обеззараживание органических отходов от патогенной микрофлоры. К тому же проис-ходит загрязнение окружающей среды.
Перспективным и современным методом перера-
ботки отходов является биологический, с использо-ванием специфических популяций микроорганизмов и грибов. В ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (г. Казань) на ос-нове выделенных из почвы микроскопических грибов разработан препарат ускоритель ферментации УФ-1, представляющий собой консорциум микромицетов рода Actinomyces и Candida. Указанные штаммы депо-нированы во «Всероссийской государственной коллек-ции штаммов микроорганизмов, используемых в вете-ринарии и животноводстве» (ФГУ ВГНКИ).
Производственные опыты показали высокую эф-
фективность использования УФ-1 для переработки органических отходов. Через несколько часов после обработки УФ-1 навоза и помета на площадках специ-фический неприятный запах исчез совсем или стано-вился почти незаметным. Использование в процессе переработки органических отходов других методов и средств устраняет неприятный запах за более длитель-ный срок.
В отличие от имеющихся аналогов УФ-1 позволяет
в короткие сроки (30–40 сут в летний период и 40–50 сут в зимний период), без больших производственных затрат и дорогостоящего оборудования переработать и обеззаразить большое количество органических отхо-дов.
В результате обработки навоза и помета получается
органическое удобрение, которое можно эффективно применять как в агропромышленном секторе, так и на приусадебных участках. Апробация препарата прове-дена во многих регионах РФ (в хозяйствах Ростовс-кой и Тульской области, Кукморского, Тюлячинского, Нижнекамского, Зеленодольского, Пестречинского района РТ).
Проведены опыты по определению способности
консорциума микромицетов, входящих в состав пре-парата УФ-1, к утилизации нефтехимических шламов, которые показали, что в течение 1,5–2-х месяцев про-исходит значительное снижение содержание углево-дородов нефти. При этом исчезает запах нефти, а на полученном субстрате происходит нормальный рост и развитие посевных злаковых культур. Содержание нефтепродуктов в конечном продукте не превышало ПДК.
В перспективе имеется вероятность использования
УФ-1 для обезвреживания канализационных стоков, бытовых отходов и загрязненных водоемов.
эф
фективность разработки подтверждена патен-
том РФ (№2298031).
ОЦЕНКА РОЛИ МИКРОМИЦЕТОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ
С ПРОИЗВЕДЕНИЙ ИСКУССТВА
Митковская Т.И., Коваль Э.З.
Национальный научно-исследовательский реставрационный центр Украины,
киев
Обследование более 400 произведений искусства
из 23 музеев Украины, расположенных в различных экологических и климатических регионах, позволило выявить свыше 130 видов микромицетов, относящих-ся к
отделам zygomycota, Ascomycota, Basidiomycota
и Mitosporic fungi. По количеству видов доминирова-ли ро
ды penicillium (44 вида) и Aspergillus (27 видов),
род Mucor представлен 6-ю видами, роды Cladospo-rium, Chaetomium,
Mortietella, Rhizopus – 4-мя видами,
другие роды 1–3 видами.
Следует отметить группу видов из разных классов Al-
ternaria alternata, Aspergillus niger, A. sydowii, A. versicolor, Emericella amstelodami, Chaetomium globosum, Cladospo-ri
um cladosporioides, C. herbarum, paecilomyces variotiі,
penicillium cyclopium, p. brevi-compactum, p. canescens, p.
expansum, p. fellutanum, p. funiculosum, Rhizopus nigricans,
Trichoderma viride, которые доминировали на экспонатах различных групп музейного хранения (станковая живо-пись, рукописи, ткань, кожа, дерево, полихромная скуль-птура, керамика) во всех обследованных музеях.
Основными повреждениями, с которых выделены
микромицеты, были поверхностные мицелиальные налеты, колонии со спорообразованием, а также нару-шения структуры поверхности: на рукописях, книгах, произве
дениях графики – пигментные пятна и налеты,
на темперной и масляной живописи – отслоение лев-каса, шелушение красочного слоя и повреждение по-лотна,
на археологической керамике – сколы, трещи-
ны, пигментные пятна.
Следует отметить, что в монокультуре грибы прак-
тически не встречались, а с наиболее разрушенных экспонатов выделяли комплексы разного видового со-става, что свидетельствовало о потере грибостойкости и старении материалов. Комплексы микромицетов из представтелей разных родов, а то и классов постоянно выделяли из наиболее запыленных предметов.
Специфика работы с произведениями искусства
усложняет определение деструктивных способностей идентифицированных видов грибов, что необходимо учитывать в рекомендациях по дезинфекции каждого обследованного експоната. При оценке выявленных ви-дов мы ориентировались на сопоставление результатов прямого микроскопирования и посевов на питательные среды, скорость ростового процесса, сроки формирова-ния репродуктивных органов и спороношения; приуро-ченность колоний к субстрату, с которого взяли пробу.
Грибы – агенты биоповреждений 375
Обращает на себя внимание обнаружение ряда ви-
дов микромицетов с полифункциональными свойства-
ми
: Aspergillus niger, A. versicolor, penicillium cyclopium,
p. canescens, p. expansum, Rhodotorula glutinis, Alternaria
alternata, Chaetomium globosum, Trichoderma viride, види Rhizopus та Cladosporium, которые проявляют деструк-тивную активность в отношении абиотических субстра-тов и одновременно могут быть причиной оппортунис-тических заболеваний и аллергических состояний. Музейных предметов, не инфицированных мик-
роорганизмами, практически не существует, а коли-чество и видовой состав выявленных микромицетов подтверждают необходимость постоянного микологи-ческого контроля состояния призведений искусства, что поможет не только обеспечить их сохранность, но и расширить представление о санитарном состоянии окружающей среды, а также о распространении отде-льных видов и их агрессивных свойств.
ИСПЫТАНИЯ ПРОМЫШЛЕННЫХ МАТЕРИАЛОВ И ИЗДЕЛИЙ
НА ГРИБОСТОЙКОСТЬ В МОСКОВСКОМ УНИВЕРСИТЕТЕ
Мокеева В.Л., Чекунова Л.Н.
Моск
овский государственный университет имени М.в. ломоносова,
Москва
Микроскопические грибы обладают широким и
лабильным набором ферментов, поэтому могут адап-тироваться к новым типам субстратов и вызывать био-повреждения различных технических материалов и изделий. Губительному действию грибов-технофилов подвержены практически все промышленные мате-риалы, как натуральные, так и искусственно синтези-рованнные. Микромицеты разрушают бумагу, книги, текстиль, кожу, повреждают лаки и краски, стекло, вызывают коррозию изделий из металла. Они выводят из строя электро- и оптические приборы, электронную технику, развиваются в авиационном топливе и т.д.. Микромицеты причиняют ущерб различным отраслям промышленности. В связи с непрекращающимся рос-том научно-технического прогресса проблема биопов-реждений не теряет своей актуальности и в настоящее время. Проблема биоповреждений тесно связана с ис-пытанием новых материалов и изделий на грибостой-кость.
В то время, как на заводах, в научно-исследова-
тельских институтах, крупных библиотеках создаются и существуют специальные лаборатории, в которых изучают грибы, вызывающие биоповреждения, и раз-рабатывают методы защиты от них, в рамках Учеб-но-научного Центра Московского государственного университет
а им.М.В. Ломоносова по переподготовке
и повышению квалификации кадров в области эко-логии, рационального природопользования и охраны природы организован Испытательный центр «Био-стойк
ость» (ИЦ «Биостойкость» экоцентра МГУ). ИЦ
аккредитован Ростехрегулированием на техническую компетентность и независимость (аттестат аккредита-ции № РОСС RU.0001.21КК01). E-mail: info@ecocen-ter.msu.ru.
Утвержденная область аккредитации ИЦ охватыва-
ет следующую продукцию: пластические массы, ком-паунды, смолы, пленочные материалы и изделия из них; резины и резиновые изделия, клеи и герметики, ткани из натуральных, искусственных, синтетических волокон и их смесей, изделия из них; ткани камволь-ные и суконные чистошерстяные и полушерстяные, изделия из них; древесину, древесные материалы, из-делия из них; топлива нефтяные дистиллятные, нефть и нефтепродукты; материалы лакокрасочные и покры-тия на их основе; масла, смазки, смазочно-охлаждаю-щие жидкости, присадки, средства временной проти-вокоррозионной защиты на нефтяной основе; битумы, мастики, грунтовки нефтяные, бумага и картон на цел-люлозной основе, войлок технический и изделия из него; материалы рулонные и мастики кровельные гид-роизоляционные и армирующие, кожи искусственные, технические; ингибиторы коррозии металлов, фунги-циды; биоциды, антисептики; смолы реактивные, по-лиуретановые и системы покрытий с их применением; стеклоткань (с липким слоем), стеклохолст и системы покрытий с их применением; цемент, бетон, железобе-тон и изделия из них; кабели (электрические, силовые, связи, сигнализации); технические изделия.
В соответствии с областью аккредитации ИЦ на
кафедре микологии и альгологии Биологического факультета МГУ проводятся испытания, в том чис-ле сертификационные, материалов и изделий на гри-бостойкость и эффективность средств их защиты от биоповреждений.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 376
Микология, в результате научно-технического про-
гресса, в последней полувековой истории, оказалась
вов
леченной в решение многих проблем. это привело
к возникновению новых направлений исследований, по мере углубления которых сформировались самосто-ятельные разделы микологии. Таким образом, к исход-ной классической микологии, начавшейся с исследо-вания видового разнообразия фитопатогенных грибов, т.
е. с фитопатогенной микологии, а несколько позже –
изучения патогенных для человека грибов-дермато-фитов, положивших начало медицинской микологии, прибавились также ветеринарная микология, пищевая микология, техническая микология, микотоксикология, микодеструкция, микофармацевтика, микологическая безопасность пищевых продуктов и кормов и другие. К сожалению, эти направления до последнего времени носили узкоспециализированный характер, при кото-ром не достаточно уделялось внимания разнообразию биологических особенностей грибов в природе, их из-менчивости под воздействием факторов среды, усло-вий культивирования и производственных процессов.
эт
о относится в первую очередь к грибам имею-
щим широкие трофические и топические связи. Таки-ми грибами являются многие гифомицеты с более или менее выраженной сапротрофностью, легко адаптиру-ющиеся к разнообразным природным и техногенным субстратам и легко культивируемые в искусственных условиях.
Гифомицеты весьма многочисленная, своеобраз-
ная группа митоспоровых грибов (Deuteromycetes). Они самые широко распространенные в естественных и искусственных экосистемах грибы, развивающиеся на всем разнообразии природных и техногенных суб-стратов. По многообразию трофических связей они превосходят все другие известные грибы и входят в со-став почти всех эколого-трофических групп.
Способность многих гифомицетов пластично пе-
реходить от сапротрофизма к паразитизму и наоборот, расширяет их возможность освоения новых экологи-ческих ниш.
Многофункциональность в естественных и искус-
ственных экосистемах, временная и пространственная частота встречаемости гифомицетов не имеют анало-гов среди других систематических групп грибов.
Примечательно, что все перечисленное характерно
для грибов в анаморфной стадии развития. Большинс-тво из них относится к грибам образующим плесень (виды ро
дов Aspergillus, penicillium, Cladosporium, Al-
ternaria, f
usarium и многие другие).
Быстрое накопление биомассы делает сапротроф-
ные гифомицеты удобными объектами для решения многих задач прикладного характера. Аспекты научно-го и прикладного значения гифомицетов охватывают самые разнообразные области науки и практической деятельности человека.
Нередко при решении многих научных и приклад-
ных задач микологии востребованным оказывается один и тот же вид. И в этом просматривается интегри-рующая роль гифомицетов, создающая предпосылки для сближения различных более или менее обособлен-ных раз
делов микологии. это диктует необходимость
знания возможного разнообразия морфо-биологичес-ких проявлений конкретного вида в различных эколо-го-трофических условиях, что, несомненно, повысит эффективность любого микологического исследова-ния.РОЛЬ САПРОТРОФНЫХ ГИФОМИЦЕТОВ
В ИНТЕГР АЦИИ Р АЗДЕЛОВ МИКОЛОГИИ
Осипян Л.Л.
ереванский Государственный Университет,
Армения, ереван
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЛАЗЕРНОЙ ТЕХНОЛОГИИ УДАЛЕНИЯ
МИКОГЕННЫХ ЗАГРЯЗНЕНИЙ С ПОВЕРХНОСТИ ПАМЯТНИКОВ
Парфенов В.А.1, Кирцидели И.Ю.2
1- СПбГЭУ,
Санкт-Петербург
2- Ботанический институт им. в.л.к омарова РАН.,
Санкт-Петербург
Поиск эффективных мер противодействия раз-
рушению
памятников – одна из важнейших научно-
практических задач сохранения культурного наследия во всем мире. Сроки хранения и эксплуатации исто-рических ценностей исчисляются сотнями лет. Впол-не естественно, что многие памятники архитектуры, искусства, жилые здания в нашем городе постепенно разрушаются под воздействием природных и биоло-гических факторов. В этой ситуации возникла настоя-тельная потребность в разработке новых эффективных технологий противодействия биологическим разру-шениям объектов исторического и культурного насле-дия. В настоящее время лазерные технологии находят широкое применение в различных отраслях науки и техники, включая промышленное производство, меди-цину и многие другие, а в последние годы лазеры ста-
Грибы – агенты биоповреждений 377
ли все чаще использоваться и в реставрации объектов
культурного наследия.
В основе лазерной очистки поверхности памят-
ников лежит эффект фотоабляции, заключающийся в удалении тонких слоев обрабатываемого вещества под воздействием высокоинтенсивного лазерного из-лучения и возникающий при достижении некоторого порогового энергетического уровня. Характерной осо-бенностью использования эффекта фотоабляции в рес-таврации является то, что под воздействием лазерного излучения у
даляются (преимущественно – испаряют-
ся) только загрязняющие «инородные» слои, посколь-ку при правильном выборе выходных параметров лазе-ра (длины волны и плотности энергии излучения) этот процесс
является селективным. это проявляется в том,
при достижении лазерным пучком поверхности самого материала, использованного при создании памятника, процесс испарения самопроизвольно прекращается, не вызывая никаких повреждений поверхности. В этом заключается принципиальное отличие метода лазер-ной очистки по сравнению с традиционными методами рест
аврации (механическими и химическими) – лазер-
ная очистка является наиболее щадящей технологией, позволяющей эффективно удалять стойкие поверхнос-тные загрязнения и природные наслоения, не нарушая микрорельеф поверхности материала.
Для проведения экспериментов по удалению био-
логических пленок в нашей работы использовались твердотельные Nd:YAG лазеры импульсно-периоди-ческого действия, работающие на длине волны 1.06 мкм.
Для оценки эффективности лазерной очистки по-
верхностей от биологических поражений в работе были использованы данные, полученные методами высокоразрешающей оптической и сканирующей электронной микроскопии, петрографического, мик-розондового и микологического анализа поверхности до и после лазерной обработки.
При обработке отобранных образцов выходные
параметры лазеров варьировались в зависимости от свойств каждого конкретного образца. При этом для каждого объекта были подобраны свои оптимальные значения плотности энергии и частоты повторения им-пульсов.
В результате проведенных исследований было
показано, что применение лазерной технологии (при отработанных методиках) полностью устраняет мик-роорганизмы, развивающиеся на поверхности различ-ных материалов и по своей эффективности может быть сравнимо с традиционными методами, применяемыми в реставрации. Прорабатывалась также технология комбинированной лазерно-биоцидной обработки, при которой воздействие лазером на поверхность материа-ла осуществлялось уже после ее предварительной об-работки растворами биоцидов.
МИКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В ОБЛАСТИ
КОНСЕРВАЦИИ КУ ЛЬТУРНОГО НАСЛЕДИЯ
Ребрикова Н.Л.
Государственный научно-исследовательский институт реставрации,
Москва
При обсуждении проектов введения отопления в
древние неотапливаемые памятники архитектуры воз-никают опасения, что повышение температуры акти-визирует развитие микроскопических грибов и других микроорганизмов на стенописи и строительных мате-риалах. Действительно, если при введении отопления в памятники каменного зодчества со сложными архи-тектурно-планировочными решениями не учитыва-ются теплофизические свойства строительных конс-трукций, например, необходимость утепления сводов, наличие «мостиков холода», существование зон с не-достаточной циркуляцией воздуха, отсутствие вытяж-ных устройств, то следствием этого являются вспышки развития микромицетов. С повышением температуры также усиливается капиллярный подсос влаги строи-тельными конструкциями, если причина переувлажне-ния
– отсутствие или повреждение гидроизоляции.
С целью предупреждения активизации развития
микроорганизмов в Дмитриевском соборе г. Владими-ра, памятнике архитектуры XII века, и в Рождественс-ком соборе Ферапонтова монастыря, памятнике архи-тект
уры конца Xv века, проводились микологические исследования одновременно с теплофизическими ис-следованиями при проведении мероприятий по нор-мализации тепло-влажностного режима конструкций и введении так называемого «ограниченного подог-рева». Мониторинг уровня численности грибов и дру-гих гетеротрофных микроорганизмов, развивающихся на стенописи и строительных материалах, позволяет проследить изменение их влагосодержания при из-менении параметров микроклимата в памятнике. Раз-ные группы и виды микроорганизмов имеют разную устойчивость к снижению водного потенциала среды, поэтому смена доминирующих форм также отражает изменение влагосодержания субстрата, на котором они развиваются.
В составе микобиоты белого камня и кладочных
растворов Дмитриевского собора доминирующим формами были Sporotrichum (Tritirachium) album, verticillium lecanii,
Acremonium charticola, Acremonium
sp., Scopulariopsis brevicaulis, S. brumpti, виды рода Cladosporium, Aspergillus versicolor. Причем в пробах, взятых дальше от уровня пола, в некоторых случаях плотность популяции Sporotrichum album была выше
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 378
90 %, в пробах, взятых ближе к уровню пола, домини-
ровали более влаголюбивые виды родов Acremonium, verticillium, Scopulariopsis,
но встречался также S.
album и другие виды. Как показали результаты мони-торинга, регулярно проводившегося в течение семи лет после введения отопления, на большинстве тестируе-мых участков строительных материалов в Дмитриевс-ком соборе и на всех тестируемых участках стенописи в Рождественском соборе снизилась численность мик-роскопических грибов и других гетеротрофных мик-роорганизмов, полностью элиминировались наиболее влаголюбивые формы.
Результаты изменений влажностного режима и
распределения влаги в конструкциях, полученные с помощью использования биосенсоров (определение численности и состава микобиоты белого камня) в не-которых случаях отличались от результатов, получен-ных с помощью электронных влагомеров. На высоте 120
– 180 см от уровня пола влагосодержание белого
камня по показаниям влагомера ВСКМ-12 было выше, чем на ниже расположенных участках, выше этого уровня резко снижалось. Данные микологических ана-лизов
указывали на другое распределение влаги – пос-
тепенное уменьшение влагосодержания в вертикаль-ном направлении. На показания влагомера оказывает влияние количество водорастворимых солей, которые концентрировались в зоне активного испарения на высоте
120 – 180 см, поэтому данные, полученные с
помощью микологических исследований, оказались более объективными.
ОСОБЕННОСТИ ДИНАМИКИ ИЗМЕНЕНИЯ ЧИСЛЕННОСТИ
МИКРОМИЦЕТОВ В КНИГОХР АНИЛИЩАХ
Сергеева Л.Е.
Российская национальная библиотека,
Санкт-Петербург
Микромицеты являются имманентной составля-
ющей книгохранилищ. Известно, что наличие незна-чительных количеств этих организмов в воздушной среде не является опасным для иммунокомпетентных людей. В то же время повышенная контаминация кни-гохранилищ микромицетами может быть причиной ал-лергических заболеваний и микозов обслуживающего персонала. Известна корреляция уровня контаминации воздуха и заболеваемости людей в ряде производс-твенных помещений.
Ранее нами было отмечено, что преобладающее
большинство штаммов, выделенных из различных изученных фондов библиотеки, принадлежат широко распространенны видам грибов. Были показаны струк-туры микромицетных сообществ в основных типах библиотечных книгохранилищ.
Исследуемые нами организмы способны выжи-
вать в достаточно широком диапазоне значений аби-отических и биотических параметров. Причем пос-ледние представляют весьма существенную роль в повышении интенсивности рассообразовательных процессов в популяциях микромицетов, что приво-дит к возникновению новых аллелей вирулентности и формированию новых таксонов условно-патогенных грибов.
В настоящее время нами проведен математический
анализ данных полученных в двух близких по услови-ям хранения помещениях библиотеки. Исследование роли абиотических параметров (температура, влаж-ность, освещенность, конвективные потоки воздуха и др.) осуществлялось отдельно по 12-ти изучаемым точкам. В результате в ряде случаев удалось выявить (на уровне значимости 0,9) влияние отдельных фак-торов на количество жизнеспособных спор в воздухе. Отмечено, что в зависимости от сезонов года значение коэффициентов корреляции сильно варьирует. Наря-ду с колебаниями численности жизнеспособных спор грибов в воздушной среде, отмечены изменения струк-туры грибного сообщества. При этом обнаружено по-явление новых доминирующих и часто встречающихся видов. Таким образом, колебания значений абиотичес-ких параметров, являясь факторами адаптации иссле-дованных грибов, могут способствовать изменению их ареала.
МИКРОМИЦЕТЫ В ВОЗДУХЕ эКСПОЗИЦИОННЫХ
ЗАЛОВ ГОСУДАРСТВЕННОГО эРМИТАЖА
Смоляницкая О.Л.
Государственный Эрмитаж, лаборатория биологического контроля,
Санкт-Петербург
Современный подход к сохранению культурного на-
следия требует разработки комплекса мер профилакти-ческого характера, частью которого является микологи-ческий контроль музейных помещений. С этой целью в Го
сударственном эрмитаже с 1994 г. проводятся иссле-
дования микобиоты залов, хранилищ и вентиляцион-
Грибы – агенты биоповреждений 379
ных систем. Установки, обеспечивающие вентиляцию,
температуру и влажность в музейных помещениях, могут оказывать решающее влияние на количество и видовой состав микромицетов. Для регулярных на-блюдений были выбраны два экспозиционных зала: с системой кондиционирования воздуха и с воздухо-ото-пительной системой.
Результаты исследований показали, что количество
микромицетов в воздухе этих помещений различалось. В зале с системой кондиционирования воздуха числен-ность микромицетов была ниже и менее подвержена колебаниям в течение дня, чем в зале, оборудованном воз
духо-отопительной системой.
Сравнение видового состава грибов в этих помеще-
ниях также обнаружило различия между ними. В зале с системой кондиционирования воздуха было обнару-жено 55 видов, в зале с воздухо-отопительной систе-мой
– 70 видов микромицетов.
Расчеты частоты встречаемости и плотности по-
пуляции микромицетов показали, что типичным до-минирующим видом в обследованных залах является Penicillium aurantiogriseum, часто встречающимися
видами
– aspergillus versicolor, cladosporium herbarum
и eur otium repens . Остальные виды микромицетов от-
носятся к редким или случайным.
В зале с воздухо-отопительной системой удель-
ное
обилие рода penicillium было значительно выше
и составляло 71.7 %, в то время как на долю рода Aspergillus приходилось 4.9 %. В зале, оборудованном системой кондиционирования воздуха, удельное оби-лие ро
да penicillium составляло 50.1 %, однако доля
рода Aspergillus была значительно выше и составляла 29.9
%.
В зале, оборудованном системой кондиционирова-
ния воздуха, плотность популяции и частота встречае-мости микромицетов asper
gillus versicolor и eur otium
repens была выше, чем в зале с воздухо-отопительной системой. Присутствие большего количества этих микромицетов можно объяснить наличием в системе
кондиционирования увлажняющей установки, а так-же более высокими значениями относительной влаж-ности воздуха в залах с кондиционированием воздуха. Представленность Penicillium aurantiogriseum и clado-
sporium
herbarum , наоборот, была выше в залах с воз-
духо-о
топительной системой.
Полученные нами результаты пока не позволяют
однозначно оценить влияние кондиционирования на состояние воздуха музея. С одной стороны, сравне-ние результатов исследований воздуха в экспози-ционных залах позволяет сделать вывод о меньшем числе видов грибов и невысоком количестве грибных пропагул в зале с кондиционированием воздуха. С другой стороны, нельзя не отметить увеличение доли и численности рода asp
ergillus в этих помещениях.
Очевидно, что для обеспечения микологической безо-пасности вентиляционные системы и климатические установки музея должны находиться под постоянным наблюдением.
ИЗУЧЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАР АТА СЕПТОДОР НА МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ
ГРИБЫ – ДЕСТРУКТОРЫ ИЗДЕЛИЙ И МАТЕРИАЛОВ
Суббота А.Г.
Институт микробиологии и вирусологии
им. Д.к
.заболотного Национальной АН Украины,
киев
Средство Септодор, действующим веществом ко-
торого является комплекс четвертично-аммонийных солей
в составе: алкилдиметилбензиламоний хлорид –
20,0 %; октилдецилдиметиламоний хлорид – 15,0 %; диоктилдимитиламоний хлорид – 6,0 %; дидецилди-метиламоний хлорид
– 9,0 %; инертные компоненты –
50,0 %, рекомендован для применения в медицинской практике в качестве дезинфектанта против вирусов, грамотрицательных и грамположительных бактерий, грибов рода Candida и Trichophiton. Согласно «Гигие-нического заключения», Септодор разрешено исполь-зовать в Украине как моющее и дезинфицирующее средство для обработки оборудования, инвентаря, посуды и помещений в пищевой и фармакологичес-кой промышленности, лечебно-профилактических уч-реждениях, на коммунальных объектах и транспорте. Септ
одор относится к Іv классу опасности в условиях
ингаляционного воздействия в насыщенной концент-рации, обладает низкой токсичностью и слабым специ-фическим запахом. Концентрированный препарат при местном воздействии раздражает кожу и слизистые оболочки глаз, но его рабочие растворы в концентра-ции 0,025–0,2
% – не имеют раздражающего действия
на кожу. Препарат поверхностноактивен, не повреж-дает металлы, стекло, полимерные материалы, резину и может представлять интерес для использования его при обработке поверхностей, контаминированных или пораженных микроскопическими грибами.
В связи с этим целью настоящей работы было
изучение действия препарата Септадор на 8 видов микромицетов-биодеструкторов: alternaria
alternata;
chaetomium globosum; cladosporium cladosporioides;
Geotrichum candidum; aspergillus niger; aspergillus
terreus; Penicillium cyclopium; Trihoderma viride . На-
шей задачей было определить фунгицидные и фунгис-татические концентрации препарата по отношению к данным культурам.
Выращивание грибов и приготовление споровой
суспензии проводили в соответствии с ГОСТ 9.048-89. Использовали 15 суточные чистые культуры, из кото-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 15 380
рых получали суспензии плотностью 106 спор в 1 см3
стерильной дистиллированной воды. Фунгицидное действие препарата определяли методом серийных разведений в жидкой питательной среде. Для каждо-го из 8 видов микромицетов готовили ряд, состоящий из 11 пробирок. В каждую пробирку вносили по 1 см3 жидкой питательной среды. В первую пробирку ряда добавляли
1 мл 8 % Септодора. Методом последова-
тельных разведений получали 10 концентраций Сеп-то
дора: 4 %; 2 %; 1 %; 0,5 %; 0,25 %; 0,125 %; 0,06;
0,03 %; 0,015 %; 0,007 %. Последняя пробирка ряда была предназначена для контрольного роста культуры без действия препарата. Суспензию спор каждой куль-туры по 1 см3 вносили в пробирки, которые выдержи-вали в термостате в течение 3 суток при оптимальной, для роста грибов, температуре. Учет результатов про-водили при появлении роста контрольной культуры. Затем определяли концентрацию, при которой наблю-далась абсолютная задержка роста испытуемого вида, и считали эту концентрацию для него фунгистатичес-кой. Из пробирок, где рост грибов не появлялся, дела-ли пересевы на жидкую питательную среду (к 1 см3 среды добавляли 0,01 мл суспензии из испытуемого разведення). Отсутствие роста на 7 сутки после иноку-ляции давало основание признать данную концентра-цию фунгицидной.
В результате исследований установлены фунгис-
татические (фск) и фунгицидные (фцк) концентрации средства Септодор относительно испытанных нами видов. Среди них высоко чувствительным оказался вид Trihoderma viride. Рост этого гриба угнетался при концент
рации (фск) 0,007 % и не возобновлялся при
концентрации (фцк ) 0,015 %. К средне чувствитель-ным видам
– отнесены Alternaria alternata, Chaetomium
globosum, Cladosporium cladosporioides, penicillium
cyclopium, рост которых угнетался при концентрации препарат
а (фс) 0,015 % и не возобновлялся под дейс-
твием (фц)
0,03 %. С низкой чувствительностью к Сеп-
тодору были грибы рода Aspergillus: для Aspergillus terreus ф
унгицидной была концентрация 0,06 %, для
Aspergillus niger – 0,125 % тогда как фунгистатичес-кая
концентрация для них была одинаковой – 0,03 %.
Наибольшая стойкость к действию препарата наблю-далась у Geotrichum candidum. Рост гриба угнетался под
действием 0,125 % концентрации Септодора и не
возобновлялся при концентрации 2,0 %.
Таким образом, установлено, что по отношению
к изученным грибам: Alternaria alternata, Chaetomium globosum, Cladosporium cladosporioides, Geotrichum candidum, Aspergillus niger, Aspergillus terreus, penicillium
cyclopium, Trihoderma viride препарат Сеп-
тодор обладает фунгицидным действием в диапазоне концент
раций от 0,015 % до 2,0 %. этот факт затруд-
нит использование данного препарата в качестве фун-гицида, так как применение малых концентраций не будет эффективным без идентификации микобиоты обрабатываемой поверхности. При использовании же мак
симальной концентрации – от 2,0 % до 3,0 % – уве-
личивается риск для здоровья и повышается стоимость обработки.
МИКРОМИЦЕТЫ, ПОВРЕЖДАЮЩИЕ КОЖУ ПЕРЕПЛЕТОВ
Хазова С.С., Великова Т.Д., Лебедева Е.В.
Федеральный центр консервации библиотечных фондов,
Санкт-Петербург
Российская национальная библиотека,
Санкт-Петербург
В течение нескольких лет в Российской националь-
ной библиотеке (РНБ) исследовали микробиологичес-кую зараженность пергаментных, кожаных и ледери-новых переплетов. Микромицеты выделяли с редких фондов РНБ и библиотек России разных городов: Астрахани, Барнаула, Вологды, Воронежа, Иванова, Курска, Тюмени, Читы. Пробы отбирали различными методами: микрососкобами, стерильными тампона-ми, влажными стерильными бумажными отпечатками, бакпечатками. Всего выделено 46 видов микромице-тов, исследовали 16 видов, наиболее активно растущие на коже. Пять из них изолировано с пергамента asper
–
gillus
versicolor Tirab , a. ustus (Bain.)Thom , Penicillium
camemberti Thom, P . chrysogenum Thom , P . terrestre
Jens
., один – o ospora lutea kamyschko – с ледерина,
ост
альные 10 видов – с кожи: a. fumigatus fres., a. ni-
ger v.Thiegh., P . aurantiogriseum Dierck ., P . funiculosum
Thom
, P . janthinellum Biour ge, P . ochro-chloron Biourge, P .
pulvillorum Turf., P . purpurogenum Stoll , P . variabile
Sopp
, Trichoderma viride pers .
Исследовали кожу, применяемую для перепле-
тов: КРС-1– кожа крупного рогатого скота, обувная, с нитролаковым покрытием, шагреневого тиснения (серая);
КС-1 – свиная, хромового дубления, подкла-
дочная
(коричневая); КРС-2 – телячий опоек, хромо-
вого дубления, галантерейная, с нитролаковым покры-тием (черная). В процессе роста 16 микромицетов на коже в течение 120 сут определяли с помощью газо-вой хроматографии образование конечного продукта разлож
ения углеродной составляющей – углекислого
газа, изменение массы образцов расчетным методом и взвешиванием до и после культивирования грибов. Все выделенные грибы способны использовать кожу в качестве единственного источника углерода и энергии: количество образующегося углекислого газа в процес-се
роста – от 8 до 12 %. Максимальная концентрация
Грибы – агенты биоповреждений 381
СО2 при росте на КРС-1 в среднем (15,7 %) выше, чем
при росте на коже КС-1 (10,3 %) и КРС-2 (12,6 %).
Потеря массы кожи, определенная весовым мето-
дом, наиболее точно отражает состояние материала после деструкции микромицетами. Кожа частично пот
ребляется грибами в процессе их роста (1–3 % в
течение 120 сут), частично разрушается под действием разрастающег
ося мицелия (до 6–7 %). Первый процесс
характеризуется расчетным количеством биомассы и потери
массы кожи, второй – количеством разрушен-
ной массы образцов.
Однако не наблюдалось прямого соответствия
между концентрацией выделяемого СО2 и потерей массы образцов, определяемой весовым методом. По сравнению с тонко выделанной кожей КС-1 и КРС-2 механическое повреждение грибами плотной кожи КРС-1 более затруднено. На образцах сортов кожи КС-1 и КРС-2 в процессе роста микромицетов на-блюдали утраты материала в виде мелких частичек и крошек, отделившихся со стороны бахтармы. Поэто-му несмотря на более низкое содержание СО2 потери массы образцов КС-1 и КРС-2 в большинстве случаев в 1,5–3 раза больше, чем потери массы образцов КРС-1. В среднем соотношение потери массы кожи, опре-деляемой весовым методом, к расчетному составляет 1,57. Потеря массы образцов в результате разрушения кожи (механического отделения при развитии мице-ли
я) у образцов КС-1 в среднем 1,4 %, у образцов
КРС-2 – 2,6 %.
В результате проведенных исследований установ-
лено, что наиболее активными деструкторами кожи по суммарной потере массы и активности выделения уг-лекислого
газа из 16 изученных культур были A. niger,
A. ustus, p . ochro-chloron, p . chrysogenum.
МИКРОМИЦЕТЫ ВОЗДУХА МУЗЕЙНЫХ ПОМЕЩЕНИЙ
И ВЫЗВАННЫЕ ИМИ НЕГАТИВНЫЕ ПОСЛЕДСТВИЯ
Элоян И.М.1, Оганесян Е.Х.2, Акопян Л.А. 3, Мнацаканян Э.А.1
1 ереванский госуниверситет, кафедра ботаники,
ереван, Армения
2 Городская клиническая больница n3,
ереван, Армения
3 Государственный музей природы Армении,
ереван, Армения
В настоящее время весьма остро стоит проблема
защиты как помещений жилых зданий, библиотек, ар-хивов, так и музеев от различных патогенных микроор-ганизмов, в частности микроскопических почвенных грибов, видовое разнообразие и численность которых резко возросло в связи с сильной загрязненностью воз-духа в городах, и частотой экстремальных ситуаций, способствующих их росту и распространению.
Микологическое обследование, проведенное в Госу-
дарственном музее природы Армении выявило загряз-ненность воздуха помещений диаспорами агрессивных микодеструкторов. При отсутствии вентиляционной системы, занесенные токами воздуха в помещения му-зея микромицеты, легко адаптировались на экспонатах, в состав которых входят разнообразные материалы ор-ганического и минерального происхождения, служащие для них источником питания. В результате наблюдалось резкое возрастание заспоренности воздуха грибами.
Микологический анализ воздуха, проведенный с
помощью устройства ПУ-1Б автоматического отбора спор показал, что заспоренность воздуха помещений залов с экспонатами превышает допустимые нормы, т.е. 500 КОЕ/м
3. Подобная же загрязненность воздуха
была зарегистрирована в помещении запасника. В воз-духе видеозала количество колониеобразующих еди-ниц в 1м
3 воздуха составило 270 КОЕ/м3, что считается
в пределах допустимой нормы. На экспонатах были об-наружены налеты, различно окрашенные пятнистости, вызванные вредоносным воздействием грибов.В числе доминирующих видов отмечены потенци-
ально
патогенные виды Aspergillus niger, penicillium
verrucosum var. cyclopium, p. canescens, p. viridicatum,
p. janthinellum, Alternaria alternata, Cladosporium
herbarum.
Пребывание в помещениях музея, где заспорен-
ность воздуха превышала допустимые нормы, серьез-но отразилось на здоровье сотрудников. В отдельных случаях работники музея жаловались на головную боль, тяжесть и сильный зуд в ушах, жжение в горле и кашель, схожий с симптомами бронхиальной астмы, вызванные различными возбудителями микотических заболеваний.
Так, в мазках из пораженного горла сотрудницы
обнаружено сообщество Aspergillus niger, A. nidulans, penicillium
verrucosum var. cyclopium. Поражение уш-
ной полости другой сотрудницы было вызвано вида-ми p. expansum
и Alternaria аlternata. Сочетание видов
Aspergillus niger и p. terrestre вызвало понижение слу-
ха.
Обильные беловато – желтые выделения – следс-
твие жизне
деятельности сообщества видов A. niger, p.
viridicatum, p . canescens, Alternaria alternata.
Лечение микозов представляет определенные
трудности и требует комплексной терапии, вклю-чая воздействие на этиологический фактор (про-тивогрибковые препараты), ослабление основных патогенетических факторов, гипосенсибилизация организма, повышение неспецифической иммунной защиты.
При исследовании роста колоний микромицетов
на питательных средах в основном используется мате-
матическая модель линейного роста радиуса колонии Д.Перта. Вместе с тем многие исследователи отмечали в опытах отклонения от линейного закона роста. При математическом моделировании в этом случае выдви-гались различные гипотезы. Распространенной гипо-тезой отклонений от линейного роста и образования пространственных структур у колоний является «гипо-теза отрицательного хемотаксиса», согласно которой микромицеты в процессе жизнедеятельности выделя-ют токсичные продукты метаболизма, ингибирующие клеточное деление.
На наш взгляд отклонения от линейного типа рос-
та связано со многими причинами. Анализ показыва-ет, что разница в динамике роста колоний может быть также связана с тем, что микромицеты имеют разный тип поведения после деления. Попытаемся оценить рост колонии с течением времени, рассматривая дан-ную задачу, как задачу диффузионного типа. Пусть клетки через некоторый промежуток времени делятся и новые клетки совершают «смещения» относительно родительской. Данный процесс роста колонии напоми-нает хаотическое движение частиц и можно восполь-зоваться теорией случайных блужданий. Рассмотрим упрощенный вариант модели случайных блужданий, когда частицы (клетки) совершают случайные пере-мещения (последовательные шаги r
i), причем средняя
длина этих перемещений ∆ за одинаковые промежутки времени не изменяется. Найдем, как далеко «уйдут» частицы за время t от исходного положения. Примем,
что каждый очередной скачок клетка делает через рав-ные промежутки времени ф и, следовательно, за время t она сделает n = t/τ скачков. Предсказать местонахож-
дение любой отдельной клетки через определенный промежуток невозможно, речь может идти только о смещении, усредненном по всем клеткам, т.е. нужно найти среднее квадратичное отклонение от начального положения частицы. Для среднего квадрата расстоя-ния можно записать:
Определяющим в этой сумме является второе сла-
гаемое, в зависимости от поведения клеток после де-ления это слагаемое дает разный результат. Если клет-ки двигаются так, что происходит случайность выбора
угла на каждом последующем шаге, то
.
В этом случае получаем, что
(здесь Г = 1/τ), поэтому можно сказать, что средний
радиус роста колонии бактерий пропорци-
онален корню квадратному из времени: (соот-
ношение эйнштейна).
Отметим, что именно такой по-
рядок роста колоний характерен для многих колоний,
выращиваемых на питательных средах.
Если при делении дочерние клетки двигаются по
радиальному направлению или мало отличающегося от него, то получается линейный закон роста колонии
. этот рост также характерен для колоний, у кото-
рых физико-химические условия среды приводят к де-терминиров
анному закону движения клеток – по ради-
альному направлению. Именно такое поведение было обнаружено нами в стрессовой ситуации, когда в поч-ву вносилась нефть. И если в контрольных вариантах явно наблюдались отклонения от линейного роста, то в нефтезагрязненных почвах рост подчинялся линейно-му закону (коэффициент корреляции более 0,95). Раздел 16
ГРИбы эКСТРЕМАЛьНых МЕСТООбИТАНИй
МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ Р ОСТ А КОЛОНИЙ
МИКРОМИЦЕТОВ В УСЛОВИЯХ СТРЕССА
Водопьянов В.В.1, Киреева Н.А.2, Идиятуллина А.Р.1
1 Уфимский государственный авиационный технический университет,
Уфа
2 Башкирский государственный университет,
Уфа
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 16 384
Получение препаратов биологически активных
веществ – сложный и многоступенчатый процесс, на-
чальными этапами которого можно считать поиск и выделение грибов-антагонистов в природе, изучение спектра антимикробного действия выделенных куль-тур. Исследования некоторых актиномицетов и грибов, выделенных из обычных почв и способных к росту на щелочных средах, показали наличие у них антибиоти-ческих веществ с необычными свойствами и спектром действия. эти
метаболиты вырабатывались изолятами
только при культивировании в щелочных условиях.
Была исследована способность проявлять антимик-
робные свойства у галоалкалотолерантных грибов (22 изолята, 12 видов), выделенных из образцов щелочных засоленных почв Центральной Азии (Кулундинская степь, Кункурская степь, район оз. Байкал и северо-вос-точная Монголия) и культивируемых на щелочной бу-ферной среде. Антимикробную активность определяли методом диффузии в агар (метод дисков). В качестве тест-объектов использовали 14 штаммов микроорганиз-мов (грамположительные (8) и грамотрицательные(3) бактерии; грибы (3)); биологические испытания прово-дили с концентрированными экстрактами веществ, вы-деленных как из мицелия, так и из нативного раствора (всего проанализировано 88 концентратов).
Исследование показало, что биологически актив-
ные вещества содержатся как в концентратах, полу-ченных из мицелия, так и в концентратах из нативного раствора, но с преобладающей антимикробной актив-ностью в мицелиальных экстрактах. Интересно отме-тить, что экстракты, полученные из изучаемых культур грибов, оказались наиболее активными в отношении Staphylococcus aur
eus, micrococcus luteus и asper gillus
niger и практически неактивными в отношении candia
albicans
и escherichia coli.
Для изолята Heleococcum alkalinum был выявлен
широкий спектр активности, зоны подавления соста-вили от 8 до 12 мм по отношению к bacillus
mycoides,
Pseudomonas aeruginosa и a. niger .
Ряд изолятов показал антибиотическую активность
к грамположительным бактериальным тест-культурам (b.
subtilis, m. luteus, S. aureus и S. aureus (клиничес-
кий изолят)): у изолята acr emonium sp. sect. nectrioidea
з
оны подавления составили 7–18 мм; для изолята acr e-
monium sp. зоны подавления составили от 7 до 21 мм.
Для некоторых культур грибов характерен узкий
спектр биологической активности. Например, изоляты acr
emonium rutilum и Heleococcum alkalinum активны
по отношению к a. niger ; изолят acremonium sp. sect.
nec
trioidea – по отношению к Saccharomyces cerevisiae .
В результате работы было показано, что изоляты
галоалкалотолерантных грибов при культивировании на щелочных средах способны продуцировать антиби-отические вещества, обладающие как антибактериаль-ной активностью с широким и узким спектром дейс-твия, так и антифунгальной активностью.СПЕКТР АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ
У МИКРОМИЦЕТОВ ЩЕЛОЧНЫХ ЗАСОЛЕННЫХ ПОЧВ
Георгиева М.Л.1,2, Толстых И.В.1, Биланенко Е.Н.2, Катруха Г.С.1
1 ГУ НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе РАМН,
Москва
2 МГУ им. М.в. ломоносова, Биологический факультет,
Москва
МИКРОМИЦЕТЫ ТОРФЯНИКОВ ВЕРХОВЫХ БОЛОТ
НА ПОБЕРЕЖЬЕ КАНДАЛАКШСКОГО ЗАЛИВА БЕЛОГО МОРЯ
Грум-Гржимайло О.А., Биланенко Е.Н.
Моск
овский государственный университет имени М. в. ломоносова,
Москва
Болота занимают примерно 350 млн. га на повер-
хности
Земли. Торфяные болота – это крупнейший
депозитарий устойчивого органического углерода. Болота имеют отношение к проблеме глобального изменения климата. Не менее трети мирового пула углерода торфов приходится на Россию, из которых 30 млн.
га – на ее европейскую часть. Торфяники яв-
ляются важными элементами ландшафтов таежной зоны, в отдельных регионах которой они занимают более половины территории и обусловливают ход динамики природных процессов. Доминирует в этой области верховой тип болот. Участие микроорганиз-мов в разложении растительных остатков торфяников сильно затруднено, как из-за специфических условий болотных экосистем (низкие значения рН, анаэробные условия, низкие значения температуры), так и из-за особого химического состава растений-торфообра-зователей (углеводы, липиды, белки, лигнин в самых разнообразных сочетаниях, а также вещества-антисеп-тики
– фенолы, фенолкарбоновые кислоты). Особенно
устойчивыми к разложению микроорганизмами явля-ют
ся сфагны – доминирующие мхи верховых болот.
Ведущая роль в первичной деструкции сфагновых мхов принадлежит грибам, которые мало изучены как с точки зрения биоразнообразия, так и функционирова-ния в экстремальных условиях данных экосистем. Мы провели исследование микобиоты трех торфяников из верховых болот на побережье Кандалакшского залива
Грибы экстремальных местообитаний 385
Белого моря в окрестностях Беломорской биологичес-
кой станции им. Н. А. Перцова МГУ . Для этого были отобраны 25 образцов живой части сфагнума, очеса и торфа всего профиля болот, с разной степенью разло-жения. Для культивирования использовали как стан-дартные, так и селективные среды на основе цитрат-ного буфера (pH 4) и вытяжки сфагнума. В результате изолировали микромицеты, среди которых идентифи-цирова
ли 50 видов: 2 вида аскомицетов, 4 – зигомице-
тов, 34 анаморфных вида и 9 стерильных мицелиев. Среди анаморфных грибов наибольшее число видов принадлежит роду Penicillium , секциям monoverticil
–
lata и biverticillata-Symmetrica . Зигомицеты представ-
лены родами umbelopsis, m ucor, аскомицеты – родами
zythiostroma и Sclerotinia. Доминировали виды Tolypo-cladium inflatum, c
ladosporium herbarum, Penicillium
spinulosum. Наряду с широко распространенными
выделены ацидофильные виды грибов из рода Oidio-
dendron. Отмечено наличие грибных диаспор по всему
профилю торфяников. Способность выделенных ви-дов развиваться в условиях анаэробиоза исследуется. Мы изучили образцы очеса и живой части сфагнума с помощью сканирующего электронного микроскопа и обнаружили на разлагающихся участках интенсивное развитие мицелия и спороношение грибов. На живой части мицелия не обнаружено совсем или он присутс-твов
ал в очень незначительных количествах. это на-
глядно демонстрирует активное участие грибов в де-струкции еще не погруженных в болотную топь частей сфагновых мхов.
ГИДРОЛИТИЧЕСКИЕ ФЕРМЕНТЫ ГАЛОАЛКАЛОФИЛЬНОГО
АСКОМИЦЕТА Heleococcum alKalinum
Грум-Гржимайло А.А., Биланенко Е.Н.
Моск
овский государственный университет имени М.в. ломоносова,
Москва
Щелочные засоленные почвы являются уникаль-
ными природными экосистемами и, являясь аналогами содовых озер, характеризуются стабильно высокими значениями рН и высокими концентрациями раствори-мых солей, такими как NaCl, Na
2CO3, NaHCO3, Na2SO4.
Микробное сообщество в таких местообитаниях изуче-но очень детально, однако практически ничего не извес-тно о грибах, способных расти в условиях рН выше 10, а тем более о продуцируемых ими ферментах. Приме-ры алкалофилии среди грибов чрезвычайно редки, хотя данные местообитания достаточно широко распростра-нены по всему миру. Один из доминирующих в содовых солончаках вид аскомицетов описан как Heleococcum
alkalinum Bilanenko et Ivanova sp. nov. с анаморфной
стадией типа acr
emonium sect. nectrioidea (ascomycetes,
H
ypocreales, bionectriaceae ). Жизненный цикл гриба и
его морфологические особенности были детально изу-чены. Оптимум роста на жидких и агаризованных сре-дах наблюдался при значениях рН от 8,5 до 10,5.
Известно, что алкалофильные бактерии являются
активными продуцентами гидролитических ферментов, которые широко используются в различных отраслях промышленности, в первую очередь, при производстве детергентов. Мы проверили способность данного гриба секретировать внеклеточные протеолитические фер-менты, амилазы, липазы, глюкоамилазы, сохраняющие активность в широком диапазоне значений рН. Мицелий Heleococcum alkalinum был успешно иммобилизован в
растворе поливинилового спирта. Иммобилизованные клетки гриба характеризовались сходным или более вы-соким уровнем секреции экзоферментов по сравнению со свободными клетками. Показано, что иммобилиза-ция не повлияла отрицательно на жизнеспособность клеток гриба. Протеолитическая активность достигала 10
000 ед/л, амилолитическая – 1600 ед/л, липолитичес-
ка
я – 3500 ед/л, глюкоамилазная – 900 ед/л. Показана
возможность повторного применения иммобилизован-ного биокатализатора на основе данного гриба. Было выявлено, что амилолитические и протеолитические ферменты Heleococcum alkalinum активны в широком
диапазоне значений рН, а протеолитические ферменты имеют максимальный уровень активности при рН 10, что является очень важным свойством для применения их в промышленности.
ОЛИГОКАРБОТОЛЕР АНТНЫЕ ГРИБЫ В УСЛОВИЯХ 10-КМ ЗОНЫ ОЧУЖДЕНИЯ.
Жданова Н.Н., Павличенко А.К.
Институт микро
биологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАН Украины,
киев
Объектом нашего исследования были олигокарбо-
толерантные микроскопические грибы, выделенные из экстремальных по условиям существования экото-пов – помещений 4-г
о блока ЧА эС.
Результаты проведенной работы позволили вы-
делить ряд эколого-физиологических особенностей таких грибов, по которым можно определить их при-надлежность к этой эколого-трофической группе орга-низмов. К ним относятся:
1. уст
ойчивость к пониженному (до 0,1 – 0,01 г/л и
менее) содержанию источника углерода органичес-кой природы в питательной среде. Последнее со-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 16 386
провождается значительными морфологическими
изменениями, которые были разными у Hormoconis
resinae и видов рода cladosporium ;
2.
низкие значения удельной скорости роста (м) на
оптимальной питательной среде (20 г/л), которые в условиях стационарного культивирования – поряд-ка 0,004 – 0,009 ч
-1 и в условиях глубинного культи-
вирования – 0,03 – 0,06 ч-1 ;
3. способность расти и образовывать микроколонии
(Hormoconis resinae, cladosporium sphaerosper-
mum) на силикагельной среде;
4. у
меньшение накопления грибной биомассы на сре-
де с 20 и 1 г/л глюкозы в 6 – 10 раз у олиготоле-рантных и в 20 – 26 раз у сапротрофных штаммов соответственно;
5. высок
ая резистентность к продолжительному (200
сут.) голоданию в условиях глубинного культиви-рования на дистилированной воде;
6. опре
деление ростовых констант (Кs и Кi) свиде-
тельствует о широких границах адаптации каждого из изученных видов к различным концентрациях углерода у олигокарботолератных видов рр Hormo-
conis и cladosporium
;7. в
ряду изученных ферментативных активностей
установлены различия в уровнях внутриклеточ-ной и экзогенной каталазы. В большинстве слу-чае первая (внутриклеточная) у изученных нами видов была выше, чем внеклеточная. На видовом уровне каталазная активность изученных штам-мов H. resinae выше таковой c.
sphaerospermum и
c.
herbarum ;
8. ак
тивность внеклеточных гидролитических фер-
ментов (липолитическая, амилолитическая, про-теолитическая и др.) у изученных нами штаммов была низкой и иногда падала до нуля ( H. resinae (6
штаммов из 8), c.
herbarum (3 штамма), c. sphaero-
spermum (2 штамма из 4)).
В ряду упомянутых критериев, характеризующих
олигокарботолерантные виды, наиболее показатель-
ными и легко воспроизводимыми на наш взгляд можно считать – рост на силикагельной среде и сохранение жизнеспособности культуры в результате продолжи-тельного голодания (200 сут.) в условиях глубинного культивирования.
ВЫСШИЕ ГРИБЫ ИЗ ДОННЫХ ОТЛОЖЕНИЙ
СЕРОВОДОРОДНОЙ БАТИАЛИ ЧЕРНОГО МОРЯ
Зайцев Ю.П., Копытина Н.И.
од
есский филиал Института биологии Южных морей НАН Украины,
одесса
Уверенность в том, что зараженная сероводородом
глубоководная зона Черного моря пригодна для жизни лишь тиобионтов-серобактерий, более столетия сдер-живала поиск в ней каких-либо организмов. Находки в грунтах батиали на больших глубинах представите-лей нематод и других мелких беспозвоночных не мог-ли быть убедительным доказательством того, что они пребывали живыми in situ. Их обычно cчитали следс-твием «дождя трупов» из верхних насыщенных кис-лородом слоев моря. Укрепившееся в науке название «азойная», то есть «безжизненная» зона для черномор-ской батиали представлялась аксиомой.
Идея приступить к специальному поиску аэробио-
тов в черноморской сероводородной батиали возникла в свете развития идей В.И. Вернадского о геохимичес-кой и экологической важности граничных (контурных) зон. э
то направление научного поиска уже много лет
успешно разрабатывается в отделе экологии краевых сообществ Одесского филиала Института биологии южных морей Национальной академии наук Украины и в отделе радиационной и химической биологии Ин-БЮМ НАНУ в Севастополе.
В 2005 г. коллектив исследователей под руководс-
твом Ю.П. Зайцева и Г.Г. Поликарпова притупил к изу-чению организмов из донных осадков, отобранных в Черном
море на глубинах 730 – 2100 м с соблюдением
всех доступных условий стерильности. В лаборатор-ных условиях по специальным методикам из образцов грунта впервые удалось получить культуры различных микроорганизмов-аэробионтов, характерных для кис-лородной зоны моря (Зайцев, Поликарпов, Егоров…Копытина и др., 2007; Зайцев, Поликарпов, Егоров…Копытина
и др., в печати). это были гетеротрофные
бактерии, бактерии группы кишечной палочки, одно-клеточные водоросли, высшие грибы. Был сделан вы-вод, что в сероводородной среде черноморской батиа-ли эти организмы пребывали в виде жизнеспособных покоящихся стадий, которые проросли после перене-сения их в благоприятные условия.
Исследование грибов водной толщи сероводород-
ной з
оны моря (250 – 2000 м) проводил А. Е. Крисс
(1959). Он выделил 18 видов дрожжей, в основ-ном, из семейств Torulopsidaceae, Rhodotorulaceae, Sporobolomycetaceae и
Saccharomycodaceae. Н. Г. Сер-
геев
а и В. Е. Заика (1999) описали две формы бен-
тосных организмов с глубин 1800 и 2250 м. По при-веденным в статье рисункам и морфологическим характеристикам организмов, мы предположили, что они относятся к роду asper
gillus.
Материалом наших исследований послужили
10 проб донных отложений (черный ил) из верхнего слоя 0–6 см, отобранных при помощи геологической трубки и колоночным пробоотборником подводного телеробот
а QUEST – 4000. Отбор проб проводили В.
Грибы экстремальных местообитаний 387
Н. Поповичев и С. В. Гулин. Материал обрабатывали
методами прямого микроскопирования и накопления-проращивания.
Микроскопирование проводили в трех повторнос-
тях.
На покровное стекло наносили грунт (3 – 5 мг),
взвешивали и проводили подсчет пропагул (спор и клеток гиф) при увеличении 400Ч. Плотность пропа-гул грибов рассчитывали на 1 г сухого грунта, прини-мая,
что 1 г сырого грунта = 1,4 г сухого. Грибы прора-
щивали методом накопления (Литвинов, Дудка, 1975; Артемчук,
1981). Для посева 1,8 – 4,5 г ила разбавля-
ли в 50 мл стерильной морской воды с антибиотиком (1000000 ед. пенициллина на 1000 мл), суспензию раз-ливали в чашки Петри (по 2 повторности), в которые добавляли субстраты-приманки (стерильные полоски фильтровальной бумаги, опилки дуба). Чашки инку-бирова
ли в термостате при температуре 18 – 20 °С в
течение 20 недель, материал периодически просмат-ривали под стереомикроскопом с малым увеличением (Биолам
– 9). Фотоснимки плодовых тел и спор грибов
делали на микроскопе с вмонтированной кинокамерой Motic
B1 series system microscopes при увеличении
100Ч и 1000Ч.
В пробах грунта батиали был выявлен 31 вид вы-
сших грибов. Из отдела Ascomycota 11 видов: 3 об-лигатно морских (* ar
enariomyces trifurcatus Hцhnk,
E.B.G. Jones, *cor ollospora maritima Werdermann и
leptosphaeria
albopunctata (Westendorp) Saccardo),
6 факультативно морских (* chaetomium globosum
kunze,
*c. murorum Cda, Gloniella sp., leptosphaeria
sp.
1, leptosphaeria sp. 2, Pleospora sp.) и 2 *неи-
дентифицированных вида. Из формальной группы Anamorphic fungi
– 20 видов: 3 облигатно морс-
ких (diplodia oraemaris Linder, cumulospora varia
Chatmata & Somrithipol, camar osporium metableticum
Trail.), 10 факультативно морских, представленных широко распространенными наземными грибами (*alternaria
alternata (fries) keissler, *a. consortiale
(Thuem.) Hyghes, Joly, * a. radicina Meitr, Drechsl. &
Eddy,*A. tenuissima ( fr.) Wiltshire, *aspergillus niger, *aspergillus sp., * Humicola sp.,*Penicillium citrinum
Thom., *Penicillium sp. 1, * Stachybotrys chartarum
(Ehrend.) Hughes) и 6 неидентифицированных видов.
На г
лубине 835 м обнаружено 11 видов грибов (2 –
прямым микроскопированием и 9 – методом накопле-ния), на
глубине 2082 м – 9 видов (6 + 3), наименьшее
число видов отмечено на глубине 1875 2 вида (1 + 1) при м
аксимальной плотности пропагул – 3755±698 г–1.
На глубине 2090 м при микроскопировании пропагу-лы обнаружены не были, но методом накопления было выявлено 3 вида. Средняя плотность пропагул в дон-ных отложениях сероводородной батиали составляла 546±460 г
–1, что в 8 – 13 раз выше средней плотности
пропагул в донных отложениях шельфа (до 20 м) и в 11
– 27 раз выше, чем в черном иле в северо-западной
части Черного моря (СЗЧМ).
В донных отложения СЗЧМ выявлено 58 видов гри-
бов. Донные отложения в виде черного ила с запахом сероводорода широко распространены и по сравнению с другими типами грунта отличаются максимальным так
сономическим разнообразием – 33 вида. По видо-
вому составу грибов сходство донных отложений бати-али
с шельфовой зоной (до 20 м) составляло 42,88 %,
с донными отложениями в виде черного ила – 42,11 % (по коэффиценту Брей-Куртиса).
Полученные результаты подтверждают способ-
ность пропагул грибов переносить экстремальные ус-ловия батиали Черного моря (отсутствие кислорода, наличие сероводорода, высокое давление (до 210 атм.), низкую постоянную температуру воды (около 8°С)) и прорастать после попадания их в благоприятные усло-вия.
Полученные результаты имеют теоретическое и
прикладное значение и вызывают много вопросов, требующих дальнейших исследований. Изучение вы-сших грибов сероводородной батиали Черного моря продолжается.
Примечание:
* – виды грибов, выявленные мето-
дом накопления-проращивания.
СТРУКТУР А КОМЛЕКСОВ МИКРОМИЦЕТОВ В НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ
ПОЧВАХ И ПРИ РЕКУ ЛЬТИВАЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОПРЕПАР АТА
Киреева Н.А., Рафикова Г.Ф.
Башкирский государственный университет,
Уфа
В районах с крупной нефтедобывающей промыш-
ленностью наиболее распространенными стрессора-ми окружающей среды выступают нефть и продукты ее переработки. Нефтяное загрязнение почвы приво-дит к изменениям в составе микробиоты, в частнос-ти микобиоты. Почвенные микроскопические грибы преобладают среди почвенных микроорганизмов и представляют собой одну из основных составляю-щих микробного сообщества почвы. В связи с этим представляется необходимым изучение влияния не-фтяного загрязнения на структуру почвенных микро-мицетов.
Целью настоящей работы явилось изучение влия-
ния нефтяного загрязнения и использования биопре-парата «Азолен» на комплексы микромицетов серой лесной почвы Республики Башкортостан и торфяно-глеевой почвы Республики Коми. Выделение и коли-чественный учет микромицетов проводили по обще-принятой методике посева почвенной суспензии на агаризованную среду Чапека, идентификацию видов
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 16 388
осуществляли по соответствующим определителям.
Для оценки сходства микобиот использовали коэффи-циент сходства по Жаккару.
Исследования проводились в лабораторных усло-
виях на вариантах с чистой (фоновой), загрязненной в разных концент
рациях (1,4 и 8 % от массы) и подверг-
нутой биоремедиации почвой.
Было отмечено, что нефтяное загрязнение как се-
рой лесной, так и торфяно-глеевой почвы при невысо-ких к
онцентрациях нефти (1 %) стимулирует развитие
микромицетов, при дальнейшем увеличении концен-трации
поллютанта (4 и 8 %) наблюдается некоторое
снижение численности грибов, однако этот показатель превышает таковой незагрязненной фоновой почвы. При использовании биопрепарата «Азолен» в незаг-рязненной серой лесной почве наблюдается увеличе-ние численности микромицетов, в нефтезагрязненной почве их численность снижается.
Из исследуемых серых лесных почв было выде-
лено 18 видов микромицетов, относящихся к 8 родам класса Hyphomycetes и одна культура была представле-на светлоокрашенной формой стерильного мицелия. В фоновой почве доминировал вид P .simplisissimum. Из
торфяно-глеевых почв был выделен 21 вид микроми-цетов, относящихся к 11 родам класса Hyphomycetes
и одна культура относилась к mycelia
sterilia (white).
Доминантом в незагрязненной почве был вид P . cane-
scens. В загрязненной серой лесной и торфяно-глеевой почве появлялись толерантные к антропогенным нару-шениям в почве виды, такие как asper
gillus fumigatus,
a. niger. При оценке сходства микобиот по Жаккару было показано, что с увеличением концентрации не-фти, как в серой лесной так и торфяно-глеевой почве наблюдается снижение сходства с незагрязненной поч-вой. Со временем сходство рекультивированных почв одного типа увеличивалось. Незагрязненные почвы разных регионов обнаруживали меньше сходства, чем их загрязненные аналоги. При использовании биопре-парата для рекультивации нефтезагрязненных почв, происходило увеличение видового разнообразия мик-ромицетов по сравнению с таковым нефтезагрязнен-ных почв без биопрепарата.
МИКРОМИЦЕТЫ В ПОЧВАХ ПОЛЯРНЫХ ПУСТЫНЬ
СЕВЕРО-ВОСТОЧНОЙ ЗЕМЛИ
Кирцидели И.Ю.
Ботанический институт им. в.л.к омарова РАН,
Санкт-Петербург
Изучение различных групп организмов экстремаль-
ных местообитаний − одна из важнейших проблем современной экологии. Биологическое разнообразие почвенных микромицетов в арктических ценозах до сих пор мало изучено. Полярные пустыни имеют цир-кумполярное размещение. В России распространены в основном на островах и архипелагах Северного Ледо-витого океана.
Адаптационные способности микроскопических
грибов, их толерантость позволяют им успешно осва-ивать различные субстраты и развиваться в условиях Арктики. Полярные пустыни моделируют условия первичного формирования растительного покрова суши по
сле многочисленных оледенений.
Показано, что общая численность комплексов поч-
венных микромицетов всегда остается на низком уров-не. Растительный покров является одним из основных факторов, влияющих на колебания численности мик-ромицетов в почвах и грунтах (в некоторых случаях, по-видимому, является лимитирующим фактором раз-вития микромицетов), особенности микрорельефа так-же оказывают селектирующие действие на комплексы микромицетов (по видимому, за счет микроклимати-ческих изменений температуры почвы), в лаборатор-ных условиях температура является селектирующим фактором при определении численности микромице-тов.
При проведении анализа приуроченности типич-
ных видов почвенных микромицетов к различным ценозам практически не отмечено видов с высокой приуроченностью к одному из исследованных местоо-битаний. э
колого-субстратный анализ микромицетов,
показал, что более 20 % видов осваивает все типы суб-стра
та, а более 40 % два типа субстрата. Подтвержде-
на гипотеза о филогенетической примитивности сооб-ществ полярных пустынь, одной из характерных черт которой считается широта экологической амплитуды подавляющего числа видов и супердоминантность. Микромицеты рода Geomyces составляют более поло-вины всех выделенных изолятов, а в некоторых цено-зах их
плотность достигает 90 %. Микромицеты этого
рода представлены видами G. pannorum и G. vinaceus. Преобладание данного вида (или видов) характерно для комплексов микромицетов в вечной мерзлоте.
Таксономический состав комплексов микромице-
тов в почвах растительных сообществ в зоне поляр-ных пустынь о. Северо-Восточная Земля (Шпицбер-ген) составляли 37 видов из 17 родов. Стоит отметить, что выявленность видового состава нельзя считать окончательной, в следствии ограниченности исследо-ванных конкретных точек и типов ценозов. Отмечена обедненность систематического состава микромице-тов в арктических почвах (как на видовом, так и на родовом уровне
Основная часть микромицетов, выделенных из почв
о.Северо-Восточная Земля, имеют температурный оп-тимум
роста 100 – 120 С, что выше, чем условия их
существования в природе, но в то же время большая
Грибы экстремальных местообитаний 389
часть изолятов обладает способностью к росту и раз-
витию при более низких температурах. (4–50 С). Т.е. более
60 % изолятов являются психротрофами, и лишь
сравнительно небольшая доля относится к истинным психрофилам. Споры большинства выделенных видов способны практически не терять жизнеспособности при отрицательных температурах в течение длитель-ного времени и могут использовать короткий период положительных температур для осуществления жиз-недеятельности.
МИКОБИОТА МНОГОЛЕТНЕЙ МЕРЗЛОТЫ
Кочкина Г.А.1, Озерская С.М.1, Иванушкина Н.Е.1, Гиличинский Д.А.2
1 Институт биохимии и физиологии
микроорганизмов им. Г
.к.Скрябина РАН,
Пушино
2 Институт физико-химических
и биологических проблем почвоведения РАН,
Пущино
При исследовании грибов из арктических и антарк-
тических местообитаний основное внимание миколо-гов обычно бывает сосредоточено на поверхностных горизонтах данных местообитаний. Изучается так-сономическое разнообразие грибов льдов, антаркти-ческих лишайников, поверхностных горизонтов почв арктических ландшафтов и подобных субстратов. На-именее исследованы глубинные горизонты многолет-ней мерзлоты, активное изучение которых в последнее десятилетие стало возможным благодаря развитию комплексных международных программ и поддержке различных научных фондов.
Нами было исследовано микробиологическими ме-
тодами более 200, в основном, глубинных образцов, отобранных в разных регионах мира: в дельте реки Маккензи
в Канаде, в Антарктиде – в сухих долинах
Майерса и Тейлора, на Камчатке в районе вулкана Бе-зымянный, на
Колымской низменности в России. это
были образцы многолетнемерзлых грунтов, воды из линз криопэгов, палеосемян, сохранившихся в мерз-лых грунтах, замерзших вулканических пеплов, части ископаемой лошади, обнаруженной в мерзлоте. Глуби-на отбора отдельных образов превышала 45 м, а воз-раст достигал 3 млн лет.
В результате данных исследований в многолетне-
мерзлых местообитаниях выявлены жизнеспособные грибы, которые находятся под воздействием множес-твенных стрессоров, таких как низкие температуры, низкая активность воды и др., численность которых составляет от единиц до десятков тысяч КОЕ/г грунта. Особенностью распределения грибов в образцах много-летней мерзлоты является микроочаговость, со вспыш-ками количества в самых различных точках, независи-мо от глубины и возраста отложений. При этом резкое увеличение численности грибов в отдельных образцах происходит при низком видовом разнообразии.На основе изучения большого числа образцов,
выделения в культуру и идентификации более 1500 штаммов установлено соотношение таксономических групп грибов, выявляемых традиционными микроби-ологическими методами. Наибольшее число изоля-тов
– это анаморфы и телеоморфы сумчатых грибов.
Значительную часть мицелиальных грибов составляет стерильный мицелий, часть штаммов которого удалось идентифицировать молекулярно-генетическими мето-дами. Выявлено, что половину стерильного мицелия сост
авляют базидиальные грибы, около 30 % – аско-
мицеты, о
стальное – пикнидиальные грибы сумчатого
аффинитета, среди которых, возможно, есть новые для науки виды.
Анализ грибного разнообразия позволяет сделать
вывод, что грибы в данных экотопах, по-видимому, в основном находятся в состоянии переживания, кото-рое обусловлено наличием возможных благоприятных факторов естественной криоконсервации. Однако, изу-чение частоты встречаемости отдельных видов, прове-дение исследований физиологических особенностей выделенных грибов позволяет говорить и о том, что существуют экстремотолерантные грибы, которые не только сохраняют жизнеспособность, но и могут раз-виваться в данных условиях, проявляя свой широкий адаптивный потенциал.
Проведенные исследования позволили создать во
Всероссийской коллекции микроорганизмов специа-лизированную коллекцию палеогрибов, содержащую более 600 штаммов, относящихся к 112 видам 44 ро-дов, изолированных, главным образом, из глубинных горизонтов многолетней мерзлоты Арктики и Антар-ктиды.
Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ
06–04–49229.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 16 390
Щелочные гидротермы Байкальского региона явля-
ются экстремальными экосистемами, представляющи-
ми значительный интерес как для фундаментальных исследований, так и при решении ряда практических задач. Мицелиальные грибы представляют немного-численную по числу видов экологическую группу, составляющую довольно стабильный компонент в гидротермах Забайкалья. Активная роль микромице-тов в процессах трансформации веществ обусловлена присущей им высокой ферментативной активностью и физиологической пластичностью на изменение фи-зико-химических и биологических параметров среды. Среди секретируемых микромицетами внеклеточных ферментов важная роль принадлежит протеазам, при-нимающим активное участие в использовании микро-организмами органических субстратов.
Изучены внеклеточные протеолитические фермен-
ты термофильных грибов Paecelomyces variotii и asper
–
gillus carneus, выделенные из термальных источников Баргузинской долины (Северо-Западное Забайкалье). Способность термофильных грибов к росту на различ-ных субстратах и концентрациях белка, характеризу-ется межвидовой и внутривидовой гетерогенностью, которая возможно определяется наличием или возник-новением адаптации к росту в процессе развития форм при повышенной температуре.
Полученные
результаты по исследованию гриба p.
variotii показали, что активность протеаз по синтети-ческим субстратам БАПА, ГААЛП, ГПА, ФПА не была обнаружена. Однако, активность протеаз по белковому су
бстрату – желатине на культуральной среде Чапека с
1 % казеином показала два максимума на 3 и 6 сутки. Изучение влияния концентрации казеина на величину протеолитической активности в культуральной среде p. variotii
выявило, что при увеличении концентрации
казеина активность возрастала. Максимальная секре-тируемая протеолитическая активность приходилась при к
онцентрации 1 % казеина на 3 и 6 сутки, также
при 1,5 % казеина на 7 сутки. Дальнейшее увеличение концентрации казеина (до 2 %) практически не при-водило к увеличению протеолитической активности. Данные ингибиторного анализа показывают, что при добавлении эДТ
А и IAA до 2 мМ и рН-оптимум ак-
тивности фермента, составляет 9,7 на 3 сутки и 10,4 на 6 с
утки при концентрации 1 % казеина, что позволяют
отнести внеклеточную протеазу p. variotii к классу ще-
лочных металлопротеаз.
Проведенные исследования на культуре a. carneus
на различных углеводах показали заметное влияние на секрецию протеаз исследуемых культур. Данные пока-зывают, что различные сахара могут вызывать не только количественные изменения в активности внеклеточной протеазы, но и приводить к репрессии или индукции формирования того или иного фермента. Так, при росте a.
сarneus на различных сахарах в культуральной жид-
кости менялось количественное соотношение внекле-точных протеаз. Начало секреции внеклеточной про-теазы приходилось на 5 сутки, максимальные значения были обнаружены на 8–9 сутки. Данные ингибиторного анализа показали, что при добавлении ФМСФ до 2 мМ и полного его ингибирования и рН-оптимум активнос-ти фермента был равен 7,7, что определяет их к классу нейтральных сериновых протеаз.
Проведенные исследования показали, что продук-
ция внеклеточных протеаз у исследуемой культуры a.
carneus
главным образом индуцирована и регулиру-
ется рядом факторов, среди которых важное значение имеет состав сред, что приводит к регуляции секреции протеолитических ферментов и может использоваться грибами в период адаптации.
Работа поддержана грантом НОЦ-Байкал, Интегра-
ционным проектом СО Р АН № 24.ВНЕКЛЕТОЧНЫЕ ПРОТЕАЗЫ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ
ГРИБОВ ГИДРОТЕРМ ЗАБАЙКАЛЬЯ
Лаврентьева Е.В.1, Биланенко Е.Н.2, Дунаевский Я.Е.2
1 Институт общей и экспериментальной биологии Со РАН,
Улан-Удэ
2 Московский государственный университет им. М.в. ломоносова,
Москва
ОЛИГОКАРБОТОЛЕР АНТНЫЕ ГРИБЫ В УСЛОВИЯХ 10-КМ ЗОНЫ ОЧУЖДЕНИЯ
Павличенко А.К., Жданова Н.Н.
Институт микро
биологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАН Украины,
киев
Объектом нашего исследования были олигокарбо-
толерантные микроскопические грибы, выделенные из экстремальных по условиям существования экото-пов
– помещений 4-го блока ЧА эС.
Результаты проведенной работы позволили выде-
лить ряд особенностей таких грибов, по которым мож-но определить их принадлежность к этой эколого-тро-фической группе организмов. К ним относятся:
1. У
стойчивость к пониженному (до 0,1 – 0,01 г/л и
менее) содержанию источника углерода органичес-кой природы в питательной среде. Последнее со-провождается значительными морфологическими
Грибы экстремальных местообитаний 391
изменениями, которые были разными у Hormoconis
resinae и видов рода Cladosporium.
2.
