Actiunea Antimicrobiana A Pigmentilor Din Monascus [620842]
Cuprins
Capitolul1.INTRODUCERE…………………………………………………………………………………………….………….………1
Capitolul2.STRUCTURAPIGMENȚILORPRODUȘIDEFUNGIIDINGENULMONASCUS
…………………………………………………………………………………………………………………………………………..………5
Capitolul3.BIOSINTEZAPIGMENȚILORDINMONASCUS……………………………………………………….9
Capitolul4.BIOSINTEZAÎNMEDIILICHIDE………………………………………………………………………..10
Capitolul5.BIOSINTEZAPEMEDIISOLIDE………………………………………………………………………16
Capitolul6.UTILIZAREAPIGMENȚILORDINMONASCUSÎNINDUSTRIAALIMENTARĂ
….…………………………………………………………………………………………………………………………………………….19
Bibliografie……………………………………………………………………………………………………………………………….………..32
ACTIUNEAANTIMICROBIANĂAPIGMENȚILORDINMONASCUS
CAPITOLUL1.INTODUCERE
Coloranțiisuntsubstanțecareauproprietateadeaabsorbiradiațiileluminoasedin
spectrulvizibil.Componentacromoforădinstructurapigmențilorabsoarbeopartedinenergia
radiațiilordinspectrulvizibil,parteaneabsorbită,reflectatăsaurefractată,esteperceputăde
ochiuluman,generândimpulsurileneuraleresponsabiledepercepțiaculorii.
Lamodulgeneral,culoareaesteunelementimportantalpercepțieidecătreoma
mediuluiînconjurătoriarînparticular,înceeacepriveștealimentele,culoareapoatefi
consideratăcacelmaiimportantfactoralevaluăriicalitățiialimentelor.Culorilenedoriteale
alimentelor(careprezintădeviațiidelanormal)suntasociatedeconsumatorcuprezențaîn
alimentaunorcompușistrăini,apăruțicaurmareaalterării,învechirii,falsificăriisaua
modificărilorgeneratedeprocesarea,ambalarea,transportulsaudepozitareanecorespunzătoare.
Înconsecință,culoareapoateficonsideratăunelementimportantalacceptării
alimentuluidecătreconsumator.Caurmareaglobalizării,decelemaimulteori,produsele
alimentaresuntexpusesprevânzareladepărtaredeloculdeproducere,perioadădetimpîn
care,caurmareaprocesării,transportuluișidepozitării,aparinevitabilșimodificărideculoare.
Coloranțiialimentarisuntsubstanțecarenusuntconsumatecaatareșiseadaugăînalimente
pentruarealizaunulsaumaimultedinurmătoareleefecteasupraalimentului:
-pentruarestabiliculoareaoriginalăaalimentului,modificatcaurmareaproceselornormale
careaulocpeparcursulprocesăriiși/saudepozitării;
-pentruacontracaravariațiiledeculoaregeneratedevariațiiledeculoaresezoniereale
materiilorprimefolosite;
-pentruaprotejauniiconstituențivaloroșiaialimentelorsensibililaacțiunealuminii
(substanțeantioxidante,vitamineetc);
-pentruadaalimentelorunaspectatractivpentruconsumatori;
-pentruaconservaculoareacaracteristicăaunuialiment,atuncicândaceasta
reprezintăunelementimportantdeidentificareacestuia;
-pentruaseasiguraunaspectvizualcaresăinducăaspectulcalitativnormal,necesar
valorificăriiprodusului.
Coloranțiialimentarinuseutilizeazăînscopulmascăriiunormodificăriapăruteca
urmareadeficiențelordeprocesare,transportsaudepozitare.Înconformitateculegislația
actualănusuntconsiderațicoloranțialimentari:
-ingredientelealimentareuscatesauconcentratecaresuntutilizateînprincipalpentrua
imprimaalimentuluigust,mirossauaromespecifice,chiardacă,înmodsecundar,modificăși
culoareaalimentului(paprika,saffronul,acidulturmericetc)
-substanțelecolorantefolositepentruacoperireaalimentuluidarcarenusuntconsumate
(straturiledeacoperirelabrânzeturi,coloranțiifolosițipentrumembraneleartificialeetc).
Condițiiledeutilizarealecoloranțiloralimentari:
Pentruafiutilizatînalimenteuncoloranttrebuiesăîndeplineascăurmătoarelecondiții:
-săfieaprobatpentruutilizareprinlegislațiaînvigoare;
-sănufietoxicpentruconsumator,prinelînsuși,prinimpurități,sauprincompușiicarepot
luanaștereînaliment,caurmareaprocesăriisauainteracțiuniicualțiconstituențiai
alimentului;
-săaibădispersibilitateși/sausolubilitateînconformitatecucaracteristicile
alimentuluiîncarevafifolosit;
-săfiestabillavariațiilefactorilorfizico-chimici(temperatură,pHetc),normaleîntimpul
procesăriișiulteriorpeparcursultransportuluișidepozităriialimentului;
-sănuimprimemirosuriși/saugusturiparticularealimentului;
-săpoatăfipusînevidențăînalimentprintehnicianaliticeadecvate.
Clasificareacoloranțilornaturali:
Pebazastructuriichimice,coloranțiialimentarinaturalifacpartedinșaseclase:
1)derivațitetrapirolici–conțininelulpirolicînstructuriciclicesaulineare.Cuprindpigmenții
porfirinici,celmaiimportantreprezentantfiindclorofilașiderivațiiacesteiadinplantedarși
mioglobinașihemoglobinacuorigineanimală;
2)derivațiisoprenoidici–răspândițiatâtînregnulvegetalcâtșiîncelanimal;ceimai
importanțidinpunctdevederealutilizăriiînindustriaalimentarăfiindcarotenoizii;
3)compușiN-heterociclici–diferițifoartepuțindeceitetrapirolici,cuprindșasegrupuri
distinctedepigmenți(purine,pterine,flavine,fenazine,fenoxazineșibetalaine).Ceimai
importanțisuntbetalainele;
4)derivațidebenzopiran–cuprindcompușiheterociclicioxigenați,ceimaiimportanțifiind
antocianineleșipigmențiiflavonoizi;
5)quinone–ceimaiimportanțifiindbenzoquinonele,naftoquinoneleșiantraquinonele;
6)melanine.
Dupăoriginealorcoloranțiialimentarinaturalipotfi:
1)deoriginevegetală–antocianii,carotenoizii,betalainele,clorofilaetc;
2)deorigineanimală–hemoglobina,mioglobina,carminuldecochenilla3)deorigine
microbiană–pigmențiideMonascus(suntadmișinumaiînJaponia).[1]
MonascuscuspeciaM.ruberestefolositpentruobținereadecoloranțiroșiideuz
alimentar.[2]
Oaltăalternativădeutilizareamicroorganismelorînindustriaalimentară,darșiîncea
farmaceutică,oreprezintăcapacitateaacestoradeasintetizapigmenți.Extragereadepigmenți
naturalideoriginemicrobianăesteopracticăceîncepesădevinădinceîncemaicăutată,
datorităinteresuluioamenilorpentruoalimentațienaturală.Multecompaniifarmaceutice
europenesauceleinteresatededezvolatareabiotehnologiiloralimentareaufăcutinvestiții
serioaseîncercetarepentrudescoperireaunorastfeldecoloranțialimentari.Acestepractici
suntcorelatelanivellegislativînfuncțiedeloculîncaresuntpuseînpractică(Laurent
Dufosse´et.al.2005).Spreexemplu,uncolorantfoartedesutilizatînAsianuestepermispe
piețeleeuropenesaupeceleamericane–seconsiderăpericulospentrusănătate,deșicontrariul
afostdemonstrat.EstevorbadesprepigmentulMonascus,dincareseproducecolorantul
alimentar”Anka”.AcestaesteextrasdinfungulMonascus,gencarecurpindetreispecii:
pilosus,purpureusșiruber.PigmențiiMonascussuntînrealitatemetabolițifungici,denumiți
azaphiloni.Azaphiloniișimonascinelesuntpigmențigalbeni,rubropunctatineleși
monascorburinelesuntportocalii,iarrubropunctamineleșimonascorubraminelesuntmov.
Caracteristicilechimicealeacestorpigmențisuntreprezentateprinsolubilitatescăzutăînapă,
sensibilitatecrescutăfațădecăldură6șiluminășiprintr-oinstabilitateîntr-unmediucupH
cuprinsîntre2și10.Înceeacepriveștesolubilitatealorînapă,s-auîncercatoseriede
experimentebiochimicepentrualefacesoubile.
AnumitemicroorganismedingenuldeMonascussp.suntutilizateinmodtraditionalin
tariledinAsiasubformadeconservantisicolorantipentrupeste,carnesiprodusederivate.Cel
maiutilizatprodusesteorezulrosu,obtinutprinfermentareaorezuluicutulpinideMonascus.
Acestmicroorganismproduceprintrealtiexometabolitisasepigmentimajori:rubropunctamina
simonascorubraminarubropunctatinamonascorubrina,monascinasiankaflavina.Cercetari
recenterealizateinvitropeliniicelulareauaratatcauniidintreexometabolitiisecretatiin
mediuldeculturapotaveaaplicatiiinterapiedatoritaefectelorcicatrizantebacteriostatice
fungistaticesimainouimmunomodulatoare,avandefectepozitiveinprofilaxiacancerului.[3]
CAPITOLUL2
STRUCTURAPIGMENȚILORPRODUȘIDEFUNGIIDINGENULMONASCUS
PrincipaliipigmențiprodușidemicroorganismeledingenulMonascusaufostpentru
primaoarăizolațtișianalizațiîndeceniulaltreileaalacestuisecol,iardupă1950s-auefectuat
studiidetaliateasupraacestorsubstanțe.MonascinaafostizolatădinM.rubropunctatusșiM.
rubiginosus,apoialțidoipigmenți,numițimonascorubrinașirubropunctatinaaufost
descoperițiînM.purpureusșiM.rubiginosus.Întreanii1958și1961structurileacestor
pigmențiaufostelucidateînurmaanalizelorspectrelorIR,UVșivizibil,astudiului
proprietățilorchimiceetc.[ChenF.C.ș.a.,1971;FieldingB.C.ș.a.,1971;HawsE.J.ș.a.,1971;
NakanishiK.ș.a.,1959].ÎnperioadaurmătoareesteizolatăankaflavinadinM.anka,
determinându-seșipentruacestpigmentostructurăasemănătoarecuaceloranteriori
[ManchandP.S.ș.a.,1973].
Investigațiileulterioarereferitoarelastudiulpigmențilorresponsabilideculoarearoșiea
acestorfungiauindicatprezențaunuicromoforînaltconjugatconținândfuncțiicarbonil.
PigmențiiprodușidefungiidingenulMonascusfacpartedinclasadecompușichimici
denumițiAZAFILONE,încaresemaiîncadreazărotiorinașisclerotiorina(produșide
Penicilliumsclerotioum)[WhalleyW.B.ș.a.,1971;SteinP.ș.a.,1975].
