Analiza Criminalistica a Probelor de Par Pentru Extragerea Adn

Analiza criminalistică a probelor de par pentru extragerea ADN-ului este o metodă frecvent utilizata în scopul identificării ADN-ului parental dar si in cercetări penale. Probe de par gasite in locul unde s-a savarst o infractiune sunt colectate , deoarece o asstfe de proba poate fi folosita pentru identificarea făptuitorului, extragerea ADN-ului din proba depinde foarte mult de provenienta firului de par si starea acestuia. Pentru a înțelege mai bine complexitatea, testul ADN efectuat pe firul de par acesta necesita un studiu in detaliu asupra structuii și componența acesteia. De asemenea, trebuie să înțeleagă distribuirea limitată a ADN-ului în păr, precum și tipul de ADN într-o anumită parte a parului (ADN nuclear sau mitocondrial).

Structura și compoziția de par
Firele de par sunt compuse în principal dintr-o proteină fibroasă cunoscut sub numele de keratina. Această proteină este, de asemenea, principalul constituent al pielii.
Firul de par este format din trei straturi concentrice. Cel mai interior strat este cunoscut ca medulla; este o structură suport de celule rotunjite și este uneori menționată ca maduva. Partea de mijloc a parului, cunoscut sub numele de cortexul, este ceea ce conține pigmenți care dau părului și elasticitatea. Stratul exterior este cunoscut sub denumirea de cuticulele parului. În ciuda faptului că celulele fac parte din structura firului de par, aceste celule nu conțin material adecvat pentru un test ADN.
Rădăcina firului de păr este înrădăcinată sub scalp și este închis într-un folicul de par. Acest lucru este legat la fluxul sanguin prin papila dermica. Anumiti hormoni și receptori se regăsesc în foliculi care contribuie la reglementarea cresterea parului.

Distribuția nucleare și ADN-ul mitocondrial în probe de par
Fibrele de păr (uneori denumite firul de par) sunt de fapt formate de keratinocite, tipuri de celule ale pielii, care sunt responsabile de sinteza keratinei de proteine. Aceste celule mor in mod natural și în procesul de a lua convertite din celule într-un material excitat, dur cum ar fi fire de par. Acest proces de conversie este cunoscut sub numele de cornificare, și implică distrugerea și degradarea nucleului celulei (și, prin urmare, de asemenea, a materialului genetic). Ca o consecință a cornificarii, firul de par, care este parte a parului care iese în afara scalpului, nu conține ADN-ul nuclear.

Deși ADN-ul nuclear nu poate fi izolată de firul de par, deoarece este în mare parte absent ca urmare a cornificarii menționate anterior, ADN-ul nuclear poate fi extras cu succes din rădăcina părului. Rădăcina firului de păr conține keratinocite, celule care sunt ideale pentru extracția de ADN-ul nuclear. Prezența unor corneocite nucleate (biologic celule moarte sau keratinocite în ultimul stadiu de diferențiere) pot permite extragerea profilului ADN derivat din ADN-ul nuclear. Existența corneocite nucleate este cunoscuta ca fiind o cauza a unei etape incomplete sau absente în timpul procesului de cornificare care ar avea ca rezulta în mod normal degradarea sau distrugerea nucleului celulei și ADN-ul. Aparitia resturilor nucleare nu este pe deplin înțelesa, dar fenomenul poate să apară doar pe parul anumitelor persoane.

 

In mod normal testarea are loc doar pe firele de par, care au în mod evident foliculul atașat. Identificarea foliculului pilos se poate face prin observarea atentă a parului cu ochiul liber, totusi pentru facilitarea descoperirii acestora este necasara o sursa de lumina mai puternica sau sa se recurga la lupe, foliculul apare ca o minge mică gri-alb la vârful firului de par. În unele cazuri, o lupă ar putea fi necesara pentru observarea foliculului.