Низкие значения удельной скорости роста (м) на
оптимальной питательной среде (20 г/л), которые в условиях ст
ационарного культивирования – поряд-
ка
0,004 – 0,009 ч–1 и в условиях глубинного культи-
вирования
– 0,03 – 0,06 ч–1
3. Способность расти и образовывать микроколонии
(Hormoconis resinae, Cladosporium sphaerosper-mum).
4. У
меньшение накопления грибной биомассы на сре-
де с
20 и 1 г/л глюкозы в 6 – 10 раз у олиготолеран-
тных и в 20
– 26 раз у сапротрофных штаммов
5. Высокая резистентность к продолжительному (200 сут.) голоданию в условиях глубинного культиви-рования на бидистилляте
6. Опре
деление ростовых констант (Кs и Кi) свиде-
тельствует о широких границах адаптации каж-дого из изученных видов к различным концентра-циях углерода у олигокарботолератных видов рр Hormoconis и Cladosporium7. В
ряду изученных ферментативных активностей
установлены различия в уровнях внутриклеточ-ной и экзогенной каталазы. В большинстве случае первая (внутриклеточная) у изученных нами видов была выше, чем внеклеточная. В целом каталазная активность штаммов H. resinae выше таковой C. sphaerospermum и C. herbarum.
8. Ак
тивность внеклеточных гидролитических фер-
ментов (липолитическая, амилолитическая, про-теолитическая и др.) у изученных нами штаммов была низкой и иногда падала до нуля (H. resinae (6 штаммов из 8), C. herbarum (3 штамма), C sphaero-spermum (2 штамма из 4))Среди упомянутых критериев, характеризующих
олигокарботолерантные виды, наиболее показатель-ными и легко воспроизводимыми на наш взгляд можно счит
ать – рост на силикагельной среде и сохранение
жизнеспособности культуры в результате продолжи-тельного голодания (200 сут.) в условиях глубинного культивирования.
МОНИТОРИНГ МИКРОМИЦЕТНЫХ СООБЩЕСТВ В ПИРОГЕННЫХ ПОЧВАХ
Семенова Т.А.
ИПЭЭ РАН им. Северцова,
Москва.
Микроорганизмам принадлежит основная роль в
восстановлении почв, нарушенных в результате пиро-лиза. Целью данного исследования было определение численности и структуры микромицетных комплек-сов эутрофного торфяника после низового пожара. Объектом исследования был пирогенный торфяник, являющийся частью болота «Яковлевское» (Тульская область, Ленинский район). Низовой пожар на данном торфянике отмечался за год до начала исследований, отдельные участки тлели в течение всего года и в пери-од наблюдений, другие участки находились в различ-ной стадии восстановления (покрыты пеплом, начина-ющие зарастать мхом и/или травой)
Численность микромицетов в точке дымления со-
ст
авляла в среднем около 1,76 – 6,25 тыс.КОЕ/г. В ради-
усе 15–20 см от точки дымления численность грибов не менялась, начиная с полуметра от точки дымления по мере удаления от тлеющего участка и снижения темпе-ратуры торфяника отмечалось увеличение численности микромицетов. Вниз по вертикали от точки дымления численность микромицетов снижалась до глубины 50 см и далее возрастала до глубины 100 см, что, вероятно, связано с неравномерным прогревом и высушиванием разных горизонтов тлеющего торфяника.
Видовое разнообразие микромицетов в точке дым-
ления по всей толще и на небольшом удалении было минимальным, отмечались Penicillium aurantiogriseum,
asp
ergillus versicolor, a.candidus, a.fumigatus и acremoni-
u
m rutilum . Следует отметить, что виды рода asp ergillus
не являются типичными для данных торфяников и яв-ляются термофильными и/или термотолерантными. Вероятно, большинство микромицетов при постоянном прогреве и иссушении торфяника в тлеющих участках погибают, сохраняются лишь споры термофильных грибов, и при прекращении воздействия экстремальных факторов именно они являются «пионерными» видами при восстановлении микобиоты торфяника. По мере удаления от точки дымления численность и видовое разнообразие грибов постепенно увеличивается, наряду с упомянутыми выше видами микромицетов в составе видовых комплексов появляются и другие виды рода Penicillium: P .montanense, P .diversum (но наиболее ти-
пичного для торфяников P .spinulosum не отмечено ни в
одной пробе), представители родов cla
dosporium, Pae-
cilomyces и некоторых других, тогда как доля доминиро-
вавших на тлеющих участках микромицетов постепен-но уменьшается вплоть до полного исчезновения ряда видов (например, аспергиллов). Лишь на значительном удалении от тлеющих участков, где начинается восста-новление растительности и наблюдается зарастание участков пирогенного торфяника разными раститель-ными сообществами (мох, мох и трава, полынь), чис-ленность микромицетов значительно увеличивается, отмечается появление быстрорастущих видов микроми-цетов из родов Fu
sarium, mucor, alternaria, Trichoderma .
Высокая доля темноокрашенных микромицетов на за-растающих участках, отсутствие ряда типичных для данных биотопов микромицетов свидетельствует о не-завершенности восстановления микобиоты пирогенных торфяников через год после пожара.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 16 392
Предметом наших исследований на протяжении
ряда лет является изучение ответных реакций микро-
скопических грибов, длительное время находившихся в условиях повышенного радиационного фона в 10-км зоне
ЧАэС на повторное воздействие как больших так
и малых доз ионизирующего излучения. Было пока-зано, что у 100 штаммов 15 видов микромицетов, вы-деленных из
зоны отчуждения ЧА эС, под действием
повышенного радиационного фона проявлялись но-вые, ранее не известные для микроскопических гри-бов адаптивные реакции по отношению к действию ионизирующег
о излучения. Среди них – направлен-
ный рост ростковых гиф к источнику ионизирующего излучения
– позитивный радиотропизм. В результате
многолетнего изучения частоты проявления этого при-знака у микромицетов было показано, что свойством позитивного
радиотропизма обладали 20 % штаммов,
выделенных в первые годы после аварии из радио-активно загрязненных территорий. Среди штаммов, выделенных чере
з 10 – 20 лет после катастрофы этот
признак встречался у 40 % изученных штаммов, т.е. в 2 раза чаще. Полученные данные свидетельствуют о том, что с увеличением времени нахождения под дейс-твием повышенного радиационного фона значительно увеличивается количество грибов, обладающих этим адаптивным свойством. Свойство позитивного ра-диотропизма довольно стабильно и у многих грибов сохранялось в течение 10–15 лет в условиях хранения в коллекции культур без дополнительного облучения. У микромицетов, выделенных из чистых относитель-но радионуклидов территорий, это свойство не было выявлено.
Практически у всех грибов, обладающих способ-
ностью направленно расти к источнику ионизирую-щего излучения, была выявлена активация ростовых процессов под действием значительных доз радиа-ции
– радиостимуляция. Частота проявления радиоа-
даптивных свойств у исследованных грибов зависела от уровня радиоактивности мест их выделения. Сте-пень проявления радиоадаптивных свойств зависела от штаммовых характеристик грибов, активности и типов применяемых источников излучения. Радиости-муляция ростовых процессов у грибов была выявле-на при
высоких поглощенных дозах – порядка 100 –
150Гр при использовании источников γ- излучения (121Sn) и
500 – 1000Гр при использовании источника
смешанного (γ+β) типа излучения. это свидетельству-
ет о том, что у изученных грибов, после воздействия радиации в малых дозах, что имело место в зоне от-чуждения, сформировался адаптивный ответ, проявля-ющийся не только в повышении радиорезистентности в сравнении с контрольными штаммами, но и в сти-муляции ряда жизненных параметров при воздействии высоких доз
радиации. Однако только у 60 % штам-
мов выявлены близкие по величине и направленности ответные реакции (изменение длины ростковых гиф) на действие обоих источников излучения, тогда как у 40
% штаммов – разные по направленности (актива-
ция или
ингибирование). это свидетельствует о том,
что у этих грибов в реализации ответных реакций на действие разных типов излучения принимает участие отличающийся комплекс адаптивных механизмов.
У исследованных нами почвенных грибов адап-
тивный эффект наблюдался при дозах на три поряд-ка выше такового для животных клеток и на порядок выше, чем для растительных объектов, что дает им не-сомненное экологическое преимущество при воздейс-твии повышенного радиационного фона перспективы при использовании в технологиях по биоремедиации загрязненных радионуклидами объектов. ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ И ПРОЯВЛЕНИЯ Р АДИОАДАПТАЦИОННЫХ
СВОЙСТВ У ГРИБОВ, ДЛИТЕЛЬНОЕ ВРЕМЯ НАХОДЯЩИХСЯ
В УСЛОВИЯХ ПОВЫШЕННОГО Р АДИАЦИОННОГО ФОНА
Тугай Т.И., Жданова Н.Н.
Институт микро
биологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАН Украины,
киев
ИССЛЕДОВАНИЕ РОСТА ГРИБОВ GeomYceS P annorum В Р АЗЛИЧНЫХ
ОКИСЛИТЕЛЬНО-ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫХ УСЛОВИЯХ
Щербакова В.А., Кочкина Г.А., Иванушкина Н.Е., Озерская С.М., Лауринавичюс К.С.
Институт био
химии и физиологии микроорганизмов им. Г.к. Скрябина РАН,
Пущино, Московская область
Криопэги в многолетнемерзлых отложениях Ар-
ктики представляют собой переохлаждённые насы-щенные растворы солей с постоянной температурой (–
9)-(–12) °С и общей минерализацией 60–300 г/л. Не-
замёрзшая в таких условиях вода, образует линзы, зале-гающие на поверхности водоупорного слоя на глубине 10–30 м, изолирована от внешнего воздействия и харак-теризуется анаэробными условиями. Ранее в этих уни-кальных эконишах были обнаружены жизнеспособные ми
целиальные грибы – представители 12 различных
таксонов. Основную часть обнаруженной микобиоти-ческой популяции составляли грибы рода Geomyces.
Грибы экстремальных местообитаний 393
С целью выявления стратегий выживания культур
Geomyces pannorum , выделенных из многолетней мерз-
лоты, была проверена способность арктического изоля-
та
ВКМ fW-2241, и штамма ВКМ f-3808, выделенного
из шерсти рыжей полевки в средней полосе России, к росту при ограничении кислорода и различных окисли-тельно-восстановительных условий среды.
Как показали наши исследования, снижение кон-
центрации
кислорода в газовой фазе с17–18 до 1–2 %
не ингибировало рост исследуемых штаммов. После адапт
ационных пересевов штамм ВКМ f-3808 был
способен к росту и метаболизму в отсутствие кис-лорода
при Eh до – 215 мВ при 16 °С, а штамм ВКМ fW-2241 рос при Eh до – 280 мМ при 6 °С. Выявлен-ные новые физиологические особенности объясняют способность грибов Geomyces pannorum выживать в анаэробных условиях, характерных для криопэгов в вечной мерзлоте.
Дальнейшее развитие данного направления иссле-
дований позволит оценить влияние всего комплекса существующих экстремальных факторов на сохране-ние жизнеспособности грибов, а именно: понижения уровня кислорода при экстремально низких темпера-турах в сочетании с высокой соленостью среды.
Работа выполнена при поддержке РФФИ грант
№06–04–49229
Арбускулярная микориза – широко распространен-
ная форма микробо-растительного симбиоза, играю-
щая важную роль в обеспечении растений фосфором и другими питательными элементами, повышении урожайности, а также способствующая выживанию растений в неблагоприятных условиях окружающей среды. Арбускулярные микоризные грибы (АМГ) яв-ляются облигатными симбионтами, не растущими в культуре in vitro, существующими вне растения лишь в
форме покоящихся спор. Наиболее простым способом размножения и сохранения культур АМГ является их культивирование в корнях растений-хозяев, выращи-ваемых на стерильных субстратах.
Цель иссле
дования – изучение взаимодействия ар-
бускулярных микоризных грибов с бобовыми культу-рами и оценка эффективности применения АМГ для стимулирования роста и развития растений.
Объектами исследования являлись арбускулярные
микоризные грибы, микоризовавшие корневую сис-тему козлятника восточного (Galega orientalis), лю-церны посевной (Medicago sativa) и клевера лугового (Trifolium pratense). Для микоризации использовали инокулюм, полученный культивированием АМГ в кор-нях растений плектрантуса. Исследования проводили в двучленной горшечной культуре с использованием стерильного субстрата, включающего дерново-подзо-листую почву и торф в соотношении 3:1. В условиях микровегетационного опыта изучали влияние спосо-бов инокуляции (корневая и почвенно-корневая форма инокулюма) на рост и развитие козлятника восточно-го, люцерны посевной и клевера лугового. Изучение развития микоризной инфекции в корнях люцерны посевной показало, что наиболее интенсивное инфи-цирование идет при использовании почвенно-корне-вой формы инокулюма АМГ. Через 10 недель роста степень инфицирования люцерны в модельных ус-ловиях со
ставляет 76,5, а через 15 недель – 83,0 %, а
количество арбускул – 7 и 53 % соответственно. Через 15 недель отмечается активное развитие всех структур АМГ: мицелия, арбускул и везикул. Количество струк-тур размножения (везикул) увеличивается в среднем в 10 раз по сравнению с результатами 10-ти недельной вегетации. Использование АМГ оказывает позитивное влияние на развитие надземной массы Medicago sativa, она увеличивается в 1,87 раза по сравнению с конт-ролем. Оценку эффективности влияния АМГ на рост и развитие козлятника восточного проводили в фазу ветвления (60 суток). Микоризные структуры в корнях растения в этот срок анализа были представлены ги-фами, арб
ускулами и в меньшей степени – везикулами.
Положительное влияние на рост и развитие козлятни-ка восточного в модельной системе оказала почвенно-корневая форма инокулюма АМГ, сырой вес надземной части растений
возрастал на 380, сухой – на 194 % по
сравнению с контролем. В фазе ветвления отмечалось позитивное влияние корневой формы инокулюма АМГ на формирование корневой системы Galega orientalis.
Оценка влияния инокуляции АМГ на рост и разви-
тие клевера показала, что применение разных видов инокулюма на основе АМГ в модельной системе по-ложительно влияет на накопление фитомассы клевера. По показателям роста наибольший эффект микориза-ции наблюдался при инокуляции клевера почвенно-корневой формой инокулюма АМГ. В этом варианте опыта высота растений превышала контрольные на 69, а в
ес сухой надземной части растений – на 131,3 %. В
результате инокуляции клевера корневой формой ино-кулюма АМГ отмечалось увеличение высоты растений на 61,9,
а веса сухой фитомассы на 56,3 % по сравне-
нию с контролем.
Анализ полученных данных по формированию ар-
бускулярно-микоризного симбиоза показал, что макси-мальная степень насыщенности корней бобовых трав стр
уктурами АМГ – гифами, арбускулами и везикула-
ми, отмечается при использовании почвенно-корневой формы инокулюма АМГ. Раздел 17
СИМбИОз ГРИбОВ И РАСТЕНИй
СОЗДАНИЕ э ФФЕКТИВНОГО СИМБИОЗА БОБОВЫХ
КУ ЛЬТУР С ГРИБАМИ АРБУСКУ ЛЯРНОЙ МИКОРИЗЫ
Алещенкова З.М., Картыжова Л.Е., Ланцевич А.А., Короленок Н.В.
Институт микробиологии НАН Беларуси,
Минск
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 17 396
эндофитные грибы злаков вот уже тридцать лет слу-
жат классическим примером мутуалистических отно-
шений грибов и растений. Преимущественно это виды рода neotyphodium и
родственные им представители
трибы Balansiae (сем. Clavicipitaceae, пор. Hypocreales, п/
отд. pezizomycotina, отд. Ascomycota). эндофитные
грибы живут бессимптомно в надземных органах мно-гих злаков. Растение получает защиту от выедания и от различных абиотических стрессов. Гриб распространя-ется только вертикально вместе с семенами растения-хозяина.
Но на настоящий момент опубликовано уже значи-
тельное количество работ, в которых или не выявлено
вообще никакого эффекта эндофитных грибов на рост
и развитие растений, или даже получены результаты об отрицательном их влиянии. В связи с этим в послед-нее время разрабатывается теория о сбалансированном паразитизме эндофитных грибов. С другой стороны, и «м
утуализм», и «паразитизм» – это лишь модели, со-
зданные человеком для удобства описания процессов, происходящих в живой природе. А вопрос выбора мо-де
ли – во многом лишь вопрос удобства использования.
Поэтому попробуем посмотреть на эту ситуацию под другим углом зрения. Для эндофитного гриба экологи-ческая ниша практически полностью сводится к расте-нию-хозяину: в нем он живет, им питается, через него
до
ходят все факторы внешней среды – такие как свет,
температура, активность воды и т.д. Растение, заселен-ное эндофитным грибом (Е+), будет меняться. Как бы ни развивались отношения хозяина и симбионта, гриб-ной мицелий будет выделять те или иные метаболиты, которых бы в незараженном растении (Е-) не было. Ме-няется внутренняя среда растения, его клетки начинают
реагировать на новые биохимические сигналы. В зави-симости от генотипов растения и гриба, их возраста и условий внешней среды эти изменения могут быть вы-ражены сильнее или слабее, но в любом случае мы мо-жем утверждать, что при наличии развитого внутритка-невого мицелия физиолого-биохимические процессы растения изменятся и это будет уже другой организм.Теперь мы можем описать весь сложный комплекс
событий, происходящих в паре гриб-растение, не заго-няя их в рамки «хорошо-плохо». Растение, заселенное эндофитом, меняет свои свойства, и такое растение может реагировать на различные факторы не так, как Е- растения. Поэтому при изучении биологии злаков совершенно необходимо учитывать и этот фактор. Бу-дет ли Е+ растение выгодно отличаться от своих соро-дичей
– это вопрос каждого конкретного случая. Нами
в различных экспериментах получены данные как о положительном влиянии эндофита, так и об отсутс-твии какого-либо влияния вообще. В условиях, когда растение сильно угнетено и ослаблено, эндофит может проявлять сильное отрицательное влияние, и начать паразитировать на своем хозяине. С другой стороны, гриб может перейти в скрытое, латентное состояние, и тогда Е+ растение ни по своим реакциям, ни при мик-роскопическом анализе не будет отличаться от Е- рас-тений
– вплоть до тех пор, когда изменившиеся усло-
вия активизируют рост мицелия в растении.
Изучение распределения мицелия в отдельных
растениях полностью согласуется с этой теорией.
Нами показано, что Е+ растения могут образовывать незараженные вегетативные побеги, вплоть до полно-го отсутствия мицелия в надземной части растения в определенное время года. Дефицит воды стимулиру-ет развитие мицелия в тканях растения. При образо-вании генеративных побегов, некоторые побеги тоже могут быть свободными от мицелия, а на зараженных побегах могут образовываться незараженные семена. При изучении цветков и семян овсяницы луговой было обнаружено, что мицелий располагается не только в алейроновом слое семени, как считалось ранее, но и в самом зародыше, что для этой группы грибов счита-лось нехарактерным.
Таким образом, ассоциация «эндофит-растение»
представляет собой сложную динамическую систему, которая очень лабильна и способна быстро реагиро-вать на изменяющиеся условия среды.эНДОФИТ-Р АСТЕНИЕ КАК СЛОЖНАЯ ДИНАМИЧЕСКАЯ СИСТЕМА
Благовещенcкая Е.Ю.
МГУ имени М.в. ломоносова, биологический факультет,
Москва
КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА СИМБИОТИЧЕСКОЙ СОСТАВЛЯЮЩЕЙ
ПРОДУКТИВНОСТИ эКТОМИКОРИЗНОГО ВИДА Р АСТЕНИЙ
(PinuS SYl VeSTriS L.) В ЕСТЕСТВЕННЫХ МЕСТООБИТАНИЯХ
Веселкин Д.В.
Институт экологии растений и животных Уро РАН,
екатеринбург
Подавляющая часть накопленной к настоящему вре-
мени информации о значении эктомикоризных симби-озов для роста и развития отдельных особей растений и для функционирования наземных экосистем в целом получены в лабораторных условиях. Считая, что экс-траполяция результатов лабораторных экспериментов
Симбиоз грибов и растений 397
на описание закономерностей in situ – методологичес-
ки ограниченный прием, сопряженный с возникнове-
нием принципиально неопределяемых погрешностей, далее предлагается способ количественной оценки симбиотической составляющей продуктивности экто-микоризных растений, пригодный для использования в условиях естественных природных местообитаний.
Фактический материал, на котором осуществлены
исследования: одно-двулетние всходы сосны обыкно-венной ( Pinus sylvestris L.), произраставшие в широком
спектре условий естественных местообитаний (леса; лесные пожарища; исходно безлесные естественные и искусственные местообитания).
Предлагаемый способ количественной оценки сим-
биотической составляющей продуктивности растений заключается в регрессионном оценивании ожидаемых функциональных связей между количественными ха-рактеристиками развития надземных и подземных органов растений. При этом список характеристик, описывающих уровень развития подземных органов всходов, сформирован так, чтобы было возможным выявление независимых друг от друга (не коллине-арных) составляющих их структуры: «асимбиотичес-кой» (автономной, не зависимой от эктомикоризного симбиоза, формируемой только растением) и «симби-отической» (формируемой эктомикоризными грибами и/или при взаимодействии эктомикоризных грибов с корнями растений). В результате возможна дифферен-цированная оценка симбиотического вклада (в данном случае «эктомикоризного») в формирование надземной части особи растения на фоне того или иного состоя-ния асимбиотической части поглощающего аппарата растений. Количественно характеризуют соотношение симбиотической и асимбиотической составляющих продуктивности всходов показатели долей дисперсии массы надземной части всходов, сопряженные с каж-дым из источников изменчивости. С удовлетворитель-ным совпадением окончательных результатов способ может быть реализован в различных вариантах. Во-первых, в качестве характеристик симбиотической и асимбиотической составляющих структуры поглоща-ющего аппарата всходов могут выступать как значения конкретных морфологических признаков, так и искус-ственно
сконструированные переменные – например,
главные компоненты. Во-вторых, оценки связей могут быть получены как в парной регрессии (одна зависи-мая и одна независимая переменные), так и во мно-жественной (одна зависимая и несколько независимых переменных).
Симбиотическая составляющая продуктивности
вс
ходов p. sylvestris, оцененная предложенным спосо-
бом, варьирует в естественных местообитаниях в ши-роких пре
делах – от 0 до 38 % общей дисперсии массы
всходов (в среднем 8–15 %). В большинстве случаев, но не всегда, влияние уровня развития эктомикориз на развитие всходов меньше, чем влияние уровня раз-вития асимбиотических корневых систем. В целом значение
эктомикоризных симбиозов для всходов p.
sylvestris в естественных местообитаниях закономер-но описывается как «модифицирующее» или «подчи-ненное» по сравнению со значением асимбиотической составляющей структуры их поглощающего аппарата.
Работа осуществлена при поддержке РФФИ и
Правительства Свердловской области (проект 07–04–96121).
ГРИБЫ НА КОРНЯХ Р АСТЕНИЙ ПАМЯТНИКА ПРИРОДЫ «Д УБР АВА»
Карпук В.В., Кулаковская Н.В.
Белорусский государственный университет, каф. ботаники,
Минск
На территории памятника природы республиканс-
кого значения «Дубрава» произрастает 447 видов дре-весных и травянистых растений, из которых 3 вида, включенных в Красную Книгу Республики Беларусь. Однако ассоциированность их корневых систем с ми-коризными и паразитическими грибами не изучалась. Целью данной работы было определение грибов на корнях наиболее характерных для дубравы видов: дуб, малина, шиповник, можжевельник, крапива двудом-ная, черника, земляника, голубика, папоротник, подо-рожник, тысячелистник, мать-и-мачеха.
Корни для исследований брали из верхнего слоя
почвы на глубине 10–20 см. Аккуратно отряхнутые от почвы корни тщательно осматривали с помощью оп-тики МБ
С-12 (ЛОМО) и Axiostar (Carl zeiss). Часть
свежего материала после отмывки водой и обсуши-вания на фильтровальной бумаге помещали в чашки Петри на агаризованную среду Чапека с добавлением против
омикробного антибиотика канамицина (0,02 %)
и позволяли грибам в течение 3–14 дней прорастать и развивать спороношения с последующим разделением культур, микроскопированием и определением видов, а часть
материала фиксировали в 70 % спирте и за-
тем под микроскопом исследовали степень оплетания грибными гифами корней высшего растения (по 4-бал-льной шкале) и проникновение гриба в ткани корня и развитие паразитических или симбиотических отно-шений с ними.
В
течение всего летнего периода (июнь – август
2007 г.) стояла жаркая сухая погода, почва была сухой и в «Дубраве» отмечалось увядание травянистых рас-тений и отсутствие макромицетов. Во всех исследу-емых образцах растений выявлено оплетение корней грибными гифами по типу эктомикоризы. Вместе с тем, оплетение корней гифами было неодинаковым. Подо-рожник, черника, мать-и-мачеха, крапива оказались
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 17 398
наименее подвержены оплетению грибными гифами и,
как следствие, симбиотическим отношениям с грибами. Папоротник и земляника были наиболее подвержены оплетению грибными гифами и, соответственно, сим-биотическим отношениям с грибами. Были определены гр
ибы родов Alternaria, Botrytis, Cladosporium, fusarium,
Mortierellа, Mucor. Были также установлены следующие со
четания растений с грибными организмами: дy6 –
Botrytis cinerea pers.; дy6 – fusarium sporotrichiella nom.
nov. Bilai; черника – fusarium aquaeductuum (Radik. et
Rabh. pr. p.) Lagh. var. medium Wr.; черника – fusarium
sambucinum fuck.; земляника – Cladosporium carpophy-lu
m Thьm.; земляника – Alternaria alternata ( fr.) keissler.;
земляника – Alternaria tennussima Wiltshire; мать-и-ма-
че
хa – Mortierella hyalina (Harz.) W. Gams.; мать-и-ма-
че
хa – Mortierella verticilllata Gams; подорожник боль-
шо
й – fusarium Link. ex fr. sp.; малина – Mucor Mich. ex
fr. sp.
Таким образом, в результате проведенных исследо-
ваний на корнях произрастающих в «Дубраве» расте-ний были обнаружены почвенные грибы, а их видовой состав, предположительно, связан с особенностями погодных условий данного года и большой антропо-генной нагрузкой этой территории.
ИЗУЧЕНИЕ ГРИБА mYcoPHYciaS aScoPHYlli (COTTON)
kOHLMEYER&vOLkMAN-kOHLMEYER, АССОЦИАЦИИРОВАННОГО
С ВОДОРОСЛЬЮ aScoPHYllum nodoSum (L.) LEJOLIs
В КАНДАЛАКШСКОМ ЗАЛИВЕ БЕЛОГО МОРЯ
Коновалова О.П., Бубнова Е.Н.
Моск
овский Государственный Университет имени М.в. ломоносова,
Москва
ascophyllum nodosum (L.) LeJolis – широко распро-
страненная в северных морях бурая водоросль. Давно известна облигатная ассоциация a.
nodosum с грибом
mycophycias
ascophylli (Cotton) kohlmeyer&v olkman-
kohlmeyer (Ascomycota). Мицелий гриба всегда при-сутствует в тканях водоросли, и размножение обоих партнеров происходит синхронизированно. Однако многие аспекты взаимодействия остаются неизвест-ными. Жизненный цикл m.
ascophylli, например, пол-
ностью не прослежен; неясно, какие преимущества получаю
т партнеры от сожительства. экологические
формы a. nodosum никогда на наличие мицелия не рас-
сматривались.
Целью нашей работы было изучение биологии m.
ascophylli
(в частности) и симбиоза a. nodosum – m.
ascophylli
(в целом), в Кандалакшском заливе Белого
моря в окрестностях ББС. Для достижения этой цели были использованы методы световой и электронной микроскопии, посевы на культуральные среды и мето-ды молекулярной филогенетики.
Нами впервые были исследованы экологические
формы (экады) a.
nodosum , о микофильности которых
ранее известно не было. Мицелий гриба пронизывает талломы экад полностью, как и у типичной формы a.
nodosum
. Количество мицелия увеличивается у экад,
подвергающихся длительному осушению при отливе. эт
от результат подтверждает уже существующую ги-
потезу о том, что гриб в данной ассоциации повышает выживаемость водоросли при длительном осушении (Garbary, Deckert 2001). Кроме того, на талломах экад водоросли, размножающихся исключительно вегета-тивно, не найдено плодовых тел m. ascophylli . Для
исследования филогении m. ascophylli были
разработаны методы выделения тотальной ДНК из талломов водорослей с последующей амплификаци-ей грибной рДНК. Для выяснения филогенетичес-ких связей m.
ascophylli были секвенированы учас-
тки ITS1, 5.8S, ITS2 геномной рДНК, как наиболее употребительные. По результатам секвенирования выяснилось, что ближайшими, однако достаточно удаленными, родственниками m.
ascophylli являются
грибы рода mycosphaer ella, паразитирующие на лис-
тьях eucalyptus spp.(www .ncbi.nih.nlm.gov). Здесь не-
обх
одимо отметить следующее: семейство fucaceae
бурых водорослей, распространенное почти исключи-тельно в северном полушарии, по данным геносисте-матики происходит из Австралии. a.
nodosum считает-
ся самым древним таксоном в этом семействе (Serrгo et al., 1999). Так что, скорее всего, отделение этого мо-нотипического рода произошло одновременно с обра-зованием ассоциации с m.
ascophylli (или вследствие
этого), а затем уже произошло повсеместное расселе-ние a. nodosum
в северном полушарии.
Литература1. Garbary D.J., Deckert R.J.(2001) Three part
harmony
– ascophyllum and its symbionts // In:
«Symbiosis: Mechanisms and Model Systems» (ed. J.Seckbach). kluwer
, Dortrecht, the Netherlands, p.309–
321.
2. Serrгo E.A., Alice L.A., Brawley S.H. (1999)
Evolution of
the fucaceae (phaeophyceae) inferred from
nrDNA-ITS // Journal of phycology. vol.35, p. 382–394.
3. www.ncbi.nih.nlm.gov – National Center for
Biotechnology Information,
Симбиоз грибов и растений 399
В 2000–2007 гг. изучены эндофитные грибы мхов
и сосудистых растений, произрастающих на олиго-
трофных сфагновых болотах Украинского Полесья (Житомирская и Ровенская обл.). Такие исследования актуальны как с позиций оценки распространения эн-дофитных грибов в растениях-доминантах раститель-ного покрова лесных сфагновых болот, так и участия эндофитных грибов в биологических системах «сосу-дисто
е растение-хозяин – гриб-симбионт». Исследова-
но 2000 образцов 36 видов высших растений, изолиро-вано свыше 3000 штаммов микромицетов. Примерно у 50
% выделенных культур обнаружено спороношение,
что, по-видимому, связано с их местообитанием. В ли-тературе встречаются сведения о выделении грибов-эндофитов в виде стерильного мицелия [Lodge et al., 1996; pelaez
et al., 1998]. Идентифицированные куль-
туры были отнесены к 120 видам различных таксоно-мических групп.
Проведен сравнительный анализ целлюлазной и
ксиланазной активностей фитопатогенных и эндофит-ных грибов разных видов рода Fusarium, штаммов
alternaria
alternata , ceratocystis sp. разных трофичес-
ких групп, а также определена скорость их линейного роста на средах с карбоксиметилцеллюлозой (КМЦ) и ксиланом. Ферментативную активность определяли качественным методом, разработанным в лаборато-рии физиологии грибов Института ботаники Регенс-бургского университета (Германия) (Molitoris, 1978; Molitoris et al., 1986).
Изучена целлюлазная и ксиланазная активности
штаммов исследованных грибов, но не выявлено чет-кой зависимости этих активностей от вида и органа растения-хозяина. Большинство изученных штаммов не обладали целлюлазной активностью, или она была слабой, однако фитопатогенные штаммы были в целом более активными, чем эндофитные. Активность целлю-лазы у ceratocystis
sp. равнялась или превышала актив-
ность фитопатогенных штаммов alternaria и Fusarium.
Ксиланазная активность у штаммов a. alternata всех
трофических групп была выше, чем целлюлазная. По качественному проявлению целлюлазной активнос-ти фитопатогенные штаммы рода Fusarium обладали
большей целлюлазной активностью, чем сапротроф-ные и эндофитные. Ксиланаза штаммов ceratocystis
sp.
характеризовалась наибольшим диапазоном измен-
чивости. У фитопатогенных изолятов активности цел-люлазы и ксиланазы колебались от полного отсутствия до высоких уровней. Можно предположить, что изу-ченные штаммы ceratocystis
sp. являются латентными
паразитами болотных растений, которые при неблаго-приятных условиях могут вызывать их заболевания. У всех изученных штаммов не обнаружено корреляции между скоростью линейного роста на агаризованых средах и уровнями целлюлазной и ксиланазной актив-ностей. Штаммы ceratocystis
sp. характеризовалась
наибольшим диапазоном изменчивости скорости ли-нейного роста на среде с КМЦ и ксиланом по сравне-нию с изученными штаммами Fusarium и a.
alternata.
Скорость линейного роста фитопатогенных штаммов ceratocystis
sp. была ниже чем у эндофитных в 2,4 –
3,6 раза на среде с КМЦ и почти в 70 раз на среде с ксиланом. Не выявлено четкой зависимости между уровнями целлюлазной и ксиланазной активностей от вида и органа сосудистого растения, из которого выде-лен гриб. Зависимость ксиланазной активности от па-тогенности изолята может варьировать на штаммовом уровне, или быть характерной для конкретного вида и даже рода гриба. ЦЕЛЛЮЛАЗНАЯ И КСИЛАНАЗНАЯ АКТИВНОСТИ У эНДОФИТНЫХ
ГРИБОВ СФАГНОВЫХ БОЛОТ УКР АИНСКОГО ПОЛЕСЬЯ
Курченко И.Н.1, Соколова Е.В.1, Жданова Н.Н.1, Юрьева Е.М.1, Ярынчин А.Н.2
1 Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАН Украины,
киев
2 Институт защиты растений Украинской академии аграрных наук, ул. васильковская,
киев
ФИТОГОРМОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ КУ ЛЬТУР АЛЬНОЙ
СРЕДЫ ГРИБА-эНДОФИТА РОДА acremonium
Нагорный С.Н., Драговоз И.В., Яворская В.К.
Институт физиологии растений и генетики НАН Украины,
киев
Применение регуляторов роста растений является
неотъемлемым звеном интенсивной технологии выра-щивания многих хозяйственно ценных культур. При этом особое внимание уделяют регуляторам роста и комплексным препаратам природного происхождения как одним из важных элементов органического земле-делия. Компоненты таких препаратов хорошо метабо-лизируются, не накапливаются в конечной продукции и почве, позитивно влияют на микрофлору почвы и улучшают её структуру. Комплексные препараты на основе природного сырья стимулируют рост растений, повышают их иммунитет и защищают от фитопато-генов. Такие препараты можно получать из отходов спиртодрожжевого производства, морских водорос-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 17 400
лей, продуктов биоконверсии растительных остатков,
а также с помощью микробиологического синтеза.
Способность синтезировать метаболиты с высокой
физиологической активностью широко распростране-на среди эндомикоризных и фитопатогенных грибов. эт
о могут быть фитогормоны, их аналоги, микоток-
сины и др. О важной функциональной роли в жизни растений микоризных грибов свидетельствует их ши-рокое распространение: все голосеменные, большинс-тво
однодольных (75 %) и двудольных (90 %) расте-
ний имеют микоризу. Микоризные грибы-эндофиты продуцируют и накапливают в мицелии фитогормоны, витамины, аминокислоты, которые используются рас-тением. Они являются составной частью препаратов, полученных из чистых культур грибов-эндофитов.
В опытах использовали культуральную среду ми-
коризного гриба-эндофита рода acr
emonium, выде-
ленного из ризосферы женьшеня настоящего (Panax
ginseng C.A. Meyer). Гриб культивировался на жидкой
питательной среде, разработанной для выращивания грибов-эндофитов, 48 дней (І пассаж) и 29 дней (ІІ пассаж). Наличие фитогормональной активности оп-ределяли в культуральной среде с помощью специфи-ческого биотестирования.
Ауксиновую активность определяли по суточно-
му приросту отрезков колеоптилей озимой пшеницы сорта Альбатрос Одесский. Максимальный показатель наблюдался при анализе неразведенной среды І пасса-жа и
имел значение 18 % по отношению к контролю.
Культивирование в среде с ИУК (10–5 М) стимулирова-ло приро
ст колеоптилей на 20 % по отношению к кон-
тролю. Тест на стимуляцию ризогенеза со срезанными черенками фасоли показал, что неразведенная среда ингибирует корнеобразование. Стимуляция ризогенеза начинает проявляться при 10-кратном разведении сре-ды. Максимальная активность наблюдалась при разве-дении сре
ды в 100 раз – 47 % относительно контроля. При тестировании цитокининовой активности на изо-лированных семядолях огурца сорта Нежинский мак-симальную активность проявляла среда, разведенная в 10 раз
– 26 % (І пассаж) и 41 % (ІІ пассаж). 6-бензи-
ламинопурин стимулировал прирост массы семядолей на 64
%. Максимальный показатель гибберелловой
активности наблюдали в культуральной среде ІІ пас-сажа
при разведении в 10 раз – 22 %, и в 50 раз – 7 %
соответственно. Инкубирование проростков огурца в растворе гибберелловой кислоты (10–4М) стимулиро-ва
ло прирост гипокотилей на 12 % относительно кон-
троля. Ингибирование ростовых процессов, характер-ных для культуральной среды І пассажа, по-видимому, связано с наличием фенольных соединений и других продуктов метаболизма, которые при высокой концен-трации в среде культивирования не дают возможности проявиться специфической фитогормональной актив-ности. При разведении среды их негативное действие снижается, и начинает проявляться стимулирующее действие фитогормонов. Известно, что низкие концен-трации фенольных соединений, особенно в присутс-твии ауксина, проявляют стимулирующее действие, в частности, на процесс ризогенеза. Именно такой эффект наблюдался при высоком разведении (1:100) культуральной среды.
Таким образом, гриб-эндофит рода acr
emonium
продуцирует в питательную среду фитогормоны аук-синовой, цитокининовой и гибберелловой природы, а также другие вещества-индукторы ризогенеза. Среда культивирования гриба-эндофита может быть исполь-зована для создания комплексных регуляторов рос-та растений. Длительное культивирование (более 30 дней) гриба-эндофита рода acr
emonium in vitro приво-
дит к накоплению в культуральной среде веществ-ин-гибиторов,
возможно, фенольной природы. этот факт
надо учитывать при создании комплексного регулято-ра роста на основе экзометаболитов гриба-эндофита.
МИКОРИЗНЫЕ АГАРИКОИДНЫЕ БАЗИДИОМИЦЕТЫ
ЛЕСОПАРКА «Б АЛАТОВСКИЙ» Г . ПЕРМИ
Переведенцева Л.Г.
Пермский государственный педагогический университет,
Пермь
Городские леса г. Перми, крупного промышлен-
ного центра, являются средообразующим фактором, выполняющим санитарно-гигиенические, культурно-оздоровительные, рекреационные, эстетические, водо-охранные и почвозащитные функции. Балатовский ле-сопарк, занимающий площадь 689,0 га, расположен на левобережье реки Камы, в основном на красноцветных суглинках и глинах. Зональным типом растительности является зеленомошно-травяной пихтово-еловый лес, но в лесопарке распространены и сосновые леса. Под воздействием антропогенных факторов (рубки, пожары, выпуск сточных вод на территорию) происходит замена хвойных пород березой, рябиной, ивой, ольхой, осиной. Наблюдается внедрение растений, используемых в озе-ленении города (тополя, яблоня, ирга, карагана и др.)
Агарикоидные базидиомицеты являются одной из
наиболее изученных групп грибов Пермского края (844 вида и внутривидовых таксона), однако сведений о разнообразии микоризных агариковых грибов в го-родских лесах недостаточно.
В результате маршрутных исследований, проводи-
мых с 2000 г., было выявлено 107 видов и внутривидо-вых таксонов микоризных агарикоидных базидиоми-цетов, относящихся к 4 порядкам (Agaricales, Boletales, Cortinariales,Russulales), 12 семействам и 26 родам. На-ибольшим видовым разнообразием среди микоризных
Симбиоз грибов и растений 401
агариковых грибов характеризуются представители се-
мейств: Russulaceae
– 35 видов (33 %), Cortinariaceae –
23 вида (21 %), Tricholomataceae – 17 видов (16 %) и Amanitaceae – 10 видов (9 %). На долю перечисленных семейств приходится около 79 % всего видового соста-ва микоризных грибов. Такое соотношение семейств не характерно для лесов подзоны южной тайги, где пре-обладают грибы, относящиеся к сем. Tricholomataceae. Обилие видов сем. Russulaceae указывает на немораль-ные черты микобиоты. По-видимому, метеорологи-ческие условия города способствуют развитию более южных видов. С другой стороны, грибы этого семейс-тва, видимо, более приспособлены к ценозам, испыты-вающим рекреационную нагрузку. В силу сказанного наиболее распространенными оказались грибы рода Russula
– 21 вид, Lactarius – 14. Довольно много видов
в родах – Cortinarius – 11, Amanita – 10, Tricholoma – 8, Inocybe, Hebeloma – по 6 видов. Остальные 19 родов содержат менее 5 видов грибов (11 родов являются од-новидовыми).
В зависимости от степени проявления симбио-
трофных свойств у микоризных грибов выделяют: 1
– узкоспециализированные симбиотрофы (29 ви-
дов); 2
– симбиотрофные грибы с широким кругом
растений-хозяев, не способные формировать базиди-омы асимбиотически (67 видов). К факультативным симбиот
рофам относятся 11 видов. это, в основном,
представители родов – chlorophyllum, macrolepiota,
marasmius, rhodocollybia.
В лесопарке было выявлено 25 видов грибов, кото-
рые являются редкими. Например, Hebeloma testaceum,
cortinarius
sertipes, cortinarius violaceus, inocybe
asterospora, Tricholoma populinum.
Из найденных 107 видов микоризных агариковых
гр
ибов 76 видов (71 % микобиоты исследованного
района) являются съедобными. Тем не менее, в пищу их использовать не рекомендуется в связи с тем, что гри-бам свойственно накапливать в себе токсические соеди-не
ния. Ядовитые виды составляют 13 видов (12 %).
Таким образом, микоризные грибы лесопарка «Ба-
латовский» довольно разнообразны. Преобладают виды, относящиеся к сем. russulaceae. Наибо
лее рас-
пространены грибы с широким кругом растений-хозя-ев. Значительна доля редких видов.
АССОЦИИРОВАННОСТЬ МИКРОМИЦЕТОВ С Р АСТЕНИЯМИ
ПРИМОРСКИХ ЛУГОВ КАНДАЛАКШСКОГО ЗАЛИВА (БЕЛОЕ МОРЕ)
Порхунова Н.Н.
МГУ им. М.в. ломоносова, Биологический факультет,
кафедра Микологии и альгологии,
Москва
Приморские луга представляют собой особые
местообитания со своеобразным элементарным и элементным составом. Будучи подвержены непос-редственному влиянию моря, они характеризуются высокими влажностью и соленостью, а следователь-но, низкой активностью воды. Таким образом, при из-бытке влаги, вода остается малодоступной для орга-низмов, обитающих на приморском луге. Кроме того, периодические затопления создают в почве условия гипоксии.
Приморские луга Белого моря имеют свои специ-
фические особенности: низкие температуры в течение всего года, короткий вегетационный период у расте-ний, ледяной покров в зимнее время.
Тем не менее, приморские луга принадлежат к чис-
лу наиболее продуктивных экосистем на Земле. Мно-гие организмы, населяющие берега, не встречаются ни в каких иных экосистемах.
Понимание механизмов приспособленности орга-
низмов приморских лугов к их местообитанию не бу-дет полным без рассмотрения их взаимодействий друг с другом. Один из примеров такого взаимодействия являют собой взаимоотношения высших растений и микромицетов.
С одной стороны, показано, что на развитие мико-
биоты в зоне литорали существенное влияние оказы-вают корневые системы растений. С другой стороны, грибы ризосферы микоризы, способны значительно улучшить условия существования растений.
Целью работы являлось исследование ассоции-
рованности с грибами корневых систем приморских растений побережья Кандалакшского залива Белого моря.
Материалами для изучения послужили корни расте-
ний, доминирующих на лугах среднего и низкого уров-ней в данном районе: aster
tripolium L. (Asteraceae),
alopecurus
arundinaceus poir. (poaceae), Plantago ma-
ritima L. (plantaginaceae), T riglochin maritimum L. (Jun-
caginaceae).
Материал был обследован для выявления мицелия
и микоризных структур непосредственно в корнях, после просветления и последующей окраски корни изучали с помощью микроскопа.
Кроме того, были проанализированы микроско-
пические грибы в ризосфере и ризоплане исследуе-мых растений путем посева на агаризованные среды смывов и отмытых корней в первом и втором случае соответственно. Для анализа корневых эндофитов на среды высевали фрагменты отмытых корней после по-верхностной стерилизации.
В результате исследования были обнаружены ре-
гулярно выявляемые структуры арбускулярной мико-ризы (арбускулы, везикулы) в корнях aster
tripolium,
alopecurus
arundinaceus и Plantago maritima. При этом
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 17 402
можно отметить сходство в способности образовы-
вать микоризу для этих растений в высоких широтах с тем, что наблюдалось при исследованиях в тропиках и умеренных широтах. В корнях Triglochin maritimum в
значительном количестве наблюдался темный септиро-ванный мицелий, принадлежащий, по всей видимости, аскомицету-эндофиту.Микромицеты, выделенные культуральными ме-
тодами, в систематическом плане относятся к двум группам: 1) аскомицеты и их анаморфы, 2) стерильные мицелии. С экологической точки зрения, обнаружены как облигатные морские, так и факультативные морс-кие грибы.
эКОТОПИЧЕСКАЯ ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ КОЛИЧЕСТВЕННЫХ
ПРИЗНАКОВ МИКОРИЗЫ Picea oboV aTa LEDEb.
Творожникова Т.А.
Институт биологии к оми НЦ Уро РАН,
Сыктывкар
Исследования проводили в старовозрастных ело-
вых фитоценозах разного типа средней и крайне се-верной тайги. При описании типа грибного чехла, его структуры использовали классификацию (Селиванов, 1981). Определяли диаметр эктомикоризных корневых окончаний, толщину грибного чехла, рассчитывали объемную долю микобионта.
В условиях Севера максимальное количество тон-
ких корней древесных растений сосредоточена в вер-хних горизонтах почвы (Бобкова, 1987). Согласно на-шим наблюдениям, основная масса тонких корней ели сибирской находится в пределах границы проекции кроны: в средней тайге на расстоянии 2 м от ствола дерева, в крайне с
еверной тайге – 1.5 м.
Объемная доля и толщина грибного чехла мико-
ризы ели в средней тайге варьировали в пределах 15–40
%, в подзоне крайне северной тайги – 7 – 32 %.
Толщина, объемная доля чехла и диаметр микоризных корневых окончаний достоверно различались в ельни-ке черничном и сфагновом. Количественные показате-ли структуры эктомикориз ели закономерно менялись в течение вегетационного сезона. В ельнике чернич-ном снижение значений объемной доли и толщины грибного чехла, диаметра эктомикориз отмечали в на-чале июля и постепенное увеличение этих показателей к концу вегетации. В подзоне крайне северной тайги диаметр эктомикориз, толщина и объемная доля гриб-ного чехла также достоверно различались в ельниках разнотравно-зеленомошном, чернично-сфагновом и долгомошно-сфагновом. Наиболее развитая микори-за отмечена в ельниках разнотравно-зеленомошном и зеленомошно-лишайниковом. Наименее развит мико-ризный чехол в ельнике чернично-сфагновом и долго-мошно-сфагновом. В однотипных ельниках средней и крайне северной тайги структурные показатели мико-риз имели сходные значения.
Таким образом, неоднородное пространственное
распределение корневых окончаний в подстилке оп-ределяется размещением деревьев ели в еловом фи-тоценозе. В условиях избыточного увлажнения почв снижалась интенсивность микоризообразования. Се-зонная динамика в изменении количественных пока-зателей микоризных корневых окончаний связана, ве-роятно, с ростовой активностью корней и динамикой углеводов.
Литература:Бобкова К.С. Биологическая продуктивность хвой-
ных лесов европейского Северо-Востока. Л., 1987.156 с.
Селиванов И.А. Микосимбиотрофизм как форма
консортивных связей в растительном покрове Совет-ского Союза. М., 1981. 232 с.
О ЗНА ЧЕНИИ ПОДВИЖНОГО АЗОТА
ДЛЯ ПЛОДОНОШЕНИЯ
эКТОМИКОРИЗНЫХ ГРИБОВ
Шубин В.И.
Институт леса карельского НЦ РАН,
Петрозаводск
Получаемые от древесных растений углеводы экто-
микоризные
грибы (эМГ) в первую очередь использу-
ют
на формирование эктомикориз, затем – мицелия и в
последнюю – плодовых тел. В отличие от макромице-тов
– сапротрофов, такое снабжение эМГ углеводами
ослабляет у них зависимость образования плодовых тел от биомассы мицелия и обеспечивает им актив-ность во всем корнеобитаемом слое почвы (Шубин, 1973, 1990, 2004). Исследования О.О. Предтеченской (1994, 1998)
показали, что у эМГ отсутствует прямая
связь между биомассой мицелия и плодовых тел.
Большинство лесных биогеоценозов таежной зоны
развивается при постоянном дефиците доступного (подвижного) азота при высоком его валовом запа-
Симбиоз грибов и растений 403
се. На большое значение подвижного азота микологи
обратили внимание во второй половине XX века. Как правило, продолжительность их наблюдений за дейс-твием у
добрений на плодоношение эМГ не превы-
шала пяти лет. Поэтому многие авторы считали свои выводы предварительными и, указывая на сложность вопроса, отмечали необходимость длительных и комп-лексных исследований.
Изучение влияния удобрений на плодоношение
эМГ
нами начато в сосняках брусничных в 1967, а в
березняках разнотравных в 1970 г. и продолжается в на-стоящее время. Установлено, что основное влияние на сост
ав и урожаи эМГ оказывает азот, на фоне которого
проявляется действие фосфора и калия. В большинстве случаев внесение азота увеличивает общий урожай, но обе
дняет состав эМГ за счет ослабления или прекра-
щения плодоношения многих видов, особенно широко изве
стных съедобных. Выявлены эМГ – индикаторы
изменения содержания в почве подвижного азота. Сре-ди них наибольшее значение имеют amanita
muscaria,
Paxillus involutus и lactarius plumbeus. эти виды ис-
пользованы нами для оценки изменения содержания в почве азота и особенностей изменения общего урожая эМГ
и плодоношения boletus betulicola в опыте с вне-
сением мочевины (N) в 1971–1973 и 1979–1981 гг.
Из полученных данных видно, что внесение азо-
та оказывает более продолжительное положительное влияние на урожаи a.
muscaria . Причем, в отличие от
P . involutus и l. plumbeus, между урожаями a. muscaria
и b. betulicola после 2000 г., как в контроле, так и на
опытном участке, прослеживается синхронность в ко-лебаниях размеров урожаев. Такая связь между пло-доношением a.
muscaria и видами р. boletus издавна
привлекала внимание как грибников–любителей, так и специалистов. Отражена она и в народных приметах: «Красный мухомор дорогу к белому грибу показыва-ет» или
«Появился мухомор – жди белых грибов». М.
Левченко (1884) наблюдал совместное плодоношение a.
muscaria и видов р. boletus в Киевской губернии,
а Б.П.
Васильков (1966) – в горной тундре. Массовое
плодоношение a. muscaria и видов р. boletus отмече-
но в горах южной Вестфалии осенью 1973 г. после засушливого летнего периода (Denker, 1973). Необы-чайно высокий урожай видов р. boletus
наблюдался в
юго–восточной Франции осенью 1983 г. также после засушливого лета (Bourlier, 1984).
Необычайно высокий урожай видов р. boletus
отме-
чен на территории Карелии в 2003 г. с жарким и сухим летом. Дожди в этот год начались в начале августа, и основной урожай пришелся на 3-ю декаду августа и 1-ю декаду сентября. Урожай был представлен исключи-тельно т
рубчатыми эМГ с доминированием р. boletus .
Предшествующие два года были низкоурожайными из–за жаркой и сухой летней погоды.
Установленная нами синхронность плодоношения
видов рода boletus
и a. muscaria свидетельствует о том,
что причиной такого усиления плодоношения является накопление в почве подвижного азота. При жаркой и сухой погоде дефицит воды ограничивает использова-ние растениями азота, образующегося при разложении микроорганизмами органического вещества. В мень-шей степени недостаток воды влияет на деятельность аммонифицирующих организмов. Кроме того, более глубокое прогревание почвы повышает активность ассоциативной фиксации азота воздуха микроорга-низмами ризосферы и, особенно, эктомикоризосферы древе
сных растений. этот канал поступления в почву
азота слабо изучен, но он может иметь существенное значение, так как активность микроорганизмов обес-печивается углеводами, поступающими из корней дре-весных растений.
Влияние пог
одных условий на плодоношение эМГ
проявляется дифференцированно в зависимости от распределения их мицелия по профилю почвы. В жар-кое и сухое лето ослабляется плодоношение видов р. cortinarius
и большинства пластинчатых грибов, рас-
пространение мицелия которых ограничено лесной подстилкой и гумусированным горизонтом почвы. Большинство трубчатых, среди которых наиболее глу-боко с корнями древесных растений проникает в почву мицелий видов р. boletus
, получают возможность при
наступлении благоприятных условий увеличивать уро-жаи за счет неиспользуемых пластинчатыми грибами углеводов древесных растений и азота почвы.
Потепление климата, начавшееся в 90-х годах про-
шлого века, увеличило урожаи трубчатых по отноше-нию к
урожаям пластинчатых эМГ. Так, в березняке
разнотравном за 1970–1994 гг. доля трубчатых грибов в общем урожае составляла 10, а за 1995–2007 гг. она увеличилась
до 31 %. Изменилось и соотношение вы-
соких (В), средних (С) и низких (Н) урожаев, которое за 1970–1994 гг. выражалось формулой 2В4С4Н, а за 1995–2007 гг.
– 1В3С6Н.
Плодоношение трубчатых эМГ следует считать
одним из важных барьеров ограничения вымывания подвижного азота из корнеобитаемого слоя почвы. Древесные растения активно участвуют в создании такого барьера, дополнительно расходуя углеводы на формиров
ание плодовых тел. Пока участие эМГ в за-
креплении подвижного азота рассматривается через его содержание в биомассе мицелия, эктомикориз и плодовых тел. Полученные данные указывают на то, что сам процесс формирования плодовых тел также направлен на выполнение этой задачи. В настоящее время среди микологов преобладает мнение, что сезон-ные к
олебания урожаев эМГ зависят от биомассы ми-
целия. Поэтому влияние погодных условий на урожаи эМГ
оценивается по их влиянию на развитие мицелия,
возможности которого реализуются при наступлении благоприятных погодных условий. Нами предлагается рабочая гипотеза, согласно которой сезонные колеба-ния уро
жаев эМГ связаны с содержанием в почве под-
вижного азота. Погодные условия влияют на плодоно-шение эМГ
как непосредственно, преимущественно
через водный режим, так и косвенно, через изменение содержания в почве подвижного азота.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 17 404
эндомикоризные грибы широко распространены
в различных почвенно-географических зонах страны.
Ха
рактерной особенностью арбускулярно – мико-
ризных грибов (АМ) является широкий круг расте-ни
й – хозяев. Они образуют микоризу со злаковыми,
бобовыми, цитрусовыми, сложноцветными, хвойны-ми и др. Действие АМ грибов проявляется в повыше-нии активности роста и урожайности сельскохозяйс-твенных растений. При этом элементы минерального питания поглощаются из почвы наружными гифа-ми эндофита и поступают во внутренние грибные структуры, а затем попадают в растение. Известно, что гифы АМ способны трансформировать трудно-доступные элементы минерального питания из поч-ве
нного слоя – 7–15 см. Степень микоризации корней
зависит от вида растения, типа почвы, ее острукту-ренности, механического состава, рН среды, способа обработки, наличия предшественников и других фак-торов. Степень микоризации корней зависит от вида растения-хозяина и эндомикоризного гриба. При со-ответствующем подборе партнеров можно получить эффективный симбиоз для конкретных почвенно-климатических условий.
Настоящее исследование проводили на почвах до-
лины реки Клязьмы. Дерново-слабоподзолистые поч-вы под травянистой растительностью сменяются на глубине 25–30 см маломощным белесо-палевым под-золистым горизонтом. По химическому составу пой-менные дерново-подзолистые (лесные) почвы характе-ризуются кислой реакцией (рН 4,5), низкой степенью насыщенности
основаниями (около 50 %), высокой
гидролитической кислотностью (до 15 мг~экв/100 г) и низким содержанием гу
муса (не более 3 %).
На мелкоделяночных участках выращивали пше-
ницу, овес, просо, кукурузу. В период репродуктивно-го возраста определяли степень микоризации корней после отмывания и мацерации в течение 1–1,5 часа на во
дяной бане в 15 % растворе КОН. Частоту встреча-
емости микоризной инфекции определяли под мик-роскопом. Подсчитывали число везикул и арбускул в корнях последнего и предпоследнего порядка.
Сравнительные данные показали, что микоризация
корней у проса и кукурузы была выше чем у пшени-цы и овса. Фотостимулирующую активность абори-генной микоризы определяли в вегетационном опыте, используя смесь почвы и измельченных микоризован-ных корней растений. При выращивании пшеницы на такой смеси отмечали прибавку в накоплении биомас-сы, к
оторая составляла 15–18 % у проса и кукурузы и
8–10 % – у пшеницы и овса. Для повышения эффек-тивности аборигенных эндомикоризных грибов на де-градированных дерново-подзолистых почвах необхо-димо рассмотреть различные агротехнические приемы растениеводства.ВЛИЯНИЕ АБОРИГЕННЫХ эНДОМИКОРИЗНЫХ ГРИБОВ
НА ПРИРОСТ БИОМАССЫ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ Р АСТЕНИЙ
Юрина Т.П.
Московский государственный университет имени М.в. ломоносова,
биологический факультет,
Москва
Фолликулит, вызванный Malassezia – частое заболе-
вание, встречаемое у молодых людей, представленное
папуло-пустулезными высыпаниями, связанными с фол-ликулами, и сопровождающееся зудом. Высыпания рас-полагаются, как правило, на верхней части туловища. Ди
агноз Malassezia – фолликулита выставляется при
выделении дрожжей, либо при высокой эффективности эмпирически назначаемой противогрибковой терапии. Зачастую в результате неправильно установленного диагноза пациенту назначаются антибиотики, которые могут ухудшить состояние пациента и привести к ак-тивному размножению дрожжевой флоры.
Нами обнар
ужено, что Malassezia – фолликулит со-
став
ляет около 30 % всех фолликулитов. Обследовано
47 человек с Malassezia – фолликулитом. Отмечено, что при Malassezia – фолликулите обсемененность поверхности кожи клетками дрожжеподобных грибов значительно выше и в десятки раз превышала таковые показатели на здоровой коже.
Для повышения эффективности диагностики Mal-
assezia
– фолликулитов были разработаны клинико–
диагностические критерии: множественные папулы диаметром от 2 до 4 мм, на месте которых развивают-ся пустулы; высыпания связаны с фолликулами; содер-жимое пустул белого или слегка желтоватого цвета; локализация на спине и груди, плечах, верхних конеч-ностях, лице (редко); в незатронутых фолликулах от-мечается голубоватое или беловатое свечение при ос-вещении лампой Вуда; отсутствие комедонов и цист, сопутствующий себорейный дерматит.
У 12 человек провели диагностическую биопсию
кожи для подтверждения диагноза и изучения морфоло-гической картины Malassezia фолликулита. На препара-тах, окрашенных гематоксилин-эозином, на поверхнос-ти рогового слоя обнаруживаются скопления клеток, имеющих различную форму: округлую, овальную, ве-ретеновидную, S-образную, палочковидную, эллипсо-идную. Обнаруживаются нитчатые структуры, которые часто имеют разветвления и формируют своеобразные розетки. Вокруг них находятся клеточные инфильтраты разной плотности, состоящие из лимфоцитов, макро-фа
гов, единичных нейтрофилов, плазмоцитов. эти ин-
фильтраты особенно выражены вокруг подсосочковой сосудистой сети, однако они наблюдаются и в более глубоких отделах сетчатого слоя. Часто вблизи описан-ных структур и даже в тесном соприкосновении с ними можно обнаружить клетки макрофагического ряда, что, очевидно, является проявлением фагоцитоза. Указанные структуры обнаруживаются также вблизи концевых от-делов сальных желез и выводных протоков потовых желез. В ряде случаев описанные образования скапли-ваются вблизи групп жировых клеток, которые встреча-ются вокруг подсосочковой артериолярной сети.
Вследствие глубокого расположения дрожжеподоб-
ных грибов при фолликулите традиционная терапия местными противогрибковыми препаратами иногда оказывается недостаточно эффективной и приводит к частым рецидивам. Предложен метод лечения Malas-sezia
– фолликулита итраконазолом в дозе 200 мг в
день в течение 14 дней. Пациенты были разделены на опытную (ОГ, n=24) и контрольную (КГ, n=23) группы. Средний возраст пациентов опытной группы составил 20,3 ±
2,8 лет, контрольной – 22,1±8,2 года. Продол-
жительность заболевания в опытной группе составила 2,9±1,2 г
ода, в контрольной – 3,2±1,7 года. КГ получа-
ла традиционную терапию местными противогрибко-выми препаратами, а в ОГ проводилось комплексная терапия с использованием итраконазола.
Среднее
значение индекса тяжести Malassezia –
фолликулита до начала терапии в ОГ составило 6,8±1,0 баллов,
а в КГ – 6,3±1,0 баллов. После 14 дней лечения
среднее значение индекса тяжести составило 2,7±1,8 баллов в КГ и 1,5±1,6 баллов в ОГ (р<0,05). Ремиссия отмечена у 10 пациентов ОГ и у 5 пациентов КГ, зна-чительное
улучшение – у 9 пациентов ОГ и у 7 паци-
ентов КГ. Больные наблюдались в течение года после Раздел 18
ДЕРМАТОМИКОзы.
КАНДИДО
з СЛИзИСТых ОбОЛОЧЕК
malaSSezia – ФОЛЛИКУ ЛИТ: КЛИНИКА, ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ
Адаскевич В.П., Козловская В.В.
вите
бский государственный медицинский университет,
витебск
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 406
проведенного лечения, фиксировалось число рециди-
вов заболевания. У больных Malassezia–фолликулитом в ОГ
рецидивов не было, а в КГ они отмечены у 60,9 %
больных (р<0,05).
Таким образом, системная терапия итраконазолом
является этиологически обоснованной, более эффек-тивной вследствие глубокого расположения гифов дрожжеподобных грибов и воспаления в глубоких слоях кожи. Терапия итраконазолом позволяет добить-ся хороших результатов и более длительной ремиссии по сравнению с местными противогрибковыми средс-твами.
КАНДИДОЗНАЯ ИНФЕКЦИЯ У ЖЕНЩИН,
ОБР АТИВШИХСЯ В ЖЕНСКИЕ КОНСУ ЛЬТАЦИИ
Акышбаева К.С., Джусупгалиева М.Х., Калоиди И.А.
казах
ский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова,
Алма-ата, казахстан
С целью изучения частоты выделения кандидозной
инфекции проведено комплексное клинико-лаборатор-ное обследование 50 женщин, обратившихся с жалоба-ми на выделения из влагалища в гинекологический ка-бинет семейной врачебной амбулатории пос. Дружба.
Обследуемые женщины были разделены на воз-
растные группы: 17–20 лет; 21–30; 31–39, 40 лет и старше, позволившее возможность установления час-тоты исследуемой инфекции в конкретной возрастной группе
– выявлено преобладание кандидозной инфек-
ции у
женщин в группе от 21 до 30 лет (61,0±4,8 %).
Средний возраст обследуемых находился в пределах – 27,8±0,9 %.
Наряду с обследованием на кандидозную инфек-
цию, были проведены исследования на другие инфек-ции, пере
даваемые половым путем (ИППП) – гонорею,
трихомоноз, хламидиоз, микоплазмоз.
Использованы микробиологические, бактериоско-
пические, микроскопические и клинико-инструмен-тальные методы исследований.
Из 50 обследованных женщин почти у половины
(48,0
%) выявлены ИППП.
Кандидозная инфекция установлена у 16 из 24
(6
6,7 %) женщин, в подавляющем большинстве нахо-
ди
вшаяся в микст-инфекции (68,7 %), лишь в 31,2 %
случаев в моно-инфекции. Микст-кандидозная инфек-ци
я была представлена в 63,6 % кандида-трихомонад-
но
й, в 36,4 % – кандида-микоплазменной инфекциями.
Другие ИППП выявлены в 33,3 % случаев, пред-
ставленные в основном трихомонадной инфекцией, находившейся в трех случаях в сочетании с микоплаз-менной инфекцией, по одному случаю наблюдалось выявление трихомонадно-гарднереллезной и трихо-монадно-хламидийной инфекций. В моно-инфекции в
37,5 % случаев выявлена хламидийная инфекция.
Из объективных клинических симптомов наблю-
даемых у обследованных женщин с кандидозной инфекцией, во всех случаях наиболее частыми были обильные выделения из влагалища серовато-бело-ватого или молочного цвета, гиперемия и отечность вульвы.
Субъективные симптомы были выявлены из анам-
неза обследованных женщин, во всех случаях наблю-дались жалобы на дискомфорт из-за обильных выделе-ний, зуд, боли внизу живота.
Дальнейшее клиническое обследование женщин
с вагинальным кандидозом позволило установить у более
половины (68,7 %) различные воспалитель-
ные процессы органов малого таза, в частности, в 2 (18,2
%) случаях выявлена эрозия шейки матки, по 4
(36,4 %) – цервициты и сальпингиты, в одном случае – сальпингоофорит.
На основании комплексного клинико-лабораторно-
го исследования, включающего современные, инфор-мативные методы исследований установлен верифици-рованный диагноз вагинального кандидоза у женщин с симптомами выделения из влагалища.
Проведенное исследование свидетельствует о не-
обходимости комплексного обследования подобного контингента женщин.
ИЗБЫТОЧНАЯ ПОТЛИВОСТЬ: ПРОБЛЕМЫ И РЕШЕНИЯ.
Альбанова В.И.
Фармацевтическое научно-производственное предприятие «Ретиноиды»,
Москва
Потоотделение в норме разделяют на терморегу-
ляционное, психогенное и пищевое. Интенсивность потоотделения зависит от возраста, пола, веса тела, сост
ояния здоровья. Гипергидроз – состояние избы-
точного потоотделения. Различают первичный гипер-гидроз, не связанный с какими-либо болезнями, и вто-ричный, представляющий собой один из симптомов различных заболеваний.
Избыточная потливость наблюдается при многих
заболеваниях нервной системы (неврастении, истерии,
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 407
невритах, вегето-сосудистой дистонии, черепно-моз-
говых травмах, энцефалите, алкоголизме), эндокрин-ных нарушениях (сахарный диабет, тиреотоксикоз, ак-ромегалия, ожирение), заболеваниях кожи (лимфомы, эритродермии, проказа, микозы), острых и хроничес-ких инфекционных заболеваниях (паротит, опоясыва-ющий лишай, туберкулез), опухолях, гипертонической болезни, ревматизме, тромбофлебите, поражениях почек. Она может быть побочным действием ряда ле-карственных препаратов (аспирина, инсулина, проти-ворвотных средств, ненаркотических и наркотических анальгетиков).
Повышенная потливость может быть общей, захва-
тывающей всю поверхность кожи и местной, ограни-ченной отдельными участками (акрогидроз, гипергид-роз лица, подмышечных впадин).
В лечении больных с чрезмерной потливостью ос-
новная, трудно решаемая или не имеющая решения за-дача
– выявление и устранение причин, вызывающих
гипергидроз.
При общей потливости временный эффект дают
системная медикаментозная терапия, психотерапия. Потливость любого происхождения снижают гигие-нические мероприятия (обувь, одежда, уход за кожей, температурный режим). При ограниченном наруше-нии потоотделения применяют преимущественно на-ружные средства. Все наружные средства можно разделить на дезо-
доранты и антиперспиранты.
К последним относятся средства, содержащие фор-
мальдегид (Формагель
, Формидрон, паста Теймуро-
ва), соли алюминия (квасцы), цинка, свинца, хрома, висмута, салициловую кислоту, этиловый спирт и др.
Из физиотерапевтических процедур для лечения
гипергидроза применяют ионофорез холинолитичес-ких средств и водопроводной воды, общее и локальное ультрафиолетовое облучение, УВЧ на нижние грудные и поясничные симпатические узлы, душ Шарко, кос-венную диатермию (индуктотермию) шейных узлов, лучи Букки.
При гипергидрозе ладоней и подмышечных впа-
дин, не поддающемся лечению обычными способами, применяется хиругическое лечение (эндоскопическая трансплевральная резекция симпатических узлов или преганглионарная симпатэктомия, разрушение пото-вых желез методами подкожной резекции с помощью углекислого лазера, липосакции под местной анестези-ей, подкожного кюретажа), для устранения подмышеч-ного, ладонного и подошвенного гипергидроза приме-няются также инъекции ботулинического токсина.
Любые, даже самые эффективные наружные средс-
тва и методы лечения, не устраняют причины повы-шенного потоотделения, поэтому с их помощью мож-но достигнуть только временного результата.
НАРИНэ В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕР АПИИ КАНДИДОЗНОГО ВАГИНИТА
Альменова Л.Т.
казахский Национальный Медицинский Университет имени С.Д. Асфендиярова,
Алма-ата, казахстан
Среди инфекционных заболеваний влагалища кан-
дидозный вагинит занимает одно из ведущих мест, ус-тупая лишь бактериальному вагинозу и является одной из наиболее частых причин обращения женщин к спе-циалистам. Частота его за последние годы возросла в 2 раза и
составляет 30–45 % в структуре инфекционной
патологии нижнего отдела половых органов.
Факторы местного иммунитета урогенитального
тракта являются первой линией защиты, которые пре-пятствуют проникновению патогенных агентов.
Микрофлора влагалища в норме характеризуется
большим количеством лактобактерий, которые со-став
ляют 70–98 % общего числа микроорганизмов.
Наличие достаточного количества лактобактерий на слизистой
оболочке – важный фактор, обеспечиваю-
щий адекватный уровень местных иммунных меха-низмов. Кроме того, выделяющаяся в процессе обмена веществ этих микроорганизмов молочная кислота под-держивает рН влагалищной среды в пределах 3,8–4,4 , что обусловливает защиту от колонизации слизистой оболочки различными условно-патогенными и пато-генными микроорганизмами.
Нами было проведено клинико-лабораторное об-
следование 80 женщин в возрасте от 17 до 42 лет с давностью заболевания от 2-х месяцев и более, кото-рые в зависимости от метода лечения были разделе-ны на 2 группы: I группа (основная) –40 больных и II группа (контрольная)–40. Все пациентки проходили обследование до и после лечения, включавшее осмотр, микроскопия мазков из отделяемого влагалища, куль-туральное исследование (бактериальный посев на сре-ду Сабуро), определение секреторного IgA в вагиналь-ном секрете. Диагноз основывался на оценке данных анамнеза, субъективных и объективных клинических признаках (обильные или умеренные выделения из половых путей творожистого характера, зуд, жжение, раздражение в области наружных половых органов), результатах лабораторного обследования.
В основной группе назначали в качестве эти-
отропного препарата микосист (флуконазол), произ-водство «Гедеон Рихтер» по схеме: 150 мг 2-х крат-но per os с интервалами 7 дней. Дополнительно для местного лечения с первого дня всем больным был назначен эубиотик «Наринэ» (ацидофильная форма лактобактерина) в виде ванночек с целью восста-новления нормального микробиоценоза влагалища. В контрольной группе использовали микосист (по той же схеме).
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 408
Результаты исследования показали, что клиничес-
кие проявления у женщин (выделения, зуд, жжение,
гиперемия) в I (основной) группе исчезали на 2–3 день; во II (контрольной) группе на 5–6 день от начала тера-пии. Концентрация секреторного IgA в вагинальном секрете до лечения была значительно снижена в обеих группах. После проведенного лечения уровень секреторного IgA повысился в обеих группах, однако значительное повышение содержания SIgA отмечается в основной группе. Все пациентки лечение переноси-ли хорошо и не отмечали каких-либо побочных эффек-тов.
Таким образом, полученные результаты позволяют
считать включение эубиотика «Наринэ» в комплекс-ную терапию кандидозных вагинитов достаточно эф-фективным.
НОВОЕ В ДИАГНОСТИКЕ, ОЦЕНКЕ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА
И ПРОГНОЗИРОВАНИИ ВУ ЛЬВОВАГИНАЛЬНОГО КАНДИДОЗА
Арзуманян В.Г., Мальбахова Е.Т., Комиссарова Л.М.,
Сердюк О.А., Карапетян Т.Э.
1 ГУ НИИ в
акцин и сывороток им. И.И.Мечникова РАМН,
2 кафедра акушерства, гинекологии, перинатологии
и репрод
уктологии ФППов ММА им. И.М. Сеченова,
3 ФГУ НЦ акушерства, гинекологии и перинатологии
им. в
.И.кулакова Росмедтехнологий,
Москва
На сегодняшний день гуморальное и Т-клеточное
звенья общего иммунитета уже не считают наиболее значимыми в патогенезе вульвовагинального кандидо-за (ВВК)
[fidel p.L. Jr, 2002]. Среди многочисленных
факторов местного иммунитета можно выделить те, которые непосредственно взаимодействуют с клетка-ми оппор
тунистических дрожжей – это фагоцитиру-
ющие клетки, иммуноглобулины [Omaetxebarria, M. J. et al,
2005] и антимикробные пептиды (АМП – эндо-
генные
антибиотики) [v alore E.v . et al, 2002]. Оценка
различных механизмов прямого воздействия организ-ма хозяина на клетки candida
spp. при (ВВК) явилась
целью настоящего исследования.
В исследование были включены 45 беременных
женщин в возрасте от 22 до 35 лет, условно разделен-ных на четыре группы: с хроническим вульвоваги-нальным
кандидозом в стадии обострения – ХВВКО
(n=9), с хроническим вульвовагинальным кандидозом в ст
адии ремиссии – ХВВКР (n=10), с острым вульво-
вагина
льным кандидозом – ОВВК (n=13) и женщины
без типичных признаков вульвовагинального канди-доза на
момент обследования – АСИМ (n=13). Для
оценки тяжести течения ВВК использовали совокуп-ность следующих симптомов: зуд; жжение; характер и количество выделений; боли при мочеиспускании; диспареуния; дерматит перианальной зоны; отечность, гиперемия и эрозивные поражения стенок влагалища. Каждый симптом оценивали по трехбалльной шкале от 0 до 2, где за 0 принимали отсутствие симптома, за 1- у
меренную выраженность, а за 2 – яркую выражен-
ность симптома. Посев проводили стандартным методом на глю-
козо-пептон-дрожжевую питательную среду, содер-жащую антибиотик. Материал для микроскопии со-бирали со сводов влагалища. Микроскопию образца прово
дили при суммарном увеличении х1750. эффек-
тивность фагоцитоза оценивали как соотношение меж-ду числом дрожжевых клеток, локализованных внутри фагоцитов, и общим числом дрожжевых клеток в поле зрения.