SpeciiledeMonascusproducuncomplexdepigmențiconținândcelpuțin6
componente:2compușigalbeni(monascinașiankaflavina),2oranj(rubropunctatinași
monascorubrina)și2roșii(rubropunctaminașimonascorubramina).S-ademonstratcă,defapt
atomuldeoxigendininelulpiranicalpigmențilororanjmonascorubrinășirubropunctatinăeste
înlocuitcugruparea-NH-lapHridicat,pentruaformapigmențiiroșiimonascorubraminași
rubropunctamina.Pigmențiioranjprodușidefungreacționeazădecicugrupările-NH-în
miceliupentruadanașterelaculoarearoșietipicădinang-kak.Dealtfel,separecăpigmenții
oranjsuntbiosintetizațiinițial,întimpcecompușiigalbenișiceiroșiiderivădinprimii,
culoareafinalăaamesteculuidepigmențidiferindînfuncțiedecondițiiledecultură.
FigurareprezintadiferitecoloratiidatedeMonascus
Formulelestructuraleșiprincipalelecaracteristicialepigmențilorsuntprezentatemai
jos:
1.MONASCINA
În1932,KareerșiSaloman[ChenF.C.ș.a.,1971;FieldingB.C.ș.a.,1971]audescris
izolareaunuipigmentgalbendin“redrice”și,aproapeînacelașitimp,Nishikawaaraportat
izolareaunuicompusroșu,moanscorubrina,împreunăcuuncompusgalben,monascoflavina
(aparentidenticcumonascina)dintr-oculturădeM.purpureuscrescutăpeunmediusintetic.
Cevamaitârziu,înurmaunuistudiusistematicalDepartamentuluipentrumetabolițiaigenului
Monascus(Univ.Liverpool)s-arealizatizolareamonascineișirubropunctatineidinM.
rubropunctatusSato,monascineișimonascorubrineidinM.purpureusșimonascineidinM.
rubiginosusSato.
Princristalizareamonascineidinetanols-auobținutcristaleînformădeacegalbene,cu
punctdetopire142oC-144oC.SpectreledeabsorbțieînEt-OHprezintămaximelaurmătoarele
lungimideundă:232nm,288nmși392nm.Purificareamonascineiafostefectuatăprin
cromatografiepesilicagelîntr-uneluantdinbenzen-cloroform-metanol(85:12:3).Înurma
oxidăriimonascineirezultărubropunctatina.OO
OOCOC5H11
2.ANKAFLAVINAareculoareagalbenășiesteobținutăprindiferitemetodedeextracție
alăturidemonascină.
3.MONASCORUBRINA
AfostizolatăpentruprimaoarădeE.Nishikawaîn1926dinMonascuspurpureusWent,
caunpigmentoranj,alăturidepigmentulgalbenmonascoflavină.După1957monascorubrinaa
fostidentificatăînmaimultetulpinideMonascus,împreunăcualțicompușiînrudiți
(sclerotiorina,rotiorinașirubropunctatina)[KuronoM.ș.a.,1963].
Acestpigmentarepunctuldetopire134oC-136oCșiprezintămaimultemaximede
absorbțiela=253nm;302nm;352nm.Estesolubilîneter,metanol,etanol,benzen,
cloroform,acidaceticșiacetonă,darinsolubilînapășiîneterdepetrol.
Acțiuneablândăaamoniaculuiasupramonascorubrineiarecarezultatînlocuirea
oxigenuluipiraniccu-NH-rezultândmonascamina(monascorubramina),caresereducela
monascaminona(apomonascorubramina)printratarecuzincîndiferitemedii.OO
OOCOC7H15
OO
OOCOC7H15
4.RUBROPUNCTATINAafostizolatăpentruprimaoarădinM.rubropunctatusSato.
Înstarecristalinăaparesubformădeaceoranj,fiindsolubilăînsolvențiiorganiciuzuali
darnumaiparțialîneterdepetrolșitetraclorurădecarbon.Înprezențaamoniaculuiînsoluție,
rubropunctatinaformeazăunanalog,rubropunctatamina(rubropunctamina)
5.RUBROPUNCTAMINA(rubropunctatamina)seprezintăcauncompusviolet,cupunct
detopirela217oC-218oCșimaximedeabsorbțiela252nm,305nm,382nm,426nmși542
nm.
6.MONASCORUBRAMINA(monascamina)NHO
OO
NHO
OOOO
OOCOC5H11
Acestpigmentroșuesteobținutdinmonascorubrinăînurmareacțieicuamoniacul(prin
agitareenergicăla0oC).Soluțiapurpuriu-închiscareseobțineestediluatăînapă,iar
monascorubraminaesteprecipitatăînurmaadaosuluideHCl2Nla0oC.Înurmare-cristalizării,
acestpigmentseprezintăsubformădeplăcipurpurii,cupunctdetopirela192oC.
În1992esteraportatăizolareaunuicompusnou,cuvaloaredecolorant,denumit
xantomonasinaA,dintr-otulpinămutantădeM.anka.
CAPITOLUL3
BIOSINTEZAPIGMENȚILORDINMONASCUS
FungiidingenulMonascuspotproducepigmențiatâtînmediilichide,însubmers(cuaerare
șiagitare),câtșiînsuprafață,pemediisinteticeagarizatesaupemediinaturale.Cantitateașitipul
pigmențilorbiosintetizațisuntdependenteatâtdetulpinautilizată,câtșidecondițiiledecultivare.
Îngeneral,pigmentațiafungiloresteafectatădeunnumărdefactoriprintrecarelumina,
temperatura,hormoniisexuali,microelementele,compușiiorgano-mercurici,oxigenuletc.[Wong
H.C.ș.a.,1981].
Deobicei,cultivareaacestuimucegaiînvedereaîntrețineriișiconservăriilui,sefacepe
mediisinteticececonținglucoză,extractdedrojdie,peptonă,săruri,extractdecartof,agaretc.
[ChiuS.W.ș.a.,1993;FabreC.E.ș.a.,1993;McHanFș.a.,1970;WongH.C.ș.a.,1981].
Aerareașiagitareamediuluideculturăreprezintădoifactoriimportanțiînproducția
pigmenților.Aufosttestatecomparativcantitateașitipulpigmențilorprodușideotulpinăde
Monascusankacultivatăînsuprafațăpeagar,însistem“batch”șiînvaserotative.Înacestultim
cazmiceliulfungicseatașeazădeperetelevaselordeculturășiproducemaimultpigmentintrași
extracelular,aproximativdezeceorimaimultdecâtînculturile“batch”sauînsuprafață.Timpul
optimdebiosintezăafostredusdela7zilelanumai4zile,iarraportuldintrecantitateadepigmenți
roșiișigalbeniacrescut.Acestefenomeneapardatorităunorcombinațiidefactori:unschimbmai
bundegaze,unpHalmediuluimairidicat,prezențaunuisuportsolidpentrumiceliu,ceeace
conducelaoîntârziereaconidiogenezeișilaeficiențasporităsecrețieidepigment.
W.ChiușiS.M.Chanaratăcăfermentațiaînfazăsolidă,utilizândbagasadetrestiede
zahăr,precumșifermentațiaînsubmers,staticsaucuagitare,utilizândunmediusemi-sinteticsunt
eficientepentruproducțiadepigmențidinMonascuspurpureus.Totuși,culturileagitateproduc
cantitățimaimaridepigmențidecâtcelestaticeși,totodatăsereduceșitimpuldebiosinteză[Chiu
S.W.ș.a.,1992].
Cultivareasimultană,peacelașimediuagarizatauneitulpinideMonascusșiauneitulpini
deSaccharomycescerevisiaeadeterminatcreștereaproducțieidepigmențidecâtevazecideori
comparativcumonoculturademucegai.Filtrateledeculturădedrojdieaufostdeasemeneaeficiente
îninducereamodificărilormorfologicelatulpinadeMonascusșiîncreștereaproducțieidepigmenți
[ShinC.S.ș.a.,1998].AutoriiconsiderăcăefectorularfichitinazaprodusădeceluleledeS.
cerevisiae.DeasemeneaauefectamilazașiproteazadinAspergillusoryzae,întimpceamilazadin
BacillusșichitinazadinStreptomycessuntineficiente.
CAPITOLUL4.
BIOSINTEZAÎNMEDIILICHIDE
ÎnmediilichidetulpiniledeMonascusproducpigmențiînfuncțiedecompozițiamediului,
derataaerării,depH,deprezențaanumitormicroelementeetc.Biosintezapigmențiloresteîn
strânsălegăuracuratadecreștereșicuformareaconidiilor[CarelsMș.a.,1977;CarelsMș.a.,
1978].Odeosebităimportanțăoprezintănaturasurseidecarbonșiazotatâtasupraproduceriide
etanolcâtșiaproducțieidepigmenți[ChenM.H.ș.a.,1993;1994].
Influențacompozițieimediuluideculturăasuprabiosintezei
Sursadecarbon
Dintreglucide,glucoza,fructozașimaltozareprezintănutriențiioptimipentrupigmentație.
În1962,LillyșiBarnettauarătatcăzahărulinvertitesteobunăsursădecarbonpentruM.
purpureus,iarsucrozaînprezențaglucozei,fructozeisauaambelormonozaharidedeterminăo
creșteremaibunădecâtglucozașifructozaluateseparat.
În1970,FrankMcHanșiGeorgeJohnsonstudiazăefectulconcentrațieideglucozăasupra
dezvoltăriimiceliuluideM.purpureus[McHanFș.a.,1970],variindconcentrațiaacesteiunice
sursedecarbonîntre1și20%.Pentruacestevalorialeconținutuluideglucozăs-audeterminat,în
ordinecrescătoare,valorialegreutățiiuscateamiceliuluidin50mlmediucuprinse0,164și0,269g.
AutoriiaratăcăM.purpureusWentcreștebinepeglucoză-peptonă-extractdedrojdie,darmult
maislabpeCzapekDoxBroth.
ÎnurmastudiilorefectuatecuomutantădeMonascuskaoliangdenumităKB20M10.2,
Yongsmith[YongsmithBș.a.,1990;1993],afirmăcăproductivitateaceamaimaredepigmențiare
locînmediicuglucoză,manitol,maltozășicassava,încareșicreștereamicroorganismuluieste
optimă.
Substituireaglucozeicaunicăsursădecarboncumaltoza,într-unfermentatorcupH
controlatcreșteproducțiaînmonascorubramină,utilizândpeptonacasursădeazot,obținându-se
totodatăcantitățicrescutedeetanol[ChenM.H.ș.a.,1993].