Utilizarea ADN-ul nuclear in ADN-ul de testare
Identificare genetică și profilarea este posibilă doar prin analiza ADN-ului nuclear. În ciuda posibilitatilor prezente in resturi de ADN-ul nuclear provenite din firul de par (în firele de păr taiate sau in fire de par cazute natural), analiza cu această parte specifică a parului probabil nu va da rezultate.
Atunci când firele de păr nu au radacinile ,probabilitatea de extracție cu succes a unui profil ADN complet folosind tehnologia PCR standard este undeva între 60-70%. Când firele de păr nu au rădăcina atașata, analiza poate, în cazuri rare, sa duca la obține unui profil ADN nuclear. Acest lucru este posibil în cazul în care celulele din firul de par sunt încă prezente la vârful acestuia sau în cazul în care, după cum sa menționat, a existat o defalcare incompletă a ADN-ului nuclear în timpul procesului de cornificării.
ADN-ul mitocondrial se gaseste in mitocondrii celulă – organite celulare situate în citoplasma responsabila pentru furnizarea celulei cu energie. ADN-ul mitocondrial este mult mai abundent decât ADN-ul nuclear cu o celulă umană tipică care conține mai multe copii, chiar de ordinul miilor ale ADNmt, spre deosebire de doar un singur exemplar din ADN-ul nuclear.

În multe țări, guvernele au acces la bazele de date ADN în cazul în care sunt depozitate profilurile a mii de criminali urmăriți penal. Profilurile ADN sunt totuși, profilurile ADN nucleare și nu profile ADN mitocondrial. Acest lucru contribuie din nou la creșterea puterii de identificare a ADN-ului nuclear în rezolvarea crimei. Ca urmare a acestui fapt, ADN-ul mitocondrial nu are nici o putere de discriminare între indivizi, ca toți oamenii de partajare o linie de sange matern comun vor împărtăși, de asemenea, exact același profil mtDNA. Acest lucru înseamnă că nu se poate distinge între persoane din aceeași linie maternă, pe baza analizei profilurile lor ADNmt respective profiluri vor fi identice între rude materne.
Rata de succes în ceea ce privește extracția de ADN de la orice probe este dependentă de un număr de factori:
Tratamentul chimic folosind coloranți pot modifica cuticula. Coloranți pot penetra cu ușurință spațiile dintre celulele care formează o structura solzoasa a cuticulele parului sau să le ridice pentru a fi mai bine absorbite de păr chiar. Peroxizi, una dintre principalele substanțe chimice prezente în vopselele de păr, aceste substante contribuie puternic la degradarea ADN-ului în păr. Peroxizi acționează prin ruperea specifica a legăturilor fosfodiestere in ADN-ul uman. Expunerea frecventa la apă a parului, ADN-ul este pierdut din firele de par. Această pierdere a ADN-ului nu este numai din cauza degradării și descompunereii a obligațiunilor fosfodiester in ADN-ul, dar și pentru prejudiciul cauzat de păr prin simpla spălare.
importanța și factori care ar putea afecta orice tip de mostre de ADN: vârsta probei, modul în care proba a fost colectata și stocata, precum și orice forțe externe care ar putea duce la modificarea starii ADN-ului ( de exemplu, expunerea la temperaturi foarte ridicate, săpunuri și detergenți, sau la substanțe corozive)

2. CERCETAREA LA FATA LOCULUI

2.1 Descoperirea si ridicarea firelor de par

In cazul cercetarii la fata locului probele sunt colectate din zona înconjurătoare și acest lucru poate fi, în scopul de a elimina persoane din anchete de poliție, precum și pentru a ajuta la restrânge lista de suspecți. Aceste probe sunt colectate foarte meticulos, persoanele abilitate in aceasta actiune sunt îmbrăcate în haine de protecție, astfel încât propriile lor haine și părul acestora sa nu contaminează nici o dovadă care ar putea pre-exista.
Aceste probe sunt colectate în diferite flacoane, tuburi si pungi derivate astfel incat din momentul colectării și timpul alocat analizei corespunzătoare sa nu intervina alterarea probelor.
Astfel sunt examinate obiectele de imbrăcăminte ale victimei, lenjeria si corpul persoanei, cat si alte suprafete inclusiv obiectele de igiena personala, in special prosoapele si pieptenii.
A doua etapă de colectare a probelor are loc la momentul autopsiei când medicul legist va racla partea inferioară a unghiilor victimei pentru orice păr, piele, fibre sau materiale care ar fi adunat acolo. Aceasta este o tehnică utilă ca de multe ori în timpul unei lupte violente victima de cele mai multe ori încercarea sa se apere , eventual prin zgarieturi sau muscaturi aplicate atacatorului.