Образцы вагинального секрета собирали с помо-
щью тампонов O.B. pro comfort, элюировали, филь-тровали через бактериальный фильтр. Фильтраты лиофилизировали и разводили стерильной дистилли-рованной водой так, чтобы получить 10-кратный кон-центрат по отношению к исходному фильтрату (ВС). Антитела классов IgG и sIgA в образцах ВС определя-ли методом дот-блот анализа с использованием специ-фического антигена, полученного ранее из поверхнос-тных слоев клеток candida
albicans [Арзуманян В.Г. с
соавт. , 2006 ].
Определение противогрибковой активности ВС
проводили путем инкубации тест-культуры c. albicans
в соотношении 20 мкл ВС / 5 мкл дрожжевой суспен-зии плотностью 10
5 КОЕ/мл и последующих высевов
на плотную питательную среду. Данный показатель выражали как процент клеток, убитых в процессе ин-кубации в течение 2 часов, по отношению к соответс-твующему контролю.
Сумма симптомов (медианы), характеризующая тя-
жесть течения ВВК, для группы ХВВКО составляла 8, тог
да как для группы ХВВКР – 4, для группы ОВВК –
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 409
5, для группы АСИМ – 3. Максимальное число дрож-
жевых клеток в одном поле зрения (медианы) состави-ло 43 в группе ХВВКО, 19 для ХВВКР , 30 для ОВВК и 8 для АСИМ. Коэффициент корреляции данного пока-зателя с тяжестью течения r = 0,968. При этом медиа-ны эффективности фагоцитоза составляли 40, 80, 50 и 15
% соответственно; корреляция с тяжестью течения
отсутствовала (r = 0,057). Положительные культураль-ные высевы (медианы) в группе ХВВКО встречались с часто
той 100 %, при ОВВК – 30,8 %, тогда как в груп-
пах ХВВКР и АСИМ вообще отсутствовали. Отмече-на корреляция с тяжестью течения: r = 0,982. Частота обнаружения псевдомицелия / мицелия при микроско-пии (ме
дианы) составляла: при ХВВКО – 100 / 33,3 %
, при ХВВКР – 70 / 0 %, при ОВВК – 61,2 / 16,7 %, у АСИМ – 16,7 / 0 % (корреляция с тяжестью течения r = 0,881 / 0,967).
Частота обнаружения иммуноглобулинов классов
G и секреторных А к антигену C. albicans в изучаемом локус
е варьировала следующим образом: 50 % и 25 %
в группе ХВВКО, 42,9 % и 0 % при ХВВКР , 62,5 % и 50 % при ОВВК, а также 16,7 % и 33,3 % в группе АСИМ. Частота выявления IgG-антител в группах кор-релировала с медианами обсемененности вагинально-го секрета (r = 0,772), тогда как частота обнаружения sIgA-антител не была связана с этим показателем (r = 0,143). Абсолютные величины уровней IgG и sIgA, оце-ниваемые по интенсивности пятен в дот-блот анализе, не коррелировали ни с обилием дрожжевых клеток в вагинальном секрете, ни с высевом, ни между собой.
Противогрибковая активность (медиана) для груп-
пы ХВВК
О была равна 13,6 %, ХВВКР – 43,2 %,
ОВВК – 12,5 %, АСИМ – 54,1 %. Отмечена обратная корреляция между медианами противогрибковой ак-тивности и медианами следующих показателей: тя-же
сти течения ВВК (r = – 0,723), высева (r = – 0,689),
обсемененности (r = – 0,855), IgG-антител (r = – 0,894), sIgA-антител (r = – 0,544). Не обнаружено корреляции между медианами противогрибковой активности и эф-фективно
сти фагоцитоза (r = – 0,117).
Сравнение полученных данных с имеющимися
в литературе позволяет сделать следующие выводы. Фагоцитоз является одним из важных механизмов за-щиты организма при оппортунистических микозах, причем оценку его принято проводить in vitro на мо-
дельных культурах клеток нейтрофилов и макрофагов [vonk
A.G. et al, 2002]. Обнаружив наличие дрожжевых
бластоспор не только в межклеточном пространстве вагинального отделяемого, но и внутри фагоцитов, мы сочли возможным оценить соотношение числа свобод-ных и поглощенных клеток дрожжей и использовать его как показатель эффективности фагоцитоза в дан-ном локусе. Антимикробное действие растворимой фракции вагинального секрета изучено ранее лишь в отношении e.
coli и в контексте активности АМП
[valore
E. et al, 2006]. Аналогичного исследования с
тест-культурой c. albicans ранее не проводили. Наибо-
лее представленными в вагинальном секрете считают иммуноглобулины класса G [Mestecky J. et al, 2005]. Попытки установления взаимосвязи между тяжестью течения ВВК и уровнями иммуноглобулинов ранее не дали однозначных результатов, однако, мы попытались соотнести уровни и частоту обнаружения секреторных иммуноглобулинов при хроническом и остром ВВК с другими показателями местного иммунитета. Обоб-щение данных корреляционного анализа показало, что для категории пациенток, близкой к норме (АСИМ), наиболее значимым звеном местного иммунитета яв-ляется совокупная активность растворимых проти-вогрибковых компонентов вагинального секрета. По-нятно, что при высокой противогрибковой активности АМП в функционировании фагоцитов и иммуноглобу-линов нет необходимости. Первичный острый процесс обусловлен низкой противогрибковой активностью, но при этом характеризуется значительной активизацией фагоцитов и иммуноглобулинов (ОВВК). Хронизация острого процесса (ХВВКО) также отличается низкой противогрибковой активностью и повышенным фаго-цитозом, но менее частым обнаружением иммуногло-булинов, чем при ОВВК. На основании данных микро-скопии и культуральных тестов можно заключить, что острая фаза хронического ВВК всегда сопровождает-ся наибольшей выраженностью симптомов, обилием бластоспор, а зачастую и мицелиальных элементов, наличием
высевов. эти данные согласуются с резуль-
татами исследований, проведенных на больших вы-борках пациенток с ВВК (2861 чел.), где показано, что наличие гифов мицелия является маркером тяжести течения заболевания [Demirezen S., Beksac M.S., 2004]. В стадии ремиссии хронического процесса (ХВВКР) отмечена относительно высокая противогрибковая ак-тивность, высокий уровень эффективности фагоцито-за и самый низкий уровень иммуноглобулинов.
Таким образом, непосредственная противогриб-
ковая активность растворимой фракции вагинально-го секрета, по-видимому, является первым условием, сдерживающим увеличение грибной популяции. Орга-низм вынужден восполнять дефицит АМП с помощью аль
тернативных механизмов – активизации местной
фагоцитарной функции и увеличения синтеза специ-фических секреторных иммуноглобулинов. Исполь-зованный подход позволил сравнить вклад различных механизмов прямого воздействия организма хозяина на клетки candida
spp. при разных формах ВВК. Оцен-
ка этих показателей позволит составить примерный прогноз течения ВВК у данного пациента.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 410
Зооантропозная трихофития – природно-очаговая
инфекция, эпидемические особенности и периодич-
ность вспышек которой, по мнению некоторых авто-ров, зависят от географических, экологических и ряда других факторов.
Под нашим клиническим наблюдением и лечени-
ем находились 60 больных трихофитией в возрасте от 16 до
42 лет. Мужчин было 41, женщин – 19. У всех
больных мы наблюдали расположение очагов микоза в лобковой области. У 5 больных кроме вышеуказанной области
очаги располагались на руках, у 2 – на ногах,
у 1 на лице и у 1 – на туловище. 33 пациентов свое заболевание связывали с внебрачными половыми кон-так
тами, 8 указали возможную причину заражения –
посещение саун, ношение чужой одежды, 9 больных считают источниками заражения домашних животных (коровы, бараны и т.д.) и 10 больных не смогли указать причину заболевания. Городские жители значительно преобладали над сельскими (45 и 15 соответственно). При обследовании супружеских пар у 43 были найде-ны очаги поражения соответствующие по клинической картине той или иной формы зоонтрапонозной трихо-фитии. 17 больных не были женатыми или замужнем.
При детальном клиническом осмотре было ус-
тановлено наличие поверхностно-пятнистой формы трих
офитии у 12 больных, инфильтративной – у 19,
нагноительной – у 29 больных.
Клинический диагноз был подтвержден лабора-
торными методами обследования. Микроскопически в материале с очагов поражения (чешуйки, волосы) был обнаружен Tr.ectotrix, а при посеве на среду Сабуро в 42
% случаев была получена культура T.faviforme.
Другие виды грибов выделены не были.
Определенный интерес представляют проведенные
исследования на наличие инфекций, передаваемых по-ловым путем в наблюдаемой группе больных. Среди 43 обследованных на ИППП больных трихофитией, у 23 пациентов были обнаружены различные урогени-та
льные инфекции: трихомониаз – 4, кандидоз – 3, ,
уреаплазмоз – 4, хламидиоз –7, гонорея – 2, гениталь-ный герпе
с – 1, сифилис –2.
Полученные результаты послужили основанием к
назначению ламизила при лечении больных лобковой трихофитией. Все больные получали ламизил по 250 мг (1 таблетка) в сутки в течение 14 дней. Наружная терапия назначалась в соответствии с клинической картиной заболевания. После двукратного отрица-тельного анализа на грибы больные выписывались из стационара на дальнейшее амбулаторное наблюдение. Больной считался излеченным при полном разреше-нии клинических проявлений заболевания и получе-ния двукратных отрицательных результатов анализа на грибы. Оценку эффективности проводимой тера-пии осуществляли по следующим критериям: степень уменьшения зуда, воспалительных явлений: отеч-ность, гиперемия, инфильтрация кожи, исчезновение первичных и вторичных морфологических элементов, рост здоровых волос. К концу терапии клиническое излечение
достигнуто у 80 % больных. К концу 2-ой
недели терапии микологическое излечение достигнуто у 40
% больных. В дальнейшем количество больных
с отрицательным микологическим результатом резко возраст
ало и к концу 5-й недели достигло 100 %.
В процессе терапии ламизилом у 2 больных отме-
чалась к
ожная сыпь, у 1 – диспепсические явления.
Таким образом, трихофития лобковой локализации
передается при половом контакте и наши наблюдения будут полезны для дерматовенерологов в установле-нии диагноза и проведении целевых организационных и лечебно-профилактических работ по борьбе с три-хофитией и ИППП. Ламизил является эффективным препаратом в терапии этой инфекции.ЗООАНТР АПОНОЗНАЯ ТРИХОФИТИЯ ЛОБКОВОЙ
ЛОКАЛИЗАЦИИ И ЕЕ ЛЕЧЕНИЕ
Арифов С.С., Иноятов А.Ш., Арифова М.Х
НИИ Дермато
логии и венерологии,
Ташкент, Узбекистан
Ташкентский Институт Усовершенствование врачей,
Ташкент, Узбекистан
ОПЫТ СИСТЕМНОГО ЛЕЧЕНИЯ ОНИХОМИКОЗОВ
У ЛИЦ ПОЖИЛОГО ВОЗР АСТА
Асташина С.М.
во ГУз областной кожно-венерологический диспансер,
г.владимир
Заболеваемость онихомикозами увеличивается с
возрастом, достигая максимума-до 75 % у лиц пожи-лого и старческого возраста. Часто больные онихо-микозом, особенно пожилые пациенты ограничивают свое общение с родственниками, боясь заразить их, развивается депрессия, т.к. лечение только наружными антимикотиками не приносит заметного улучшения, больные высказывают недовольство и врачу, поэтому
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 411
назрела необходимость назначения системных препа-
ратов лицам пожилого и старческого возраста.
Под наблюдением находилось 42 мужчины и 19
женщин, в возрасте от 60 до 84 лет. Диагноз онихоми-коза был подтвержден микроскопически у всех. Посев патогенного материала проводился в начале и в ходе лечения. У 43 пациентов из 61 был определен этиоло-гический возбудитель или возбудители. Моноинфек-ция была
зафиксирована в 30 случаях:Tr. Rubrum – 22
(51.2 %), Tr. Interdigitale – 2(4.7 %), Candida albicans – 6(14 %). Сочетание возбудителей в 13 случаях: Tr. Rubrum + Candida albicans – 8(18.6 %), Tr. Rubrum + плесневые грибы – 5(11.6 %). У всех пациентов от-мечалось многолетнее течение заболевания (более 20 лет) с множественным поражением ногтевых пласти-нок (о
т 4 до 10 ногтей стоп – 36 чел.(83.7 %), 10 ногтей
на стопах + поражение ногтей кисти – 7чел.(16.3 %)). Во всех случаях имелась свамозно-гиперкератоти-ческ
ая форма микоза стоп, у 5(11.6 %) микоз кистей,
поражение кожи живота, бедер, ягодиц или голени у 8(18.6
%), вторичные аллергические везикулезные вы-
сыпания на кистях у т
рех(7 %).
В лечении применялись препараты группы азолов,
а именно интраконазол (чаще препарат ирунин фирмы Верофарм) и флюконазол (различных фирм). Общим противопоказанием в назначении азолов является за-болевания печени. Инраконазол применялся по стан-дартной пульс-терапии (по 2 капулы 2 раза в день 7 дней три курса). Флюконазол по методике 150 mg 1 раз в неделю
применялся длительно у 21 пациента (до 6 мес.–3, с 6 до 8 мес.–15, с 8 до 12 мес.–3).
Терапия онихомикозов была комплексной. Приме-
нялись наружные антимикотики различных групп. У 35 больных для удаления подногтевого гиперкератоза был использован аппаратный метод лечения онихо-микоза с помощью аппарата SX-35. У больных с па-тологией периферических сосудов применялись ве-гетокорректоры (грандаксин), сосудистые препараты (никотиновая кислота, ксантинола никотинат, трентал). Для усиления роста ногтей применялся аевит, массаж стоп с метилурациловой мазью.
Сделаны выводы:1. О возможности назначения системной терапии
пожилым и престарелым пациентам после тщательного изучения имеющихся у них соматических заболеваний
2. Проводить учет взаимодействия лекарственных
средств
3. Назначение системной терапии в комплексе ле-
чения грибковых заболеваний, проведение коррегиру-ющей терапии по поводу соматической патологии, а также средств, улучшающих периферическое кровос-набжение
4. Хорошая переносимость, отсутствие токсичес-
ких реакций, удовлетворительные результаты лечения свидетельствуют о целесообразности системной тера-пии у пожилых пациентов.
МИКОЗЫ СТОП В ПР АКТИКЕ ВР А ЧА-ТЕР АПЕВТА
Барабанов Л.Г., Калинина Т.В., Барабанов А.Л.
Белорусская медицинская академия
последипломного образования,
Минск
Белорусский государственный медицинский университет,
Минск
Микозы стоп относятся к наиболее распространен-
ным микотическим поражениям и часто протекают бессимптомно. Помимо врачей дермато-венерологов в выявлении микозов стоп могут участвовать и врачи других
специальностей, прежде всего – участковые те-
рапевты («врачи первого контакта»).
Цель нашей
работы – выяснить особенности эпи-
демиологии и клинических проявлений микозов стоп у пациент
ов, обратившихся на прием к врачам – тера-
певтам в 2007 году в поликлиники г. Минска и област-ных центров Республики Беларусь.
Задачами исследования были:1. Установить частоту сочетания микозов стоп с со-
матической патологией.
2. Выяснить возрастно-половые особенности, дли-
тельность заболевания микозами стоп у пациентов те-рапевтического профиля.3. Выяснить эпидемиологические особенности ми-
козов стоп в зависимости от региона проживания и се-мейного анамнеза.
4. Изучить эффективность предшествовавшего ле-
чения микозов стоп.
Было осмотрено 2559 пациентов, обратившихся на
прием к участковым терапевтам в 1 квартале 2007 года. Микотические поражения стоп были выявлены у 922 (3
6,0 %) обследованных. Из них у 747 (81 %) выявлен
онихомикоз, микоз гладкой кожи стоп – у 78 (8,5 %) и
интертригинозный микоз стоп – у 97 (10,5 %). Среди
всех обследованных мужчин было 1073 (41,9 %), жен-
щи
н – 1486 (58,1 %), а среди больных с выявленными
микозами стоп мужчин было 404, а женщин 518. Час-то
та онихомикозов у мужчин составила 31,1 %, а у
женщин – 37,8 %. Интертригинозный микоз стоп также
чаще регистрировался у мужчин (4,1 %), чем у женщин
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 412
(3,6 %). Микоз гладкой кожи стоп чаще отмечался у
женщин (3,5 %), чем у мужчин (2,4 %). Частота грибко-
вых поражений стоп у пациентов в возрастной группе
до
20 лет не превышала 6,4 %. С возрастом удельный
вес выявленных больных с грибковыми инфекциями стоп увеличивался: до 15,3 в возрастной группе 20–30 ле
т, до 26,5 % у пациентов в возрасте от 31 до 40 лет и
до 54,7 % при возрасте больных старше 60 лет. Также
прогрессивно возрастала удельная масса пациентов с он
ихомикозами – с 5,2 % в возрастной группе до 20 лет
до 48,4 % при возрасте больных старше 60 лет.
Частота выявления микозов стоп у больных тера-
певтического профиля была различной в разных ре-гионах Беларуси. Так, в Брестском регионе она была наименьшей и
составляла 19,6 % обследованных, а в
Гомельской области достигала 60 %. Показатель по г. Минску составил 39,6 %. Частота выявления онихоми-козов также колебалась от 12,6 на 100 обследованных в Витебск
ой области до 51,4 на 100 обследованных – в
Гомельской.
Давность
заболевания более 1 года была у 79,18 %
пациентов. При онихомикозе такая давность заболева-ния отме
чена у 88,95 %.
У 42,5 % больных с выявленными микозами
стоп отмечены болезни системы кровообращения, у 15,5
% – болезни органов дыхания, у 13 % – инфекци-онные забо
левания, у 4,6 % – эндокринные болезни, у
0,8 % – аллергические и иммунные болезни. Прочие заболевания выявлены у 23,6 %.
В прошлом получали противогрибковое лечение
328 пациент
ов, но лишь у 23,8 % из них было достиг-
нуто
полное излечение. 50,4 % получавших противо-
грибковое лечение, прекратили его из-за отсутствия эф
фекта, 16,4 % – в связи с длительностью лечения,
4,4 % – из-за развившихся побочных эффектов и 12 % из-за высокой стоимости лечения. У 14,6 % выявлен-ных больных микозом стоп болел хотя бы один член семьи.
Полученные данные свидетельствуют о широкой
распространенности микозов стоп среди континген-та терапевтических кабинетов поликлиники, которая зависит от пола, возраста и региона проживания па-циентов. Среди грибковых поражения стоп преобла-дает грибковое поражение ногтей. Наиболее частыми причинами, заставляющими пациентов прекращать противогрибковую терапию, являются длительное и дорогое лечение, недостаточная эффективность вы-бранного варианта лечения и значительное количест-во побочных эффектов. Следует отметить и высокую частоту сопутствующих заболеваний среди пациен-тов с микозами стоп, выявляемых на терапевтическом приеме.
НАШ ОПЫТ ЛЕЧЕНИЯ ИНФИЛЬТР АТИВНО-НАГНОИТЕЛЬНОЙ
ТРИХОФИТИИ АТИПИЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ
Баратова В.А., Саркисова Э.Э.
кожвендиспанс
ер №1,
Ташкент, Узбекистан
За последнее десятилетие в Узбекистане отмечает-
ся рост заболеваемости зооантропонозной трихофити-ей, возбудителем которой являются зоофильные грибы Trichophiton mentagraphytes var. Gipseum с локализаци-ей очагов поражения в лобковой области.
Нами за период 2001–2007 гг. пролечено 30 боль-
ных с инфильтративно-нагноительной трихофитией лобковой области в возрасте 21–35 лет. Среди паци-ентов преобладали мужчины –18 чел. Семейных пар было 12. Обращает на себя внимание, что заражение практически у всех больных (28 чел) произошло после полового контакта.
Диагноз трихофитии был установлен на основании
клинических проявлений и лабораторного обнаруже-ния грибов в очагах поражения.
Патологический процесс имел островоспалитель-
ный характер и располагался на коже лобковой об-ласти. Отмечалась инфильтрация кожи с приподнятой бугристой поверхностью красно-бордового цвета, мел-копластинчатым шелушением по периферии очагов поражения. Наблюдалось резкое расширение устьев волосяных фолликулов, заполненных гноем, положи-тельный симптом «медовых сот».
Для лечения был использован системный антими-
котик орунгал, который назначался методом пульс те-рапии по 400мг в сутки в течение 1 недели (1 пульс). Местное лечение в начале проводилось цитеалом и 20
% ихтиоловой мазью, а после размягчения очагов
и разрешения инфильтратов – 3 % салициловой – 10 % серной мазью, 3 % настойкой йода.
В результате проведенной терапии клинико-лабо-
раторное излечение наступило у всех пациентов через 3–4 недели с момента начала лечения. Ни в одном слу-чае не зарегистрировано каких-либо побочных эффек-тов или рецидивов заболевания.
Считаем, что применение орунгала методом пульс
терапии обеспечивает оптимальную длительную кон-центрацию препарата в коже и сально-волосяных фол-ликулах, что крайне важно для исключения возмож-ности рецидива при инфильтративно-нагноительной трихофитии лобковой области.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 413
В отделении гнойной хирургии ФГУ Института
хирургии им. А. В. Вишневского Росмедтехнологий, и
ГКБ №14 им. В.Г.Короленко, на лечении находилось 102 пациента с трофическими язвами голени и вари-козной экземой, в период 2006–2007 гг.
Из них
38 (59,375 %)женщин и 26 (40,625 %)муж-
чин. Возраст пациентов от 21 до 80 лет в среднем 49+4,5 лет. Трофические язвы локализовались пре-имущественно на внутренней поверхности в нижней трети голени.
Клинический диагноз онихомикоза был уточнен
микроскопическим методом исследования, видовую интерпретацию проводили культуральным методом.
Из
102 больных у 64 (62.74 %) при микроскопии
грибы обнаружены, у 7(6.86 %), несмотря на утолщение
и деформацию ногтевых пластинок, данные микроско-пического исследования были отрицательными, но при культуральном исследовании, выявлен рост грибов.
По выраженности поражения ногтевых пластин
бо
льные разделены на 3 группы:1-я группа – 31 (48,44 %)
пациент с тотальным поражением ногтевых пластин, вк
лючая зону роста, 2-я группа:19 (29,69 %) пациентов с
поражением не менее 2\3площади ногтевых пластин, 3-я
группа: 14 (21,87 %) больных с проксимальным типом
поражения. У 34 (53,125 %) человек также отмечалось
поражение межпальцевых складок и кожи подошвы в виде сквамозно-кератотической формы. При культураль-ном исследовании патологического материала (соскоб чешуек с очагов поражения на коже стоп и с ногтевых пл
астинок) выявлены грибы Т. Rubrum – у 14 (70 %)
больных, Candida – у 4 (6,25 %), у 2 (3,125 %) обнаруже-
на смешанная, грибково-дрожжевая инфекция.
У 24
(37,5 %) больных с кожи вокруг трофических
язв выделены грибы рода Candida.
Определение общего и специфического IgE выяви-
ло специфическую реакцию на грибковые антигены Т. Rubrum
– у 39 (60,93 %), Candida – у 18 (28,13 %) боль-
ных, у
7(10,94 %) ассоциации плесневых грибов, при
этом у 4 (6,25 %) при микроскопическом исследовании грибы не были обнаружены.
В зависимости от проводимой терапии больные
разделены
на две группы: 1-я группа из 32 (50 %)
пациентов получала антимикотик широкого спектра действия Ру
микоз® методом пульс – терапии в дозе
400 мг в сутки реr.os в течение 7-ми дней (1 тур)– всего 3–4 тура с перерывом 3 недели, без топических анти-мико
тиков; 2-я группа из 32 (50 %) пациентов получа-
ла антимикотик широкого спектра действия Румикоз® мето
дом пульс – терапии в дозе 400 мг в сутки реr.os в
течение 7-ми дней с применением топических антими-котиков (микосептин, ламизил, экодакс).
В 1-ой группе больных купирование экзематозно-
го процесса, рубцевание трофических язв было более длительное, чем во 2-й группе, при этом в 1-ой группе рецидив эк
земы развился у 4 (15 %). Во 2-ой группе
больных отмечалось купирование экзематозного про-цесса, рубцевание трофических язв и клинико-этиоло-гическое излечение онихомикоза, рецидивов заболева-ния не было выявлено.
После лечения варикозной экземы и снятия воспа-
лительного процесса, выполняли хирургическую об-работку-иссечение трофической язвы с последующей аутодермопластикой свободным расщепленным лос-кутом. Вопрос о пластике решался в каждом случае индивидуально. После иссечения трофической язвы 23 больным была выполнена первичная пластика, 4- первично отсроченная пластика. Повторная хирур-гическая обработка потребовалась 14-ти больным в связи с продолжающимся воспалительным процессом. В послеоперационном периоде больные продолжали применять антимикотики, антикоагулянты, антиагре-ганты, венотоники.КОМПЛЕКСНОЕ ЛЕЧЕНИЕ ТРОФИЧЕСКИХ ЯЗВ ГОЛЕНИ
И ВАРИКОЗНОЙ (ГИПОСТАТИЧЕСКОЙ) эКЗЕМЫ
АССОЦИИРОВАННОЙ С МИКОТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Баткаев Э.А., Махулаева А.М., Аскеров Н.Г.,
Малина В.Н., Светухин А.М.
ФГУ Институт хир
ургии им. А.в.вишневского Росмедтехнологий,
кафедра дерматовенерологии и клинической микологии
с курс
ом лабораторной диагностики и лабораторной микологии РМАПо,
Москва
СИТУ АЦИЯ ПО ДЕРМАТОМИЦЕТАМ
И КА ЧЕСТВО ЖИЗНИ БОЛЬНЫХ
Бендриковская И.А.
ГквД,
Ухта, Республика к оми
Актуальность: В мире существует множество па-
тогенных грибов. Однако свойства их патогенности чаще проявляются при снижении защитной реакции организма и нередко влияет на качество жизни боль-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 414
ных. В связи с этим в Республике Коми, как и в целом
по России, заболеваемость дерматомицетами являет-ся актуальной медико-социальной проблемой.
Материал: Проведен анализ заболеваемости дерма-
томицетами в различных социальных группах насе-ления Республики Коми на примере обращаемости в республиканский кожно-венерологический диспансер по поводу поражений кожи и ногтевых пластинок.
Результаты: Профессиональная сфера деятельнос-
ти больных микозами была различной. Так, основную часть ре
спондентов (25,0 %) составили работники
промышленности (лесной, нефтеперерабатывающей, газоперерабатывающей, угольной и пр.) и транспорта (13,6
%). Учащиеся составили 10,7 %, работники тор-
гов
ли, бытового обслуживания и строительства – по
10,0 %, работники образования – 9,3 %, неработающее население – 7,9 %, работники коммерческой структуры и финансовой сферы – 5,8 %, здравоохранения – 5,0 %, системы МВД – 2,1 %, сельского хозяйства – 0,7 %.
Жилищные условия большинства пациентов рас-
ценива
лись как «хорошие»: 56,4 % имели отдельную
квартиру, 36,4 % проживали с ближайшими родствен-никами
(родители, бабушки и пр.). Лишь 3,6 % респон-
дентов
проживали в общежитии, 2,9 % – на съемной
жилплощади. Часть пациентов (13,6 %) с поражением кожи и ногтевых пластинок, из числа проживающих с близкими родственниками (матери, отцы, братья, сестры, бабушки, дедушки), отметили подобные на-рушения у других членов семьи. Некоторые пациенты (7,1
%) с патологическим поражением ногтевых плас-
тинок стоп отметили вероятность их заражения от сво-их мужей», имевших более ранние изменения ногте-вых пластин стоп и не обращавшихся за медицинской помощью к дерматовенерологу.Распределение больных в зависимости от измене-
ния трудовой адаптации в период заболевания было следующим:
у 45,7 % больных заболеваемость не от-
ражалась
на трудовой деятельности, 35,0 % отмечали
умеренное снижение трудоспособности, что сопро-вождалось снижением производительности труда (со слов пациентов) в связи с временным переходом на щадящий труд, либо вплоть до кратковременной по-тери т
рудоспособности, 19,3 % отмечали резкое сни-
жение трудоспособности, в связи с выраженными кли-ническими проявлениями заболевания, неудобством появления в обществе. В отдельных случаях ухудше-ние общего состояния сопровождалось более длитель-ной утерей трудоспособности.
Нарушения социальной адаптации в период забо-
левания у пациентов, страдающих дерматомицетами, было различным. Так, умеренно выраженные наруше-ния социа
льной адаптации отметили 55,7 % респон-
дентов, резко выраженные с преобладанием неврозов, депрессий, ограничением пребывания в обществе, ограничением общения с окружающими и ограни-чением посещения мест общественного обслужива-ния
– 21,4 %. Следует отметить, что чувство личного
дискомфорта от заболевания было выше, чем боязнь заразить близких.
Таким образом, анализ полученных результатов
свидетельствует о недостаточной информированности о путях заражения грибковой патологией и, в связи с этим, низкой санитарной культуре респондентов, не-обходимости разработать более дифференцированный подход по оказанию лечебно-профилактической помо-щи населению, определить стратегию профилактики микотической инфекции.
эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ СИТУ АЦИЯ ПО МИКРОСПОРИИ
В РЕСПУБЛИКЕ КОМИ В 2003 – 2006 ГГ.
Бендриковская И.А.
ГквД,
Ухта
Актуальность: Грибковая патология является одной
из наиболее распространенных в структуре заболеваний кожи. Их постоянное присутствие в среде макроорганиз-ма обуславливает неизбежность контакта с патогенны-ми грибами. Факторами для возникновения грибковой патологии, наряду со снижением иммунной системы, нередко может послужить повседневный стресс.
Материал: Проведен анализ заболеваемости микро-
спорией в Республике Коми за период с 2003 по 2006гг. в сравнении с показателями по Российской Федерации согласно данным форм государственного статистичес-кого наблюдения №9 «Сведения о заболеваниях, пере-даваемых преимущественно половым путем, грибко-вых кожных заболеваниях и чесоткой».
Результаты: В 2006 году в целом по России выявле-
ние больных микроспорией в общей популяции умень-шилось
на 15,4 %, показатель заболеваемости – в 1,2
раза, среди детского населения – на 16,9 % и в 1,1 раза соответственно. В четырех территориях Северо-За-падного федерального округа (СЗФО) в 2003 году по-казатели заболеваемости по микроспории были выше среднероссийского уровня. В числе неблагополучных территорий следует отметить Архангельскую (78,1 на 100
000 населения), Вологодскую (54,8 на 100 000 на-
селения),
Новгородскую (48,2 на 100 000 населения)
области и г.С.-Петербург (30,0 на 100 000 населения), где зарегистрировано 19,9 %–12,7 %–6,1 %–24,7 % от всей заболеваемости по округу, у детей – в Архангель-ской
области (17,3 %). У детского населения показа-
тели заболеваемости превысили среднероссийский уровень
в Архангельской (318,6 на 100 000 детского
населения), Вологодской (274,1 на 100 000 детского
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 415
населения), Новгородской (256,3 на 100 000 детского
населения) и Ленинградской (241,5) областях.
В 2006 году в СЗФО произошло снижение числа
больных
микроспорией в общей популяции на 17,6 %,
показатели заболеваемости при этом уменьшились в 1,2 раза,
среди детского населения – на 16,3 % и в 1,1
раза соответственно. Преимущественная часть боль-ных в
общей популяции (25,3 %) и среди детского на-
селения
(23,4 %) СЗФО в 2006 году была выявлена в
г.С.-Петербурге. При этом показатели заболеваемости в общей популяции детского населения г.С.-Петербур-га уменьшились в 1,2 и 1,1 раза соответственно.Таким образом, неблагополучная эпидемиологи-
ческая ситуация по дерматомицетам в Республике Коми, как и в целом по Российской Федерации, сохра-няется за счет высокой заболеваемости микроспорией детского населения. Наиболее неблагополучными тер-риториями по заболеваемости микроспорией в СЗФО остаются г. Санкт-Петербург, Архангельская, Вологод-ская, Новгородская и Вологодская области. Следова-тельно, для снижения заболеваемости микроспорией необходима координация деятельности сотрудников ветеринарной службы, Роспотребнадзора и дерматове-нерологов по проведению профилактической работы.
АНАЛИЗ ПЕРСПЕКТИВНЫХ ИСТОЧНИКОВ СЫРЬЯ ДЛЯ
СОЗДАНИЯ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД
Блинкова Л.П., Горобец О.Б., Калягина С.Ю.
ГУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН,
Москва
Создание отечественных конкурентоспособных
питательных сред более дешевых, чем импортируе-мые в РФ, для диагностики и культивирования микро-организмов, относится к приоритетным направлениям здравоохранения.
Целью настоящих исследований, проведенных в
течение нескольких лет, являлось экспериментальное доказательство пригодности выбранного сырья, неко-торые виды которого ранее не использовали в составе питательных сред.
Оценивая различные источники белкового сырья,
среди наиболее перспективных следует назвать биомас-су нетоксичных представителей водорослей: сине-зеле-ных (Spirulina), зеленых (Chlorella) и бурых (Laminaria, fuc
us) [Блинкова Л.П. и др., 1993, 1998, Горобец О.Б.,
2000], отходы морских промыслов, таких, как неконди-ционный смешанный материал, состоящий из «лома» креветок с частями рыбных тушек, водорослей и дру-гих гидробионтов [Блинкова Л.П. и др., 2003], а также ут
ильное мясное сырье скотобоен – толстый кишечник
крупного рогатого скота [Калягина С.Ю. и др., 2006].
Оценку физико-химических и биологических ха-
рактеристик (прозрачность, цветность, содержание общего и аминного азота, хлориды, чувствительность, окраска клеток, эффективность и скорость роста мик-роорганизмов, стабильность культурально-морфоло-гических свойств, образование диагностически зна-чимых ферментов) проводили, руководствуясь МУК 4.1/4.2.588–96 и «Методическими рекомендациями к контролю питательных сред по биологическим по-казателям». М., 1980. Испытание созданных сред для культивирования или дифференциальной диагностики с представителями микроорганизмов разных таксо-номических групп (Candida albicans, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella enterica Typhimurium, Salmonella enterica T
yphi, Escherichia coli, proteus vulgaris,
pseudomonas aeruginosa, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium xerosis и др.) показало, в сравнении с контрольными коммерческими средами соответству-ющего назначения, высокую чувствительность сред (показатель составлял около 10–7) и их эффективность (более
90 %). это соответствует требованиям к биоло-
гическим показателям сред.
Высокое качество разработанных питательных
сред обусловлено их составом. Так, среды из микрово-дорослей Spirulina platensis имеют набор аминокислот и витаминов, сопоставимый с женским грудным мо-локом. Одной из особенностей сред с использованием ламинарии является стимулирующее влияние на обра-зование культурами пигмента. Например, обильный синтез липохромного пигмента отмечен у S. aureus,
вследствие чего колонии приобретают апельсиново-желтый цвет.
Биохимический анализ гидролизатов гидробион-
тов, помимо белковой составляющей, выявил в них значительный уровень незаменимых аминокислот, витаминов, микроэлементов, т.е. указывает на сущест-венную питательную ценность субстрата.
Утильное мясное сырье, использованное как основа
питательных сред, содержит достаточное количество белка, чтобы выращивать возбудителей инфекционных заболеваний с типичными для микробов свойствами.
В заключение следует отметить, что указанное сы-
рье имеется в РФ в достаточном количестве. Целесо-образно возродить культивирование микроводорослей с получением биомассы в специально сконструирован-ных многолитражных реакторах, или в акваториях с контролируемыми условиями выращивания, исходя не только из питательной ценности этих микроводослей, но и вследствие их экологической значимости для ок-ружающей атмосферы.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 416
Дерматомикозы – наиболее распространенные
грибковые инфекции, встречаются повсеместно прак-
тически во всех социальных и возрастных группах населения. Основными возбудителями дерматоми-козов являются дерматомицеты: Trichophyton spp.,
micr
osporum spp. и epidermophyton floccosum. В то же
время, выделение из патологического материала гри-бов, не относящихся к дерматомицетам, в некоторых случаях, может также служить основанием для под-тверждения диагноза микоза кожи и ногтей.
В 2007 году в микологической лаборатории КВКД
№ 1
ДЗМ было обследовано 4 306 пациентов. В резуль-
та
те было выделено 1 196 культуры грибов: дерматоми-
цеты, дрожжеподобные микромицеты и плесневые не-дерматомицеты. Дерматомицеты составили основную группу
патогенной микобиоты – 752 штамма. Наибо-
лее част
о выявлялись T.rubrum – 90, T.mentagrophytes
v.gypseum – 40, M.canis – 605 штаммов. Остальные виды дерматомицетов, как и в предыдущие годы, были немногочисленны: T. tonsurans –
1, T. verrucosum – 4,
T. violaceum – 5, T. mentagrophytes v.interdigitale – 1, m.
gypseum – 6.Г
рибы рода can dida чаще всего вызывают канди-
доз кожи и ногтей кистей. В наших исследованиях доля can
dida в спектре выделенных микромицетов состави-
ла 318 штаммов. Плесневые грибы рода Scopulariopsis ,
считающиеся также самостоятельными возбудителями де
рматомикозов, были выделены у 8 пациентов. этио-
логическая роль других микромицетов определялась в комплексе с клиническими, лабораторными и литера-турными данными. При росте asp
ergillus spp., alternaria
spp., acremonium spp., Fusarium spp., cladosporium spp .
учитывались положительные результаты микроскопии, выделение монокультуры в диагностически значимом росте и подтвержденные в литературе случаи выделе-ния этого вида гриба при дерматомикозах. Грибы рода Penicillium при достаточно частом выявлении (19 слу-
чаев) возбудителями не признавались, т.к. считаются самыми частыми контаминантами.
Таким образом, анализ динамики микобиоты воз-
будителей дерматомикозов, проводимый в течение 5 лет, позволяет установить незначительные колебания постоянного видового спектра возбудителей и конта-минантов.ОЦЕНКА СПЕКТР А ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ДЕРМАТОМИКОЗОВ
В МОСКВЕ В 2007 ГОДУ
Богуш П.Г., Лещенко В.М., Дворников А.С., Полякова А.А., Кириллова Н.Н.,
Курбатова И.В., Бондарев И.М., Лещенко Г.М., Павлова Г.В., Стерлигова Н.Д.,
Белкина К.Б., Миринова Л.Г., Туманян А.А., Галькевич Т.М.
квкД № 1 Д
зМ,
Москва
В наше время грибковыми заболеваниями страда-
ют сотни миллионов людей (1). Уровень инфициро-ванности населения патогенными грибами в различ-ных регионах
Европы составляет 20–70 %, в среднем
по России – около 40 % (3). Значительное место среди грибковой патологии занимают различные формы три-хофитии. э
то контагиозное распространённое грибко-
вое заболевание, при котором происходит поражение гладкой кожи и волос. У детей в возрасте от 1 года до 14 лет чаще встречается трихофития волосистой части головы, а у взрослых, в последние годы, участились случаи заболеваемости трихофитией лобковой об-ласти. Больной может заражаться как при непосредс-твенном контакте с человеком или животными (чаще крупным рогатым скотом), так и через предметы оби-хода. Длительное нахождение грибковой инфекции в организме может приводить к развитию аллергодерма-тозов(2). В связи с этим, встаёт вопрос о разработке эффективных, этиологически обоснованных методах лечения микозов. В нашей клинике мы апробировали системный
антимикотик Румикоз на больных с онихомикозом и различными формами трихофитии. Целью исследо-вания было изучение эффективности и переносимос-ти препарата Румикоз. Румикоз принимали 2 группы больных. В первой группе под нашим наблюдением находилось 18 больных в возрасте от 33 до 55 лет с диагнозо
м – онихомикоз. Длительность заболевания
составляла от нескольких месяцев до 30 лет. У всех больных диагноз был подтверждён положительными микроскопическими исследованиями патологического материала.
Во второй группе находилось 36 больных в возрас-
те о
т 14 до 35 лет. Из них мужчин – 20 человек, жен-
щин
– 16. Источником заражения служил, в основном,
крупный рогатый скот (у 22 человек), реже, заражение происходило от больных людей при половом контакте (6 человек), при бытовом контакте и не соблюдении личной гигиены (5 человек), один человек заразился от
собаки и у двух – источник не установлен. Клини-ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ РУМИКОЗА В ЛЕЧЕНИИ ГРИБКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ.
Ваисов А.Ш., Мусаева Н.Ш., Аллаева М.Д.
Ташкентская Медицинская Академия, кафедра кожных и венерических болезней,
Ташкент, Узбекистан
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 417
ческий диагноз был подтверждён с помощью микро-
скопического исследования волос и кожных чешуек. Микологические исследования повторяли в конце лечения, а также через 2 и 4 недели после окончания лечения. Кроме того, перед началом лечения и в конце делали общий анализ крови и мочи.
В первой группе больных Румикоз применяли по
схеме пульс-терапии, то есть по 200 мг два раза в сут-ки после обильного приёма пищи в течение 7 дней с последующим 3-х недельным перерывом. Было прове-дено по 3 цикла терапии. Длительность наблюдения за пациентами составила в среднем 12 месяцев. Клини-ческие и лабораторные исследования (микроскопия) проводились на 6, 9, и 12 месяце от начала лечения. Все пациенты, находившиеся под наблюдением, не имели в анамнезе заболеваний печени.
Во второй группе больных Румикоз назначался по
непрерывной схеме внутрь ежедневно в дозе по 100 мг 1–2 раза в сутки, в зависимости от массы тела (до 25 кг
– 100 мг, более 25 кг – 200 мг) в течение 14–28 дней,
в зависимости от клинической формы. Препарат на-значался сразу после приёма плотной пищи, в связи с тем, что растворимость Румикоза возрастает в кислой среде.
Клинико-микологическое излечение онихомикоза
после 3-х пульсов отмечалось у 7 пациентов. Клини-ческое улучшение (сокращение тяжести не менее 3 баллов КИОТОС) 4 больных. У 5 пациентов клини-ческое излечение не сопровождалось микологическим выздоровлением.
При поверхностной форме исчезновение грибов
наблю
далось на 15–17 день, при инфильтративной – на 18–20-й, а при нагноительной – на 25–27-й. Кли-ническое выздоровление к концу лечения наступило у 28 больных, выраженное улучшение наступило у 8 па-циентов. При дальнейшем наблюдении за последними выяснилось, что у 6 из них клинико-микологическое выздоровление наступило через 2 недели после окон-чания приёма Ру
микоза, а у 2 – через 4 недели.
Лечение «Румикозом» дало, в целом, хорошие ре-
зультаты. Сначала наступило улучшение, а затем мико-логическое и клиническое выздоровление. Отмечалась хорошая переносимость препарата больными. Только у 2-х пациентов отмечались диспепсические явления в виде тошноты, чувства переполнения желудка и взду-тия живота. У одного больного после приёма «Румико-за» отмечался небольшой зуд и пятнисто-уртикарные высыпания.
Таким образом, результаты проведённых иссле-
дований показали хорошую терапевтическую эффек-тивность препарата «Румикоз» при лечении различ-ных форм трихофитии, препарат хорошо переносится больными, что позволяет рекомендовать его как препа-рат выбора для лечения трихофитии.
Литература1.Сергеев Ю.В., Сергеев А. Ю. «Орунгал и терапия
онихомикозов в ХХI веке». Российский журнал кож-ных и венерических болезней №3, 2004
2. Лещенко В.М. Грибковые заболевания: совре-
менное состояние проблемы. Международный меди-цинский журнал. Харьков, 1999,№3,Т.З,С.51–55
3. Иванов О.Л., Ломоносов К.М. «Орунгал: итоги и
перспективы применения при дерматомикозах». В по-мощь практикующему врачу №3 1997. с 54–58.
МИКОЗ СТОП У ЛИЦ ПОЖИЛОГО И СТАРЧЕСКОГО ВОЗР АСТА
ПО ДАННЫМ Т АШКЕНТСКОГО ОБЛАСТНОГО КВД
Ваисов А.Ш., Имамов О.С.
Ташкентская медицинская академия,
Ташкент, Узбекистан
Цель исследования: на основе ретроспективного
анализа историй болезни Ташкентского областного КВД выяснить частоту встречаемости микозов стоп у лиц пожилого и старческого возраста.
Материал и методы исследования. Проведен рет-
роспективный анализ 931 историй болезни больных пожилого и старческого возраста, обратившихся в Ташкентский областной КВД за период 2000–2007 гг. Диагноз и форму микозов устанавливали согласно классификации К-710 ХТ и на основание клиничес-ких, микологических анализов. Анализировали, часто-ту встречаемости микозов стоп, различных его форм, осложнения и сопутствующие патологии. Материал обработан методом вариационной статистики.
Ре
зультаты. Из 931 историй болезни в 528 (56,7 %)
случаях выявлены различные микотические пора-жения:
сочетание микоз стоп с онихомикозами – 147 (15,7 %), только микоз стоп – у 118 (12,7 %) обратив-шихся и именно эту группу мы анализировали. Анализ встречаемости микозов стоп у лиц пожилого и стар-ческого возраста по годам показал тенденцию к посте-пенному увеличению обращаемости. Так, если в 2000 го
ду частота микоз составила 9,3 %, то к 2007 году
данный показатель составил 17,4 %. Анализ частоты встречаемости больных с микозом стоп в зависимости от возраста показал наибольшую его встречаемость в возрасте
50–60 лет (51,2 % больных), тогда как в воз-
растных группах 61–70 и свыше 70 лет данный пока-затель
составил 15,8 и 29,1 %, соответственно. Анализ
распределения больных по форме микозов стоп пока-зал, что в основном выявлялась сквамозная форма: у 51,1
% – сквамозная, у 15,8 % – интертригинозная и у
29,1 % – дисгидротическая форма. Вместе с тем, анализ частоты встречаемости различных форм микозов в за-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 418
висимости от возраста показал отличительные особен-
ности. Так, если частота сквамозной формы с увеличе-нием возраста больных имела тенденцию к снижению, составляя в возрастных группах 50–50 лет, 61–70 лет и свыше
70 лет 56,8; 25 и 18,9 %, соответственно, т.е.
у больных в возрасте 50–60 лет она выявлялась более чем в и 3 раза чаще. Такая же динамика была отмечена и в частоте встречаемости интертригинозной и дисгид-ротической форм микозов стоп. Однако соотношение их в возрастных группах было другим. В частности, частота встречаемости интертригинозной формы была в 1,5 и 4,5 раза выше в первой возрастной группе, дис-гидротиче
ской – лишь в 1,4 и 1,8 раза выше, т.е. дис-
гидротическая форма микозов стоп с возрастом имела тенденцию к увеличению. Из анализированных исто-рий болезней видно, что у лиц пожилого и старческого возраст
а осложнения микоза стоп выявлены в 82,6 %.
У всех обследованных больных отмечены сопутствую-щие забо
левания: периферические ангиопатии (21 %),
ожирение (17 %), различные деформации стоп (15 %), сахарный диабет (8 %), гастриты с разными типами секреции имели 100 % больных, гепатиты разной эти-ологии диагно
стированы у 73,3 %.
Таким образом, на основание полученных данных
можно сказать, что у лиц пожилого и старческого воз-раста
частота микоз составляет 12,7 % и имеет тенден-
цию к увеличению. Наиболее частой формой является сквамозная, а частота встречаемости дисгидротической имеет тенденцию к увеличению. Осложнения развива-ют
ся в 82,6 % случаях. Основными факторами разви-
тия микозов стоп являются наличие микст-патологий, особенно дисгормональные и сосудистые нарушения. эт
о диктует необходимость проведения комплексных
лечебных мероприятий, не только антимикотическими средствами, но и назначения препаратов метаболичес-кого ряда и улучшающих микрогемодинамику.
К ПРОБЛЕМЕ ТРИХОФИТИИ В ЦЕНТР АЛЬНОАЗИАТСКОМ РЕГИОНЕ
Ваисов А.Ш., Мусаева Н.Ш., Аллаева М.Д.
Ташкентская Медицинская Академия кафедра кожных и венерических болезней,
Ташкент, Узбекистан
Широкое распространение грибковых заболеваний
среди людей различных возрастных групп, длитель-ность течения и трудность лечения обуславливают более пристальное внимание исследователей к этой проблеме(1,2,3,9,10). На сегодняшний день одними из распространенных кожных заболеваний остаются де-рматофитии(4,5,6).
В последние годы среди дерматофитий преоблада-
ет т
рихофития – 72,5 % против 27,5 % микроспории,
появляется феномен атипичной локализации трихофи-тии в области лобка(6,7,8,9). Продолжающийся рост трихофитии, обусловленной зоофильными трихофи-тонами, ее полиморфизм и наличие различных форм указывают на необходимость изучения патогенеза и различных вариантов тканевой реакции(3,9,10,11). Ос-таются открытыми вопросы возрастной эпидемиоло-гии трихофитии, многообразие путей передач и раци-ональной терапии.
Целью наших исследований явилось клиническое
изучение динамики морфофункциональных и микроби-ологических характеристик кожи и волос в очагах пора-жения при глубокой форме зооантропонозной трихофи-тии, а так же совершенствование методов ее лечения.
Под проспективным клиническим наблюдением
находилось 66 больных, страдающих инфильтратив-но-нагноительной формой трихофитии (ИНТ), полу-чавших стационарное лечение в Ташкентском Облас-тном КВД. Заболеваемость трихофитией приходилась в основном на группу лиц детского возраста от 7 до 11 лет (44,2
%), значительно чаще встречалась у лиц муж-
ског
о пола (66,3 %) с инфильтративно-нагноительной
формой, давностью свыше 1 месяца (58,2 %), наиболее частым поражением волосистой части головы (38 %). Изучение анамнеза заболевания больных трихофитией выявило, чт
о в 69,5 % случаях заражение произошло
от животных, в 24,0 % случаях при контакте с больны-ми людьми и несоблюдением правил личной гигиены. В 35,2
% случаях не исключена возможность полового
заражения. Семейные случаи заболевания в результате бытового заражения членов одной семьи отмечены в 43 случаях
из 212 заболевших трихофитией. В 6,5 %
случаях источник заражения выявить не удалось.
При культуральном исследовании ИНТ наиболее
часто
был высеян Tr. mentagrophytes var. gypseum –
43,2 %, Tr. verrucosum faviforme – 42,6 %.
Морфологические исследования кожи пациентов с
ИНТ выявили изменения кожи и внутренней структу-ры волос в очагах поражения при внедрении гриба.
У больных выявлен гиперкератоз, акантоз и акан-
толизис эпидермиса, изменения ядер базального и шиповатого слоя. В дерме полиморфноклеточная ин-фильтрация с внесосудистыми скоплениями. Измене-ниям подвергается структура внутреннего корневого влагалища волоса, до полной дезинтеграции. Клетки кутикулы располагаются рыхло, ядра пикнозированы.
В микрофлоре очагов поражения больных с ИНТ
развитие пиогенных наслоений происходит благодаря симбиозу патогенных культур стафилококков и стреп-тококков с грибами рода Trichophyton. У золотистого стафилококка выявлены ферменты-патогенности, спо-собствующие обострению воспалительных реакций и создающие патогенетический фон для трансформации поверхностной трихофитии в ее глубокую форму.
Применение в терапии комбинированного метода
лечения
тербинафина – Тербизила (250 мг) с раство-
ром Куриозин, в целях улучшения репоративных про-
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 419
цессов в очаге поражения, дает нам основание реко-
мендовать его больным с зооантропонозной ИНТ как комплексный метод лечения. Добавление в комплекс лечения раствора Куриозин обеспечило более раннее купирование и стабилизацию воспалительных процес-сов в очаге, санацию вторичной бактериальной флоры и заживление трихофитного очага.
эф
фективность метода лечения оказала влияние на
сроки пребывания больных в стационаре (до 21,5 ±0,5
дней).
Список литературы:1.Кубанова А.А., Потекаев Н.С., Потекаев Н.Н.
Руков
одство по практической микологии // Москва –
2001- 144с.
2.Суколин Г.И., Тимошин Г.П., Ремнев В.К. Острая
глубокая диссеминированная трихофития // Вестник пост
дипломного медицинского образования – 2001 –
№1 – с.63–64
3.Сергеев Ю.В., Сергеев А .Ю. Основы медицинс-
кой микологии: В кн.: Медицинская микробиология / под ре
д. Д.К.Новикова – Витебск,2002.–325 с.
4. АбидоваЗ.М.,Арифов С.С., ЦойМ.Р . Зооантропо-
нозная трихофития лобковой локализации (информа-ционное письмо)
– Ташкент, 2004 – 4с5. Ваисов А.Ш.,Мусаева Н.Ш., Джаббаров Н.Х.
Трих
офития – инфекция передающаяся половым пу-
тем //
Новости дерматологии и венерологии – 2002 –
№3–4 с.39–41
6. К
апкаев Р .А., Любан Б.Л., эшонхужаев Ш.И.
Орунгал в терапии грибковых заболеваний : мед. По-собие
– Ташкент, 2004 – С. 35
7.Цой М.Р . Клинико-экспериментальное обоснова-
ние применения некоторых антимикотиков в лечении трихофитии у детей : Автореферат дисс. канд.мед.наук.
– Ташкент, 1999 – 17 с.
8. Чистякова э.В. Современная эпидемиология
зооантропонозной трихофитии. Влияние урбаниза-ции :
Автореферат дисс… доктора мед.наук. – Москва,
1992 – 32 с.
9. Lobato M.N., vugia p.J/, frieden I.J. Tinea ca-
pi
tis in California children: a population – based study
of growinq epidemic // pediatrics – 1997 – vol 99,
№4 – p. 551–4
10. kwon-Chung k.J.,Bennett J.E.Medical mycology.
philadelphia: Lea and febiger,1992,866 p.
11. Jacobs pH, Nall L. fungal disease: biology, immu-
nology, fnd diagnosis. New York: Dekker, 1997, 591 p.
ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС У БОЛЬНЫХ ОНИХОМИКОЗОМ
Васенова В.Ю., Бутов Ю.С.
кафе
дра дерматовенерологии и клинической микологии ФУв Г оУ вПо РГМУ,
Москва
Нами было проведено исследование цитокинового
статуса (определение наличия мРНК про- и противо-воспалительных цитокинов, хемокинов, факторов рос-та сосудов и индуцибельной NO-синтазы) у пациентов с длительным течением онихомикоза.
В результате было установлено, что у большинс-
тва пациентов в ногтевом ложе отсутствуют маркеры во
спалительного процесса. Только у 26,3 % больных
была обнаружена мРНК IL-1в, у 47,4 % – мРНК IL-6. Отсутствие или низкий уровень синтеза этих двух цитокинов возможно обусловлены длительно проте-кающим хроническим инфекционным процессом, со-провождающимся истощением некоторых звеньев им-мунной системы.
У большинства пациентов (73,7 %)
отсутствовала продукция мРНК TNf-б, играющего важнейшую роль в развитии воспалительного процес-са, обусловленного участием макрофагального звена иммунитета.
То
лько у 15 % пациентов в биоптате из ногтевого
ложа была выявлена мРНК INf-г, играющего важную роль и во врожденном и приобретенном иммунитете. Отс
утствие или низкий уровень синтеза INf-г говорит
о том, что Т-хелперы 1 типа, по-видимому, не играют важной роли в формировании местного противогриб-кового иммунитета.
Подавление воспалительного процесса в зоне по-
ражения, по-видимому, обеспечивается активным син-тезом почти у всех пациентов IL-10, основной эффект которого связан с ингибированием активности Th1-клеток и снижением активности макрофагов, являю-щихся продуцентами провоспалительных цитокинов.
Лишь у части обследованных нами пациентов
(42,1
%) активированы гены IL-8, обеспечивающего
привлечение (хемотаксис) в зону воспаления моно-цитов и полиморфно-ядерных лейкоцитов. Возможно, это объясняется патологией капилляров в зоне пораже-ния, выявленного у этих пациентов при гистологичес-ком исследовании ногтевого ложа.
На фоне сниженной функции специфического про-
тивогрибкового иммунитета, по-видимому, происходит активация механизмов локальной неспецифической за-щи
ты – почти у всех пациентов в биоптате выявлялась
мРНК индуцибельной NO-синтазы. этот фермент син-
тезируется только в результате действия противовоспа-лительных цитокинов. Оксид азота обладает прямым цитотоксическим действием на клетки бактерий и гри-бов, попавшие в организм. Его действие осуществляет-ся путем ингибирования жизненно важных групп фер-ментов, участвующих в цикле Кребса и синтезе ДНК.
То
лько у 5 % больных в биоптате выявляется мРНК
сосудистого эндотелиального фактора роста (vEGf) в значимых количествах, что говорит об отсутствии процесса восстановления структуры кровеносных со-судов.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 420
Актуальность проблемы онихомикоза обусловлена
как широкой распространенностью среди населения,
так и в немалой степени сложностями терапии этой па-тологии, которая зависит от анатомо-физиологических особенностей ногтевой пластинки.
Несомненный интерес представляет использова-
ние местного противогрибкового препарата в форме лака для ногтей в комбинированном лечении онихоми-коза. Комбинированная терапия, при правильном на-значении, превосходит по эффективности местную и системную терапию, взятые в отдельности. Ее основ-ным достоинством являются сокращение сроков ле-чения системными препаратами и более эффективное предотвращение рецидивов. Заведомая успешность комбинированной терапии обусловлена следующими предпосылками. Во-первых, сочетанное применение антимикотиков с различными механизмами действия (фунгист
атическим – у системного, фунгицидным – у
местного) обеспечивают синергизм действия и расши-рение спектра антимикробной активности. Во-вторых, появляется возможность создания оптимальной кон-центрации лекарственных веществ во всех структурах ногтя благодаря одновременному поступлению анти-мико
тиков по разным направлениям: системного – с
током крови через матрикс и ногтевое ложе, местно-го
– непосредственно через ногтевую пластинку. Ком-
бинированная терапия позволяет повысить эффектив-ность системных препаратов, снижает риск развития нежелательных эффектов за счет сокращения сроков лечения и обеспечивает большую безопасность лече-ния для больного.Использование лака в качестве местного препарата
является хорошим профилактическим средством. Лак батрафен совместим со всеми косметическими лаками, и его применение значительно улучшает качество жиз-ни, так как пациенты могут свободно посещать пляжи, бассейны, спортивные площадки, не смущаясь своего дефекта и, что очень важно, не ставя окружающих в опасность заражения.
Под нашим наблюдением находилось 48 больных (20
женщин и 28 мужчин) в возрасте от 18 до 50 лет. По кли-ническим формам больные были распределены следую-щим образом: онихомикоз стоп (n=18), рубромикоз стоп (n=12), эпидермофития стоп (n=18). При экссудативных формах применяли крем батрафен 2 раза в сутки. Лак на-зн
ачали при площади поражения ногтя не более 40 %.
Под влиянием комплекса препаратов прекращал-
ся зуд, острые явления стихали через 3–4 дня, полное разрешение процесса достигалось через 7–9 дней. При онихомикозах на ногтевую пластинку наносили лак, частично удалив пораженную часть ногтя с боковых краев и со свободного края. Чистку ногтей производи-ли 1 раз в 2 недели, а лак наносили 2 раза в неделю. Длительность лечения составила 4–6 месяца. После 20 аппликаций наблюдалось уменьшение интенсивнос-ти гиперхромии ногтей, подногтевого гиперкератоза и площади поражения. Через 6 месяцев клиническое излечение
было достигнуто у 70 % больных, у 30 % –
значительное улучшение. Во всех случаях результаты лечения были подвержены микроскопически.
Таким образом, батрафен является эффективным
средством для терапии различных форм микозов.ТАКТИКА КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕР АПИИ ОНИХОМИКОЗОВ
С ПРИМЕНЕНИЕМ ЛАКА «БАТР АФЕН»
Васенова В.Ю., Бутов Ю.С., Аллахвердов А.И.
кафе
дра дерматовенерологии и клинической микологии ФУв РГМУ,
Москва
ПРИНЦИПЫ ТЕР АПИИ ОНИХОМИКОЗОВ
Васенова В.Ю., Бутов Ю.С., Школьников М.М.
кафе
дра дерматовенерологии и клинической микологии ФУв Г оУ вПо РГМУ,
Москва
Актуальность проблемы онихомикозов возрастает
с каждым годом в связи со стабильным увеличением числа больных. Количество пациентов увеличивается с возрастом вне зависимости от пола. По данным за-рубежных исследователей, онихомикозом страдает от 2
% до 18,5 % от общего числа жителей планеты, а в
возрастной группе 70 лет и старше этим недугом пора-жено 50
% населения.
У многих пациентов выявляются нарушения кле-
точного и гуморального звеньев иммунитета, что вы-ражается
в изменениях в популяциях фагоцитов, Nk
и Т-клеток, которые соответствуют наличию вялотеку-щей хронической инфекции. Выявляется избыточный уровень эндогенной иммуносупрессии, свидетельс-твующий о функциональной недостаточности иммун-ной защиты. В связи с этим для успешного лечения грибковой инфекции наряду с назначением системных антимикотиков целесообразно проводить иммунокор-регирующую терапию.
Мы применяли отечественный иммуномодулятор
иммуномакс в комплексном лечении 15 больных они-хомикозами. Терапия включала удаление пораженных ногтевых пластинок, назначение системного антими-котика орунгала по схеме пульс-терапии, применение наружных противогрибковых средств и введение им-муномакса. Препарат назначался после первого курса
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 421
пульс-терапии орунгалом по 200 ед внутримышечно,
один раз в день через день в количестве 3 инъекций, затем следовал недельный перерыв и повторный курс из 3 инъекций иммуномакса.
Системные антимикотики обладают фунгицид-
ным и фунгистатическим действием. Гибель клеток гриба и высвобождение специфических для гриба ан-тигенов приводит к увеличению антигенной нагрузки и, как следствие, повышает интенсивность иммун-ных реакций. Поэтому у больных после лечения сис-темными антимикотиками происходит увеличение количества лимфоцитов, и в частности, СD8
+Т-кле-ток, нарастает интенсивность хемилюминесценции нейтрофилов. Добавление иммуномакса к антими-котической терапии повышает эффективность функ-ционирования имеющихся клеток иммунной систе-мы
(Nk, моноцитов, макрофагов, нейтрофилов), что
позволяет справиться с инфекцией и инфекционными антигенами без дополнительного увеличения коли-чества этих клеток.
В результате комплексного применения орунгала и
иммуномакса было отмечено увеличение количества выздоров
евших до 96 % и сокращение сроков лечения
до 4,3 месяцев.
ИССЛЕДОВАНИЕ э ФФЕКТИВНОСТИ КОМПЛЕКСА
«ФОЛТЕНЕ ФАРМА ПРОТИВ ПЕРХОТИ»
Верхогляд И.В., Пинсон И.Я.
РМА
По, кафедра дерматовенерологии и клинической микологии,
Москва
клиника лазерной дерматологии «Гарвей ор» на базе медицинского центра
Управления Делами Президента РФ,
Москва
Перхотью по данным разных авторов страдают от
30 до 50 % жителей земного шара. Причины ее воз-никновения разнообразны, но у всех пациентов обна-руживаются дрожжеподобные грибы рода Маlassezia. Роль этих грибов в формировании перхоти до конца не ясна, однако доказано, что их присутствие приводит к усилению шелушения и воспаления кожи головы. По-иск эффективных препаратов против перхоти является актуальной проблемой дерматологии.
Целью нашего исследования была оценка эффек-
тивности комплекса «Фолтене фарма против перхоти». Комплекс состоит из шампуня и лосьона. Активными компонентами шампуня «Фолтене фарма против пер-хоти» являются: пироктон оламин, салициловая кис-лота и витамин В5. Лосьон «Фолтене фарма против перхоти» содержит климбазол и комплекс витаминов (А, В5, С, Е, РР) и аминокислот.
Под нашим наблюдением находилось 23 пациента
с проявлениями перхоти. Группа была представлена 10 женщинами и 13 мужчинами в возрасте от 14 до 43 лет. Длительность заболевания варьировалась от 1 месяца до 3-х лет. Всем пациентам назначались препа-раты «Фолтене фарма против перхоти» шампунь 2–3 раза и лосьон 3 раза в неделю. Результаты оценивались через 30 и 60 дней учитывались уменьшение десква-мации, воспаления и зуда. Через 30 дней применения комплекса исчезновение признаков перхоти отмеча-лось
у 20 пациентов (85,2 %). Через 60 дней примене-
ния перх
оть исчезла у 21 пациента (92,8 %). У двоих
пациентов отмечалось значительное снижение шелу-шения, исчезновение зуда, однако полного регресса не наблюдалось. Все пациенты отметили комплаэнтность и хорошую переносимость препаратов. В дальнейшем пациентам назначался курс поддерживающей терапии дважды в год весной и осенью применялся шампунь «Фолтене фарма против перхоти».
По результатам исследования можно сделать вы-
вод, что комплекс препаратов «Фолтене фарма против перхоти» является высоко эффективным. Активные компоненты действуют на различные звенья форми-рования перхоти. Комбинация противогрибковых ком-понентов пироктон оламина и климбазола оказывают синергическое губительное действие на грибы рода Маlassezia, салициловая кислота устраняет шелуше-ние, витамин В5 обладает противовоспалительным эффектом. Комплекс удобен в использовании и не име-ет побочных эффектов, поэтому может быть рекомен-дован для широкого применения.
ПЕРСПЕКТИВЫ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ПРОТИВОГРИБКОВОЙ ТЕР АПИИ
Гарасько Е.В., Ефимова Е.Г., Пругер И.В.
Ивановская государственная медицинская академия,
Иваново
Фотодинамическая терапия (ФДТ), использующая
действие активных форм кислорода и иных свободных радикалов, образующихся под действием лазерного излучения в сенсибилизированных объектах, является уникальным направлением противогрибковой тера-пии, не зависящим от лекарственной устойчивости.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 422
Имеются сообщения об эффективности фотодинами-
ческой инактивации грибов рода Candida в системах in vitro в присутствии катионных производных фталоци-анинов и in vivo при ФТД экспериментальной грибко-вой инфекции. В то же время отсутствует эксперимен-тально обоснованная физико-химическая модель ФДТ, использующей лазерное облучение грибов, сенсиби-лизированных химическими соединениями на основе хлорина Е6. Цель работы определить перспективы фо-тодинамического воздействия на штаммы грибов рода Candida, выделенные из гнойной мокроты 23 больных с клинико-рентгенологическим симптомокомплексом тяжелой внебольничной пневмонии и клинически неэ-ффективной стартовой антимикробной терапией.
Для определения способности грибов захватывать
и удерживать фотосенсибилизатор(ФС) взвесь штам-мов C.
albicans в 0,9 %-ном растворе натрия хлорида с
0,1мл 1 %геля ФС инкубировали в темноте при 37 °С в течение1,5часа с последующим высевом на плотную питательную среду. Для сенсибилизации к лазерному излучению (ЛИ) через 1,5 часа темновой инкубации с ФС культуру грибов облучали непрерывным ЛИ с длиной волны 662нм методов кругового поля. Мощ-ность
ЛИ на выходе волокна – 0,147; 0,243; 0,475Вт.
Плотность потока энергии падающего ЛИ-1; 10; 15 Дж/см2, пло
тность потока мощности – 0,11; 0,18; 0,36 Вт/см2. Световую дозу подводили перпендикулярно поверхности с помощью моноволоконного кварцевого световода (d оптического волокна 600мкм) с прямым выходом излучения.
В результате исследований установлено, что все
исследуемые штаммы C. albicans задерживают ФС. Используемые ФС не обладают собственной темновой цитотоксичностью, собственным противогрибковым действием: в контрольных сериях определялся сплош-но
й рост (I vстепень). Облучение ЛИ несенсибилизиро-
ванных культур умеренно угнетало рост (до III степени), причем число колоний уменьшалось с ростом плотнос-ти мощности излучения. Облучение ЛИ сенсибилизи-рованных культур обеспечивало полный фунгицидный эффект (рост культуры отсутствовал). Фунгицидный эффект ФДТ не зависит от рН среды и определяется фо-тохимической реакцией I типа, зависящие от плотности мощности и экспозиционной дозы ЛИ.
Таким образом, представленная модель ФТД, ис-
пользующей лазерное облучение грибов, сенсибили-зированных химическими соединениями на основе хлорина Е6, является уникальным направлением про-тивогрибковой терапии, где для достижения фунги-цидного эффекта требуются значительно меньшие дозы излучения (1–15 Дж/см
2), чем при проведении
противоопухолевой терапии.
ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ
КАНДИДО-ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ МИКСТ-ИНФЕКЦИЕЙ
Гарбузов Д.А., Федотов В.П.
Днепропетровская государственная медицинская академия,
Днепропетровск, Украина
Под наблюдением находилось 150 больных: 30 – с
урогенитальным кандидозом (первая группа), 30 – с
герпесвирусной инфекцией (вторая группа) и 90 – с
комбинацией этих инфекций (третья группа). Для диагностики применяли микроскопические, миколо-гические, бактериологические методы, определение КОЕ, активность на сахарах, биохимические тесты. ИФА, ПИФ, Иммунодот, can
didaselect . Для оценки
иммунного статуса определяли ЦИК, титр компле-мента, ФАЛ, НСТ-тест, cd3+. cd4+, cd8+, cd56+,
cd56+, cd22+. cd25+, иммуноглобулины класса А,
М, G. ФНО-α и α-ИФН в сыворотке крови, а также
количество секреторного iga (s iga)
в выделениях
урогенитального тракта (тест-система siga-ИФА-
бест). У больных первой и третьей группы отмечено статистически значимое снижение ФЧ, ПФЛ, НСТ-теста и повышение уровня ЦИК при нормальном уровне комплемента. В тоже время у больных герпе-свирусной инфекцией (вторая группа) эти показатели существенно не изменялись. У этих пациентов (вто-рая группа) был несколько снижен уровень cd16+,
igm, повышение ФНО- α и α-ИФН в сыворотке крови, высокий уровень секреторной фракции iga в выделе-
ниях из уретры и в сыворотке крови, т.е. изменения иммунитета были менее выражены. В тоже время у больных кандида-инфекцией, а особенно микст-ин-фекцией (кандида-герпетической). зарегистрирова-но снижение cd3+ в основном за счет уменьшения
CD4+, угнетения индекса cd4+/cd8+, снижение
показателя cd16+, iga, igm, увеличение ФНО- α,
при нормальных показателях α-ИФН, cd22+, igG,
c
d19+, cd8+. У этих лиц на фоне нормального уров-
ня секреторной фракции iga (s iga ) в выделениях из
уретры на фоне снижения этой фракции в сыворотке крови (78.2±16,0 против 66,4±8,2 г/л). Все это свиде-тельствует об однонаправленных сдвигах иммунном статусе, особенно при микст-инфекции, что на наш взгляд, отражает глубокие нарушения противоин-фекционной защиты за счет комбинированного дейс-твия этих инфекционных факторов (герпесвирусной инфекции и кандидоза). Полученные нами данные требуют необходимости назначения дифференциро-ванной адекватной иммунокорригирующей терапии, наряду с применением этиотропных препаратов.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 423
Актуальность проблемы. По частоте распростране-
ния и способности поражать людей различных возрас-
тных групп микозы стоп, онихомикозы приближаются к обычным простудным заболеваниям. Соответствен-но лечение микозов стоп и онихомикозов остается важной проблемой. Изыскание новых подходов и раз-работок новых лекарственных препаратов для лечения больных является весьма актуальной.
Ламикан
– системный противогрибковый препарат,
относящийся к классу аллиламинов. Действующим веществом ламикана является тербинафин. Препарат оказывает выраженное фунгистатическое и фунгицид-ное действие, которое обусловлено ингибированием биосинтеза грибкового эргостерола путем ингибиро-вания
фермента – скваленэпоксидазы, расположенной
на клеточной мембране гриба, в результате чего проис-ходит дефицит эргостерола и внутриклеточное накоп-ление сквалена, что вызывает гибель клетки гриба.
При приеме ламикана внутрь 250 мг/сутки мак-
симальная концентрация препарата в плазме крови достигается в течение 2 часов после приема, хорошо адсорбиру
ется при пероральном приеме (около 70 %),
биодоступность составляет 40 %. Тербинафин интен-сивно св
язывается с белками плазмы крови (99 %),
быстро проникает в дермальный слой кожи и накапли-вается в роговом слое и ногтевых пластинках, обеспе-чивая фунгицидное действие, достигает высокой кон-центрации в волосах, волосяных фолликулах, коже и подкожной клетчатке. Период полувыведения состав-ляет около 17 часов.
Препарат ламикан активен в отношении групп
Trichophyton (T. rubrum, T. mentagrophytes, T. tonsurans, T. verrucosum, T. violaceum), Microsporon, Epidermoph-yton floccosum. В низких концентрациях оказывает фунгицидное действие в отношении дерматофитов, плесневых грибов (Aspergillus, Cladosporium, Scopu-lariopsis brevicaulis и др.). Действие на дрожжевые гри-бы рода Candida может быть фунгистатическим и фун-гицидным в зависимости от формы гриба. Тербинафин актив
ен также в отношении pityrosporum-возбудителя
разноцветного лишая. Выпускается ЗАО « Канофарма продакшн» (г. Щелково, Московская область) в таблет-ках 125 и 250 мг.
Целью исследования явилась оценка качества лече-
ния онихомикозов препаратом Ламикан.
Материалы исследования. Нами пролечены лами-
каном 21 человек, больных онихомикозами стоп и кис-тей. Из
них мужчин – 15, женщин – 6, в возрасте от
18 лет до 52 лет. Изменение ногтей стоп было у 18, сочетанное грибковое поражение ногтей стоп и кистей (Trichophyton rubrum+ Candida) у 3 больных. Площадь поражения
ногтей составляла от 22 % до 78 % от об-
щей площади. Давность заболевания была от 1,2 года до 15 лет.
Методика лечения. Препарат Ламикан назначали
по 250 мг/сутки в комплексе с йодантипирином, по-ливитаминами, гепатопротекторами, ферментами и энтеросорбентами. Препараты, улучшающие микро-циркуляцию конечностей добавляли лицам с онихо-микозами стоп. Продолжительность лечения соста-вила 3 месяца у 15 больных, 4 месяца у 4 больных, 6 месяцев у 2 больных (с субтотальным поражением ногтей стоп).