DezvoltareamiceliuluideM.purpureusesteafectată,înprimulrândderaportuldintre
cantitateadecarbonșiazotdinmediuldecultură[WongH.C.ș.a.,1981].Pentruademonstraacest
lucru,Wongcultivămicroorganismulpeunmediuconținândglucozăcaunicăsursădecarbonși
NH4NO3,caunicăsursădeazot.Laconcentrațiiscăzutedeglucoză(40g/l),concentrațiade
NH4NO3cuovaloaremică,de0,5g/lestesuficientăpentrucreștereamaximăafungului.Cucât
cantitateadecarbondinmediucrește,cuatâtcerințadeazotestemaimarepentruodezvoltare
maximă.Oconcentrațiedeazotatdeamoniude50g/lestepreamarepentruconcentrațiilede
glucozătestate(pânăla200g/l).La200g/lglucoză,creștereamaximăseînregistreazăpentru5și
10g/lNH4NO3.Separecăvalorimarialeconcentrațieiionilordeamoniuarfitoxicepentru
creștere,totuși,deoareceaceștiapotdifuzarapidîncelulă,eisuntutilizațiimediat.
ValoriledeterminatedeWongpentrubiomasauscatărezultatădinmiceliuldeM.purpureus
crescodatăcumărireaconcentrațieideNH4NO3(pânăla10g/l)șiaglucozei(celpuținpânăla200
g/l).
CantitateadepigmentprodusădeM.purpureuseste,deasemenea,afectatădediferite
concentrațiialeglucozeișiNH4NO3.ConcentrațiilemarideNH4NO3scadpigmentația,acestlucru
putândfidatoratcreșteriimicelieneextensivelaconcentrațiimarideglucozăsauazotatșiinhibării
produceriidemetabolițisecundaricumsuntpigmenții.Îngeneral,producțiadepigmentcreșteo
datăcumărireaconcentrațieideglucoză,deșicuoratămaimicădecâtacreșteriimiceliene.
CuloareacomplexuluidepigmențiprodusdeM.purpureusdiferăînmediicuunanumit
conținutdeglucozășiazotatdeamoniu.Astfel,pentruoriceconcentrațiedeglucoză,intensitatea
culoriiroșiicreștecumărireavalorilorconcentrațieideazotatdeamoniu,cuexcepția
concentrațiilormaricareinhibăatâtcreștereamiceliului,câtșipigmentația.Totuși,înansambluse
formeazămaimultpigmentroșuînmediilecuconținutmaiscăzutdeglucoză.Laconcentrațiimari
deglucoză,dincauzacreșteriimiceliului,pH-ulmediuluidevinemaiacidșinufavorizează
producereadepigment.Deasemenea,concentrațiilemarideglucozădeterminăocererecrescutăa
miceliuluipentrusursadeazot,pentrua-șiformacompușistructuraliîndetrimentulproducerii
pigmențilorroșii(cuatomideazotînmoleculă).
Utilizareauneiconcentrațiide2%(vol/vol)deetanolcasursădecarbonadeterminato
productivitateridicatădepigmenți,înspecialcândetanolulafostasociatcumaltoza[YuzlovaP.
ș.a.,1994].
OaltăsursădecarbonadeseautilizatăînproducereapigmențilordinMonascuseste
amidonul,înspecialceldecartof,îndiferiteconcentrații.Oseriedestudiijaponezearatăcă
amidonuldecartofdulce,înconcentrațiede3-5%asigurănecesaruldecarbohidrațidinmediulde
cultură,atuncicândacestaestesuplimentatcusărurișicuosursădeazot.
În1993,B.Yongsmith,W.Tablokașialțiiaustudiatcondițiiledeculturăpentruproducerea
pigmențilordinMonascussp.utilizândunmediudeculturăconținândamidondecassava
[YongsmithB.ș.a.,1990;YongsmithBș.a.,1993].OtulpinadeMonascusizolatădinbrânzaroșie
desoia(sufu)estecrescutăpemediulcuamidondecassava,peptonășiacidglutamic,ladiferite
pH-uriinițiale,obținându-secomplexedepigmențioranjsaugalbeni.Aceeașiautoriraportează,în
1990posibilitateaproduceriidepigmențigalbenișienzimeamiloliticeînurmafermentăriiunui
mediucucassava,cultivatcuotulpinămutantădeMonascussp.
PentruproducereapigmențilordinMonascuss-autilizat,deasemenea[LeeY.K.ș.a.,1995]
amidondintapiocaînconcentrațiede50g/lpentruocultură“batch”,obținându-sepigmențigalbeni
șiroșiiechivalențicu70și60unitățidedensitateoptică.Utilizându-seblocurideamidongelificat
(400g/l),într-unsistembatchdeculturăsolid-lichid,s-auobținut145unitățidedensitateoptică
după170deoredecultivarepentrupigmențiiroșii.Explicațiaconstăînfaptulcăblocurilede
amidonaufostdigerategradualdeenzimeleamiloliticeprodusedeMonascus,constituindosursă
continuădecarbohidrați.
Casursedecarbonaumaifostutilizatefăinadeorez,făinadesoiasaubagasarezultatăîn
urmaextracțieilichiduluidulcedintrestiadezahăr[ChiuS.W.ș.a.,1992;Wong-LeungY.L.ș.a.,
1993].Utilizareasubproduselorrezultatedinindustriaagroalimentarăînproducțiadepigmențidin
Monascusarputeaconduceladiminuareaprețuluidecostșilaprotejareamediuluiambiant.
StudiileefectuatedeChiușiChan[ChiuS.W.ș.a.,1992]audemonstratcăbagasacadeseusolid
poatefireciclatăînvedereaproduceriidepigmențidinMonascus,rezultatelecomparativeale
utilizăriiacestuimediunaturalșiamediuluiPGY(peptona,glucoza,extractdedrojdie)fiind
asemănătoare.Deșeurilerezultatedintrestiadezahărșisoiaaufost,deasemenea,testatedeWong-
LeungșiFong(1993)înscopulproduceriide-galactozidazădinMonascusanka,curezultate
similaremediuluiPGY[Wong-LeungY.L.ș.a.,1993].
Suculprovenitdin“cactusulpăr”afostutilizatcamaterieprimăînobținereadepigmenți
[HamdiM.ș.a.,1996;HamdiM.ș.a.,1997],determinându-seceamaicrescutăproducțiede
pigmențicândsuculdecactusafostdiluatdepatruoricuapă,launpHde5,2șiînurmaadițieide
glutamatmonosodic.
Sursadeazot
Studiileefectuatepânăînprezentaratăcă,dintretoțifactoriiceinfluențează
producțiadepigmențidinMonascus,tipulsurseideazotjoacăcelmaiimportantrol.Carelsși
Shepherddemonstreazăfaptulcătipulpigmentuluiprodus(galben,oranjsaurosu)estedeterminat
decondițiiledeculturășiînspecialdeutilizareaunuianumitcomponentcuazot[ShepherdD.ș.a.,
1977;1979].
Dupăcums-aamintit,numaidouătipuridepigmenți,șianumetipuloranjmonasco-rubrina
-rubropunctatinașitipulgalbenmonascina-ankaflavinapotfiformateprinbiosinteză.Dintre
aceștia,doarpigmențiioranjpotreacționacugrupări-NH-pentruaproduceaminele
corespunzătoare,decinumaimonascorubrinașirubropunctatinapotdanașterepigmențilorroșii.
Tipulsurseideazotdeterminăraportulroșu/galbenșidacăpigmențiisunteliberațiînmediulde
culturăsauacumulațiintracelular[LeeY.K.ș.a.,1994].
Înprezențaextractuluidedrojdie(careconțineunexcesdeaminoacizi)monascorubrinași
rubropunctatinaformatesuntimediatconvertiteînaminelerespective,monascorubraminași
rubropunctaminaastfelîncâtînmediiledeculturăconținândextractdedrojdiepredominăpigmenții
roșii.
Încazulmediilordeculturăcareconținazotatdreptunicăsursădeazot,seformează
pigmențioranjșiroșii.Deșiaminoaciziiliberilipsescînacestemedii,separecă,înprezențaunui
pHrelativridicatpigmențiioranjpotreacționatotușicuaminoaciziidinmiceliusaualțicompuși
conținândgrupări-NH-prezenți[CarelsMș.a.,1977;CarelsM.ș.a.,1978;ChenM.H.ș.a.,1993].
Dacăseutilizeazăionideamoniu(NH4+)casursădeazot,pH-ulestescăzut,ceeaceface
capigmențiisănupoatăreacționacugrupările-NH-dinmiceliu,acumulându-seastfel
monascorubrinașirubropunctatina.ÎncazulutilizăriideNH4ClsauNH4NO3,uneletulpinide
Monascusformeazăpigmențigalbeni(monascinasauankaflavina),acestfenomendatorându-se,
separe,oxidăriimonascorubrineidincultură.Observațiacătulpinileproducătoaredepigmenți
galbeniformeazămaipuținăbiomasădecâtcelelaltearputeademonstraconsumulmaimarede
oxigennecesaroxidăriipigmențilororanjlapigmențigalbeni.
Estefoarteposibilca,defapt,numaipigmențiioranjsăfieprodușiprinbiosinteză,iar
ceilalțipigmențisăfieformațiprintransformărichimicedependentedemediuldecultură.
FrankMcHanșiG.JohnsonaustudiatinfluențaasupracreșteriimicelienelaMonascus
purpureusaurmătorilorcompușiutilizațicasursădeazot:peptonă,extractdedrojdieșidiferiți
aminoacizi,ajungândlaconcluziacădezvoltareamiceliuluiesteoptimăînprezențapeptoneișia
uneicombinațiiparticularedeaminoaciziconținândglicină,leucinășitriptofan[McHanF.ș.a.,
1970].
Wongaratăcăcelemaimaricantitățidepigmențiroșiiseproduclaconcentrațiirelativ
ridicatedeNH4NO3înprezențaglucozeiîncantitățimici,creștereamicelianășipigmentațiafiind
scăzutelaconcentrațiideNH4NO3>50g/l[WongH.C.ș.a.,1981].
Osursădeazottotmaidesîntrebuințatăînultimaperioadăpentruproducereapigmenților
dinMonascusesteglutamatulmonosodic(MSG)[BlancP.J.ș.a.,1990;SanterreA.L.ș.a.,1995].
În1995,L.Pastrana,P.J.Blancșialțiiaustudiatproducțiadepigmențiroșiidin
Monascusruberpemediisinteticeconținândglucozăcasursădecarbonșiglutamatmonosodicca
unicăsursădeazot[PastranaL.ș.a.,1995],învedereacreșteriisimultaneatâtaproducțieide
pigmențiextracelulari,câtșiaproporțieiroșu-galben.Autoriiaratăcăîncazulîncarecondițiilede
culturădeterminăcreștereaproducțieidepigmenți,raportulroșu/galbenscade.Ambeleobiective
menționateanteriorarputeafiatinseîncondițiidecompromis,laanumiteconcentrațiideglucoza,
MSG,KH2PO4șiK2HPO4înmediu,respectivde26;5;5;și5g/l.