Pentru ridicare se folosește penseta din plastic de unică folosință cu atenția necesară pentru ca recoltarea să se realizeze integral în așa fel încât să nu se piardă pe parcursul recoltării, ambalării sau transportului celulele de țesut atașate pe rădăcina firului de păr. Modul de ambalare trebuie să evite cu sterictețe plierea firelor de păr sau amestecarea probelor. Dacă părul este impregnat cu fluide biologice, fiecare unitate distinctă se va ambala separat. Până la predarea la laborator trebuiesc respectate regulile de păstrare și manipulare valabile și pentru celelalte urme biologice.

3. Expertia biocriminalistica a urmelor de natura piloasa

3.1 Cercetarea de laborator

Probele de control se recoltează prin smulgerea a câte cel puțin 10-15 fire din fiecare regiune anatomică, dar, obligatoriu de la nivelul: pielii păroase a capului (frontal, occipital, temporal dreapta și stânga), pubian, axilar drepta si stanga.

Prelevarea probelor respective se va consemna în procesul verbal de cercetarela locul faptei. Probele prelevate se împachetează separat pentru fiecare regiune, se etichetează în conformitate cu normele procedurale și se trimit la laborator.

Examinarea firului de par uman in laboratorul de criminalistică se efectuează, de regulă, prin utilizarea microscopului optic. Acest examen implică în mod obișnuit două etape: procesul de identificarea a firelor de par și compararea firelor de par aflate sub semnul întrebării ca fiind cunoscute. Scopul pentru realizarea acestui examen este de a stabili dacă două sau mai multe persoane ar fi putut intra în contact sau dacă una sau mai multe persoane ar fi putut intra în contact cu un obiect. Aceste dovezi sunt aasociate in mod deosebit cu infracțiunile de violență, cum ar fi crimă, agresiune sexuală, și asalt, în cazul în care ar fi avut loc un contact fizic. Infracțiuni, cum ar fi furt și jaf armat implică în mod tipic o recuperare a resturilor și articole de îmbrăcăminte care pot conține fire de par utile pentru identificarea suspecților.

Pentru atingerea scopurilor enunțate anterior, experții medico-legali ar trebui să răspundă la următoarele întrebări formulate de organele de anchetă:

1. Dacă obiectele găsite sunt fire de păr?

2. Care este proveniența firelor de păr, umană sau animală?

3. Care este mecanismul detașării firelor de păr: tăierea,

smulgerea, căderea, tunderea?

4. Din ce regiune corporală provin firele de păr?

5. Dacă firele de păr găsite la locul faptei sunt identice cu

firele recoltate de la presupusul autor (victima, suspect,

martor)?

6. Care este culoarea naturală a firelor de păr?

7. Dacă la nivelul firelor de păr se constată semne particulare

(vopsit, permanent, semne de acțiune fizică, chimică,

termică, boli ale părului)?

Prin examenul comparativ se studiază toate caracteristicile posibile: lungimea, grosimea, culoarea, aspectele cuticulei, aspectele particulare, componența chimică (în special se urmăresc elementele chimice rare). La

nivelul firelor de păr se stabilesc destul de bine antigenele sistemului ABO, ceea ce permite excluderea provenienței acestora de la anumite persoane.

Firele de păr îi pot oferi expertului informații prețioase despre persoana de la care provin: sexul (cu condiția integrității bulbului), culoarea părului, faptul contactului cu anumite substanțe chimice rare, grupa

sanguină, chiar si existența unor boli.

Rasa umana este reprezentata de catre forma sectiunii firului de par, aceasta fiind ovala la albi si reniforma la negri , iar la rasa galbena fiind rotunda.