этио
логическое излечение достигнуто у 16 боль-
ных, отмечено значительное улучшение у 4 больных (от
растание более 50 % площади здорового ногтя).
Появление здоровых ногтей от матрикса на 2–3 мм от-мечается у 1 пациента. Все больные прием препарата перенесли хорошо. В отдельных результатах случаев рецидива ни у кого из больных в период наблюдения, сроком до 1 года, не наблюдалось.
Таким образом, как показали наши исследования,
новый препарат Ламикан является высокоэффектив-ным и безопасным противогрибковым средством для лечения всех больных с онихомикозоми. Использова-ние в комплексе лечения ферментов и энтеросорбен-тов предупреждает нежелательные побочные явления со стороны желудочно-кишечного тракта.ЛЕЧЕНИЕ БОЛЬНЫХ МИКОЗАМИ СТОП НОВЫМ
АНТИМИКОТИКОМ ЛАМИКАН
Гафаров М.М., Блинова Е.С., Петрасюк О.А.
ГоУ вПо БашГМУ Росздрава,
Уфа
НОВЫЙ МЕНЕДЖМЕНТ ЛЕЧЕНИЯ ДЕРМАТОФИТИЙ
Герасимчук Е.В.
9 консультативно-диагностическая поликлиника Мво Мо РФ,
Москва
Известно, что согласно классификации микозов
Н.Д.Шеклакова (1976), при дерматофитии поражают-ся эпидермис, дерма, волосы и ногти. Современная статистическая классификация микозов (МКБ №10), основанная на локализации патологических очагов на теле пациента, среди клинических форм микозов, в частности, дерматофитий, выделяет микоз ногтей (В35.1) и микоз стоп (В35.3). По данным КВО 9 КДП у больных моложе 30 лет микоз стоп сочетается с ми-коз
ом ногтей в 18 % случаев, а у больных старше 60
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 424
лет – в 100 %. Так как в последнее время наблюдается
резистентность микобиоты к старым антимикотичес-ким средствам для местного лечения, возникла необ-ходимость внедрения в практическое здравоохранение научно обоснованных альтернативных клинически эффективных и безопасных лекарственных средств. На основании опроса микологических больных КВО 9 КДП (n
= 172) в возрасте от 15 до 78 лет, мужчин – 130
(75,6 %), женщин – 41 (24,4 %), были выявлены сле-дующие результаты: предпочтение только химиоте-рапев
тическим средствам – 11 человек (6,4 %), пред-
почтение
только фитотерапевтическим средствам – 89
человек (51,5 %), комбинирование фито- и химиопре-парат
ов – 72 человека (42,1 %); предпочтение только
жидким формам внутрь – 30 человек (17,4 %), толь-ко
таблетированным – 62 человека (36,1 %), комби-
нирование
жидких и таблетированных – 80 человек
(46,5 %).
Цель исследования: научно обосновать целесооб-
разность использования препаратов из лекарственного сырья при лечении микотической инфекции стоп. Со-гласно клинической классификации микозов (Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В., 2006), в исследовании приняли участие больные (n=40) от 15 до 84 лет со различны-ми формами дерматофитии стоп (сквамозная, гипер-кера
тотическая – 30 человек, дисгидротическая – 12,
межпальцевая – 8) в сочетании со следующими фор-мами
онихомикоза: дистальная – 33 человека, поверх-
ностная
– 6, проксимальная – 1. Контрольную группу
составили больные (n=38), сопоставимые по возрасту, клинической картине, сопутствующим соматическим заболеваниям и данным анамнеза. В первой группе для местного лечения использовались ножные ванноч-ки с экстрактами растений (шалфей, береза, эвкалипт) и мази с витаминами А, Е, мочевиной, эфирными мас-лами чайного дерева, розмарина и сосны. Во второй группе использовались ножные ванночки с раствором перманганата калия 1:5000 и бикарбоната кальция, 1
%-ный крем Клотримазол, 3 %-ная серносалицило-
вая мазь. В обеих группах при присоединении вторич-ной инфекции использовался крем Акридерм-ГК. По показаниям (в соответствии с анамнезом) назначались седативные (настойка пустырника, таблетки персена, содержащие экстракт мелиссы, валерианы, мяты), ан-тигистаминные (диазолин, супрастин), гепатопротек-торные (препараты на основе расторопши), пробиоти-ческие (Нормофлорин Л и Б, Линекс), пребиотические (пантотенат кальция, Хилак-Форте), селективные энтеросорбенты (Лактофильтрум), общеукрепляю-щие, антиоксидантные средства (плоды шиповника, боярышника, трава мелиссы). Клиническая эффектив-ность оценивалась по субъективным характеристикам (уменьшение зуда, жжения, болезненности) и объек-тивным (данным микроскопии, параметрическим дан-ным: уменьшение шелушения, количества пузырьков и пустул, эпителизация трещин и подсыхающих эро-зий). В клинических анализах крови и мочи до и после исследования изменений не было выявлено. В обеих группах клиническая эффективность оценивалась по шкалам и была равноценной.
Вывод: фитопрепараты клинически эффективны в
комплексе с химиопрепаратами при лечении микоти-ческой инфекции стоп, расширяют арсенал противо-грибковых средств.
ИММУНОМОДУ ЛИРУЮЩАЯ ТЕР АПИЯ МАЛАССЕЗИОЗА КОЖИ
Горбунцов В.В.
Днепропетровская государственная медицинская академия,
Днепропетровск, Украина
Малассезийная инфекция кожи у больных обычно
проявляется в виде не одной клинической формы ма-лассезиоза кожи, а как комбинация двух, трех и даже четырех различных его клинических форм. Чаще все-го отмечаются комбинации кероза Дарье, простого питириаза волосистой части головы и комедонов; ке-роза, комедонов, простого питириаза и себорейного дерматита волосистой части головы; кероза, просто-го питириаза волосистой части головы, комедонов и фолликулярных экзематидов; кероза, фолликулярных экзематидов и других клинических форм экзематидов Дарье. Разноцветный лишай чаще всего сочетается с керозом, комедонами и негнойным фолликулитом кожи туловища и конечностей.
Известно, что вид клинических проявлений дерма-
тоза обусловлен действием защитных сил организма (взаимодействием возбудитель-макроорганизм). У больных малассезиозом кожи обращает на себя вни-мание значительное различие его клинических про-явлений, одновременно существующих на различных участках
кожи. это дает основание думать о различии
вида, направления или степени иммунных изменений в различных участках пораженной кожи больных ма-лассе
зиозом кожи, – что было подтверждено клини-
ческими наблюдениями.
Вышесказанное было основанием проведения
больным малассезиозом кожи исследования особен-ностей изменений клеточного иммунитета и факторов естественной резистентности не только капиллярной крови непораженной кожи (как это делается обычно), но и одновременно крови, взятой непосредственно с очагов поражений, дифференцированно в зависимости от клинических форм (проявлений) этого дерматоми-коза.
Изучение особенностей изменений клеточного им-
мунитета и факторов естественной резистентности у 216 больных малассезиозом кожи показало не только наличие определенных иммунных изменений, зави-
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 425
сящих от вида наиболее манифестной клинической
формы малассезиоза кожи (в сравнении с пациентами, не имевшими проявлений малассезиоза); но и нали-чие различий изменений изученных показателей и их особенности, взаимосвязанные с особенностями раз-личных, одновременно существующих, проявлений малассезиоза кожи, в капиллярной крови пораженной ко
жи, – сравнительно с показателями капиллярной
крови непораженной кожи исследованных больных.
На основании того, что у больных одновременно на
разных участках кожи были выявлены такие, разные по направлению и степенью выраженности, иммун-ные изменения, зависящие от особенностей и харак-тера проявлений малассезиоза кожи; больным было обосновано проведение комплексной иммуномодули-рующей терапии, которая, в отличие от общепринятой, включала в себя, кроме системной иммуномодулиру-ющей терапии, проведение локальной иммуномоду-лирующей терапии, с применением таких средств, как линимент Циклоферона, раствор Протефлазида, крем элидел и
кортикостероиды, в комбинации с физиоте-
рапевтическим лечением.
Сравнение результатов предложенной терапии с ре-
зультатами общепринятого лечения показало не только лучший эффект по показателям сроков стабилизации, регресса проявлений малассезиоза и длительности его ре
миссий, – но и по показателям частоты и характера
возникновения обострений дерматоза во время лечения, процента случаев торпидности по отношению к про-водимой терапии, частоты и характера возникновения побочных и нежелательных эффектов от применения на
значенных средств иммуномодулирующей терапии, –
что дает основания для рекомендации применения ло-кальной иммуномодулирующей терапии в практике лечения больных малассезиозом кожи для повышения эффективности лечения этого дерматомикоза.
Р АСПРЕДЕЛЕНИЕ БОЛЬНЫХ С ОНИХОМИКОЗАМИ ПО
ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ В СИСТЕМЕ АВО
Дукович Е.В., Хабирова Р.Х., Титугина А.Ю.,
Балтер И.А., Табашникова А.И.
ГУз
Самарский областной кожно-венерологический диспансер,
Самара
В российской и зарубежной литературе сведения
о взаимосвязи онихомикоза с групповой принадлеж-ностью в системе АВО отсутствуют. Известно, что в различных популяциях распространённость повер-хностных антигенов эритроцитов различная. Чтобы выяснить её для рассматриваемого региона, мы обра-тились к различным доступным источникам: к данным областной станции переливания крови, архивам жен-ских консультаций, стационаров недерматологическо-го профиля. Во всех возможных источниках о данных распределения людей по группам крови общая картина оказалась примерно одинаковой: по трети людей име-ют первую и вторую группу крови и оставшаяся треть приходится на третью и четвёртую группы.
В качестве базы для сравнения и анализа мы ре-
шили взять данные областной станции переливания крови. эт
о обусловлено тем, что всем потенциальным
донорам определяют групповую принадлежность на современном методологическом уровне, а также они проходят медицинскую комиссию, включая осмотр де-рматовеноролога.
В группу контроля вошло 626 пациентов, проходив-
ших обследование и лечение по поводу онихомикоза в Центре по лечению заболеваний кожи стоп и ногтей СОКВД.
Распределение обследованных пациентов по груп-
повой принадлежности в системе АВО представле-но следующим образом. Выявлено, что доля людей с группой крови I(0) среди здоровых доноров составля-ет 33,7
%, а среди пациентов с онихомикозом – только
19,2 % (р<0,001). Группа крови II(A) наоборот преоб-ладает у
пациентов с онихомикозом – 43,8 % против
34,2 % в группе контроле (р=0,014). Распространён-ность третьей и четвёртой групп крови у обследован-ного
контингента и населения не различалась (29,3 %
и 23,0 % – III(B); 7,7 % и 9,1 % – Iv(AB) соответствен-но).
Помимо этого нами были изучены процессы не-
гативации результатов микробиологических методов исследования в зависимости от принадлежности паци-ентов к определенной группе крови по системе АВО. Нами выявлена следующая тенденция: у лиц со II и III группами крови происходит более быстрая негатива-ция данных
микроскопии – через 2 месяца от начала
лечения данные микроскопии были отрицательными у 83,3
% человек у пациентов со II группой крови и
16,7 % с III группой крови соответственно. При этом если рассматривать людей с сохранившимися поло-жительными результатами микроскопии, то среди них преоб
ладают люди с I группой крови – 41,7 %
(37,5 % – II группа крови, 12,5 % – III группа крови, 8,3 % – Iv группа крови) (р=0,064).
Таким образом, на основании полученных дан-
ных можно сделать вывод о том, что среди больных онихомикозом преобладают люди со второй группой крови (р=0,014). Среди людей с первой группой кро-ви онихомикоз встречается реже (р>0,001). Несмотря на то, что лица со II группой крови заболевают онихо-микозом чаще других, у них наблюдается самая быс-трая негативация данных микробиологических мето-дов исследования: через 2 месяца от начала лечения данные микро
скопии были отрицательными у 83,3 %
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 426
пациентов. Если рассматривать людей с сохранивши-
мися положительными результатами микроскопии, то среди
них преобладают люди с I группой крови – 41,7
(р=0,064). Исследования в данной области представляются
нам перспективными для формирования в дальней-шем групп риска и требуют дальнейшего научного изучения.
эФФЕКТИВНОСТЬ ТЕРБИЗИЛА В КОМПЛЕКСНОМ
ЛЕЧЕНИИ ОНИХОМИКОЗОВ
Ерашова Т.Ю., Разумная Г.Н., Суслов В.С.
Могилевский областной кожно-венерологический диспансер,
Могилев, Белоруссия
По данным ВОЗ каждый пятый житель нашей
планеты страдает грибковыми заболеваниями кожи и ее придатков. Наиболее распространены онихомико-зы
– поражение грибами ногтевых пластинок кистей
и стоп. При этом число таких больных во всем мире, в том числе и Белоруссии ежегодно увеличивается. Про-блема лечения этой патологии, по- прежнему, является актуальной. Несмотря на существование многочислен-ных современных наружных и системных антимико-тических препаратов, эффективность их недостаточно высокая.
В республике Беларусь можно предположить на-
личие около двух миллионов носителей микотической инфекциии и 500
000 больных онихомикозами.
Заболеваемость онихомикозами увеличивается
с возрастом, наиболее высока она у пожилых людей (29,9
% составляют пациенты в возрасте старше 65
лет). Реже онихомикозы диагностируются у детей и подро
стков (1–2 %). У мужчин онихомикозы встреча-
ют
ся в два раза чаще, чем у женщин. В 40,7 % случаев
заболевание носит семейный характер.
Предрасполагающими к развитию микозов фак-
торами являются нарушения целостности кожного покрова, повышенная потливость, вегетососудистая дистония, иммунодефицитные состояния, сосудистая патология с нарушением периферического кровообра-щения, эндокринопатии (сахарный диабет), ожирение, длительный прием антибиотиков, глюкокортикоидов, цитостатиков, иммуносупрессоров.
В распространении дерматофитийной инфекции ос-
новная роль принадлежит общественным баням, саунам, плавательным бассейнам. Следует помнить о внутрисе-мейной передаче возбудителя при пользовании общей обувью, полотенцами, мочалками, через недостаточно обработанные ванны, коврики и решетки.
Диагностика онихомикозов основана на наличии
клинических проявлений, результатах микроскопи-ческого исследования патологического материала и посева его на питательные среды с идентификацией выделяемой культуры. Основным возбудителем они-хомикозов является красный трихофитон. Вторые по часто
те возбудители – дрожжепождобные грибы рода
кандида, а среди представителей рода кандида до 90 % преобладают c.albicans.
Ле
чение онихомикозов – сложная, актуальная про-
блема. Имевшиеся ранее на рынке препараты, такие как гризеофульвин, кетоконазол, миконазол, флуко-назол требовали длительного применения и не всег-да позволяли достичь положительных результатов. эф
фективность лечения онихомикозов значительно
повысилась с появлением тербинафинов (ламизил, тербизил), итраконазолов (орунгал). Терапия онихо-микозов в зависимости от количества пораженных ногтей, площади и глубины поражения может быть местной, системной и комбинированной.
Мы применили комбинированный метод в лечении
онихомикозов. Из системных антимикотиков исполь-зовали тербизил.
Он обладает высокой фунгицидной активностью в
отношении наиболее распространенных возбудителей грибковых инфекций, при этом не проявляет гепато- и нефротоксического действия.
В течении двух лет под наблюдением находилось
38 больных онихомикозами, получавших комбиниро-ванное лечение и принимавших тербизил. Поражение ногтей было множественным. Мужчин было 22, жен-щин
– 16. Возраст больных от 25 до 64 лет. Длитель-
ность заболевания от 2 до 16 лет. Большинство паци-ентов неоднократно, безуспешно лечилось по поводу микоза, онихомикоза стоп и кистей.
Все больные обследованы. Со стороны общего ана-
лиза крови, мочи, биохимического анализа крови от-клонений от физиологической нормы не выявлено.
Для установления диагноза использовались бакте-
риоскопический и бактериологический методы, а так же оценивались клинические проявления.
Бактериологический метод применялся у 31 боль-
ного, у 20 больных получен рост tr. rubrum, у тро-их
– epidermophyton flocjssum, грибы рода candida – у
5 больных, у трех больных – плесневые грибы.
У 29 больных установили онихомикоз пальцев
стоп, у 9 онихомикоз пальцев стоп и кистей. У всех больных поражение ногтей сочеталось с поражением кожи стоп. На коже подошв были выражены сухость, трещины и гиперкератоз, муковидное шелушение. У 10 больных поражение ногтей протекало по нормот-рофическ
ому типу, у остальных – по смешанному. При
этом у одного и того же пациента можно было наблю-дать 2–3 формы поражения ногтей. Дистальное пора-жение ногтей имело место у 22 больных (с разрушени-ем Ѕ
и больше ногтя – у 10 больных, с поражение до
1/3 у 6 больных).
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 427
У 3 из пролеченных больных диагностирован са-
харный диабет, у двух варикозный симптомокомп-
лекс.
Тербизил больные получали по 0,25 г в день от 3
до 6 месяцев. Контрольное обследование проходили через 1–3–6 месяцев после окончания лечения.
Микотическое поражение гладкой кожи под вли-
янием терапии тербизилом разрешалось у больных в течении 2–3 недель.
Для излечения пораженных ногтевых пластинок
потребовалось более длительное время приема терби-зила. Прием препарата в течении 3 месяцев позволил достичь излечения клинического и этиологического у 35 больных. Прием антимикотика был продлен: на 1 месяц
– 2 больным, на 2 месяца – одному больному.
Среди больных, которым был продлен прием ан-
тимико
тиков в сочетании с местной терапией – это
больные старше 60 лет, больные сахарным диабетом и варикозным расширением вен.
Хочется отметить хорошую переносимость препа-
рата тербизил. Серьезных побочных явлений у боль-ных не наблюдалось. У 3 больных наблюдалось в тече-нии короткого времени тошнота, горечь во рту, потеря аппетита, у 2- легкий зуд.
Данные проявления наблюдались в течении корот-
кого времени и в легкой форме, по этому прием препа-рата не прерывался.
По нашим данным при 3 месячном приеме терби-
зила достичь положительных результатов удалось в 92,1
% случаев. В 7,9 % случаев (при наличии тоталь-
ного поражения ногтевых пластинок и сопутствующих заболеваниях) курс лечения составил 4–5 месяцев.
Таким образом, в результате наблюдения за проле-
ченными больными мы пришли к выводу о достаточно высокой эффективности препарата тербизил.
ЛИТЕР АТУР А1. Карпова О.И. //РМЖ.- 2003.-Т.11, №172. Кашкин П.Н., Шеклаков Н.Д. Руководство по ме-
дицинской микологии.- М.: Медицина, 1978.
3. Руководство по кожным и венерическим болез-
ням /
под редакцией Ю.К.Скрипкина. – М.: Медицина,
1995. – Т.1.
4. Шеклаков Н.Д. Болезни ногтей. – М.: Медицина,
1975.
РЕДКИЕ ЛОКАЛИЗАЦИИ ЗООАНТРОПОНОЗНОЙ
МИКРОСПОРИИ У ВЗРОСЛЫХ
Жукова И.Ю., Терегулова Г.А., Магазова Р.А., Левченко Т.С.,
Хамматова А.А., Гареева Р.Р., Корытова Е.Н.
Республиканский кожно-венерологический диспансер,
Уфа
Башкирский государственный медицинский университет,
Уфа
Микроспория поражает в основном детей до 15 лет.
Очаги зооантропонозной микроспории крайне редко локализуются в местах роста длинных и щетинистых волос, что объясняется качественным изменением состава кожного сала у взрослых, в котором накапли-ваются свободные жирные кислоты с высоким содер-жанием атомов углерода, обладающие фунгицидной активностью. Такие локализации могут наблюдаться у взрослых на фоне снижения естественной резистент-ности, связанной с наличием фоновой патологии или беременности (Корсунская И.М., 2004).
Цель: выявить редкие локализации зооантропоноз-
ной микроспории у взрослых.
Методы: непосредственное наблюдение больных
микроспорией, находившихся на лечении в микологи-ческ
ом отделении РКВД за период 2000 – начало 2008
годов.
Результаты: в этот период мы наблюдали мужчину
25 лет и женщину 37 лет (беременность 28 недель) с микроспорией волосистой части головы, женщину 35 лет с микроспорией области лобка (сопутствующее заболевание: хронический холецистит, панкреатит)), обусловленных M.canis. Во всех случаях диагноз был выставлен сразу в условиях поликлиники РКВД. У мужчины источником заражения была бродячая
кошка. У беременной женщины источник заражения не выявлен, контакта с животными или больными людьми не было, имеется указание на посещение па-рикмахерской за месяц до появления первых призна-ков заболевания. У женщины с микроспорией области лобка источником заражения явилась больная собака, за которой хозяйка ухаживала в процессе лечения ее ветеринарами от микроспории вакциной «Микодерм».
Клинические проявления у всех больных были
типичными для микроспории: имелось один или два эритематозно-сквамозных очага с четкими границами и сплошным обламыванием волос на уровне 4–6 мм, окруженных у основания «муфточкой», дающей под люминесцентной лампой точечное зеленое свечение. При микроскопии обломков обнаруживались споры Microsporum, в пос
еве – рост Microsporum canis.
Если лечение болного с микроспорией волосистой
части головы и больной с микроспорией лобка не вызва-ло особых проблем (излечение наступило через 32 дня приема гризеофульвина внутрь в сочетании с традици-онной наружной терапией), то лечение беременной жен-щины было весьма проблематичным. Поскольку приме-нение системных антимикотиков на фоне беременности
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 428
исключается, то лечении сводилось к местной терапии
йодом и серной мазью, сбриванию волос на волосистой части головы и попыткам эпиляции их в очаге. Естес-твенно, такое лечение не могло быть эффективным, в процессе лечения отмечалось появление новых очагов. Женщина была выписана по семейным обстоятельствам с рекомендациями продолжить наружную терапию. В этом случае речь о полноценной терапии больной мо-жет пойти только после родоразрешения при отказе от естественного вскармливания младенца.
Выводы: приведенные наблюдения напоминают о
возможной локализации очагов зооаноторопонозной микроспории на волосистой части головы и генитали-ях у взрослых.
ПСЕВДОМИКОЗЫ В ПР АКТИКЕ ДЕРМАТОЛОГА-МИКОЛОГА
Завадский В.Н.
Ярославская государственная медицинская академия,
Ярославль
В плане подготовки и специализации дерматолога,
вероятно, недостаточно уделяется внимания микро-
бным поражениям кожи, имитирующим микоз, и их со-
четаниям с дерматофитиями. По крайней мере, не так
уж редко встречаются досадные недоразумения, когда мелкоточечный кератолиз (возб
удитель – kytococcus
[синоним: Micrococcus] sedentarius), имеющий, кста-ти, ряд ярких клинических отличий от микоза, упор-но пытаются лечить, как дерматофитию. Эритразму
(возб
удитель – Corynebacterium minutissimum) рас-
познают достаточно успешно при локализации в паху, под мышками, но не в межпальцевых складках стоп, которые поражаются не реже. В результате незаслу-женно упрекают лабораторию, не обнаружившую «грибки», или винят противомикотические препараты. Некоторое своеобразие данной проблемы связано с тем обстоятельством, что возбудители псевдомикозов: kytococcus
sedentarius, Corynebacterium minutissimum,
pseudomonas aeruginosa, а также стафилококки и неко-торые
другие, – являются условно-патогенными. Они
могут быть представителями нормальной микрофло-ры кожи и становятся патогенными при определенных условиях. эти
условия создаются в случае снижения
иммунитета (хронические болезни и т.п.) и при на-
рушении защитных свойств кожи, например: несоб-
людение гигиены, потливость ног, ношение слишком тесной, теплой или воздухонепроницаемой обуви, травмирование кожи, варикозный симптомокомплекс. Если при смешанной микробно-микотической инфек-ции ограничиться лечением только дерматофитии, без использования антисептических средств, могут воз-никнуть условия для активизации микробного процес-са и продолжения болезни. При затянувшемся воспа-лительном процессе возможна экзематизация, которая
раньше трактовалась как «микотическая» экзема, затем как «микробно-микотическая». Однако практически она быстро излечивается пенициллином или другими антибиотиками, что указывает на ее преимущественно микробный характер. Мелкоточечный кератолиз стоп (keratolysis sulcata)
вст
речается, по крайней мере, у 10 % лиц, имеющих
повышенную потливость ног. Его нельзя не заметить по таким признакам как липкость подошв и неприят-ный запах от ног, что обусловлено свойством возбу-дителя (
kytococcus sedentarius) вырабатывать энзимы,
разрушающие и разлагающие кератин. Повреждения рогового слоя в виде сливающихся мелких углублений располагаются на опорных участках стопы и между пальцами. Мелкоточечный кератолиз, сочетаясь с де-рматофитией, придает ей вышеописанный характер-ный «колорит». Наиболее подвержены заболеванию лица, вынужденные по роду своих занятий носить за-крытую, из искусственного материала обувь, затрудня-ющую испарение пота.
эрит
разма (erythrasma) отмечается у 20–30 % лиц с
поражением кожи в паховых, межъягодичных складках и между пальцами стоп. Часто сочетается с дермато-фитией, кандидозом. Диагноз эритразмы может быть подтвержден появлением кораллово-красного свече-ния под люменом (УФЛ). Заболевание контагиозное.
Поражения,
вызванные pseudomonas aeruginosa,
примерно у 10 % лиц сочетаются и совпадают по ло-кализации с дерматофитиями (межпальцевые складки стоп, околоногтевые валики, под мышками, в паху) либо встречаются как самостоятельная инфекция: при повышенной влажности кожи (из-за потливости или внешних условий), при снижении иммунитета (напри-мер, «госпитальная» инфекция). Заболевание конта-гиозное.
Возможны серьезные осложнения – эктима и
др.
Лечение псевдомикозов можно проводить антиби-
отиками наружно (например, эритромициновой ма-зь
ю), иногда – внутрь. Но целесообразнее, по опыту,
применять местно универсальные (противомикроб-ные и противомикотические) антисептики, лучшим из
которых до сих пор остается йод (5 %-ый спирто-
вы
й раствор или раствор Люголя с глицерином – для
«нежных» мест). эффективен бензоилпероксид (5 %-
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 429
В последние годы на дерматологическом приёме
значительно увеличилось количество пациентов де-
тского возраста с заболеваниями ногтевых пластинок негрибковой и грибковой этиологии. Рост заболевае-мости ставит перед специалистами задачу не только совершенствования методов диагностики и лечения, но и поиска новых патогенетических механизмов формирования онихопатий. Согласно исследованиям последних лет, спрогнозировать исход и оценить ак-тивность ряда заболеваний инфекционной и неинфек-ционной природы позволяет исследование реактив-ности слизистых оболочек, о которой можно судить, в частности, по уровню естественной колонизации эпи-телиоцитов полости рта.
Целью настоящего исследования было сравнение
уровня естественной колонизации буккальных эпите-лиоцитов у пациентов детского возраста с патологи-ческими изменениями ногтевых пластинок грибковой и негрибковой этиологии с аналогичными показателя-ми в группе здоровых детей.
Буккальные эпителиоциты получали от детей в воз-
расте от 10 месяцев до 17 лет. Было выделено 3 груп-пы наблюдения, первую составили 40 здоровых детей, во вторую вошли 13 пациентов с ониходистрофиями, в т
ретью – 15 детей с онихомикозом дрожжевого или
смешанного (Candida + Tr.rubrum) генеза. Пациентам утром натощак производился соскоб с внутренней по-верхности слизистой щёк, клетки трижды отмывали (40g, 5 мин.) забуференным физиологическим раство-ром
(ЗФР , рН 7,2 – 7,4) и готовили взвесь с концент-
рацией 106 кл/мл. Способность буккальных эпителио-цитов к адгезивным реакциям определяли по уровню естественной колонизации. Для оценки естественной колонизации из суспензии эпителиоцитов готовили мазки,
фиксировали метанолом и окрашивали 0,25 %
раствором азура А («Sigma», США). Индекс естест-венной колонизации оценивали по числу бактериаль-ных клеток в пересчёте на один эпителиоцит (просмат-ривали 100 клеток) и выражали в условных единицах (усл.ед).
Было отмечено, что показатели естественной ко-
лонизации у пациентов первой группы колебались в пределах от 6,42 до 110,06 усл.ед; у детей с дист-ро
фическими изменениями ногтевых пластинок – от
40,5 до 213,22 усл.е; у пациентов с дрожжевым они-хо
микозом – от 3,5 до 171,4 усл.ед. Среднее значение
у здоровых детей составило 40,58 ± 3,96, в то время ка
к у детей с ониходистрофиями – 106,85 ± 14,77усл.
ед, а у пациентов с кандидозными онихиями – 71,72
± 13,36 усл.ед. Было проведено условное разделение уровней естественной колонизации на низкий (менее 10
), средний (10–50) и высокий (более 50). это позво-
лило установить, что у здоровых детей, в основном, отмечался средний уровень естественной колониза-ци
и (у 65 %), реже имел место высокий уровень (у
27,5 %), у 7,5 % – низкий. В то же время у детей с
онихопатиями, в основном, имелись высокие цифры ур
овня колонизации (у 76,9 % больных с ониходист-
ро
фиями и у 66,7 % больных с онихомикозами), сред-
ни
й уровень отмечался у 23,1 % пациентов второй
группы и у 20 % – третьей, низкий – у 13,3 % детей
с онихомикозом. У детей с дистрофическими измене-ниями ногтевых пластинок ни в одном случае не был зарегистрирован низкий показатель уровня естест-венной колонизации.
Таким образом, высокие уровни показателей ес-
тественной колонизации у больных в сравнении с контрольной группой могут быть обусловлены нару-шением местного иммунитета у детей с патологией ногтевых пластинок как грибковой, так и негрибковой этиологии. Можно предположить, что снижение мест-ного иммунитета, в свою очередь, является одним из патогенетических механизмов нарушения формирова-ния ногтевых пластинок и увеличивает риск зараже-ния пациента детского возраста грибковой инфекцией ногтей.АДГЕЗИВНЫЕ РЕАКЦИИ БУККАЛЬНЫХ эПИТЕЛИОЦИТОВ
У ПАЦИЕНТОВ ДЕТСКОГО ВОЗР АСТА С ОНИХОПАТИЯМИ
Заславская М.И.1, Мишина Ю.В.2, Лукова О.А.1
1 Нижегородская государственная медицинская академия,
Нижний Новгород
2 ФГУ «Нижегородский НИквИ Росздрава»,
Нижний Новгородый гель) или содержащий его базирон АС . Перед началом лечения рекомендуется сделать местную марганцовую ванну. Для снятия воспаления можно первое время дополнительно использовать любую кортикостероидную мазь, особенно комбинированно-го
действия (пимафукорт). В дальнейшем – соблюде-
ние гигиены и обычные кремы или гели для ухода за кожей.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 430
Актуальность: В настоящее время дерматомице-
ты получили достаточно широкое распространение не
только в Российской Федерации, но и во все мире. Их патогенность в организме человека нередко проявляет-ся в виде микогенной аллергии, микотоксикозов и т.д. Свойства патогенности грибов чаще проявляются при снижении защитной реакции макроорганизма. Грибко-вые поражения являются одним из наиболее распростра-ненных в структуре заболеваний кожи и продолжают оставаться актуальной медико-социальной проблемой.
Материал: На основании данных форм государс-
твенного статистического наблюдения за 2003–2006гг. нами проведен ретроспективный анализ заболеваемос-ти трихофитией в общей популяции и среди детского населения в различных Федеральных округах России.
Результаты: Анализ заболеваемости дерматомице-
тами за изучаемый период показал, что в 2003 году лишь на территориях Центрального федерального ок-руга (ЦФО) и Северо-Западного федерального округа (СЗФО) показатели общей заболеваемости трихофити-ей не превысили среднероссийский уровень.
В 2006 году в целом по Российской Федерации вы-
явление трихофитии относительно 2003 года умень-шилось
на 13,7 %, в ЦФО – на 18,0 %, в СЗФО – на
45,5 %, в том числе у детей – на 14,1 % – 10,4 % и 51,6 % соответственно. При этом ЦФО и СЗФО как в общей популяции, так и у детей, показатели заболе-ваемости трихофитией не превысили среднестатис-тические показатели по России. В 2006 году преиму-щественное число случаев трихофитии по ЦФО было выявлено
в г.Москве (36,9 %), Воронежской (15,4 %),
Костромской (8,7 %) и Тамбовской (8,1 %) областях, в том числе у детей – в г.Москве (40,0 %), Воронежской (20,0 %) и Тамбовской (10,5 %) областях. Среди терри-торий СЗФО в 2006 году преимущественное число слу-чаев заболеваемости трихофитией в общей популяции было выяв
лено в республике Коми (30,0 %), Калинин-
градской
области (23,3 %), г.С.-Петербурге (16,7 %), у
детей – по 26,7 % в Республике Коми и Калининградс-кой об
ласти, 13,3 % – Вологодской области.
В Южном федеральном округе (ЮФО) в 2006 году
выявление
трихофитии выросло на 13,9 %, в том числе
у детского населения – на 7,9 %. Преимущественная часть больных трихофитией в ЮФО в 2006 году была выявлена
в республиках Дагестан (46,2 %), Чеченской
(12,4 %), Карачаево-Черкессия (12,3) и Кабардино-Балкария (11,0 %.), в том числе у детей – в республи-ках
Дагестан (45,5 %), Чеченской (16,3 %), Карачаево-
Черкессия (12,2 %), Кабардино-Балкария (8,5 %).
На территориях Приволжского ФО выявление
больных трихофитией в общей популяции населения за из
учаемый период уменьшилось на 32,1 %, у де-
тей
– на 30,5 %. Преимущественная часть больных
трихофитией в 2006 году в общей популяции и среди детского населения выявлялась в республиках Баш-кор
тостан (52,5 % и 59,5 соответственно) и Татарстан
(18,4 % и 12,3 % соответственно).
В Уральском ФО за изучаемый период выявление
трих
офитии уменьшилось на 39,4 % как в общей попу-
ляции, так и у детского населения. При этом преиму-щественная часть больных, как в общей популяции, так
и среди детского населения (61,5 % и 55,3 % соот-
ветственно) была выявлена в Челябинской области.
В 2006 году в Сибирском ФО показатели общей забо-
леваемости трихофитией, в том числе у детского населе-ния, уменьшились в 1,4 раза. Преимущественная часть больных в 2006 году в общей популяции Сибирского ФО
была выявлена в Республике Тыва (16,9 %), Томской
области (16,3 %), Алтайском крае и Новосибирской об-
ла
сти (по 14,5 %), среди детского населения – в Респуб-
ли
ке Тыва (22,9 %), Омской (15,1 %), и Новосибирской
(12,9 %) областях, Республике Алтай (12,5 %).
В Дальневосточном ФО выявление больных трихо-
фитией в общей популяции за изучаемый период умень-ши
лось на 40,5 %, у детей – на 33,0 %. Наибольшее чис-
ло больных трихофитией в 2006 году было выявлено в Ре
спублике Саха (70,0 %) и Амурской области (19,1 %),
в том числе у детей – 60,7 % и 23,0 % соответственно.
При этом в Республике Саха показатели заболеваемости в
общей популяции уменьшились в 1,9 раза, у детей – в
1,7 раза, в Амурской области – в общей популяции по-
казатель заболеваемости сохраняется на прежнем уров-не
, в то время как у детей – вырос в 1,3 раза.
Результаты проведенного анализа свидетельству-
ют о неблагополучной эпидемиологической ситуации по дерматомицетам в ряде субъектов территорий Рос-сийской Федерации и высокой заболеваемости три-хофитией детского населения Южного Федерального округа. Для улучшения эпидемиологической ситуации необходимо:
• проведение санитарно-просветительской работы среди населения;
• координация работы всех заинтересованных служб и ведомств по профилактической работе.эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ СИТУ АЦИЯ
ПО ТРИХО
ФИТИИ В РОССИИ В 2003 – 2006 ГГ.
Иванова М.А.1 , Бендриковская И.А.2, Мельниченко Н.Е.3, Николаев А.И.4
1 ФГУ «ЦНИИоИз Росздрава»,
Москва
2 Гкв Д,
Ухта
3 ГоУ вПо АГМА,
Благовещенск
4 Ркв Д,
Ижевск
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 431
Воспаление наружного слухового прохода – (otitis
extema) – это воспаление кожи ушного канала, заболе-
вание полиэтиологичное, требующее очень вниматель-ного диагностического и терапевтического подхода.
Существует много внешних факторов (инородные
тела, паразитарные болезни, травмы и т.д.), систем-ных болезней (эндокринопатии, аутоиммунные за-болевания), предрасполагающих к возникновению отита.
Большую роль в развитии отита играет бактери-
альная и грибковая флора. Присутствие бактерий и микофлоры в ушном канале не обязательно означает, что эти микроорганизмы играют причинную роль в развитии отита. В ушах многих клинически здоровых животных присутствует их незначительное количест-во. Однако эти микроорганизмы способны очень быс-тро размножаться при поражениях слухового прохода либо при изменении микроклимата в ухе. Хотя, они могут и не быть главным этиологическим фактором, тем не менее, они включаются в последующий болез-нетворный процесс, осложняя течение болезни.
Объектом изучения явился состав микофлоры в
наружном ушном проходе. Исследования были прове-дены на базе ветеринарной лаборатории «Пастер» г. Москвы.
За период работы (январь-декабрь 2007г) было про-
ведено микологических посевов из ушной раковины от 234 собак и 50 кошек, принадлежащих частным вла-дельцам. Животные относятся к разным возрастным группам, породам и полу. Был выделен грибковый агент в 117 случаях у собак (50%) и в 10 случаях у кошек (20%).Результаты идентификации
malassezia candida cladospo-
rium aspergillus
Собаки
95% 3% 1% 1%
Кошки 60% 10% – 30%
Как видно по данным таблицы основным предста-
вителем служат дрожжевые грибы р. Malassezia, ко-торые являются обитателем нормальной сапрофитной микобиоты кожного покрова теплокровных животных и человека. Однако при нарушении симбиоза между микро – и макроорганизмом, что обусловлено наруше-нием иммунологических защитных механизмов носи-теля, грибы рода malassezia
могут вызвать патологии
кожного покрова.
Отиты с участием дрожжевых грибов candida
встречаются гораздо реже. По нашим данным гриб-ковый агент candida
появляется после длительного
и безуспешного применения антибиотиков в качестве лечения отитов. Так в наших исследованиях candida
были выделены в ассоциации с malassezia spp. после
длительного лечения малассезиозного отита.
Плесневые грибы, по-видимому, не несут такой
этиологической значимости в развитии патологичес-кого процесса как дрожжи. Грибы asper
gillus были
выделены в случае от кота с клещевым отитом (клещи рода оtodectes,
безусловно, играли доминантную роль
в возникновении отита) и от собаки с малассезиозным отитом. В данных случаях плесневые грибы были выделены в осенне-летний период. Плесневые грибы являются в основном обитателями почвы, поэтому в зимний период редко выделяются с кожных покровах у домашних животных в условиях города.РОЛЬ МИКОФЛОРЫ В Р АЗВИТИИ НАРУЖНОГО ОТИТА
Ивченко О.В., Литвинов А.М.
вс
ероссийский НИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. к оваленко,
Москва
ЛЕЧЕНИЕ ОТРУБЕВИДНОГО ЛИШАЯ КРЕМОМ
«эКЗОДЕРИЛ» (НАФТИФИНА ГИДРОХЛОРИД)
Исламов В.Г., Киянская Е.С.
Гл
авный военный клинический госпиталь внутренних войск Мв Д РФ,
г.Балашиха, Мо
Отрубевидный лишай является поверхностным
хронически рецидивирующим заболеванием кожи, ха-рактеризуется поражением только рогового слоя эпи-дермиса (кератомикоз) и отсутствием воспалительных явлений.
ЦЕЛЬ : изучение терапевтической эффективнос-
ти и переносимости курса лечения противогрибковым препаратом из класса аллиламинов, оказывающего вы-ра
женное фунгистатическое и фунгицидное действие –
кремом экзодерил больных с отрубевидным лишаем.
МЕТОДЫ : Под нашим наблюдением находилось
27 больных обоего пола (18 мужчин и 9 женщин) в воз-расте от 15 до 43 лет, с различными сроками давности заболевания ( от 1 месяца до 6 лет) . Диагностика вклю-чала данные осмотра, анамнез, положительную про-бу Бальзера, микроскопическое исследование. Всем больным
назначали крем «экзодерил» на пораженные
участки утром и вечером. Курс лечения составил 4 не-дели. Динамику симптомов заболевания оценивали на 14 и 28 сутки терапии.
РЕЗУЛЬТАТЫ : При оценке эффективности крема
«э
кзодерил» были получены следующие результаты.
Через 2 недели применения крема значительное улуч-шение наблюдали у 12 больных, клиническое выздо-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 432
ровление – у 13, отсутствие клинического улучше-
ния
– у 2 больных. Через 4 недели применения крема
«экзодерил» клиническое выздоровление у всех боль-ных
– 27 человек. Данные микроспории у всех пациен-
тов отрицательные.ВЫВОДЫ : На основании собственных наблюде-
ний считаем, что высокая эффективность препарата, его хорошая переносимость, отсутствие побочных яв-лений, а также доступность по цене и удобство в при-менении, позв
оляют широко использовать крем «экзо-
дерил» при лечении отрубевидного лишая.
К ВОПРОСУ ОБ АТИПИЧНЫХ ФОРМАХ МИКРОСПОРИИ
Касымов О.И., Максудова М.Н., Нуралиев М.Д., Бобиев А.З.
кафе
дра дерматовенерологии ТИППМк,
Душанбе, Таджикистан
За последние два десятилетия многие исследова-
тели отмечают патоморфоз в клинической картине зооантропонозной микроспории. Атипичные формы заболевания по данным разных авторов встречаются от 15,5 до 43,8
% случаев.
Целью нашей работы явилось изучение частоты ати-
пичных форм микроспории по данным микологическо-го отделения Республиканского клинического центра кожных и венерических болезней за последние 5 лет.
Под нашим наблюдением находилось 218 больных.
Лиц ж
енского пола было 89 человек, мужского – 129.
Возраст больных был от 1 года до 17 лет. В возрасте до 3-х лет
было 13 человек, от 4 до 6 лет – 57, от 7 до 10
лет – 98, от 11 до 14 лет – 30, от 15 лет и старше 20.
Из 218 больных у 96 наблюдалось поражение только
во
лосистой части головы, у 19 – только гладкой кожи, у
103 – сочетанное поражение волосистой части головы и гладкой кожи. У всех больных диагноз микроспории был подтвержден микроскопически, люминесцентным методом под лампой Вуда и культурально.
Из 218 больных с различными формами микроспо-
ри
и у 126 (57,8 %) были типичные формы микоза, у 92
(42,2 %) – атипичные. Среди 96 больных с поражением
только волосистой части головы атипичные формы за-бо
левания наблюдались у 32 (33,3 %), среди 19 больных
с поражением только гладкой кожи – у 7 (36,8 %). Среди
103 больных с сочетанным поражением волосистой час-ти
головы и гладкой кожи у 53 (51,5 %) отмечены ати-
пи
чные варианты, из них у 33 (32 %) – на волосистой
части головы, у 20 (19,4 %) – на гладкой коже. Следо-
вательно, среди 199 больных с поражением волосистой ча
сти головы атипичные формы выявлены у 65 (32,7 %),
среди 122-с поражением гладкой кожи – у 27 (22,1 %).
На волосистой части головы наблюдались следу-
ющие атипичные варианты зооантропонозной микро-спории: у
27 (13,6 % от всех случаев поражения воло-
систой части головы) больных трихофитоидная форма, у12 (6
%) – себорейная, у 4 (2 %) экссудативная, у13
(6,5 %) – инфильтративная, у 8 (4 %) – инфильтратив-но-нагноительная.
На г
ладкой коже отмечены: у 9 (7,4 % от всех слу-
чаев поражения гладкой кожи) больных- абортивная, у 12 (9,8
%) – эритематозно-отечная, у 3 (2,5 %) – папу-
лезно-скв
амозная,у 3 (2,5 %) – глубокая.
Таким образом, наши исследования показывают,
что в последние годы в Таджикистане значительно чаще стали отмечаться атипичные формы зооантропо-нозной микроспории.
ОРУНГАЛ В ТЕР АПИИ ОНИХОМИКОЗОВ
Касымов О. И., Хайдаралиева Ш.З., Кулмадов А.Ш.
кафе
дра дерматовенерологии ТИППМк,
Душанбе, Таджикистан
Наиболее эффективной при любой форме онихоми-
козов считается системная терапия препаратами перо-орального использования. Целью наших исследований явилось изучение эффективности препарата орунгал (итраконазол) при лечении больных онихомикозами.
Под наблюдением находились 18 больных в возрас-
те
от 23 до 68 лет (м – 15, ж – 3). Длительность болезни
колебалась от нескольких месяцев до 30 и более лет. У 15
(83,3 %) больных поражены были только ногти стоп,
у 1 (5,5 %) – ногти стоп и кистей, у 2 (11,1 %) – только
ногти кистей. На стопах у 2 больных отмечен онихо-ми
коз только ногтей больших пальцев, у 3 – первого и пятого, 4–5 ногтей были поражены у 2 больных, 6–7 – у
3, 8–10 – у 5. У больных с онихомикозом кистей были
инфицированы по 7 ногтей. У больного с онихомикозом стоп и кистей были поражены все 20 ногтей.
Дистально-латеральной подногтевой формой они-
хо
микоза страдали 8 (44,4 %) больных, поверхност-
ной б
елой – 1 (5,5 %), проксимально-подногтевой – 2
(11,1 %), тотальной дистрофической – 7 (38,9 %). У всех больных онихомикоз протекал на фоне микоза кожи стоп, стоп и кистей, кистей.
Диагноз онихомикоза у всех больных был под-
твержден результатами микроскопического и культу-
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 433
рального исследования. У 10 (55,5 %) больных причи-
ной был
Tr. rubrum, у 2 (11,1 %) – Tr. interdigitale, у 6
(33,3 %) – роста не было.
Орунгал назначался в виде пульсовой терапии (по
200 мг 2 раза в день в течение 1 недели). При пора-жении ногтевых пластинок на кистях проводилось 2 курс
а терапии, при поражении ногтей стоп – 3 курса.
Промежуток между курсами составил 3 недели. Боль-ным с наличием сопутствующей патологии проводи-лась корригирующая терапия.
Лечение все больные перенесли хорошо, побочных
явлений и осложнений не было ни в одном случае. Наблюдения показали высокую эффективность орун-гала при лечении онихомикозов. Клиническое и мико-логическое выздоровление микоза на гладкой коже у больных наступило в среднем через 3 недели от начала лечения. Через 3 месяца приема орунгала клиническое и этиологическое излечение наступило у всех больных с пораж
ением ногтей кистей и у 9 (56,3 %) из 16 с по-
ражением
ногтей стоп, через 5 месяцев – у 13 (87,5 %),
через 7 месяцев – у 15 (93,8 %). Резистентность к те-рапии
отмечена у 1 (6,2 %) больного с тотально-дис-
трофической формой онихомикоза стоп, страдавшего сахарным диабетом.
эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ТРИХОМИКОЗОВ В ГРУЗИИ
Китуашвили Т.А.1, 2, Твалиашвили Г.М.1, Бучукури И.В.1,
Иноземцева М.Н.1, Гурчумалидзе Х.Т.1, Галдава Г.Г.1, 2
1 НИИ дерматологии и венерологии Грузии,
Тбилиси, Грузия
2 Тбилиский Государственный университет, медицинский факультет,
Тбилиси, Грузия
Tinea capitis (TC) – грибковая инфекция, вызван-
ная дерматофитами. Заболевания часто регистриру-ется среди детей и характеризуется микроэпидеми-ями. Вызывающая их флора различается не только на уровне стран, но на уровне регионов одной и той же страны, хотя соотношение возбудителей при этом нестабильно.
В результате целенаправленно проведённых мероп-
риятий в нашей стране в 70–ые годы прошлого века практический был ликвидирован фавус. В результате этого на сегодняшний день в Грузии ТС представле-на трихофитией и микроспорией, при этом количество зарегистрированных случаев трихофитии всегда пре-обладало над микроспорией.
Целью исследования явилось изучение эпидемио-
логии Тinea capitis в Грузии в 1997–2007 гг.
Материа
лы и методы исследования: эпидемиоло-
гический анализ заболевания проводился по принятой в Грузии учетной форме №089–1/2 (извещение о диа-гнозе, поставленном впервые).Результаты: В 2000–2007 гг в Грузии зарегистри-
ро
вано 692 случаев ТС, из них – 619 трихофитии и 73
микроспории. Из клинических форм трихофитии преоб-ладала трихофития зоофильной этиологии (возбудитель T.mentagrophytes var.gypseum), переносчиком которой яв-лялись телёнок и кролик. В некоторых случаях трихофи-тия носила семейный характер. Заболевание в основном отмечалось среди детей, не посещавших детские сады и шк
олу, 95 % больных были сельскими жителями. эпиде-
миологический анализ микроспории показал, что заболе-вание носило зооантропонозный характер и его возбуди-телем являлся M.canis. В основном болели дети от 3 до 7 лет, живущие в городе. Чаще болели девочки. У станов-лена сезонность заболевания, когда пик заболеваемости приходился на лето и продолжался до октября-ноября.
Выводы: Таким образом, возбудителем Тinea capitis
в Грузии, в основном, является T.mentagrophytes var.gypseum и M.canis. Зооантропонозная трихофития преимущественно регистрируется в сёлах, а микро-спория
– среди детей, живущих в городах.
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАР АТА «эКЗИФИН»
В ЛЕЧЕНИИ ОНИХОМИКОЗА СТОП
Киянская Е.С.
Главный военный клинический госпиталь
внутренних войск М
вД РФ,
Балашиха
Цель: Изучение терапевтической эффективности
и переносимости курса лечения противогрибковым препаратом из класса аллиламинов, оказывающего выраженное фунгистатическое и фунгицидное дейс-твие
– экзифин, у больных с онихомикозом стоп.Методы: под наблюдением находилось 12 больных
с онихомикозом стоп в возрасте с 27 до 67 лет без со-путствующей патологии. Среди них 7 мужчин и 5 жен-щин. У 1 больной были поражены ногтевые пластинки и г
ладкая кожа стоп, 2 2 – ногтевые пластинки кистей
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 434
и стоп, без сопутствующей патологии. Давность забо-
левания от 1 года до 15 лет. Контроль за состоянием пациентов осуществлялся ежемесячно.
Результаты: У 1 больной с поражением гладкой
кожи и ногтевых пластинок на 6 неделе отмечалось полное исчезновение кожных проявлений. Через 3 месяца приема экзифина у 2 больных, имевших они-хомикоз кистей и стоп, отмечалось полное отрастание зд
оровых ногтей на кистях и на 50 % на стопах. Че-
рез 6,5 месяцев ногтевые пластинки стоп очистились полностью, т.е. у всех больных отмечалось клиничес-кое выздоровление, подтвержденное лабораторно. Во время приема препарата побочных явлений не наблю-далось. Выписка из амбулаторной карты больного Л., 47 лет с диагнозом онихомикоз стоп и правой кисти. Болен онихомикозом 15 лет. При осмотре обнаружено то
тальное поражение I, v ногтевых пластинок стоп и
ногтя I пальца правой кисти, гипертрофическая фор-ма. Больной получал экзифин по 250 мг 1 раз в день. Через 3 месяца отмечалось полное отрастание здо-рового ногтя на кисти. Через 6,5 месяцев отмечается полное клиническое и микологическое выздоровле-ние.
Выводы: на основании собственных наблюдений,
считаю, что высокая эффективность препарата, его хо-рошая переносимость, отсутствие побочных явлений, а также доступность по цене и удобство в применении позволяют широко использовать экзифин при лечении онихомикозов амбулаторно в дерматологических ле-чебных учреждениях.
КЛИНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ЗАБОЛЕВАНИЙ
НОГТЕЙ У ПАЦИЕНТОВ ДЕТСКОГО ВОЗР АСТА
Клеменова И.А., Мишина Ю.В., Шебашова Н.В.
ФГУ «Нижегоро
дский НИквИ Росздрава»,
Нижний Новгород
Согласно статистическим данным и результатам
собственных наблюдений, процентная доля заболева-ний ногтевых пластинок в структуре детской дермато-логической патологии продолжает ежегодно увеличи-ваться.
Под нашим наблюдением находилось 187 детей и
подростков с патологией ногтей (107 девочек и 80 маль-чиков), средний возраст которых составил 7,98±0,35 лет. Продолжительность заболевания варьировала от 1 недели до 14 лет (в сре
днем – 1 год 5 месяцев).
На основании данных осмотра, микроскопического
и к
ультурального исследования 101 пациенту (54 %)
был установлен диагноз онихомикоза, 86 (46 %) – они-ходистрофии.
Одной из задач проводимого исследования было вы-
явление клинических особенностей ониходистрофий (д
алее в тексте – ОД ) и онихомикозов (далее в тексте –
ОМ) у пациентов детского возраста. Для выполнения поставленной задачи изучались локализация, характер и тип изменения ногтевых пластинок у детей.
Изучение локализации поражения при заболевани-
ях ногтей инфекционной и неинфекционной природы позволило установить, что при ОД в патологический процесс чаще вовлекались ногтевые пластинки кистей (у 59,3
% больных), реже – стоп (у 29,1 %), одновре-
менное поражение ногтей стоп и кистей имело место у 11,6
% детей. У детей с ОМ, напротив, в 51,5 % случаев
отмечалось поражение ногтей стоп, в 41,6 % – кистей, у 6,9 % больных имело место одновременное пораже-ние ногтей верхних и нижних конечностей. У детей с дистрофическими изменениями ногтевых пластинок примерно с одинаковой частотой выявлялись единич-ные и
множественные изменения ногтей (у 48,8 % и
51,2 % соответственно). У пациентов с ОМ преоблада-ли единичные онихии (у 62,4
%).При изучении клинических вариантов изменения
ногтевых пластинок нами отмечено, что наиболее часто встречающимся типом ОД у детей были попе-речные
борозды (выявлены у 27,9 %), далее в порядке
убывания регистрировались трахионихии и гипертро-фические
изменения (каждый из видов – у 24,4 %),
пунктиформная дистрофия (у 23,3 %), онихошизис (у 18,6 %). На долю остальных типов ОД приходилось от 2,3 % до 9,3 %. Следует особо подчеркнуть, что у 23 детей одновременно имелось 2 вида ОД, у 6 – одновре-менно 3 вида. Имелись различия в клинике ОД у детей разных возрастных групп, а также у пациентов мужс-кого и женского пола (так у девочек чаще выявлялись поперечные борозды, онихошизис и пунктиформная дистрофия,
у мальчиков – трахионихии и гипертрофи-
ческие изменения).
При изучении клинических особенностей пора-
жения ногтевых пластинок грибковой природы было отмечено, что характер изменения ногтей зависит от вида гриба-возбудителя. Так для кандидозов ногтей была характерна локализация, в основном, на ногтях рук
(у 63 % пациентов); клинически поражение прояв-
лялось чаще нарушением формы ногтевой пластинки (у 59,3
%), реже – развитием подногтевого гиперкера-
тоза
(у 37 %) или появлением пятнистых включений
в ногтях (у 30 %); изменение ногтевых пластинок в 61,1 % случаев сочеталось с поражением околоногте-вых валиков и экземой. Для дерматомицет-обусловлен-ных ОМ более характерным было поражение ногтей стоп
(у 80 %), клинически проявляющееся развитием
подногтевого гиперкератоза (у 83,3 %) и незначитель-ными кожными изменениями (менее, чем у половины пациентов). Клинические проявления плесневых и микст-ОМ практически не отличались от таковых у взрослых.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 435
На основании полученных данных можно сделать
выводы о том, что имеются различия в клинических
проявлениях дистрофических и грибковых изменений ногтевых пластинок у детей. Клинические особеннос-ти ониходистрофий зависят от пола и возраста ребён-ка, наличия или отсутствия у него сопутствующей патологии внутренних органов, в то время как клини-ческие особенности онихомикозов в первую очередь связаны с видо
м гриба-возбудителя.
ВОПРОСЫ ЛЕЧЕНИЯ Р АСПРОСТР АНЕННЫХ ФОРМ ОТРУБЕВИДНОГО ЛИШАЯ
Коган А.И., Носоченко Г.Ф., Сазонова Н.И.
кожно-венеро
логический диспансер №28,
Москва
Отрубевидный или разноцветный лишай (pityriasis
versicolor) относится к группе кератомикозов. Кожа при этом недуге покрывается множественными пят-нами окр
угло – овальной формы различной величины,
порой сливающимися в очаги крупных размеров.
Для пятен характерно мелкоотрубевидное шелу-
шение и широкий спектр цвета, от серовато-желтого до коричневато-бурого оттенка. Пятна располагаются главным образом на коже шеи, туловища и плеч.
Субъективные ощущения часто отсутствуют, однако
распространенность пятен вызывает у больных чувство косметического дискомфорта и подавленности.
В последние годы заболевание встречается доста-
точно часто, особенно среди лиц молодого возраста, примерно в равной степени как среди мужчин так и среди женщин.
Под нашим наблюдением находилось 102 больных
в возрасте от 16 до 45 лет, среди них 86 больных были в возрасте от 16 до 33 лет.
У всех наших больных заболевание характеризова-
лось распространенностью процесса, и упорством его лечения.
Распространенность очагов может развиваться
медленно
или возникать очень быстро. этому способс-
твует в первую очередь выраженная потливость у этих пациентов, как одно из проявлений общего вегетонев-роза, нередко наблюдающегося в этом возрасте.
Наблюдая этих больных, мы должны констатиро-
вать, что в большинстве случаев распространенных и рецидивирующих форм данного заболевания исполь-зование для их лечения исключительно местных ме-тодов терапии оказывается, как правило, неэффектив-ным.
Мы применяли в лечении сочетанную общую и
местную терапию. Все лечение состояло из двух эта-пов. Первый
– основной курс терапии включал прием
препарата Орунгал по 100мг в капсулах 2 раза в день утром и вечером после еды в течении 4–5 дней под-ряд.
Одновременно назначалась местная терапия про-
тивогрибковыми мазями (чаще ламизиловая мазь) все пять дней подряд. Обычно на шестой день курс закан-чивался гигиенической ванной или душем со сменой нательного и постельного белья.
Примерно через месяц больные получали второй,
как бы закрепляющий, курс лечения. Орунгал назна-чался при этом так же, но в течении двух дней с одно-временным пятидневным местным мазевым лечением (жела
тельно со сменой мази – экзодерил, кандид). Так
как у 75 % наших больных были выявлены симптомы вегетоневроза (выраженная потливость, тахикардия, раздражительность, бледность кожных покровов и др.), им назначалось индивидуально соответствующее сопутствующее лечение.
Большинство больных были проконсультированы у
невропатолога и эндокринолога.
Среди наших больных ранее уже лечились 28 че-
ловек. После нашего лечения мы наблюдали в течении года 66 больных, у всех наступило полное излечение, рецидивов не наблюдалось.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИНДУКТОРОВ ИНТЕРФЕРОНА В ТЕР АПИИ
РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО УРОГЕНИТАЛЬНОГО КАНДИДОЗА
Корепанов А.Р., Якубович А.И., Чуприн А.Е.
ГоУ в
По Медицинский университет,
Иркутск
Изучение различных сторон патогенеза и разра-
ботка эффективных методов терапии урогениталь-ного кандидоза (УК) не теряют своей актуальности в связи с достаточно высоким процентом рециди-вов. С целью усовершенствования лечения рециди-вирующего УК и для повышения иммунобиологи-ческой резистентности в комплексной терапии был использован индуктор интерферона Циклоферон. Препарат вызывает образование провоспалитель-ных и противовоспалительных цитокинов, что поз-воляет рассматривать его как биорегулятор цитоки-новой сети.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 436
Циклоферон проявляет широкий спектр антивирус-
ной, антипротозойной, антибактериальной активности,
оказывает мягкое иммуностимулирующее действие. Хорошо сочетается с традиционными терапевтичес-кими средствами, при применении в рекомендованных дозировках побочные эффекты крайне редки
Все больные (42 человека) получали противоканди-
дозный препарат флуконазол в стандартных дозировках.
В лечении одной группы больных (23 человека) до-
полнительно использовался Циклоферон внутримы-шечно по 2 мл (250 мг) один раз в сутки на 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 19-й день курса лечения.
эф
фективность комплексной терапии с использо-
ванием Циклоферона оказалась выше по сравнению с обычной про
тивогрибковой терапией (96 и 88 % соот-
ветственно).
Для лечения рецидивирующего УК помимо тради-
ционных схем лечения, обоснованно применение ин-терферонотерапии.
ГРИБЫ РОДА CANDIDA – МАРКЕРЫ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ ПСОРИАЗА
Корнишева В.Г., Чилина Г.А., Свиридова К.В.
кафе
дра дерматовенерологии, НИИ Медицинской микологии им. П.Н. кашкина
ГоУ ДПо
СПбМАПо Росздрав,
Санкт-Петербург
Обследовано 46 больных псориазом, имевших по-
ражение ногтевых пластин кистей и стоп . Первую группу составили 16 пациентов в возрасте от 23 до 64 лет, имевших распространенную бляшечную форму вульгарного псориаза, с длительностью заболевания от
2 до 10 лет. У 10 (63 %) пациентов имелась наперс-
тковидная
ониходисторофия. У 6 (54 %) отмечался
подногтевой гиперкератоз на пальцах стоп и кистей.
Вторую группу составили 30 больных в возрасте от
32 до 76 лет, имевших экссудативную форму вульгар-ного псориаза и псориатический артрит, с длительнос-тью заболевания от 7 до 20 лет. Системную терапию (глюкокортикостероиды, метотрексат) получали 16 пациентов. Наперстковидная ониходисторофия выяв-лена у
23 (77 %) больных, подногтевой гиперкератоз
и онихолизис у 25 (83 %) пациентов. У 4(13 %) было тотальное поражение всех ногтевых пластин с явлени-ями паронихий и онихомадезиса.
Микологическое исследование ногтевых пластин
проводилось методами прямой микроскопии соскобов ногтевых пластин и посева на среду Сабуро, далее при выделении дрожжеподобных грибов рода Candida для идентификации возбудителя ставили тест на ростко-вые трубки, при отрицательном результате была при-менена тест-система <<Auxacolor2>>. Для выявления очагов кандиданосительства проводилось исследо-вание биосубстратов ( тампон из зева, посев кала) на грибы рода Candida.
Ре
зультаты. У 31 (67 %) из 46 обследованных был
получен рост грибов при посеве ногтевых чешуек пальцев стоп и кистей. В первой группе грибы выяв-лены у
7(43 %) больных, у 6(37 %) из которых получен
рост монокультуры T.rubrum. У одного больного выяв-лен рост C.albicans.
Во в
торой группе грибы обнаружены у 24 (80 %)
пациентов, у 5(17 %) из которых получен рост T.rubrum в ассоциации с дрожжеподобными грибами. Рост дрожжеподобных грибов получен у 24 больных, страдавших экссудативным псориазом и псориати-ческим артритом. Дрожжевая биота была представ-лена грибами рода Candida (C.albicans, C.parapsilosis, C.guilliermondii), как монокультурой, а также в ассоци-ациях друг с другом.
При микологического исследования кала и тампо-
на из
зева у 2 (12 %) пациентов первой группы и у 14
(46 %) больных второй группы получен рост грибов рода Candida.
Таким образом, с нарастанием тяжести течения
псориатического процесса возрастала частота выяв-ления поражения грибами рода Candida как ногтевых пластин, так и желудочно-кишечного тракта.
МИКОЗЫ КОЖИ НА ПРОМЫШЛЕННЫХ ПРЕДПРИЯТИЯХ
СЕВЕРНОГО РЕГИОНА КАЗАХСТАНА
Котлярова Т.В., Батпенова Г.Р., Малгаздарова К.С.
казах
ская Государственная Медицинская Академия,
Астана, казахстан.
Грибковые поражения кожи по данным многочис-
ле
нных исследований составляют от 37 % до 42 % в
общей структуре заболеваемости дерматозами и в пос-леднее время имеют тенденцию к неуклонному росту (Кутасевич Я.Ф., Зимина Т.В.). Основной рост грибко-вых заболеваний наблюдается у лиц различных профес-сиональных групп, работников угольного производства, металлургической промышленности, где в условиях
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 437
современного технологического процесса на работа-
ющих воздействует широкий спектр неблагоприятных профессиональных факторов различной природы.
С целью изучения распространенности грибко-
вых заболеваний на горно-обогатительном комбинате г. Хромтау было обследовано 2298 работников. Среди 27 %
выявленных дерматозов различной этиологии,
71 % составляют больные с грибковой заболеваниями.
В структуре грибковой патологии ведущее место
занимаю
т онихомикозы – 76 %, на втором месте мико-
зы стоп
– 14 %, отрубевидный лишай – 10 %.
Частая регистрация онихомикозов наблюдалась в воз-
ра
стной группе 40–49 лет – 53 %, со стажем работы 10 и
более лет, с длительным течением заболевания. Следует об
ратить внимание, что в 39 % случаев выявлено пора-
же
ние 1 или 2 ногтевых пластин стоп, в 33 % поражение
2–5 ногтей, 5–10 в 16 %, тотальное поражение 12 %. В
основном онихомикоз протекал в дистально-латеральной фо
рме – 92 %, по гипертрофическому типу – 72 %.Микозы стоп чаще регистрировался в возрастной
группе
от 40 до 49 лет – 34 %, в группе от 20 до 29
лет – 20 %, со стажем работы на данном предприятии в 57 % случаев 10 и более лет. Клинически наблюда-лось преобладание сквамозно-гиперкератотической формы
микоза стоп у 48 %, чаще в возрастной группе
от 30 до 39 лет, со стажем работы более 5 лет. Интер-триг
енозная и дисгидротическая форма в 31 % и 21
соответственно
Третье место по распространенности занимает от-
рубевидный лишай, который чаще регистрировался в возрастной
группе от 20 до 29 лет – 38 %, со стажем
работы от 1 до 3 лет в 62 %.
Широкая распространенность грибковых заболева-
ний связана с профессиональными факторами данно-го производства: пониженной температурой, высокой влажностью, длительным ношением тесной и плохо вентилируемой обуви, несоблюдением правил личной и общественной гигиены.
КЛИНИЧЕСКИЕ Р АЗНОВИДНОСТИ МИКРОСПОРИИ,
ВЫЗВАННОЙ microSP orum caniS
Кравец Е.В.
Донецкий государственный медицинский университет им. Горького,
Донецк, Украина
Городской кожно-венерологический диспансер №1,
Донецк, Украина
Актуальность проблемы грибковых заболеваний
в Донецкой области обусловлена высоким уровнем и неуклонным ростом дерматофитий среди населения. Особое место в структуре дерматофитий занимает микроспория. В 2006 году показатель заболеваемос-ти микозами и, в частности, микроспорией в Укра-ин
е составил 36,6, а в Донецкой области – 57,1 на
100 тыс. населения (один из высоких показателей по
стране). За последние 10 лет самый низкий уровень за
болеваемости в области отмечен в 1996 году – 28,9
на 100 тыс. населения. Определенную трудность в диагностике микроспории волосистой части головы представляют участившиеся случаи атипичных форм микозов.
Материалы и методы. В работе приведены резуль-
таты изучения особенностей клиники микроспории у детей, госпитализированных в городской клинический кожно-венерологический диспансер №1 г.Донецка в 2005–2007 году.
Результаты и обсуждение. За последние 3 года в
дерматологическом отделении ГККВД №1 пролече-но бо
льных детей – 531, с диагнозом микроспория.
Клинический диагноз у всех пациентов верифициро-ван культуральным (получена культура M.canis), лю-минесцентным методами. Микроспория волосистой части г
оловы диагностирована в 434 случаях (82 %),
волосистой части головы и гладкой кожи – 54 слу-чая (10
%), распространенные поражения гладкой
кожи – 43 (8 %). Поражения волосистой части головы преимущественно носили распространенный харак-тер (2 и более очагов поражения). Атипичные формы микроспории волосистой части головы наблюдались у 69 больных с единичными очагами поражения: три-хофитоидная, экссудативная, инфильтративно-нагно-ительная, с
еборейная – что составило 16 % от числа
всех больных микроспорией волосистой части головы. Среди больных микроспорией гладкой кожи 43 чел. (8
%) наблюдались диссеминированные формы с вы-
раженной гиперемией, отечностью в очагах пораже-ния. Локализация очагов поражения на коже бровей отме
чалась у 6 пациентов, в области ресниц и век – у
13. У женщины 23 лет отмечалась микроспория в об-ласти лобка с поражением половых губ в виде инфиль-тративной формы микроспории.
Выводы. У больных с микроспорией в настоящее
время наблюдаются как типичные, так и атипичные клинические формы микоза. Нередко несвоевремен-ная диагностика и неадекватная терапии атипичных форм микроспории приводит к изменению клиничес-кой симптоматики, диссеминации высыпаний и хрони-зации процесса.
Требуется изучить влияние эндо- и экзогенных
факторов на рост атипичных форм микроспории за последние годы.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 438
rubrum чаще всего вызывает микозы стоп и кистей,
а также онихомикозы. Крайне редко поражения наблю-
даются на волосистой части головы. Рукавишникова В.М. наблюдала рубромикоз волосистой части головы у больной с дисфункцией половых и щитовидной же-лез (В.М.Рукавшникова, 2003).
За последние 10 лет (1997–2007 гг.) в стационарном
отделении №4 городского клинического кожно-венеро-логического диспансера №1 г.Донецка мы наблюдали единичный случай рубромикоза волосистой части го-ловы и гладкой кожи шеи у женщины 53 лет. Давность заболевания около 6 месяцев, причину заболевания па-циентка ни с чем не связывала. Из перенесенных забо-леваний отмечался поликистоз яичников, гипотериоз, хронический гастрит с повышенной секреторной фун-кцией, постменопаузальный период. При объективном осмотре было отмечено локализацию патологического очага на коже задней поверхности шеи с переходом в затылочную область волосистой части головы. Очаг по-ражения овальной формы с четкими границами в виде ограниченного прерывистого валика, представленного инфильтратом фолликулярных папул. Волосы в очаге обломаны на разных уровнях (от 0,2 до 4 мм.), кожа в центре очага застойно гиперемированного цвета, шелу-шение необильное в виде прозрачных чешуек, инфиль-трация в очаге выражена незначительно. Под лампой Вуда специфического свечения не отмечено. Диагноз был подтвержден получением культуры Trychophyton rubrum с волос, кожи волосистой части головы и шеи. Культура гриба была верифицирована на среде Сабуро, рост культуры отмечен на 14-е сутки. Амбулаторно име-ла место диагностическая ошибка: дерматолог в поли-клинике, выставив диагноз хронической себорейной эк-земы, рекомендовал кортикостероидные мази, которые больная применяла в течение 6 месяцев.
Выводы: поражение волосистой части головы явля-
ется атипичным для проявления рубромикоза, поэтому окончательный диагноз необходимо выставлять толь-ко после культурального исследования на питательных средах.
РУБРОМИКОЗ Г ЛАДКОЙ КОЖИ И ВОЛОСИСТОЙ ЧАСТИ ГОЛОВЫ
Кравец Е.В.
Донецкий государственный медицинский университет им. Горького,
Донецк,Украина
Городской кожно-венерологический диспансер №1 г.Донецка,
Донецк,Украина
При изучении биологических свойств микроор-
ганизмов одним из важнейших показателей является оценка вирулентности в опытах на эксперименталь-ных животных путем их заражения взвесью клеток с заранее определенным содержанием в единице объема. эт
о же требование является основным при изучении
антифунгального действия лекарственных препаратов, дезинфицирующих средств, а также при оценке качес-тва питательных средств.
Используемые в настоящее время стандартизован-
ные методы подразделяются на культуральные, которые заключаются в подсчете количества выросших колоний после высева тестируемой взвеси на питательные сре-ды (Скворцов В.В. и др., 1955) и методы, связанные с применением красителей
– карболового фуксина Циля
и метиленового синего для окрашивания нежизнеспо-собных бактерий и грибов по методу Ожешки (Синай Г.Я. и др., 1941). Для выявления живых и мертвых кле-ток используются также флуорохромные красители в различных сочетаниях (Израйлет Л.И., Мадер В.Л., 1976; Яновский К.А. с соавт., 1979; Богданов К.М. с соавт. 1979). Все названные методы имеют недостат-ки, препятствующие их применению в повседневной практической и научной работе.
Ранее (Лесовой В.С., Гришина М.А. 2007) мы опи-
сали ускоренный метод определения количества живых клеток во взвесях дрожжеподобных грибов с помощью Янус-грюна и метиленового синего. Как показали даль-нейшие опыты, перечень красителей пригодных для на-званной цели может быть дополнен малахитовым зеле-ным, Кумасси голубым и краской Май- Грюнвальда.
0,5
% раствор малахитового зеленого готовят на
дистиллированной воде. Его смешивают в равной про-порции со взвесью гриба, в которой нужно определить жизнеспособность клеток и их концентрацию в едини-це объема. Инкубируют при комнатной температуре 30 мин, периодически встряхивая смесь. Качественную оценку результатов по содержанию живых и мертвых клеток гриба проводят путем просмотра препаратов, приготовленных по типу «раздавленной капли» под микроскопом с увеличением х 400. Фон препарата и мертвые клетки гриба имеют цвет красителя, живые клетки или не окрашиваются, или имеют бледно-зеле-ный цвет. Подсчет живых или нежизнеспособных кле-СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИРОВАНИЯ И ПОДСЧЕТА ЖИВЫХ
И НЕЖИЗНЕСПОСОБНЫХ КЛЕТОК ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ
Лесовой В.С.
ФГУз волгоградский научно-исследовательский противочумный институт,
волгоград
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 439
ток (в зависимости от задачи исследования) проводят в
камере Горяева с последующим пересчетом по форму-ле, используемой при оценке количества лейкоцитов в крови.
При использовании Кумасси голубого методика
аналогична описанной для малахитового зеленого.
Сухую краску Май-Грюнвальда растворяют в дис-
тиллированной
воде до конечной концентрации 0,5 %. Ее смешивают в равной пропорции с тестируемой взвесью клеток дрожжеподобного гриба и оставляют при комнатной температуре на 40 мин., периодичес-ки встряхивая. Предварительную оценку результатов (восприятия окраски живыми и нежизнеспособными клетками) и подсчет тех и других производят по опи-санной выше методике. Мертвые клетки имеют темно-синий цвет
, и живые – бледно-голубой.