M.YoshimurașiShigeruYamanakaaustudiatinfluențaadaosuluidepolipeptonă,extract
dedrojdie,glutamatmonosodicșicasaminoaciziasupraproducțieidepigmențiînculturasubmersă
[YoshimuraMș.a.,1975].Eiauarătatcăpromotoriiceimaieficiențipentruproducereade
pigmențisuntglicina,treonina,arginina,alaninașitirozina,faptevidențiatșideWongșiKoehler
[WongH.C.ș.a.,1983]șiYamaguchișiIto[YamaguchiY.ș.a.,1973].
Dintr-unmediudeculturăconținândglutamatmonosodiccasursădeazotaufostizolați
pigmențiroșiisolubiliînapă,derivațiaiaciduluiglutamiccumonascorubrinașirubropunctatina.
Aceștipigmenți[LinC.F.ș.a.,1973;1991;1992;1994]prezintăcâtevaavantajefațădepigmenții
roșiiprodușidemucegaiînlipsaglutamatului:bunăsolubilitateînapă,omaimarerezistențăla
decolorareaprinlumină,coeficiențideabsorbțieridicați.Deasemenea,adăugareadeglicinăsau
leucinăconducelaobținereadepigmențiroșiispecificisolubiliînapă,corespunzătoriaminoacizilor
folosiți.
PigmențiroșiișioranjaufostobținuțiprincultivareafungilordingenulMonascuspe
mediideculturăavândlabazăpermeatdelaptesauzerlacares-auadăugatdiferiteoligoelemente.
Aceastămetodăecologicăfoloseștesubproduseagroalimentareconținândlactoză,proteine,
aminoacizi,vitamine,obținându-sepigmențisolubiliînapă.Metodanuproducedeșeuriși
utilizeazăsubstratenetradiționale,deșeurialeindustrieideproduselactate[KujumdzievaA.ș.a.,
1995].
InfluențasărurilorșiapH-ului
Producțiapigmențilorînmediiledeculturăsinteticeconținândglucoză,peptonăși
extractdedrojdienecesităprezențaunorsăruricumsuntK2HPO4,KH2PO4,MgSO4,NaCl,
FeSO4,ZnSO4,MnSO4[BauY.S.ș.a.,1979;WongH.C.ș.a.,1981]
Câtevainvestigațiisereferălainfluențaionilordemetaleasupracreșteriimiceliene
laMonascuspurpureus[McHanF.ș.a.,1970],studiindu-seacumulareadebiomasăînmediide
culturăconținândZn2+,Cu2+,Mn2+,Ca2+,Mo6+.S-aconstatatcădezvoltareamicelianăafost
maximăînprezențaionilordeZn2+careprezintăunefecttipic“trace-metal”.Acumulareade
biomasăcreșteodatăcucreștereaconcentrațieideZndela0,5g/lla800g/l,aceastadinurmă
valoarereprezentândșiconcentrațiaoptimădeZn2+.
PigmentațiafungilordingenulMonascusesteputernicafectatădepH,pigmențiide
culoaregalbenăapărândderegulălavalorimicidepH,iarceiroșiilavalorimari.Deasemenea,s-a
demonstratcămodificareapH-uluimediuluiîntimpuldezvoltăriiculturii[WongH.C.ș.a.,1981]
poatefiresponsabilădetransformareapigmențilororanjînpigmențiroșii.DupăCarelsșiShepherd
[CarelsM.ș.a.,1977;ShepherdD.,1977],pigmențiiroșiiseformeazăînmediiconținândextractde
drojdiesauazotatlapH6,5,iarceioranjînmediicuionideamoniulapH2,5.Wongaratăcăo
cantitatemaimaredepigmențiroșiiseproducelaunpHfinalmaimareca6,deoarecegrupările
aminoreacționeazăcupigmențiioranjpentruaformaderivațiiaminicirespectivi(roșii)lavaloride
pHrelativridicate.Aciditateainhibăputernicacesttipdereacție,faptpentrucarepigmențiigalbeni
șioranjseacumuleazăînmediilecupHmic.S-aconstatat,deasemenea,căvalorilescăzutedepH
arputeaficauzainhibăriiconidiogenezei(caîncazulmediilorcuionideNH4)[ChenM.H.ș.a.,
1993].
ÎncazulcultivăriiuneitulpinideMonascussp.peunmediunaturalcucassava,lapHde7,0
arelocopigmentațieoranj-roșie,dar,pentruunpHinițialsub4seformeazapigmențigalbeni
[YongsmithB.ș.a.,1993].
Alțifactoricareinfluențeazăproducțiadepigmenți
AdaosuldeTween80paresănuafecteze[ChiuS.W.ș.a.,1993]niciconsumulde
glucozădinmediu,niciratadecreștere,darmăreșteproductivitateaspecificădepigmentde
aproximativ6-8ori.Deasemenea,culturilesuplimentatecuTweenproducmaimultpigmentroșu
decâtgalben.ÎncazulstudiilorefectuatedeChiușiPoon,pemediulconținândextractdecartof,
extractdedrojdieșiglucozăs-agăsitcăoconcentrațiede0,4%Tweendeterminăproducereaa385
unitățidedensitateopticăpigmentroșuși356unitățidedensitateopticăpigmentgalben.
Tween80estecunoscutdealtfelpentrucreștereaproducțieideenzimecelulozolitice
șipentrucapacitateasademărireapermeabilitățiimembranare,facilitândînacestmodtransportul
compușilorînafaracelulei,probabilșiîncazulpigmenților.
În1995Young-Justudiazăefectulunorsubstanțeimplicateînbiosintezapigmenților
dinMonascusșiaratăcăacidulcrotonicșisorbic,laconcentrațiijoaseîmbunătățescproducțiade
pigmentfărăamăriapreciabilmasademiceliu.
S-aobservat,deasemenea,căutilizareaaciduluisorbicșiaesteruluietilicalacestuia
estededouăorimaieficientăpentrupigmentogenezădecâtacidulcrotonicșiesterulsău.Înplus,au
fosttestațiacidulcinamicșivinilacrilicpentrucapacitateaacestoradeainițiasintezapigmenților.
Culoareaculturiisuplimentatăcuacidcinamicafostpredominantroșu-închis,darcuoscăderea
producțieidepigmenți.Prezențaesteriloretiliciaiacestordoidinurmăaciziadeterminattotușio
creșteresemnificativăaproducțieidepigmenți.
Producțiadepigmențiînstarecristalinăîntimpulfermentațieipoateavealocîn
prezențaunuiinductor.Acestcompuspoatefiesterpoli(oxietilen)sorbitansauacidpalmitic,ulei
vegetalșitriesteriaiglicerolului.Aceastămetodăproducepigmențicristalinioranjcuoeficiențăde
7%,înprezențaglucozeicasursădecarbon.Deasemenea,1%Tween80înmediuldecultură
determinăproducereacristalelordepigmențioranj[MartinkovaL.ș.a.,1995].
ProducțiadepigmențiafoststudiatășiîncazulimobilizăriicelulelordeMonascussp.
pentruaseexplicadecefungulproducemaimultpigmentînculturisolide,decâtînsubmers.
ImobilizareamicroorganismuluiînHydrogeladeterminatoscădereaproducțieidepigment,
rezultatdatorat,separe,rezistențeidifuzionaleapigmentuluiprinstratuldeHydrogel.Adaosulunei
rășiniadsorbantepolimericesterile,neionicelaculturadeMonascusamăritatâtproducțiade
pigment,câtșivitezadebiosinteză[EvansP.J.ș.a.,1984].
PentruevaluareașioptimizareaproduceriidepigmențidinMonascus,s-apusla
punctometodădemăsurareapigmentațieiînbioreactor,prindeterminareaspectrofotometricăa
parametruluideiluminareL[SanterreA.L.ș.a.,1994].
CAPITOLUL5
BIOSINTEZAPEMEDIISOLIDE
Mediuldeculturătradiționalpentrubiosintezaînsuprafațăesteorezul,dar,înafară
deacesta,porumbulpoatefi,deasemenea,utilizatcasubstrat.Varietățiledeorezcuconținutscăzut
deglutensuntmaibunepentruapreparaang-kak-ul,întimpceboabeledeorezcuconținutmarede
glutentindsărămânălipite,reducândastfelsuprafațadeformareapigmentului.Procedeulcelmai
simpludeobținereapigmențilorînsuprafațăcuprindeoseriedeetapereferitoarela:sterilizarea
orezuluiumezitînprealabil.,inoculareacuoculturădeMonascus,incubarea,uscarea,măcinarea,
ambalarea[KunzB.ș.a.,1987;JuJ.Y.ș.a.,1994;MiyakeT.ș.a.,1984].
UmiditateaoptimăinițialăaorezuluiceurmeazăaficultivatcuMonascus
purpureussesitueazăînjurulvaloriide25%-30%,diferindcutulpinautilizată.Pentrutulpinade
MonascuspurpureusDSM1379,[TengS.ș.a.,1995],umiditateaoptimăafostde24%,iaradaosul
deapăîntimpulfermentăriiainfluențatnegativprocesul.
În1995,K.E.ByounșiY.S.Han[ByounK.E.ș.a.,1995]aratăcăpentrutulpinade
Monascuspurpureusfolosită,pH-uloptimalmediuluiafost6,2iaractivitateaapei,aw=0,97,în
timpcetemperaturadeincubareafost30oCșiduratadesterilizareaorezuluide20deminute.
În1977SlugenD.șiRosenbergM.aratăcăproducereadepigmențidecătre
MonascuspurpureusATCC16424întimpulfermentațieipesubstratsolidconținândcereale
depindenunumaideconținutulinițialdeapăcâtșideniveluldeacidifiere,tipuldeacidutilizatși
deregimuldesterilizare.Celemaibunerezultates-auînregistratdacăs-autilizatorez,apoigrâu
sausubstrateexpandate[SlugenD.ș.a.,1977]producțiadapigmențifiindinversproporționalăcu
conținutuldeproteinădinsubstrat.Condițiileoptimedebiosintezăs-auînregistratlatemperaturade
28oCșiumiditateainițialăde37,5%,înmediuacidulatcuHCl0,1M.După400oredefermentare
s-auobținut1931U400și1057U500/s.u.OunitateU400afostdefinitădreptcantitateade
pigmentextrasăcuetanol40%prinprocedeuldeextracțiealautorilor,careesteechivalentăcu1
unitatedeabsorbanțăîncuvede1cm,la=400nm.Înmodsimilars-adefinitși1U500.
StudiulproducțieidepigmențidinMonascuspurpureusînculturăsolidăafost
efectuatdeM.JohnsșiS.Deidre[JohnsM.R.ș.a.,1991]peorezși,comparativ,peunmediu
sinteticsolidificatcucarageenanșiextrudatînparticuleasemănătoarecuboabeledeorez.Autorii
auconstatatcăpH-uloptimafostde6,iarumiditateainițialăoptimăde56%.Umiditățimai
scăzutedeterminăreducereadrasticăacantitățiidepigmenți.
Pentrureducereacontaminăriiorezuluifermentat,H.Kawabaraș.a.propuneotratare
aorezuluicuosoluțiedeacidcitric0,2-1,0%,la4oCpestenoapte,înaintedeutilizare.O
concentrațiecelpuținegalăcu0,5%deacidcitricprevineceamaimareparteacontaminării
microbieneîncultură.CulturiledeMonascuspeoreztratatcuacidcitricproduccantitățimaimari
depigment,concentrațiimaimicideacidmalicșisuccinic,1-propanol,1-butanoletc.șivolume
comparabiledeetanol.
Biosintezapigmențilorînsuprafațăesteputernicinfluențatădepresiuneaparțialăa
oxigenuluișiadioxiduluidecarbon[HanO,ș.a.,1991;1992].
S-ademonstratcăîntr-unfermentatorcuaerare,presiunileparțialealeO2cuprinse
întrevalorile0,05-0,5atmosfereșipresiuneaparțialaaCO2constantăde0,02atmdetermină
formareadecantitățimaridepigmențicuunmaximla0,50atmO2.Presiuniparțialemaimiciale
CO2laovaloarede0,21atmpresiuneO2determină,deasemenea,oproducțiesporitădepigmenți.
MaximulconsumuluideoxigenșialproduceriideCO2s-aînregistratdupă70-90oreși,respectiv
la60-80ore.Condițiileoptimepentrupigmentogenezănusuntaceleașicapentrucreștere.
În1990,LotongșiSuwanarit[LotongNș.a.,1990]propunometodădeproducerea
ang-kak-uluiînsacideplastic,utilizândotulpinădeMonascuspurpureus.Ang-kak-ulpoatefi
produsdoarîncazulunuinivelscăzutalumiditățiiinițiale.Eiexplicăacestmecanismprinfaptulcă
activitateaglucoamilazeicreșteodatăcucreștereaumiditățiiinițialeasubstratului.Astfel,la
umiditățiinițialecrescute,glucozaesteeliberatărapiddeglucoamilazăîncantitățicareinhibă
pigmentația,darînaceastăsituațieglucidulestetransformatînetanol.Adăugareadediferite
cantitățideglucozăînorezulcuumiditateinițialăscăzută,înaintedefermentare,confirmăfaptulcă
glucidulpoateaveaunefectinhibitorasuprapigmentogenezei.[4]
Separareapigmențilorroșii
Extractulbenzenicafostconcentrat,apoiafostadăugatăacetonăobținându-seun
precipitatbrutcareafostspălatsuccesivcuacetonășieter.Înurmarecristalizăriipigmentuluidin
Et-OHaurezultataceroșii,reprezentândunamestecderubropunctaminășimonasco-rubramină.
Decelemaimulteoriîntregulamestecdepigmențiesteextrasdinmediuldecultură,
determinându-sedensitățileopticeladiferitelungimideundăcorespunzătoarefiecăreiculori.
ConcentrațiapigmențilorextracelularidinmediuldeculturăesteexprimatăcaUnități/mlmediu
[ChiuS.W.ș.a.,1993]șiestecalculatăprinmultiplicareadensitățiiopticelamaximuldeabsorbție
(citităfațădemediuldeculturăînaintedeinoculare,carereprezintăblancul)cufactoruldediluție.
Productivitateaspecificădepigment(Unități/gcelule)sereferălacantitateadepigmentpeunitatea
debiomasă[ChiuS.W.ș.a.,1993].[4]
Spectreledeabsorbțiealepigmențilorextrașiîndiferițisolvențiorganici(metanol,
cloroform,etanol,acetonă)prezintădouăpeak-uricareindicădouăculoridominante.Maximuldin
jurulvaloriide390nmaparținecomponenteigalbene,întimpcepeak-uldelaaproximativ500nm
revineculoriiroșii[BroderC.U.ș.a.,1980].Solventulcelmaiutilizatestemetanolul
datorităeficiențeisaledeextracție,saucombinațiacloroform:metanol,1:1[FabreC.E.ș.a.,1993].
PentrupreparareaextractuluideMonascuscumetanolseefectueazămaimulte
extracțiisuccesivealemiceliuluiuscatcusolventpur(puritateanalitică)[LeistnerL.ș.a.,1991],
dupăcaremetanolulesteevaporatînatmosferădeazot,iarreziduulestepăstratîntr-unexicator.
SeparareacromatograficăsepoateefectuafiepehârtieWhatmanno.1[WongH.C.
ș.a.,1977],fieînstratsubțirepeunsuportdesilicagel,utilizândmaimultevariantealeamestecului
desolvențipentrueluareaprobei.
Sistemuldedevelopareaplăcilorconținândprobelepoateconținebezen,cloroform
șimetanolsaucloroform,metanolșiacidacetic[CarelsM.ș.a.,1977],precumșialtevarianteale
amesteculuidesolvenți.Pentrufiecarespotrezultatdupădeveloparesedeterminăfactorulde
retenție,Rf,carediferăînfuncțiedeculoareapigmentului.
Fink-GremmelsșiL.Leistneraustudiatcomparativseparareacromatograficăa
pigmențilordintr-unextractmetanolicdeM.ruberșiunextractdinpulberedeang-kak.Înurma
separăriiprincromatografieînstratsubțireacelordouăamestecuridepigmențiaurezultatceletrei
grupetipicedepigmenți:galben,portocaliu-roșușiroșu.Separareaextractuluideang-kakarămas
incompletă.ÎnextractuldeM.rubers-augăsittreipigmențidiferițicuurmătoarelevaloriRf(pe
geldekieselgur60,eluant:metanol)[Fink-GremmelsJ.ș.a.,1989]:
Extractang-kak Rf
roșu 0,79-0,80
roșudeschis0,76-0,83
roșuînchis0,83-0,94
galben0,89-0,91
ExtractMonascus
roșu –-
roșudeschis0,80-0,87
roșuînchis0,85-0,87
galben0,89-0,93
Laseparareacromatograficăînstratsubțireprinfolosiredeacetonitril:apă:tetra-
hidrofuran(40:50:10)aurezultatpentruextractuldeMonascuscincibenziseparate,fracțiunea
galbenaavândvaloriRFde0,09-0,12;întimpcefracțiunileroșiiauvalorile0,57-0,60;0,62și
0,67.
Spectrulînvizibilpentruextractuldeang-kakaprezentatdouămaximedeabsorbție
la423nmși499nm.LaextractuldeMonascusauapăruttreipeak-uri:la387nm(galben);498
nm(roșudeschis)și510nm(roșu),fiecarepeakreprezentândcelpuțindoipigmențidiferiți.La
toatespectrele,domeniuldintre192nmși205nmreprezintăpărțilemediuluisolubileînmetanol.
[5]
CAPITOLUL6
UTILIZAREAPIGMENȚILORDINMONASCUSÎNINDUSTRIAALIMENTARĂ
PrincipaleleutilizărialepigmențilordinMonascusatâtsubformădeorezroșucâtși
subformădeextractsereferă,înprincipal,laurmatoareleproduse:
-produsedincarne;
-pastădepestefermentat,produsetradiționaleasiaticedenumite“surimi”,“mirin”;
-sos“hoi-sin”,pastă“miso”,sosdesoia,pastădesoia,“tofu”,ketchup,sosde
banane[DizonE.I.ș.a.,1984];
-vindeorez(“shaoxin”),brandy,lichior;
-otetdinvinrosudeorez,murături,pastediferite,snacks-uri,cereale
-băuturidetoatetipurile
-ciocolate,marmelade,înghetate;
-coloranțiînhranapentruanimaledecasă[YuehM.ș.a.,1983;RashbaumS.
ș.a.,1983].
-produsecosmetice(săpunuri,creme,ferduri);
-coloranțipentrupărșipentrutextile.
Îndiferiteleaplicații,pigmențiidinMonascussuntutilizațisubmaimulteforme,în
funcțiedenecesități:
-subformădematerieprimă,cainocul,pentruproceseledefermentație;
-subformădegranulepentruproduselealimentare;
-pudră(dupăuscareșipulverizare);
-extract;
-lichid(cusolubilitateînapăsauulei).
Deexemplu,firmaBIO-FERMcomercializeazăcolorantuldinMonascusînmaimult
de20deformediferiteprinsolubilitate,culoare,pudră,tabletesaulichide,toateproduselefiind
însoțitedeBio-certificat.Înfuncțiedeintensitateaculorii,produseleFRP(FermentedRicePowder)
sauFRPP(FermentedRicePowderPigment)suntcaracterizatedeunnumărreprezentândvaloarea
culorii-“color-value”.Înplusexistăprodusespecialeobținuteprinfermentareaaltorcerealesau
materiiprimeagricoledecâtorezul:(extractdeorez,grâu,sorg)precumșiprodusecuacțiune
farmacologică(MONASTIN-cuconținutridicatdemonacolină).
Orezulroșuesteutilizatdeasemeneapentrucolorareaproduselorvegetarieneînlocuitoare
aleproduselordincarne,oferiteconsumatorilorînGermaniadefirmaDe-Vau-GeGesundkostwerk
GMBH,careimbunătătesteaspectulacestora,făcându-lesăsemenecucarneaprinadaosulde
pigmențidinMonascus[LeistnerL.,1994].
Afostpuslapunct,totodătă,unprocedeudedetectareapigmențilordinMonascusîn
produseledincarne[HenningW.ș.a.,1992].Înacestscop,probeledegresatesuntsupuseextracției
cuunamestecde98:2deNaOHșiNH4OHconcentrat,purificatepeocoloanăRp18,iar
pigmentulestedetectatfieprinTLC(silicagel)sauprinfotometrie.
MucegaiuriledingenulMonascuspotfi,deasemenea,utilizatelafabricareaunorbăuturi
fermentate.StudiilecomparatealefermentațieialcooliceaorezuluicuAspergillus,Rhizopusși
Monascus,auarătatcălichidulfermentatcuAspergillusnuestebundebăut,celcuRhizopuseste
bun,iarlichidulrezultatînurmacultivăriitulpiniideMonascusarputeafiutilizatpentruonouă
băuturăalcoolică.Calitățileacesteiadinurmăsereferălaaciditateadatoratăaciduluisuccinicși
malicșilaaromacaracteristică.
În1992,O.Shigeoșialțiipropunobținereaunuisortimentdebrânzăroșie,cuungust
excelent,utilizânduninoculdeMonascusankasauMonascuspurpureus.Microorganismulafost
colectatdinmediuldeculturășiinoculatpeosuprafatădebrânzăcheddarsterilizatăcualcoolprin
sprayereșicrescuttimpde10zile.Brânzarezultatăafostapoiincubatăla12oCtimpde30dezile
pentrumaturare.