СОСТОЯНИЕ эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЙ СИТУ АЦИИ
Р АЗНОЦВЕТНОГО ЛИШАЯ В РЕСПУБЛИКЕ УЗБЕКИСТАН
Махсудов М.Р., Эшбаев Э.Х., Маматкулов У.А.
НИИ Дермато
логии и венерологии Мз РУз,
Ташкент, Узбекистан
В настоящее время как отечественные, так и за-
рубежные исследователи уделяют большое внимание различным аспектам грибковых заболеваний кожи у взрослых. Однако о заболеваемости разноцветным лишаем имеются незначительные сообщения. В этой связи изучение эпидемиологической ситуации разно-цветного лишая в нашей республике остается актуаль-ной проблемой.
Изучена распространенность разноцветного лишая
по данным архивного материала Клиники НИИДиВ МЗ РУЗ за 2004–2006гг.
Анализ данных показал, что за этот период обрати-
лись на обследование и лечение 284 больных. Из них больных
в возрасте от 16 до 30 лет было 172 (60,6 %),
старше 30 лет – 52 (18,3 %) человек и дети составили 60 (21,1 %) лиц. это показывает, что данным заболева-
нием, в большинстве случаев болеют лица в возрасте 16–30 лет.
При изучение распределения больных по професси-
ям было выявлено, что среди обследованных ученики средних
школ составили 74 (26 %) лиц, студенты – 51
(17,9 %), рабочие и служащие – 34 (12,1 %), пенсио-неры
– 8 (2,8 %), дети ясельного возраста – 10 (3,5 %)
и лица временно неработающие – 107 (37,7 %) боль-ных. Следует отметить, что разноцветным лишаем в основном заражаются неработающие лица, это вероят-но связано с тем, что данная группа лиц не соблюдают условия личной гигиены.
Исследование распространенности заболеваемос-
ти разноцветным лишаем в зависимости от сезона года показало, что среди обследованных больных весной болели
78 (27,5 %) лиц, летом – 74 (26 %), осенью – 92
(32,4 %) и зимой – 40 (14,1 %) лиц. это свидетельс-
твует о том, что данное заболевание в основном вы-является весной, летом и осенью, а зимой заражение происходит реже.
На основании анализа архивного материала, где
изучены некоторые стороны эпидемиологии разно-цветного лишая было выявлено, что среди обследо-ванных лиц данным заболеванием в большинстве случаев заражаются люди молодого возраста и вре-менно неработающие. Высокая встречаемость забо-левания приходится с начала весны до окончания осени.
РУБРОФИТИЯ, МАСКИРУЮЩАЯ ОГР АНИЧЕННУЮ ПРЕТИБИАЛЬНУЮ
МИКСЕДЕМУ У БОЛЬНЫХ С ГИПЕРТИРЕОЗОМ
Мельник А.П., Яковлев И.М.
ГУз
окв Д №4,
Магнитогорск
Претибиальная микседема (ПМ) – относительно
редкое заболевание, ограниченная форма которого комбинируется или предшествует гипертиреозу и поч-ти всегда наблюдается у лиц с экзофтальмом. Часто она развивается после струмэктомии или лечения мер-казолилом.
Мы наблюдали развитие ПМ у 2-х больных с ги-
пертиреозом, у которых одновременно присутствовал микоз стоп, обусловленный Tr.rubrum, сквамозно-ги-перкератотическая форма, без поражения ногтевых пластинок. Об
е женщины. Возраст – 36 и 48 лет. Тирео-
токсикоз предшествовал развитию кожного процесса. Диагноз микоза стоп подтверждён микроскопически и культурально. Проводили исследования уровня Т3, Т4, ТТГ, гистологическое обследование, УЗИ щитовидной железы, совместно с эндокринологом.
На фоне отёчности кожи передней и боковой по-
верхностей обеих голеней, развития симметричных подушкообразых уплотнений, кожи в виде «апель-синовой корки», наблюдали эритематозно-сквамоз-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 440
ные очаги, окаймлённые периферическим валиком,
склонные к центробежному росту, слиянию и рас-пространению, с образованием участков поражения розовато-желтовато-коричневого цвета, с инфильтра-цией и лихенификацией кожи. Необычность течения заболевания обусловила то, что длительное время дерматологи расценивали процесс как проявление кожной дерматофитийной аутосенсибилизации (ми-котической экземы), особенно в период обострения, когда появлялись мокнутие, эрозии, корочки серозно-геморрагического характера на фоне акроцианоза и пигментации. Лечение микоза традиционными мето-дами приводило лишь к коротким ремиссиям. Было проведено гистологическое исследование, на осно-вании которого установлен диагноз претибиальной микседемы (наличие очаговых массивных отложений муцина, вокруг которых располагались пролифериру-ющие фибробласты и коллагеновые волокна. Отмеча-лись незначительная мононуклеарная инфильтрация, ра
сширение сосудистых просветов. В эпидермисе –
акантоз и гиперкератоз).
Дополнительное активное лечение тиреотокси-
коза у эндокринолога способствовало клиническому выздоровлению у больной 36-ти лет и значительному клиническому улучшению течения кожного процесса у больной 48-ми лет.
Цель нашего сообщения в том, чтобы привлечь
внимание дерматологов и микологов к этим заболе-ваниям, которые могут существовать параллельно, во взаимосвязи и взаимообусловленности.
ЛЕЧЕНИЕ МИКОЗОВ КОЖИ МЕТОДОМ
АППЛИКАЦИОННОЙ ФОТОХИМИОТЕР АПИИ
Мошнин М.В., Яковлев А.Б.
НИИ медицинской биофизики МИФИ,
Москва
Современные методы лечения микозов кожи эф-
фективны и удобны, но имеют ряд недостатков: сис-темные препараты довольно дороги, наружное лече-ние занимает весьма продолжительное время (от 12 дней при микроспории до 30 при микозе гладкой кожи другой этиологии), нередки явления токсичности и ин-дивидуальной непереносимости.
Возможность использования для лечения поверх-
ностных микозов кожи и ее придатков фурокумаринов путем смазывания очага с последующим облучением его ультрафиолетовым светом спектра А (УФА), с дли-ной волны 320–400 нм, была показана в работе С.Н. Ахтямова, М.В. Мошнина и соавт. (1985).
В сентябре 2007 года на 2-м Всероссийском Кон-
грессе дерматовенерологов мы сообщали о выражен-ном фунгицидном эффекте, который был получен in vitro при воздействии УФА-излучения в присутствии фурокумаринов на суспензии культур возбудителей дерматомикозов.
Целью настоящей работы явилось получение кли-
нически значимого эффекта от применения апплика-ционной фо
тохимиотерапии с 0,3 % раствором амми-
фурина у больных поверхностным микозом гладкой кожи.
Для лечения были отобраны двое больных микро-
спорией гладкой кожи груди. У одного пациента име-лись четыре очага размером до 2 см с четкими грани-цами, шелушением на поверхности, периферическим ва
ликом, у другого – 32 таких очага, преимущественно
на коже лица, шеи, груди.
Диагноз микроспории гладкой кожи был подтверж-
ден обнаружением гриба с помощью КОН-теста, све-чение в лучах лампы Вуда отсутствовало.
Было получено информированное согласие на про-
ведение данных процедур.
Метод исследования: Для лечения микроспории
гладкой кожи использована следующая методика: 0,3
% раствор аммифурина наносился на кожу в облас-
ти очагов поражения за 10 минут до процедуры УФА-облучения. Время облучения рассчитано с учетом интенсивности света на поверхности тела. Апплика-ционную фотохимиотерапию начинали с дозы облуче-ния 0,3
Дж\смІ. Проведено 5 с еансов (суммарная доза
облучения 1,5 Дж\смІ). Процедуры проводились через день.
Результаты. После лечения проводился клинико-
лабораторный контроль в соответствии с инструкция-ми Минздрава РФ: троекратное исследование на гри-бы с
очагов с интервалом 5 дней, затем – один раз в две
недели в течение двух месяцев. Ни в одном из контро-лей грибы не были обнаружены. Клинически на месте бывших очагов отмечалась гиперпигментация, которая разрешилась к концу второго месяца наблюдения.
Выводы. Комбинированное воздействие УФА-света
и 0,3
% раствора аммифурина обладает выраженным
антимикотическим действием in vivo.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 441
Цель исследования: оценить эффективность назна-
чения системной терапии бинафином (Шрея лайф Са-
енсиз ) при микозах стоп, вызванных дерматофитами.
Метод: обследовано 38 больных (23 женщины и 15
мужчин) в возрасте от 19 до 54 лет. Длительность за-болевания составляла от 2 до 10 месяцев. Клинические проявления локализовались в межпальцевых складках стоп, коже пальцев стоп и подошв. Сквамозная форма за
болевания была у 19 больных, интертригинозная – у
12, дисгидротическая – у 17 больных. Лабораторная диа-
гностика базировалась на микроскопическом и культу-ральном исследовании. У 28 больных возбудителем за-бо
левания был Trichophyton rubrum, у 10 – Trichophyton
mentagrophyles var.interdigitale. Бинафин (активное ве-щество тербинафина гидрохлорид) назначался по 1 таб-летке (250 мг) 1 раз в день. Продолжительность курса составила 4 недели. Наряду с системной терапией про-во
дилась наружная терапия мазью бинафин 1 %, дезин-фекция обуви. Оценку терапевтической эффективности комплексного лечения бинафином проводили методом клинического наблюдения, микроскопического и бакте-риологического контроля исследованиями.
Результаты: после лечения у всех обследуемых
больных
исчезли высыпания. этиологическое изле-
чение наступило у 34 больных. У 4 больных терапия была продлена до 6 недель. Побочных эффектов не отмечено. Отдаленные результаты клинического и микологического исследования, проведенного через 3 месяца, 6 месяцев не выявили рецидивов заболевания, поражения ногтевых пластинок.
Выводы: назначение системной терапии бинафи-
ном при микозах стоп, вызванных дерматофитами, необходимо для ускорения разрешения клинических проявлений, микологической санации, предотвра-щения рецидивов заболевания, поражения ногтевых пластинок.СИСТЕМНАЯ ТЕР АПИЯ БИНАФИНОМ В ЛЕЧЕНИИ МИКОЗОВ СТОП
Новикова Л.А., Бахметьева Т.М.
вороне
жская государственная медицинская академия им. Н.Н.Бурденко,
воронеж
ВАГИНАЛЬНЫЙ ГЕЛЬ «КАНДИД» И ВАГИНАЛЬНЫЕ ТАБЛЕТКИ
«КАНДИД» В ЛЕЧЕНИИ ВУ ЛЬВОВАГИНАЛЬНОГО КАНДИДОЗА
Новикова Л.А., Бахметьева Т.М.
вороне
жская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко,
воронеж
Цель: дать клиническую и лабораторную оценку
результатов терапевтического воздействия вагиналь-ных форм препарата « Кандид » (гель, таблетки) при лечении вульвовагинального кандидоза
Методы: 32 женщинам в возрасте 18–45 лет, страда-
ющих вульвовагинальным кандидозом (у 10-впервые возникший, острый, у 22-хронический рецидивирую-щий), проводилось лечение вагинальными препарата-ми «К
андид»: гель 5 г, таблетки В6 100 мг, таблетки
500 мг. Активным веществом является клотримазол, антимикотик группы имидазолов, обладающий ши-роким спектром фунгицидного и антибактериально-го действия в отношении: дрожжевых грибов (рода Candida, Torulopsis glabrata, рода Rhodotoruis). При ин-травагинальном применении абсорбция клотримазола сост
авляет 3–10 % введенной дозы. Высокие концент-
рации в вагинальном секрете и низкие концентрации в крови сохраняются в течение 48–72 часов. Проти-вопоказаниями к применению были: менструальный период, первый триместр беременности. При впервые возникшем вульвовагинальном кандидозе назначались вагинальные таблетки с аппликатором «Кандид» 500 мг однократно, при хроническом рецидивирующем кандидозе
– вагинальные таблетки «Кандид» В6 100
мг в течение 6 дней. У 6 пациенток после основного приема проводилась профилактика рецидивов ваги-нальными таблетками «Кандид» 500 мг. по 1 таблет-ке
ежедневно в течение 3 – 6 месяцев. Гелевая форма
препарата обеспечивает: полное растворение препара-та в вагинальном секрете, предотвращает вытекание препарата наружу. Быстрая растворимость таблетки с пенообразованием обеспечивает равномерное распре-деление препарата по слизистой.
Результаты: под влиянием лечения исчезли клини-
ческие
симптомы, зуд, жжение у всех больных . эти-
ологическое излечение (отрицательные результаты микроскопического и культурального анализов) насту-пило у
28 больных ( 87,5 %). 4 пациенткам с сохраняю-
щимися положительными результатами на дрожжевые грибы назначена терапия вагинальными таблетками «Кандид» 500 мг по 1 таблетке ежедневно (кроме менструальных дней) в течение 6 месяцев. Возникших осложнений терапии не наблюдали.
Выводы: вагинальный гель, таблетки »Кандид»
В6 1
00 мг и «Кандид» 500 мг обладают выраженным
противокандидозным эффектом, приводят к этиологи-ческому излечению заболевания. Полученные результа-ты позволяют рекомендовать применение вагинального ге
ля «Кандид», вагинальных таблеток Кандид В6 100
мг для лечения хронического рецидивирующего канди-доза, вагинальных таблеток Кандид 500 мг для лечения острого кандидоза и профилактики заболевания.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 442
Малассезиозы – это группа заболеваний кожи,
обусловленных жизнедеятельностью условно-пато-
генных грибов рода malassezia . В настоящее время
известны 7 видов грибов рода malassezia , наиболее
распространенными из которых считаются m. furfur,
относящийся к Pityrosporum orbiculare, а также m. glo-
bosa и m. restricta, относящиеся к Pityrosporum ovale .
Известно, что М. furfur вызывает отрубевидный ли-
шай, а m. restricta способствует возникновению пити-риаза (перхоти). В свою очередь, m.
globosa (наряду с
Propionibacterium acnes и Staphylococcus epidermidis)
приводит к развитию себорейного дерматита.
Себорейный
дерматит (СД) – это хроническое вос-
палительное заболевание себорейных областей кожи, характеризующееся четко очерченными эритематоз-ными очагами, покрытыми жирными желтоватыми чешуйками. Заболеваемость СД населения планеты достигает
3–5 %, что составляет до 300 млн. чело-
век. Следует отметить, что этот дерматоз весьма час-то встречается среди ВИЧ-инфицированных лиц (до 83
% случаев). Диагностируется преимущественно
у мужчин, при этом превалирует среди подростков и молодых людей. Учитывая тот факт, что обсеменен-ность кожи здоровых людей грибами рода Malassezia превышает 60
%, можно утверждать, что в зоне рис-
ка заболеваемости себорейным дерматитом находится более половины населения планеты. Наконец, следует отметить, что персистенция грибов рода Malassezia на коже человека при отсутствии полноценной терапии возможна на протяжении всей жизни.
Кроме микотической этиологии следует отметить
некоторые другие триггерные факторы СД. В их чис-ле: кишечный дисбиоз, хеликобактериоз, кишечные ферментопатии, наличие очагов хронической инфек-ции, эндокринный дисбаланс, нейроциркуляторная (вегетососудистая) дистония, высокая стрессогенная обстановка, неблагоприятный экологический фон, патологии иммунной системы (как первичные, так и вторичные), генетическая предрасположенность и ятрогения.С точки зрения гистопатологии кожи этиопатогенез
СД, помимо микобактериальной колонизации сально-волосяных фолликулов, обусловлен повышением про-дукции и изменением химического состава кожного сала, нарушением пролиферации и дифференцировки кератиноцитов, а также реакцией гиперчувствитель-ности на контаминацию кожных покровов грибами рода m alassezia
.
Фактически, СД является неспецифическим марке-
ром неблагополучия таких систем, как пищеварительная, эндокринная, иммунная и нервная, что нередко требует полноценного участия в обследовании и лечении кон-сультантов-интернистов соответствующего профиля.
Исходя из этого, терапевтический алгоритм СД
представляется следующим образом. Системная те-рапия включает применение антимикотиков (флуко-назол, итраконазол), нормобиотиков (нормофлорины, биовестин-лакто и др.), ферментных препаратов (фес-тал, карсил и др.), антигистаминных средств (дезлора-тадин, фексофенадин и др.), а также антибиотиков и ингибиторов протонной помпы (при наличии H. pylori и вторичной инфекции). Местная терапия должна об-ладать противовоспалительным, фунгицидным и фун-гистатическим, себо- и кераторегулирующим, а также противозудным действием.
В наибольшей степени требованиям к местной
терапии отвечают препараты с индексом DS от лабо-ратории Bioderma. В их числе шампунь Node DS+, обладающий противогрибковым, себо- и кераторегу-лирующим, противовоспалительным и противозудным действиями; гель Sensibio DS, оказывающий противо-грибковое, смягчающее и очищающее действие и крем Sensibio DS, характеризующийся противогрибковым, смягчающим и противовоспалительным эффектами.
Исходя из многообразия представленных положи-
тельных эффектов, данная линейка препаратов может использоваться как с целью лечения, так и для предуп-реждения рецидивов себорейного дерматита, а также повышения качества жизни лиц, предрасположенных к болезням сальных желез.СЕБОРЕЙНЫЙ ДЕРМАТИТ – КАК МАЛАССЕЗИОЗ
Новоселов А.В., Богадельникова А.Е., Новоселов В.С.
Московская медицинская академия имени И. М. Сеченова,
Москва
ВЛИЯНИЕ МИКОТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ НА ПСОРИАТИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС
Павлова О.В.
кафедра дерматовенерологии Г оУ вПо РГМУ Росздрава,
Москва
Известно, что наличие псориаза создает благопри-
ятные условия для развития микотической инфекции. Присоединение микоза, в свою очередь, оказывает влияние на течение и клинические проявления псори-атического процесса.Под наблюдением находился 51 больной псориа-
зом, осложненным микотической инфекцией (29 муж-чин, 22 женщины в возрасте от 18 до 55 лет). Давность заболевания псориазом составила от 2 до 16 лет, в среднем 10,5±1,5 г.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 443
Микоз стоп с онихомикозом выявлен у 12 больных
(23,5 %), сочетанное поражение стоп и кистей отме-
чено у
9 больных (17,6 %), у 20 больных выявлено
поражение кожных складок (39,2 %), у 6 больных от-мечено
поражение гладкой кожи (11,8 %), у 4 больных
выявлено сочетанное поражение кожных складок и стоп
(7,8 %). Возбудителями микоза у больных псо-
риазо
м были Тr. rubrum (62,7 %), С. albicans (15,7 %),
penicillium Spp., Aspergillus Spp. (3,9 %); сочетание возбудителей выявлено в 17,6 % случаев.
Для оценки влияния микоза на течение и клиничес-
кие проявления псориаза использовались: 1) катамнес-тические данные о течении болезни у наблюдаемых пациентов до присоединения микоза; 2) данные о тече-нии псориаза в группе лиц без микоза, сопоставимой по основным характеристикам с изучаемой группой. Установлено, что частота обострений псориатическо-го процесса при наличии сопутствующей микотичес-кой инфекции повышается в 1,5–2,5 раз. Кроме того, течение псориаза у таких больных становится более упорным; отмечается тенденция к распространению и утяжелению процесса (псориатическая эритродер-мия отмечена у 6 пациентов). 11 больных обратились в связи с ухудшением состояния на фоне поддержива-ющей терапии кортикостероидными мазями, которые ранее позволяли больным самостоятельно купиро-вать обострение; у 9 больных поводом для обращения оказалась резистентность к традиционной терапии псориаза
– эти данные объясняются тем, что приме-
нение средств, оказывающих супрессивное действие на иммунную систему, повышает вероятность присо-единения грибковой инфекции, которая, в свою оче-редь, утяжеляет течение псориаза. У 32 больных с наиболее тяжелыми проявлениями псориаза отмечена поливалентная сенсибилизация к антигенам грибов. В клинической картине у данных больных преобла-дали островоспалительные изменения с тенденцией к экссудации и выраженный зуд; в иммунном статусе отмечено повышение общего IgE и специфических ан-тител к грибам, а также повышение функциональной активности цитокинов Th2-типа (ИЛ-10, ИЛ-4). Из 32 больных с наличием микогенной сенсибилизации у 9 при консультации эндокринолога отмечены признаки нарушения функций желез внутренней секреции (ги-пофиз, щитовидная железа, надпочечники). У больных без микогенной сенсибилизации уровень общего IgE оставался в пределах нормы, а анализ цитокинового профиля свидетельствовал о преобладании Th1-реак-ций (повышение уровней ФНОб, ИЛ-1).
Таким образом, присоединение микотической ин-
фекции утяжеляет течение псориаза, а в случае разви-тия микогенной сенсибилизации способствует иммун-ным нарушениям со сдвигом в сторону Th2-реакций и развитию эндокринопатии.
КЛИНИКО-эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ
МИКРОСПОРИИ В Г.МИНСКЕ В 2003–2007 ГОДАХ
Панкратов В.Г.1, Панкратов О.В.2, Рабчинская О.М.1, Новиченко Д.Д.3
1 Белорусский государственный медицинский университет,
Минск
2 Белорусская медицинская академия последипломного образования,
Минск
3 Уз Городской клинический кожно-венерологический диспансер,
Минск
Микроспория является распространенным инфек-
ционным дерматомикозом, поражающим кожу и её придатки у человека, а также кожу и шерсть живот-ных. Теоретически возбудителями микроспории могут быть антропофильные, зоофильные и геофильные гри-бы рода микроспорум. Опыт работы микологических лабораторий Беларуси показывает, что в настоящее время у больных микроспорией волосистой части го-ловы и гладкой кожи высевается только M. lanosum (M. canis). Так, в микологической лаборатории Минского городского клинического кожно-венерологическо-го диспансера в 2006–2007 годах при посеве пеньков волос и чешуек с очагов поражения микроспории на среду Сабуро было получено 923 культуры M. lanosum при обследовании 771 больного микроспорией (в том числе у всех больных при поступлении). Мы согласны с мнением В.М. Рукавишниковой (2001), что пушис-тый микроспорум стал своеобразным грибом-космо-политом, практически единственным возбудителем зоофильной микроспории на евроазиатском континен-те.
После 3 лет (2003–2005 гг.) относительной стаби-
лизации заболеваемости микроспорией в г. Минске на сравнительно высоком уровне (около 31 сл./100 000 населения), отмечается её существенное снижение в 2006–2007 годах (до 21,3 сл./100 000 населения). Мы сравнили частоту регистрации случаев микроспории в различные месяцы года. В период с 2003 г. по 2007 г. амплитуды месячных колебаний заболеваемости мик-роспорией были весьма схожи, поэтому мы сочли воз-можным суммировать по месяцам эти результаты за 5 лет.
Наименьшая заболеваемость микроспорией в г.
Минске в последние 5 лет регистрировалась в марте-июле, а в августе-сентябре наблюдался выраженный рост регистрации случаев микроспории с последующим постепенным снижением этого показателя с октября по февраль. Наблюдающаяся сезонность эпидемического
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 444
процесса обусловлена сезонностью эпизоотии микро-
спории среди кошек (основного источника заражения), а также сезонной миграцией населения, когда в августе-сентябре дети возвращаются в город и осматриваются родителями и медработниками при поступлении их в школы и детские сады. Источники заражения больных ми
кроспорией выявлялись в 98,0–99,5 % случаев. Ис-
то
чником заражения были кошки – у 91,5 % заболев-
ши
х, собаки – у 3,7 %, хомячки и крысы – у 0,1 %, дру-
ги
е больные микроспорией – у 4,7 %. В 0,5–2 % случаев
источник заражения установить не удалось.Поражение только волосистой части головы было у
26,9–35,6
% больных, сочетанное поражение волосис-
той
части головы и гладкой кожи – у 18,0–28,4 %, мно-
гоо
чаговое поражение гладкой кожи – у 44,3–53,1 %.
Инфильтративно-нагноительная форма микроспории, выявлялась
у 0,9–2,6 %, чаще у взрослых и подрост-
ков. Дети до 14 лет среди заболевших составляли от 89 до
93 %, в последние 3 года отмечается повышение
удельного веса подростков (15–18 лет) до 4–5,6 % и взрослых до 5–7 %. Имели место семейные очаги с по-ражением микроспорией всех членов семьи.
ОПЫТ ЛЕЧЕНИЯ МИКРОСПОРИИ ПРЕПАР АТАМИ ТЕРБИНАФИНА
Панкратов В.Г.1 , Панкратов О.В.2, Рабчинская О.М.1, Римко Е.Г.3, Страпко Е.В.3, Олецкая Н.Э.3
1 Белорусский государственный медицинский университет,
Минск
2 Белорусская медицинская академия последипломного образования,
Минск
3 Уз «Городской клинический кожно-венерологический диспансер,
Минск
Под наблюдением находилось 100 больных микро-
спорией в возрасте от 2 лет до 66 лет (56 муж. и 44 жен.).
Детей до 4 лет было 15, 5–7 лет – 28, 8–14 лет –
45, 15–18 лет – 5, старше 18 лет – 7. Микроспория во-лосистой части головы диагностирована у 28, гладкой ко
жи – у 52, сочетанное поражение волосистой части
головы и гладкой кожи – у 20. Патологический процесс на коже волосистой части головы был локализован в 1 о
чаге у 54,2 %, в 2 очагах – у 29,1 %, в 3 – у 6,3 %,
в 5 и более очагах – у 10,4 % больных. Преобладала теменная и затылочная локализация очагов (89,3 %). Патологический процесс на гладкой коже носил в ос-новном распространенный характер, количество оча-гов колебалось от 2 до 36, причем у 47 больных имело место одновременное поражение пушковых волос в очагах. До 3 очагов поражения гладкой кожи выявлено у 23,0
% больных, 4–5 очагов – у 13,5 %, 6–10 очагов –
у 13,5 %, 11–20 очагов – у 23,0 %, более 20 очагов – у 27,0 % наблюдавшихся пациентов.
Системная терапия проводилась следующими пре-
паратами тербинафина: 6 больных получали ламизил, 66
– ламитер, 18 – экзифин, 10 – бинафин. Одновре-
менно проводилась общепринятая наружная терапия и бритьё головы 1–2 раза в неделю. 66 детей до 14 лет начинали лечение по классической схеме. При этом дети с массой тела до 20 кг получали ежедневно 62,5 мг тербинафина,
с массой тела 20–40 кг – 125 мг, более
40 кг – 250 мг. Дети с сочетанным поражением воло-систой части головы и гладкой кожи с одновременным поражением и пушковых волос (14 человек) и дети с наличием от 3 до 8 очагов поражения волосистой части головы (8 детей) сразу начинали лечение по методике Н.Н.Потекаева (с 1,5-кратным увеличением суточной дозы препарата). Системная терапия продолжалась до получения 3 подряд отрицательных анализов, анализы повторялись 1 раз в 5–7 дней.У 3 детей с поражением только волосистой части
головы с числом очагов от 1 до 3, получавших лами-зил по классической методике, первый отрицательный анализ на грибы был получен на 12–17-ый день лече-ния, в
торой отрицательный анализ – на 18–23-ий день,
третий подряд отрицательный анализ – на 25–30-ый день, т.е. пребывание детей в стационаре длилось в среднем 4 недели.
У 3 детей с сочетанным поражением волосистой
части головы и гладкой кожи с поражением пушковых волос лечение ламизилом было начато сразу по мето-дике Н.Н.Потекаева. Первый отрицательный анализ на грибы был
получен на 9–17-ый день лечения, второй –
на 16–23-ий, третий – на 23–28-ой, т.е. санирование детей произошло за 3,5–4 недели.
При лечении экзифином или бинафином 20 детей,
страдавших многоочаговой микроспорией гладкой кожи, первый отрицательный анализ на грибы был по-лучен в
среднем на 14,3+2,1 день, второй – на 19,1+2,4
день, третий – на 24,2+1,9 день. У 8 детей, получав-ших экзифин или бинафин по поводу сочетанной мик-роспории волосистой части головы и гладкой кожи, первый отрицательный анализ на грибы был получен в сре
днем на 20,8+3,1 день, второй – 26,4+3,7 день,
третий – 31,5+3,0 день.
У 32 детей с микроспорией гладкой кожи первый от-
рицательный анализ на грибы на фоне лечения ламите-ро
м был получен в среднем на 16,0+1,9 дня, второй – на
21,3+2,1 дня, третий – на 26,2+2,8 дня. У детей с микро-
спорией волосистой части головы, а также при сочетан-ном поражении волосистой части головы и гладкой кожи при лечении ламитером первый отрицательный анализ на грибы был получен на 7–46-ой день (в среднем на 23
,8+6,1 день), второй – на 14–50-й день (в среднем на
30,6+5,4 день), третий – на 21–56-й день (в среднем на
35,8+5,7 день). У 5 детей этой группы этиологическое
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 445
и клиническое выздоровление протекало замедленно,
а повышение дозы препарата или не проводилось или было предпринято только на 6–8-й неделе лечения. Ле-чение у них было закончено к 60–89 дню, что позволяет говорить и о снижении чувствительности возбудителя у этих пациентов к препаратам тербинафина. Так, у маль-чика Г., 6 лет с массой тела 22 кг лечение ламитером начато было по классической схеме (125 мг в день), на 27-й день был переведен на лечение экзифином в этой же дозе, на 40-й день лечения дозу повысили до 187,5 мг, первый отрицательный анализ был получен только на
51-й день, второй – лишь на 82-й день, третий – 84-й,
а четвертый отрицательный анализ – на 89-ый день, т.е.
на 13-й неделе лечения.
Таким образом, на фоне отсутствия гризеофульви-
на в аптечной сети Беларуси препараты тербинафина могут рекомендоваться для системной терапии боль-ных микроспорией.
МИКОНОРМ В ТЕР АПИИ МИКОЗОВ
Рукавишникова В.М.
ФГУ ЦНИквИ Росмедтехнологий,
Москва
Немецкая фирма «Ратиофарм» предложила 3 ле-
карственные формы основных современных противо-грибковых
средств. это – системные антимикотики-
итраконазол-ратиофарм – генерик орунгала в капсулах по 100 мг., в упаковке по 15 шт. и флуконорм – генерик дифлюкана по 50 мг. в упаковке по 7 табл. и по 150 мг., в упаковке по 1 табл. По существу одними препара-тами только этой фирмы можно практически излечить наиболее распространенные микозы настоящего вре-мени.
Из наружных антимикотиков фирмы следует на-
звать крем миконорм, действующим началом которо-го является тербинафин. Так фирма дополнила число своих
наружных препаратов – кремы – кандибене и
фунгизид, в состав которых входит клотримазол.
Препарат
ов ламизила достаточно много – это ори-
гинальные средства- крем ламизил, ламизил спрей и г
ель – дермгель (Новартис, Швейцария), генери-
ки
– кремы микотербин, фунготербин, термикон-спрей
(АЗТ, Нижфарм, АCN, Россия), крем тербизил (Гедеон Рихтер, Венгрия), крем экзифин (Др.Реддис, Индия). и др. эт
о не случайно, т.к наружные препараты на осно-
ве тербинафина обладают многоплановым, по крайней мере, трояким действием. Прежде всего, их отлича-ет выраженное противогрибковое, в основном фун-гицидное действие в отношении различных грибов, что связано со специфическим, ранним подавлением синтеза эргостерина и массивным накоплением сква-ленов, разрывающих ущербную из-за недостаточнос-ти стеринов грибковую клетку. Имеет место, видимо, нарушение синтеза хитина клеточной стенки грибов (Сергеев Ю.В. и др. 2007).
Препараты тербинафина обладают также противо-
воспалительными и антибактериальными свойствами, что исключает необходимость их комбинации с кор-тикостероидными и антибактериальными составами, могущими активизировать грибковый процесс. Поэто-му при островоспалительных проявлениях микозов, а также при их осложнении бактериальной флорой це-лесообразны именно препараты тербинафина.
Мы заметили. что препараты, сравнительно недав-
но появившиеся на Российском рынке более активны, т.к. видимо, к ним нет привыкания грибов, они более тщательно готовятся и проверяются, их не подделыва-ют. Не менее важна их меньшая стоимость. В течение 2007 мы применили крем миконорм у 11 больных: 5- микроспорией, 1- гипсовидной трихофитией с остро воспалительными явлениями в очагах микоза на коже лица, туловища и конечностей. Очаги микоза были яр-кими, отечными с наличием в них везикуло-пустулез-ных элементов.
Кандидоз кожи наружных половых губ и лобка был
у 1 женщины, дисгидротический микоз кожи свода и межпальцевых складок ст
оп – у 4 больных.
Все больные трихомикозами и кандидозом смазы-
вали очаги микоза кремом «миконорм» 2 раза в день. В ближайшие 3–4 дня переставали беспокоить зуд и жжение. очаги микоза уплощались и бледнели, разре-шались везикуло-пустулезные элементы, уменьшалась краснота, появлялись ливидные оттенки увядания, на-чиналось обильное шелушение. К 10–20 дню лечения очаги микоза разрешались, что подтверждалось отри-цательными данными микроскопических исследова-ний.
Больные дисгидротическим микозом кожи стоп на-
чинали применять миконорм по вскрытии пузырьково-пустулезных элементов после ванночек с марганцово-кислым калием. Крем наносили 2 раза в день, слегка втирая. Довольно быстро прекращались зуд и жжение, кожа становилась мягче и эластичнее, освобождаясь от участков шелушения, эпителизировались трещины и эрозии. Очаги микоза разрешались в ближайшие 2–3 недели. Препарат хорошо впитывался кожей, не пачкал белье, не вызвал раздражения, хорошо переносился.
Наш опыт позволяет считать крем миконорм вы-
соко эффективным и в тоже время щадящим препа-ратом. По эффективности он не уступает оригиналь-ному крему ламизил, который мы применяем с 1998 г у больных различными микозами. Обычно при его использовании от 1 до 2–4 недель разрешаются оча-ги разноцветного лишая, кандидоза и дерматофитий в том числе инфильтративно нагноительных.
У больных сквамозно-кератотическими или ги-
перкератотическими формами микозов кожи стоп
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 446
мы предпочитаем отечественный крем фунготербин.
Включение 0,5 % мочевины в его состав усиливает
гидратацию кожи, обусловливает проникновение тер-бинафина в глубжележащие ткани, кератолитический и отшелушивающий эффект. В зависимости от выра-женности гиперкератоза очаги микоза разрешаются в сроки от 10 дней до 3–4 недель. Исключается необ-ходимость обычного у такого рода больных исполь-зования кератолитиков. Существование различных лекарственных форм тербинафина, изготовленных к тому же разными фирмами позволяет оперативно и адекватно использовать их в каждом конкретном слу-чае и добиваться разрешения очагов микоза в крат-чайшие сроки.
СТРУКТУР А ОНИХОДИСТРОФИЙ, ОШИБОЧНО
Р АССМАТРИВАЕМЫХ КАК ОНИХОМИКОЗ
Рукавишникова В.М.
ФГУ ЦНИквИ Росмедтехнологий,
Москва
Ониходистрофии (О) – неинфекционные измене-
ния те
х или иных параметров ногтей – цвета, формы,
длины и толщины, поверхности, плотности и элас-тичности, соприкосновения с ногтевым ложем. Они встречаются в 3–4 раза чаще онихомикоза, за который их нередко принимают.
Тенденция рассматривать всякий сквамозно-кера-
тотический или дисгидротический процесс на кистях и стопах и изменения ногтей как грибковые с годами не только не уменьшилась, а даже возросла. Так, если в 1997 г немикотические поражения, трактовавшиеся как
микотические были у 33 % больных, то в 2007г – у
51,5 % (у 232 из 450).
На негрибковые поражения кожи и/или слизистых
оболо
чек приходилось 41,8 % (97 из 232), ониходистро-
фии регист
рировались еще чаще- у 135 из 232(58,2 %).
Достаточно часто у 53 из 142 (37 %) их можно было связать с наиболее распространенными дерматозами с нередкой ладонно-подошвенной локализацией
Псориатические О наблюдались чаще всего- у 34
(23,9
%), причем изолированные О были у 16 из них.
Установлению диагноза помогали одновременное и быстрое вовлечение многих ногтей, чаще кистей, как правило, после стрессовых ситуаций, однотипность их изменений, характерная их динамика, обнаружение псориатических элементов на коже, анамнестические указания на их наличие в прошлом у самого больно-го и/или его ближайших родственников. Лаборатор-но исключалась грибковая природа.Самым частым и бросающимся в глаза симптомом псориатических О был дистальный, дистально-боковой, проксимальный или центральный онихолизис. Он нередко сочетался с подногтевым гиперкератозом, «масляными» пятна-ми, подногтевыми геморрагиями. В далеко зашедших случаях ногти или утолщались по типу онихогрифоза или, напротив, истончались, как бы отшелушивались. Наперстковидная истыканность 4-х ногтей кистей, считающаяся патогномоничной для псориаза ногтей, наблюдалась лишь у 1-го мальчика 4-х лет .
эк
зематозные О диагностировали у 11 (7,7 %).
Они сопутствовали хронической рецидивирующей экземе ладоней и подошв. Ногти, чаще кистей стано-вились грязно-серыми, утолщенными. Их поверхность покрывалась поперечными бороздами и валиками, от-ражающими периоды обострений и ремиссий экземы. Кроме того, на их поверхности появлялись неглубо-кие, неправильной формы хаотически разбросанные как бы запыленные ямочки. У 1 б-ой наблюдалась кой-лонихия.
У
7 больных красным плоским лишаем (4,9 %) О
были представлены продольными бороздами -канав-ками и гребешками, создающими картину продольной ребристости ногтей. В гребешках образовывались глу-бокие трещины, карманы. расщелины. Ногти были су-хими, ломкими, легко расслаивались и обламывались, начиная с дистального края, уменьшаясь в дистально-проксимальном направлении. Цвет ногтей варьировал от беловато-перламутрового до желто-коричневого. При тщательном осмотре удавалось обнаружить ха-рактерные для этого дерматоза изменения кожи и/или слизистых оболочек.
У 9- летнего мальчика диагностирован синдром
Ядассона-Левандовского. Ногти кистей и стоп с 3 лет стали утолщенными, плотными, тусклыми приобре-ли бочонкообразную форму. Имелись фолликулярные мелкие папулы на коленях, лейкокератотические папу-лы на слизистой рта, очаги гиперкератоза на подош-вах. Грибы отсутствовали.
Искусственные ногти как причина О были у 11
б-х. Чаще всего после ИК возникал дистальный или дистально-боковой онихолизис, реже ногти изменя-лись по типу онихомадеза. В этих случаях кутикула частично исчезала, а между луночкой и задним вали-ком возникала щель. Ногти даже при краткосрочном использовании ИК, особенно при их покрытии деко-ративным рисунком, становились сухими, тусклыми, ломкими, на их поверхности появлялись расщепления, ямочки, вкрапления зеленоватого или серовато- буро-ватого цвета.
У 1-го больного дистальный онихолизис явился
результатом околонгтевых бородавок, расположенных у дистального края ногтя и переходящих частично на ногтевое ложе.
Вросшие ногти были у 7 б-х (4,9
%).
У 62 больных были недифференцированные О, к
которым мы относили О с невыясненной причиной,
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 447
точнее в возникновении которых было задействовано
много различных факторов. Чаще всего имели место травмы- от грубо произведенного маникюра или они-хотиломании до травмировния ногтей современной обувью с узким носом и высоким каблуком, что при-водило к слабости поперечного свода стопы. Имели значения излишняя выпуклость ногтей, несоответс-твие величины ногтя и ногтевого ложа, а также боль-шая длина 2 и 3 пальцев по сравнению с 1-ым. В этих случаях 1-ый палец становился торчащим, а его ноготь пост
оянно упирался в обувь. это вызывало чаще раз-
витие дистально- бокового онихолизиса или приводи-ло к онихогрифозу. Другие пальцы сгибались в меж-фалангеальных суставах, чтобы поместиться в узком носке. Над ними появлялись околосуставные узлова-тости. Сами ногти утолщались испещрялись продоль-ными бороздами. Иногда ногти изменялись после чис-ток, хирургического или лазерного удаления. Иногда О провоцировались профессиональной деятельностью или домашней работой с использованием клеев, лаков, моющих средств.
Цвет ногтей менялся от белого до буро-коричне-
воого, форма- от истончения до онихогрифоза, повер-хность- от хаотически разбросанных ямочек, попереч-ной или продольной исчерченности до каналиформных изменений, образования выпуклостей, бугристостей, расщепляющихся послойно и прокрашивающихся в грязно-серые тона.
Наряду с физическими травмами на ногтях остав-
ляли след перенесенные заболевания или стрессовые ситуации; деформация позвоночника (значительный сколиоз, остеохондроз) или резкое похудание из-за однообразного и ограниченного питания. Обычно ногти становились сухими, ломкими, расслаивающи-мися, с наличием множественных лейконихий. На их поверхности появлялись ямочки, поперечные линии, возвышающиеся борозды, канавки. Иногда борозды становились выраженными, выпуклыми и даже рас-щеплялись, разделяя ноготь на дистальную и прокси-мальную части с поперечным дефектом между ними.
Обычно недифференцированные О были поли-
морфны, поражали единичные ногти, при этом кожа кистей/стоп оставалась интактной, не обнаруживались признаки дерматоза, с которыми та или иная О была сходна, путем лабораторных исследований исключал-ся онихомикоз.
К ВОПРОСУ О ВУ ЛЬВОВАГИНАЛЬНОМ КАНДИДОЗЕ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ
Саркисян Э.Ю.
ереванский гос. университет, кафедра ботаники,
ереван, Армения
В последние годы вульвовагинальная инфекция
неуклонно растет. Основной причиной вагинальных кандидозов традиционно считается Candida albicans (85–90
%). Частота вагинального кандидоза у больных
вне беременности составляет 10–17 %, у беременных – 30–40 %, перед родами – 44,4 % случаев (Прилепская В.Н. и соавт.,1997 ).
Во время беременности и перед родами высокая
частота вагинального кандидоза обусловлена особен-ностями организма в этот период жизни: изменением иммунитета и гормонального баланса, накоплением гликогена в эпителиальных клетках влагалища и др. Наиболее высокая степень поражения отмечается в последнем триместре и у первородящих.
Вагинальная инфекция особо значима при бере-
менности, поскольку она является частой причиной осложнений у матери, плода и новорожденного. К этим осложнениям относятся: угроза прерывания бе-ременности, самопроизвольные выкидыши, преждев-ременные роды, хориоамнионит, несвоевременное излитие околоплодных вод, рождение детей с малой массой тела и др. По литературным данным, частота кандидемии в группе недоношенных новорожденных сост
авляет от 2,5 % до 9 %. При этом, инвазивный кан-
дидоз является непосредственной причиной смерти в 25–60
% случаев.
Генитальный кандидоз часто сочетается с бактери-
альной условно-патогенной флорой, обладающей фер-ментативной и литической активностью, что создает благоприятные условия для внедрения грибов в ткани (Орджоникидзе Н.В.,2004).
В 2007 году в одном из роддомов Еревана нами
были обследованы 93 беременные женщины в воз-расте от 18 до 37 лет. Материалом для исследования служили соскобы со слизистой влагалища и вульвы. В рез
ультате, у 72 ( 77,42 %) беременных были выделе-
ны дрожжеподобные грибы рода Candida, в основном идентифицированные как C. albicans. Микроскопия ва-гинального мазка, окрашенного по Грамму, позволила выявить сопут
ствующую микрофлору. У 32 % женщин
выявлена кандидозная моноинфекция, у 4,17 % – на-блюдалась ассоциированность с Gardnerella vaginalis, у 63,83
% -ассоциированность с условно-патогенной
бактериальной флорой (Escherichia coli, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Streptococcus spp., klebsiella
spp., pseudomonas aeruginosa), а у 2,78 % – с
трихомонадами ( Trichomonas vaginalis).
Поскольку вагинальный кандидоз, в основном,
имел смешанную этиологию, для лечения беременных использовали «Тержинан», как комбинированный мес-тный препарат (по 1 вагинальной свече 1 раз на ночь в течение 6 дней ) с предварительной обработкой влага-лища раствором боракса. После окончания курса тера-пии у
подавляющего большинства беременных (85 %)
в вагинальных мазках псевдомицелий и дрожжевые клетки не выявлялись. Клинически излечение выража-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 448
лось в исчезновении выделений творожистой массы,
покраснения, зуда, жжения. У остальных наблюдалось уменьшение клинических признаков. Для лечения ва-гинального кандидоза у беременных, нужно назначать те антимикотики, у которых низкая токсичность для плода и матери, высокая эффективность и хорошая пе-реносимость, что характерно, по нашим наблюдениям, для препарата «Тержинан».
РАЗР АБОТКА МЕТОДИКИ ВЫЯВЛЕНИЯ ДНК AspERGILLUs spp . НА
ОСНОВЕ ПЦР С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ
ПРОДУКТОВ АМПЛИФИКАЦИИ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ
Сафонова А.П., Шипулина О.Ю., Куевда Д.А., Шипулин Г.А.
ФГУН «ЦНИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора РФ,
Москва
Аспергиллез – это заболевание, вызываемое гриба-
ми рода asper gillus, чаще всего, a. fumigatus , a. flavus,
a. terreus , a. niger , которое характеризуется поражени-
ем различных органов, преимущественно бронхоле-гочной системы. Заболевания, вызванные различными разновидностями грибов asper
gillus клинически не-
различимы.
Аспергиллы распространены в природе повсемес-
тно. Входными воротами для аспергилл в большинс-тве случаев являются верхние дыхательные пути. Од-нако,
инвазивная форма заболевания – аспергиллез
внутренних органов, встречается преимущественно у лиц с иммунодефицитами, чаще при СПИДе, тяжелой нейтропении, у реципиентов гемопоэтических стволо-вых клет
ок и органов, реже – у больных с опухолями
и у лиц с невыраженной иммуносупрессией. Легочные формы аспергиллеза в основном развиваются у боль-ных бронхоэктатической болезнью, абсцессом легкого, туберкулезом, раком легких, хроническим бронхитом.
Диагноз основывается на клинико-эпидемиоло-
гических данных и результатах рентгенологического исследования, но вследствие неспецифической сим-птоматики обязательно подтверждается выявлением аспергилл прямыми
лабораторными методами – мик-
роскопическим и бактериологическим выявлением грибов в биологических жидкостях и при гистологи-ческом исследовании биоптатов. Однако используе-мые методы имеют ряд существенных недостатков. Бактериологическое исследование занимает 3–5 суток, и аспергиллы
высевают только в 8–34 % случаев ос-
трого аспергиллеза. При микроскопии гифы грибов трудно отличить от других оппортунистических ми-целиальных
патогенов (fusarium spp, Scedosporium
apiospermum). Используют также серологические ме-то
ды – определение антигена аспергиллезного галак-томанна в крови. Чувствительность метода составляет от
57 до 71 %, специфичность – от 89 до 93 %, отри-
цательная
прогностическая ценность теста – 95–98 %,
положительная прогностическая ценность – толь-ко
26–53 %. Недостатком метода является большой
процент ложноположительных реакций, связанных с предварительным приемом антибиотиков и некоторых продуктов питания, содержащих галактоманнан.
Наиболее эффективным, чувствительным и спе-
цифичным методом прямого выявления аспергилл в последние годы считают ПЦР . Однако, обнаружение ДНК asper
gillus spp. в дыхательных путях не всегда может указывать на инвазивный аспергиллез, т.к. этот возбудитель является условно-патогенным и возможно носительство.
С целью совершенствования методов лаборатор-
ной диагностики аспергиллеза нами была разработа-на тест-система для количественного выявления ДНК asper
gillus spp. (a. fumigatus, a. flavus, a. terreus, a.
niger, a. versicolor ) в различном клиническом, аутоп-
сийном материале и объектах внешней среды методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизаци-онно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени». Разработанная тест-система предназначена для подтверждения диагноза «аспергиллез» и для мо-ниторинга объектов внешней среды. Для анализа ана-литической специфичности теста была использована ДНК 30 различных видов грибов, в том числе из рода candida
, в результате чего было доказано отсутствие
ложноположительных результатов. Аналитическая чувствительность теста изучалась с помощью добав-ления разведений культуры аспергилл к различному клиническ
ому и биологическому материалу – цельной
периферической крови, мокроте, БАЛу, смывам из по-лости носа, СМЖ, объектам окружающей среды.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 449
Дерматомикозы, вызванные грибами Trychophyton
rubrum, являются распространенным и зачастую хро-
ническим заболеванием. Наличие хронически текущей микотической инфекции в коже предрасполагает к сен-сибилизации иммунной системы антигенными струк-турами гриба. В этом случае возможно параллельное развитие атопической реакции макроорганизма и фор-мирование аллергодерматозов. Роль микотической инфекции при аллергодерматозах и их взаимосвязи изучены недостаточно. Анализ состояния иммуните-та у этих больных на современном уровне позволит оптимизировать лечение больных с микозами, ос-ложненными аллергодерматозами. Ранее мы показа-ли, что у больных онихомикозом, вызванным грибом Trychophyton rubrum, не наблюдается достоверного снижения основных функций иммунной системы. Так, количество лимфоцитов и нейтрофилов в крови, фа-гоцитарная функция гранулоцитов крови, доля CD3, CD4 и CD8 лимфоцитов находились в пределах нор-мы. Кроме того, показали, что у больных онихомико-зом наблюдается достоверная активация иммунитета по типу
Т-хелперов 2, у 63 % повышена продукция
интерлейкинов (ИЛ) 4, 5, 10, а также повышен уровень активированных Т-клеток, натуральных киллеров и В-клеток. Данные изменения характерны для больных атопическим дерматитом, у которых, кроме изменения в указанных параметрах, также наблюдается повышен-ный уровень общего и аллерген-специфического IgE.
Целью данной работы было определение общего и
аллерген-специфичного IgE и оценка эффективности, безопасности и переносимости румикоза в лечении онихомикоза и онихомикоза, осложненного аллерго-дерматозами. Под нашим наблюдением было 86 больных в воз-
расте о
т 36 до 82 лет (мужчин – 51,женщин- 35) с диа-
гнозом онихомикоз стоп и/или кистей, из них у 48 па-циентов
– онизомикоз, осложненный экзематизацией.
Диагноз устанавливался на основании клинического, микроскопического и культурального исследований. Осложнения в виде дисгидротической экземы наблю-дались
у 30 пациентов, микробной экземы – у 18 боль-
ных с числом рецидивов не менее 4 раз в год. У 32 из 48 пациентов экзематозные проявления развились на фоне микоза стоп, у16 больных экзема предшест-вовала микозу. Определение общего и аллерген-специ-фичного IgE проводили методом иммуно-ферментного анализа. Антигены гриба выделяли из мицелия гриба.
Все
пациенты получали румикоз по схеме пульс –
терапии по 200 мг (2 капсулы) 2 раза в день ежедневно в течение 7 дней. Интервал между курсами составлял 3 недели. Больным было проведено 3 курса пульс-те-рапии. Также проводилось лечение осложнений они-хомикоза (антигистаминная, десенсибилизирующая и наружная противовоспалительная терапия).
В результате проведенного лечения клинико-этио-
ло
гическое излечение отмечено у 77 пациентов (89 %).
Излечение микотической инфекции препаратом руми-коз позволяет поддерживать состояние клинической ре-ми
ссии аллергодерматозов. Показано, что у 52 % боль-
ных онихомикозом наблюдается повышенный уровень об
щего IgE (у больных атопическим дерматитом 68 %),
однако специфичных к антигенам гриба IgG и IgE вы-явлено не было. Таким образом, можно предположить общий генез дерматомикозов, вызванных грибами Trychophyton rubrum, и атопического дерматита, связан-ный с нарушением барьерной функции кожи. АКТИВАЦИЯ Т-ХЕЛПЕРОВ 2 И ПОВЫШЕНИЕ IGE У БОЛЬНЫХ
ОНИХОМИКОЗОМ, ВЫЗВАННОГО ГРИБОМ TRYCHOpHYTON RUbRUM
Свирщевская Е.В.1, Айрапетян Н.Р.2, Матушевская Е.В.2,
Карпенкова С.В.2, Лещенко В.М.3
1 Институт Биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.в.овчинникова РАН,
Москва
2 квкД №29,
Москва
3 Российский Государственный Медицинский Университет, 3 квкД №1,
Москва.
ДИСТАНЦИОННЫЕ МЕТОДЫ ПРЕПОДАВАНИЯ
В МЕДИЦИНСКОЙ МИКОЛОГИИ: ОПЫТ РОССИИ
Сергеев Ю.В., Сергеев А.Ю.
Национальная академия микологии,
Москва
Десятого октября 2007 года состоялся первый в Рос-
сии и мире микологический телемост, организатором которого выступила Национальная академия миколо-гии. В течение 2-х часов под руководством Президента Академии, Заслуженного врача РФ, профессора Серге-ева Юрия Валентиновича была проведена видеоконфе-ренция «Новое в диагностике и лечении микозов». По каналам спутниковой связи был организован телемост между 18 городами, в работе видеоконференции при-няли участие около 800 ученых в области медицины,
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 450
преподавателей медицинских ВУЗов, руководителей
медицинских учреждений, практикующих врачей-де-рматологов. Телемост проводился в рамках програм-мы Национальной академии микологии по борьбе с массовыми и заразными грибковыми заболеваниями в России, впервые представленной микологическому и медицинскому сообществам в рамках Первого Всерос-сийского конгресса по медицинской микологии (Мос-ква, 2003 г.).
Особый интерес аудитории вызвала лекция акаде-
мика Ю.В. Сергеева «Новая клинико-патогенетичес-кая концепция наружной терапии онихомикозов». В прямом эфире участниками видеоконференции было задано более 200 вопросов, из них 23 вопроса были об-суждены в ходе самой видеоконференции. Присталь-ное внимание участников вызвало обсуждение новой системы молекулярно-генетической диагностики грибковых заболеваний кожи, разработанной коллек-тивом российских ученых в рамках программы Наци-ональной академии микологии. Перед собравшимися выступили профессора Сер-
геев А.Ю. (Национальная академия микологии), Буро-ва С.А. (центр глубоких микозов, 83 ГКБ г. Москва), Богуш П.Г. (РГМУ , КВКД №1 г. Москва), Иванов О. Л. (ММА имени И.М. Сеченова), Лещенко В.М. (городс-кой микологический центр, КВКД №1, г. Москва).
В ходе видеоконференции была успешно апроби-
рована специальная система Интернет-опроса для телемостов, разработанная российской IT-компанией «Себрос».
В ходе видеоконференции, учитывая значитель-
ный интерес практикующих врачей дерматологов и микологов к обсуждаемой теме, было принято реше-ние о создании в Интернете постоянно действующей «Горячей линии для дерматологов-микологов» TELE-MOST.GRIBO
k.RU, где практикующие врачи cмогут
найти ответы на большинство вопросов по грибковым заболеваниям, а при необходимости получить консуль-тацию и советы известных специалистов дерматологов и микологов.
СООТВЕТСТВИЕ РЕЗУ ЛЬТАТОВ ПЦР-ТЕСТА И РЕГ ЛАМЕНТИРОВАННЫХ
МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ПРИ ОНИХОМИКОЗЕ
Сергеев В.Ю.
Московская медицинская академия имени И.М. Сеченова,
Москва
С помощью ПЦР теста на T. rubrum и T. mentag-
rophytes
var. interdigitale (система «Трифам», Щербо
С.Н., Сергеев В.Ю. и соавт., 2007) было обследовано 2603 пациента с патологией ногтей. Результат ПЦР по-ложительный у 1371 пациента (52,7%), отрицательный – у
1232 (47,3%). Результат kOH микроскопии поло-
жительный у 1681 пациента (58,8%), отрицательный – у 1179 (41,2%).
Расчетный положительный процент дерматофитии
ногтей среди всех случаев онихомикоза, по данным литературы, около 70-85%, т.е. истинный положитель-ный процент КОН для дерматофитии ногтей составит 70-85% от исходного. Число положительных результа-тов ПЦР (1371) попадает в этот интервал, составляя 81,6% от числа положительных результатов микроско-пии.
Посев патологического материала с выделением и
идентификацией культуры гриба был проведен у 462 пациентов с патологией ногтей. Результат культиви-рования положительный (рост гриба) у 288 пациен-тов (62,3%), отрицательный (нет роста гриба) – у 174 (37,7%).
Среди пациентов с положительным результатом
ПЦР (1371),
результаты kOH микроскопии были полу-
чены у 1288 пациентов, а результаты культивирования – у 160 пациентов. Среди пациентов с положительным рез
ультатом ПЦР , результат kOH микроскопии по-ложительный у 1111 (86,3%), отрицательный – у 177 (13,7%). Среди пациентов с положительным резуль-татом ПЦР , результат культивирования положитель-ный (рост гриба) у 106 (66,2%), отрицательный – у 54 (33,8%). Среди пациентов с положительным результа-том ПЦР , рост T.
rubrum наблюдался у 88 пациентов
(55%), T. mentagrophytes var. interdigitale – у 6 (3,8%),
candida
spp. – у 5 (3,1%), рост плесневого гриба – у 7
(4,4%), роста не было у 54 (33,8%) пациентов.
Среди пациентов с положительным результатом
kOH
микроскопии (1681), результаты ПЦР были полу-
чены у 1530 пациентов, а результаты культивирования – у 223 пациентов. Среди пациентов с положительным рез
ультатом kOH микроскопии, результат ПЦР по-
ложительный у 1111 (72,6%), отрицательный – у 419 (27,4%). Среди пациентов с отрицательным результа-том ПЦР , результат культивирования положительный (рост гриба) у 34 (41%), отрицательный – у 49 (59%).
Более высокий положительный процент при куль-
тивировании
по сравнению с kOH микроскопией ука-
зывает на то, что ПЦР обнаруживает большее число истинного
онихомикоза, чем kOH микроскопия. На
фоне общего числа образцов, исследованных с помо-щью микроскопии (n=2444) прирост выявляемости с помощью ПЦР составил 7,2%. В целом, ПЦР повыша-ет выявляемость онихомикоза на 19%, по сравнению с КОН-микроскопией.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 451
Среди пациентов с отрицательным результатом
kOH микроскопии, результат культивирования поло-
жительный (рост гриба) у 80 (47,1%), отрицательный – у 90 (52,9%). Столь высокий показатель (47,1%) мо-жет свидетельствовать о контаминации, по сравнению с 72,6% на фоне положительной КОН. В то же время, положительный процент культивирования дерматофи-тов
составляет всего 19,4%. это указывает на несовер-
шенство регламентированных методов.
Прирост положительных случаев ПЦР (n=54) при
отрицательном результате культивирования составил: из 174 отрицательных посевов – 31%, из отрицатель-ных посевов и полученном результате ПЦР – 52,4% (n=103). На фоне общего числа образцов, исследован-ных с помощью посева (n=462) прирост выявляемос-ти с помощью ПЦР составил 11,7%. Таким образом, ПЦР повышает выявляемость онихомикоза на 52,4% по сравнению с посевом.
Существенное преимущество в выявляемости они-
хомикоза с помощью ПЦР показывает высокую диа-гностическую ценность метода, утверждая его как но-вый золотой стандарт в диагностике онихомикозов.
НОВЫЙ МЕТОД ПЦР В ОЦЕНКЕ
РЕЗУ ЛЬТАТОВ ЛЕЧЕНИЯ ОНИХОМИКОЗА
Сергеев В.Ю.
Московская медицинская академия имени И.М. Сеченова,
Москва
Для определения возможностей российской ме-
тодики полимеразной цепной реакции (набор ПЦР «Трифам», Щербо С.Н., Сергеев В.Ю. и соавт., 2007) в оценке эффективности терапии онихомикозов нами была изучены в динамике результаты обследования группы из 137 больных онихомикозом. У всех боль-ных диагноз был подтвержден положительными ре-зультатами световой микроскопии с просветлением раствором щелочи (КОН) и ПЦР . Все больные нужда-лись в проведении системной противогрибковой тера-пии (КИОТОС > 6) и не имели противопоказаний к ее назначению. После проведения адекватного лечения у вс
ех больных повторно были проведены kOH микро-
скопия и ПЦР.
Результаты КОН микроскопии и ПЦР после про-
веденного лечения распределились на три, почти рав-ные группы. В группе из 47 пациентов отсутствовала динамика результатов лабораторных анализов: КОН микроскопия и ПЦР остались положительными. У 47 других пациентов произошла негативация одного из анализов: отрицательным стал либо результат КОН микроскопии, либо ПЦР . У 43 пациентов результаты и КОН микроскопии, и ПЦР стали отрицательными.
Среднее время прошедшее от начала лечения паци-
ентов, у которых не была выявлена динамика резуль-татов КОН микроскопии и ПЦР составило 104±37,5 дней, в группе с негативацией одного из анализов – 126±74,5 дней, а в группе пациентов с негативацией и КОН микроскопии и ПЦР – 143±74,6 дней. Диспер-сионный анализ показал, что различия в сроках про-ведения повторных анализов достоверны для группы с положительным результатом КОН микроскопии и положительным результатом ПЦР и группы с отрица-тельным результатом КОН микроскопии и отрицатель-ным ре
зультатом ПЦР (p=0,002). это обстоятельство
позволяет характеризовать группу, в которой отрица-тельным стал результат либо КОН микроскопии, либо ПЦР , как переходную и по результатам анализов и по сроку, прошедшему со дня начала лечения.
Сравнение возможностей КОН микроскопии и
ПЦР в оценке эффективности проводимой терапии было проведено в группе 47 пациентов, у которых от-рицательным стал результат либо КОН микроскопии, либо ПЦР .
Среди больных, у которых в процессе лечения один
из результатов лабораторных анализов становился от-рицательным, у 38 больных (80,9%) первым негати-вировался результат ПЦР , а у 9 больных (19,1%) – ре-зультат КОН микроскопии. Дисперсионный анализ показал, что различия в сроках проведения повторных анализов между этими двумя подгруппами недосто-верны (p=0,846). Таким образом, в среднем на 4 ме-сяце лечения онихомикоза негативацию результатов ПЦР можно ожидать в 4,2 раза чаще, чем негативацию рез
ультатов kOH микроскопии.
Таким образом, использование ПЦР как средства
лабораторного контроля при лечении онихомикоза может обеспечить ранние отрицательные показатели микологического излечения, позволяя избежать пов-торных (нередко трехкратных) обследований, традици-онно выполняемых с помощью КОН микроскопии, за счет более высокой точности генодиагностики. Более того, внедрение ПЦР наряду с дифференцированным подходом к терапии в перспективе позволит сократить сроки наблюдения при лечении больных онихомико-зом.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 452
На протяжении нескольких десятилетий, когда
были отработаны и внедрены в практику суточные
дозы гризеофульвина с учетом массы тела при лечении больных микозами, врачи не испытывали трудностей при ведении этих больных. В последние 3 года стали наблюдаться неудачи при применении гризеофульвина больным микроспорией: увеличились сроки до первого отрицательного анализа на грибы и общая продолжи-тельность лечения. По данным зарубежных и отечес-твенных исследователей продолжительность лечения больных микроспорией гризеофульвином составляет 4–8 и 6–12 недель, суточная доза микронизированного гризеофульвина от 20 до 25 мг/кг массы тела. В России гризеофульвин при микроспории назначается из рас-чета 21–22 мг/кг.
С целью выяснения причин длительного лечения
больных микроспорией нами проведен анализ исто-рий болезни 48 больных, находящихся в микологичес-ком отделении в 2006 году. Больные были в возрасте от
1года 2 месяца до 13 лет, их них до 3 лет – 12, от
4 до 6 –18, от 7 до 13 – 1, мужского пола – 26, жен-ского- 22. С микроспорией волосистой части головы было 20 человек, волосистой части головы и гладкой ко
жи – 24, с распространенной микроспорией гладкой
кожи и вовлечением в процесс пушковых волос 4 боль-ных. Лечение проводилось гризеофульвином в сочета-нии с наружными антимикотическими средствами. 45 больных получали препарат из расчета 22 мг/кг массы тела, 3
– 25 мг/кг. Сопутствующие заболевания были
выявлены у 40 больных, что составляет 83,3 %. Чаще отмечались ОРВИ (20 больных), хронические заболе-вания бронхо-легочной системы и верхних дыхатель-ных путей: бронхит, пневмония, ангина,тонзиллит, ла-ринготрахеит (10). Заболевания желудочно-кишечного тракта имели место у 2 больных (гастроэнтерит, панк-реа
тит), заболевания эндокринной системы – у 2, ноч-
ной энуре
з – у 2, задержка физического развития – у 2,
системная красная волчанка – у 1, туберкулез внутриг-рудных лимфатических узлов у 1 больного. У больных с микроспорией волосистой части головы первый от-рицательный анализ на грибы был через 19–31 день (в среднем 23,5), продолжительность пребывания в ста-ционаре составляла от 29 до 49 дней (в среднем 33,5). Двое больных выписались на 26 и 32 день с положи-тельным результатом анализа. У больных с микроспо-рией волосистой части головы и гладкой кожи отри-цательный анализ на грибы был через 16–37 дней (в среднем 26,6), продолжительность пребывания в ста-ционаре
– 26–47 дней ( в среднем 36,2), двое больных
выписались с положительным анализом на 25-й день. При распространенной микроспории гладкой кожи с поражением пушковых волос отрицательный анализ был через 15, 17, 25 и 32 дня, срок пребывания в ста-ционаре составил 21, 24, 32 и 38 дней.
При анализе продолжительности лечения в зависи-
мости от сопутствующих заболеваний было установ-лено, что у 8 детей, часто болеющих ангиной, ОРВИ, с хроническим тонзиллитом, одного энурезом анализ на грибы был отрицательным через 30–49 дней. Через 49 дней грибы не обнаруживали у ребенка12 лет с оли-гофренией и часто болеющего ОРВИ, из стационара выписан через 59 дней. Нами также отмечено, что бо-лее короткая продолжительность лечения до первого отрицательного анализа ( 20, 21 и 27 дней) была у 3 детей, которым суточная доза гризеофульвина была назначена из расчета 25 мг/кг массы тела, увеличена на Ѕ таблетки. У одного из этих больных был хрони-ческий бронхит, двое болели ОРВИ.
Таким
образом, нами установлено: 1. У 83,3 %
больных были сопутствующие заболевания; 2. Более продолжительно лечение микроспории гризеофуль-вином у детей, страдающих заболеваниями бронхо-легочной системы и верхних дыхательных путей; 3. Терапевтическая эффективность при лечении микро-спории гризеофульвином может быть повышена при увеличении суточной дозы препарата до 25 мг/кг в со-четании с общеукрепляющими и иммуностимулирую-щими средствами. ЗАВИСИМОСТЬ э ФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ МИКРОСПОРИЕЙ
ОТ СОПУТСТВУЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И СУТОЧНОЙ ДОЗЫ ПРЕПАР АТА
Степанова Ж.В., Оленич И.В., Климова И.Я.
ФГУ «ЦНИкв
И Росмедтехнологий», городская клиническая больница им. в.Г.к ороленко,
Москва
К ВОПРОСУ О НАРУЖНОЙ ТЕР АПИИ И ПРОФИЛАКТИКИ МИКОЗОВ
Тарасенко Г.Н., Патронов И.В., Кузьмина Ю.В., Тарасенко Ю.Г.
ФГУ 3 Центральный в
оенный клинический Госпиталь им. А.А.вишневского,
красногорск
Микозы являются наиболее частой проблемой де-
рматологии, однако, наружная терапия требует посто-янного совершенствования, тем более что в последние годы в арсенале дерматолога появляются все новые и новые препараты противогрибкового действия. В сво-ей практике мы использовали уникальный препарат «ДАКТАРИН», который применяется для профилак-тики и лечения дерматомикозов в форме спрей-пудры и со
держит 0.16 % активного вещества миконазола
нитрата. Он устраняет гипергидроз, действует фун-
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 453
гицидно на широкий спектр возбудителей микозов и
обладает антибактериальной активностью.
Нами было проведено обследование и лечение 24
больных мужчин в возрасте от 20 до 86 лет с различны-ми клиническими формами дерматомикозов. Жалобы и клиническая картина микоза соответствовали клини-ческой форме. Патологический процесс, как правило, носил ограниченный характер и локализовался на кис-тях, стопах и паховых складках. Препарат наносили на пораженную поверхность до легкого увлажнения 2 раза в день (утром и вечером). Продолжительность лечения в зависимости от клинической формы микоза составляла до 4-х недель. На первом этапе мы оцени-вали уменьшение субъективных и объективных ощу-щений (зуд, гипергидроз, воспалительные явления и др.). Хороший подсушивающий эффект сохранялся от 4 до 10 часов. У всех больных нами отмечено клини-ческое и микологическое излечение. Побочных эффек-тов в процессе лечения не наблюдали.
Таким образом, отсутствие клинических призна-
ков рецидива и побочных эффектов подтверждает эффективность этого препарата, что позволяет реко-мендовать его для лечения и профилактики дермато-микозов.
РЕДКАЯ ЛОКАЛИЗАЦИЯ ОТРУБЕВИДНОГО ЛИШАЯ
НА ВОЛОСИСТОЙ ЧАСТИ ГОЛОВЫ У БОЛЬНОГО МИКРОСПОРИЕЙ
Терегулова Г.А., Жукова И.Ю., Магазова Р.А.,
Левченко Т.С., Копусова С.И., Гумерова И.Р.
Башкирский государственный медицинский университет,
Уфа
Республиканский кожно-венерологический диспансер,
Уфа
Отрубевидный лишай – грибковое заболевание,
обусловленное грибом Malassezia furfur, характеризу-ющееся поверхностным невоспалительным пораже-нием кожи шеи, груди, спины, живота. У детей отрубе-видный лишай может начинается с волосистой части головы.
Мы наблюдали сочетание инфильтративной мик-
роспории волосистой части головы (30 очагов) с отру-бевидным лишаем волоситой части головы у мальчика Т., 9 лет, заражение которого произошло от двоюрод-ного брата в процессе непродолжительного бытового контакта.
Очаги шелушения и поредение волос на голове
появились за 3,5 месяца до госпитализации. По реко-мендации фельдшера лечились синафланом. Проявле-ния отрубевидного лишая у ребенка мать замечала в течение двух лет в виде появление «белых пятен после загара» на коже шеи и лба, по поводу чего к врачу не обращались. Тем более, что аналогичные высыпания распространенного характера имеются и у отца маль-чика (при обследовании диагностирован распростра-ненный отрубевидный лишай).
Клинические проявления микроспории волосистой
части головы у больного Т., были представлены нали-чием двух крупных очагов размерами 3 см в диаметре и множеством более мелких очагов размерами от 0,2 до 1 см в диаметре с четкими границами, разбросан-ных в затылочной и височных областях (общее число оч
агов – 30). Кожа в очагах была гиперемирована и ин-
фильтрирована, имелись, асбестовидное шелушение, единичные пустулы, сплошное обламывание волос на уровне 4–6 мм и единичные необломанные волосы, светящиеся на уровне 1 см над кожей. Кроме этого на коже волосистой части головы с переходом на кожу лба, височных, затылочных областей и шеи имелись пятна светло-коричневого цвета округлой формы, сливающи-еся местами в крупные очаги с фестончатыми краями и слабо выраженным отрубевидным шелушением.
Интересная картина наблюдалась под люминесцен-
тной лампой: наряду с зеленым свечением обломков волос в очагах микроспории имелось бурое свечение очагов отрубевидного лишая.
Оба диагноза были подтверждены микроскопичес-
ки: поражение волос по типу Microsporum и обнаруже-нием коротких изогнутых нитей мицелия и скоплени-ем спор в виде гроздьев винограда в чешуйках с очагов поражения отрубевидного лишая. Диагноз микроспо-рии был
подтвержден культурально – выделением Mi-
crosporum canis на питательных средах.
Отрубевидный лишай не обладает контагиознос-
тью. Ребенку, очевидно, досталась от отца наследс-твенная предрасположеннось к возникновению этого заболевания, проявляющаяся особенностями хими-ческого состава пота, кожного сала, замедлением фи-зиологического шелушения, ослаблением факторов макроорганизма, препятствующих трансформации дрожжевых форм возбудителя в мицелиальную.
Случай представляет интерес в связи с семейным
характером неконтагиозного микоза, сочетанием двух грибковых заболеваний у ребенка, развитием инфиль-тративной формы микроспории на фоне местного применения кортикостроидных мазей и редкой лока-лизацией отрубевидного лишая на волосистой части головы.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 454
Микроспория, обусловленная M. сanis, характери-
зуется многоочаговостью, поражением многих членов
семьи, вовлечением в процесс пушковых волос.
Среди исследователей нет единого мнения по
вопросу о роли человека в распространении микро-спории. По мнению одних авторов передача зооант-ропонозной микроспории от человека к человеку воз-мо
жна в 2 % случаев (Степанова Ж.В., 2005). Другие
исследователи выявляли большую частоту заражения микроспорией, обусловленной M. canis, от человека. Известно, что заражение микроспорией возможно от клинически здоровых кошек, которые могут быть но
сителями Microsporum canis в 2,4 % (Степанова
Ж.В.,2005). Семейные случаи микроспории наблюда-ются достаточно часто и характеризуются поражени-ем многих членов семьи, нередко включая и взрос-лых.
В нашем случае из пяти членов одной семьи забо-
лели четверо: мать и трое детей. Отец семьи оказался здоровым, так как в это был в длительной командиров-ке. Семья находилась на лечении в микологическом отделении РКВД.
У матери С., 34 лет, диагностирована распростра-
ненная микро
спория гладкой кожи (28 очагов) – забо-
лела позже всех. Мать, в отличие от детей, заразивших-ся от котенка, не имевшего клинических проявлений заболевания, инфицировалась от дочери, с которой спала в одной постели.
У сына
А., 6 лет – распространенная микроспория
волосистой части головы (8 очагов) и гладкой кожи (240 о
чагов) с поражением пушковых волос – заболел
первым, больше всех играл с котенком.
У сына
И., 11 лет – распространенная микроспория
гладкой кожи (139 очагов).
У до
чери А., 8 лет – распространенная микроспо-
рия гладкой кожи (274 очага) и поражением волос пра-вой брови.Поражение гладкой кожи у всех членов семьи носи-
ло распространенный характер и выглядело следующим образом: на коже лица, туловища и конечностей имелось от 28 до 274 очагов размерами от 0,2 до 2 см в диаметре округлой и овальной формы с четкими контурами, кожа в
очагах розово-красного цвета, в центре очагов – мелко-
пл
астинчатое шелушение, по периферии очагов – валик
из пузырьков и корочек. В некоторых очагах имелась картина «ирис» (наличие кольца в кольце). У девочки 8 лет в процесс были вовлечены щетинистые волосы правой брови. У мальчика 6 лет наблюдалось свечение пушковых волос в очагах на гладкой коже. Кроме того, у него же имелось 8 очагов на волосистой части головы (на мокушке, теменной и затылочной области, в краевой зоне роста волос области лба и затылка). Очаги были размерами от 0,5 до 2 см в диаметре, округлой формы с четкими границами, кожа в очагах слегка гипереми-ро
вана, на поверхности очагов – обильное мелкоплас-
тинчатое шелушение. Волосы в очагах обламаны на уровне 4–6 мм, окружены у основания «муфтой». Под лю
минесцентной лампой – зеленое свечение обломков
волос в очагах на волосистой части головы и пушковых во
лос – в очагах на гладкой коже. У всех больных при
микроскопии с очагов гладкой кожи обнаружены нити ми
целия, в пораженных волосах – споры Microsporum,
в посевах – рост Microsporum canis.