Deasemenea,încombinațiecualtemucegaiuri,Monascuspoatefiutilizatîntăriledin
Orientlareciclareadeseuriloruscatedepestepentrupreparareadecondimente.Astfel,pesteleuscat
estereciclatprinamestecarecuboabedeorezșiinoculatcuAspergillusoryzaesauAspergillus
soya,pentruasepreparakoji.Acțiuneaenzimelorhidroliticedinacestemicro-organismeareloc
timpde72ore,apoiseadaugăRN-azasintetizatădeMonascus.Metodaesteeficientă,iar
condimentulastfelpreparatarecaracteristiciorganolepticeexcelente.[4]
UTILIZAREAPIGMENȚILORDINMONASCUSÎNINDUSTRIA
PREPARATELORDINCARNE
Utilizareanitrațilorsaunitrițilorînindustriapreparatelordincarneareolungă
tradițiepentruimbunătățireaculorii,aromeișiconservăriiacestorproduse[LechowichR.V.ș.a.,
1978;YarbroughJ.M.ș.a.,1980].Totuși,nitrițiisuntsubstantecutoxicitateconsiderabilă,fiind
folosițiîncantitățipecâtdemiciposibil,doaratâtcâtestenecesar[SebranekJ.G.,1979].De
exemplu,dinanul1981înGermaniaadăugareadenitrițiafostredusăcu20%,iarutilizarea
nitrațilorafost,deasemenea,restricționată.Dealtfel,uniiconsumatoriaipreparatelordincarne
obiecteazălaprezentanitritului,chiarîncantitățimici.Azotițiiprezintăatâttoxicitatedirectă,câtși
toxicitateindirectă.Toxicitateadirectăsedatoresteputeriioxidanteaazotițilorînprezentacărora
pigmențiiheminicitrecînforma“met”prinoxidareaFe2+înFe3+[CassensR.G.ș.a.,1979].O
astfeldeoxidarenuestecompatibilăcuviata,deoarecemethemoglobinanumaiasigurătransferul
oxigenului.Toxicitateaindirectăaazotituluisedatoresteparticipăriiacestuialaformareade
nitrozamine,substantecuacțiunecancerigenădovedităpeanimaleledeexperientă[BanuC.,1985].
Dinacestemotiveînprezentsecautăsursealternativedesubstituențiainitrițilorșinitraților,
dintrecareceimaiimportanțisunt:pigmentuldinrosudesfeclă,colorantuldinpaprika,pigmenții
heminici,ascorbațiișiacidulascorbic,sorbatuldepotasiuprecumșiutilizareaprocesuluide
radapertizareetc.[SebranekJ.G.,1979].
PigmențiiroșiidinMonascusreprezintăunposibilsubstituentalnitrițilorșinitraților,
putândfiadăugațiînpreparateledincarne,fieînstarerelativpură,caextractsau,direct,subformă
deorezrosufermentat.
DemaimultesecoleorezulrosufermentatesteutilizatîntărialeAsieipentrupreparatele
tradiționaledincarne,atâtpentrutratareasuprafetelorfripturilordeporc(zasau),șiderată(sauya),
câtșipentrupreparareasosurilorutilizatedreptcondimentepentruacesteproduse.Deasemenea,
orezulrosuesteadăugatșiînpreparateletradiționaledincarnecumsuntcârnațiichinezesti(ia
chang)pentrualeconferioculoareroșieatractivă,aromășipentruconservare.
RecentînChinaaufostintrodusepepiatănoitipurideprodusedincarnenumite
“welcomesausage”sau“hotulxiang”,derivatedincârnațiiautoclavați,“ambient-stable”,din
Germania.Acesticârnațichinezesti,încadrațiîngrupul“WesternStyleMeatProductsofChina”
[LeistnerL.ș.a.,1991],conținorezrosudinMonascus,produsșiexportatdecâtevamaricompanii
dinChina,cumsuntNingxiaR.D.NaturalPigmentCO,YinchuansauNingxia.
ÎncelemaimulteprodusedincarnedinEuropasuntadăugaținitriți(saunitrațicare
suntredușilanitriți)pentruculoareașiaromatipicădecarnepreparată,pentruaprevenioxidareași
pentruconservare.OrezulrosudinMonascusafostutilizatîncadrulInstitutuluiGermanpentru
CarneKulmbach,înexperimentedeobținereacârnațilortip“bologna”saufermentați,cuintenția
deaînlocuinitriții/nitrațiitoxicidinproduseînmodtotalsaumăcarparțial,fărăreducerea
proprietățilorsenzorialetradiționale[Fink-GremmelsJș.a.,1989,1991].Înacesteexperimentes-a
utilizatextractdeMonascusînlocdeorezrosudeoareceareocompozițiemaiuniformă,dozarease
poatefacemaiexact,iarrezultatelesuntsimilare.S-aconstatatcămenținereaproprietăților
senzorialedoritedeconsumatoresteposibilăpânălaoreducereacantitățiidenitrițicucelmult
60%.Produseleastfelobținuteauoculoaresuperioarășimaistabilădecâtîncazulmartoruluice
conțineacantitateatradiționalădenitriți.Prinmicsorareaconținutuluideazotițiînmodsubstanțial,
esteredusăcantitateadenitrozaminecancerigeneceaparînprocesuldefabricare.
În1993,C.E.Fabre,A.L.Santerreșialțiiprezintărezultateleutilizăriiextractuluide
Monascusînmaimulteprodusedincarne:cârnați“Toulousan”,uscați,“Strasbourgan”șipatede
ficat[FebreC.E.ș.a.,1993].Eiauutilizatcantitățicuprinseîntre0,2și1,2gextractdeMonascus
perkilogramdemixturadecarne,comparândrezultatelecucelealefolosiriicosenilei(E120),
nitratuluidepotasiu(E252)șianitriților(E249).Afoststudiat,deasemenea,graduldedecolorare
apigmențilordinMonascusintrodușiînpreparatelemenționate,dupăprocesuldepasteurizare,la
80oC,1oră(cârnați“Toulousan”),dupădeshidratarela13oC,45zile(cârnațiuscați),uscarela
85oC,30minute(cârnați“Strasbourgan”)sausterilizarela120oC,30minute(patedeficat).
RezultatelearatăcăoconcentrațiecorespunzatoaredeextractdeMonascuspoaterezistarelativ
binetratamenteloraplicate.După3lunidepăstrareapreparatelor,culoareaacestorarămânestabilă
(stabilitateaproximativ95%).Înurmaevaluăriisenzoriales-aarătatcănumai4dincei12testați
ausesizatdiferenteîntreproduselecoloratecuaditiviitradiționalișicuextractdeMonascus.
Înafarădevaloareadecolorant,extractuldeMonascusprezintășiproprietățideconservant
[OberP.ș.a.,1989].Unuldintremotiveleutilizăriinitrițiloresteșiefectulinhibitorasupra
microrganismelornedorite.În1977,Wong[WongH.C.ș.a.,1977]izolasedejadinculturiledeM.
purpureusosubstantăantibiotic,numitămonascidinaA,careademonstratactivitățiinhibitoare
asupraunormicroorganismedingenulBacillus,StreptococcusșiPseudomonas.
În1989,ChenșiTsangauobservat,pentru8din10tulpinideMonascusinvestigate,efecte
bacteriostatice,înspecialfatădeStaphylococcusaureus.Fracțiilebacteriostaticenusuntcolorateși
suntstabilelacăldură(20minutela120oC).EfectulbacteriostaticamaifostevidențiatdeFink-
Gremmels(1989)șiLeistner(1991),pesistememodelșiînprodusedincarne.Eiaudemonstratcă
efectulinhibitordepindedespeciiledebacterii,decantitateadeinoculșidetimpuldeincubare.
Maisensibiles-audemonstrat[Fink-GremmelsJ.ș.a.,1989]afimaimultespeciideBacillus,
Listeriamonocytogenesiar,dupaoperioadădeincubaremaimareșiStaphylococcusaureus.În
general,bacteriileGrampozitiveaufostmaisensibilelaantibioticuldinMonascusdecâtceleGram
negative.Deexemplu,încârnațiitipBologna,L.monocytogenesafostinhibatăla4000ppm
extractdeMonascus,înmodsimilarpentru80ppmdenitrit,darmultmaievidentdecâtîncazul
cloruriidesodiu.Încârnațiifermentațiadaosuluzualdenitrit(120ppm)inhibăSalmonellassp.mai
binedecâtextractuldeMonascus(4000ppm),iarrezultatelesuntsimilareșipentruL.
monocytogenes.Lactobaciliidorițiîncârnațiifermentaținuaufostinhibaținicideextractulde
Monascus,nicidenitriți.
ALTEUTILIZĂRIALEPIGMENȚILOR
PigmențiiprodușideMonascusauutilizărișiînindustriadecosmetice,pentruobținereade
fardurisauvopseledepăr.Înacestscop,acțiuneacolorantăaacestorpigmențiafostcomparatăcua
celorextrașidingardenia,sofran,cacao,cosenilăetc.Pentruobținereadefarduriconținândculori
naturales-auutilizatparticuledefibroinăregenerată,tratatecupigmențidinMonascusșialtesurse,
înprezentasărurilordealuminiucamordanți.Particuleledefibroinăaufostdispersateîntr-osoluție
conținândpigmenții,încălzitela60-100oCtimpdeooră,filtrateșiapoidispersate,încălzitela70
-80oC,timpde30minute,filtrateșiuscate.
EFECTEDIETETICEȘIANTITUMORALEALEEXTRACTULUIDEMONASCUS
Cercetărilestiințificedinultimaperioadăauconfirmatcalitățilefarmacologiceși
efectelebeneficealeorezuluirosu,înspecialreducereacolesteroluluitotaldinsânge,aHDL-
colesteroluluișiavaloriitrigliceridelorsanguine,ceeacedeterminăscădereatensiuniisanguine
[KohamaY.ș.a.,1987;MartinkovaL.ș.a.,1995].
ProduselefermentațieicuMonascussuntrecomandateînAsiașiîncazulunor
regimuri,deexempluîntratamentulimpotrivahiperlipoproteinemiei.În1980,EndoaizolatdinM.
ruberunmetabolitnumitmonacolinaK,carenormalizeazăhiperlipoproteinemiaindusălasobolani.
MaimultespeciialegenuluiMonascuspotproducemonacolinaKșiomologiiacesteiaînurma
fermentațieiînsubmers;monacolinaesteuninhibitoral3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzimaA
(HMGCoA)reductaza,enzimăcarelimiteazăratadesintezăacolesteroluluiînsângeleuman.
Acelașiautoraratăcăunadincauzelemajorealemortalitățiiîntăriledezvoltatesuntbolile
coronariene,avândcamanifestaredebazăateroscleroza,cauzatădedepuneriledegrăsimipe
pereteleinternalarterelor;acestegrăsimiaudreptcomponentădebazăcolesterolul.Colesterolul
estesintetizatdinacetil-CoAprintr-oseriede20dereacțiienzimatice.Înurmatestăriia8000de
tulpinidemicroorganismeprivindcapacitatealordeaproduceuninhibitoralsintezeisterolilorin
vitro,EndoșiasociatulsăuSankyo(1985)audescoperitcăMonascuspoateproducemonacolinaK,
monacolinaJșiL,dihidromonacolinaLșimonacolinaX.Toțiacesticompușisuntînrudiți
structuralșisuntinhibitorispecificiaiHMG-CoAreductazeicarecatalizeazăreducereaHMG-Co
Alamevalonat.Încelemaimultetesuturi,modificareaactivitățiiacesteienzimeestestrânslegată
demodificăriînratasintezeicolesterolului[EndoA.ș.a.,1985;KomagataD.ș.a.,1989].
ÎnexperiențeleefectuatepecobaidecătreJ.Fink-GremmelsșiL.Leistners-aindusnutritiv
ohiperlipoproteinemielaanimale,manifestatăprinvaloriridicatedetrigliceride,princresterea
colesteroluluisericșiavalorilorcolesteroluluiHDL.
Oadministrareaditivădeextractdeang-kakaduslaoreducereatrigliceridelordependentă
dedoză,laoscădereevidentăaconcentrațieidecolesterolșiacolesteroluluiHDLînfazainițială
(24deore).Laoadministraremaiîndelungatădeang-kakrezultădiferenteîntremasculișifemele.
Astfel,dupăuntratamentde20dezile,valoriletrigliceridelors-aumicsoratsemnificativlamasculi
numaiîngrupadedozaremaximă,iarlafemeleîntoateceletreigrupededozare(200,500și1000
ppm).Înceeaceprivestenivelulcolesterolului,numaifemeleledingrupelededozare500și1000
ppmprezentau,după20dezile,valorievidentmaiscăzute.S-aconstatat,îngeneral,influenta
pozitivăaextractuluideMonascussolubilînmetanolasuprametabolismuluilipoproteinelorla
sobolani[LiC.ș.a.,1996;1998].
Sobolaniihrănițicudietecaresăinducăhipercolesterolemia[ChanglingLș.a.,1998;YanZ.
ș.a.,1995]careausuferituntratamentcuextractdeMonascusaudemonstratoscădere
semnificativăacolesteroluluitotal(TC)șiafracțiuniiHDLacolesteroluluidupăoperioadăde
maximum60dezile.
S-auefectuat,deasemeneamaimultestudiiprivindefecteleantihipertensivealeextractelor
deMonascuspepaciențivoluntarisuferinddehiperlipidemie[KiyoshiIș.a.,1995;SviridovDș.a.,
1987;WangJș.a.,1997].S-aconstatatoscădereaniveluluicolesteroluluitotal,fracțieiHDLșia
trigliceridelordinsângelepacienților,concomitentcuoreduceresemnificativăatensiuniisanguine.
ExtracteledinMonascuscuproprietateadeareducecolesterolulsuntcomercializatesub
diferitenume:Pravasin,Lovastatin,Simvastatin,Mevastatin.Unpatentjaponezdin1985descrie
reducereatensiuniisângeluidecătreorezulrosusaudeextractulalcoolicalacestuia.Extractulde
MonascussubnumeledeMONACOLINesteunprodusdieteticpepiată,prezentândurmatoarele
caracteristici:
-carbohidrați 75%
-proteină 15%
-fibre 2%
-lipide 1,2%
-apă 7%
-cenusă 1,5%
-plumb <0,5g/g
-arsenic <0,25g/g
-fosfor 0,2-0,3%
-MONACOLINA-5mg/g-20mg/g
Preparatul“wenstardin“capsuleesteunmedicamentrecentînregistratde
UniversitateadeBiotehnologiidinPekin,avândlabazăextractedeMonascus.Produsulaprimit
CertificatulpentruNouaMedicinădelaMinisterulSănătățiidinChinaînoctombrie1995.
Înurmastudiilorefectuatepesoarecicutumoriindusecu12-O-tetradecanoilforbol-
13-acetat[YasukawaK.ș.a.,1994;1996]s-aconstatatcăadministrareadeextractdeMonascus
poateinhibadezvoltareatumoriișinuprezintătoxicitate.Acelașiefectl-auavutderivațiiazafilonici
dinTalaromycesluteus:sclerotiorina,sclerotioraminașichaetoviridinaA.
EVALUAREATOXICOLOGICĂAEXTRACTULUIDEMONASCUS
Înurmatestelorefectuateîn1991deFink-GremmelsșiLeistner,înextractuldeMonascus
nuafostdetectatăniciunadincele40demicotoxineanalizate,dincelepeste300cunoscute.
Cercetărileaufostcontinuatecutestebiologice,prinevaluareatoxicitățiiacuteaextractuluipe
soarecișisobolani,demonstrându-secătulpinadeMonascuspurpureusstudiatăestelipsităde
toxicitate.
Astfel,dupăadministrareapreoralade5g,respectiv10g,dinamesteculdepigmențiobținut
dinM.purpureusnus-auconstatatnicimodificăridecomportamentacut-toxice,nicimodificăriale
organelor,determinatepost-mortem.Maseleorganelor-ficat,splină,inimă,plămâni,timus,glande
suprarenaleșiorganegenitale-nuauprezentatabateriindusedeacestesubstante.Înmodspecialnu
s-auconstatatmodificăriîntesuturilegrase.Prinurmare,dozamedieletalăaproximativăpentru
soareciestemaimarede10g/kilocorp.Verificareacudozemaimarinuafostposibilădatorită
capacitățiiredusedesolubilizareaamesteculuidepigmenți[LeistnerL.ș.a.,1991].
Înplus,s-austudiat“invitro”citotoxicitateașigenotoxicitateaextractuluideMonascus,
demonstrându-secăpotențialulgenotoxicalextractuluiestemultmaiscăzutdecâtacelaal
nitrozaminelordincarneapreparată[LiC.ș.a.,1995].
RecentauexistatafirmațiicămucegaiuriledingenulMonascusformeazăpelângă
pigmențișimicotoxine,înspecialcitrinina[Fink-GremmelsJ.ș.a.,1998PastranaL.ș.a.,1996].
Citrinina,asacumsecunoastedemaimultăvreme,esteprodusăpealimentedespeciialegenurilor
PenicilliumșiAspergillusșiesteomicotoxinăcuacțiunenefrotoxică.
ProducereadecitrininădecătretulpinadeMonascusutilizatăpoatefievitatăprin
screeningultulpinilor,prinmodificareacondițiilordecultură(adițiadeacizigrași),acondițiilorde
aerare(limitareaagităriișiaerării),adăugareasecvențialădesubstrat,alegereacorespunzatoarea
surseideazot[Blanc,P.J.ș.a.,1995;1997].Deasemenea,Blancș.a.propuncasoluțieoptimăa
îndepărtăriicitrininei,detoxifiereaprindistrugereamoleculeiacesteiautilizândenzimecuacțiune
peroxidazicăînprezentaHOînmediuldereacție.
Cutoateacestea,cantitateadecitrininaînprodusulfinitesteatâtdescăzută,încâtnu
potapareefectenegative,întimpcepotențialultoxicalnitrituluiestemultmaimare.
ASPECTEPRIVINDLEGALITATEACOMERCIALIZĂRIIOREZULUIROȘUÎN
ȚĂRILEEUROPEI
Odatăcuintroducerea“orezuluirosufermentat”pepiataeuropeanăs-apusproblema
dacăacestprodusesteunaditivalimentar,subiectpentruavizarealuilafolosireaînpreparatele
alimentaresauuningredient,acăruiculoarecaaaltoralimenteputerniccolorate(sfeclăroșie,
spanac)îiconferăproprietateadeaimbunătățiaspectulalimentelorînmodspecific.Părerileaufost
impărțite:astfel,deciziadin20iunie1995aTribunaluluiAdministrativBaden-WuerttembergLGH
astabilitcăorezulrosuesteunaditivalimentardeoareceesteutilizatdoarpentrucolorarea
alimentelor.
ÎnArticolul1secțiunea2dinGuide-line89/107/EEC,orezulrosufermentateste
cuprinscaingredientalimentar,decinuestenecesarăopermisiespecialăpentruutilizarealui(după
DietrichGorny,ALLOKGmbH,Germania).
Ingredientelebucătărieiasiaticenusuntutilizatedoarpentrupreparareaproduselor
alimentareasiatice,cisuntlargrăspânditeșiînEuropa,asacumestecazulorezuluirosu.Sosul
“Hoi-sin”,devânzarecasospentru“barbeque”chinezesc,esteutilizatcasosuniversalpentrugrătar.
“Miso-paste”esterecomandatănudoarcaingredientpentrutoatetipuriledemâncareînspecial
supesauciorbedepeste,darșipentruconsumuldirect.Prinurmare,utilizareaorezuluirosunueste
limitatălapreparateledinAsia,acestingredientputândfideasemeneafolositpentrupreparareași
producereaaltoralimente.
Dacăsingurulscopalutilizăriiluiarficuloarea,acestafiindșisingurulcriteriude
folosire,atunciorezulrosuarputeafiîncadratcaaditiv,fiindsubiectpentruadmitereapepiată.
Acestprodusînsăestefolositpentrumaimultescopuri,incluzândaroma,culoarea,efectelede
conservant,efecteledietetice,timpdesecolebucurându-sedeolungătradițieîntăriledinOrientul
Îndepărtat.ÎnGermaniașiînEuropa,utilizarealuiestepracticatădemaimultde10ani,înspecial
dreptcolorant.ConsumulestimatînGermaniaesteînprezentdeaproximativ300tone/anșiesteîn
crestere,iardacăindustrianuaraveareținerifatădeeventualelerestricții,crestereautilizariiar
puteasăfieexplozivă.
ALȚICOMPUȘIDEINTERESINDUSTRIALSAUFARMACEUTICPRODUȘIDE
MONASCUS
EnzimeMucegaiuriledingenulMonascusproduc,pelângăpigmenți,oseriedeenzime
hidroliticecumsuntalfa-amilaza,glucoamilaza,-galactozidaza,proteaza,lipaza,pectinazași
celulaza[JuzlovaP.ș.a.,1996].Pentruproducerea-galactozidazeiutilizatălarafinareazahărului
(înscopulclivăriicapetelor-D-galactozidicedinoligozaharideledinfamiliarafinozei),sepoate
utilizamucegaiulMonascusanka,cultivatpedeșeuridetrestiedezahăr[Wong-Leungș.a.,1993].
Aceastăenzimăpoatereprezentaunco-produscepoatefiobținutîntimpulizolăriipigmenților,din
acelașilichiddecultură.Monascusankapoatefiutilizat,deasemenea,pentruproducerea
inhibitoruluimonoamino-oxidazei(MAO),eficientîntratamentuldepresiilor,maladieiParkinsonși
aaltordereglăripsihiatrice.
Monacolina.DinaltespeciideMonascus(ex.M.pilosus)s-aizolatuncompusdenumit
monacolina,cuproprietateadeaîntârziainvivosintezacolesterolului.Celmaibunsubstratpentru
sintezamonacolineis-adoveditafiunamestecdeglicerină,glucoză,extractdeporumbșiNaNO3.