Все члены семьи лечились гризеофульвином, выпи-
саны
с выздоровлением мать: и старшие дети – через
23 дня, младший сын, у которого имелось поражение во
лосистой части головы – через 35 дней.
Приведенное наблюдение еще раз подтверждает,
что для микроспории, обусловленной
M. сanis характерны семейные случаи заболевания,
многоочаговость поражения, заражение от животных без видимых признаков заболевания, вовлечение в процесс пушковых волос , возможность заражения от больного человека. СЛУЧАЙ СЕМЕЙНОЙ МИКРОСПОРИИ
Терегулова Г.А., Жукова И.Ю., Гафаров М.М., Левченко Т.С., Магазова Р.А., Корытова Е.Н.
Башкирский государственный медицинский университет,
Уфа
Республиканский кожно-венерологический диспансер,
Уфа
ИСКУССТВЕННЫЕ НОГТИ КАК ПРИЧИНА ПАТОЛОГИИ НОГТЕЙ
Титугина А.Ю., Хабирова Р.Х., Дукович Е.В., Табашникова А.И.
ГУз
Самарский областной кожно – венерологический диспансер,
Самара
В последние годы отмечается развитие индустрии
красоты. В том числе и услуг по наращиванию ног-тей.
В центре по лечению кожи стоп и ногтей Самарс-
кого областного кожно венерологического диспансера за 2007 год, обратились 24 женщины с различными изменениями ногтевых пластин кисти, после примене-ния различных технологий наращивания (гель, акрил, типсы). Искусственные ногти приводили к изменению собственных ногтей при травматизации, длительном контакте с водой, с использованием чистящих, мою-щих средств (стирка, уборка, купание).
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 455
Длительность применения наращивания составила
от одного года до пяти лет. Возраст женщин варьиро-
вал от 23 до 45 лет. Более половины из них (14 чело-век), не имея представления о заболевании лечились самостоятельно или по совету мастера по наращива-нию ногтей
– наружными противогрибковыми средс-
твами или различными косметическими маслами для ухода за ногтевыми пластинками, продолжая носить искусственные ногти.
Изменение ногтей были различными и зависели от
вида гриба структуры собственного ногтя и длитель-ности ношения искусственных ногтей.
Наиболее частым изменением зарегистрирован-
ным у
16 пациенток, наблюдалось онихолизис – ног-
тевая пластинка отслаивалась от свободного края или латеральных поверхностей ногтевого ложа на различ-ную глубину. На этом фоне менялась так же и окраска (моло
чно – белая, желто – коричневая или светло зе-
леная).
У четырёх женщин развилась кандидозная парони-
хия, с отечным гиперемированным валиком, окружаю-щим ногтевую пластину.
У четырех пациенток отмечались ониходистрофия
с выраженным истончением и трещинами (разрывами) ногтевой пластинки, сопровождающаяся резкой болез-ненностью. При культуральном исследовании выявле-на следующая картина:16 человек
– Candida alb.
4 человека – Aspergillus n.4 человека – рост патогенных грибов не полученЛечение проводимое больным по поводу онихо-
микоза кистей заключалось в применение системного антимико
тика итроконазола – 2 курса пульс – терапии.
Использовалась так же наружная терапия, раствором эк
зодерил по 1–2 капли на ногтевую пластинку 2 раза
в день. При лечении ониходистрофии наружно приме-нялся г
ель Солкосерил, крем с витаминами А и Е – (Ра-
девит). Коррекция недостаточности микроэлементов во
сполнялась с помощью витаминно – минерального
комплекса «спецальное драже Мерц» 2 раза, в день 6 месяцев.
Полное излечение было зарегистрировано через
четыре месяца от начала лечения у 10 человек; 5 меся-цев потребовалось для излечения 10 человек, четырем пациентам потребовалось более длительное лечение (7 месяцев) для восстановления ногтевой пластинки при ониходистрофии.
Учитывая широкое распространение грибковых
заболеваний и ониходистрофии необходимо рекомен-довать прочтения цикла лекций врачами микологами специалистам по маникюру и наращиванию ногтей в косметических салонах. С целью профилактики гриб-ковых инфекций и своевременному направлению в КВУ при выявлении патологии ногтевой пластины.
МОРФОЛОГИЯ МИКОТИЧЕСКИХ ПОР АЖЕНИЙ КОЖИ
НА ФОНЕ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА
Тухватуллина З.Г., Рахимов С.В., Сиротина Н.В., Тухватуллина Э.Ф.
Центральная полик
линика №1 Медико-санитарного объединения Минздрава Республики Узбекистан,
Ташкент
Цель исследования: изучить сочетание метаболи-
ческого синдрома комплекса клинико-биохимических нарушений, имеющих в своей основе тканевую инсу-линорезистентность и гиперинсулинемию и микоти-ческих поражений кожи.
Методы исследования: наличие метаболического
синдрома у 78 пациентов ( 40 мужчин и 38 женщин, средний возраст 60 лет) оценивалось по методике АТР III Национального Института Здоровья США. Из ком-понентов метаболического синдрома чаще всего отме-чались абдоминальное ожирение, артериальная гипер-тензия, гипертриглицеридемия и сниженный уровень липопротеидов высокой плотности.
Полученные результаты: изменение углеводного
обмена в форме нарушенной гликемии натощак были зафиксированы у 56 пациентов, из них микотические поражения кожи были диагностированы у 38 пациен-тов клинически и подтверждены бактериоскопичес-кими и бактериологическими исследованиями. Микоз стоп был диагностирован у 17, кандидамикотические инфекции у 12, эритразмы у 9 пациентов. Из дермато-зов, ассоциируемых с нарушениями углеводного обме-на, были диагностированы: эруптивный ксантоматоз (6), кольцевидная гранулема (5), гранулематоз Мишер-Лидера (3), амилоидоз (2), липоидный некробиоз (1), склерома Бушке (1). Клинические диагнозы были под-тверждены гистологически.
С целью изучения патогенетических механиз-
мов возникновения грибковых инфекций у больных с метаболическим синдромом нами дополнительно проводилась биопсия патологических элементов при ишемизирующих заболеваниях артерий нижних ко-нечно
стей (с диабетической ангиопатией – 7 обли-
терирующим
атеросклерозом – 1, облитерирующим
эндартериитом – 1,) сочетающихся с микозами стоп. Биоптаты фиксировались в 12 % нейтральном форма-лине, обезвоживались и уплотнялись, окрашивались гематоксилином и эозином, толуидиновым синим, по Ван-Гизону, проводилась Шик-рекция.
В биоптатах кожи при диабетической ангиопатии
сочетающейся с микозом стоп в эпидермисе наблюдал-ся выраженный гиперкератоз, неравномерный, места-ми выраженный акантоз, паракератоз, в роговом слое были обнаружены нити мицелия. Стенки капиляр, артериол, венул, артерий и вен были утолщены, отеч-ны, имелись периваскулярные лимфо-гистиоцитарные
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 456
инфильтраты с большим количеством плазматических
клеток, на отдельных участках пропитывающих стен-ки сосудов. При окраске толуидиновым синим выяв-лена метахромазия, фибриноидное изменение коллаге-новых волокон и стенок сосудов, свидетельствующие о нарушениях метаболизма и отложениях гликозами-ногликанов в тканях. В биоптатах кожи при облите-рирующем атеросклерозе, облитерирующем эндарте-риите с сопутствующим микозом стоп наблюдались атрофия эпидермиса, просветы сосудов были сужены за счет атеросклеротических бляшек в первом случае и увеличения эндотелия во втором. В роговом слое об-наруживались нити мицелия. При окраске толуидино-вым синим метахромазии не выявлено. При окраске по Ван-Гизону определена дезорганизация коллагена, на отдельных участках вторичный некроз тканей.
Выводы: патоморфологический процесс микотичес-
ких поражений кожи на фоне метаболического синдро-ма носит характер вторичного и развивается на фоне нарушенного гомеостаза, микроангиопатии, дисталь-ной полинейропатии, измененной иммунологической реактивности, что способствует росту микотической инфекции. Следовательно, микоз гладкой кожи является патогенетически значимой сопутствующей патологией метаболического синдрома, что обосновывает назначе-ние комплексной комбинированной терапии.
МИКОТИЧЕСКАЯ КОЛОНИЗАЦИЯ ПРИ ОСЛОЖНЕННЫХ
ФОРМАХ ПСОРИАЗА: ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ
Файзуллина Е.В., Файзуллин В.А., Бригаднова А.Ю., Глушко Н.И.
ГоУ в
По казанский государственный медицинский университет,
казань
Центр Дерматология ооо,
казань
казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии,
казань
Псориаз (П) – мультифакториальное заболевание,
занимающее особое место в дерматологии, его час-то
та непрерывно увеличивается и составляет до 5 %
населения планеты, а в северных районах России – до 10 % популяции. В настоящее время псориатическая болезнь характеризуется непрогнозируемым началом, малопрогнозируемым течением у пациентов различ-ных возрастных групп, развитием осложнений. Целью данной работы явилось изучение микробного состава флоры при атипичных формах псориаза.
Материалы и методы. Нами было пролечено 30
больных с осложненными формами псориаза (22 с экссудативным П и 8 пустулезным П типа Барбера) и 48 больных с ограниченной бляшечной формой забо-левания. Продолжительность болезни до 5 лет имели 25,8
% пациентов, от 5 до 10 лет – 28,6 %, более 10
лет – 45,6 %. Мужчин в исследовании было 42, жен-щин
– 36 человек. Благоприятное течение болезни
наблюдалось у 61,5 % , среднетяжелое – 27 % паци-ентов,
тяжелое – у 11,5 %. Все больные обследова-
ны клинически (сбор анамнеза, вычисление индекса pASI, био
химическое тестирование) и микологически,
с выделением чистой культуры гриба. Материал для исследования получали с помощью соскобов и смывов дистиллированной водой с центральной и перифери-ческой части бляшек. Посевы выращивали на чашке Петри в течение 5 суток при 30°С. Микроскопические и биохимические методы идентификации грибов (фер-ментация углеводов, тесты на трубки прорастания), проводили по общепринятым методам.
Результаты и обсуждение: У больных с П., имею-
щих ограниченную бляшечную форму заболевания и индекс
е pASI 1,4 – 2,8 в 54,2 % случаев (26 пациентов)
отмечалось грибковое обсеменение папулезных высы-паний. У пациентов с обнаруженной грибковой микро-флорой мицелиальные дерматофиты регистрировались в 3,9
% случаев, грибы рода Candida 57,7 %, золо-
тистый ст
афилококк – в 30,8 %, Malassezia furfur – в
38,5 % случаев. Структура грибковой колонизации при ограниченных формах П. была следующей: Malassezia furfur
– в 46,6 %, грибы рода Candida со Staph. aurens –
в 28,5 %, грибковые ассоциации Malassezia furfur и грибов рода Candida – 19,5 %, мицелиальные дермато-фиты
– 5,4 %. Пациенты с П., имеющие экссудативные
и пустулезные формы, имели грибковую колонизацию ко
жи в 80 % случаев (24 пациента). У пациентов с обна-
руженной грибковой микрофлорой выявлены дрожже-подобные
грибы рода Candida в 58,3 %, золотистый
стафилококк выявлен в 54,2 %, Aspergillus или мице-лиальные
дерматофиты по 8,3 %, Rhodotorula rubra –
12,5 %. Вопреки бытующему мнению о стерильности содержимого пустул у одного пациента были высеяны грибы ро
да Aspergillus (12,5 % от выборки). На пер-
вом месте в структуре грибковой колонизации нахо-дятся грибы рода Candida, ассоциированные с Staph. aurens
– 41,7 %, на 2-м – грибы рода Candida – 16,7 %,
на 3-м – St.Aureus и Rhodotorula rubra в ассоциации со стафилококком по 12,5 %, Aspergillus и мицелиальные дерматофиты – по 8,3 %.
Лечение псориаза топическим стероидом с трой-
ным действием Тридерм приводит к положительному клиническ
ому эффекту в 87 % случаев. У больных от-
меча
лся регресс индекса pASI с 17,8 до 0,8. Пациентов
с тяжелыми формами П. целесообразно обследовать на микотическую инфекцию.
В ходе лечения была достигнута стойкая ремиссия
П, результаты микологического обследования были от-рицательными в 92
% случаев.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 457
Генитальные кондиломы (ГК) – заболевание, пере-
даваемое половым путем, которое не только ухудшает
качество жизни женщин, но и повышает вероятность возникновения цервикальных интраэпителиальных неоплазий. Наиболее частыми симптомами нача-ла болезни являются дискомфорт в области входа во влагалище, зуд и повышение количества выделений. Нами было обследовано 1268 женщин с ГК, из них 826 (65
%) имели кандидоз влагалища, 335 (26,5 %) – со-
четанную уреаплазмо-микоплазменную инфекцию; 8.5
% – 107 человек – бактериальный вагиноз. Если по
данным А.Л.Тихомирова, Ч.Г.Олейник (2002), распро-страненность кандидозного вульвовагинита состав-ляла о
т 30–45 %, то в настоящее время наблюдается
тенденция к увеличению данной патологии почти в два раза. Увеличивается частота возникновения церви-кальных неоплазий на фоне поражения слизистых гри-бами рода Candida. Помимо широко известных причин формирования влагалищных дисбиозов, инвазивные манипуляций по поводу ГК (деструкция различными методами), вероятно, также увеличивают частоту воз-никновения кандидозной инфекции.
Наиболее перспективным в плане минимальной
травматичности, на наш взгляд, является радиоволно-вой метод удаления ГК с последующим назначением противовирусной терапии, противокандидозного и ан-типролиферативного лечения.
Под нашим наблюдением находилось 47 жен-
щин от 19 до 45 лет с давностью заболевания ГК от нескольких месяцев до 4,5 лет. Все пациентки име-ли ВПЧ онкогенности высокого риска, выявленные мето
дом ПЦР . Большинство (78 %) не подозревали о
наличии заболевания, были выявлены гинекологами и предъявляли жалобы на периодически возникающую «молочницу». После проведения радиодеструкции ГК, 25 женщин получали рекомендации по уходу, систем-ное противовирусное лечение препаратом «Панавир», интравагинальное введение препарата «Залаин» в дозе 300 мг однократно (группа сравнения). 22 пациенткам помимо указанного лечения был рекомендован препа-рат «Индинол» в дозе 200 мг два раза в день в течение трех месяцев (основная группа). Результаты лечения прослеживались через 10 дней, одного, трех и шес-ти месяцев от начала лечения. Через десятидневный промежут
ок 27 женщинам (57,5 %) потребовалось
повторное удаление ГК. Через месяц нуждались в ра-диоволновом удалении 13 пациенток группы сравне-ния и 4 пациентки основной группы. Через три месяца лечения
у 19 (86,4 %) женщин, получавших «Инди-
нол»,
ВПЧ обнаружен не был, в группе сравнения – у
15 женщин (60,0 %), т.е. меньше почти в полтора раза (p<0,05, χ2=5,49). Через шесть месяцев лечения у 20 (90,9 %) женщин, получавших «Индинол», ВПЧ об-нару
жен не был, в группе сравнения – у 16 женщин
(64,0 %) (p<0,05, χ2=6,35).
Препарат «Индинол» может быть рекомендован в
клиническую практику пациенткам с высоким риском интраэпителиальных неоплазий, осложненными и со-четанными формами ГК, в том числе вагинальными кандидозами. КОМПЛЕКСНОЕ ЛЕЧЕНИЕ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ,
ОСЛОЖНЕННОЙ КАНДИДОЗНЫМ ВУ ЛЬВОВАГИНИТОМ.
ПРОФИЛАКТИКА ЦЕРВИКАЛЬНЫХ НЕОПЛАЗИЙ
Файзуллина Е.В., Файзуллин В.А.
ГоУ в
По казанский государственный медицинский университет Мз СР РФ,
казань
Центр Дерматология,
казань
МЕДИЦИНСКИЕ ПЕРИОДИЧЕСКИЕ ОСМОТРЫ, КАК ОДНО
ИЗ ВАЖНЕЙШИХ ЗВЕНЬЕВ ПРОФИЛАКТИКИ ОНИХОМИКОЗОВ
Фандий В.А., Мамон А.А., Привалов В.С.
Медицинская служба Приднепровской железной дороги,
Днепропетровск, Украина
Наметившаяся в последнее время тенденция, к так
называемой «либерализации медицины», сокращение количества профессий и кратности прохождений мед-осмотров негативно влияет на выявляемость инфекци-онных и
социально опасных заболеваний, – в том чис-
ле онихомикозов. Поскольку в большинстве случаев, онихомикозы протекают малосимтомно, без выражен-ных субъективных нарушений, и представляют собой, с точки зрения пациента, «всего лишь» косметический дефек
т, – то большинство больных не обращаются к врачу. это наглядно демонстрирует опыт врачей-де-
рматовенерологов Приднепровской железной дороги. Несмотря на активную санитарно-просветительную работу (лекции на предприятиях, освещение пробле-мы в
средствах массовой телекоммуникации), – за
2007 год было выявлено 369 новых случаев заболе-ваний ногтей; при этом обратились к врачу самосто-ятельно всего лишь 67 человек, а 302 были выявлены при прохождении периодических медосмотров. При этом диагноз онихомикоза, после проведения миколо-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 458
гического исследования был подтвержден у 288 чело-
век,
что составило 78 %. Всем выявленным больным
назначались антимикотики системно, проводилось местное лечение, были даны рекомендации по обра-ботке обуви, белья, жилища, рекомендации по соб-людению мер, направленных на минимизацию риска заражения окружающих. Родные и близкие пациентов были приглашены для осмотра врачом-дерматовенеро-логом и, при необходимости, с ними также проводи-лись соответствующие мероприятия. Таким образом, проведение периодических медицинских осмотров позволило не только более своевременно выявить и назначить лечение пациентам страдающих микозами, но и предотвратить новые случаи заражения, прервать эпидемическую цепочку. Систематическое проведение медосмотров (с обязательным осмотром стоп), воз-можность проведения микологических исследований, «нацеленность» врачей на такую патологию, широкий континг
ент осматриваемых категорий населения –
дают возможность не допустить эпидемии микозов.
К ВОПРОСУ эПИДЕМИОЛОГИИ МИКРОСПОРИИ
ВОЛОСИСТОЙ ЧАСТИ ГОЛОВЫ
Фахретдинова Х.С., Абсалямова Н.Н., Левченко Т.С., Бурханова Н.Р.
Башкирский Государственный Медицинский Университет,
Уфа
Республиканский к ожно-венерологический Диспансер,
Уфа
Микроспорией волосистой части головы, как из-
вестно, болеют преимущественно дети до13–14 лет. Достаточно редко заболевание встречается у детей до 1 года. С началом пубертатного периода, когда в во-лосах обнаруживают фунгистатические органические кислоты (в частности, ундициленовую кислоту) взрос-лые заболевают редко. Из числа взрослых болеют в ос-новном молодые женщины; среди мужчин заболевание регистрируют спорадически. Актуальность: Однако в последнее время участились случаи заболевания мик-роспорией волосистой части головы у детей младшего возраста, и у взрослых. Целью работы является срав-нение заболеваемости микроспорией волосистой час-ти головы среди разных возрастных групп в республи-ке Башкортостан за последние 4 года. Учитывая, что все больные микроспорией волосистой части, кроме жителей г.Уфы, госпитализируются в РКВД, данные анализа госпитализированных больных отражают, в основном, заболеваемость в республике.
Материалы и методы: проводили ретроспективный
анализ историй болезни больных микроспорией, гос-питализированных в микологическое отделение РКВД в 2004–2007 гг.
Результаты. Основная часть больных приходится
во все исследуемые годы без значительных колебаний на возрастные группы от 3 до 14 лет: доля больных с 3 до 6
лет ежегодно составляет около 44 % находивших-
ся в
стационаре больных; 7 – 14 лет – около 33 %. В
группе от 0 до 2 лет в 2004 году зарегистрировано 11 детей, чт
о составило 14,7 % от общего числа больных,
а в 2007 году – 20 %. Среди этой группы в 2004 и в 2005 годах детей до 1 года не наблюдалось, в 2006 году в отделение поступил 1 ребенок до года, а в 2007 году таких
детей было трое. Во взрослой группе в 2004 году
зарегистрирована 1 больная – это 1,3 % от числа проле-чившихся в РКВД больных микроспорией волосистой части г
оловы, в 2005 – 2,2 %, 2006 – 3,8 %, а в 2007 –
5,8 %. Из анамнеза известно, что в 2004 – 2005 годах заболевшими являлись матери больных микроспорией детей, находившиеся с ними в тесном бытовом контак-те, а в 2006 –2007 годах большую часть заболевших составили случаи заражения микроспорией в резуль-тате непосредственных контактов с пораженными жи-во
тными, четверо заболевших – мужчины.
Выводы. По нашим наблюдениям за последние 4
года выросла доля больных в возрасте от 0 до 2 лет с 14 до
20 %, причем в отличие от предыдущих 2-х лет в
2006 году на стационарном лечении в РКВД находился один ребенок в возрасте до 1 года, а в 2007 году таких детей стало трое. Также значительно увеличилось ко-личеств
о заболевших взрослых с 1,3 % в 2004 году до
5,8 % в 2007 году ( 2005 г. – 2,2 %, 2006 г. – 3,8 %).
АНАЛИЗ РЕЗУ ЛЬТАТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ МИКРОСПОРИЕЙ
Р АЗЛИЧНЫМИ АНТИФУНГАЛЬНЫМИ ПРЕПАР АТАМИ
Фахретдинова Х.С., Абсалямова Н.Н., Левченко Т.С., Бурханова Н.Р.
Башкирский государственный медицинский университет,
Уфа
Республиканский кожно-венерологический диспансер,
Уфа
Актуальность. В связи с появившимися в послед-
нее время целого ряда системных антимикотических антибиотиков иногда перед молодыми врачами встает вопрос выбора препарата для лечения дерматофитий.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 459
Целью работы явилось сравнить эффективность лече-
ния больных микроспорией различными антимикоти-ческими антибиотиками.
Материалы и методы. Проводили ретроспективный
анализ историй болезни госпиталилированных в РКВД за последние три года больных микроспорией.
Результаты. Системные антимикотики: гризеофуль-
вин и препараты группы тербинафина (ламизил, тер-бизил, экзифин) получали 119 больных микроспорией волосистой части головы. При выявлении сопутству-ющих заболеваний всем больным проводилось соот-ветствующее лечение.
Ламизил (тербинафин) получили 15 больных мик-
роспорией волосистой части головы 2–14 лет в дозах: 62,5 мг/сутки при массе тела менее 20 кг, 125 мг/сут-ки при
массе тела 20–40 кг, 250 мг/сутки – при массе
более 40 кг. Выявлены сопутствующие заболевания: железодефицитная анемии (ЖДА) легкой степени у 2 детей, лак
унарная ангина – у 1, энурез-у 2, подострый
назофарингит – у 4.
Тербизил (тербинафин) получили 27 больных мик-
роспорией волосистой части головы 6–18 лет в тех же дозах, что и при лечении ламизилом. Выявлены со-путств
ующие заболевания: ЖДА легкой степени – у 2,
подострый назофарингит у 6, энурез – у 2 детей.
экзифином (тербинафин) пролечено 45 больных
микроспорией волосистой части головы: в возрасте 5–14
лет – 34 человека, 18 лет и старше –11 . Дозы те же,
что и при лечении ламизилом. Лечили сопутствующую патологию (ЖДА легкой степени, подострый назофа-рингит, пиодермия волосистой части головы и заушной ск
ладки, вегето-сосудистая дистония) – у 14 больных. Гризеофульвин из расчета 22 мг/кг массы тела
в сутки получили 114 больных микроспорией во-лосистой части головы в возрасте от 8 месяцев до 15 лет. Из них сопутствующую патологию имели 44 больных.
При сравнительном анализе результатов лечения
больных микроспорией гризеофульвином и группой препаратов тербинафина получены статистически достоверные (р>0,05) результаты: в очагах микоза свечение пораженных волос при лечении гризефуль-вином прекратилось на 18±2,1 день, препаратами гр
уппы тербинафинов (85 человек) – на 25±4,1 день
лечения, микологическое выздоровление отмечено (получен первый отрицательный анализ) соответс-твенно в среднем на 18±2,4 и 28±4,3 день. При срав-нении результатов лечения разными препаратами из группы тербинафинов, более эффективным было ле-чение экзифином (первый отрицательный анализ по-лу
чен на 25±5,6 день лечения, ламизилом – на 31±3,4
день лечения). При сравнении ламизила и тербизила лечение тербизилом оказалось более эффективным: (первый отрицательный анализ получен на 27±3,5 день). При лечении вышеперечисленными препа-ратами биохимические анализы крови оставались в пределах нормы.
Выводы: по нашим наблюдениям сроки лечения
больных микроспорией волосистой части головы гри-зеофульвином было на 7±1,9дней короче по сравнению с другими препаратами группы тербинафинов. Одна-ко, лечение тербинафинами является более удобным, особенно при амбулаторном лечении (прием препара-та 1 раз в сутки).
АППАР АТ «АЛОМ» В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ МИКОЗОВ
И ОНИХОДИСТРОФИЙ СТОП И КИСТЕЙ
Федосеев А.С.
ФГУ клинический санаторий «Барвиха» Управления делами Президента РФ, 1
Московская область
Как показывает опыт, лечение микозов стоп и кис-
тей, особенно осложнённых онизомикозом, требующее систематического, длительного подхода, представляет определённую трудность как для пациентов, так и вра-ча, осуществляющего контроль лечения. Зачастую у пациентов не хватает времени и терпения проводить терапию на постоянной основе.
В связи с появлением нового физиотерапевтического
аппарата для лечения онихомикозв «АЛОМ», нами была предпринята попытка интенсифицировать лечебный про-цесс в условиях санатория, где пациенты могут получить специальное лечение на систематической основе.
Аппарат
«АЛОМ», работающий в трех режимах –
ультразвуковое воздействие (фонофорез), магнитофо-рез, электрофорез одновременно или в любом сочета-нии, позволяет ускорить «доставку» лечебных средств к пораженным участкам, использовать небольшие кон-центрации лекарственных препаратов.За 2006–2007 г. нами был пролечен 46 пациент са-
натория в возрасте от 45 до 72 лет.
При выборе и определении длительности и форм
лечения, учитывались клинические формы проявле-ния онихомикозов, согласно международной клас-си
фикации, предложенной N. zaias. Данная клас-
сификация учитывает выраженность подногтевого гиперкератоза и степень вовлечённости ногтевой пластинки. Тяжесть микотического процесса оцени-валась в соответствии с КИОТОС. Учитывая возраст-ной состав пациентов, необходимо отметить, что ряд пациентов имели сопутствующую патологию, спо-собствующую течению микотической инфекции. Так у
17 больных (37,0 %) онихомикоз протекал на фоне
таких заболеваний, как диабетическая ангиопатия и варикозная болезнь нижних конечностей различной степени тяжести (без трофических изменений кожи). Пациенты по данным заболеваниям получали лече-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 460
ние в соответствии с диагнозами под контролем леча-
щих врачей-терапевтов.
Специальное противомикотическое лечение всех
пациентов проводилось комплексно, в соответствии со стандартом медицинской помощи больным микозом ногтей и методическими рекомендациями для врачей по профилактике грибковых заболеваний в санаторно-курортных учреждениях и пансионатах.
Больным с поражением менее половины ногтя на-
значалась терапия местными антимикотиками и лече-ние с помощью аппарата «АЛОМ». При поражениях более половины ногтя, а также 2-х и более ногтей мес-тная терапия сочеталась с системной (препараты итра-коназола или тербинафина).
Процедуры проводились ежедневно по 15–20 мин
каждая. В ванночку аппарата заливали раствор йодида ка
лия (2 %) или раствор цитросепта.Перед процедурой проводилось чистка поражён-
ных ногтевых пластинок с помощью наложения уре-апласта или специального аппарата.
У по
давляющего числа пациентов (81,1 %) наблю-
дались клинические признаки улучшения или разре-шения онихомикотического процесса, с явлениями роста здоровой ногтевой пластинки.
Кроме лечения онихомикозов, в нашей практике
аппарат «АЛОМ» использовался у 15 больных с не-микотическими ониходистрофиями. Нами применял-ся раствор витаминов А и Е с добавлениям Димексида (по оригинальной прописи). Клиническая картина ле-чения носила положительно-динамический характер.
Полученные результаты позволяют рекомендовать
применение аппарата «АЛОМ», как немаловажный элемент в комплексной терапии онихомикозов и они-ходистрофий стоп и кистей.
АНАЛИЗ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ И ОПЫТ ЛЕЧЕНИЯ МИКОЗОВ СТОП
И КИСТЕЙ В КЛИНИЧЕСКОМ САНАТОРИИ «БАРВИХА»
Федосеев А.С.
ФГУ клинический санаторий «Барвиха»
Управления делами Президента Российской Федерации,
Московская область
Одной из самых распространенных патологий,
встречающейся в дерматологической практике явля-ются микозы стоп и кистей, в том числе с поражением ногтей, так называемые онихомикозы.
По данным, полученным в Клиническом санатории
«Барвиха», количество пациентов, страдающих мико-тическим поражением стоп и кистей, стабильно нахо-дится на втором месте после острых дерматитов раз-личной этиологии. Следует принять во внимание, что поражения кожи и ногтевых пластинок стоп (в сред-нем за
три года) составляли 94,6 % от общего числа,
страдающих данной патологий. На долю поражения ко
жи и ногтевых пластинок кистей пришлось 5,4 %.
При опросах пациентов было установлено, что со-провождаемые заболевание изменения кистей, в силу визуальной открытости органа, доставляет крайне вы-раженный дискомфорт качеством жизни и, впрямую обуславливает более интенсивное и систематическое лечение. При поражении стоп, основным фактором, «заставляющим» пациентов обратится к врачу, служи-ли изменения ногтей (онихомикоз).
По нашим данным, учитывая возрастной состав
пациентов санатория, в структуре преобладали лица старших
возрастных групп: моложе 60 лет – 22,5 %;
60–69 лет – 31,6 %; 70–79 лет – 42,8 %; 80 лет и стар-ше
– 3,1 %.
Необходимо отметить, что первичное инфицирова-
ние произошло в более раннем возрасте. Так, впервые выявленные поражения в группах до 60 лет составили 84,3
%; старше 60 лет – 15,7 %.
Продолжительность заболевания в среднем соста-
вила более 18 лет. При анализе проводимого лечения было выяснено,
что местная антимикотическая терапия по общеприня-тым схемам большинством пациентов, в силу различ-ных причин, проводилась не регулярно и не система-тически. Поэтому, несмотря на многолетние усилия, желаемого эффекта, достигнуто не было. В тоже вре-мя, практически все пациенты отметили, что грибко-вая инфекция, безусловно, снижает «качество жизни» и их социальную адаптацию в обществе, является оча-гом хронической инфекции.
При проведении анализа имеющихся у больных
микозами заболеваний, было отмечено преобладание сос
удистой патологии (89,6 %), с соответствующими
поражениями периферических сосудов конечностей, способствующими течению микотического процесса.
На второе место вышли болезни желудочно-кишеч-
ного т
ракта и гепатобилиарной системы (80,2 %).
Третье место занимают различные эндокринопатии
(68,7
%): болезни щитовидной железы и, что особенно
важно, сахарный диабет. Так, среди пожилых пациен-тов с сахарным диабетом поражённость онихомикозом сост
авила 42,5 %.
Течение онихомикоза, как правило, носит длитель-
ный и упорный характер, поэтому лечение должно быть комплексным, учитывающим сопутствующую патологию.
С целью повышения эффективности местной анти-
микотической терапии, нами вначале проводится ща-дящее (бескровное) удаление поражённых ногтевых пластинок при помощи уреапласта или аппаратной чистки. Одновременно с удалением ногтей рекоменду-ется приём системного антимикотика.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 461
Системная терапия включает препараты тербина-
фина (Ламизил и его аналоги), итраконазол (Орунгал и
его аналоги) и флуконазол (Дифлюкан и его аналоги). Препараты тербинафина эффективны при онихомико-зе, вызв
анном дерматофитами, флюконазола – дерма-
тофит
ами и дрожжевыми грибами, а итраконазола –
при онихомикозе любой этиологии [1]. Рекомендуемая продолжительность лечения любым препаратом зави-села от клинической формы онихомикоза, распростра-ненности поражения и возраста больного. Для расчета продолжительности лечения, в настоящее время, мы используем специальный индекс КИОТОС [2].
Учитывая данные исследований и проведённого
нами анализа, лечение пациентов старших возрастных групп целесообразно проводить препаратами итрако-назола, обладающими широким спектром действия, по схеме пульс-терапии. С обязательными рекомендация-ми по дальнейшему наблюдению и контролю лечения в поликлинике по месту основного прикрепления.
Местно больные применяли такие препараты, как
растворы Лоцерил или Батрафен; кремы Ламизил, Ми-фунгар,
экзодерил, мазь Микоспор и др.
Практически все пациенты лечение переноси-
ли хорошо. По данным годичного контроля лечения клиническая эффективность такой терапии составила 78,6
%.
Однако, не все наши пациенты были настроены
на проведение лечения системными антимикотиками. В связи с чем, был проведён анализ общей заболева-емости данной группы больных, при котором было выяснено, чт
о у подавляющего большинства (87,3 %)
общесоматический статус отягощён патологическими изменениями со стороны внутренних органов. Пос-ле консультации с врачами-интернистами, учитывая имеющиеся противопоказания, назначение системных антимикотиков не представилось возможным. Иногда, по ряду других причин (фобия антибиотиков, аллер-гические реакции неясного генеза, приём большого количества других жизненно важных препаратов), па-циенты отказывались применять современные систем-ные противогрибковые средства.
В св
язи с этим, таким больным (5 % от общего
числа больных микозами), было предложено (наряду с местной терапией) провести курс лечения на физио-терапевтическом аппарате «АЛОМ» и имеющимися в продаже фитопрепаратами, такими как мазь «Анти-микоз», р-р «Цитросепт», ванночки с морской солью «Ахиллес» и др.
В ит
оге проведённого фитолечения у 88 % наблю-
даемых пациентов прекратились неприятные ощуще-ния; было
отмечено клиническое улучшение – исчезли
шелушение и трещины кожи, улучшились структу-ральные параметры ногтевых пластинок.
Всем пациентам были даны рекомендации по даль-
нейшему применению фитопрепаратов в домашних условиях.
Выводы1. Лечение микоза стоп и кистей у больных в ус-
ловиях санатория должно проводиться комплексно с обязательным учётом сопутствующей патологии.
2. При выборе системного антимикотика целесо-
образно использовать препараты итраконазола (Орун-гал), которые позволят ограничиться 3 курсами пульс-терапии.
3. Контроль лечения должен осуществляться в тес-
ном контакте с дерматологами-микологами поликли-ник по месту постоянного прикрепления пациентов.
4. Более активно выявлять и лечить грибковую па-
тологию у лиц молодого возраста, течение заболева-ния у которых, носит менее затяжной и ригидный ха-рактеры.
5. Проведение систематического, контролируемого
лечения, позволит привести к снижению уровня забо-леваемости микозами стоп и кистей.
СИФИЛИС, КАНДИДОЗ ВУ ЛЬВЫ И ВАГИНЫ
У СОЦИАЛЬНО-ДЕЗАДАПТИРОВАННЫХ ЖЕНЩИН
Хейдар С.А., Кулешов А.Н.
Российский государственный медицинский университет,
кафедра дерматовенерологии лечебного факультета,
Москва
Городская клиническая больница № 14 им. в.Г. к ороленко,
Москва
За последнее время значительно увеличилось коли-
чество социально-дезадаптированных женщин, боль-ных кандидозом, сифилисом, гонореей, хламидиозом, трихомонозом, уреаплазмозом, и другими инфекциями, передаваемыми половым путем.
Причины, способствующие повышению уровню
заболеваемости:
– социа
льное расслоение общества;
– лица из групп риска;- образ жизни населения;
– неконтролируемая миграция населения;
– отсутствие общей культуры;
– место проживания;
– лица, уклоняющиеся от лечения;
– лица, прервавшие начатое лечение;
– место работы;
– вид трудовой деятельности;
– материальное состояние;
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 462
– падения уровня жизни на фоне роста потребностей
на различные виды услуг;
– псих
ологическое состояние.
Основным контингентом венерологического от-
деления № 2 Городской клинической больницы № 14 имени В.Г. Короленко, являются социально-дезадап-тированные лица, ведущие аморальный образ жизни, способствуют распространению грибковых заболе-ваний, сифилиса, инфекций, передаваемых половым путем. Данный контингент часто повторно инфициру-ются, так как плохо ориентирован в вопросах гигиены половых и бытовых отношений, плохо ознакомлен с правилами поведения в обществе.
Под нашим наблюдением и лечением находилось
33 женщины в возрасте от 20 до 57 лет, больных си-филисом и кандидозом вульвы и вагины, поступив-ших на лечение в венерологическое отделение № 2 Городской клинической больницы № 14 имени В.Г. Ко
роленко. Из них 30 человек – БОМЖи; 15 – лица,
имеющие судимости; 27 – страдающие алкоголизмом,
22 – занимающиеся проституцией. Всем больным
проводилась клиническая и серологическая диагнос-тика, определение антител к вирусу иммунодефицита человека , исследования на антитела к вирусным ге-патитам В и С.
Материалом для лабораторного исследования слу-
жили выделения из влагалища и цервикального кана-ла. Мазки и соскобы окрашивались по Граму и мети-леновым синим. При осмотре отмечались умеренные выделения, налеты творожистой консистенции, гипе-ремия, отечность, инфильтрация слизистой оболочки преддверия влагалища. Субъективно зуд, жжение у 27 женщин. У 13 женщин отмечались эрозии, трещины в области преддверия влагалища, сопровождающиеся болезненностью.
Больные получали противосифилитическую тера-
пию согласно инструкции и методических рекоменда-ций. Лечение кандидоза заключалось в приеме внутрь нистатина по 1 таблетке (500.000 ЕД) четыре раза в день. М
естно – кандид В6 интравагинально, по 1 таб-
летке два раза в день (утро, вечер).
Таким, образом, ведение аморального образа жиз-
ни, безразличное отношение к собственному здоровью представляет серьезную опасность для современного цивилизованного общества и тем самым подвергает опасности заражения окружающего населения.
ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА Р АСПОРСТР АНЕНИЕ МИКОТИЧЕСКОЙ
ИНФЕКЦИИ У СОЦИАЛЬНО-ДЕЗАДАПТИРОВАННЫХ ЛИЦ, БОЛЬНЫХ
СИФИЛИСОМ И ИНФЕКЦИЯМИ, ПЕРЕДАВАЕМЫЕ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ
Хейдар С.А.
Российский государственный медицинский университет,
кафедра дерматовенерологии лечебного факультета,
Москва
Большую проблему для здравоохранения и обще-
ства в целом представляют социально дезадаптирован-ные лица, ведущие аморальный образ жизни.
Именно данный контингент поддерживает эпиде-
мическую напряженность и способствует возникнове-нию в обществе вспышек социально значимых забо-леваний таких, как сифилис, микозы, ВИЧ-инфекция, гепатиты, туберкулез, чесотка, педикулез и другие.
Группами риска, способствующих росту грибковых
инфекций являются:
– лица
без определенного места жительства и места
работы (Бомжи);
– э
мигранты;
– лица из мест лишения свободы;
– заключенные;
– лица, живущие в ночлежках и социальных при-ютах;
– нарк
оманы;
– токсикоманы;
– лица, страдающие алкоголизмом или бытовым пьянством;
– бро
дяги;- беженцы. Причины, приводящие к развитию микозов у соци-
ально-дезадаптированного контингента: повышенная потливость; травмы ногтевых пластин и кожи (сса-дины, потертости); острые и хронические инфекции (ВИЧ-инфекция, туберкулез, гепатиты); паразитарные заболевания кожи (педикулез, чесотка); сопутствую-щая патология; авитаминоз; переохлаждение и обмо-рожение верхних и нижних конечностей; голодание; расстройства периферического кровообращения, а так-же не соблюдение правил личной и общей гигиены.
Факторы, способствующие распространению гриб-
ковой инфекции, у социально-дезадаптированных лиц:
ухудшение социальной и эпидемиологической об-становки;
наличие венерических заболеваний и инфекций, передаваемых половым путем;
позднее диагностирование и непроводимое ранее лечение грибковой патологии;
скученность совместного проживания на чердаках, подвалах жилых и нежилых помещений, вокзалах;
отсутствие банно-прачечных мероприятий;
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 463
обмен загрязненной одеждой (нательной, верхней),
головными уборами, перчатками, обувью;
неблагоприятные санитарно-гигиенические усло-вия;
низкий уровень жизни. Таким, образом, распространение грибковой пато-
логии у социально-дезадаптированных лиц зависит не только от патогенности и вирулентности микроорга-низма, а в большей степени от состояния резистент-ности макроорганизма, подорванной, сифилитической патологией, инфекциями, передаваемые половым пу-тем, алкоголизмом, наркоманией и характерным для них образом жизни.
эПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ МИКОЗОВ В РЕСПУБЛИКЕ
ТАТАРСТАН И НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ИХ ЛЕЧЕНИЮ
Хисматуллина И.М., Лисовская С.А., Никитина Л.Е., Абдрахманов Р.М.
ГоУ в
По казанский государственный медицинский университет Росздрава России,
казань
ФГУН кНИИЭМ Роспотребнадзора,
казань
Актуальность проблемы грибковых инфекций кожи
и ее придатков определяется их высокой распространен-ностью. В Республике Татарстан (РТ) заболеваемость микозами составляет 156,2 на 100 тысяч населения. Из них значительную долю составляют грибковые пораже-ния кожи и ногтей стоп, вследствие чего исключительно важным является изучение преобладающих возбудите-лей в этиологической структуре микозов стоп.
За период от 2004 до 2007 года обследовано 1479
больных микозами стоп, в том числе и онихомикоза-ми, из разных медицинских учреждений РТ. Среди них было 610 мужчин и 869 женщин в возрасте от 18 до 82 лет (средний возраст 45,8 лет) с давностью заболева-ния от 2 недель до 20 лет. У всех пациентов диагноз микоз стоп был подтвержден культурально в миколо-гическ
ой лаборатории КНИИэМ.
Среди идентифицированных до вида грибов ли-
дирующее положение занимали Candida albicans (22,9
%), Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale
(14,1 %), Candida parapsilosis (11,4 %), Rhodoturola rubra (11,2 %), Aspergillus niger (11,1 %), Trichophyton rubrum (10,4 %).
Выявлено, что заболевание чаще всего вызывали
грибковые
ассоциации – 56,7 %, дерматофиты обнару-
жива
лись в 21,7 %, дрожжи – в 17 %, а доля плесневых
грибов была незначительной – 1,6 %.
Наиболее весомыми грибковыми ассоциациями яв-
лялись со
четания дерматофитов и дрожжей (16,6 %), а
также дерматофитов и плесени (11,8 %). В первом слу-чае чаще всего встречалась комбинация грибов рода Candida и
Trichophyton spp. (70,3 %). При сочетаниях
дерматофитов и плесени наиболее распространенной была ассоциация Trichophyton spp. с Aspergillus spp. или penicillum
spp. (70 %). Кроме того, определенное
значение имели сочетания дерматофитов с плесневы-ми и
дрожжевыми грибами одновременно (9,5 %), а
также сочетания дрожжей и плесени (8,4 %).Научной группой, состоящей из ученых разного
профиля
– химиков-органиков, микробиологов, меди-
ков разработаны экологически чистые методы синтеза серии модифицированных терпеноидов на основе при-родных соединений, являющихся основными компо-нентами отечественных скипидаров. Синтезировано 30 новых серосодержащих соединений, 7 из которых проявили высокую фунгицидную активность. Иссле-дования полученных соединений на мутагенность и генотоксичность показали отсутствие у них токсич-ности и мутагенности.
Исследованные вещества проявили высокую про-
тивогрибковую активность широкого спектра дейс-твия и были рекомендованы для «полевых» испытаний на грибостойкость. Результаты «полевых» испытаний соединений, проведенные в соответствии со стандар-тной мет
одикой (ГОСТ 28.206-89, МэК-68-2-10-88),
показали, что все вещества обладают фунгицидными свойствами в отношении стандартного набора грибов и могут быть рекомендованы для противогрибковой обработки поверхностей. Некоторые соединения наря-ду с противогрибковыми, обладают и антибактериаль-ными свойствами, одно из соединений проявило ярко выраженный противовоспалительный эффект.
Таким образом, проведенные исследования показа-
ли, что микозы стоп у больных РТ чаще всего вызваны ассоциациями различного рода грибов. Региональной особенностью на данное время можно считать сниже-ние роли Trichophyton rubrum в этиологической струк-туре заболевания.
Синтезированные и исследованные нами соеди-
нения перспективны в плане применения их для об-работки обуви и некоторых предметов мест общего пользования с целью профилактики распространения грибковых заболеваний, в частности, микозов стоп, а также дальнейшего изучения в целях создания новых лекарственных препаратов.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 464
Проблема трихофитии, вызванная зоофильными
грибами, по-прежнему является одной из актуальных
проблем современной дерматомикологии, в связи с наблюдающимися эпидемическими вспышками ее у людей и эпизоотиями скота в ряде стран. За последнее десятилетие изменились клинические проявления зоо-антропонозной трихофитии.
Целью настоящей работы явилось изучение осо-
бенностей клинической картины нагноительных форм зооантропонозной трихофитии в настоящее время.
Под наблюдением находилось 166 больных инфек-
циями, обусловленными Triсhophyton verrucosum. Для подтверждения диагноза проводилась микроскопичес-кая и культуральная диагностика.
Нагноительные поражения волосистой части голо-
вы типа кериона наблюдались у 111 больных, а у 27 имелись сочетанные формы (нагноительная, инфиль-тративная, поверхностная). У 48 больных были еди-ничные пораж
ения (от 1 до 3), у 63 – множественные,
а у 19 – обширные сливные инфильтраты, занимаю-щие целую область волосистой части головы. Следует также подчеркнуть, что для этого заболевания более характерны крупные, чем мелкие инфильтраты. Очаги с размерами от 1 до 4 см в диаметре имелись только у 7 бо
льных, а у остальных были крупные – от 5 до 18
см в диаметре.
Иногда (у 13 больных) мы наблюдали большие
сливные узловатые или плоские керионы, занимав-шие целый
участок волосистой части головы – висок,
затылок. Наблюдались также гигантские уплощенные инфильтраты величиной до 15 см в диаметре, высотой 2 и 3 см, с обильным гнойным отделяемым. У 27 боль-ных вокруг очень крупного воспалительного узла фор-мировались более мелкие, такого же характера.
У 14 больных, кроме большого очага нагноитель-
ной трихофитии, имелись многочисленные фурунку-лоидные инфильтраты, а у одного из них занимавшие всю волосистую часть головы. У 17 больных отмеча-лось абсцедирование в очагах поражения.
Почти у 1/3 (48 больных) нагноительная трихофи-
тия сопровождалась повышением температуры в на-чале заболевания, в период суппурации или в момент обост
рения процесса. У 30 % больных с распростра-
ненными формами нагноительной трихофитии были харак
терны и другие нарушения общего состояния –
головная боль, слабость, значительные изменения в общем на
лизе крови (лейкоцитоз, ускоренное СОэ).
При этой форме трихофитии также отмечалась весьма заметная реакция со стороны лимфоузлов. У 38 боль-ных были увеличены шейные и заушные лимфоузлы, у 69
– только шейные.
На основании проведенных наблюдений можно
сделать вывод, что нагноительные формы зооантропо-нозной трихофитии являются не редкостью в настоя-щее время и характеризуются клиническим многооб-разием. КЛИНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ НАГНОИТЕЛЬНЫХ
ФОРМ ЗООАНТРОПОНОЗНОЙ ТРИХОФИТИИ
Хисматуллина З.Р., Алиева Г.А., Гафаров М.М., Мухамадеева О.Р.
Башкирский государственный медицинский университет,
Уфа
ДИАГНОСТИКА ОНИХОМИКОЗОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПЦР
Цыкин А.А., Иванов О.Л., Ломоносов К.М.
кафе
дра кожных и венерических болезней лечебного факультета, ММА имени И.М. Сеченова,
Москва
На сегодняшний существующие проблемы в диа-
гностике онихомикозов связаны в первую очередь с трудностью и часто невозможностью установить вид возбудителя. По данным литературы выделить культу-ру гриба из пораженной ногтевой пластинки при они-хо
микозе удается не более, чем в 30–50 % случаев. это
послужило основанием для введения в диагностику современных более чувствительных методов исследо-вания, таких как метод ПЦР .
В России под эгидой Национальной академии ми-
кологии были разработаны и успешно применены в клинических условиях первые генетические зонды для прямой диагностики дерматофитии кожи, волос и ногтей (Сергеев А.Ю. и соавт., 2004). За основу была взята методика, использующая последовательности ДНК-топоизомеразы II, специфичные для отдельных видов дерматофитов. Выделение ДНК из клини-ческих образцов для ПЦР-анализа на дерматофиты проводилось на наборе «Реамикс» с инкубацией в течение 2 ч. при 37°С в лизирующем растворе, амп-лификация проводилась на диагностическом наборе «ТрифАм» (Щербо С.Н., Сергеев В.Ю., Богуш П.Г. и соавт., 2007).
Под нашим наблюдением находилось 88 больных
(49 мужчин, 39 женщин) в возрасте от 18 до 70 лет с выраженными клиническими признаками онихоми-коза. Каждому пациенту проводилось лабораторная диагностик
а в виде КОН – теста, посева и ПЦР-ана-
лиза на грибы рода Tr. rubrum и Tr. mentagrophytes var. interdigitale (самых частых возбудителей дерматофи-тии ногтей).
В результате исследования у 70 (79,5 %)
пациентов обнаружен – Tr. rubrum, у 6 (6,8 %) – Tr.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 465
mentagrophytes var. interdigitale, у 12 (13,6 %) – обна-
ру
жена недерматофитная флора (Candida albicans – у
7 (7,9 %)., Scopulariopsis brevicaulis – 3 (3,4 %), Aspergillus fumigatus – 2 (1,1 %)). Таким образом, в по-давляющем числе случаев основными возбудителями онихомикозов являются Tr. rubrum и Tr. mentagrophytes var.
interdigitale – (86,2 %). При посеве Tr. rubrum и Tr.
mentagrophytes var. interdigitale определялся лишь у 28 из 77
пациентов, что составило – 36,4 %, в то время
как чувствительность ПЦР-анализа на дерматофиты сост
авила – 94,8 %. У 7 (9 %) пациентов с клиничес-
кой картиной онихомикоза микроскопия и культураль-ное исследование дали отрицательный результат, в то время как при ПЦР-анализе на дерматофиты обнару-жен Tr. rubrum.
Полученные нами данные свидетельствуют о том,
что
ПЦР-анализ – эффективный метод лабораторной
диагностики онихомикозов, так как способен выявить основных возбудителей онихомикоза Tr. rubrum и Tr. mentagrophytes var. interdigitale. Высокая чувствитель-ность ПЦР-анализа на дерматофиты превосходит пока-затели микроскопии и посева. Новый метод ДНК-диа-гностики может быть рекомендован в лабораторной практике диагностики онихомикозов.
КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕР АПИЯ ОНИХОМИКОЗОВ С ПРИМЕНЕНИЕМ
АППАР АТНОЙ ОБР АБОТКИ НОГТЕВЫХ ПЛАСТИН
Цыкин А.А., Иванов О.Л., Ломоносов К.М.
кафе
дра кожных и венерических болезней лечебного факультета,
ММА имени И.М. Сеченова,
Москва
эффективность терапии онихомикозов обычно не
превышает 75–80 %. Неудачи в лечении и частые реци-дивы развиваются, как правило, при тяжелых формах онихомикоза, при многолетнем течении заболевания, при выраженном подногтевом гиперкератозе и онихо-лизисе, при вовлечении в процесс матрикса. Частые рецидивы онихомикоза многие ученые связывают с дерм
атофитомой – полостным образованием в ногте,
где длительное время могут находиться жизнеспособ-ные формы возбудителя, причем антимикотические средства практически не проникает внутрь этой полос-ти. На современном этапе наиболее целесообразным представляется использование комбинированных схем терапии с применением системных антимикотиков и удалением пораженных ногтевых пластин и подногте-вого гиперкератоза.
Нами разработан и внедряется в практику комбини-
рованный метод лечения больных онихомикозом, при котором для удаления пораженной ногтевой пластин-ки применяет
ся аппарат «podolog nova», оснащенный
пылесосом, что является очень важным при работе с инфицированным материалом. Технология одобрена и допущена к применению в медицинской практике Минздравсоцразвития РФ. Регистрационное удостове-рение № 2005/1374. Обработку пораженных ногтевых пластин мы проводили по следующей схеме: пациен-там
при значениях КИОТОС до 16 проводилось 2 – 3
обработки, при значениях КИОТОС более 16 проводи-лась обрабо
тка ежемесячно на курс 3 – 4 обработки.
При противопоказаниях к приему системных препара-тов рекомендовано проводилась аппаратная обработка 1 раз в 2 месяца в сочетании с местной противогрибко-вой тера
пией 6 – 7 обработок на курс лечения.
Под нашим наблюдением находилось 210 пациента
(124 мужчин, 86 женщин) в возрасте от 18 до 70, лет с лабораторно подтвержденным диагнозом онихомикоз. Давность заболевания составляла от 1 до 40 лет. Тя-жесть онихомикоза определялась с помощью индекса КИОТОС по 5 основным критериям. Индекс КИОТОС у 33
больных находился в диапазоне 6 – 9, у 122 боль-
ных
– 9–16 и у 55 индекс КИОТОС составил 16–20.
В основной – 1 группе, состоящей из 138 боль-
ных, оценивалась эффективность комбинированной терапии с применением системных антимикотиков орунгала, ламизила и аппаратной обработки ногте-вых пластин
с помощью аппарата «podolog nova». В
основной – 2 группе, состоящей из 32 больных, оце-нивалась эффективность комбинированной терапии с применением местных противогрибковых препаратов и а
ппаратной обработки с помощью аппарата «podolog
nova». В Контрольной – 3 группе, состоящей из 40 пациентов, оценивалась эффективность монотерапии системными противогрибковыми препаратами орун-гал и ламизил.
В основной 1 группе клиническая эффективность
терапии
составила – 92.2 %, микологическая излечен-
ность
– 93,5 %. В контрольной группе клиническая эф-
фективно
сть терапии составила 82,1 %, микологичес-
кая
излеченность – 84,6 %. Во 2 группе с применением
аппаратной обработки и местной терапии клиническая эф
фективность терапии составила – 36,3 %, микологи-
ческ
ая излеченность – 43,7 %.
Полученные результаты свидетельствуют о вы-
сокой эффективности аппаратного метода в терапии онихомикозов. В комбинации с системными противо-грибковыми препаратами метод позволяет повысить эффективность терапии. Аппаратная обработка может служить альтернативным методом лечения больных, у которых по тем или иным причинам невозможно про-вести системную антимикотическую терапию.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 466
Кандидозный вульвовагинит, несмотря на кажущу-
юся простоту и «несерьезность» проблемы, встречает-
ся у
75 % женщин детородного возраста, что обуслов-
лено рядом предрасполагающих факторов, таких как длительный, а иногда и бесконтрольный прием анти-биотиков, кортикостероидов, цитостатиков, оральных контрацептивов, наличием эндокринных нарушений и иммунодефицитных состояний. Поэтому, особо важно проводить адекватную терапию каждого эпизода кан-дидозного вульвовагинита для снижения количества хронических (рецидивирующих) форм.
Для лечения кандидозного вульвовагинита мы
использовали препарат МИКОФЛЮКАН (ФЛУКО-НАЗОЛ) производства фармацевтической компании «Докт
ор Редди’с Лабораторис Лтд» (Индия) – антими-
котический препарат, относящийся к классу триазоль-ных соединений, избирательно действующий на клетку гриба, не оказывая влияния на метаболизм гормонов, исключая развитие гинекомастии, гипокалиемии.
Под нашим наблюдением находилось 59 женщин
в возрасте от 17 до 49 лет, обратившихся с жалобами на ощущение дискомфорта, зуд, жжение в области на-ружных половых органов, умеренные или обильные творо
жистые выделения. этиологический диагноз
подтверждался методом микроскопии мазков, окра-шенных по Грамму (выявление грибов рода Candida с преобладанием вегетирующих форм) при условии ис-ключения ассоциированных урогенитальных инфек-ций мет
одами ПИФ и ПЦР . У 19 (32,2 %) пациенток
диагноз кандидозного вульвовагинита был поставлен впервые в жизни и МИКОФЛЮКАН назначен в дозе 150 мг
однократно, а у 40 (67,8 %) в анамнезе было
несколько эпизодов данного заболевания ( до 4–6 эпи-зодов в год ), поэтому мы назначили им МИКОФЛЮ-КАН в дозе 150 мг в 1 и 7 день. На третьи сутки улуч-шение клинических симптомов заболевания отметили 38 (64,4
%) женщин. На 10 день в случаях острого кан-
дидозного вульвовагинита и на 17 день (спустя 10 дней после последнего приёма МИКОФЛЮКАНА) в груп-пе с рецидивирующим кандидозным вульвовагинитом этиологическое и клиническое излечение наблюдалось у 59
(100 %) пациенток. Побочные действия от приме-
нения данного препарата не наблюдались. Таким обра-зом, использование МИКОФЛЮКАНА в дозе 150 мг однократно при остром кандидозном вульвовагините и в дозе 150 мг в 1 и 7 день при рецидивирующем кан-дидозном вульвовагините продемонстрировало высо-кую этиологическую и клиническую эффективность, высокую комплаентность при отсутствии побочных эффектов и может быть рекомендовано к практичес-кому применению для лечения эпизодов кандидозного вульвовагинита.ЛЕЧЕНИЕ ОСТРОГО И РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО КАНДИДОЗНОГО
ВУ ЛЬВОВАГИНИТА ПРЕПАР АТОМ «МИКОФЛЮКАН»
Шамина Г.Е., Родионов В.А.
ГУз
Мо к оролевский кв Д,
королев
«ИТР АЗОЛ» В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕР АПИИ УРОГЕНИТАЛЬНОГО
ХЛАМИДИОЗА И МИКОПЛАЗМОЗА
Шамина Г.Е., Родионов В.А.
ГУз
Мо «к оролевский кв Д»,
королев
В последние годы отмечается рост инфекций, пе-
редаваемых половым путем и особую актуальность приобретает проблема урогенитального хламидиоза.
В мире ежегодно официально регистрируется бо-
лее 90 млн. новых случаев.
Нерациональное лечение и самолечение приводит к
персистенции Ch. Trachomatis и к хронизации процес-са, что ведет квозникновению осложнений хроничес-кому простатиту, везикулиту, эпидидимиту, сальпин-гиту и др., существенно повышая частоту мужского и женского бесплодия, что подчеркивает социальную значимость проблемы. Очень часто урогенитальный хламидиоз протекает в виде смешанной инфекции с другими возбудителями ИППП: гонококками, трихо-монадами, гарднереллами и микоплазмами.
Урогенитальный уреамикоплазмоз, находящийся
«в тени» хламидийной инфекции, также имеет тен-денцию к хронизации, к возникновению осложнений и также социально значим.
Для лечения этих инфекций применяются мощные
антибиотики широкого спектра действия, разрабаты-ваются и внедряются в практику новые схемы комп-лексного лечения. И если применение в этих схемах иммунотерапии, витаминотерапии, ферментотерапии, физиотерапии и адекватного местного лечения ни у кого не вызывает сомнения то применение антимикотиков в этих схемах вызывает непонимание у многих врачей.
Королевский КВД, являясь базой апробации Ми-
нистерства здравоохранения РФ и участвуя в Програм-мах МЗ РФ и МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского по внедрению новых методик и Схем лечения урогени-тального хламидиоза и микоплазмоза, накопил опреде-ленный опыт по лечению данных инфекций, которым мы и хотим поделиться в данной статье.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 467
Противомикробную терапию мы проводим в стро-
гом соответствии с принципами «рациональной анти-
биотикотерапии»:
– выделение и идентификация возбудителей заболе-
вания и определение их чувствительности к лекарс-твенным препаратам;
– выбор наиболее активного и наименее токсичного
препарата;
– определение оптимальных доз и достаточного
курса антибиотикотерапии;
– своевременное начало лечения;- комбинация антибиотика с другими препаратами
с целью усиления антибактериального эффекта.
Таким образом, соблюдая эти принципы, мы на-
значали мощный антибиотик с широким спектром действия длительным курсом ( до 21 дня при уроге-нитальном хламидиозе для перекрытия 6–8 циклов развития хламидий, и по 14 дней при микоплазмозе), способствуя развитию у некоторых пациентов канди-дозной инфекции (генитальной и экстрогенитальной), а также дисбактериоза кишечника.
В случае же применения антибиотиков на фоне уже
развившегося дисбактериоза кишечника и экстрогени-тальной кандидозной инфекции такая терапия может усилить степень его выраженности. А рядом авторов показано, что наличие экстрогенитальных очагов кан-дидозной инфекции ( в ротоглотке, желудочно-кишеч-ном тракте, складках кожи) нередко является источни-ком инфекции мочеполовых органов.
Поэтому, несмотря на то, что многие авторы реко-
мендуют назначить «антимикотики по показаниям» мы, проанализировав возможные причины развития кандидоза и взвесив все «за» и «против» назначения антимикотических препаратов, пришли к выводу о не-обходимости назначения антимикотиков общего дейс-твия одновременно с антибиотиками в комплексном лечении урогенитального хламидиоза и уреаплазмоза.
В данном контексте нельзя не упомянуть уроге-
нита
льный трихомониаз, т.к. у 40–50 % больных со
смешанной урогенитальной инфекцией встречается трихомонадное носительство, а трихомонада, являясь резервуаром сохранения гонококков, уреаплазм, хла-мидий, ганднерелл, обеспечивая персистенцию этих патогенных организмов во время лечения, приводит к дальнейшему рецидиву заболевания.
Применение противопротозойных препаратов, в
частности метронидозола, по данным некоторых ав-торов,
в 20–40 % наблюдений может способствовать
развитию кандидозной инфекции, что также требует применеия антимикотических препаратов.
Учитывая вышесказанное, мы пришли к необходи-
мости применения в копмлексной терапии урогени-тального хламидиоза и уреаплазмоза одновременно с антибактериальным препаратом антимикотика и про-тивопротозойного препарата, что должно предотвра-тить возникновение дисбактериоза кишечника, канди-дозной инфекции и рецидива основного заболевания.
Далее перед нами стоял выбор антимикотичес-
кого препарата, в спектр действия которого входила Candida
– это итраконазол или флуконазол.В связи с тем, что в последнее время появились
публикации о том, что именно итраконазол имеет са-мый широкий спектр действия в отношении кандид, включающий «non-albicans», а это становится сейчас особо актуально, а также итраконазол способен созда-вать высокую и длительную концентрацию в глубоких слоях влагалища, давая длительный терапевтический эффект, мы остановили свой выбор на итраконазоле.
Из-за сложившейся в последнее время социаль-
но
– экономической обстановки многие пациенты не
могут позволить себе лечиться оригинальным препа-ратом «Орангал», поэтому мы стали искать замену в виде достойного генерика, предпочтительно российс-кого производства.
Задавшись целью поддержать российского произ-
водителя, мы применяли многие генерики, но оста-новились на препарате «Итразол», выпускаемом ЗАО «Вертекс» г. Санкт-Петербург. На наш взгляд «Итра-зол» обладает эффективностью, сходной с оригиналь-ным препаратом, без побочных эффектов и весьма де-мократичной ценой.
Таким образом, для коплексной терапии урогени-
тального хламидиоза и микоплазмоза мы применили иммунотерапию (Лавомакс), витаминотерапию, фер-ментотерапию (Вобэнзим), физиотерапию, адекватное местное лечение, на фоне которых с 8-го дня назначал-ся антибактериальный препарат Фромилид (кларитро-мицин) по 500 мг. 2 раза в день в течение 21 дня при урогенитальном хламидиозе и 14 дней при микоплаз-мозе, антимикотический препарат «Итразол» по 200 мг.х 1 раз в день в течение 7 дней и Клион (проти-вопротозойный препарат), а также «Хилак-форте» по 40 к х 3 раза в сутки для регулирования равновесия кишечной микрофлоры.
Под нашим наблюдением находилось 43 пациента
(29 мужчин и 14 женщин) с осложненными формами урогенитального хламидиоза и микоплазмоза в возрас-те от 22 до 49 лет со сроком заболевания от 2 до 16 лет. эти
ологический диагноз подтвержался комбинацией
следующих методов: ПЦР , ПИФ, ИФА. Бактериоскопию мазков проводили для исключения N. honorrhoeae и вы-явления T. vaginalis. Урогенитальный хламидиоз в виде мо
ноинфекции наблюдался у 11 ( 25,6 % ) пациентов,
хламидийно-уреаплазменная инфекция – у 19 ( 44,2 % )
пациентов, хламидийно – микоплазменная – у 3 ( 7,0 %
) пациентов, уреаплазмы в виде моноинфекции – 7
(16,3 % ), а микоплазмы – у 3 ( 7,0 % ) пациентов.
Топическая диагностика проводилась с помощью
уретроскопмческого, ультразвукового, бимануального и др. методов исследования и выявила, что наиболее часто у мужчин встречается: хронический катараль-ный про
статит – 15 ( 51,7 % ) пациентов, хронический
фолликулярный простатит – 12 ( 41,4 % ), хроничес-кий к
атаральный колликулит – 25 ( 86,2 % ), литтре-
ит
– 21 ( 72,4 % ), а хронический тотальный уретрит
наблюдался у всех мужчин – 29 ( 100 % ).
У женщин наблюдались следующие диагнозы:
уретрит
– 8 (57,2 % ), эндоцервицит – 11 ( 78,6 % ),
бартолинит – 8 ( 57,1 % ), поликистоз яичников – 1 ( 7,1 % ) пациенток.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 468
Побочные действия (небольшая тошнота) во время
лечения отмечены у 1 ( 2,3 % ) пациента, обусловле-
ны применением антибиотика и не тркбовали прекра-щения лечения, т.к. проходили на 2–3-й дни после его приема.
В результате проведенного лечения элиминация
возбудителей ( хламидий, уреаплазм, микоплазм) наблю
далась у 28 ( 96,6 % ) мужчин и 14 ( 100 % )
женщин, клиническое излечение наблюдалось у 27 ( 93,1
%) и 12 ( 85,7 % ) соответственно.
При микроскопическом исследовании мазков гри-
бов рода Candida не обнаружено ни у одного пациента, определилась
смешанная флора 27 ( 93,1 % ) мужчин и
13 ( 92,8 % ) женщин.
Таким образом, применение антимикотического
препарата «Итразол» по 200 мг х 1 раз в день в течение 7 дней в составе комплексной терапии осложненных форм урогенитального хламидиоза и микоплазмоза позволило избежать заведомо ожидаемых последствий массивной антибиотикотерапии в виде нарушения микроценоза влагалища и развития кандидоинфекции и может быть рекомендовано к практическому приме-нению.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К ПРОТИВОГРИБКОВЫМ ПРЕПАР АТАМ ГРИБОВ
РОДА КАНДИДА, ВЫЗЫВАЮЩИХ КАНДИДОЗ КОЖИ И НОГТЕЙ
Шебашова Н.В., Клеменова И.А., Мишина Ю.В.
ФГУ Нижегоро
дский НИквИ,
Нижний Новгород
Под нашим наблюдением находилось 164 паци-
ента (112 взрослых и 52 ребенка) с клиническими признаками поражения кожи и ногтевых пластинок кистей и стоп кандидозной этиологии. Всем пациен-там проводились бактериологическое и бактериоско-пическое исследования. Для селективной изоляции и идентификации дрожжей использовалась среда Кандиселект и колориметрический ферментный тест Ауксоколор.
Рост грибов рода Candida на среде Сабуро обна-
ру
жен у 54,5 % от общего количества наблюдавших-
ся взро
слых пациентов и у 80,8 % детей. В результате
проведенных исследований у 45 % больных получен рост Candida albicans, у 24 %-Candida parapsilosis, у 11 %-Candida tropicalis; у 7 %-Candida famata, у 4,4 %-Candida laurentii. В единичных случаях наблюдался рост редких видов дрожжей: Candida glabrata, Candida inconspicua, Candida zeylanoides, Candida lusitaniae и др. У детей был получен рост только Candida albicans (у 62
% пациентов), Candida parapsilosis и Candida
tropicalis.
Проводилось определение чувствительности по-
лученных колоний грибов рода Candida к антифун-гальным препаратам с помощью набора Фунгитест. Было обнаружено существенное снижение чувстви-тельности Candida spp. к азоловым препаратам (итра-коназолу, флуконазолу, кетоконазолу и миконазолу), которые наиболее широко используются в настоя-щее время в терапии дрожжевых онихомикозов. По нашим данных штаммы C.albicans имели маркеры промежуточной устойчивости или были устойчивы к ит
раконазолу в 18 % случаев, к флуконазолу в 9 %, к
миконазолу к 65 %Среди штаммов кандида не-альбиканс результаты
были следующие: штаммы C.parapsilosis обладали уме-ренной чувствительностью или были нечувствительны к
итраконазолу и к флуконазолу в 26 % случаев, к мико-
на
золу в 68 %; штаммы C.tropicalis имели маркеры про-
межуточной устойчивости или были устойчивы к итра-ко
назолу почти в 30 %, чувствительность к флуконазолу
была сохранена; чувствительность C.laurentii к антими-ко
тикам была умеренной к интраконазолу в 67 % слу-
чаев. Редкие виды сохраняли различную чувствитель-ность: С. famata и С. inconspicua были чувствительны к итраконазолу и флуконазолу; С. famata- не чувствитель-на
к итраконазолу; С. laurentii – умеренно чувствитель-
ны к итраконазолу. Полное отсутствие или снижение чувствительности Candida spp. к лекарственным препа-ратам выявлялось среди больных, получавших в анам-незе генерики без последующего контрольного микро-скопического и культурального исследования.
Всем пациентам, нуждающимся в системной анти-
микотической терапии, назначалось лечение с учетом чувствительности выявленного гриба к определенно-му лекарственному препарату (в большинстве случа-ев к итраконазолу или к флуконазолу). У пациентов с изолированным поражением кожи дрожжевой этио-логии (при кандидозе складок, кандидозных экземах и др.) назначались противогрибковые мази и кремы.
Таким образом, длительное время считалось, что
основным возбудителем дрожжевых пораженияй кожи и ногтей является Candida albicans, однако, в настоя-щее время возрастает роль Candida non-albicans, мно-гие из которых устойчивы к современным системным и местным антимикотикам, что необходимо учитывать при выборе антифунгальной терапии.
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 469
Целью работы явилось проведение анализа распро-
страненности различных видов пародонтопатогенных
бактерий, некоторых грибов, микроорганизмов и гер-песвирусов у больных хроническим генерализованным пародонтит
ом в московском регионе в 2006–2007 гг.
За 2 года нами обследовано 238 пациентов (90 муж-
чин и 148 женщин) с пародонтитом различной степе-ни тяжести. Исследование соскобов зубнодесневых карманов проводилось методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием наборов Научно-производственной фирмы «ГЕНТЕХ» (Москва) в ла-боратории ООО «ДИАСАН» (Москва).
Известно, что относительная частота маркерных па-
родонт
опатогенных микроорганизмов (porphyromonas
gingivalis, prevotella intermedia, Bacteroides forsythus,
Actinobacillus actinomycetemcomitans и Treponema denticola) может сильно различаться в зависимости от применяемых методов исследования, регион Рос-сии и мира. В результате проведенных нами иссле-дований методом ПЦР содержимого зубодесневых карманов 238 пациентов с хроническим генерализо-ванным пародонтитом показано, что Actinobacillus actinomycetemcomitans в
стречалось в 36,13 % (86
человек), prevotella intermedia – 49,58 % (118 чело-
век), p
orphyromonas gingivalis – 65,97 % (157 чело-
век),
Treponema denticola – 70,59 % (168 человек) и
Bacteroides forsythus – 83,61 % (199 человек). Из 114 исследованных в 2007 г. пациентов у 19 обнаружены грибы Candida albicans, у 3 Chlamydia trachomatis, ви-русы э
пштейн-Барра и простого герпеса у 7 и 3 чело-
век, соответственно.
Кроме кандида альбиканс в ротовой области обна-
руживаются и другие грибы рода кандид. Нами разра-ботан и зарегистрирован в МЗСР мультипраймерный диагностический набор реагентов «ТриКанАм» для диагностики candida
albicans, candida glabrata, can-
dida
krusei в одной пробе методом ПЦР . Известно, что
candida
glabrata и candida krusei устойчивы к наибо-
лее распространенным противогрибковым препара-там, поэтому применение данного набора в стоматоло-гии является перспективным.
Выводы: Изучен видовой состав основных пародон-
топатогенов (P . gingivalis , P . intermedia , b.
forsythus, a.
actinomycetemcomitans
и T. denticola) с помощью оте-
чественного набора реактивов, впервые в России раз-работанных и производимых НПФ «ГЕНТЕХ», а также некоторых грибов, микроорганизмов и вирусов среди жителей московского региона с хроническим генера-лизованным пародонтитом в 2006–2007 гг. Показана возможность применения молекулярно-генетических методов для диагностики, контролю за лекарственной терапией и эпидемиологических исследований в паро-донтологии и имплантологии. Разработан набор для диагностики различных типов грибов рода кандида.ПРИМЕНЕНИЕ МОЛЕКУ ЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ
МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ В ПАРОДОНТОЛОГИИ
Щербо С.Н., Садовский В.В., Сергеев А.Ю., Чониашвили Д.З.,
Дё
Д.А., Щербо Д.С., Сергеев Ю.В.
Национальная академия микологии
Российский государственный медицинский университет НИИАМС,
клиник
а «ДеНТА лЬ»,
ооо «ДИАСАН»,
Москва
ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ КУ ЛЬТУР ГРИБОВ ВИДОВ TRICHOpHYTON vERRUCOsUM
И TRICHOpHYTON MENTAGROpHYTEs МЕТОДОМ ИХ ВЫСЕВА НА
ВАРИАНТЫ СУСЛОАГАР А С ДОБАВКАМИ Р АСТВОРОВ УГ ЛЕВОДОВ
Эмнис-Хома О.О.