Deasemenea,Endo(1980)adovedit[Fink-GremmelsJ.ș.a.,1989;LeistnerL.ș.a.,1991]căo
tulpinădeM.ruberproducemonacolinaK,cuefectinhibitorasupralipidelornesaponificabileîn
sisteminvitro.Totodată,s-ademonstratprincercetăriinvivoasuprasobolanilorcăohiperglicemie
indusăprindetergențipoatefiredusă,înfuncțiededoză,prinmonacolinaK.Spredeosebirede
pigmenți,acestcompusnuareunineldetetrahidrofuranonșidecinuesteînruditstructuralcu
coloranții.
AntibioticeSpeciiledingenulMonascussunt,deasemenea,binecunoscutepentru
capacitatealordeaproducesubstanțecuactivitatedeantibiotic.În1972,Wangșialțiiaudetectat
antibioticeîntr-unnumărdefungiutilizațiînproducereadealimentefermentatedinOrient[Hwa
L.W.ș.a.,1972].MonascuspurpureusesteunuldinfungiirecunoscuțiînOrientpentruactivitatea
saterapeutică,raportatăpentruprimaoarăîn1977decătreWongșiBau[WongH.C.ș.a.,1981].
În1981,WongșiKoehlerprezintăstudiileprivindproducțiașiizolareaunui
antibioticdinMonascuspurpureus,cultivatînsubmerspeunmediuconținândextractdedrojdie
[WongH.C.ș.a.,1981].Pentrupurificareașiizolareaantibioticului,mediuldeculturăafost
acidificatcu1NHCl,apoifiltratșineutralizatcuNaOHșiliofilizat.Antibioticulbrutobținutafost
solubilizatînetanol,apoiseparatpeocoloanădesilicagelșipurificat,înfinal,princromatografie
înstratsubțire.Autoriiauconstatatcăproducțiadeantibioticestefavorizatădecultivarea
microorganismuluipemediisolidesaulichide,fărăagitare.Ceamaimareparteacantitățiide
antibioticestesecretatăînmediu,șiomicăporțiuneseaflăînmiceliu,fiinddificildeseparatde
pigmențiiprezenți.Cantitateamaximădeantibioticafostdetectatădupă15-17ziledeincubare.
Adițiadeacetatdesodiuainhibatproducțiadeantibiotic,daradeterminattransformarea
pigmențilororanjînpigmențiroșii.
Antibioticulizolat,cașiunpigmentgalbenfluorescentsintetizatauculoareagalbenă
înluminăvizibilășiverde-fluorescentînluminăultravioletă.Mutantele“albino”șislabpigmentate
obținuteanteriordeWongnuauprezentatactivitateantibacteriană,întimpcemutantele
hiperproductiveînpigmentsintetizeazăantibioticul.Mediiledeculturăcaredeterminăproducerea
depigmențioranjinduc,deasemenea,șibiosintezaantibioticului,iarprezențazinculuimărește
producțiaacestoradecătreM.purpureus.
ActivitateaantibioticuluiafosttestatădeWongfațădemaimultespeciideBacillus
șiPseudomonas,fațădeE.coli,Salmonellatyphi,Shigellasonnei,determinându-sezonade
inhibițieîncentimetri.S-adoveditcăM.purpureusprezentaactivitateantibacterianănumaifațăde
Bacillus,PseudomonasșiStreptococcus:Bacillussp.(2,36);Bacillussubtilis(1,51);Bacillus
sphaericus(1,23);Bacilluscereus(1,24);Bacillusmegaterium(2,27);Streptococcusaureus(1,16);
Pseudomonaseisenbergii(1,14);Pseudomonasfluorescens(1,00)[WongH.C.ș.a.,1977].
OBIECTIVELECERCETARILORPENTRUACTIUNIALEPIGMENTILORDIN
MONASCUS:
-creareadenoiprodusefarmaceuticeprinprocesesitehnologiicurate;
-fundamentareastiintificasidezvoltareadetehnologiipentruconsolidareadiversitatii
biologice,concretizateprinobtinereaunortulpinideMonascussp.inaltproductive;
-optimizareametodelordeprevenireabolilorsidezvoltareadeterapiimedicaleindomeniul
dermatologieisiimunologiei;
-dezvoltareabiotehnologiilordesintezasubstantebioactivecuaplicatiiinfarmacologie,cu
impactasupracalitatiivietiisidezvoltariitehnologiceindomeniulbioinginerieisibiotehnologiei;
-dezvoltareadenoimaterialeprodusefarmaceuticeșiprocesebiotehnologicecuînaltă
valoareadăugată;
-crestereacompetitivitatiiisicreativitatii,adezvoltariiculturiiorganizationaleinsistemele
educatiei,cercetarii,precumsiinsistemulsanitar
Printrecelemaiimportanteaspectefarmaceutice,oreprezintaposibilitateadescaderea
colesteroluluicuajutorulacestuiprodus:
.Redyeast-peplaculinimiitale
FungiidegenulMonascussuntutilizațideaproapedouămileniiînțăriledinAsiadeEst.Încădepe
vremeadinastieiTang(secolul(sec.VII-IXd.Chr.)orezulfermentatcumonascuspurpureus
(cunoscutastăzisubdenumireade„redyeast”)erautilizatatâtînscopurimedicinale,câtșidrept
condiment,conservantșicolorantnaturalînalimentație.
Vecheafarmacopeechineză,dintimpuldinastieiMing(1368-1644),alăsatindicațiiprecisedespre
utilizareaacestuipreparatpentruîmbunătățireacirculațieisângelui,afecțiunialeinimiișiprobleme
digestive(tratatuldemedicinădinanul1590,scrisdeLiShih-Chun).
PotrivitunuistudiuefectuatlaUniversitateaThomasJeffersondinPhiladelphia,acestașa-numit
“redyeast”poatereducecu66%ratadedeceseprovocatedecancerșicu33%ceadedecese
provocatedemaladiicardiace.
Recent,afostrealizatînChinaunstudiufoarteamplu,implicândaproape5.000depaciențicu
maladiicardiace,cuvârsteîntre18și70deani,din60despitaledinChina.
Paciențiiaufostmonitorizațitimpdecinciani.S-aremarcatoscădereaprobabilitățilordeasuferi
uninfarctcu45%,precumșiaprobabilitățilordeoperațiebypasscu33%.
Cumsăscazicolesterolulîntr-unmodsimplușieficace
Unstudiuclinicefectuatîn1999șipublicatînJurnalulAmericandeNutrițieclinică(vol.69,nr.2,
2310236)demonstreazăcă8săptămânidetratamentcuorezfermentatastfel(redyeast)scade
nivelurileplasmaticealecolesteroluluicu23%,trigliceridelecu36,5%întimpcecreștecolesterolul
"bun"HDLcu19,6%.
Acesterezultatedepășescdedeparteposibilitateadeareducecolesterolulpecaledietaraprinaport
redusdegrăsimianimale.Lovastatinuldinacestpreparatnuareniciunefectsecundar(singurele
contraindicațiisuntpentrufemeilegravidesaucarealăptează).
IndustriafarmaceuticăacreatoseriedemedicamentedesintezăcareîncearcăsăcopiezeRedYeast
șicaresuntprescriseînmodcurentdecătremedici.
Acestemedicamentedesintezăpotaveaînsăefectesecundareuneorifoarteserioase(dereglarea
ficatului,diabet,creareastăriidedependențăcunecesitateadeamăridozajul).
Cercetăriefectuateînanul2006deoameniideștiințăchinezipe93depaciențiaudemonstratcă
acestpreparatareduscolesterolultotalcu30%,trigliceridelecu15-25%,iarLDLcolesterolulcu
10-20%.
DilemaFDA-ului
ÎnStateleUnitealeAmericii,studiirealizatelaFacultateadeMedicinădinCaliforniapepaciențicu
unnivelridicatdecolesterolauconcluzionatcă,după12săptămânidetratamentcuacestpreparat
(zilnic),niveluldecolesteroltotal,triglicerideșiLDLafostredusînmodsemnificativ.
Esteatâtdeeficientîncombatereacolesterolului,încâtexistăînprezentodilemăpentruFDA,dacă
săclasificeorezulfermentatcuMonascuspurpureuslacategoriasuplimentealimentaresau
medicamente.
Deasemenea,datorităuneisubstanțenumitămonascidina,orezulfermentatcumonascusesteun
antibioticeficient,putândfiutilizatcusuccesîmpotrivaunormicroorganismeprecumBacillus,
Streptococcus,Pseudomonas,Listeria,Staphylococcus.
Învațăsă-țiprepari“remediul”fărăefectesecundare
Sefierbeorez,apoiselasăcâtevazileîntr-unvaslafermentat,cudrojdiedemonascus(sepoate
găsiînmagazinelebineaprovizionatecuprodusenaturiste).
Întimpulprocesuluidefermentareseproduceoculoareroșie.Cândestegata,sepoateconsumaca
atare,sausepoateutilizaîncombinațiecudiversealtepreparateculinare,dupăpreferințe.
ActivitateaantibacterianășiantifungicădeorezroșuobținutdintulpinaMonascuspurpureusM5
impotrivaunortulpinimicrobienesedatoreazădemonascidineiA,compusulprincipalresponsabil
pentruactivitateainibitorie.Proprietățileantimicrobienealeorezroșuafostdeterminatăfolosind2
tulpinideBacillussubtilis,2tulpinidePseudomonasaeruginosa,otulpinădeEscherichiacoliși
multespeciidegenuriAspergillus,Penicillium,Mucor,Fusarium,AlternariașiBotrytis.Activitatea
antimicrobianăapigmențilorMonascuss-audoveditcaracteristiciledeconservarealeacestui
colorantalimentarnatural.
Bibliografie
1.***http://tehnologii-alimentare.blogspot.ro/2014/12/coloranti-alimentari.html
2.***http://chimie-biologie.ubm.ro/Cursuri
3.***http://spd-biotech.usamvcluj.ro
4.CarvalhoJ.C.,OishiB.O.,PandeyA.andSoccolC.R.,1995,Biopigmentsfrom
Monascus:StrainSelection,CitrininProductionandColorStability,Brasilian
ArchivesofBiologyandTechnology,vol48,885-894
5.Dominguez-EspinosaR.andWebbC.,2003,Submergedfermentationinwheat
substratesforproductionofMonascuspigments,WorldJournalofMicrobiology
andBiotechnology,19:329-336
6.”AntimicrobialeffectofMonascuspurpureusredriceagainstsomebacterialandfungalstrains’-
M.ferdes,CameliaUngureanu
Copyright Notice
© Licențiada.org respectă drepturile de proprietate intelectuală și așteaptă ca toți utilizatorii să facă același lucru. Dacă consideri că un conținut de pe site încalcă drepturile tale de autor, te rugăm să trimiți o notificare DMCA.
Acest articol: Actiunea Antimicrobiana A Pigmentilor Din Monascus [620842] (ID: 620842)
Dacă considerați că acest conținut vă încalcă drepturile de autor, vă rugăm să depuneți o cerere pe pagina noastră Copyright Takedown.