ГНкИБШ,
киев
По клиническим признакам заболевших трихофи-
тией у разных видов животных практически трудно определить возбудителя рода Trihophyton, которым за-разилась данная группа. В тоже время лабораторным ветеринарным специалистам при поступлении матери-ала необходимо в сжатые сроки определить вид гриба рода Trichophyton, который поразил данную группу животных, чтобы дать рекомендацию практическим ве-теринарным специалистам для выбора метода терапии и профилактики трихофитии путём введения этим жи-вотным доз определённого биопрепарата. С этой целью необходимо выяснить вид возбудителя, который обна-ружен в присланном материале. Различные отечествен-ные и зарубежные исследователи предлагают несколько методов дифференциации грибов рода Trichophyton: по морфологии, с помощью иммунологических реакций, определению ферментативной активности, а также при определении чувствительности к антифунгальным пре-паратам. Особенно большие трудности в дифференци-ации видов грибов вызывают часто встречаемые виды возбудителя трихофитии : Trichophyton vrerrucosum и Trichophyton mentagrophytes.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 470
Нами для этой цели предложен метод дифференци-
ации этих двух видов с помощью определения скоро-
сти роста и других культуральных свойств грибов при выращивании
их на питательной среде с добавкой 5 %
растворов углеводов.
В работе были использованы по два штамма (му-
зейный и производственный) 18–21 дневных куль-тур грибов Trichophyton verrucosum и Trichophyton mentagrophytes, партии суслоагара с добавками девяти 5
% растворов углеводов (фруктоза, глюкоза, мальто-
за, раффиноза, целлобиоза, ксилоза, маннит, дульцит, сорбит) и
без них (контроль). эти партии суслоагара
после стерилизации разливали по пробиркам и чаш-кам Петри и засевали испытуемыми культурами. По-севы выращивали в термостате до 21 дня при темпе-рат
уре +26–28 °С. С 5 дня со времени засева культур
и далее через каждые 3–5 дня проводился визуальный просмотр роста грибов и замер выросших колоний на чашках Петри
При визуальном осмотре посевов испытуемых
культур (всех четырёх штаммов), засеянных на про-бирки с
суслоагаром с добавками 5 % растворов фрук-
тозы и глюкозы, видимый рост регистрировался с 5 дня, а к 14 дню на чашках Петри с этими вариантами питательной среды наблюдались округлые пушистые колонии диаметром до 29 мм тёмно-вишнёвого цвета. 21 дневные колонии этих культур превышали диаметр 31 мм. При микроскопии этих 14 и 21 дневных куль-тур обнаруживали стареющий толстый вакуолеобраз-ный мицелий, небольшое количество макроконидий, хламидоспор и незначительное количество микроко-нидий. 18- дневные культуры Tr.vеrrucosum и 21-днев-ные Тr.mentagrophytes, засеянные на варианты с сус-лоагаром с добавками сахарозы, мальтозы и инулина догоняли в росте к 15 дню (начало роста к 8 дню) куль-туры, засеянные на варианты с добавками фруктозы и глюкозы, образуя на чашках Петри к 15 дню красной пигментации плотные колонии диаметром 18–21 мм ( к 21 дню выращивания они не превышали 23 мм). У производственных штаммов скорость роста и диа-метр выросших колоний (на 2–3 мм) превышали те же показатели засеянных музейных культур. При микро-скопии образцов, взятых от этих производственных культур, наблюдали тонкий септированный мицелий и микроконидии на его веточках (у музейных штаммов выросших микроконидий наблюдалось значительно меньше).
При высеве испытуемых культур Tr.verrucosum на
среде
с добавкой 5 % раствора раффинозы по срав-
нению с ростом культуры Tr.mentagrophytes было ус-тановлено, что на этом варианте питательной среды рост у культур обнаруживается уже на 8 сутки в виде оранжевых колоний с диаметром до 7 мм. У культур Tr.mentagrophytes, засеянных на этот вариант пита-тельной среды, такие показатели регистрируются только к 10–15 дню. К 21 дню по скорости роста и размеру выросших колоний культуры Tr.verrucosum ( 23–27 мм) опережают рост культуры Tr.mtntagrophytes (до 18 мм). Противоположная картина наблюдается у этих двух видов культур высеянных на суслоагар с добавкой
5 % раствора целлобиозы. У культур вида
Tr.mentagrophytes видимый рост оранжевых колоний наблюдался с 8 дня со времени засева ( Д 9 мм), а у Tr.verrucosum только с 12 дня ( не более 10 мм). Осо-бенно разнился их рост к 21 дню (соответственно 16 и 24 мм). При микроскопии образцов этих культур, засе-янных на испытуемых два варианта особых различий не было обнаружено: тонкий септированный мицелий с небольшим количеством микроконидий. На вариан-тах
суслоагара с добавками 5 % растворов ксилозы,
инулина и дульцита скорость роста была незначитель-на (даже к 21 дню роста выросшая культура не покры-вала косяк питательной среды), а на чашках Петри к этому сроку диаметр колоний не превышал 9–11 мм. В поле зрения микроскопа обнаруживались тонкие нити септированного мицелия, на веточках которых выявля-ли очень незначительное количество микроконидий.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ На модифициров
анной питательной среде с до-
бавками
5 % растворов углеводов наибольшую ростко-
вую активность проявили культуры вида Tr.verrucosum при добавк
ах раффинозы, а Tr.mentagrophytes – целло-
биозы. Добавки
этих двух 5 % растворов в суслоагар
являются дифференцирующим фактором между этими двумя видами грибов рода Trichophyton и могут быть использованы в диагностической работе.
РЕЗУ ЛЬТАТЫ ВИДОВОГО МОНИТОРИНГА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ
МИКОЗОВ В МОНГОЛИИ С 1964 ПО 2006 ГОД
Энхтур Я.1, Уранчимэг Ц.1, Намжилмаа Ш.2, Лыкова С.Г. 3
1 Монгольский Государственный Медицинский Университет,
Уланбатор, Монголия
2 Центральный Дерматологический Центр Монголии,
Уланбатор, Монголия
3 Новосибирский государственный медицинский университет,
Новосибирск
Заболеваемость микозами растет в Монголии с
каждым годом. Причины этого роста совпадают с об-щемировыми: активные миграционные процессы, на-копление коморбидного фона среди населения, широ-кое сопутствующей иммуносупрессивной терапии. С 1964 года при прямой помощи специалистов из СССР
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 471
была организована первая микологическая лаборато-
рия и начато исследование видового состава дермато-фитов. С тех пор постоянно ведется микологический и культуральный мониторинг. Установлено, что доля зоофильных грибов и дрожжевой инфекции растет с каждым годом. Монголия скотоводческая страна, и вполне
очевидно, почему в 81,6 % передача инфекции
происходит при непосредственном контакте с живот-ными. Ист
очником заражения в 39,1 % являлся домаш-
ний ск
от (телята, коровы), и в 22,6 % случаев – домаш-
ние животные (кошки, собаки). Выявлено некоторое изменение
позиций ведущих возбудителей – определе-
но, что до 1990 годов ведущими возбудителями гриб-ковых заболеваний кожи и её придатков являлись M. сanis и Tr. violaceum. С 2000-х годов видовой состав грибов из
менился и более 58 % случаев стало связано
с Tr. verrucosum, с этого же года повысилась доля вы-деления Candida
albicans, дойдя в 2006 году до 34.5 %.
Возможно, это связано с тем, что Монголия по-прежне-му является скотоводческой страной с недостаточной обеспеченностью ветеринарной помощью. Еще одним фактором роста микотических заболеваний служит процесс миграции населения из сельской местности в города при недостаточном соблюдении санитарно-гигиенических мероприятий и широком воздействии иммуносупрессивных факторов (антибактериальная терапия, глюкокортикоиды, цитостатики), приводящие к росту числа больных с кандидамикотическими ин-фекциями.
СПЕКТР ВОЗБУДИТЕЛЕЙ И ВИДОВАЯ ХАР АКТЕРИСТИКА ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ
РОДА КАНДИДА ПРИ ОНИХОМИКОЗАХ В ПРИМОРСКОМ КР АЕ
Юцковский А.Д. , Кулагина Л.М., Паулов О.И.
кафе
дра дерматовенерологии с курсом медицинской косметологии Г оУ вПо
вл
адивостокский государственный медицинский университет,
владивосток
Грибковые инфекции являются важной проблемой
клинической микологии и составляют значительную часть инфекционной патологии человека. Среди них наиболее распространенными являются онихомико-зы. При этом число таких больных во всем мире и в Российской Федерации ежегодно увеличивается, что некоторые специалисты называют эту ситуацию пов-семестной эпидемией. По данным разных авторов, частота онихомикоза в популяции составляет от 2 до 14
%. Однако истинная картина распространеннос-
ти забо
левания традиционно считается большей – не
менее 10–20 % населения. В России количество боль-ных онихомикозом варьирует от 4,5 до 15 миллионов человек. По результатам анализа заболеваемости по Приморскому краю, на регистрируемый онихомикоз прихо
дится около 7 % в год от всех дерматозов.
Возросший интерес к вопросам микотической ин-
фекции, с одной стороны, объясняется неуклонными темпами ро
ста заболеваемости, с другой – появлением
в последнее время на отечественном рынке большого количества антимикотических препаратов. Несмот-ря на успехи фармацевтической промышленности в создании современных эффективных антимикотиков число больных онихомикозом не убывает, а увеличи-вается.
Известных возбудителей онихомикоза принято
делить на три группы: дерматомицеты, дрожжевые грибы ро
да Candida и плесневые – грибы недермато-
мицеты. По результатам лабораторных исследований публикуются материалы, которые свидетельствуют о тенденции к сокращению доли выделенных дерма-томицетов и нарастанию долей дрожжевых и плесне-вых грибов в этиологии онихомикозов. В последнее десятилетие характерной чертой инфекций является полимикробность, в результате чего утрачивается их специфичность. Наличие смешанных форм затруд-няет диагностику и лечение, что обусловливает рост частоты рецидивов и реинфицирования. Грозным ос-ложнением нелеченного микоза является депрессия клеточного иммунного ответа, а также формирование аутоиммунного ответа. И, наконец, неадекватная те-рапия может привести к микогенной аллергии в виде «аллергидов», микробной экземы и других аллерги-ческих реакций.
Главными возбудителями онихомикоза считаются
дерм
атомицеты, на их долю приходится от 60 до 90 %
этиологии. В настоящее время увеличилась заболева-емость ногтевых пластинок вызываемая дрожжепо-добными грибами рода Candida. Появились данные о некотором снижении чувствительности дрожжей к современным системным антимикотикам, что затруд-няет лечение. Залогом эффективного лечения онихо-микоза является точная идентификация возбудителя и выбор препарата на основании чувствительности к антимикотическим препаратам.
Целью настоящего исследования стало изучение
спектра возбудителей и видовой характеристики пред-ставителей рода Candida у больных онихомикозом стоп и кистей.
Нами проанализированы результаты микологичес-
кого обследования 357 пациентов с онихомикозом стоп и кистей, обратившихся в микологическую лаборато-рию КККВД, являющейся клинической базой кафедры дерматовенерологии с курсом медицинской космето-логии г. Владивостока за период 2005–2006 г.г.
Материалом для бактериоскопического и бактери-
ологического исследования служили соскобы с ногте-вых пластинок стоп и кистей. Выделенные культуры
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 18 472
идентифицировали до вида. После получения чис-
той дрожжевой культуры на среде Сабуро проводили идентификацию до вида с помощью колориметри-ческого ферментного теста Auxacolor 2 (BIO-RAD, Sanofi Diagnostics p
asteur), основанный на утилизации
сахаров различными видами грибов и позволяющий идентифицировать около 30 видов дрожжей. Всего при микологическом исследовании было выделено 357 культур разных грибов. Распределение общего ко-личества грибов было по 3 группам: дерматомицеты, грибы рода Candida, плесневые. Частота выделения дерм
атомицетов составила 37,3 %, как моно-инфек-
ция
– 7,3 %, как микст- 30 %, с грибами рода Candida –
27,7 %, с плесневыми – 2,3 %. При анализе выделяе-мости
грибов рода Candida мы получили 57,1 %, как
моно-инфекция – в 51,3 % случаев, как микст – два вида Candida 2 %, плесневыми – 3,8 %. Плесневые культуры распределились соответственно – 5,6 % и 6,1 %. Полученные результаты нашего исследования свидетельствуют о том, что грибковые поражения ног-тевых пластинок могут быть вызваны в большей мере грибами рода Candida, чем дерматомицетами или их ассоциациями. Их соотношение в структуре заболева-емости онихомикозами различными исследователями оценивается по разному. При изучении частоты встре-чаемости монокультур и микст-форм полученные ре-зу
льтаты ( моно – 64,1 %, микст – 35,9 %) свидетель-
ствуют о возросшей доле микст-форм. Недооценка возрастающей роли микст-микотической инфекции, а она мо
жет достигать 51 % по данным некоторых ав-
торов, не позволит врачу сделать правильный выбор при лечении онихомикоза. Мы дополнительно изучи-ли видовую этиологическую структуру онихомикоза в 3 основных группах его возбудителей. Для этого мы рассматривали все полученные 357 культуры, иден-тифицированные до уровня вида без учета формы ( моно- или микст). Оказалось, что в 1 группе дерма-то
мицетов tr. rubrum – составил 31,1 %, tr.interdig.
var.mentagr.- 6,2 %.Во 2 группе (Candida spp.) из 183 культур после идентификации до вида получили сле-дующие данные:
С. parapsilosis –50,8 %, С.tropicalis –
31,1 %, C.albicans – 10,4 % С.guillierm. – 7,7 %. В 3 группе плесневых грибов из 357 культур было 10,1 %, а именно: fusarium solani- 1,7 %, Trichosporon spp –
7,8 %, Scopular. brev. – 0,3 %, Acremonium –0,3 %.
С целью изучения влияние локализации на этиоло-
гическую структуру онихомикоза мы проанализирова-ли культуры грибов, полученные с ногтевых пласти-нок стоп и кистей.
Соотношение культур от локализации было следу-
ющим: стопы
– 71,4 %, кисти – 28,6 %.
Так, при исследовании ногтевых пластинок стоп в
45,9
% определены дерматомицеты (как моно – 21,4 %),
грибы Candida spp. в 48,6 % ( как моно – 84,3 %), пле-сени
– в 5,5 %. При этом в 78,6 % зарегистрирована
микст- инфекция дерматомицетов с Candida spp. Ос-новные группы грибов выделенные из пораженных ногтей кистей,
составили: дерматомицеты – 16,7 %
(как моно – 5,9 %, микст с Candida spp. – 94,1 %), кандидомицеты – 76,5 % (моно – 74,5 %), плесневые –6,8 %.
Данные нашего исследования свидетельствуют о
том, что удельный вес дерматомицетов и остальных групп возбудителей онихомикоза может сильно разли-чаться. Сегодня уже трудно утверждать о дерматоми-цетах как о единственных или единственно значимых возбудителях онихомикоза. Встречаемость дерматоми-цетов, кандидомицетов и плесневых грибов, по нашим данным, варьировала в зависимости от локализации онихомикоза. Кроме того, наблюдались изменения и в проценте выделенных культур всех видов, увеличение кандидамицетов, уменьшение дерматомицетов, увели-чение их ассоциаций. Итак, грибковые поражения ногте-вых пластин при обследовании пациентов Приморского края могут быть вызваны различного вида грибами или их ассоциациями. Региональной особенностью можно считать регистрацию преимущества недерматомицетов в этиологической структуре онихомикозов.
Таким образом, чтобы повысить эффективность
этиотропной терапии, до начала лечения необходимо провести видовую идентификацию грибов рода Can-dida spp. Такой подход может гарантировать успешное лечение и предотвратить рост частоты рецидивов и ос-ложнений.
ГРИБЫ РОДА malaSSezia В эТИОЛОГИИ УГРЕВОЙ БОЛЕЗНИ
Юцковский А.Д., Рахманова С.Н., Петрова Л.И.
владивосток,
Якутск
В патологии человека этиологическую роль играет
ограниченное число видов рода кандида, при резком доминировании C. albicans. Вместе с тем недостаточ-ное внимание придается еще одному виду дрожже-подобных
липофильных грибов – роду Malassezia.
Чрезвычайная изменчивость этих грибов in vivo и трудности их культивирования затрудняли на протяже-нии многих лет классификацию и определение их роли в этиологии целого ряда весьма распространенных де-рм
атозов. Между тем при практически 100 % обсеме-
ненности населения этими грибами, скорее всего в ре-зультате одностороннего подхода ряда исследователей к понятию «здоровая кожа» человека, сформировалось не совсем правильное мнение о грибах Malassezia как о единственных представителях дрожжеподобных гри-бов, составляющих нормальную микрофлору кожи че-ловека. Ограниченность подхода, по нашему мнению, состоит в том, что игнорируется возможность наличия
Дерматомикозы. кандидоз слизистых оболочек 473
у обследуемых «косметических» изменений – таких
как перхоть, комедоны и некоторые другие проявления пат
ологии. эти весьма нежелательные для современ-
ной клинической медицины моменты в последние годы успешно преодолены для целого ряда заболеваний малассезийной природы, таких как разноцветный ли-шай, питириаз волосистой части головы, себорейный дерматит кожи головы и туловища у взрослых и детей. Бесспорно, что вышеперечисленными формами про-явления малассезийной инфекции не исчерпываются. Тем более, что диагностика и лечение лишь «части» дерматоза не соответствует требованиям современной медицины. А изменяющиеся условия существования человеческой и микробной популяций, напряженность экологических условий, глобально меняющийся кли-мато–погодный фон, трудности социально–экономи-ческой и бытовой обстановки и связанные с ними де-прессивные состояния населения вновь представляют благоприятную среду для развития самой разной па-тологии, в том числе и угревой болезни (УБ) с тяже-лым, а также рефрактерным течением. Исследователи все чаще информируют об особенностях современно-го течения УБ, а в практике дерматолога все больше регистрируются осложненные формы УБ. Выяснение причин такого явления и, в частности, возможной роли разных видов условно–патогенных микроорганизмов в развитии и течении УБ стало целью нашего исследо-вания. Изучен микробный состав угревых элементов 160 бо
льных УБ: культуральным методом – 240 проб,
микроскопическим – 225 мазков–отпечатков с кожи вокруг угревых высыпаний, окрашенных методом Грамма. Высеяно и идентифицировано 315 штаммов бактерий и грибов, отнесенных к 14 родам и 34 видам. Лидирующее положение заняли грибы рода Malassezia (29,5
%) . Остальная микрофлора заняла следующий,
по убывающей, ранговый ряд: грамположительные кокки
(25,4 %), грибы рода кандида (24,1 %), p.acnes
(15,1 %), энтеробактерии (5,1 %), p.aeruginosa (0,3 %),
Clostridium spp. (0,3 %). В мазках – отпечатках в 100 % обнаружены грибы рода Malassezia, чаще они выяв-лены в угревых высыпаниях с кожи лица у женщин в в
озрасте 20 – 29 лет (6,4 %), и у мужчин в 18 – 19
лет (3,1 %). Как правило, Malassezia spp. выявлялись в ассоциативных вариантах с другими видами бакте-рий, грибов и с Demodex folliculorum в активной фазе в зависимости от тяжести УБ. Массивность обсемене-ния штаммами грибов в 101–103 КОЕ/см2 определя-лась при
легкой степени УБ; в 103–105 КОЕ/см2 – при
средне тяжелой, а при тяжелой и очень тяжелой она равнялась 105–107 КОЕ/см2. А ассоциативная форма Malassezia spp.
с энтеробактериями, p. acnes и клост-
ридиями инициировала очень тяжелую УБ в дозе 103 КОЕ/см2.
Итак, в результате исследования у больных УБ
выявлен широкий спектр морфологических форм ус-ловно
– патогенной микрофлоры с доминирующим
значением липофильных грибов рода Malassezia. В этой связи при проведении комплексной терапии УБ целесообразно включать топические антимикотичес-кие препараты широкого спектра действия.
ПРИМЕНЕНИЕ КРЕМА ТЕРБИНАФИНА В ЛЕЧЕНИИ КЕР АТОМИКОЗОВ
Якубович А.И., Корепанов А.Р., Чуприн А.Е.
ГоУ в
По Медицинский университет,
Иркутск
Изучение патогенеза и разработка эффективных
методов терапии разноцветного (отрубевидного) ли-шая (РЛ) не теряют своей актуальности. Несмотря на низкую контагиозность гриба Pityrosporum orbiculare
заболевание имеет достаточно высокую распростра-ненность среди населения. Трансформация сапрофит-ной формы в патогенную или первичное инфицирова-ние происходит на фоне патологических изменений клеточного иммунитета и повышенной потливости.
Клинико-экспериментальные данные применения
«Тербизила» при различных формах микозов, в том числе при РЛ, явились теоретической предпосылкой для проведения настоящего исследования.
В группу исследования вошли 32 больных с диагно-
зом РЛ, подтвержденным микроскопическим исследо-ванием чешуек кожи, осмотром очагов поражения под лампой Вуда и пробой Бальцера.Все больные получали препарат «Тербизил» в виде
1
% крема тербинафина, который представляет собой
аллиламин и обладает широким спектром противо-грибкового действия. «Тербизил» наносили 1–2 раза в день на пораженные участки кожи тонким слоем и слегка втирали. Продолжительность лечения соста-вила 2 недели. В качестве профилактики проводилась дезинфекция нательного и постельного белья, а также коррекция потливости.
Клиническая эффективность терапии с использова-
нием «Тербизила» наблюдалась у всех пациентов, одна-ко у 2 больных отмечался рецидив заболевания, кото-рый потребовал назначения дополнительного лечения.
Таким образом, крем «Тербизил» обладает выра-
женным противогрибковым действием, хорошей пе-реносимостью и может быть использован в лечении кератомикозов.
Пециломикоз – новый вид системного микоза, ха-
рактеризующийся полиморфизмом клинических про-
явлений с поражением одного или нескольких органов и, прежде всего, кожи, легких, печени, сердца (Ахуно-ва А.М. и Шустова В.И., 1989; Naidi J and Singh SM, 1992; G.S.
de Hoog and J. Guaro, 1995; pastor fJ and
Guaro, 2006).
Проведено комплексное обследование 92 боль-
ных бронхиальной астмой в возрасте от 18 до 80 лет, включающие аллерго-иммунологические, клинико-ла-борат
орные и микологические исследования (м – 23 и
ж – 69). Среди них у 36 % больных выявлено наличие кожных проявлений в виде локализованного или рас-пространенного поражения на фоне активации пецило-микозной инфекции в крови. Наиболее часто отмечено появление буллезных высыпаний под твердой покрыш-кой в области дистальных отделов конечностей или эритематозных и сквамозных высыпаний в области внутренних или наружных поверхностей локтевых и коленных суставов, за ушными раковинами. В мазках- отпечатках или биопсийном материале, полученных с пораженных поверхностей кожи, среди клеточного со-става воспалительной реакции, представленной эози-нофилами, лимфоцитами, плазматическими клетками и единичными нейтрофилами обнаружено присутс-твие с
ферул гриба рода paecilomyces. Посев крови на
питательную среду Сабуро выявлял рост грибов рода paecilomyces видов
p.variotii или реже p . lilacinus.Раздел 19
ОППОРТуНИСТИЧЕСКИЕ И ИНВАзИВНыЕ МИКОзы.
МИКОзы В ОНКОЛОГИИ, ПЕДИАТРИИ
И
СПЕцИАЛИзИРОВАННОй КЛИНИКЕ
КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ И МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАР АКТЕРИСТИКА
ДЕРМАТОРЕСПИР АТОРНОГО СИНДРОМА ПРИ ПЕЦИЛОМИКОЗЕ
Ахунов В.М., Ахунова А.М
Полик
линика № 204 ЮА о,
Москва
ПЕЦИЛОМИКОЗ. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ
Ахунова А.М.
Поликлиника № 204 ЮА о,
Москва
Пециломикоз – новая нозологическая единица микоза, введенная Baker в 1971 г. на основании имеющихся
сообщений о поражении человека и животных грибами рода paecilomyces. Остается до настоящего времени
малоизученным видом системного микоза. Повсеместное распространение грибов рода paecilomyces в почве
различных географических зон определяет массовую инфицированность ими населения земного шара. Однако использование рутинных методов выделения грибов из патологического материала от больных затрудняет осве-щение данного вопроса (Ахунова А.М.,1991).
В рамках общепринятого диагностического обследования больных с аллергическими заболеваниями с 2001
по 2002 гг. на базе КДЦ № 1г. Москвы, а с 2003 по 2007 гг. на базе городской поликлиники № 204 ЮАО г. Москвы у каждого первичного больного проводились дополнительные исследования на выявление гемотропной инфек-ции диморфными
грибами рода paecilomyces (всего 2100 исследований). Проведенное лабораторно-эпидемиоло-
гическ
ое исследование выявило тотальную инфицированность обследованных лиц грибами рода paecilomyces,
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 476
среди которых доминирует вид paecilomyces variotii
Bainier (1907). Клинические наблюдения и экспери-
ментальные исследования, проведенные на территории Узбекистана и Российской Федерации с 1979 по 2007 гг.
показали следующее: грибы рода paecilomyces об-
ладают диморфизмом и являются возбудителем нового вида врожденной гемотропной инфекции, контролиру-емой системами неспецифического и специфического иммунитета, состоятельность которых обусловливает фазы носительства или активации пециломикозной инфекции в крови. Клинические проявления пецило-микоза полиморфны, что определено, прежде всего, генерализованным распространением грибной инфек-ции, а так же типами иммунных реакций, реализую-щихся в процессе сопротивления возбудителю. Внут-риклеточный цикл паразитирования тканевых форм грибов ро
да paecilomyces не позволяет достичь их
полной элиминации из организма хозяина. Наиболее часто зафиксированы проявления в форме аллергичес-ких заболеваний, в том числе в виде бронхиальной ас-тмы. Среди факторов, подавляющих состоятельность иммунного контроля и провоцирующих переход пе-цилоносительства в клинически выраженный пецило-микоз, доминируют острые и хронические вирусные инфекции, стрессовые воздействия. По данным кли-нических наблюдений и микологических исследова-ний за период с 2003 по 2007 гг., проведенных на базе городской поликлиники № 204 ЮАО г. Москвы, каждая сезонная вспышка ОРВИ провоцирует от 6 до 15 слу-чаев первичного заболевания острым обструктивным бронхитом или бронхиальной астмой пециломикозной эт
иологии. Использование метода экспресс – диагнос-
тики пециломикоза ( патент № 2287163, 2005 г.РФ) в ка-честве дополнительного обследования вышеуказанной категории больных способствовало их своевременному диагностированию и, в рамках общепринятого лечения, проведению этиотропного лечения системными и инга-ляционными антимикотиками. Обратное развитие об-структивного синдрома наступало на 3–4 день от начала лечения и полностью исчезало у лиц с нормально функ-ционирующей иммунной системой. У лиц с возрастной инволюцией тимуса (старше 40 лет) или наличием ИДС отмечены повторные рецидивы заболевания.
В свете представленных материалов организация
противопециломикозной помощи населению является актуальной проблемой современной микологии.
АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ У ДЕТЕЙ,
АССОЦИИРОВАННЫЕ С ГРИБКОВОЙ СЕНСИБИЛИЗАЦИЕЙ
Балаболкин И.И., Ибоян А.С., Рылеева И.В., Тюменцева Е.С., Горюнов А.В.
Научный центр здоровья детей РАМН,
Москва
Цель работы – изучить значение сенсибилизации
к грибам в развитии аллергических болезней органов дыхания у детей и эффективность иммунотерапии при этих заболеваниях
Материалы и методы. Обследовано 163 ребенка
с аллергическими заболеваниями органов дыхания (бронхиальная астма, аллергический бронхит, дермо-респира
торный синдром) из них у 108 детей (66,8 %)
была выявлена сенсибилизация к аллергенам грибов. У 75 детей с подтвержденной аллергией к грибам имела мест
о бронхиальная астма, у 20 – аллергический брон-
хит, и у 14 больных сочетание бронхиальной астмы и атопического дерматита. Проводимое обследование па-циентам включало оценку данных аллергологического анамнеза, постановку кожных проб с аллергенами и в том числе с аллергенами грибов, определение уровня общего и специфических IgE, ЦИК в сыворотке кро-ви, секреторных IgA в назальном секрете, показателя РБТЛ (реакция бластной трансформации лимфоцитов) на ФГА (фитогемагглютинин).
Результаты. По данным кожного тестирования сен-
сибилизация к аллергенам Alternari tenius, Rhizopus ni
gricans, fusarium oxysporum, Aspergillus flavus, Candida
albicans была выявлена соответственно у 47,9 %, 44,8 %,
39,3 %, 37,0 % и 32,5 % детей с аллергическими болез-
нями органов дыхания. У большинства детей на вво-димые при кожном тестировании аллергены грибов отмечалось развитие кожной реакции по немедленному ти
пу (в 52,3 – 71,8 % случаев). У 81,4 % больных была
обнаружена поливалентная сенсибилизация к грибам. Наиболее часто выявлялась сочетанная сенсибилизация к грибам рода Alternari tenius и Candida albicans. Спе-ци
фические IgE к аллергенам penicillium, Aspergillus и
Candida были выявлены соответственно у 11,0 %, 9,2 %
и 14,7 % обследованных детей. У 28 (25,9 %) наблюда-
емых детей при аллергическом обследовании была об-наружена сочетанная сенсибилизация аллергенами гри-бов, домашней пыли, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, эпидермальными, пищевыми и бактериальными аллергенами.
У детей с аллергическими заболеваниями органов
дыхания наблюдается повышение уровней IgE, IgG, ЦИК в сыворотке крови, снижение абсолютного и относительного количества лимфоцитов, Т-лимфо-цитов в периферической крови, РБТЛ, что указывает на развитие нарушений в гуморальном и клеточном звене иммунитета. При сенсибилизации к аллергенам плесневых грибов в сравнении с больными, у кото-рых была выявлена изолированная сенсибилизация к аллергенам домашней пыли, обнаруживается бо-лее высокое содержание IgG, ЦИК в сыворотке кро-ви и более низкие значения показателей клеточного иммунитета. Бронхиальная астма у детей, ассоции-рованная с сенсибилизацией к плесневым грибам,
оппортунистические и инвазивные микозы… 477
чаще развивалась при проживании в сырых жилых
помещениях и характеризовалась более тяжелым течением болезни и обострениями в сырую и влаж-ную погоду, после приема продуктов, содержащих грибы, при лечении антибиотиков пенициллинового ряда. У детей при бронхиальной астме и дерморес-пираторном синдроме эндоназальная специфическая иммунотерапия аллергенами плесневых грибов была кл
инически эффективна у 65,2 % больных; благопри-
ятное влияние ее на течение указанных заболеваний сопровождается снижением уровня ЦИК в сыворотке крови и повышением содержания секреторного IgA в назальном секрете.
Применения Т-активина и Тимогена при бронхи-
альной астме у детей, ассоциированной с сенсибили-зацией к грибам, способствовало повышению эффек-тивности соо
тветственно у 76,1 % и 71,4 % больных.
Выводы: 1. Сенсибилизация к грибам является отяг-
чающим течение болезней органов дыхания фактором. 2. Применение методов иммунотерапии способствует повышению эффективности лечения грибковой брон-хиальной астмой у детей.
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ АКТИНОЛИЗАТА ПРИ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ
АКТИНОМИКОЗОМ СЛЕЗООТВОДЯЩИХ ПУТЕЙ
Белоглазов В.Г., Атькова Е.Л., Сидорова М.В.
ГУ НИИ Глазных болезней РАМН,
Москва.
В последнее годы врачи – офтальмологи в своей
практике все чаще встречаются с заболеваниями, обус-ловленными
условно – патогенными микроорганизма-
ми, в том числе и грибами. Грибы все чаще становятся одной из причин заболеваний слезоотводящих путей, поражая в основном слезные канальцы (грибковый ка-наликулит), слезный мешок (грибковый дакриоцистит) и носослезный проток (грибковый дакриостеноз).
Актинолизат представляет собой свежеприготов-
ленный, стабилизированный фильтрат культуральной жидко
сти самолизирующихся актиномицет. это естес-
твенное для организма вещество, согласно различным источникам, оказывает иммуномодулирующее влия-ние на организм больного при актиномикозе. Изучив патогенез и клинические проявления актиномикоти-ческого поражения слезоотводящих путей, мы пришли к выводу о необходимости комплексного лечения с применением актинолизата.
Комплексное лечение, включающее актинолизат,
проведено нами 11 пациентам (10 женщинам и 1 муж-чине). Актинолизат назначался по 3 мл внутримышеч-но 2 раза в неделю, курс лечения 10–20 инъекций. От-мечена хорошая переносимость препарата, побочные эффекты не наблюдались. У 2 больных получивших лечение на ранних стадиях заболевания было отме-чено полное выздоровление. 9 пациентам лечение ак-тинолизатом проводилось после хирургического вме-шательства. У 7 больных клиническое выздоровление наступило в максимально короткие сроки, у 2 больных отмечено улучшение, однако полного выздоровления не наст
упило. это может быть связано с проведением
не полного курса лечения актинолизатом по просьбе больных. Рецидивов заболевания у пациентов не обна-ружено. Срок наблюдения от 6 до 12 мес.
Лечение актиномикотических заболеваний слезо-
отводящих путей чаще начинается на поздних стадиях заболевания. К сожалению, недостаточная осведом-ленность
врачей – офтальмологов о грибковых забо-
леваниях в офтальмологии приводит к длительной терапии антибиотиками и кортикостероидами, что за-трудняет дальнейшее лечение.
Проведенные исследования подтвердили эффектив-
ность применения актинолизата в комплексном лече-нии актиномикотических поражений слезоотводящих путей. Применение актинолизата в начальной стадии заболевания оказывается значительно эффективнее и может привести к выздоровлению без хирургического этапа лечения.
Мы считаем необходимым дальнейшее активное
внедрение актинолизата в клиническую практику врача
– офтальмолога в комплексном лечение акти-
номикотических поражений слезоотводящих путей и дополнительное изучение продолжительности инди-видуальных курсов лечения.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 478
Актуальность. Профессиональная деятельность
сотрудников органов внутренних дел (ОВД) с пози-
ции охраны труда относится к категории опасных профессий (Мягких Н.И.,2007). Под особыми усло-виями профессиональной деятельности понимается средовые условия выполнения оперативно-служебных и служебно-боевых задач, а также осуществление слу-жебной деятельности в условиях чрезвычайного поло-жения, при ликвидации последствий стихийных бедс-твий, техногенных катастроф, и других чрезвычайных ситуациях, сопровождающихся психофизической нагрузкой. Микробное обсеменение кожи человека, в частности плесневые и кандидозные составляющие, может проявлять свою патогенную сущность под дейс-твием неблагоприятных условий. Возникновение де-рматомикозов обусловливается не только активностью возбудителя и состоянием макроорганизма, но и усло-виями питания, степенью обеспеченности организма витаминами, санитарным режимом, гигиеническими навыками, благоустройством труда и быта, которые нередко бывают нарушенными у лиц, выполняющих различные задачи в системе ОВД.
эти
ология. Основные возбудители – плесневые
грибы рода Aspergillus, дрожжеподобные грибы рода Candida, являющиеся постоянными обитателями кожи и слизистых оболочек, при определенных условиях, при-обретающих патогенные свойства, могут вызвать пора-жения органов и систем человека. Кандидозы на коже вс
тречаются у 5–20 % пациентов, на ногтевых пластин-
ка
х – у 50 %, в полости рта –16–37 %, в носовой полос-
ти –
у 1 %, кишечнике –25–90 %, дуоденальном содер-
жи
мом – у 10–65 %, в ушных каналах – у 10–65 %, в
моче –у 10–78 % обследованных (Суколин Г.И., с соавт.,
1996). В составе вагинальной флоры у небеременных же
нщин кандидозоносительство колеблется от 14 %
до 24 %, а среди беременных – от 32 % до 43 % (Мо-
нах Л.И., 1990). Трансформация грибов из безобидных комменсалов в агрессивные возбудители происходит в результате нарушения барьерных механизмов и сниже-ние защитных сил заболевшего, что обусловлено разно-образными экзогенными и эндогенными состояниями. Из экзогенных воздействий наибольшее значение име-ют: микротравмы и химические повреждения, не только открывающие ворота для инвазии грибов, но и наруша-ющие защитную мантию кожи; повышение влажности и температуры, приводящее к мацерации кожи; побоч-ные действия антибиотиков, препаратов имидазола, ци-тостатиков, кортикостероидных гомонов, в том числе и при местном применении, антидиабетических средств, оральных контрацептивов, хронические отравления ни-котином, алкоголем и наркотиками; загрязнение окружа-ющей среды, повышение радиационного фона; др. фак-торы, снижающие иммунитет (Кунельская В.Я., 2001). К заболеваниям, способствующим появлению микоза относят: сахарный диабет, заболевания крови и желу-дочно-кишечного тракта, иммунодефицитные состоя-ния и др. Следует учитывать роль аллергии в патогенезе заболевания, поскольку грибы рода Aspergillus и Candida обладают выраженными аллергенными свойствами. К уникальным свойствам дрожжеподобных грибов мож-но отнести то, что они хорошо переносят высушивание, замораживание и неприхотливы к питательным средам. Таким образом, в патогенезе паразитарных заболеваний необходимо учитывать вид организма, среду обитания и реакцию макроорганизма.
По данным разных авторов удельный вес отомико-
зов у взрослого населения среди отитов другой этиоло-гии со
ставляет 18,6 %. В структуре отомикозов наибо-
лее част
о (60–62,8 %) поражается наружный слуховой
проход (Белоусова Т.А., 1997).
Под нашим наблюдением находилось 152 больных
отит
ами, среди которых у 27 (17,8 %) регистрировал-
ся отомикоз. Больные жаловались на боль и заложен-ностью уха, мокнутие кожи и выделения из наружного слухового прохода, головную боль. При отоскопии на-блюдалась гиперемия кожи наружного слухового про-хода с выраженным отеком и мацерацией кожи.
При осмотре у 1 больного была обнаружена ми-
котическая опрелость между пальцами стоп, у дво-их
– кандидоз межягодичной складки, еще у одного
пациента – кандидозная паронихия. Случайной наход-кой было выявление высокого содержания дрожжевых колоний во второй порции при дуоденальном зонди-ровании.
В четырех случаях микроскопическая диагностика
не проводилась, однако, пациенты имели классические проявления, свойственные аспергиллезной инфекции: отит с поражением кожи наружного слухового прохода в виде гиперемии, инфильтрации, наслоений чешуйко-корок, сопровождающихся сильным зудом, снижением слуха, повышенной чувствительностью при дотрагива-нии до слухового прохода и ушной раковины. В анамнезе у одного больного имелся хронический бронхит с еже-годными обострениями и несистематическим приемом ан
тибиотиков, у троих – хронический пиелонефрит.
Поражения ногтей первых пальцев стоп, с умеренным гиперкератозом дистальной части, серовато-желтой ок-раски имело место у двоих больных. Оценка поражения ногтевых пластинок, проведенная с помощью КИОТОС составила 6,7 баллов, что свидетельствовало о необхо-димости назначения системной терапии.
Кр
оме того, 17 пациентов(63 %) переболели ОРВИ,
один перенес острый гайморит и находился на стаци-онарном лечении в городской больнице. После про-ОТОМИКОЗЫ У ПАЦИЕНТОВ: СИСТЕМА ОРГАНИЗАЦИИ
ДИАГНОСТИКИ, ЛЕЧЕНИЯ И РЕАБИЛИТАЦИИ
Бунакова Л.К.1, Егорова В.В.1, Файзуллина Е.В.2
1 Медико–санитарная часть Министерства внутренних дел республики Татарстан
2 ГоУ вПо казанский Государственный медицинский университет Мз и Сз России,
казань
оппортунистические и инвазивные микозы… 479
веденной терапии системными противогрибковыми
препаратами – триазолами (флуконазол, итраконазол),
алиламинами (ламизил, термикон), и местной терапии –
препараты на основе азольных соединений (клотри-мазол, миконазол, кандид), алиламинов (раствор эк-зодерила, крем термикон), раствор хлорнитрофенола (н
итрофунгин) – состояние больных с отомикозами
улучшилось, восстановилась их трудоспособность.
Выводы. 1) На первом этапе обследования паци-
ента врачом общей практики должны быть выявлены клинические проявления микозов кожи и слизистых оболочек.
2).На основании клинико-лабораторной диагнос-
тики необходимо проводить мониторинг за группой пациентов, имеющих осложненный преморбидный фон: часто болеющие пациенты, лица, имевшие в анамнезе антибиотикотерапию по поводу хроничес-ких соматических заболеваний, одонтогенной и ЛОР-патологий.
3).При системной терапии отомикозов считаем це-
лесообразным применение системных антимикотичес-ких препаратов на ранних сроках с учетом синергизма действия лекарств и индивидуальной чувствительнос-ти пациента.
4).Особенно актуальными представляются вопро-
сы совершенствования профилактического и реабили-тационного направления для сохранения и поддержа-ния трудоспособности личного состава ОВД.
ДИАГНОСТИКА МУКОРМИКОЗА В ПР АКТИКЕ ВР А ЧА ОТОРИНОЛАРИНГОЛОГА
Буркутбаева Т.Н., Нурмагамбетова А.С., Григоренко В.И., Плотникова А.В.
казах
ский Национальный Медицинский Университет, кафедра оториноларингологии,
Алма-ата, казахстан
Проблема диагностики и лечения инвазивных ми-
козов в оториноларингологии является крайне значи-мой, так как ежегодно отмечается рост данной формы микозов в практике ЛОР-врача, летальность до внед-рения комбинации радикальной хирургии и терапии Амфотерицино
м В превышала 90 %, но и в настоящее
время остается достаточно высокой, достигая по дан-ным ряда авт
оров 50–85 %.
Цель исследования: Определить роль грибов рода
Mucor при микотических поражениях ЛОР-органов.
Материалы и методы:Всего было обследовано 140 больных.. Больные
были подразделены на четыре группы. Первую группу составляли 55 человек с отомикозом. От них была по-лучена 71
проба патологического материала: 8 проб –
от больных с микозом послеоперационной полости, 7 проб
– от больных с микозом наружного уха, 56 проб –
от больных с микозом среднего уха.
Во второй группе обследовали 35 человек с мико-
зом ротоглотки. От них было взято 105 проб патологи-ческого материала (35 проб из визуально определяе-мого очага микотического процесса и 70 проб из точек возможного грибкового поражения, визуально не оп-ределяемого).
В третьей группе с риномикозом от 35 человек по-
лучена и исследована 51 проба. От больных ринитом грибков
ой этиологии из носовых ходов – 39 проб и 12
проб от больных синуситом грибковой этиологии, взя-тых из верхнечелюстных пазух.
В четвертой группе исследовано 35 проб от 15 че-
ловек с сочетанием риномикоза с микозом ротоглотки и отомикозом. При этом 15 проб получено из носа, 9 проб из уха и 1
1 – из ротоглотки.При инвазивных формах микоза ЛОР-органов диа-
гноз устанавливался на основании гистологического исследования биоптата ткани.
Результаты исследования:Всего микологическому исследованию подверг-
лись 307 проб клинического материала. Из которых от больных были получены 192 пробы в результате при-цельного взятия из микотического очага (от 47 боль-ных взято по несколько проб), 70 проб из точек пред-положительной локализации грибкового процесса (в частности, от больных микозом ротоглотки)..
Роль мукоровых грибов при микотических пора-
жениях ЛОР-органов. Если при отомикозах и риноми-козах грибы рода Mucor по частоте выделения зани-ма
ли третье место (отомикоз – 7,4±5,0 %, риномикоз
–13,3+8,8 %), то при сочетании риномикоза с другими микозами ЛОР-органов мукоры занимали второе мес-то по
сле аспергилл, составляя 18,7±9,7 % от выборки.
Определенные трудности в признании этиоло-
гической роли выделенных культур были связаны с возможным транзиторным носительством плесневых грибов в слизистых оболочках ЛОР-органов. Для под-тверждения этиологической роли грибов патологичес-кий материал от больных исследовался микроскопи-ческим методом исследования.
Сопоставление результатов микологических и мик-
роскопических исследований показало их совпадение в 71,8
% случаев. Микроскопический метод оказался
информативнее (Р<0,05), подтверждая в 49,5±3,6 % случаев микотическую природу заболевания, в то вре-мя как частота выделения плесневых грибов миколо-гическим мет
одом составляла 38,0±3,5 % случаев.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 480
Многочисленные бактерии, вирусы, микроскопи-
ческие грибы и другие микроорганизмы, являясь ос-
новной частью экологической среды обитания, могут приносить не только пользу, но и вызывать различные заболевания у человека.
К сожалению, до настоящего времени в клиничес-
кой медицине не уделяется должного внимания грибам как равноправным среди других условнопатогенных микроорганизмов- возбудителей внутрибольничных (нозокомиальных) инфекций (ВБИ).
В настоящее время описано и изучено более 69000
видов грибов. Возбудителями заболеваний человека признаны 400 видов, из которых 100 выделяются на-иболее часто.
Проблема микозов в стационарах в последние годы
значительно возрастает.
Самая высокая частота нозокомиальных грибковых
инфекций отмечена в отделениях интенсивной терапии (ОИТ), ожоговых, онкологических, гематологических, инфекционных, травматологических отделениях, ро-дильных домах, отделениях патологии новорожден-ных, трансплантации органов и ВИЧ-инфекции.
Грибы рода Candida занимают 4 место среди воз-
будителей сепсиса в США, там в год регистрируется около 400000 случаев катетер-ассоциированных инфек-ций. А в Берлине, например, в ОИТ среди всех нозоко-ми
альных пневмоний 14 % составляют кандидозные, у
больных с заболеваниями печени грибковые инфекции оп
ределяются в 13 % случаев.В отделениях сердечно-
сосудистой хирургии США на 1000 госпитализирован-ных приходится более 10 кандидозных осложнений.
В ожоговом центре г. Череповца при исследовании
1028 пациентов с гнойно-септическими инфекциями грибы ро
да Candida выделены из крови у 5,5 % из них,
а из отделяемого ожоговых ран – у 1,2 % больных. В хирургических стационарах г. Рязани с раневых повер-хностей
у 1238 больных в 1,6 % случаев также обнару-
жены дрожжеподобные грибы рода Candida.
Среди грибов основными инфектантами в развитии
ВБИ являются грибы родов Candida и Aspergillus.По данным отделения сердечно-сосудистой хирургии
в
США на Candida spp. приходится 80–90 %, на Asper-
gi
llus spp.–1,3–2,5 %, не исключаются также редкие гри-
бы
Malassezia ,Trichosporon, Mucor, Rhizopus, fusarium,
Acremonium, Alternaria, Bipolaris, Curvularia и др.
По данным ОИТ в г.Санкт-Петербурге у больных, на-
хо
дящихся на ИВЛ Candida albicans выделены у 93,8 %
больных; penicillium spp.- у 70 %; Aspergullus spp.- у
3 %; Mucor spp. – у 1,6 %; fusarium spp.- у 5,6 %.
По обобщенным данным США, Канады, Европейс-
ких стран, Индии, Тайваня подчеркнута возрастающая роль грибов Candida non-albicans в развитии кандиде-мии. В г. Санкт-Петербурге при этом заболевании в 50
% случаев в крови обнаружены C. parapsilosis; C.
tropicalis; C. glabrata.
Совместные исследования, проведенные в 26 стра-
нах мира, показали, что среди 14368 изолятов грибов рода Candida, выделенных от больных системными микозами в 40 госпитальных лабораториях, получены сл
едующие виды:C.albicans – 69 %; C.glabrata – 10 %;
C.tropicalis – 4,2 %; C. parapsilosis – 3,6 %; C. krusei –
1,7 %.
Известно, что плесневыми грибами Asp. fumigatus;
Asp. flavus; p
enicillium. spp.и др. могут быть загряз-
нены кондиционеры, воздух, вода, стены, пол, окна, цветы, занавески, мягкие игрушки и другие предме-ты во внутрибольничных помещениях, что является опасным фактором для развития ВБИ. При вдыхании контаминированного воздуха споры грибов попада-ют в легкие, а из них могут проникать в мозг, печень, селезенку, почки, щитовидную железу, сердце, крове-носные сосуды, кости, суставы, синусы, гениталии, кожу и другие органы. В результате может развиваться инвазивный аспергиллез, летальность от которого со-став
ляет 60–70 %.
Таким образом, приведенные данные свидетель-
ствуют об актуальности существующей проблемы внутрибольничных микозов, что требует разработки мер борьбы с этой тяжелой патологией и мер профи-лактики внутрибольничных вспышек.ВНУТРИБОЛЬНИЧНЫЕ МИКОЗЫ – АКТУ АЛЬНАЯ ПРОБЛЕМА
С.А.Бурова
Центр глубоких микозов, ГкБ №81,
Москва
ОСОБЕННОСТИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ Г ЛУБОКИМИ МИКОЗАМИ
НА ФОНЕ ТЯЖЕЛОЙ СОПУТСТВУЮЩЕЙ ПАТОЛОГИИ
Бурова С.А.
Центр гл
убоких микозов, ГкБ № 81,
Москва
Национальная Академия микологии,
Москва
В современной медицине диагностика и лечение
системных и поверхностных грибковых инфекций проводится на основе изучения физиологии, микро-биологии, фармакологии, молекулярной патологии и даже
медицинской генетики. Candida albicans – наибо-
лее частый возбудитель оппортунистических микозов,
оппортунистические и инвазивные микозы… 481
однако, в последние годы большую значимость при-
обретаю
т Candida non – albicans (C.krusei, C. tropicalis,
C. kefyr, C. glabrata, C. parapsilosis). У лиц с иммуно-дефицит
ом их пропорция составляет более 50 %, при
«относительно нормальном» иммунитете – 15 %.
По результаты исследования здоровых доброволь-
цев в нескольких странах Европы оказалось, что ко-лонизация ЖКТ грибами Candida spp. достаточно высока. В пузырной и протоковой желчи грибы были обнару
жены у 0,8 – 4,0 % людей, в пузырных камнях –
у 15 – 20 %, в орофарингеальной зоне – у 10- 30 %, в тонком кишечнике – у 50 – 54 %, в толстом кишечни-ке
– у 55 – 70 %, в фекалиях – у 65 – 80 %.
Колонизации ЖКТ у онкогематологических боль-
ных намног
о выше: в зеве – 33 %, в биоптатах гастро-
дуо
денальных язв – 17–30 %, в кишечник – 63–65 %.
Особенно опасны последствия кандидозной коло-
низации у больных с нейтропенией, так как грибы в этих условиях могут диссеминировать в печень, селе-зенку и легкие, вплоть до грибкового сепсиса, возмож-но грибковое поражение сердца и почек.
Аспергилле
з – другой оппортунистический микоз,
отличающийся ростом заболеваемости в 1,5 раза за последние 15 лет, частотой встречаемости при хро-нических
пневмониях до 10–15 %, развитием после
трансплантации легких в 19 % случаев. Летальность от инвазивного аспергиллеза составляет 65–70 %.
Факторы риска развития грибковых инфекций у
человека: хронические аболевания ЖКТ, травмиро-вание слизистых оболочек, хронические заболевания бронхолегочной системы, беременность, период но-ворожденности, пожилой возраст, онкологические и гематологические заболевания, эндокринопатии, ВИЧ-инфицированность, трансплантационные опера-ции, состояния, требующие пребывания в ОИТ, тяже-лые аллергические заболевания, прием антибиотиков, цитостатиков, гормонов, нарушение питания, алкого-лизм, курение, наркомания.
Цель исследования: изучение эффективности и
безопасности препарата Итраконазол-ратиофарм при лечении больных с глубокими и поверхностны-ми микозами на фоне тяжелой сопутствующей па-тологии.
Механизм действия Итраконазола-ратиофарм за-
ключается в блокаде синтеза одного из основных ком-понентов
клеточной мембраны – эргостерола, с после-
дующим нарушением структуры мембраны грибковой клетки и утратой способности к росту и размножению. этим до
стигается фунгистатический эффект.
Благодаря наличию в молекуле Итраконазола-ра-
тиофарм длинной боковой липофильной цепи до-стигается высокое сродство препарата к цитохрому Р
– 450 только грибковых клеток минуя мембраны че-
ловеческих клеток. Поэтому снижается риск развития побочных эффектов при назначении Итраконазола-ра-тиофарм. К преимуществам препарата относят так же самый широкий спектр действия среди всех азолов и тербинафинов и его высокая кератофильность.
Схемы лечения больных глубокими микозами пре-
паратом Итраконазол-ратиофарм:
бронхо
– легочный аспергиллез (14 больных) –
200 – 300 мг/сут. в 1-й месяц, затем по 200 мг/сут. до 2–3 месяцев; смешанный пневмомикоз на фоне брон-хиальной
астмы (11 больных) – 200–300 мг/сут. в 1-й
месяц, затем 200 мг/сут. до 1–2 месяцев; грибковый бронхит на
фоне ХОБЛ (16 больных) – 100–200 мг/сут.
в 1-й месяц, затем 100 мг/сут. 1–2 месяца.
эф
фективность комплексного лечения глубоких
микозов на фоне тяжелой сопутствующей патологии с использ
ованием антимикотика Итраконазола – ратио-
фарм оказалась следующей: среди 14 больных бронхо-легочным аспергиллезом выздоровление достигнуто у 8,
улучшение – у 6; среди 11 больных смешанным
пневмомикозом на фоне БА выздоровление отмечено у 9,
улучшение – у 2 больных; при грибковом бронхи-
те на фоне ХОБЛ выздоровление –у 11 из 16 больных, улучшение –у 4.
Таким образом, препарат Итраконазол-ратиофарм
показал высокую эффективность и хорошую перено-симость при лечении глубоких (системных) микозов, что подтверждено результатами исследования 41 боль-ного в Московской клинике глубоких микозов.
АКТИНОМИКОЗ ПОЛОВОЙ СИСТЕМЫ ЖЕНЩИН
Бурова С.А.
Центр глубоких микозов, ГкБ № 81,
Москва
Национальная Академия микологии,
Москва
Первое упоминание об актиномикозе гениталий у
человека в мировой литературе появилось в 1883 году.
На собственном клиническом опыте, охватыва-
ющем 30-летний период, выявлено, что предраспо-лагающими факторами генитального актиномикоза являются: травматичное введение и длительное ис-пользование внутриматочных спиралей, аборты и, особенно, криминальные в поздние сроки, разрывы промежности и шейки матки при родах или травмах, внедрение инородных тел во влагалище и матку (в т.ч. при «патологическом» сексе), ношение «грубой», травмирующей гениталии одежды, длительная езда на велосипеде, эрозии шейки матки, перенесенные ин-фекции, переохлаждение, хронический аппендицит и аппендэктомия, хронический аднексит, парапроктит и др. заболевания.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 482
Нами доказано, что среди многочисленных хрони-
ческих гнойных заболеваний генитальной сферы акти-
номик
оз составляет 7,6 – 8,4 % .
Для подтверждения актиномикоза исследуют от-
деляемое из влагалища, гной из свищей, пунктат из поверхностных абсцессов и более глубоких очагов, полученных через задний свод, при пиосальпинксах, пельвеоперитонитах, параметритах.
За способность образовывать радиально располо-
женные нити мицелия с «колбочками» на концах, ак-тиномицеты, являющиеся бактериями, были названы, в свое время, «лучистыми грибами».
Обнаружение друз актиномицет является достовер-
ным признаком актиномикоза, но это возможно толь-ко
в 25–60 % случаев, т.к. эти образования способны
спонтанно лизироваться, обизвествляться, деформи-роваться, кальцинироваться и подвергаться другим де-генеративным изменениям.
В окрашенных препаратах по Граму аэробные ак-
тиномицеты выглядят в виде ветвистых нитей, ана-эробные
– в виде коротких в форме «забора» и/или
«птички» палочек. Для диагностики актиномикоза гистологические материалы окрашивают гематокси-лин
– эозином, по Циль – Нильсену, Гомори – Грокко-
ту
, Романовскому – Гимза, Грам – Вейгерту, Мак – Ма-
нусу.
Усовершенствованная методика одновременной
уро -,
фистуло – и ирригоскопии высоко информатив-
на для определения топографической локализации очагов, разветвления свищевых ходов и глубины по-ражения.
Ультразвуковое исследование позволяет опреде-
лить расположение, размеры и плотность очага.
В основе развития актиномикоза лежит формиро-
вание хронического воспаления и специфических гра-нулем в тканях, с последующим абсцедированием и образованием свищевых ходов.
Мы наблюдали 106 женщин репродуктивного воз-
раста больных генитальным актиномикозом, из них: 34
– матки и придатков (чаще одностороннее пораже-
ние), 10
– клетчатки малого таза, 51 – наружных по-
ловых органов и с распространением на промежность, надлобков
ую, паховые, параректальные области, 11 –
генитально – абдоминальной локализации.
Лечение генитального актиномикоза. 1) У даление внутриматочной спирали, 2) Специфическая иммунотерапия актинолизатом
внутримышечно 2 раза в неделю по 3 мл, на курс 25 инъекций, курсы повторять 2–3 раза с интервалом 1 месяц. Благодаря актинолизатотерапии удается значи-тельно снизить объем антибактериальных средств и избежать нежелательных побочных действий от них.
3) Антибиотикотерапия: препараты пеницилли-
нового ряда, тетрациклины, аминогликозиды, цефа-лоспорины в максимальных суточных дозах по 10–14 дней в период обострения процесса.
4) Метронидазол, клиндамицин, сульфаниламид-
ные препараты.
5) Хирургическое лечение. В остром периоде по-
казаны паллиативные операции, вскрытие абсцессов, флегмон, дренирование гнойных затеков. После ме-дикаментозной подготовки возможно радикальное иссечение пораженных участков и свищевых ходов в пределах видимо здоровых тканей, кюретирование свищевых ходов. В зависимости от локализации и глу-бины поражения проводят также экстирпацию матки, аднексэктомию, субтотальную и тотальную гистерэк-томию с трубами и др.
Таким образом:1) Ак
тиномикоз гениталий не является редким
заболеванием у женщин репродуктивного возраста.
2) Наибо
лее частым предрасполагающим факто-
ром является травматичное введение ВМС.
3) Важна
правильная и своевременная диагнос-
тика актиномикоза с использованием клинических, рентгенологических, ультразвуковых, микробиологи-ческих и гистологических методов.
4) Необ
ходимо более широкое внедрение акти-
нолизатотерапии при актиномикозе и других гнойно-бактериальных заболеваниях генитальной сферы.
5) Адекв
атное комбинированное лечение с ис-
пользованием консервативных и хирургических мето-дов позволяет достичь высокого эффекта в лечении и благоприятного прогноза.
ОСНОВНЫЕ НАПР АВЛЕНИЯ В БОРЬБЕ
С ВНУТРИБОЛЬНИЧНОЙ ГРИБКОВОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Бурова С.А.
Центр глубоких микозов, ГкБ № 81,
Москва
1. Расшифровка этиологической структуры внутри-
больничных микозов.
2. Классификация и регистрация внутрибольнич-
ных грибковых вспышек на территории России.
3. Минимизация стандартов антибактериальной,
гормональной и цитостатической терапии по нозоло-гическим формам; с учетом резистентности микроор-ганизмов в каждом лечебном учреждении.4. Исключение нерационального использования ле-
карств.
5. Правильное ведение внутрисосудистых катете-
ров.
6. Разумное сокращение числа инвазивных диа-
гностических и лечебных процедур.
7. Сокращение сроков пребывания больных в ста-
ционаре.
оппортунистические и инвазивные микозы… 483
8. Обязательное исследование биосубстратов (кровь,
моча, кал, мокрота, ликвор, гной, вагинальный секрет и
др.) на грибы и актиномицеты в группах риска.
9. Совершенствование методов ранней диагности-
ки микозов.
10. Определение возбудителя микозов до вида и
чувствительности его к антимикотикам.
11. Разработка стандартов противомикробной и ан-
тимикотической терапии.
12. Строгое соблюдение правил уборки внутри-
больничной среды, гигиены сотрудников, правил де-зинфекции и стерилизации оборудования и инстру-ментов.
Пример: в США (1995 г.) исследовали медицинский
персонал
отделений интенсивной терапеии; у 15–54 %
с рук были выделены штаммы Candida идентичные штаммам, выделенным от больных.
13. Контроль состава микобиоты больничных по-
мещений, выявление источников и путей распростра-нения грибов.14. Расширение раздела грибковых инфекций в
обучающих программах для студентов и врачей.
15. Введение раздела «Санитарная микология» в
программу специализации по микробиологии с указа-нием нормативных документов, описанием приборов, питательных сред, дезинфектантов, схем, современ-ных методик, гигиенических норм, перечня грибов и актиномицет.
16. Разработка стандартов по содержанию грибов
и актиномицет в окружающей среде и организме че-ловека.
Таким образом, назрела острая необходимость
объединения усилий ученых, клиницистов, эпидеми-ологов, инфекционистов, лабораторной и медико-про-филактической службы для успешного мониторинга и борьбы с внутрибольничными микозами на современ-ном уровне.
ЛЕЧЕНИЕ ДИССЕМИНИРОВАННОГО КАНДИДОЗА
С ПОР АЖЕНИЕМ СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК
Бурова С.А.
Центр глубоких микозов, ГкБ № 81,
Москва
Национальная Академия микологии,
Москва
До настоящего времени не уделяется должного
внимания грибам как равноправным среди других ус-ловнопатогенных микроорганизмов, вызывающих по-ражение кожи и слизистых оболочек.
В то же время грибы рода Candida различных видов
через последовательные стадии адгезии (прилипание) и инвазии (проникновение) вызывают характерный, порой, трудно излечимый воспалительный процесс в поверхностных и глубоких слоях слизистых оболочек полости рта, ЖКТ, бронхиального дерева, гениталий.
Существует несколько клинических разновиднос-
тей орофарингеального кандидоза: кандидоз полости рта у новорожденных, псевдомембранозный кандидоз, атрофический кандидоз полости рта (чаще у пожилых), эритематозный кандидоз (новая форма), срединный ромбовидный глоссит, лейкоплакия ассоциированная с кандидозом, ангулярный кандидозный хейлит, кан-дидозный гингивит.
При углубленном обследовании 172 больных, обра-
тившихся по поводу орофарингеального кандидоза в Московский Центр глубоких микозов,были выявлены очаги кандидоза в пищеводе, легких, кишечнике, мо-чевых путях у 65 бо
льных (37,8 %).
Лечение кандидоза слизистых оболочек с диссеми-
нацией требовало комплексного этиопатогенетическо-го подхода. Для назначения системного антимикоти-ка необходимо было знать вид возбудителя, характер моно
– или микст – инфекции, давность заболевания, распространенность процесса, наличие сопутствую-щих заболеваний, вес и возраст больного.
Разработанные нами схемы лечения кандидоза
слизистых оболочек с диссеминацией включали: эт
иотропный препарат – дифлазон (флуконазол),
антибиотики широкого спектра действия (строго по показаниям), общеукрепляющие средства, анти-ги
стаминные препараты, стимулятор Т – клеточно-
го
иммунитета – актинолизат, физиотерапию. При
диссеминации в бронхолегочную систему добав-ляли противокашлевые препараты, бронхолитики, бронхорасширяющие средства, при диссеминации в ЖК
Т – ферменты, гепатопротекторы, при диссеми-
на
ции в мочевые пути – мочегонные средства, фура-
новые препараты.
Выбор дифлазона оправдывался его высокой био-
дост
упностью (>90 %), низким связыванием с белками
плазы (<12 %), хорошим проникновением в различные ткани и жидкости тела (цереброспинальная жидкость, слюна, мокрота, вагинальный секрет, моча, кожа, сли-зистые оболочки), выведением в неизменном виде с мочой
(80 %) и длительным периодом полувыведения
из плазмы (около 30 часов).
Дифлазон более селективен в отношении цитохро-
ма Р450 ферментов в мембране грибов, чем в клетках млекопитающих, поэтому не влияет на синтез таких стероидов у человека, как холестерин, надпочечнико-вые кортикостероиды, тестостерон и эстроген.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 484
При назначении дифлазона мы тщательно изучали
побочные действия от препарата и противопоказания.
Дифлазон не применяли при повышенной чувствитель-ности к азольным соединениям, входящим в состав препарата, во время беременности и лактации, одновре-менно с цизапридом, терфенадином и астемизолом.
Под нашим наблюдением находилось 65 больных
с поражением слизистых оболочек: псевдомембраноз-ный к
андидоз – 36, атрофический кандидоз полости
рта у пожилых – 8, срединный ромбовидный глоссит – 13, ангулярный кандидозный хейлит – 8. При этом кандидозной инфекцией были поражены бронхи у 37 больных, легкие
– у 9 и пищевод – у 19.
Схемы лечения дифлазоном зависели от локализа-
ции и глубины поражения. Так при кандидозе слизис-тых оболочек с диссеминацией в бронхи в 1-ый день дифлазон вводили по 400 мг в/в капельно, со 2-го по 14-ый день
– по 200 мг в/в капельно, затем по 100 мг
per os, 14 дней.
Кандидоз слизистых оболочек с диссеминацией в
легкие ле
чили по схеме: 1-й день – 400 мг в/в капель-
но, со 2-го по 20-ый день по 200–300 мг в/в капельно, затем по 100 мг per os 14 дней.
При кандидозе слизистых оболочек с диссемина-
цией в пищевод в 1-ый день применяли 400 мг дифла-зона в/в капельно, затем 200 мг в/в капельно 14 дней и продолжали per os по 50 мг 14 дней.
У больных орофарингеальным кандидозом с дис-
семинацией в бронхи выздоровление наступило у 26 (70,3
%) больных, улучшение у 9 (24,3 %); при диссе-
минации в
легкие выздоровление – у 6 (66,7 %), улуч-
шение
– у 2 (22,2 %); при диссеминации в пищевод вы-
здоров
ление – у 14 (73,7 %), улучшение – у 5 (26,3 %)
больных.
Исчезновение проявлений на слизистых оболочках
полости рта и микологическая санация под влиянием лечения диф
лазоном достигнута у 100 % пациентов.
Таким образом, при орофарингеальном кандидозе
обязательно следует проводить исследование бронхо-легочной системы, ЖКТ и мочевых путей на наличие микоза. Лечение кандидоза должно быть комплекс-ным, с включением эффективного системного антими-котика, с обязательным учетом сопутствующей пато-логии и других очагов грибковой инфекции. Дифлазон в/в и per os оказался эффективным и адекватным пре-паратом для лечения орофарингеального кандидоза с диссеминацией во внутренние органы, о чем свиде-тельствуют результаты клинической эффективности: выздоров
ление у 46 (70,8 %) больных из 65, улучше-
ние
– у 16 (24,6 %).
ОТО-РИНО-КОНЬЮНКТИВАЛЬНЫЙ СИМПТОМОКОМПЛЕКС
ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ РИНОСИНУСИТАХ АССОЦИИРОВАННЫХ
ПЕЦИЛО МИКОЗНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Бустонов М.О., Умаров У.У., Кодири Д.А., Тагаймуродов Ф.Т., Лолаев Н.Г.
Национальный Медицинский Центр,
Душанбе, Таджикистан
Проведено комплексное обследование 63 больных
с хроническим риносинуситом в сочетании с хрони-ческим средним отитом вызванное грибом из рода paecilomyces.
У больных наблюдался рино-коньюнк-
тивальный синдром, сопровождавшийся жалобами на ринорею, затруднение носового дыхания, приступы чихания, зудом в носу, носо- голотке, ушах и глазах. Риноскопическая картина: « подушкообразное» утол-шение слизистой дна носовой полости, гиперплазия и полипозные изменения нижних и средних носовых раковин и слизистых оболочек около носовых пазух носа, мукозное и вязкое отделямое. Со стороны уха отмечались жалобы на сильный зуд и жжение, чувство диском форта « мокнутие » уха, шум в ушах, перехо-дяший периодически в звон. Клинической формой яв-лялся мезотимпанит. При отомикроскопии отмечалось диффузное утолшение слизистой с отёком, а также ёё «подушкообразное» утолшение в области промонто-риума у 1/4 больных. Нарушение слуха носило кон-дуктивный характер. Клиническое течение заболева-ния характеризовалось рецидивирующим течением, сезонными обострениями, проявлением респиратор-ного аллергоза.Иммунологические показатели харак-теризовались умеренным снижением концентраций иммуноглобулинов класса А , М ,G , более чем 2,5 раза увеличением уровня ЦИК,снижением концентрации комплемента в крови больше 1,5 раз.
В условиях
жаркого климата 65 % больных имели
различную степень выраженности анемии, отмечалось сочетание иммуных нарушений с дисбиотическими изменениями микробного ландшафта кишечника. В результате проведенных обследований нами пред-лож
ен новый термин – ото-рин-оконьюнктивальный
симптомокомплекс «ОРКС», характеризующий спектр особенностей клинических проявлений при сочетан-ной патологии слизистых оболочек полостей носа, ок-лоносовых пазух и среднего уха. При лечении больных мы применяли противо грибковые препараты –дифлю-кан, орунгал по 100мг х 2 раза в сутки в течение 14 дней, десенсибилизирующая, иммуно коррегирующая терапия, витамины и местное лечение. Использование основных принципов стратегии и тактики иммуно мо-дулирующей терапии ( Р .И .Сепиашвили, 2003,2004 ), подбор антимикотических препаратов (дифлюкан, интраконазол ) после определения чувствительности к грибкам, улутшает прогноз, предупреждает развитие висцеральных грибковых поражений при хронических риносинуситах.
оппортунистические и инвазивные микозы… 485
Введение. Хронические воспалительные заболе-
вания верхних дыхательных путей являются одной из
серьезных проблем оториноларингологии.
Самые древние в аспекте филогенеза мононуклеар-
ные фагоциты, к которым относится и макрофаг, обла-дают способностью саморегулирования аутокринным способом, что говорит о потенциальных возможностях при активационных процессах. Активация функций макрофага связана, так же с другой его особенностью, это воспринимать паракринную регуляцию за счет множества рецепторного аппарата на мембране клетки для лимфокинов. Одной из главных функций макро-фага, как антиген презентирующей клетки является поглощение и представление Т-клеткам на своей по-верхности антигенного материала.
Материал и методы исследования. Нами проведено
цитологические исследования у 134 больных хрони-ческим риносинуситом в сочетании со средним отитом микозной этиологии. Контрольная группа была пред-ставлена 56 больных с хроническим гнойным средним отитом.Препараты отпечатки со слизистой оболочки медиальной стенки барабанной полости окрашива-лись по методу Романовского-Гимза. Для оценки соот-ношения отдельных клеточных элементов применяли полуколичественный метод с выражением отдельных клеточных элементов в баллах. Результаты исследования: Макрофаги в препара-
тах
– отпечатках из барабанной полости встречались
у свыше 95 % пациентов. Средняя интенсивность мак-рофагальной реакции в основной группе составляла 79,1
% и значительно ниже – в контрольной (р<0,01)
Макрофаги под влиянием антигенов грибов акти-
вируются ,сильная активация макрофагов вызывает дегенерацию их структур и в конечном итоге приводит их к разрушению.
Количество разрушенных макрофагов максималь-
ным было у больных хроническим риносинуситом в сочетании со средним отитом микозной этиологии. Оно в 5,8 раз превышало таковое у пациентов конт-рольной
группы. это свидетельствует о том, что в ос-
новной группе наблюдается максимальное антигенное воздействие, которое значительно превышает таковое у больных контрольной группы (р<0,01). Макрофаги разделяются на субпопуляции, которые отличаются по происхождению, адресации действия и функциональ-ным свойствам. Механизмы аутокринной негативной регуляции контролируют гиперактивацию макрофага, при помощи синтеза цитокинов ИЛ-10 и ТФРβ, оказы-вающих супрессирующее действие на их функцию.
Таким образом, есть все основания полагать, что при
грибковых поражениях слизистых оболочек полостей носа, околоносовых пазух и среднего уха ограничивают им
мунный ответ именно макрофаги – супрессоры.МАКРОФАГ И ИМУННЫЕ МЕХАНИЗМЫ ПРИ ГРИБКОВЫХ РИНОСИНУСИТАХ
Бустонов М.О., Умаров У.У., Кодири Д.А., Тагаймуродов Ф.Т., Лолаев Н.Г.
Таджикский институт последипломной подготовки медицинских кадров,
Душанбе, Таджикистан
ИЗУЧЕНИЕ IN vITRO РОЛИ ФАКТОРОВ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА
В ЗАЩИТЕ ОТ ИНФЕКЦИИ, ВЫЗВАННОЙ candida albicanS
Ганковская О.А., Блинкова Л.П., Лавров В.Ф.
ГУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН,
Москва
Кандидозы являются актуальной проблемой здраво-
охранения, поскольку широко распространены и сопутс-твуют иммунодефициту организма, Кандидозная инфек-ция часто возникает у недоношенных и новорожденных, ослабленных и истощенных детей, а также у детей ран-него возраста. Среди взрослых наиболее уязвимым кон-тингентом являются больные СПИДом, онкологические, гематологические больные, пациенты с трансплантиро-ванными органами. Существенное влияние на развитие кандидоза оказывает длительное и бессистемное приме-нение антибиотиков, в результате чего подавляется нор-мальная микробная флора, развивается дисбиоз и вто-ри
чный иммунодефицит и как следствие – кандидозная
инфекция. Помимо этого, в патогенезе болезни значи-тельную роль играет сенсибилизирующая способность дрожжевых грибов рода can
dida и продуктов их метабо-
лизма, изменяющая реактивность макроорганизма.Целью работы являлось изучение экспрессии генов
цитокинов (ФНОα) и сигнальных рецепторов (TLR) при действии антигенов c.
albicans в клеточных сис-
темах in vitro.
В связи с тем, что врожденный иммунитет обес-
печивает первую линию защиты от патогенов, боль-шой интерес представляет исследование активации локального и системного иммунитета в ответ на ан-тиген c. аlbicans .
В качестве моделей были исполь-
зо
ваны перевиваемая культура клеток vero (успешно
применялась в предыдущих экспериментах для опре-деления активации врожденного иммунитета на ви-русную инфекцию), а также мононуклеарные клетки периферической крови здоровых доноров (системный ответ на кандидозный антиген).
В опытах были использованы три варианта инактиви-
рованных температурой клеток C. albicans: выращенные
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 486
на солевой безбелковой среде с 4 % глюкозы; выращен-
ны
е на той же минимальной среде с 1 % глюкозы; выра-
щенные на минимальной среде без содержания углевода,
а также фракции биополимеров разрушенных клеток C. albicans (фракция нуклеиновых кислот, фракция рас-творенных белков). Изучение уровней экспрессии генов ФНОα и TLR2 проводили с помощью ПЦР в реальном времени с использованием интеркалирующего красителя SYBR GreenI и флуоресцентных зондов фирмы Синтол (РФ). Количество копий кДНК генов определяли по от-ношению к 1 млн. копий кДНК гена β-актина.
В экспериментах на культурах клеток нами было
показано, что под действием антигена c.
albicans уров-
ни экспрессии генов TLR2 возрастали незначительно (не более, чем в 2 раза), в то же время, уровень экс-прессии провоспалительного цитокина ФНО α досто-
верно увеличивался при различных концентрациях ан-тигена. Полученные результаты можно объяснить тем, что TLR2 образует гетеродимеры с TLR1 или TLR6, и в распознавании кандидозного патогена может прини-мать участие не только TLR2. Следовательно, в даль-нейших экспериментах необходимо исследовать экс-прессию генов TLR1 и TLR6.
Известно, что ФНО α принимает активное непос-
редственное участие в защите организма от инфекции. Увеличение уровня экспрессии гена ФНО α связано с
активацией сигнальных рецепторов врожденного им-мунитета.
Таким образом, можно сделать заключение, что
локально происходит активация факторов врожден-ного иммунитета в ответ на инфекцию, вызванную дрожжевым грибом рода candida
. В следующей серии
экспериментов на культуре мононуклеарных клеток и непосредственно в клетках слизистой урогениталь-ного тракта женщин с кандидозом планируется также изучить, какие из TLRs помимо TLR2 приводят к вы-работке провоспалительных цитокинов при действии кандидозного антигена.
ОППОРТУНИСТИЧЕСКИЕ МИКОЗЫ ПРИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ
ЗАБОЛЕВАНИЯХ МОЧЕВЫВОДЯЩИХ ПУТЕЙ
Гасанова Т.А., Липский В.С., Хачатуров К.А.
МУз
Городская клиническая больница №8,
Саратов
В последние десятилетия наблюдается измене-
ние этиологической структуры инфекционных забо-леваний; отмечается расширение спектра микозов, обусловленных ухудшением экологии, нарастающей иммуносупрессией и нарушением колонизаци-онной резистентности кишечника современного человека. Возросли не только число и тяжесть грибковых инфек-ций, но и разнообразие грибов, выявляемых в качестве этио-логических агентов.
Клинически микозы могут проявляться как асим-
птомной микурией, так и септи-цемией. При этом грибковые безоары способны в ряде случаев вызывать обструкцию мочеточников при поражении верхних мочевых путей. Известно также, что для любых гри-бов характерно образование вторичных метаболитов, которые могут оказывать аллергическое и токсическое воздействие на ткани и органы человека.
Целью исследования явилось изучение частоты ми-
курии, обусловленной плесне-выми и дрожжеподоб-ными грибами, а также частоты регистрации специфи-ческих IgG-антител к candida
albicans у беременных и
небеременных женщин с острыми пиело-нефритами.
Материалы и методы: Выявление в моче дрожже-
подобных и плесневых грибов в диагностической концентрации, а также специфических IgG-антител к candida
albicans было проведено 86 с острым гес-
тационным
пиелонефритом (ОГП) и 72 – с острым
пиелонефритом (ОП), находящихся на стационарном лечении в МУЗ «ГКБ №8» г. Саратова. Контрольные группы были представлены 63 женщинами с благо-приятным акушерским анамнезом (БАА) и физиологи-ческим течением беременности и 57 практи-чески здо-ровыми женщинами, проходившими прегравидарное обследование. Забор утренней мочи у женщин конт-рольных групп осуществляли при свободном мочеис-пускании,
а у пациенток с ОГП и ОП – катетеризацией
мочевого пузыря.
Микологическая диагностика осуществлялась ме-
тодом микроскопического исследования нативных и окрашенных препаратов; производился также посев биомате-риалов на среду Сабуро и Чапека. Иденти-фицировали 5–7 дневные культуры грибов со споро-ношением, используя культурально-морфологические критерии идентификации: характер роста культуры гриба на агаризированных средах (макроморфология), микро-морфология гриба. Индикация специфических IgG-антител к candida
albicans проводилась на ИФА-
тестах ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск.
На
ми было установлено, что у 1,6 % женщин с БАА
и физиологическим течени-ем беременности и 7,0 %
практически здоровых женщин в прегравидарном пе-риоде с мочой выделялась Candida albicans (≥105 КОЕ/мл). Микурия в диагностических концен-трациях была за
фиксирована у 12,8 % женщин с ОГП и у 16,7 % жен-
щин с ОП, т.е. была практически одинаковой в сравни-ваемых группах пациенток, что достоверно и значи-тельно превышало показатели контрольных групп.
Показано,
что IgG к Candida albicans – серологи-
ческие
маркёры висцерального кандидоза – выявлены
у 27,0 % женщин с физиологически протекающей бе-ременно-стью, 31,6
% – проходящих прегравидарную
подготовку, 68,6 % с ОГП и 56,9 % с ОП.
оппортунистические и инвазивные микозы… 487
При изучении распределения IgG-антител по вы-
соте титров среди серопозитив-ных пациенток срав-
ниваемых групп установлено, что их высокие концен-тр
ации (1/800 – 1/1600) чаще всего регистрировались
у женщин с ОП (31,7 %), что в 2,3 раза превышало
частоту регистрации высоких титров у женщин с ОГП, в 1,9 раз женщин в преграви-дарном периоде, и в 5,4 раз женщин с физиологическим течением бе-ременности.
Детальное изучение частоты и структуры мику-
рии в диагностической концен-трации, обусловленной дрожжеподобными и мицелиальными грибами, про-ведённое культуральными методами показало, что у женщин с ОГП в 2,5 раза чаще, чем у женщин с ОП выделялись с мочой мицелиальные грибы, частота же выявления дрожжеподобных в сравниваемых группах была практически одинаковой. Спектр выделенных штаммов плесневых грибов был представлен преиму-щественно родом Aspergillus.
Было установлено, что в структуре микурии у жен-
щин с ОГП плесневые грибы встречались в 3,2 раза чаще, чем дрожжеподобные; в то же время у женщин с ОП плесневые и дрожжеподобные грибы регистриро-вались с одинаковой частотой.
Преобладание плесневых грибов в моче у беремен-
ных женщин с ОП, вероятно, обусловлено более вы-раженными застойными явлениями из-за нарушения уродинамики верхних мочевых путей, связанной с их компрессией растущей маткой, а также деком-пенси-рованным атоническим толстокишечным стазом и из-менениями гормонального фона.
Различная структура микурии у женщин с ОГП и ОП
отчасти может объяснить, почему, вопреки ожиданиям, высокие титры IgG-антител к кандидам встречались в 2,3 раза чаще у женщин с ОП вне беременности.
Представленные данные свидетельствуют об эти-
опатогенетической причастности грибов (как дрожже-вых, так и плесневых) к инфекционно-воспалительным процессам в мочевыводящих путях, а значительная частота регистрации IgG-антител к candida
albicans у
женщин с ОГП и ОП, достоверно превышающая час-тоту аналогичных показателей контрольных групп, ве-роятнее всего является индикатором иммуноло-гичес-кой недостаточности и нарушения колонизационной резистентности кишечника.
Таким образом, в современных условиях традици-
онная эмпирическая терапия ОП и ОГП в ряде случаев должна дополняться антимикотиками, а также дли-тельной комплексной коррекцией кишечного микро-биоценоза препаратами с пробиотической функцией и адекватным обеспечением микронутриентами.
Результаты проведенных исследований диктуют
необходимость дальнейшего изучения роли плесне-вых, дрожжеподобных грибов и их сочетаний в генезе воспали-тельных заболеваний мочевыводящей систе-мы с целью усовершенствования и разра-ботки эффек-тивных схем лечения, предотвращающих возникнове-ние рецидивов болезни.
ОСОБЕННОСТИ ГРИБКОВОЙ ФЛОРЫ ПРИ ОТОМИКОЗАХ
Глушко Н.И., Лисовская С.А., Халдеева Е.В., Сайфиева О.В.
казанский НИИ эпид
емиологии и микробиологии,
казань
В последние десятилетия данные статистики ука-
зывают на рост заболеваемости микозами не только кожи, но и внутренних органов, в том числе ЛОР-орга-нов. Отдельную группу среди них составляют отоми-козы. Микозы ЛОР-органов имеют ряд особенностей в связи с их анатомо-физиологическим строением, кото-рые обуславливают специфический состав грибов-воз-будителей. Только в ЛОР-патологии одной из основ-ных групп возбудителей являются плесневые грибы, которые при других грибковых поражениях играют роль комменсалов.
Лабораторная диагностика отомикозов представля-
ет известные трудности, связанные с одной стороны с особенностями забора материала, с другой– с интер-претацией результатов, поскольку обычно выявляют-ся грибы, широко распространенные в окружающей среде, что затрудняет разграничение истинного воз-будителя и случайного контаминанта. За последние 3 года обследовано более 350 пациентов с диагнозом «от
омикоз» и «отит», при этом в 65 % случаев были
обнаружены грибы, способные вызывать проявление клинической картины отомикоза. Наиболее часто вы-делялись грибы рода Candida, в том числе Candida albicans (25
%), C. krusei (2,6 %), C. parakrusei (2,4 %),
C. tropicalis (0,8 %)Ў>9083, а также Rhodotorula rubra (2 %). В 8 % случаев дрожжеподобные грибы выде-лялись в незначительном количестве, что затруднило их видовую идентификацию. В целом, ассоциации дрожжеподобных грибов с бактериальной флорой об-нару
живались в 45 % случаев.
Не менее заметную роль в возникновении отомико-
зов, по нашим данным, играют плесневые грибы. Так, в сочетании с бактериальной микрофлорой они встре-чались
в 25 %, а в ассоциациях с дрожжеподобными
грибами – в 15,2 % случаев. При этом чаще всего вы-делялись грибы
рода Aspergillus: Asp. niger (12,2 %),
Asp.fumigatus (2,8 %), Asp. flavus (1,8 %), Asp. terreus (0,7 %), а также penicillium spp. (8,6 %). В некоторых
случаях в ассоциациях с дрожжеподобными грибами выявляли плесневые грибы, характерные для окру-жающей сре
ды: Rhizopus nigricans (1,5 %), fuzarium
spp. (0,3 %), Acremonium spp. (0,2 %), Neurospora spp. (0,3 %), Mucor spp. (0,3 %), что может рассматривать-ся как вторичная контаминация. Однако присутствие
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 488
этих грибов может быть связано с особенностями жиз-
ни пациент
а. Так, fuzarium spp. был выделен у боль-
ной, рабо
тающей на элеваторе, а Acremonium spp. – у
штукатура-отделочника.
Следу
ет отметить, что в 14 случаях (4 %) в посевах
выделялись грибы–дерматомицеты Trichophyton spp, в о
сновном, в ассоциациях с плесневыми (35,7 %) и
дрожжеподобными (29 %) грибами. Нередко это обус-ловлено наличием грибкового заболевания ногтей и кожи рук. В то же время при лабораторной диагности-ке отомикоза нередко не обращают внимания на гри-бы, вырастающие на поздних сроках культивирования (5–7 дней), хотя наличие на коже слуховых проходов дерматомицета вносит существенный вклад в симпто-матику заболевания (зуд, шелушение), а учитывая его длительный характер, снижает качество жизни паци-ента.
Таким образом, проведенные исследования показа-
ли, что наряду с плесневыми грибами, в частности, на-иболее часто упоминающимся в литературе как возбу-дитель отомикозов Aspergillus niger, большое значение имеют дрожжеподобные грибы, а также грибковые ассоциации. эт
о требует проведения дифференциро-
ванной диагностики и более тщательного подхода к назначению противогрибковых препаратов, поскольку препараты различных групп обладают разной актив-ностью по отношению к дрожжеподобным и плесне-вым грибам.
ОСОБЕНОСТИ КАНДИДОЗА ПИЩЕВОДА У БОЛЬНЫХ,
ПОЛУЧАЮЩИХ СИСТЕМНЫЕ Г ЛЮКОКОРТИКОСТЕРОИДЫ
Гудкова Ю.И., Шевяков М.А.
НИИ медицинск
ой микологии СПбМАПо,
Санкт-Петербург
Известно, что длительное (более 3 недель) исполь-
зование системных глюкокортикостероидов (СГКС) в дозе, в перерасчете на преднизолон, более 0,3 мг/кг/сутки, существенно повышает риск развития оппорту-нистических микозов.
Цель исследования: изучить частоту и особенности
кандидоза пищевода у пациентов, получающих СГКС.
Материал и методы. Обследованы 81 пациент мико-
логической клиники СПбМАПО, получающие СГКС непрерывно в течение более 6 мес. Обследование вклю-чало фиброэзофагогастроскопию с микроскопическим исследованием мазков-отпечатков и культуральным исследованием биоптатов слизистой оболочки пище-вода. Диагноз кандидоза пищевода устанавливали при наличии картины эзофагита и обнаружении нитевид-ной формы гриба рода candida
(псевдомицелия) при
микроскопии мазков.
Результаты. Кандидоз пищевода обнаружили у 16
из обследованных больных, таким образом, частота выявления
составила 19,8 %. Большинство пациентов
с кандидозом пищевода предъявляли жалобы на не-значительный дискомфорт за грудиной, у части из них развивалась дисфагия и одинофагия (боли при глота-нии). При эндоскопическом осмотре выявляли гипе-ремию и контактную ранимость слизистой оболочки пищевода, так же характерным было появление белых фибринозных наложений в виде бляшек размерами от 1х1 мм до 5х5 мм. При культуральном исследовании биоптатов слизистой оболочки пищевода был получен рост гриба Candida albicans. Всем пациентам с канди-дозо
м пищевода назначали флуконазол 2,5 – 3,0 мг/кг/
сутки в течение 2 недель. После проведенного курса лечения пациенты отмечали исчезновение жалоб, при конт
рольной фиброэзофагогастроскопии – отсутствие
картины эзофагита, а при исследовании мазков-отпе-чатков и биоптатов слизистой пищевода псевдомице-лия и роста гриба рода Candida не находили.
Вы
воды. Кандидоз пищевода встречается у 19,8 %
больных, получающих СГКС. Как правило, кандидоз пищевода у данной категории больных вызван гри-бами Candida albicans, чувствительными к флукона-золу.
эКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ
КАНДИДОЗНОГО МЕНИНГ
ОэНЦЕФАЛИТА
Гусева Е.В.1, Надеев А.П.2, Шкурупий В.А.1
1 ГУ Научный Центр клинической и экспериментальной медицины Со РАМН,
2 Новосибирский государственный медицинский университет,
Новосибирск
В течение последних 20 лет наблюдается значитель-
ный рост частоты инвазивных грибковых инфекций, а также летальности вследствие микозов, в первую очередь, среди иммунокомпрометированных больных (Н.С. Багирова, 2006). Особенно тяжело протекают микозы центральной нервной системы, возбудителями ко
торых в 78–85 % случаев являются Сandida spp. Кан-
дидозный менингит и менингоэнцефалит могут разви-
оппортунистические и инвазивные микозы… 489
ваться также вследствие неонатального сепсиса или
инфекции ЦНС у новорожденных, особенно – у не-доношенных с признаками органического поражения мозга, в результате проведения интенсивной терапии с применением мер реанимации, а также развиваться как вторичные осложнения при нейрохирургических вмешательствах. Учитывая тенденцию к росту заболе-ваемости кандидозным менингитом и менингоэнцефа-литом у детей (Г.А. Самсыгина, Г.Н. Буслаева, 1998) при отсутствии достаточного набора эффективных препаратов для лечения этого заболевания, актуаль-ным является создание химиотерапевтической модели кандидозной инфекции с преимущественным пораже-нием ЦНС.
Мыши являются наиболее доступным видом жи-
вотных для химиотерапевтических исследований. Ра-нее был описан способ интрацеребрального заражения мышей (М.Н.Лебедева, Д.М. Гольдфарб, 1944) при вве-дении дифтерийной культуры, который заключается в следующем: возбудитель вводится путем укола в мозг около средней линии черепа на 2–3 мм выше глазницы на г
лубину 2–3 мм. эту же модель использовали за ос-
нову другие исследователи в экспериментах с введени-ем C. albicans (О.В. Бакланова и др., 1987,1992, 1995).
Мы пре
длагаем модифицировать эту модель. экс-
перимент проводили на 2-х месячных мышах-самцах линии СВА массой 20–22 г. Животные были разделе-ны на две группы по 10 мышей в каждой: 1-ой (конт-рольной) группе вводили физиологический раствор в объеме
0,05 мл, 2-ой группе – культуру C.albicans. Под общим наркозом обеспечивали доступ к черепу путем небольшого (3–4 мм) разреза и затем производили прокол в теменной кости, на 2–3 мм от сагиттального и теменно-затылочного швов. Взвесь суточной культу-ры C.albicans в изотоническом растворе NaCl (1Ч10
9
микробных тел в 1 мл), объемом 0,05 мл вводили тон-кой иглой под максимально острым к кости углом на глубину 2–3 мм в субдуральное пространство, затем место прокола тампонировали. На кожу накладывали 1–2 шва.
Забор головного мозга производили на 10-е сутки.
Образцы тк
аней фиксировали в 10 % растворе ней-
трального формалина, обезвоживали и заключали в парафин (Меркулов Г.А., 1969). Гистологические сре-зы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином и эо-зином и ШИК-реактивом.
При гистологическом исследовании перивентрику-
лярно были выявлены макрофагальные инфильтраты и гранулемы,
в полости желудочков – тканевой детрит с
примесью макрофагов. При окраске ШИК-реактивом в тк
ани мозга и гранулемах выявляли возбудитель –
дрожжевую форму C. albicans.
Преимуществом этой модели, на наш взгляд, явля-
ется возможность более точной дозировки при введе-нии возбудителя, под контролем глаза, через разрез. Кроме того, предлагаемое место прокола, вероятно, приводило к травме менее чувствительных структур головного мозга, что подтверждается меньшими пока-зателями летальности в 1-й (контрольной) группе жи-вотных при введении физиологического раствора.
СТРУКТУР А ГРИБКОВЫХ ПОР АЖЕНИЙ ЦНС У ПАЦИЕНТОВ
С ВИЧ-
ИНФЕКЦИЕЙ ПО МАТЕРИАЛАМ ГОСПИТАЛЯ Р ОССИЙСКОГО
КР АСНОГО КРЕСТА ИМ. ДЕДЖ. Б АЛЧИ В Г . АДДИС-АБЕБА, эФИОПИЯ
Дегтярь Л.Д.
Больница Ркк им. Дедж. Балчи,
Аддис-Абеба, Эфиопия
Введение. Клинические проявления ВИЧ-инфек-
ции в поздних стадиях у значительной части пациен-тов манифестируются поражением ЦНС (у трети боль-ных по данным э
.Фаучи, К.Лэйн).
Цель исследования: Определение структуры гриб-
ковых поражений ЦНС у пациентов в ВИЧ-инфекци-ей.
Материалы и методы: За пятилетний период (2003–
2007) в госпитале РКК им. Дедж. Балчи наблюдалось 1447 пациентов с ВИЧ-инфекцией, поражения ЦНС отмечались у 528 из них.
При обследовании пациентов использовались об-
щепринятые лабораторные методы, а так же иссле-дование спинномозговой жидкости, в т.ч. бактерио-логическое, определение уровня СД4, компьютерная томография головного мозга.
Результаты: По нашим данным грибковые пораже-
ния ЦНС
у 137 пациентов (25,95 % от числа ВИЧ-па-
циентов
с поражениями ЦНС). Среди них у 132 (25 %)
диагносцирован криптококкоз ЦНС, у 5 (0,95 %) – кан-дидозные поражения ЦНС.
Заключение: По нашим данным грибковые пораже-
ния ЦНС в поздних стадиях ВИЧ-инфекции регистри-рую
тся у 25,95 % пациентов, преобладают поражения
ЦНС криптококковой этиологии (25 %), что объявля-ется гео-эпидемиологическими факторами.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 490
Цель нашей работы состояла в сравнении мик-
рофлоры околоносовых пазух (ОНП) и кишечника у
больных хроническом синуситом при наличии грибко-вой микрофлоры в locus morbi и в ее отсутствии.
Материалы и методы: Микробиологические иссле-
дования состояли из качественной и количественной оценки состава микрофлоры ОНП и кала у больных хроническим риносинуситом в двух группах: конт-рольной (55 пациентов, у которых микробный пейзаж ОНП состоял из бактериальной флоры) и основной (36 пациентов, у которых из ОНП была выделена грибковая флора). Для микологического исследования использо-вали хлорамфениколовый агар Сабуро (BioMerieux), для идентифик
ации рода и вида грибов – питательную
среду Чапека. С целью идентификации грибов рода Candida применялся стандартный метод ферментации сахаров. Все посевы выдерживали в термостате при температуре 37
°С в течение 24 часов, а для выявле-
ния микро
мицетов – 30 суток при температуре 22 °С и
37 °С. У 26 больных контрольной и 27 больных основ-
ной групп исследовали микрофлору кала. Бактериоло-гическая диагностика дисбактериоза предусматривала выделение, идентификацию и количественный учет представителей родов энтеробактерий, неферменти-рующих грамнегативных палочек, бактерий кокковой группы, лактобактерий, бифидобактерий, дрожжепо-добных грибов рода Candida, плесневых грибов и дру-гих видов. Определялись также патогенные свойства выделенной флоры и ее чувствительность к антибио-тикам и антимикотикам.
Результаты: У больных обеих групп наблюдался
сложный видовой состав микрофлоры ОНП. Грампо-зитивные к
окки высевались в 55 % случаев. Концен-
трация бактерий S.аureus, S.haemolyticus, S.faecalis, S.pneumoniae, H.influenzae в ОНП не превышала 102–105 клеток/тампон. Грамнегативные палочки были выявлены
у 37 % обследованных (E.coli, E.aerogenes,
E.cloaceae, Citrobacter spp., k.рneumoniae, p.аeruginosa).
У пациентов основной группы в содержимом ОНП кроме бактериальной флоры выделялись микромице-ты, состав которых был достаточно разнообразным.
Результаты исследования микрофлоры фекалий у
больных контрольной группы выявили дисбактери-оз кише
чника в 23,1 % случаев. У пациентов данной
группы наблюдалось выраженное уменьшение коли-чества бифидобактерий и лактобактерий. Отмечалось также повышение количества кишечных палочек с гемо
литическими свойствами (80–100 %), энтерокок-
ков, появление в факультативной флоре бактерий рода клебсиелл и грибов рода Candida (у 6 больных) в кон-центрации 104–105 клеток/тампон.
Значительные нарушения в микробиоценозе кишеч-
ника наблюдались у 26 из 27 больных основной груп-пы
(96,3 %). Отмечалось значительное снижение или
отсутствие бифидобактерий (40,7 %), лактобактерий
(66,7 %), уменьшение количества кишечных палочек
(14,8 %). У 33,3 %, пациентов этой группы наблюда-
лось значительное повышение количества энтерококков (до 109). Увеличение количества таких представителей фа
культативной флоры как k.pneumoniae, E.сloacae,
E.аerogenes выявлено у 25,9 % пациентов. Кроме того,
в фекалиях у больных основной группы наблюдалось значительное повышение частоты выделения микроми-цетов. Так, отклонение от нормы относительно дрожже-по
добных грибов рода Candida выявлено у 92,6 % боль-
ных. По видовым признакам они распределялись таким об
разом: С. tropicalis (52 %), C. stellatoidea (16 %), C.
pseudotropicalis (12 %), C. albicans (12 %), C. krusei
(4 %), C. guilliermondii (4 %). У одного пациента в фека-
лиях была выделена Rhodotorula rubra.
В фек
алиях у 66,7 % больных основной группы нами
были выявлены такие виды гифомицетов: Alternaria alternata (2), Aspergillus spp. (4), Aureobasidium pullulans (1), Cladosporium
cladosporioides (1), fusarium spp. (1),
Geotrichum candidum (8).
Результаты проведенных исследований могут слу-
жить основанием для комплексного подхода к лече-нию пациентов с хроническим синуситом.СР АВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНОЙ И ГРИБКОВОЙ
МИКРОФЛОРЫ ОКОЛОНОСОВЫХ ПАЗУХ И КИШЕЧНИКА
У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ СИНУСИТОМ
Заболотный Д.И., Волосевич Л.И., Зарицкая И.С.
Институт ото
ларингологии им. проф. А.С. к оломийченко АМН Украины,
киев
ЧАСТОТА ВЫСЕВАЕМОСТИ ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ РОДА
CANDIDA ОТ ЧАСТО БОЛЕЮЩИХ ДЕТЕЙ ГОРОДА КАР АГАНДЫ
Захарова Е.А., Азизов И.С.
Научно-иссл
едовательский центр карагандинской государственной медицинской академии,
казахстан
Актуальность. Кандидоз различных органов и сис-
тем
– проблема, привлекающая внимание специалис-
тов различных областей. В группу риска по развитию кандидоза относят часто болеющих детей (ЧБД), дли-тельно или повторно получающих антибиотики. Пред-полагают (Самсыгина Г.А. и др.), что кишечник может
оппортунистические и инвазивные микозы… 491
выполнять роль резервуара грибов в организме ребен-
ка и являться входными воротами для формирования других форм кандидоза при действии неблагоприят-ных экзо- и эндогенных факторов.
Таким образом, целью нашей работы было опре-
деление частоты высева грибов рода Candida от часто болеющих детей г. Караганды.
Материалы и методы. Для выяснения доли часто
болеющих детей были проанкетированы 370 родите-лей детей 3–7 лет. На выявление дисбактериоза толс-того кишечника обследовано 48 детей. Исследование ка
ла на дисбактериоз проводилось по методике эпш-
тейн-Литвак в нашей модификации. Для идентифика-ции грибов рода Candida были использованы тесты по ферментации и ассимиляции углеводов, а также спо-собность образовывать ростовые трубки. Для отбора группы часто болеющих детей были использованы критерии, предложенные Барановым и Альбицким: от 1 до
3 лет – 6 и более, 4–5 лет – 5 и более, старше 6
лет – 4 и более. Статистическая обработка материала проводилась с использованием пакета программ Statis-tica 6.0 (StatSoft) Excel (Microsoft).
Результаты и обсуждение. По результатам анкети-
рования доля часто болеющих детей в г. Караганды сост
авила 35 %. Далее, были отобраны 29 человек из
группы часто болеющих и 19 человек – группа срав-нения для исследования кала на дисбактериоз. Среди часто болеющих детей грибы рода Candida в титре, превышающем показатели нормы (>104), были выде-лены о
т 38 %, в то время как в группе контроля гри-
бы ро
да Candida были выделены от 16 %. Выявлен-
ные нами различия достоверного характера не несли (р>0,27).
Вывод. Не выявлено достоверных различий высева
грибов рода Candidaв группах часто болеющих и здо-ровых детей.
РОЛЬ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ
ПИЕЛОНЕФРИТОМ, АССОЦИИРОВАННЫМ ГРИБАМИ РОДА CANDIDA
Зиатдинова Н.В., Агафонова Е.В., Дзамукова Н.Н.
казанский гос
ударственный медицинский институт,
казань
казанский научно-исследовательский институт микробиологии,
казань
Роль провоспалительных цитокинов у больных
детей с патологией почек и мочевыводящих путей на-стоящее время очевидна. Целью нашего исследования явилась изучение интерлейкинов (ИЛ –10) и фактора некроза опухоли б ( ФНО- б ) при различных вариан-тах хронического пиелонефрита у детей.,
Обследовано 65 детей в возрасте от 3 до 14 лет,
из них 30 детей с хроническим обструктивным пие-лонефритом и 35 детей хроническим дисметаболичн-ским пиелонефритом. Все дети находились в стадии клинико-лабораторной ремиссии, не имели нарушения функции почек и артериальной гипертензии. Из них дево
чки составили 65,3 %, мальчики – 34,7 %. Всем
детям наряду с углубленным клиническим и лабора-торно-инструментальным обследованием проводилось исследование ИЛ-10 и ФНО- б в суточной моче.
В 86
% обследованных, в сыворотке крови обнару-
живался циркулирующий антиген Candida albicans и кандидурия, что свидетельствовало о процессе разви-тия инвазивного кандидоза. При этом высокий уровень цирку
лирующего антигена 10–5 – 10–3 мг/мл имел
место у 20,0 % больных, средний – 10–6 – 10–7 мг/мл у 33,7 %, низкий – 10–8 – 10–9 мг/мл у 26 %. Дети, с высоким уровнем циркулирующего антигена в сыво-ротке крови в анамнезе, имели неоднократную катете-ризацию мочевого пузыря: по поводу сопутствующего бу
ллезного цистита (25 %) и нейрогенной дисфункции
мочевого пузыря (45 %). Установлена достоверная кор-реляция между уровнем антигенемии и рецидивирова-нием хронического пиелонефрита (r=0,65,p<0,05). У этой группы детей отмечена прямая корреляция меж-ду степенью кандидурии и уровнем циркулирующего антигена
(r=0,68,p<0,05). У большинства детей (57 %)
выявлены аномалии развития почек и мочевыводящих путей, в
моче половины обследованных детей (48,2 %)
имелась ассоциация грибов рода Candida с грамотри-цательной
флорой – E.coli. Все дети получали дли-
тельное лечение (6–8 курсов) антибактериальными препаратами широкого спектра действия.
Таким образом, хронический пиелонефрит ассо-
циированный грибами рода Candida имеет исход в непрерывно-рецидивирующее течение, особенно при наличие таких факторов риска, как нарушения уро-динамики, катетеризации мочевого пузыря, аномалии мочевой системы и длительного применения антиби-отиков.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 492
Воспаление наружного слухового прохода – (otitis
extema) – это воспаление кожи ушного канала, заболе-
вание полиэтиологичное, требующее очень вниматель-
ного диагностического и терапевтического подхода.
Существует много внешних факторов (инородные
тела, паразитарные болезни, травмы и т.д.), системных болезней (эндокринопатии, аутоиммунные заболева-ния), предрасполагающих к возникновению отита.
Большую роль в развитии отита играет бактери-
альная и грибковая флора. Присутствие бактерий и микофлоры в ушном канале не обязательно означает, что эти микроорганизмы играют причинную роль в развитии отита. В ушах многих клинически здоровых животных присутствует их незначительное количест-во. Однако эти микроорганизмы способны очень быс-тро размножаться при поражениях слухового прохода либо при изменении микроклимата в ухе. Хотя, они могут и не быть главным этиологическим фактором, тем не менее, они включаются в последующий болез-нетворный процесс, осложняя течение болезни.
Объектом изучения явился состав микофлоры в
наружном ушном проходе. Исследования были про-ведены на базе ветеринарной лаборатории «Пастер» г. Москвы.
За период работы (январь-декабрь 2007г) было
проведено микологических посевов из ушной ракови-ны от 234 собак и 50 кошек, принадлежащих частным владельцам. Животные относятся к разным возраст-ным группам, породам и полу. Был выделен грибко-вый аг
ент в 117 случаях у собак (50 %) и в 10 случаях
у кошек (20 %).Результаты идентификации
Malassezia Candida Cladospo-
rium Aspergillus
Собаки 95 % 3 % 1 % 1 %
Кошки 60 % 10 % – 30 %
Как видно по данным таблицы основным представи-
телем служат дрожжевые грибы р. Malassezia, которые являются обитателем нормальной сапрофитной микобио-ты кожного покрова теплокровных животных и человека. Од
нако при нарушении симбиоза между микро – и мак-
роорганизмом, что обусловлено нарушением иммуноло-гических защитных механизмов носителя, грибы рода Malassezia могут вызвать патологии кожного покрова.
Отиты с участием дрожжевых грибов Candida
встречаются гораздо реже. По нашим данным гриб-ковый агент Candida появляется после длительного и безуспешного применения антибиотиков в качестве лечения отитов. Так в наших исследованиях Candiada были выделены в ассоциации с гр. р. Malassezia после длительного лечения малассезиозного отита.
Плесневые грибы, по-видимому, не несут такой
этиологической значимости в развитии патологичес-кого процесса как дрожжи. Грибы Aspergillus были выделены в случае от кота с клещевым отитом (клещи рода Оtodectes, безусловно, играли доминантную роль в возникновении отита) и от собаки с малассезиозным отитом. В данных случаях плесневые грибы были вы-делены в осенне-летний период. Плесневые грибы являются в основном обитателями почвы, поэтому в зимний период редко выделяются с кожных покровах у домашних животных в условиях города.РОЛЬ МИКОФЛОРЫ В Р АЗВИТИИ НАРУЖНОГО ОТИТА
Ивченко О.В.
всероссийский научно-исследовательский институт
эксперимент
альной ветеринарии им. Я.Р. к оваленко,
Москва
КЛИНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ МИКОТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ
У ПАЦИЕНТОВ С НАРУШЕНИЯМИ УГ ЛЕВОДНОГО ОБМЕНА
Кондратьева Ю.С.
кафедра дерматовенерологии, Алтайский государственный
медицинский университет,
Барнаул
В настоящее время в отечественной и зарубежной
литературе описано более 30 видов дерматозов, кото-рые могут протекать на фоне различных нарушений углеводного обмена. Специфические дерматозы часто возникают на фоне диабетических макроангиопатий и метаболических нарушений. К этой группе можно отнести липоидный некробиоз, ксантоматоз на фоне сахарного диабета и др. Неспецифические дерматозы, имеют общие патогенетические моменты при мета-болических нарушениях, но не являются следствием фоновопротекающих нарушений углеводного обмена (экзема, микозы кожи и придатков, инфекционные де-рматозы).
Микозы
и онихомикозы – наиболее часто встреча-
ющаяся патология у пациентов, страдающих различ-ными нарушениями углеводного обмена, такими как нарушение толерантности к глюкозе (НТГ), сахарный диабет. По данным литературы распространенность онихомикозов различной этиологии у этой категории больных со
ставляет от 68 до 74 %.
Нарушения углеводного обмена в рамках мета-
болического синдрома способствуют длительному
оппортунистические и инвазивные микозы… 493
сосудистому воспалению с повышенной выработкой
провоспалительных цитокинов, которые в свою оче-редь приводят к повышенному уровню С-реактивного белка, фибриногена. Одновременно повышается со-держание ингибитора плазминогена 1-го типа. Все эти факторы приводят к повышенной склонности к тром-бозам, атеросклеротическим поражениям сосудистого русла и тканевой ишемии, что значительно облегчает присоединение и быстрое развитие различной микоти-ческой инфекции.
В терапевтическом отделении ОКБ ст. Барнаул об-
следовано 40 пациентов с различными нарушениями углеводного обмена. Исследуемую группу составили 22 женщины и 18 мужчин, в возрасте от 29 до 79 лет. Длительность заболевания колеблется от 2 до 30 лет, у 5 пациентов диагноз сахарного диабета 2 типа был установлен впервые. Грибковое поражение ногтевых пластинок и
кожи стоп выявлено у 31 (77,5 %) паци-
ентов.
У 12 больных (38,7 %) была поражена только
кожа стоп, а в остальных 19 случаях (61,2 %) были поражены и ногти. Онихомикоз на фоне сахарного диабет
а имел ряд клинических особенностей. это по-ражение ногтевых пластинок по гипертрофическому типу (89
% всех случаев), частое наличие нескольких
возбудителей (кандида, дерматофитии, плесневая ин-фекция), на фоне нарушений микроциркуляции в ар-териоло-венулярном звене сосудов стоп и кистей цвет их имел красновато-синюшный оттенок с явлениями воспаления околоногтевых валиков и наличием кан-дидомикотических межпальцевых эрозий. Одной из характерных жалоб являлся упорный зуд, а при канди-дамикозах он, как правило, предшествовал развитию высыпаний.
Пациенты с различными нарушениями углеводного
обмена составляют группу риска для развития мико-зов любых локализаций, являются причиной развития осложнений сахарного диабета, ухудшают качество жизни пациентов. Поэтому ранняя коррекция наруше-ний углеводного обмена будет служить и первичной профилактикой развития микозов у пациентов с НТГ и сахарным диабетом 2 типа, в то же время адекватная фармакотерапия самой микотической инфекции смо-жет отдалить или предупредить развитие осложнений сахарного диабета.
ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ КАНДИДОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ У БОЛЬНЫХ
СО СМЕШАННЫМИ УРОГЕНИТАЛЬНЫМИ ИНФЕКЦИЯМИ
Крывовязый И.В., Якубович А.И., Корепанов А.Р., Чуприн А.Е.
ГоУ в
По Медицинский университет,
Иркутск
Проведен анализ частоты выявления урогени-
тального кандидоза, а также структуры сопутствую-щих инфекций, передаваемых половым путем, среди больных, обратившихся в центр урогенитальных ин-фекций факультетских клиник ГОУ ВПО ИГМУ за 2007 год.
Среди наблюдаемых нами 410 больных (муж-
чин) урогенитальный кандидоз диагностирован у 43 (10,5
%). По возрасту, больные распределились сле-
дующим образ
ом: до 20 лет – 5 больных (11,63 %),
21–30 лет – 24 больных (55,81 %), 31–40 лет – 9 боль-ных (20,93
%), 41–50 лет-4 больных (9,3 %), старше 50
лет – 1 больной (2,32 %).
У 19 больных (44,19 %) урогенитальный кандидоз
диагностирован в виде моно инфекции. У 24 боль-ных (55,81
%) – в виде микст-инфекций. У 8 больных
(18,6 %) одновременно с урогенитальным кандидозом выявлен урогенитальный трихомониаз, у 12 больных (27,91
%) – урогенитальный хламидиоз, у 3 больных (6,98 %) – гарднереллез, у 1 больного (2,32 %) – одно-временно диагностированы урогенитальный трихомо-ниаз и урогенитальный микоплазмоз.
Проведенный анализ показал, что урогенитальный
кандидоз чаще встречается у мужчин в возрастной группе 21–30 лет. Преимущественно в виде микст-ин-фекции. В структуре микст-инфекций ведущее место занимает урогенитальный хламидиоз.
При сравнении полученных данных с результатами
проведенного нами подобного анализа в 2005 году, ус-тановлены некоторые изменения:
1. Изменилась возрастная структура выявляемости
урогенитального кандидоза. Так, в 2005 году урогени-тальный кандидоз регистрировался преимущественно в в
озрастной группе – 41–50 лет, то в 2007 году в груп-
пе 21–30 лет;
2. В структуре микст-инфекций в 2005 году веду-
щее место занимал урогенитальный трихомониаз, в то время как в 2007
– урогенитальный хламидиоз.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 494
Вторичные оппортунистические микозы легких
относятся к вероятным осложнениям туберкулеза, что
обусловлено рядом предрасполагающих факторов: длительным применением пациентами комбинаций химиопрепаратов, в том числе антибиотиков широко-го спектра действия, наличием остаточных полостей и бронхоэктазов в легких, инвазивными процедурами. Однако, распространенность и этиологическое разно-образие бронхолегочных микозов у больных туберку-лезом, частота миконосительства условно-патогенных грибов до сих пор изучены недостаточно.
Целью представленной работы был анализ резуль-
татов лабораторного обследования больных туберку-лезом органов дыхания, полученных в 2003–2007 гг. в Московском научно-практическом центре борьбы с туберкулезом (МНПЦБТ).
Используемый в МНПЦБТ алгоритм лабораторной
диагностики грибковых инфекций легких у больных туберкулезом включает микологические исследования (прямая микроскопия, посев) трех проб мокроты и про-бы материала, полученного при бронхоскопии (БАЛ). Выделенные штаммы дрожжевых и плесневых грибов идентифицируют до рода/вида (предпочтительно) с использованием общепринятых в медицинской мико-логии методов и исследуют на чувствительность к про-тивогрибковым препаратам. У ряда больных проводят высокоспецифичные исследования материала биопсии легочной ткани, содержимого полостных образований легких и плевральных полостей. При дифференциаль-ной диагностике легочного аспергиллеза или кандидо-за (положительные культуральные и/или клинические и рентгенологические данные) проводят специальное иммунологическое исследование на наличие в сыво-ротке крови антигенов asper
gillus и candida (те ст-на-
боры латек
с-агглютинации pastorex, Bio-Rad).Всего было обследовано 712 пациентов МНПЦБТ с
туберкулезом органов дыхания, с подозрением на вто-ричную грибковую инфекцию легких. Из посевов диа-гностического материала было выделено 52 вида гри-бов из 18 родов, относящихся к различным таксонам и группам. Колонизация нижних отделов дыхательных путей одним или несколькими видами условно-пато-генных грибов (исследования мокроты, БАЛ) была вы-явлена у 38,2
% обследованных пациентов.
У 33 из 134 больных туберкулезом с деструктив-
ными по
лостными образованиями в легких (24,6 %)
болезнетворные грибы были обнаружены в матери-але из легочной полости (резекционный материал, аспираты). Выделенные штаммы грибов относились к 7
родам: Alternaria (1 вид), Aspergillus (6 видов),
Candida (2 вида), Cladosporium (1 вид), fusarium (1
вид), penicillium (2 вида), Rhodotorula (1 вид). В двух
случаях A. fumigatus был выделен из бронхиального биоптата. Кроме того, у ряда пациентов оппортунис-тические грибы выделялись из содержимого плевраль-ной полости.
Группа больных с риском развития бронхолегочно-
го аспергиллеза (микологические и иммунологичес-кие иссле
дования) составила 10,8 %, причем у 28,6 %
больных данной группы выявлялись также и призна-ки вероятного кандидоза. В целом, группа больных туберкулезом с риском развития кандидоза составила 30,9
% от числа обследованных.
Выводы: Учитывая вероятность развития вторич-
ных микозов органов дыхания у больных, получаю-щих лечение по поводу туберкулеза легких, очевидна актуальность проблемы организации в микробиологи-ческих лабораториях фтизиатрических клиник адек-ватной лабораторной диагностики микозов на основе современных методических подходов.ЛАБОР АТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГРИБКОВЫХ ИНФЕКЦИЙ
ЛЕГКИХ ВО ФТИЗИАТРИЧЕСКОЙ КЛИНИКЕ
Кулько А.Б., Исаева Е.Л.
Московский научно-практический центр борьбы с туберкулезом
Департамента здравоохранения города Москвы,
Москва
ПОЛИКОМПОНЕНТНАЯ ВАКЦИНА ДЛЯ ПРОФИЛАТИКИ
И ИММУНОТЕР АПИИ ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ
ОППОРТУНИСТИЧЕСКИМИ БАКТЕРИЯМИ И ГРИБАМИ
Михайлова Н.А., Блинкова Л.П., Батуро А.П., Калошин А.А., Романенко Э.Е.,
Злыгостев
С.А., Горбатко Е.С., Исаков М.А., Гатыпова Е.В., Леонова А.Ю.
ГУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН,
Москва
Во всех странах существенно возросла заболева-
емость, вызываемая оппортунистическими микроор-ганизмами (ОМ). Наиболее клинически значимыми ОМ являются Klebsiella spp., Pseudomonas spp., Pro-
teus spp., e
scherichia spp., Staphylococcus spp., candida spp., которые выделяют в виде монокультур или их ассоциаций. Широкая распространенность ОМ связа-на с развитием иммунодефицита у населения разных возрастных групп под действием повреждающих фи-зических и химических факторов окружающей сре-
оппортунистические и инвазивные микозы… 495
ды, нерационального использования лекарственных
препаратов, особенно у онкологических, гематоло-гических, ВИЧ-инфицированных и других больных. Известно, что возбудители этой группы обладают уни-кальными механизмами формирования устойчивости к воздействию лекарственных препаратов, а также, участвуя в запуске многих аллергических патологий, обуславливают хроническое течение воспалительных процессов.
Решением этой проблемы может быть разработка
нового поколения поликомпонентных вакцин, влия-ющих на системы врожденного и адаптивного имму-нитета. Действие таких препаратов связано с пато-генассоциированными молекулярными структурами различных микроорганизмов, которые распознаются Toll-по
добными рецепторами иммунной системы. это
приводит к быстрой активации эффекторных механиз-мов, направленных на элиминацию патогенов и фор-мированию протективного иммунитета.
Результатом проведенных исследований является
формирование коллекции культур ОМ, из которых на основании оценки физиолого-биохимических, серо-логических и других биологических свойств выбраны наиболее перспективные штаммы – кандидаты для получения поликомпонентной вакцины. Например, для дальнейшего изучения взяты несколько штаммов Klebsiella pneumoniae , Proteus spp., e
scherichia spp.,
Staphylococcus spp., Pseudomonas spp., изученные по антигенным свойствам и обладающие слабой виру-лентностью отобранных штаммов, а также различные виды candida
spp. с низким уровнем токсичности. Для
выделения протективных антигенов из выбранных штаммов проведен подбор питательных сред, обеспе-чивающих максимальный выход биомассы.
Обязательным условием конструирования поликом-
понентных вакцин является использование специфичес-ких иммуногенных монопрепаратов, освобожденных от балластных белков. Однако традиционные технологии получения вакцин предусматривают многостадийный цикл выделения очищенных протективных антигенов. В связи с этим нами проведены исследования по по-лучению рекомбинантных белков наружной мембраны pse
udomonas aeruginosa (Opr f и OprL), синтезирован-
ных клетками esc herichia coli M 15. У становлено, что
эти хроматографически очищенные рекомбинантные белки индуцировали в организме кроликов образова-ние специфических антител. В опытах in vivo показано,
чт
о полученные к белкам Opr f, OprL кроличьи гипе-
риммунные сыворотки способны защищать мышей от инфекции, вызываемой P . aeruginosa . В опытах in vivo
сыворотки тормозили рост этой культуры.
Таким образом, в соответствии с этиологическим
значением ОМ в современной инфекционной патоло-гии человека определен состав микроорганизмов с це-лью выделения протективных антигенов, предназна-ченных для включения в поликомпонентную вакцину и получаемых традиционными способами, а также ме-тодами генной инженерии.
ОСОБЕННОСТИ МИКРОФЛОРЫ ГОЛОСОВЫХ ПРОТЕЗОВ
Новожилова Е.Н., Ольшанский В.О.
МГк
Б № 62, МНИоИ им. П.А. Герцена,
Москва
В настоящее время для реабилитации голосовой
функции после ларингэктомии широко применяют голосовые протезы. Большое значение имеет дли-тельность их использования. Наш опыт показал, что протезы выходили из строя и требовали замены не вследствие их износа, а в результате поражения гри-бами и патогенными бактериями. Нами исследова-ны
47 голосовых протезов: 36 provox (Швеция) и 11
Blom-Singer (США), которые были удалены в связи с не
пригодностью к эксплуатации. эти протезы были
заменены по стандартной методике на новые. Сроки использования до замены составляли от 6 мес до 6 лет. Средний срок службы протезов –1,5 года. Выяв-лено, что колониями грибов и патогенных бактерий был поражен только пищеводный фланец удаленного протеза. Вегетации деформировали защитный кла-пан, препятствовали его плотному смыканию, что ухудшало качество голоса и вызывало аспирацию пищи и жидкости в дыхательные пути. Бактериологи-ческое исследование обнаружило грибковую супер-инфекцию, т.е. развитие грибковой инфекции на фоне бактериальной. Грибы в три раза чаще выделяли в ассоциации с бактериями, чем в монокультуре. Пре-валировали дрожжеподобные грибы рода Сandida. Пр
ичем только у 47 % пациентов были обнаружены
грибы C.albicans, у остальных пациентов-так называ-емые non albicans-представители (С. tropicalis, crusei, gl
abrata). эти виды грибов обладали значительной
устойчивостью к обычно применяющимся антими-котическим препаратам. Среди бактерий наиболее частыми видами, обсеменяющими голосовые проте-зы
был Staphylococcus aureus (39,4 %), Enterococсus
faecalis (22,75 %), pseudomonas aeruginosa (15,5 %).
Нами разработана система профилактики грибкового и бактериального поражения протезов, которая поз-волила увеличить время их эксплуатации в 2 раза по сравнению со сроком, рекомендованным фирмой-из-готовителем.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 496
Правосторонняя гемиколэктомия является наибо-
лее распространенным типом оперативного вмеша-
тельства в хирургии ободочной кишки и составляет 17–34
% от общего количества операций. Она выпол-
няется при доброкачественных и злокачественных опухолях, травматических и огнестрельных повреж-дениях, дивертикулите, болезни Крона и других вос-палительно-дистрофичных заболеваниях, которые не подлежат консервативной терапии. По сообщениям различных клиник, независимо от географии располо-жения, наибольшая часть оперативных вмешательств на ободочной кишке выполняется по поводу новообра-зований. Именно поэтому, наличие опухоли, проведе-ние химио- и лучевой терапии с одной стороны, избы-точный рост сапрофитной флоры толстой кишки, как результат проведенного хирургического вмешатель-ства с нарушением анатомической структуры кишеч-ника, с другой которая будет способствовать инвазии агрессивной условно патогенной флоры и создавать условия для избыточного роста грибов рода Candida
Цель
– изучить состав микрофлоры толстой кишки
у больных после правосторонней гемиколэктомии.
Материалы и методы: Нами обследовано 46 боль-
ных (23 женщины и 23 мужчины) после правосторон-ней гемиколэктомии, прооперированных по поводу опухолей правой половины толстой кишки. Средний возраст больных 58±1,7 года (от 39 до 77 лет).
При обследовании больным выполнялась колонос-
копия и посев кала на дисбактериоз. Оценка количест-венного и качественного состава микрофлоры толстой проводилась согласно классификации И.Б. Куваевой и К.С. Ладодо.
Результаты: Во время проведения колоноскопии у
больных после правосторонней гемиколэктомии эн-доскопические признаки рецидива опухоли толстой кишки, а также признаки инвазивного кандидоза от-сутствовали.
У 42,1
% обследованных больных наблюдался
диарейный синдром, в 39,3 % случаев – потеря массы тела, что привело к полной или частичной потере ра-бот
оспособности у 64,9 % таких пациентов
По результатам анализа посевов кала для определе-
ния качественного и количественного состава микро-бной ф
лоры толстой кишки у 43 (93,5 %) больных диа-
гностирован дисбактериоз кишечника ІІІ степени, у 3 (6,5
%) пациентов – дисбактериоз II степени согласно
классификации И.Б. Куваевой и К.С. Ладодо.
Обращает внимание на себя тот факт, что у 9
(19,6
%) обследованных пациентов наблюдается избы-
точный рост грибов рода Candida.
Выводы: 1. У больных после правосторонней гемиколэкто-
мии наблюдаются глубокие нарушения микрофлоры то
лстой кишки: 93,5 % пациентов имеют дисбактери-
оз
ІІІ степени и еще у 6,5 % – дисбактериоз ІІ сте-
пени согласно классификации И.Б. Куваевой и К.С. Ладодо..
2. При выполнении посева кала на дисбактериоз у
каждого пятого пациента, после правосторонней геми-колэктомии диагностируется неинвазивний микотич-ний процесс, вызванный грибами рода Candida, в соче-тании с изменениями качественного и количественного состава бактериальной флоры толстой кишки.
3. этио
логически и патогенетически обоснованным
методом борьбы с грибковым поражением толстой кишки в комплексном лечении больных после право-сторонней гемиколэктомии может служить назначение невсасывающихся антимикотиков (натамицин). ПРОБЛЕМА ГРИБКОВОЙ ИНФЕКЦИИ У БОЛЬНЫХ,
ПОДВЕРГШИХСЯ ПР АВОСТОРОННЕЙ ГЕМИКОЛэКТОМИИ
Палий И.Г., Заика С.В., Дроненко В.Г.
винницкий национальный ме
дицинский университет им. Н.И. Пирогова,
винница, Украина
ВЛИЯНИЕ Р АСПРОСТР АНЕННОСТИ ГРИБКОВОГО ПОР АЖЕНИЯ
НА ОСНОВНЫЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ
У ПАЦИЕНТОВ С ТЕРМИНАЛЬНОЙ СТАДИЕЙ ХРОНИЧЕСКОЙ
ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ, ПОЛУЧАЮЩИХ ГЕМОДИАЛИЗ
Пушкина А.В.1, Полякова И.Я.2, Мордик А.И.1
1 Центр экстракорпоральной терапии ооо к омпания «Фесфарм»,
Москва
2 Институт аллергологии и клинической иммунологии,
Москва
По данным регистра Российского диализного об-
щества в настоящий момент более 13 тысяч пациентов получает гемодиализ (ГД) по поводу терминальной ста-дии хронической почечной недостаточности (тХПН) в России. В связи с ежегодным приростом обеспечен-ности заместительной почечной терапией, количест-во
таких больных увеличивается, в среднем, на 12 %
в год. Наши исследования выявили высокий уровень
оппортунистические и инвазивные микозы… 497
заболеваемости микозами стоп среди этих пациентов.
Около 65 % пациентов страдали распространенными формами заболевания. И у половины пациентов, стра-дающих микозами стоп, давность заболевания превы-шала 5 лет.
Целью исследования явилось: изучение влияния
распространенности микозов на основные гематоло-гические и биохимические показатели у пациентов с тХПН, получающих амбулаторный программный ГД.
Материалы и методы: было обследовано 40 пациен-
тов, 15 мужчин и 25 женщин среднего возраста 54±13 лет. Микоз стоп с преимущественным поражением ногтей по гипертрофическому типу выявлен у 29 боль-ных, в
дальнейшем – группа 1. Распространенный ми-
коз с поражением ногтей на стопах и кистях выявлен у 1
1 больных, в дальнейшем – группа 2. Все пациенты
находились на лечении в амбулаторном гемодиализ-ном центре и получали стандартный бикарбонатный ГД 3 раза в неделю по 4–4,5 часа. Терминальная ХПН развилась вследствие хронического гломерулонефрита у 30
% пациентов, мочекаменной болезни и хрони-
ческ
ого пиелонефрита- у 20 %, из-за диабетической
нефропатии- у 20 %, вследствие поликистоза почек- у 10 %, вследствие гипертонического нефроангиоскле-роза
– у 10 %, аномалия развития почек и поражение
почек в рамках системных заболеваний наблюдалось у 10
% пациентов. Длительность лечения гемоди-
ализом колебалась от 15 до 219 месяцев, составив в среднем 67±38 месяцев. У пациентов в течение года ежеме
сячно определяли количество Hb (г/л), Ht ( %)
и недельную потребность в препаратах рекомбинант-ного
человеческого эритропоэтина (рчэПО) в ЕД на
кг массы тела. Препараты рчэПО используются для лечения анемии, которая является одним из основных осложнений тХПН. Также определяли преддиализ-ные уровни креатинина (Cr) мкмоль/л, мочевины (Ur) моль/л и альбумина (Alb) г/л. Оценивались среднего-довые показатели.
Результаты. Согласно полученным данным, сред-
негодовой уровень Hb у пациентов 1 группы соста-вил 112±13 г/л и был статистически достоверно выше (р=0,007) уровня Hb у пациентов 2 группы, составив-шего
101±11 г/л. Процент Ht равнялся 36±3 % у паци-
ентов 1 группы и был также статистически достоверно выше (р=0,04),
чем у пациентов КГ (31 ±2 %). Средне-
го
довая потребность в препаратах рчэПО также ста-
тистически достоверно различалась между группами и составила 43±24 и 59±24 ЕД/кг/нед. соответственно в 1 и 2 группах ( р=0,04). Вместе с тем, уровни Cr, Ur и Alb не носили статистически достоверных различий между группами и составили для 1 группы соответс-твенно 841±152 мкмоль/л; 20±5 ммоль/л; 41±2 г/л, и для второй группы 808±178 мкмоль/л; 20±6 ммоль/л; 41±2 г/л.
Выводы. Полученные данные позволяют утверж-
дать, что распространенный грибковый процесс не-гативно влияет на один из основных показателей, определяющий качество жизни пациентов, а именно успешность
коррекции анемии. это выражается в более
низком уровне гемоглобина и потребности в дорогос-то
ящих препаратах рчэПО у лиц с распространенным
грибковым поражением. Возможно, распространенная микотическая инфекция влияет на развитие у гемодиа-лизных пациентов синдрома хронического воспаления и, при дальнейшем существовании будет отягощать преморбидный фон организма.
МОЛЕКУ ЛЯРНАЯ ДИАГНОСТИКА ПНЕВМОЦИСТНОЙ ПНЕВМОНИИ
У ВИЧ–ИНФИЦИРОВАННЫХ БОЛЬНЫХ С ЛЕГОЧНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ
Сафонова А.П., Шипулина О.Ю., Шахгильдян В.И., Пиксасова О.В., Куевда Д.А.
ФГУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора,
Москва
Пневмоцистная пневмония является широко рас-
пространенной инфекцией, возникающей у пациен-тов, иммунитет которых был снижен в силу различных причин. До эпидемии ВИЧ-инфекции случаи пневмо-цистной пневмонии отмечались у больных с первичной иммунопатией или с медикаментозной иммуносупрес-сией. Для
прямого выявления pneumocystis jirovecii
(carinii) в клиническом материале используются мик-роскопические методы, эффективность которых низка. Наиболее информативным материалом при диагнос-тике пневмоцистной пневмонии служит отделяемое респираторного тракта. Исследование его с помощью ПЦР позволяет быстро и точно диагностировать инап-парантные, атипичные формы пневмонии у ВИЧ- ин-фицированных и унифицировать методы диагностики оппортунистических инфекций. Целью нашей работы была оценка эффективности
лабораторной диагностики пневмоцистной пневмонии при использовании метода ПЦР .
Было протестировано 483 образцов клинического
материала от 360 ВИЧ-инфицированных пациентов в возрасте
18 – 64 лет с диагнозом «пневмония», прохо-
дивших стационарное лечение в ИКБ №2 г. Москвы. Материалом для исследования служили бронхоальве-олярный лаваж (БАЛ) и биоптаты бронхов. Выявле-ние ДНК p
neumocystis jirovecii (carinii) проводилось
с помощью тест-системы «АмплиСенс® pneumocystis
jirovecii (carinii) – fRT» (ФГУН «ЦНИИэ» Роспотреб-
надзора, г. Москва).
На момент постановки клинического диагноза в
данной группе больных врачи не обладали сведениями о результатах лабораторного обследования этих паци-
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 498
ентов на pneumocystis jirovecii (carinii), исследование
проводилось ретроспективно, после постановки диа-
гноза. По
ложительный результат на ДНК pneumocystis
jirovecii (carinii) был у 42 пациентов. Разброс значений лимфоцитов CD4+ среди этой группы больных соста-вил от 1 до 242 клеток в 1 мкл крови.
Среди пациентов с положительным результатом
ПЦР –теста были поставлены следующие клиничес-кие диагнозы:
в 34 % случаев – «пневмоцистная пнев-
мония», в
17 % – «пневмония неясной этиологии», в
29 % – диагноз «пневмония неясной этиологии» со-четался с диагнозом «туберкулез внутригрудных лим-фатиче
ских узлов» (ТБ ВГЛУ), в 20 % – с диагнозом
«цитомегаловирусная пневмония». Во всех случаях постановки пациенту диагноза «пневмоцистная пнев-мония» была
выявлена ДНК pneumocystis jirovecii
(carinii). Диагноз «пневмония неясной этиологии» был поставлен пациентам, для которых лабораторными мето
дами, кроме ДНК pneumocystis jirovecii (carinii), была выявлена только ДНК ЦМВ в БАЛ, что не явля-ется основанием предполагать пневмонию цитомега-ловирусной этиологии. Диагноз «цитомегаловирусная пневмония» был поставлен при обнаружении в биоп-татах бронхов ДНК ЦМВ и при высокой концентрации цитомегаловируса в крови. Из них у четверых диагноз «цитомегаловирусная пневмония» сочетался с диагно-зами «пневмоцистная пневмония» и «ТБ ВГЛУ».
Таким образом, диагноз «пневмоцистная пнев-
мония» должен подтверждаться прямыми методами лабораторной диагностики, наиболее чувствитель-ны
м из которых является определение ДНК pneumo-
cystis jirovecii (carinii) в БАЛ и биоптатах бронхов с помощью ПЦР. У пациентов с ВИЧ-инфекцией при снижении количества CD4+ Т-лимфоцитов менее 200 клеток в 1 мкл и возникновении клинической респи-раторной симптоматики необходимо проводить до-по
лнительное обследование на pneumocystis jirovecii
(carinii).
СР АВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МИКРОБИОТИЧЕСКОГО ПЕЙЗАЖА ЗЕВА И НОСА
У БОЛЬНЫХ АТОПИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ И МИКРОБНОЙ эКЗЕМОЙ
Соколова Т.В., Кливитская Н.А., Дьячек И.А., Айзикович Л.А.
Гос
ударственный институт усовершенствования врачей Мо РФ,
Москва
Патология зева и носа играет важную роль в хро-
низации течения многих дерматозов, особенно аллер-гического генеза.
Целью настоящего исследования явилось изучение
микробиотического пейзажа отделяемого зева и носа у больных атопическим дерматитом (АтД) и микробной экземой
(Мэ). Под наблюдением было 35 больных АтД
в возрасте от 4 до 35 лет и 74 Мэ в возрасте от 7 до 48 лет, мужчин и женщин в обеих группах практически поровну. Изучение состава микробной флоры из очагов в зеве и носу и определение чувствительности к анти-биотикам осуществлялось по общепринятой методике путем посева материала на селективные питательные среды Идентификацию стафилококков и стрептокок-ков проводили согласно современной классификации (Акатов А.К. 1983, Смирнов В.В. 1988).
Установлено, что обсемененность зева стафилокок-
ками
у больных АтД и Мэ наблюдалась в большинстве
случаев, и достоверно не отличалась в обеих группах (77,1
% и 75,7 %). Преобладал золотистый стафи-
лококк
(92,5 % и 100 %). В тоже время дрожжи рода
Candida spp. в зеве у больных АтД вырастали в 2,1 раза реже,
чем у больных Мэ (70,3 % против 34,3 %). Толь-
ко
при Мэ росли С. tropicalis и С. кrusei (по 3,8 %). это
можно объяснить тем, что больные Мэ значительно чаще получали антибактериальную терапию, являю-щуюся основой тактики ведения больных. Обсеменен-ность зева стрептококками в 2,6 раза чаще наблюда-лась у
больных Мэ (14,8 % против 5,7 %). При АтД
высевались только Str.в-hemolyticus и Str. рyogenes, а при микробной экземе 6 различных видов стрептокок-ков (в-hemolyticus, pyogenes, uberi, salivaris, аgalactia, milleri). Другая аэробная и анаэробная флора высева-лась из
зева в единичных случаях, в целом в 17,1 %
(АтД) и 14,8 % (микробная экзема). Обращает на себя внимание факт существенного различия этой флоры. Только Enterobacacter cloacae встречался при обоих за-болеваниях. Остальные представители флоры при АтД и Мэ
не совпадали.
Обсемененность носа стафилококками, как и зева,
у бо
льных АтД и Мэ наблюдалась в большинстве слу-
чаев и
достоверно не отличалась в обеих группах (80 %
и 79,7 %). Преобладал золотистый стафилококк (92,8 и 93,5 %). Дрожжи рода Candida spp. в носу у боль-ных обеих групп росли значительно реже, чем в зеве. При А
тД – в 3,9 раза реже (34,3 % против 8,6 %), при
микробной экземе – в 1,9 раза (70,3 % против 36,5 %). Установлен факт отсутствия роста стрептококков в нос
у у больных АтД, при их наличии у 10,8 % больных
Мэ с резким преобладанием Str. в-hemolyticus Другая аэробная и анаэробная флора высевалась из носа в единичных
случаях, в целом в 14,3 % (АтД) и 13,5 %
(микробная экзема). Как и в зеве, обращает на себя внимание факт существенного различия этой флоры. Только Corynobacterium spp. встречался при обоих за-болеваниях. Остальные представители флоры при АтД и Мэ
не совпадали.
Сравнение результатов резистентности высевае-
мой флоры к антибиотикам и антимикотикам показа-ло, чт
о при Мэ резистентность наблюдается значи-
тельно чаще.
Дрожжи рода Candida spp. при Мэ были
резистентны к нистатину в 1,4 раза чаще (83 % против
оппортунистические и инвазивные микозы… 499
57 %). Если при АтД отсутствовала резистентность к
флуконазолу, амфотерицину, клотримазолу, то при Мэ она зарегистрирована в 39 %, 4 % и 4 % соответствен-но.
Полученные данные свидетельствуют, что при на-
значении топических препаратов для лечения носог-лотки следует проводить исследование на чувстви-тельность флору к лекарственным препаратам. При отсутствии такой возможности необходимо пользо-ваться антисептиками, резистентность к которым не развивается. К ним относятся препаратов на основе микроэлементов, в частности бетадин.
МИКРОБИОТИЧЕСКИЙ ПЕЙЗАЖ ЗЕВА И НОСА
У БОЛЬНЫХ АТОПИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ
Соколова Т.В., Кливитская Н.А., Дьячек И.А., Айзикович Л.А.
Гос
ударственный институт усовершенствования врачей Мо РФ,
Москва
Общеизвестно, что бактериальные, грибковые, ви-
русные и другие инфекции играют важную роль в хро-низации течения атопического дерматита (АтД).
Целью настоящего исследования явилось изуче-
ние микробиологического пейзажа отделяемого зева и носа у больных АтД и анализ резистентности бактери-альной флоры к антибиотикам, дрожжей рода Candida spp.
– к антимикотикам.
Работа выполнялась на базе кафедры дерматове-
нерологии ГИУВ МО РФ. Под наблюдением было 35 больных АтД в возрасте от 4 до 35 лет, мужчин и жен-щин поровну. Изучение состава микробной флоры из очагов в зеве и носу и определение чувствительнос-ти к антибиотикам Staphylococcus aureus, Streptococ-cus в- hemolythicus, Candida spp. осуществлялось по общепринятой методике путем посева материала на селективные питательные среды Идентификацию ста-филококков и стрептококков проводили согласно сов-ременной классификации (Акатов А.К. 1983, Смирнов В.В. 1988).
Анализ результатов бактериологического исследо-
вания отделяемого носа и зева у больных АтД показал, что совпадение состава микробиоты с обеих локали-заций имело
место только у 1/3 (34,3 %) больных. Во
всех случаях рос только St.aureus, т.е. треть больных имела выраженную гиперколонизацию носоглотки зо-лотистым стафилококком, суперантиген которого яв-ляется значимым тригерным фактором в хронизации течения АтД. Оценка количественного состава микро-биоты зева и носа свидетельствовала, что для отделя-емое зева нередко имело разнообразную флору. У 2/3 (68,6
%) больных вырос один возбудитель, более чем у
ј (28,6 %) – два, а у одного пациента (2,8 %) – три. Для отделяемого носа характерен мономорфный состав флоры.
Практически у всех пациентов (97,2 %) вырас-
тал только один возбудитель.
St. aureus у больных АтД одинаково часто высевал-
ся
из зева и носа (71,4 % и 74,3 %). В носу золотистый стафилококк рос как монокультура, а в зеве у ј пациен-то
в (28,6 %) наряду с ним росли и другие представите-
ли микрофлоры. Дрожжи Candida albicans высевались из
носа в 4 раза реже, чем из зева (8,6 % против 34,3 %).
Рост Streptococcus в-hemolyticus как в носу, так и в зеве нетипичен для АтД. Видовой состав другой флоры был достаточно разнообразен. В зеве, помимо перечислен-ных выше возбудителей, наблюдался рост 9 представи-те
лей аэробной и анаэробной флоры, в носу – 7. Только
klebsiella pneumoniae и St. hemolyticus выявлялись на
слизистой носа и зева. Спектр других возбудителей от-личался. Со слизистой зева в единичных случая росли Enterobacacter cloacae, St. mitis, Acinetobacter baumanii, St
r. pyogenes, pseudomonas fluorescens, Haemophilus
parainfluenzae, Escherichia coli, носа – Enterobacacter
aerogenes, pseudomonas stutzeri, St. epidermidis, Aspergil-
lus spp., Corinebacter propingum.
Изучение результатов исследования чувствитель-
ности флоры к антибиотикам и антимикотикам по-каза
ло, что бактериальная флора в 100 % случаев
резистентна к пенициллину, 17 % – к гентамицину, эритромицину, клиндамицину, котримоксазолу, 8 % – к цефуроксиму, фузидиновой кислоте, оксациллину, тетрациклину. Невысокий уровень резистентности к большинству антибактериальных препаратов, возмож-но, связан с ограниченным их применением у атопиков в связи с возможным возникновением аллергической реакции
на их введение. В 57 % случаев выявлена ре-
зистентность к нистатину. Ее не зарегистрировано по отношению к амфотерицину, кетоконазолу, флуконазо-лу, итраконазолу.
Полученные данные свидетельствуют о необходи-
мость обследования зева и носа у больных АтД, а при отсутствии такой возможности проведение их санации с использованием антисептиков широкого спектра действия. Как для лечения, так и с профилактической целью х
орошо зарекомендовал себя бетадин – универ-
сальный антисептик на основе йода.
ii СъезД МИколоГ ов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел 19 500
В страховые медицинские компании обращаются
пациенты и их родственники с жалобами (до 30 % от
всех обращений) на просьбы и подчас требования ме-
дицинских работников государственных и муниципаль-ных учреждений здравоохранения приобрести в аптеке и принести в стационар лекарственные средства, необ-ходимые для лечения сопутствующей тому или иному заболеванию грибковой инфекции. В ряде случаев такие требования могут быть признаны законными, но чаще врачу-эксперту страховой компании приходится прини-мать решение о незаконности таковых требований.
Федеральный фонд обязательного медицинско-
го страхования (ФОМС) письмом № 1993/36.1-и от 05.05.1998 г.: «Возмещение вреда (ущерба) застра-хованным в случае оказания некачественной меди-цинской помощи в рамках программы обязательного медицинского страхования» ввел в практику здравоох-ранения следующие дефиниции, среди которых четко обозначено понятие вреда (ущерба), который может быть причинен застрахованному пациенту в учреж-дении здравоохранения: « вре
д (ущерб) – это реаль-
ный ущерб, причиненный жизни, здоровью застрахо-ванного, а также упущенная им выгода, связанные с действием или бездействием работников учреждений здравоохранения при оказании медицинской и (или) ле-карственной помощи и подлежащие возмещению».
Ключевыми с точки зрения обсуждаемой проблемы
в этом определении являются следующие:
1) реальный ущерб здоровью пациента, который
может быть связан с применением неквалифициро-ванной лекарственной помощи, т.е. при отсутствии назначения необходимого показанного лекарственного препарата (компонента или препарата крови);
2) упущенная выгода со стороны пациента при тре-
бовании к нему о приобретении лекарственного пре-парата (компонента или препарата крови) в аптечном учреждении за собственные денежные средства.
В соответствии с действующим Приказом ФОМС
от 06.09.2000 №73 «Территориальная система обеспе-чения и защиты прав граждан в условиях обязательно-го
медицинского страхования» медицинской помощью
надлежащего качества (качественной ме дицинской по-
мощью) признается медицинская помощь, исключаю-щая негативные последствия:
– затрудняющие стабилизацию или увеличиваю-
щие риск прогрессирования имеющегося у пациента заболевания, повышающие риск возникновения ново-го патологического процесса,
– приводящие к неоптимальному использованию
рес
урсов медицинского учреждения,– вызывающие неудовлетворенность пациента от
его взаимо
действия с медицинским учреждением.
Из этого нормативного определения следует, что
при отсутствии назначения необходимого лекарствен-ного препарата может возникнуть риск прогрессиро-вания имеющегося у пациента заболевания или риск появления нового патологического процесса, что рас-сматривается как ненадлежащее качество медицинс-кой помощи. Неоптимальное использование ресурсов учреждения здравоохранения может быть связано с назначением малоэффективных непоказанных препа-ратов вместо необходимых, равно и при отсутствии назначения современного показанного средства, что приведет к удлинению срока госпитализации, и будет также расценено как ненадлежащее качество меди-цинской помощи. Последний пункт определения оче-виден
– скорее всего пациент, заплативший за необхо-
димое лекарство, будет неудовлетворен оказанной ему медицинской помощью, что также поставит вопрос перед врачом-экспертом о ее качестве.
Приказом ФОМС от 11 октября 2002 г. № 48 «Мето-
дические рекомендации для структурных подразделе-ний по защите прав застрахованных территориальных фондов ОМС (СМО) по подготовке дел, связанных с защитой прав застрахованных, к судебному разбира-тельству» предложен к исполнению кл
ассификатор
наиболее часто встречающихся нарушений, которые могут послужить поводом для обращения в суд за за-щитой, где указан дефект лекарственной терапии:
«2. Некачественное оказание медицинской помощи,
повлекшее неблагоприятные последствия для застра-хованного:
в) ошибочный выбор лекарственной терапии, пов-
лекший утяжеление состояния больного, развитие осложнений, удлинение сроков лечения, возможную инвалидизацию, смерть;
г) ошибки при выполнении медикаментозной те-
рапии, повлекшие утяжеление состояния больного, развитие осложнений, удлинение сроков лечения, воз-можную инвалидизацию, смерть ».
Таким образом, на сегодняшний день имеются
правовые основания для контроля за правильностью, эффективностью и доступностью назначения лекарс-твенных средств в стационаре, в том числе за обосно-ванностью назначения противогрибковой терапии.
Приказ Минздрава РФ № 170 от 27.05.97 г. «О пе-
реходе органов и учреждений здравоохранения РФ на Международную статистическую классификацию болезней и проблем, связанных со здоровьем Х пе-ресмотра» установил правомочность применения в НОРМАТИВЫ МЕНЕДЖМЕНТА КА ЧЕСТВА МЕДИЦИНСКОЙ
ПОМОЩИ ПРИ ХИМИОТЕР АПИИ ГРИБКОВОЙ ИНФЕКЦИИ
Старченко А.А., Третьякова Е.Н., Комарец С.А., Кочергина Г.А., Курило И.Н., Алешин П.И.
Мо
НИкИ им. М.Ф. владимирского
зАо «капиталъ Медицинское страхование»
МоФоМС
общественный совет по защите прав пациентов при Росздравнадзоре
Москва
Copyright Notice
© Licențiada.org respectă drepturile de proprietate intelectuală și așteaptă ca toți utilizatorii să facă același lucru. Dacă consideri că un conținut de pe site încalcă drepturile tale de autor, te rugăm să trimiți o notificare DMCA.
Acest articol: НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ МИКОЛОГИИ ОБЩЕРОССИЙСКАЯ ОБЩЕСТВЕННАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ СОВРЕМЕННАЯ МИКОЛОГИЯ В РОССИИ ТОМ 2 ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ ВТОРОГО СЪЕЗДА МИКОЛОГОВ… [629429] (ID: 629429)
Dacă considerați că acest conținut vă încalcă drepturile de autor, vă rugăm să depuneți o cerere pe pagina noastră Copyright Takedown.